Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Иммуноморфогенез у цыплят, вакцинированных против болезни гамборо, и влияние на него иммуностимуляторов

ВИТЕБСКАЯ ОРДЕНА "ЗН АК ПОЧЕТА" ГОСУДАРСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ВЕТЕРИНАРНОЙ

МЕДИЦИНЫ

ИММУНОМОРФОГЕНЕЗ У ЦЫПЛЯТ, ВАКЦИНИРОВАННЫХ ПРОТИВ БОЛЕЗНИ ГАМБОРО, • И ВЛИЯНИЕ НА НЕГО ИММУНОСТИМУЛЯТОРОВ

16.00.02. - патология, онкология п морфология животных

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных

наук

УДК: 619:616.47,6-097.3:615.371:636.5

ГРОМОВ Игорь Николаевич

ВИТЕБСК-2000

Работа выполнена в Витебской ордена "Знак Почета" государственной академии ветеринарной медицины.

Научные руководители:

• доктор ветеринарных наук, профессор, Прудников В.С

• кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник Бирман Б.Я.

Официальные оппоненты:

в доктор ветеринарных наук, профессор,

член-корреспондент ААН РБ Карпуть U.M. • доктор ветеринарных наук, профессор Красочко П.А.

Оппонирующая организация - Белорусская сельскохозяйственная академия

Защита состоится «2000 года в # часов на заседшши совета по защите диссертаций Д 0i.33.0I в Витебской ордена "Знак Почета" государственной академии ветеринарной медицины по адресу: 210602, г. Витебск, ул. Дозатора 7/11, государственная академия ветеринарной медицины, тел. 37-04-42.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Витебской Ордена 'Знак Почета" государственной ахадемни ветеринарной медицины.

Автореферат разослан « 2. У>гУе$рСГЯЯ' 2000 года

Ученый секретарь совета по защите диссеща^й, кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник у И.З. Севрюк

& Ъ.а^о^ -¿{¿о

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы диссертации. Болезнь Гамборо получила в последние годы широкое распространение во многих странах мира, в том числе и в Республике Беларусь. Данная болезнь предстапляет серьезную опасность в связи с выраженным иммунодепресспвным действием вируса, поражающего бурсу Фабрициуса птпц (K M. Lam, 1997). В комплексе мероприятий по профилактике и ликвидации болезни Гамборо основное место уделяется проведению вакцинаций (А,В. Борисов и др., I995, 1997). При -1 >м иммупоморфогенез у птиц, вакцинированных против болезни Гамборо, изучен недостаточно. Ряд исследователей (ГЛ. Красников и др., 1994; 1996) указывает на то, что используемые для перорадьиой иммушшшш кыплят против болезни Гамборо живые вирус-вакцины могут вызывать иммуиодепрсссию, обусловленную явлениями делим-фатизации и атрофии лимфоидной ткани в органах иммунной системы птиц. Поэтому для специфической профилактики болезни Гамборо должны использоваться вакцины, имеющее научное иммуиоморфологическое обоснование.

Доказано, что парентеральная иммунизация ремонтного молодняка кур инакгивированными вакцинами для создания трансовариачьного иммунитета у цыплят раннего возраста не всегда бывает эффективной (W. Solano е.а., 1986). Поэтому повышение имчуногенности »»активированных вакцин путем применения иммуностимуляторов является актуальной задачей и имеет важное научно-практическое значение.

Связь работы с крупным» каучнымн программами, темами. Настоящая работа является составной частью плана НИР Витебской государственной академии ветеринарной медицины и темы кафедры патологической анато-чш и гистологии: "Иммупоморфогенез у животных при болезнях, вакцинациях и им-мунокорргкции" (Лга госрегистрацни 1998! 778).

Цель и задачи исследования. Целью наших исследований явилось изучение в сравнительном аспекте иммуноморфегенеза у цыплят при пероральной иммунизации их против болезни Гамборо сухими живыми вирус-вакцинами из шт. "Впнтерфильд 2512" (производство ВНИИЗЖ, г. Владимир, Россия"» и из шт. "Д 7S" (производство фирмы "Интервет", Голландия), а также влияния иммуностимуляторов на иммуноморфоге'нез у ремонтного молодняка кур при парентеральной иммунизации против болезни Гамборо жидкой сорбированной инактивированной вакциной (производство ВНИИЗЖ).

Для выполнения поста «ленной цели нами были определены задачи:

1. Изучить в сравнительном аспекте иммуноморфегенез у цыплят при пероральной иммунизации их против болезни Гамборо сухими живыми вирус-вакцинами из шт. "Винтерфильд 2512" и из шт. "Д 78".

2. Изучить влияние ряда иммуностимуляторов .атрия тиосульфат, натрия тиосульфат в сочетании с новокаином, тималин, левамизол, АСД-2) на эффективность парентеральной иммунизации ремонтного молодняка кур против болезни Гамборо жидкой сорбированной мнактивированной вакциной.

3. Изучить влияние иммуностимулятора натрия тиосульфата (7%-ный водный раствор) на иммупоморфогенез у ремонтного молодняка кур при парентеральной иммунизации их против болезни Гамборо ¡кадкой сорбированной инактивированной вакциной.

Объект и предмет исследования. Объектом исследований были цыплята к ремонтный молодняк кур. Предметом исследований служили кусочки тимуса, бурсы Фабрициуса, селезенки, железы Гардера, дивертикула Меккеля, тонкого кишечника, пищеводной и слепокишечных миндалин, печени, почек, сердца, скелетных мышц, ткани с места введения вакцины при парентеральном ее применении, а также пунктат костного мозга, кровь и пробы сыооротки кроен птиц.

Гипотеза. Для иммунизации птиц против болезни Гамборо в РБ применяют зарубежные вакцгшы производства Голландии, России и др. стран, имеющие разную коммерческую стоимость. Мммуноморфогедаз у птиц при введении указанных биопрепаратов пе изучен. Доказано, что аттенунрованные вакцинные штаммы вируса болезни Гамборо способны вызывать у цыплят капания атрофии и делкмфатмзацеш в тимусе и бурсе Фабрициуса. Это позволило выдвинуть пгрзуто часть гипотезы о том, что при изучении е сравнительной аспекте пммуиоморфогс.чеза у цыплят, пероралыю иммунизированных против болезни Гамборо .внрус-вахшшами из шт. "Винтерф»альд 25! 2" к из шт. "Д 78" будет предложен оптимальный биопрепарат, имеющий более низкую рыночную стоимость, вызывающий у птиц более выраженные иммукоморфшюгическис изменения и не обладающий нммунодепрессивиым действием.

Имеются сведения о том, »¡то парентеральная иммунизация ремонтного молодняка кур инактивированными вакцинами для создания траисовариалького иммунитета у цыплят раннего возраста ие всегда бызает эффективной. Это позволило выдвинуть вторую ч?сть гипотезы о том, что при изучении влияния ряда иммуностимуляторов (натрия тиосульфат, натрия тиосульфат в сочетании с новокаином, тамалин, левамизол, АСД-2) на эффективность парентеральной иммунизации ремонтного молодняка кур жидкой сорбированной инактнвиро-ванной вакцины против болезни Гамборо будет предложена схема вакцинации с использованием оптимального иммуностимулятора, а также изучено слияние данного препарата на шлмуиоморфологнческиг реакции у ремонтного молодняка кур при иммунизации вышеуказанной вакциной.

Методология I! методы прсаедеаиогс исследование. Опыты'по изучению иммуноморфогенеза у цыплят, вакцинированных против болезни Гаыборо, и влиянию на него иммуностимуляторов, были проведены в 3 этапа.

На первом этапе исследований был изучен в сравнительном аспекте им-муиоморфогеиез у цыплят, перорально вакцинированных против болезни Гамборо сухими живыми вирус-вакцинами из шт. "Винтеофильд 2512" и из шт. "Д 78".

На втором этапе исследований нами изучено влияние ряда иммуностимуляторов (натрия тиосульфат, натрия тиосульфат в сочетании с новокаином, ти-ыалин, левамизол, АСД-2) на эффективность парентеральной иммунизации ремонтного молодияка кур жидкой сорбированной ииактивнрованной вакцшюй против болезни Гамборо.

На третьем этапе исследований изучено влияние наиболее оптимального иммуностимулятора натрия тиосульфата (7%-ный водный раствор) на иммуно-ыорфологические реакции у ремонтного молодняка кур, парентерально иммунизированных против болезни Гамборо вышеуказанной вакциной.

Для выполнения поставленных задач использовались иммуноморфологи-ческие, гистохимические, гематологические, иммунологические, биохимические и серологические методы исследования.

Научная' новизна и значимость полученных результатов. В работе впервые изучен в сравнительном аспекте иммуноморфогенез у цыплят, геро-рально иммунизированных против болезни Гамборо сухими живыми вирус-вакцинами из шт. "Винтерфильд 2512" и из шт. "Д 78". Установлено, что иммунизация цыплят против болезни Гамборо сухой живой вирус-вакциной из шт. "Винтерфильд 25)2" вызывает у птиц развитее более выраженных, по сравнению с использованном сухой живой вирус-вакцины из шт. "Д 78", имму-номорфологическнх изменений в организме птиц, не оказывая при этом имму-подепрессипного действия.

Изучено влияние ряда иммуностимуляторов (натрия тиосульфат, патрпл тиосульфат в сочетании с новокаином, тималкн, левамизол, АСД-2) на эффективность парентеральной иммунизации ремонтного молодняка кур жццкоЯ сорбированной кнактнвироезнной вакциной против; болезни Гамборо. Показано, что натрия тиосульфат {7%-ный водный раствор) и тимэлин (в доза 1 мг/кг массы тела птин) значительно повышают напряженность поствакцняальною иммунитета у ремонтного молодняка :;ур, им му ш.зкровг! шы х указанной вакциной.

Доказано стимулирующее деГцгт.тае нзтрнз тиосульфата (7%-ный водный раствор) на развитие иммуноморфологачсжи ргакцай у ремонтного молодняка кур при парентеральнсй имму^ззашш ярэтиэ болезни Гамборо жидкой сер-бированноП инахтивированной вакц'лпой, что способдтвуст формированию солее напряженного и длительного иммунитета протиз эгоИ болезни, по сравнению с применением одной вакцины.

Практическая шчййопь, полученных результатов. Дано имглуно-морфологическое обоснование применения для пероралыюл шл.тптции цыплят против болезни Гамборо сухой йпвой вйруо-пзхцяны из шт. "Винтерфильд 2532". Показано, что геммуннэгцнв цыплят указззжой вакциной сопровождается развитием более выразкеяных, по сравнению с использованием вакцины из шт. "Д 78", иммуноморфологнчссгсих'ргака'гК з организме птнц, пе оказывая при этом нммунодепресс.чяного действия. Устзноадена высокая эффективность парентеральной иммунизации ремонтного молодняка кур кядкон сорбиройанной ииактивнрованной закцииоЯ протиз болезни Гамборо на фоне применения и м м у н о стимулятора в наград тиосульфата (7%-ный годный раствор) и тималина (в дозе 1 мг/кг живой массы тела птиц). Выявлено положительное влияние иммуностимулятора 7%-нбго водного раствора натрия тиосульфата на течение иммуноморфологических реакций в организме птиц при парентеральной иммунизации ремонтного молодняп кур против болезни Гамборо жидкой сорбированной икактивированной вакциной, что имеет важную практическую значимость . повышении эффективности вакцинаций против болезни Гамборо.

Результаты работы включены в Наставление по применению тимачина, лития карбоната и натрия тиосульфата в птицеводстве для повышения иммунологической реактивности организма птиц (Наставление утверждено ГУВ Мин-

сельхозпрода Республики Беларусь 18.05.1999 г., приказ № 10-1-5-557) и внедрены в ветеринарную практику Республики Беларусь.

На основании проведенных исследований в соавторстве разработаны, изданы и внедрены в практику "Методические рекомендации по диагностике, профилактике и ликвидации инфекционной бурсальной болезни птиц" (Рассмотрены и одобрены Ученым Советом БелНИИЭВ им. Вышелесского 3.12.1998 г., протокол №15; утверждены РО "Белптиценром" 11.12.1998 г.).

Экономическая значимость полученных результатов. Результаты им-муноморфологических исследований, подтверждающие иммуностимулирующее свойства 7%-ного раствора натрия тиосульфата, применённого совместно с жидкой сорбированной инактивированной вакциной при иммунизации ремонтного молодняка кур против болезни Гамборо, позволяют использовать его в качестве коммерческого продукта^

Основные положении диссертации, иьпшеимые на защиту:

1. Применение для пероральной иммунизации цыплят против болезни Гамборо сухой живой вирус-вакцины из шт. "Винтерфильд 2512" вызывает у птиц развитие более выраженных, по сравнению с использованием сухой живой вирус-вакцины из шт. "Д 78", иммуноморфологических реакций, и не оказывает при этом иммунодепрессивного действия.

2. Натрия тиосульфат и тималин, по сравнению с другими иммуностимуляторами (натрия тиосульфат в сочетании с новокаином, левамизол, АСД-2), значительно повышают эффективность парентеральной иммунизации ремонтного молодняка кур жидкой сорбированной инактивированной вакциной против болезни Гамборо.

3. При парентеральной иммунизации ремонтного молодняка кур против болезни Гамборо жидкой сорбированной инактивированной вакциной в органах иммунной системы птиц развиваются иммуноморфологичеекне изменения, свидетельствующие о формирования иммунитета к данной болезни.

4. Парентеральная иммунизация ремонтного молодняка кур против болезни Гамборо с одновременным применением жидкой сорбированной инактивированной вакцины и 7%-ного водного раствора натрия тиосульфата способствует актглизации иммуноморфогенеза и созданию более напряженного и длительного иммунитета, по сравнению с применением одной вакцины.

Личный вклад соискателя. Данная диссертационная работа является законченным научно-исследовательским трудом по изучению иммуиоморфогене-за у цыплят, вакцинированных против болезни Гамборо, и влияния на него иммуностимуляторов. Исследования проведены лично автором под руководством доктора ветеринарных наук, профессора Прудникова Виктора Сергеевича, и кандидзта ветеринарных наук, старшего научного сотрудника БелНИИЭВ, Бнрмана Бориса Яковлевича в соответствии с основными направлениями научных исследований кафедры патологической анатомии и гистологии ВГАВМ.

Аиробаиия результатов диссертации. Результат! ■ исследований доложены и обсуждены на итоговых научных конференциях профессорско-преподавательского состава ВГАВМ (Витебск, 1997; 1998; 1999), международном аулеическои конференции, посвященной памяти академика РАСХН K.M. (Лмниевз (Горки. 1^>7). 3-сй республиканской научной конференции студентов

РБ (Минск, 1997), 2-ой и З-ей международных научно-практических конференциях по ветеринарным н зооинженерным проблемам животноводства и научно-методического обеспечения учебного процесса (Витебск, 1997, 1999), научной конференции, посвяшенной 70-летию клинических кафедр ВГАВМ (Витебск, 1993), международной научно-практической конференции по проблемам патологии, санитарии и бесплодия а животноводстве (Минск, 1998), учредительной конференции ассоциации паразитоценологов СНГ (Витебск, 1999), международной научной конференции студентов ¡1 мол о, ,. лх ученых "Студенческая медицинская наука XXI века" (Витебск, 1999).

Онублнковашюсть результатов. Основные положения диссертации опубликованы в 19 научных работах, в том числе 7 - в научных журналах, 3 - в сборниках научных трудов, 4 - в сборниках материалов конференций а г. Горки, Витебске, Минске, 4 - в тезисах докладов на конференциях в г. Ереване, Минске и Витебске. По результатам исследований изданы методические рекомендации. Общий объем опубликованных работ составляет 92 страницы.

Структура н объем диссертации. Диссертация объемом 239 страниц машинописного текста состоит из введения, общей характеристики работы, основной части, включающей в себя пять глав, выводов, практических предложений, списка использованных источников и приложения. Список использованной литературы включает 354 источника, а том числе 135 зарубежных авторов. Работа иллюстрирована.70 рисунками и 43 таблицами.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ В пяти подразделах главы отражены данные литературы о назначении, составе и функциях иммунной системы птиц, особенностях формирования иммунного ответа при вирусных болезнях, приведены современные принципы специфической профилактики болезни Гамборо кур, показана роль иммуностимулирующих препаратов в усилении поствзкииналыюго иммунитета и повышении иммунной реактивности организма птац.

ОБЩАЯ КОНЦЕПЦИЯ 5! ОСНОВНЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ В данной главе наложено обоснование исследований но изучению в срав-л,г;тел!.;;ом аспекте иммуноморфогенеза у цыплят, перорально иммунизированных против болезни Гамборо вирус-вакцинами из штамма "Виитерфильд 2512" и из штамма "Д 78", а тахжс влияния иммуностимуляторов на иммуноморфоло-гачеекке реакции у ремонтного молодняка кур при парентеральной иммунизации жидкой сорбированной ииактизировашюП вакциной против болезни Гамборо.

ОПИСАНИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЧАСТИ, ПРИМЕНЯЕМОГО ОБОРУДОВАНИЯ И ТЕХНИКИ ЭКСПЕРИМЕНТА Экспериментальная часть работы была выполнена з 1996-1999 г.г. в лаборатории кафедры патологической анатомии и гистологии Витебской государственной академии ветеринарией, медицины. Республиканской ветеринарной лаборатории по борьбе с болезнями птиц. Всероссийском НИИ защити живот-

пых, а таюке па Витебской г Смолевичской бройлерных птицефабриках. Данная работа является частью темы кафедры патологической анатомии и гистологии: "Иммуиоморфогенез.у животных при болезнях, вакцинациях и иммуно-коррекции" (Ка госрегистрации 19981778). Для решения поставленных задач нсследоааикя были проведены в 4 опытах.

В опыте на 620-ти цыплятах-аналогах 7-36-дцевнсго возраста, разделенных на 3 группы, нами был изучен в сравнительном аспекте иммуиошр-■фогекез у птиц при пероральной вакцинации их против болезни Гамборо сухими хсивыми вирус-вакцинами из шт. "Вишерфильд 2512" и из шт. "Д 78".

Цыплята 1-ой группы (300 голов) были иммунизированы сухой живой ифус-вакциной из штамма "Втггерфальд 2512".

Цыплят 2-ой группы б (300 голов) иммунизировали сухой живой вирус-вахциной из штамма ИД 78**. :

Иитжтая птица З-ей группь; (20 голов) служила котролгм.

Иммунизацию цыплят проводали согласно Наставлениям по праиеиешао вышеуказанных вакцин, пероральио, двукратно, е интервалом 14 дней в 7- и 22-диевном возрасте! За всей птицей было установлено клиническое каблюдешз.

На 15-й день после 1-ой и 15-й день после 2-ой вакцинации по 4 цыпленка из каждой группы убивали для проведения имыуноыорфояогичедаас исследований и контроля напряженности поствакцинаяыюго иммунитета в РИД. • ' Во 2-о»т оп;>пс наци было изучено влияние ряда иммуностимуляторов (натрия тиосульфат, нэтрия тиосульфат в сочетания с новокаином, ягшшвап, тгшалии, АСД-2) на эффективность парентеральной иммунизации птиц жвдкей сорбированной инаэти&ироганной вакциной против болезни Ггшборо. С этой цзлыо нами было подобрало по принципу аналогов 70 голов рсио:тюго молодняка кур 130-дпевного возраста. Птица была разделена ка 7 грутга (по 10 голов в, каждой). .

Иммунизацию ремонтного молодняка кур проводит по следующей схеме: птицу 1-ой группы иммунизировали вакциной совместно с тшаяжюм (в дозе 1 мг/кг'массы тела птиц); птице 2-ой группы вакцину вводили ссз^есгпо с натрия тиосульфатом (7%-иый водный раствор); нммукизацшо йтицы З-ей группы проводили совместно с натрия тиосульфатом (7%-иый водный растаор) • и новокаином (0,5%-ный водный раствор); птице 4-ой группы вакцину вводили совместно с левамизолом (в дозе 2,5 мг/кг массы птиц); птицз 5-ой группы вакцину вводили совместно с АСД-2 (2%-ный раствор); птицу 6-ой группы иммунизировали жидкой сорбированной инактивированной вакциной против болезни Гамборо согласно Временному Наставлению по ее применению, однократно, внутримышечно, в область грудной мышцы, в дозе 0,5 мл (без иммуностимуляторов); интактная птица 7-ой группы служила контролем. За всей птицей было установлено клиническое наблюдение.

На 14-й и 21-й день после вакцинации от 5 птиц из казздой группы отбирали пробы сыворотки крови для постановки РИД и ИФА.

В 3-м опыте было изучено влияние иммуностимулятора натрия тиосульфата (7%-ный водный раствор) на иммуномррфогенез у ремонтного молодняка кур, иммунизированных против болезни Гамборо жидкой сорбированной ннактивироваиной вакциной.

С этой целью нам» было подобрано по принципу аналогов 30 голов ремонтного молодняка кур^ЗО-дйезного возраста. Птицу разделили на 3 группы по 10 голов з каждой.

Птице 1-ой группы вакцину вводили совместно с натрия тиосульфатом (7%-ный водный раствор), однократно, внутримышечно, з дозе 0,6 мл, в область грудной мышцы.

Птицу 2-ой группы иммунизировали жидкой сорбированной ннактивиро-ваниой вакцине» против болезни Гамборо согласно Временному Наставлению по ее применению, однократно, внутримышечно, ¡а дозе 0,5 мл, в область грудной мышцы (без иммуностимулятора).

Интаетная птица 3-й группы служила контролем. Иммунизацию лроао-дзхли в 130-дкевном возрасте. За всей птицей было установлено клиническое, наблюдение.

На 14-й день после проведения вакцинации по 4 птицы из кшхдой группы убквалн для проведения нммуноморфологических исследований.

В ^йм/пяо»в»достт;е1»иом) опыте была изучена экономическая гффек-тазность парентеральной иммунизации ремонтного молодняка кур против болезни Гамборо жидкой сорбированной ниактивировгнной вакциной совместно с иммуностимулятором нстрия тиосульфатом (7%-ный водный раствор).

Исследования били проведены на 800 голсаах ремонтного молодняка кур 168-дневного возраста, подобранных по принципу аналогов, и разделенных на 2 групяхл, по 400 птиц в кавдой. . '

Птица 1-ой (опытной), группы згхаязу вводили совместно с натрия тиосульфатом {7%-ныи водный раствор), однохргшэ, лнутрнмшнечно, в дозг 0,6 мя, в область грудной мышцы. , •

Птицу 2-ой (контрольной) группы иимушгзкрозалн жидкой сорбированной ингкгазпрованной вакциной против болезни Гамбсро согласно Временному Наставлению по ее пршгаеимю, однократно, биутр'.мыглечно, в дозе 0,5 мл, в область грудной мышцы (без иммуностимулятора). .

За птицей гсех групп было установлено клнипчгс::оа наблюдение. Контроль напряженности посгпакцикзльного иммунитета протай болезни Гамборо осуществляли путей серологического исследования проб оыг.ороток крози птиц я желтков инкубашюпных яиц а РИГА на 30-й день после еакщшацшг, а затем 1 раз э месяц в течение 8 месяцев (срок наблюдения). .

При проведения морфологических исследования кровь получали из яремной и »срыловой иен (И.М. Карлуть, 1936). Содержание гемоглобина в крови определяли на ФЭКе. Количество эритроцитов, тромбоцитов и лейкоцитов подсчитывали по методике АЛ. Кудрявцева и А.А. Кудрявцевой (1979). Мазки крови птиц "отовили на тонких обезжиренных предметных стеклах, фиксировали в метаноле, окрашивали но Романовскому-Гимза (И.М. Карпуть, 1926). Лей^даграмму выводили на основании подсчета 100 .леток.

Содержанке РНК а лчмфоцитах выявляли по методике Брате в модификации М.С. Жаховз и И.М. Карпутя (1967). Оценку относительного.количества РНК производили по 3-баль! й системе, подсчитывая 100 лимфоцитов. Интенсивно окрашенные клетки отмечали +++, среднеокрашенные ++, слабоокрашенные +, неокрашенные - 0. Для сопоставления полученных результатов вы-

водили средней цитохимический коэффициент (СЦ1-С) по формуле G. Astaldi и L. Verga (Э.Н. Терентьева).

Дифференциащш Т- и B-лимфоцитов проводили с учетом размера клеток, величины ядра, цитоплазмы, интенсивности их окраски (N. Vujanovic, 1972; G. Voisin, 1985; П.М. Мусненко, 1986), Фагоцитарную активность псев-дозозииофилов птиц определяли по методике А.И. Ивановой и Б.А. Чухловина (1967), завершенный фагоцитоз - по О.Г. Алексеевой и А.Г. Волковой (1966).

Содержание общего белка в сыворотке крови птиц устанавливали с использованием рефрактометра ИРТ-3 и таблицы Райеса. Количественное определение белковых фракций проводили методом электрофореза в полиакрила-мидном геле (В.М. Холод, Г.Ф. Ермолаев, 1988). Лнтическую стивность лизо-цима сыворотки крови определяли по Д.Г. Дорофейчуку, а бактерицидную ак-п1 шость - по О.В. Смирновой и Г.А. Кузьминой (1966) в модификации 10.М. Маркова (1968) (С.С. Абрамсз и др., 1989).

Пушстат костного мозга птиц получали из проксимального отдела боль-шеберцоаол кости с использованием иглы 17 M с хорошо подобранным маяд-оеисм и шприца типа "Рекорд" (И.М. Карпуть, 1986). Мнслограмму выводили, исходя из подсчета 1000 клеток в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимза (И.М. Карпуть, 1986). Наряду с оценкой дшслограм*ш выводили парциальные формулы различных групп клеток костного мозга (И.М. Карпуть, 1986;- С.М. Коленкии, А.И. Михесва, 1999).

Во все сроки исследозшшй проводили контрольное взвешивание подопытной птицы, определяли абсолютную месу и индекс тимуса, бурсы Фабрициуса и селезенки. Для нммуноыорфологических исследований от птиц отбирали кусочки тимуса, бурсы Фабрициуса, селезенки, зкелезы Гардера, стенки тонкого кишечника, дивертикула Меккеля, пищеводной й слепокншечиых миндалин, скелетных мышц, печени, почек, миокарда, ткани с места введения вакцины при парентеральном ее применении, а из бурсы Фабрициуса и селезенки, кроме того, готовили мазки-отпечатки. Материал, предназначенный для иммуномор-фологических, морфометрических и гистохимических исследований, фиксировали в жидкости Кврнуа, 10%-ном раствс,' е формалина, 10%-ном растворе нитрата серебра и жидкости lffi-1. Зафиксированный материал подвергали уплотнению путем залипни в парафин но общепринятой методике» а также замораживанием (Г.А. Меркулов, 1969). Для .лучения общих структурных изменений срезы окрашивали гематоксилин-эозином, а для дифференциации иымуноком-петентиых клеток - по Браше (Г.А. Меркулов, 1969). Для объективной оценки характера изменений в органах иммунной системы птиц определяли содержание Т- и В-лимфоцитоз, лимфо- и плазмобластов, незрелых и зрелых илазмоци-тов, митозов, подсчитывали общее количество клеточных элементов, подсчитывали число и размеры лимфоидных узелков. Подсчет клеточных элементов-проводили в 50 полях зрения микроскопа (объектив х 90, окуляр х 10, биноку-лярх1,5).

Гликоген в тканях выявляли по методу A.A. Шабадаша (1949), аскорби-иоаую кислоту - реакцией Жира и Леблона (Г.И. Роскин, Л.Б. Левииеон, 1957). Кроме того, определяли гнстоэнзимологическую и биохимическую активность

кислой и телочкой фосфатаз в органах иммунной системы птиц (О.В. Волкова, Ю.Х. Елецкий, 1982; В.М. Холод, Г.Ф. Ермолаев, 1988).

Статистическую обработку полученных данных проводили по методике B.C. Асатиани (1965).

Расчет экономической эффективности парентеральной иммунизации ремонтного молодняка кур против болезни Гамборо жидкой сорбированной инак-тивированной вакциной совместно с иммуностимулятором натрия тиосульфатом (7%-ный водный раствор) проводили "о методике, изложенной в "Организации и экономике ветеринарного дела" (И.Н. Никитин н др., 1996).

РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Иммуиоморфогенез у цыплят, перорально вакцинированных проткд болешн Гамборо сухими живыми пнрус-пакншгамн «¡з шт. "Виитерфильд 2512" и !13 шт. «Д 78".

На 15-й день после i-он вакцинации в костном .мозге цыплят 1-ой груп-г.ц отмечалась активизация миелобластического ¡сроветзоргпяя. Одновременно возрастали, по сравнению с контролем, показатели лейхоэрнтробластического индекса иа 38,4% (Р<0,01), костномозгового созревания псевдоэозинофилов и зшииофилов, соответственно на 35,4% (Р<0,05) к 61,1% (Р<0,01). У птиц 2-ой группы в эти сроки процессы иммуночорфолегичееко.ч перестройки протекали менее интенсивно и характеризовались активизацией моноците .озза. На 15-й день после 2-ой вакцинации морфологический состав костного мозга иммунных птиц 1-ой и 2-ой групп нормализовался, что свидетельствует об ослаблении иммунных реакций в .эти сроки.

В тнмусе цыплят !-ей группа :га 15-й день, после S-ой лгкцинации отмечалось расширение корковой я мозговой гоп долек, а также снижение плотности расположения тнмоцитез в них, что свидетельствует об активной миграции геяеток за пределы органа, преоишгхчагГ» их пролифгрэкгенун) способность. У птиц 2-ой группы выявлено значительное расширение, по сравнению с контролем, мозговой зоны далек тимуса на 35,5% (Р<0,01), а размеры коркового слоя сушеетгепно не изменялись. Удельный объем элементов лямфоцдпоЯ ткани в тимуез также снижался, и, соответственно, увеличивалось соотношение эле-р'витав стромы и паренхимы органа. На 15-й день после 2-ой йякцявзиди размеры и соотношение коркового и мозгогого вещества долек, а тглоге плотность томоцнтов у иммунных ггп.-ц 1-ой и 2-сГ; групп нормализовались. Вместе с тем у цыплят 2-ой группы, удельные объемы лиыфондней ткани были по-прежнему ниже, чем у птиц других групп.

В бурсе Фзбрпшуся ¡цыплят 1-ой группы на 15-й />сть госте 1-ой огкнн-нации наблюдалась гиперплазия лимфепдаых узелков, лронеходившая за счет расширения, о сравнению с контролем; корковой и мозговой зон, соответственно в 1,5 (Р<0,01) и'1,4 (Р<0,05) раза. В корковом веществе лнмфоидных узелков отмечалось обеднение лимфощгпши. У цыплят 2-ой группы выявлена атрофия лимфеидиых узеякоз, происходившая за счёт сужения размеров их коркового слоя, а также опустошение мозговой зоны лимфовднымн элементами. В результате лныфокдиые уззлкн ¡ риипмали бмд "пчелиных сот". В отдельных лимфоидных узелках фориировалксь гаянрвхтспл. Содержание плаз-

мобластов у цыплят 1-ой группы увеличивалось по сравнению с контролем в 3 раза (Р<0,05), а проплазмоци. :>в в 1,9 раза (Р<0,05). Иммунные реакции у птиц 2-ой группы протекали менее активно. На 15-й день после 2-ой вакцинации у подопытных цыплят 2-ой группы регистрировалось достоверное (Р<0,05) снижение абсолютной массы и индекса бурсы Фабрициуса. При гистонсследова-нии бурсы Фабрициуса иммунных цыплят 1 -о fi группы в эти сроки выявлено некоторое сужение размеров коркового вещества лимфоидных узелков. Однако содержание проплазмоциТов я пллзмоцитов у цыплят данной группы было выше, чем в контроле, соответственно в 1,9 (Р<0,01) и 1,5 (Р<0,05) раза. У птиц 2-ой группы обнаруживались признаки акцидеотзльиой трансформации органа: разроет межузелкавой соединительной ткани, формирование на месте отдельных лимфоидных узелков железистых структур.

В селезенке птиц 1-ой группы на 15-й день после 1-ой вакцинации размс- ' ры лимфоидиых узелков достоверно возрастали по сравнению с контролем. У цыплят 2-ой группы число и размеры лимфоидных узелкоз не отличались от контрольных показателей. В более поздние сроки (па 15-й день после 2-ой сак-шшпцип") у подопытных птиц 1-ой и 2-ой групп происходило увеличение абсолютной массы и индекса селезень«, которое коррелировало со снижением абсолютной массы н индекса бурсы Фабрициуса. Число лимфоидных узелков с селезенке несколько снижалась. Однако размеры лимфоидных узелков у птиц

1-ой группы были по-прежнему больше, чем у иетактных цыплят.

В "селезе Гврдгрг цыплят 1-ой и 2-ой групп на 15-й день после î-pfi ыс: ринании происходзшо усиленное накопление проплазмоцятов и плазмоцнтов, Ьодержгхше которых превышало контрольные показатели в 1,5 - 1,8 раза (Р<0.05). На 15-й лет посла 2-ой вакцинации иммунные реакции в глелгзг Гардера вакцинированных птиц 1-ой и 2-ой групп угасал».

В пншеводней м(Н!дзл"!|е цыплят 1-ой группы на 15-й День посла 1-ой вакцинации содержание лнмфобяаетов, плазмобластоа н проплазмоцитов возрастало, по сравнению с контролем, соответственно в 3,5 (Р<0,001), 2,1 (Р<0,001) и 2,5 раза (Р<О,С01). У птиц 2-ой группы плазмощггарная реакция протекала менее интенсивно. На 15-й день после 2-ой вакцинации в.пищеводной тшдалнне цыплят всех групп происходило формирование лимфоидных узелков. При этом размеры лимфоидных узелков у птиц 1-ой группы были в 1,5 раза достоверно (Р<0,05) больше, чем у цыплят 2-ой группы. Иммунизация птиц 1-ой группы вакциной из шт. "Вннтерфяпьд 2512" способствовала также достоверному увеличению числа плазмоцитов в 1,7 раза (Р<0,05), по сравнению с контролем.

В стенке тонкого кишечника цыплят 1-ой группы на 15-й день после 1-ой вакцинации отмечено достоверное увеличение по сравнению с интактной птицей числа лимфобластов и пяазмобластов, соответственно в 3 (Р<0,001) и 3,2 (Р<0,05) раза. Применение вакцины из шт. "Д 78" для иммунизации цыплят

2-ой группы способствовало меньшей активизации плазмоцитарной реакции. На 15-й день после 2-ой вакцинации у цыплят всех групп отмечены процессы дифференциации диффузной лимфондной ткани тонкого кишечника с образованием лимфоидных узелков. При этом размеры лимфоидных узелков у птиц 1-ой группы были больше, че> у цыплят 2-ой и 3-й групп.

В ливертнкулс Мсккеля иммунных птиц 1-ой и 2-ой групп на 15-й лень после 1-ой вакцинации отмечалось достоверное возрастание по сравнению с контролем числа плазмоцитов, соответственно в 2,5 и 2,2 раза (Р<0,05). На 15-й день после 2-он вакцинации в дивертикуле Меккеля у всех цыплят появлялись лимфондные узелки. При этом у птиц 1-ой группы выявлено достсерное (Р<0,05) увеличение размеров лимфоидных узелков по сравнению с контролем.

В слизистой оболочке слснокшнсчнмх миндалин цыплят 1-ой группы на 15-й день после 1-ой вакцинации активизировалась плазмоцитарная реакция за счет накопления плазмоцитов, число которых превышало контрольные показатели в 2,3 раза (Р<0,05). Иммунизация цыплят 1-ой группы вакциной из шт. "Винтерфильд 2512" вызывала также увеличение числа и размеров лнмфоид-ных узелков по сравнению с контролем. Применение цыплятам 2-ой группы сакцииы из тт. "Д 78" сопровождалось развитием менее актакнон плазмоцп-тгрной реакции в органе. При этом в слизистой оболочке слепокишечных мнн-далнп уменьшались число и размеры лимфоидных узелков, что связано, по-видимому, с иммунодепрессивным действием вакцинного вируса. На 15-н день посла 2-ой вакцинации в слепокшиечпых миндалинах птиц 1-ой группы по-прежнему шло аэтивмое накопление плазмоцитов. У цыплят 2-ой группы в эти сроки число и размеры лпмфондн.ых узелков были ниже, чем в других группах, а количество плазмоцитов снижалось да контрольных показателей.

Стабильность содержания ас;-ор5ииозоЯ. кислоты в печени, почках, сердечной н скелетной мыкг:".ах подопытных л ннтактных цыплят свидетельствует о то?.г, что внедре.'ше сакданнкх апсммов ¿яруса болезни Гамборо в организм птиц не вызывает значимых «допгез ферментных систем, участвующих ь спнтечо данного соединения из глнжззы.

В ¡грозя иммунных цыплят !-ой и 2-ой групп на 15-й день после 1-ой вакцинации отмечался лейкоцитоз, сопровавдайщнйся достоверным увеличением, по сравнению с интактной ггпщзй, абсолютного содержания Т- и В-лимфоцитов. Вместе с тем, у птиц 1-ой группы количестго лимфоцитов было больше, чем у цыплят 2-ой группы. На 15-н день после 2-ой г.г.этщндцни морфологический состав крови иммунных птиц нормализовался.

Г5рм серологическом исследовании сыворотки креви з РИД (без растит-ровок) специфические противовирусные антитела обнаруживались з 100% проб у птиц 1 -ой и 2-ой групп на 15-й день после 2-ой вакцинации.

Влияние иммуностимуляторов па/эффективность парентеральной пммунизашш ремонтного молодняка кур против болезни Гамборо жидкой сорбированной ннактнвнровшшой вакциной.

На 14-й день после вякцинацни при исследовании сыворотки крови в РИД установлено, что у птиц 1-ой (вакцина + тималин) и 2-оЙ (вакцина + натрия тиосульфат) групп титры антител были соответственно в 1,8 (Р<0,05) и 1,5 (Р<0,05) выше, чем у птиц 6-ой группы (вакцина) и в 9,0 (Р<0,001) и 7,5 (Р<0,01) раза больше, ч^ I у интактных цыплят. При постановке ИФА в эти сроки исследований устано" пено, что у иммунных птии под влиянием тималина (1-ая группа) и натрия тиосульфата (2-ая группа) уровень антител повышайся соответственно на 33,7% (Р>0,05) и 23,6% (Р>0,05) по сравнению с 6-ой груп-

пой (вакцина) и в 2,6 (Р<0,05) и 2,4 (Р<0,01) раза по сравнению с контролем. Применение натрия тиосульфата и новокаина (3-я группа), левамизола (4-ая группа) и АСД-2 (5-ая группа) существенно не влияло на уровень специфических антител у вакцинированной птицы. ,

Исследование сывороток крови в РИД на 21-й день после пакпипашш , показало, что у вакцинированных цыплят 1-ой (вакцина + гималин) и 2-ой (вакцина + натрия тиосульфат) групп титры пргципитинов были соответственно в 2,0 (Р>0,05) и 2,3 (Р<0,01) раза выше, чем у птиц 6-ой группы (вакцина) и в 6,0 (Р<0,01) и 7,0 (Р<0,001) раз превышали контрольные показатели. Результаты ИФА показали, что у птиц 1-ой и 2-ой групп титры антител 'ли соответственно в 5,0 (Р<0,01) и 4,4 (Р<0,001) раза выше по сравнению с птицей 6-ой группы (пакцииа), и в 9,8 (Р<0,01) и 8,7 (Р<0,001) раза по сравнению с контролем.

Иашуио.чорфогснсз у ремонтного молодняка кур, парентерально вакцинированных против болезни Гамборо ¡кадкой сорбированной инак-тшшреванней вакциной, и влияние на »его натрпя тиосульфата.

Результаты исследований во 3-м опыте показали, что на 14-й день после вакцинации в костном мозге птиц 1 -он группы отмечалось достоверное увеличение числа клеток миелобластического ряда по сравнению с птицей 2-ой группы и контролем (Р<0,05), а также увеличение показателей лейкоэритробласти-ческого - и костномозгового индексов созревания эoзинoфFшoв (Р<0,05). У птиц 2-ой группы выявлено незначительное увеличение по сравнению с контролем количества миелобластических клеток.

В тимусе птиц 1-ой группы происходило расширение корковой (в 1,4 раза; Р<0,05) и мозговой зон (в 1,1 раза; Р>0.05) долек. При этом плотность ти-моинтос в корковом веществе доле;с тимуса снижалось, а в мозговом слое возрастала. У птиц 2-ой группы отмечалось расширение коркового вещества в дольках тимуса на 14,0 % (Р<0,05), однако плотность расположения тимусных лимфоцитов на единицу площади в корковой ¿1 мозговой зонах существенно не отличалась от контроля.

В бурсе Фабрициуса ремонтгогс молодняка ¡сур 1 -ей труппы выявлено достоверное увеличение абсолютной массы и индекса органа, по сравнению с птицей 2-ой группы, соответственно в 1,9 раза и 1,7 раза (Р<0.05). У всех вакцинированных птиц 1-ой и 2-ой гр} .!1 регистрировалось расширение корковой зоны лимфоидных узелков с одновременным снижением плотности расположения лимфоцитов в ней, что свидетельствует об усилении пролиферативной и миграционной способности В-лимфоцитов в лимфоидных узелках бурсы. В процессе иммуломорфогенеза у вакцинированных птиц, но особенно в 1-ой группе, происходило интенсивное накопление проплазмоцитов и плазмоцитов.

В селезенке птиц 1-ой группы выявлено значительное расширение пгри-артериальных муфт, а также достоверное увеличение, по сравнению с контролем, числа н размеров лимфоидных узелков (Р<(\05). Иммуноморфологическая перестройка в селезенке ремонтного молодняка кур 1-ои группы сопровождалась также активной плазматизацней белой и красной пульпы органа. У птиц 2-он группы плазмоиитарная реакция протекала менее интенсивно.

Аналогичная закономерность выявлена при исследовании железы Гар-дера в эти же сроки. При этом иммунизация птиц совместно с натрия тиосульфатом, способствовала большему накоплению плазмоцитов в паренхиме данного органа, по сравнению с использованием одной закшшы.

В дивертикуле Мекксли, слизистой оболочке тонкого кише^ика, пищеводной и слепокг.шечных миндалинах подопытных птиц 1-ой и 2-ой групп морфологический состав иммунокомпетентшлх клеток существенно не отличался от контроля.

Гистохимическое исследование почек, печени, сердечной и скелетных мыизп ремонтного молодняка кур не выявило значительных различий в содержании аскорбиновой кислоты у птиц подопытных и контрольной групп. Это свидетельствует о том, что введение а организм птиц ииактивнрэгзнпого вакцинного штамма вируса болезни Гамборо существенно не влипет на процессы синтеза аскорбиновой кислоты из глюкозы, и на вовлечение ее в реакции гид-роксилиро?ания. Содержание гликогена в указанных органах птиц 1-ой, 2-ой и шггактиой групп было также при черно одинаковым. Это означает, что вакцинация ремонтного молодняка кур жидкой сорбированной взкциПой против болезни Гамборо не вызывает существенных сдвигов в активности системы ферментов глпхогенолизп.

Гистохимическое (качественное, изучение активности несяецифических гидролаз в органах иммунной сист?ми ремонтного молодняка кур показало, что у вакцинированных птиц '-ой я 2-ой групп отмечалось усиление, по сравнению с контролем, активности киглой фогфптгеы в Т-лпмфоцчтах тимуса, а также активности щелочной фосфата?к в В-глзтках лимфоняных узелков селезенки и пгкальных пинщалин.

Биохимическое (количественное) определите ахтатосга названных ферментов показало, что у птиц 2-ой группы отмечалось усиление активности кислой фосфатазы в тимусе и щелочной фосфатазы,в селезешУ птиц ¡-ой группы происходило менее активное, по сравнению с использованием одной вакцины, нарастание указанных ферментов.

Данные гематологических исследований показали, что у птиц 1-ой грунты достоверно возрастало, по сравнению с контролем, количество лейкоцитов (Р<0,05), абсолютное число Т-клеток (Р<0,05), значительное (в 1,7 раза; Р<0,001) повышение содержания РИК в лимфоиитах. Изучение фагощггаоиой активности псепдоэозшюфилоя крови иммунных птиц 1-ой и 2-ой групп выявило незначительное увеличение по сравнению с контролем показателей процента фагоцитоза и фагоцитарного индекса. При этом показатели бактерицидной и лизоиимиой активности сьшороткн крови у иммунных птиц 1-ой и 2-ой групп были примерно одинаковыми и существенно не отличались от контроля.

Содержание общего белка и белковых.фракинй в сыворотке крови в период опыта были довольно лабильными. Вместе с тем установлено, что иммунизация птиц совместно - натрия тиосульфатом способствует значительному возрастанию, по сравнению с применением одной вакцины, к:А и в (Р<0,01 -на 14-й день после вакцинации), а также ГцМ (Р<0,001 - на 21-й день после вакцинации).

Активность щелочной фосфатазы б сыворотке крови иммунных птиц 2-ой группы на 14-й день после вакцинации возрастала в 1,5 (Р<0,05) раза по сравнению с.контролем. Иммунизация птиц 1-ой группы совместно с натрия тиосульфатом способствовала меньшему нарастанию активности фермента (в 1,3 раза; Р<0,05). .

Экономическая эффективность парентеральной иммунизации ремонтного молодняка кур против болезни Гамборо жидкой сорбированной инактивированной вакциной совместно с натрия тиосульфатом.

Результаты исследований показали, что применение иммуностимулятора 7%-ного водного раствора натрия тиосульфата при парентер*тьной иммунизации ремонтного молодняка кур против болезни Гамборо жидкой сорбированной инактивированной вакциной способствует созданию у птиц более напряженного в продолжительного иммунитета, по сравнению с применением вакцины без иммуностимулятора. При этом, иммунизация птиц совместно с натрия тиосульфатом (7%-ный водный раствор) обеспечивает, по сравнению с применением одной вакцины, увеличение экономического эффекта на 77965644 рубля (в расчете на 1000 голов), а таюке экономической эффективности ветеринар-шдх мероприятий на рубль затрат - из.6,2Груб. (в ценах 1999 года).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Полученные результаты исследований свидетельствуют о том, что применение для пероральной иммунизации цыплят против болезни Гамборо сухой живой вирус-вакцины из шт. "Вннтерфильд 2512" вызывает у птиц более выраженные, по сравнению с использованием вакцины из шт. "Д 78", иммуно-морфолопгческие реагсции,не оказывая при этом иммунодепрессивного действия на организм птиц. Вакцина из шт. "Д 78" обладает йммунодепрессшшьш действием и вызывает у птиц развитие процессов атрофии й делимфатизация в центральных и периферических органах иммунитета, а таюке ранних инволю-тивных изменений в бурсе Фабрициуса,

Натрия тиосульфат (7%-ный воднчй раствор) и тиыалин (1 мг/кг массы тела птиц), по сравнению с другими иммуностимуляторами (натрия тиосульфат в сочетании с новокаином, левамтоал, АСД-2), значительно повышают эффективность парентеральной иммунизтши ремонтного молодняка кур жидкой сорбированной инактивирозанюй вакциной. Вместе с тем, натрия тиосульфат является более доступным и дешевым препаратом по сравнению с тимзлшюм. Поэтому применение натрия тиосульфата для стимуляции поствакциналького иммунитета у ремонтного молодняка кур при иммунизации их против болезни Гамборо указанной вакциной является наиболее предпочтительным.

Применение жидкой сорбированной инактивированной вакцины совместно с иммуностимулятором натрия тиосульфатом (7%-ный водный раствор) вызывают у птиц более выраженные иммуноморфологические изменения, по сравнению с использованием одной вакцины, что способ гвует созданию более напряженного и длительного иммунитета против болезни Гамборо.

ВЫВОДЫ

1. Применение сухой живой вирус-вакцины из шт. "Винтерфильд 2512" (производство ВНИИЗЖ, г. Владимир, Россия) способствует развитию более выраженных, по сравнению с использованием сухой живой вирус-вакцины из шт. "Д 78" (производство фирмы "Интереет", Голландия), иммуноморфологи-ческих реакций п организме птиц, характеризующихся активизацией костномозгового мнелопоэза, усилением пролиферативной и миграционной активности лимфоцитов в тимусе и Фабрициевой бурсе, увеличением числа и размеров лнмфоидных узелков в селезенке, пищеводной и слепокишечных миндалинах, более интенсивной плазмоцитарной реакцией в бурсе Фабрициуса, стенке тонкого кишечника, пищеводной и слепокишечных миндалинах, а тата«е возрастанием абсолютного и относительного числа Т- и "В-лимфоцитов, что свидетельствует о создании более напряженного иммунитета против болезни Гамборо, при отсутствии морфологически выраженного и мму но депрессивного действия на организм цыплят/1,2,3,6,9,14/.

2. При пероральной иммунизации цыплят против болезни Гамборо сухой живой вирус-вакциной из шт, "Д 78"' иммуноморфологические реакции у птиц протекают менее интенсивно, по сравнению с использованием вакцины из шт. "Вгштерфильд 2512". Применение вакцины из шт. "Д 78" вызывает развитие у цыплят приобретенного иммунодефицита. Его морфологическими критериями яшкются развитие у вглсцинировавных цыплят атрофии и депимфатизации лямфоидной ткани в тимусе, бурсе Фабрициуса и цекачьных миндалинах, а тгкже ахциденталыгой инволюция в бурсе Фабрициуса/1,2,3,6,14,16/.

3. Натрия тиосульфат и тималин по сравнению с другими иммуностимуляторами (левамизол, АСД-2, пОЕОкаин) значительно повышают зффектив. эсть пяреетерзльной иммунизации ремонтного молодняка кур против болезни Гамборо жидкой сорбировгншой инахтивнровапной вакциной (производство ВНИИЗЖ, г. Владимир, Россия). При этом применение натрия тиосульфата (7%-ный раствор) совместно с вакциной повышает титры специфических антител против болезни Гамборо в 1,2-4,4 рггз, а тамзджт (в дозе 1 мг/кг :л:пс:1 массы тела птиц) - в 1,3-5,0 раза по сравнению с использованием одной висцины /5,10,13,15,16,19/.

4. Парентеральная иммунизация ремонтного г-'ояодглка :cjp против болезни Гамборо жидкой сорбированной шштивированной вакциной совместно с иммуностимулятором натрия тиосульфатом (7%-ный раствор) обеспечивает, по сравнению с применением одной вакцины, а-типпгцшо миеяоидного кроветворения в костном мозге, возрастание удельных объемов лимфоидной ткани в тимусе, размеров лймфоядных узелков (В-згвнснмых) и периартериальных (Т-зависимых) муфт з селезенке, более интенсивное развитие плазмоцитарной реакции в бурсе Фабрициуса и селезенке /7,8,11,12,14,16,17,18/, повышение абсолютного числа Т-клегток.и содержания РНК в лимфоцитах крови, и увеличение уровня IgA, М и G в сыворотке крови. Добавление в вакцггиу иммуностимулятора натрия тиосульфата (7%-ный раствор) способствует меньшему нарастанию активности неспецпфнчсских гидролаз (кислой н щелочкой фосфата) в органах иммунной системы птац, что приводит к сшшешпо процессов дефос-

форалнрования и нормашгаг и метаболизма в цепи реакций гликолиза, цикла Кребса и дыхательной цепи, участвующих в аккумулировании энергии /4/.

5. При парентеральной иммунизации ремонтного молодняка кур жидкой сорбированной вакциной в органах иммунной системы птиц развиваются им-муноморфологнческие изменения, свидетельствующие о формировании достаточно напряженного иммунитета против данной болезни,, характеризующиеся расширение;.; коркового слоя дачек тимуса и лимфоидных узелков бурсы Фабрициуса, активизацией гмазмоцитарной реакции в бурсе и селезенке, увеличением в периферической крови по сравнению с контролем содержания лейкоцитов, а в лейкограмме - числа В-лимфоцитов /11,12,14,16,17,18/. Введение указанной вакцпкы вызывает повышение активности кислой фосфатазы в тимусе и щелочной фосфатазы в селезенке и сыворотке крови, что свидетельствует с5 усилении гидролитического расщепления фосфорилировакных соединений, необходимых для синтеза АТФ /4/. .

6. Парентеральная иммунизация ремонтного молодняка кур против бо-лезш5 Гамберо хшд^ой сорбированной инактныфоваиноа вакциной сошест^о с иммуг.остимул-чтврои натрия тиосульфатом (7%-ный водный. раствор) обеспечивает, по сравнению с применением вакцины без нммуиостимулэтсра, уво Л1г:е:1;;е З!со1:аг»:«ческого эффекта (в расчете на 1000 голов) на 7965644 рубля, а глюке повышение экономической оффегстивкости ьетеринарных мероприятий па рубль затрат на 6,21 руб. (в ценах 1999 года), за счет создания у вакцшшро-ватаых птиц более напряженного и продолжительного иммунитета.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Для специфической профилактики болезни Гамборо у цыплят рекомендуем применять сухую живую Еирус-вакцину из шт. "Вигггерфнльд 2512" (пронз-содство ВНИИЗЖ, г. Владимир, Россия), которая, по сравнению с сухой живой вирус-вакциной из. шт. "Д 78" (производство фирмы "Интерзет", Голландия), способствует развитию более выраженных иммуноморфологических реакций, созданию более напряженного иммунитета, не оказывая иммунодспрсесивпого действии па организм птиц (Методические рекомендации по диагностике, про-филакгикс и ликвидации инфекционной бурсальной болезни птиц. Рассмотрены к одобрены Ученым Советом БелНИИЭВ им. Вышелссского 3.12.1998 г., протокол №15; утверждены РО "Белптицепром" 11.12.1999 г.).

При парентеральной иммунизации ремонтного молодняка кур против болезни Гамборо жидкой сорбированной ннактивированной вакциной (ВНИИЗЖ) для аетивизации иммуноморфогенеза, усиления напряженности а продоляш-телыгасти иммунитета рекомендуем в вакцину добавлять иммуностимулятор натрия тиосульфат в 7%-ной концентрации (Наставление по применению тима-лнна, лития карбоната н натрия тиосульфата в птицеводстве для повышенна иммунологической реактивности организма птиц. Утверждено ГУВ Минсельхозпрода Республики Беларусь 18.05.1999 г., приказ № 10-1-5-557).

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. ГромоЬ И.Н., Лысый В.Г. Морфологические показатели иммунитета у цыплят, вакцинированных против болезни Гамборо // Тезисы докладов 3-ей республиканской научной конференции студентов Республики Беларусь, Минск, 14-16мая ¡997 г.-Ми., 1997. - Ч.З.-С. 196-197,

2. Громов И.Н., Прудников B.C. Морфология костного мозга у цыплят, вакцинированных против болезни Гамборо // Современные проблемы интенсификации животноводства: Материалы международной студенческой научной конференции, посвященной памяти академика РАСХН K.M. Солнцева, Горки, 15-16 апр. 1997 г. - Горки, 1997. -С. 32.

3. Прудников B.C., Громов H.H. Иммуноморфологическкс реакции у цыплят, вакцинированных против болезни Гамборо // Ветеринарные и зооин-"¡таерные проблемы в жизотиоеодстсе и научно-методическое обеспеченна учебного процесса: Материалы 2-ой международной научно-практической конференции, Витебск, 25-26 сентября 1997 г. - Минск, 1997. - С. 204-206.

4. Активность кислой н щелочной фосфатаз у ремонтного молодняка кур а перкод вакцнналнн против болезни Гамборо с использованием иммуностимулятора натрия тиосульфата / И.Н. Громов, B.C. Прудников, В.И. Гндраиович, Д.С. Голубев // Ученые записки Витебской государственной академии ветеринарной медицины. - Витебск, ¡598. - Т. 34. - С. 120-122.

5. Влияние лммуностлмулзтсроп содержание антител в сыворотке кретл у птиц, вакцинпрссаянях против болезни Гамборо I ИЛ. Громоз, B.C. Прудников, Н.С. Мудршс, Т.Н. 0::ш«ая, КЛО. Фгаосзев. // Тезисы до?ашов международной хонфгренгши, косшиздппой 70-лстпк? факультета ветеринарной медицины Армянской с.-х. ашгеати, Ереван» 25-27- сект. 1998 г. - Ереван, 1998.-С. 15-1 б..

6. Громов H.H. Иммупеморфодогаческая перестройка у цыплят, згкця-т.ровашшх против болезни Гамборо // Международный йгоарный журнал, 1998. - №5. - С. 52-55.

7. Громов H.H., Прудннкоз B.C. Морфологический соска кроси и костного мозга ремонтного молодняка кур, г.пшинировзнных против болезни Гамборо, и влияние па него натрия тиосульфата // Тезисы докладов международной конференции, посглще.чшй 70-летИ!'о фзкультета ветеринарной медицины Армянской с.-х. академии,Ереван, 25-27 сеит. 1998 г.-Ереван, 1998. -С.11-12.

3. Громов И.Н., Прудникоз B.C. Иммуноморфсгенез у ремонтного молодняка кур, вакцинированных против болезни Гамборо, и влияние на него натрия тиосульфата // Ученые записки Витебской государственной академии ветеринарной медицины. - Витебск, '998.-Т. 34.-С. 122-124.

9. Прудников B.C., Громов И.Н. Плазмоцнтарная реакция в органах иммунной системы цыплят, вакцинированных против болезни Гамборо // Материалы международной научно-практической конференции "Проблемы патологии, санитарии и бесплод "т с животноводстве", посвященной 1.00-летию со дня рождения академиков АН РБ Х.С. Гореглядд и М.К. Юсковца, Минрк, 10-11 декабря 1993 г. - Минск, 1998 С. 119-120.

10. Влияние иммуностимуляторов на эффективность вакцинации кур против болезни Гамборо / В.Н. Грушин, И.Н. Громов, MC. Жаков, B.C. Пруд-

ников, Б.Я. Бирман // Фундаментальные и клинические аспекты медицины и фарамации: Тезисы докладов международной научной конференции студентов и молодых ученых "Студенческая медицинская наука XXI века", Витебск, 1215 окт. 1999 г. - Витебск, 1999. - С. 88.

11. Громов И.Н. Иммуноморфогенез у ремонтного молодняка кур, вакцинированных против болезни Гамборо, и влияние на него иммуностимуляторов II Becui Акадэмн Аграрных Навук Рэспублш Беларусь, 1999. - №2.'- С. 79-82.

12. Громов И.Н.; Прудников B.C. Влияние натрия тиосульфата на имму-номорфологические реакции у ремонтного молодняка кур, вакцинированных против болезни Гамборо // Животноводство Беларуси, 1999. - №2. - С. 26-27.

13. Громов И.Н., Прудников B.C., Влияние иммуности\...ляторов на содержание антител в сыворотке крови у ремонтного молодняка кур, вакцинированных против болезни Гамборо.// Молодежь, наука, аграрное образование и производство: Сб. тр. молодых ученых и препадавателей с,- х. учеб», и науч,-иссл. заведений/ВГАВМ.-Витебск, 1999.-С.72-75.

14. Громов И.Н., Пруднйкоа B.C. Ймкупоморфогекез у цыплят, вакцинированных против болезни Гамборо // Ученые записки ВГАВМ: Материалы 111 мевду народной научно-практической конференции, г. Витебск, 4-5 ноября 1099 г.-Витебск, 1999.-Т. 35, чЛ.-С. 35-36. ' :

15. Задачи ветеринарной службы в повышении продуктивности и сохранности ггтицы / B.C. Прудников, Ю.Г. Зелютков, И.Н. Громов, С.А. Большаков,

A.M. Курилопич // Ученые записки ВГАВМ: Материалы III международной научно-практической конференции, г. Витебск, 4-5 ноября 1999 г. - Витебск, 1999.-Т.35,ч.1.-С. 119-120. Ч

16. Методические рекомендации по диагностике, профилактике и ликвидации инфекционной бурсальной болезни птиц / МСХ и ПРБ. РО «Белптицг-пром». ААН РБ. БелНИИЭВ им. С.Н. Вышелесского. ВГАВМ,; Сост. Б.Я. Бирман, К.К. Дягилев, О.В. Леоиченко, М.С. Жаков, B.C. Прудников, И.В. Насонов, Н.В. Захарик, И.Н. Громов, В.Н. Грушнн; - Минск, 199?. - 45 с.' ■.:

17. Натрия тиосульфат - активный стимулятор поствакцинального иммунитета у животных и птиц/ И.Н. Громов, Е.И. Большакова, С.П. Прибытько,

B.C. Прудников, Л,Н. Гольиева // Молодежь, наука, аграрное образование и производство: Сб. тр. молодых ученых и препадавателей е.* х. учебн. и науч.-иссл. заведений. - Витебск, 1999. - С. о9-72.

18. Прудников B.C., Громов И.Н. Иммуноморфогенез у кур, вакцинированных против болезни Гамборо;, и влияние на него иммуностимуляторов // Проблемы сельскохозяйственного производства в изменяющихся экономических и экологических условиях: . Материалы международной научно-практической конференции, посвященной 25-летию Смоленского сельскохозяйственного института, Смоленск, 25-26 ноября 1999 г. - Смоленск, 1999. - С.

19. Эффективность ветеринарной профилактики в промышленном йтице-водстве и способы ее повышения / B.C. Прудников, Ю Г. Зелютков, И.Н. Громов, С.А. Большаков, A.M. Курилович // Проблемы научно-инновационного развития Витебской области и пути их решения: Сб. докл. науч.- практ. конф., Rhicock, 17-21 окт. 1999 г.-Минск, 1999.-С. 127-129.

181-183

РЕЗЮМЕ

Громов Игорь Николаевич

Иммуноморфогенез у цыплят, вакцинированных против болезни Гамборо, и влияние на него иммуностимуляторов.

Ключевые слова: иммуноморфогенез, вакцина, иммунизация, болезнь Гамборо, натрия тиосульфат, иммунная система, иммуностимуляторы, имму-нодепрессия, цыплята, ремонтный молодняк кур.

Объектом исследования служили цыплята 7-36-дневного возраста, а также ремонтный молодняк кур 130-150 дневного возраста.

В работе изучен в сравнительном аспекте иммуноморфогенез у цыплят, перорально иммунизированных против болезни Гамборо вирус-вакцикамн из шт. "Вшггерфнльд 2512" (Россия) и из шт. "Д 78" (Голландия), а также влияние иммуностимулятора натрия тиосульфата на иммуноморфологическне реакции у ремонтного молодняка кур при парентеральной иммунизации их .жидкой сорбированной инакгавированной вакциной (Россия) против болезни Гамборо.

Результаты иеследозгш-гй показали, что применение для пероральной иммунизации цыплят против болезни Ггчбсро янрус-вакцины из шт. "Виатерфильд 2512" вызывает у птиц развитие более выраженных, по сравнению с использованием кирус-вйкцпни из шт. "Д 7S" нммуноморфологиче-ci3!x реакций, а не оказывает при этом нымунодепрессизкого действия. Установлена высокая эффективность парентеральной иммунизации ремонтного молодняка кур у.:идхоЯ сорбкрогаиной г.н2;сгззг:рсгс!шсп вакциной (Россия) протпа болезни Гамборо на фрнг применения иммуностимуляторов натр'м тиосульфата (7%-яый еоднмП распор) з тимшпша (в дозе 1 мг/кг киаой масса тела пткц). Выявлено положительное слжшпе иммуностимулятора 7%-:;ого водного раствора плтрпл тносульфзта ва тэтегтае кммунсморфологаче-сках реакций в организ* ie ппщ при псргнтеральпой иммунизации ремонтного молодняка кур против болезни Гамборо готдкой сорбированной iffiasmmjspo-гакной вшсцаноя, что имеет стешую практическую значимость в позышешга эффективности вакцинаций против болезни Гамборо.

Громау кар Мшалаинч

РУЛОМ)

{мунамарфагенэз у куранят, вакцынаваиых супраиь хваробы Гамба^о 1 уплыу на яго дмунастимудятарау.

Ключавык слови: ¡мунамарфагенэз, вакцина, хвароба Гамбара, натрия тиясульфат, шумная сыста.-.а, плазмацытарная рэакцыя, ¡муносшмулятар, кура.чяты, рамонтны мзладняк курзй.

Лб'скгсм даследавання был» кураняты 7-36-дзённзга узросту, а таксама рамонтны маладнак курзй 130-150 дз&шага узросту.

Мэтай даследаванняу было выьучэнне у нарауназьлым аспскце шупакарфггеиззу у куранят, пераралька щумзаваных сунраць хваробы Гамбгра ырус-ижцыиам! з шт. "Вшпрфшьд 2512" (Раая) i з шт. "Д 78" (Галаг.дыя), а таксама уплыу ¡ммунасшмулятарз иатрыя тыясульфата на ¡мунамарфалапчиыя рэакцп у • рамонтнага маладняка курзй пры парэнгзральнай ¡мунЬаца ¿х вадхай сарбфаеаиай шактгшграванай вакцынай (Рас^я) супрзць хваробы Гамбара.

Вынш даслгдазанняу паказгш, што выкарыстаннг для пераральиай ¡мушзацп куранят супраць хваробы Гамбара вфус-взкцыны з шт.

■ "Вттзрфшьд 2512" Еыклжае у птушак размццЗ больщ актыуных, у параунаша з выкарыстаиисм в^рус-вакцьшы з шт. "Д 78" шунамарфалапчных рэакцый, 1 не аказзае пры гэтым ¡мунэдэпрзаумага дзеяння, Пакгзанз высокая эфектыунасць парэнтэралышй ¡мушзацьп рамонтната маладняка курзй иадкай сарб!раванай ¡цахтьшрава^ай вакцынак (Рас1я) супраць хвгробы Гамбара на фойе вьгкарысшшя ¿мунастымулятарау натрыя тыясульфата (7%-ны водны раствор) и шмашна (у дозе 1 мг/кг жывой вап). Выяулени сгамулюючы уплыу ¡мунастымулятара 7%-нага воднага раствора натрыя тыясульфата на развщцЗ «мунамарфалалчных рэакцый у аргашзме птушак пры парзнтэрдльнай ¡мушзацьн рамонтнага маладняка курэй супраць хваробы Гамбара вадкай сарб1раванай шактыв:расаиаП взкцынай, што мае важнае практичнее значэнне у павышэнж эфектыунасвд вахцыкацый супраць хваробы Гамбара.

SUMMARY

Gromov Igor Nikolaevich

Immunomorphgenesis in Chickens, Vaccinated Against Gumbcro Disease, and the Influence of Immimostwwlators on it.

Key words: immunomorphogenesis, vaccine, immunization, Gumboro disease, sodium thyosulfate, immune system, imnrnnostimuiators, immunodepression, chickens, hen youngsters.

- Subject under investigation were chickens 7-36 days old and l.en youngsters 130-150 days old.

The comparative immunomorphogenesis in chickens immunized against Gumboro disease by attenuated strains "Winterfield 2512" (Russia) and "D 78" (Netherlands), and the influence of sodium thyosulfate upon immunomorphogenesis in hen youngsters parenteral immunized by adsorbted inactivated vaccine (Russia) against Gumboro disease have been investigated.

The outcomes of researches have shown, that application of the virus-vaccine "Winterfield 2512" for oral inimuniration of chickens against Gumboro disease induced in the birds development of more expressed in compared with the virusj vaccine 78" the immunomoipholcgfcal responses, sad does not render immunodepression. The high efficiency of parenteral i:nn:unisalicn of hen youngsters with the liquid adsorbted inactivated vaccine (Russia) against Gumboro disease on a back ground noise of the application of sodium thyosulfate (7% water solution) and timalin (in a doze of 1 tng/kg of body weight) is established. The positive influence of 'he 7% water solution of sodium thyosulfate on current immimomorphological responses in an organism of birds parenteral immunisation of hen youngsters against Gumboro disease with the liquid adsorbted inactivated vaccine is revealed, that has the important practical significance in' increase of vaccination efficiency against Gumboro disease.