Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Функциональная морфология симпатических ганглиев кроликов при повышении синаптической передачи

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МОСКОВСКАЯ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ВЕТЕРИНАРНАЯ АКАДЕМИЯ имени К.И.СКРЯБИНА

На правах рукописи

УОХАНЕД БАХГАТ АБДЭЛЬ АЗИЗ ХАЛИЛЬ

ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ МОРФОЛОГИЯ СИМПАТИЧЕСКИХ ГАНГЛИЕВ КРОЛИКОВ ПРИ ПОВЫШЕНИИ СИНАПТИЧЕСКОЙ ПЕРЕДАЧИ

16.00.02 - патология, онкология и морфология животных

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Москва - 1992

Работа выполнена в Московской ордена Трудового Красного Знамени ветеринарной академии имени К.И.Скрябина.

Научный руководитель - доктор ветеринарных наук, профессор Александровская О.В.

Официальные оппоненты

доктор биологических наук, профессор Новак В.П. доктор биологических наук, Давлетова Л.В.

Ведущая организация

Московский ордена Трудового Красного Знамени институт прикладной биотехнологии

Защита состоится 1992г.

в " " часов на заседании специализированного совета Д 120.36.01 по защите диссертаций на соискание ученой степени доктора наук в Московской ордена Трудового Красного Знамени ветеринарной академии им.К.И.Скрябина 109472, Москва, ул.Академика Скрябина, 23, тел.377-93-83).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке вкадемии.

Автореферат разослан 1992 г.

Ученый секретарь специализированного совета

Слесаренко Н.А.

Ц ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

' IЛ. Актуальность пробле'/ы.1ю современным представлениям вегетативная нервная систе.\а \БНС) рассматривается как комплекс центральных и периферических клеточных структур, регулирующих необходимый для адекватной реакции всех систем функциональный уровень внутренней жизни организма .А.Д.Ноздрачев,1983). Б этой связи выяснение закономерностей ее структурной организации и функциональной пластичности - одна из актуальных проблем нейромор|юлогии. Убедительно показано, что органы пищеварения располагает гжетрамуральными и ин-трамуральными ганглия?.'«, которые со своим собственны»; эндокринным аппаратом' выступают в роли единой нейрогуморалькой системы регуляции ,А.М.Уголев,Т978;В.И.Мосин, J98I:i;.Д.Соловьева, T98I :В.Х.Васи-леико. Ё. Н.Ко."и на. 1983:11. К. Климов. J983; ri.T. Райхлин к др., 1933:

galin , 1Г>ьВ, M.YL.Y^orti, 1 , с.D.Johnson,

Как известно, они являются координирующие звеном в секреторной и моторной деятельности органов пищеварения ,Н.Г.Колосов,1968:Н.Г. Колосов,Л.Я.Хабарова, 1978, И. А.Вулыгин Л979;л.11. Арчакова.Т982').

Кроме того, вегетативные ганглии - наиболее информативные объекты для изучения отдельных морфсфизиологических процессов, протекающих в нервной системе и, в частности, е нервных глиальных клетках. Анализ состояния изученности проблема продемонстрировал, что вопросам морфологической организации ВНС е норме и патологии посвящены многочисленные публикации.' Е. .4.Крохина, 1973; Ю. М. Жаботинский, 1975:И.Ф.Иванов,Т.Н.Радостина.Т975;Л.Г.Кнорре,И.Д.Лев,1977;Э.К.Ха-ул^кэ,1978;Т.Н.Радостина,1982;Н.Д.Ноздрачев,1983;В.И.Скок,А.А.Се-ленко,В.Л.Деркач,1987 и гсногие другие).

Вместе с тем, несмотря на имеющиеся обстоятельные данные в области периферической нервной системы ;Е.Е.Ванле,195Ö,Б.И.Лаврентьева Л939;И.О.Колосова, 1948;Хауликэ, 197Т;Е.М.Крохина, В.Н.Турин. A.C. Дмитриев. Д.М.Голуб и др.,1989). до сих пор остаются дискуссионными сведения о структурно-метаболических проявлениях меченейрональных и нейрон-глиальных отношений при различных функциональных состояниях организма, и, в частности, в условиях повышенной транссинаптичес-кой передачи. Имеются единичные работы в данном направлении, вы-волненные на крысах, собаках и кошках, в то время как подобные исследования на кроликах, являющихся одной из распространенных экспериментальных моделей, отсутствует.

1.2.Цель и задачи исследования.Дель настоящего исследования изучить на основании использования комплекса современных методов функциональную морфологию чревного ганглия у кролика,а также закономерности морфологической,гистохимической и электронно-микроскспичес-кой перестройки нейронов,нейрон-глиальной системы и синаптического аг>

парата этого узла при повышении синаптической активности.

Для достижения намеченной цели были определены следующие задачи: _

-изучить питоархитекгонику чревного ганглия у кролика в норме и при повышении синаптической передачи;

-проследить >.:етаболиз\' нейрон-глиальной системы ганглия в норме и при повышении синаптической передачи;

-выяснить б условиях эксперимента ультраструктурную организацию нейронов.' сателлитов и синаптичсских контактов чревного ганглия.

1.3. Научно я новизна. Ус гановлена видоспецифичность .\ икромор{)сло-гии чревного ганглия у кролика. Впервые с помощью морфологических, нейро:. эрфологических и морфометрических методов проведено исследование этого узла в норуе и при повышении синаптической передачи. Представлено подробное описание характера изменений нейроглиоархи-тектоники чревного ганглия, а также установлены морфологические эквиваленты функциональной активности нейронов в норме и под влиянием карбохолина. Проведен электронномикроскопический анализ нейронов, синапсов й нейрон-глиальных взаимоотношений в чревных ганглиях и их структурно-качественные изменения при воздействии карбохалина.

1.4.Теоретическая значимость и практическая ценность.На основании выявленных законоьерностей разработана концептуальная база об адаптивной пластичности нервной ткани вегетативных ганглиев у кролика.

Результаты исследования расширяют научные представления о цито-архитектонике и межклеточных взаимоотношениях в чревных ганглиях кроликов как в норуе, так и при повышении синаптической передачи. Полученные результаты по морфологии и ультраструктуре чревного ганглия являются нормативными при изучении патологии пищеварительной системы, а также при тестировании фармакологических препаратов. Разработанный комплексный методический подход по изучению нейроглио-архитектоники экстрамуральных вегетативных ганглиев может использоваться при проведении научных исследований в области экспериментальной и клинической нейрохор£ологии, а также в учебном процессе кафедр анатомии, гистологии, фармакологии биологических и сельскохозяйственных вузов.

1.5.Апробация работы.Основные положения исследования доложены на научной конференции молодых ученых МВА им.К.И.Скрябина в

1991 годах.

1.6.Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 194 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов исследований.

выводов, практических предложений, библиографии Спи-

сок использованной литературы включает 440 источников, в том числе 193 иностранных. Диссертация содержит 5 таблиц, 53 рисунка.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИОШЗДШАНЖ1

Работа выполнена на кафедре гистологии псковской ветеринарной академии им.К.И.Скрябина.

Материалом для исследования служили чревные ганглии 60 молодых половозрелых кроликов.породы шиншилла массой от 3 до 4 кг обоих полов. Из них были сформированы опытная и контрольная группы. Все кролики находились в одинаковых условиях клеточного содержания И1кормления, которое осуществлялось по рационам вивария ЫВА.

Для усиления тонуса холинергической системы животным опытной группы, в отличие от контрольной, вводили подкожно двукратно с ин- ■ тервалом 15 минут 0,1%-ный раствор карбахолина в дозе 0,75 мг на I кг живого веса /М.Д.Машковский, 1988/.

Исследование чревных ганглиев проводили через 2 часа после второй инъекции. Животных убивали путем декапитации без применения наркоза. Для нейрогистологических, гистологических и гистохимических исследований материал фиксировали в 12%-ном растворе нейтрального формалина и жидкости Карнуа с последующей заливкой в парафин. Для изучения цитоархитектоники чревных ганглиев, базофильного вещества нейронов, выявления нейрофибриллярного аппарата гистологические срезы окрашивали гематоксилином и эозином, тионином по Нисслю, а также импрегнировали солями серебра по Бильшовскому-Грос по общепринятым методикам /Э.Пирс, 1962; Г.А.Меркулов, 1969/.

Для выявления нуклеиновых кислот /НК/ гистологические срезы окрашивали галлоцианин-хромовыми квасцами по методу Сйнарсона. После измерения толщины парафиновых срезов на приборе ОВИМ-1 /П.Л.Гореликов, 1975/, определяли количество нуклеиновых кислот /НК/ в дву-ядерных нейронах, на препаратах, окрашенных по ?йнарсону с помощью установки М®-3.

Уровень активности ацетилхолинэстеразы /АХЭ/ определяли по методу Карновского-Рутс /1964/.

Измерение микроструктур проводили с помощью микроскопа МЕР-3 и окуляр микрометра при увеличении 945 на срезах, окрашенных гематоксилином Хариса и эозином. Показатели объемов тел двухядерных нейронов, их ядер и цитоплазмы определяли по соответствующим формулам /К.Таикэ,1980/.

Расстояние менду двумя ядрами в двухядерных нейронах подсчитывали расположив микрометр параллельно максимальному диаметру, а за-

тем перпендикулярно к нему для измерения другого. Крош того, учитывали количество ядер глиоцитов, окружающих тела нейронов. У каждого животного проводили измерения 50 двухядерных нейронов, у которых срез прошел через ядра и ядрышки. В зависимости от величины и в связи с большой вариабельностью объемов, на основании построения гистограмм с помощью микро-сВМ " Сл.*'.-.) -82", выделяли три группы нейронов: малые, средние и крупные. Устанавливали границы юс. Полученные данные обрабатывали с помощью вариационной статистики, корреляционного анализа на сВМ ВС-1033 с использованием стандартных программ " ,

" и " KI3R ", на микро-?ВЫ " Casio РХ -82 ". Электронную микроскопию проводили по общепринятой методике. Материал фиксировали в охлажденном 2,5%-ном глютаральдегиде на фосфатном буфере с рН 7,3 с последующей дофиксацией Ю-ным раствором осьмиевой кислоты на фосфатном буфере. Кусочки заливали в впонаралдитную смесь. После получения окраски и оценки полутонких срезов, блоки окончательно затачивали и готовили ультратонкие срезы на ультратоме KB 480 А /Швеция/, монтировали их на опорные сетки и контрастировали цитратом евина по v. .• ¿1663/ и просматривали в електронном микроскопе < v 500 при увеличениях на 8000 - 20000.

З.РЕЗУЛЬТАТЫ С0ЕСТ3211ЫХ КССПДОВАКИЙ

3.1.Общая характеристика чревных ганглиев половозрелых кроликов

Чревный ганглий у всех исследованных нами половозрелых кроликов представлен одним узлом, окруженным жировой тканью. Его форма весьма вариабельна - чаще узел удлиненный с асимметричным расширением одного из концов, реже - в виде подковы или же полукольца.

Снаружи ганглий покрыт соединительнотканной капсулой, состоящей из двух слоев - внутреннего и наружного. От капсулы вглубь узла отходят нежные соединительнотканные тяжи, разделяющие ганглии на различные по диаметру и форме дольки. Здесь располагаются групповыми островками нервные клетки, плотность распределения которых по периферии чревных ганглиев выше, по сравнению с центральными частями, где обнаруживаются кровеносные сосуды, нервные волокна в рыхлолежа-щие группы нейронов.

Тела нервных клеток овольной, круглой, грушевидной и пирамидальной гермы, которая имеет тецценцию к корреляции с количеством ядер в нейронах.

Анализ гистограмм распределения объемов тел нейрона свидетельствует, что размеры нервных клеток неодинаковы и среди них можно выделить малые, средние и крупные нейроны. Первую популяцию состав-

ляют нервные клетки с объемом 71-35,81 - 29831,39, вторую - 29031,39

- 1:5027,54, третью 95027,54 - 194510,81 мкм3. Шесте с тем, средние показатели объемов тел малых нейронов равняются: 20031,37+ 854,26, средних - 51231,41 + 22t0,84, нрупш-к - 127330 + 334'.,89 мкм3. Основная популяция нервных клеток чревного узла представлена средними по размеру нейронаш 51*5, тогда как крупных клеток 2755, иелких 22?5 от всех подсчитанных нервных клеток.

-Средние объемы ци'' плазмы малых нейронов составляют:15092,65 + 857,45, средних - 52145,98 + 2C3S.24, крупнга - И573Т,-7.7 + 734.3?

мкм3.

Значительное количество нейронов имеют д::а, а небольшая часть одно ядро. /.¡ор/ометрически выявлено, что расстояние кег,цу двумя ядрами двухядерных клеток для малых по размеру нейронов 5,5 + 0,39, средних - 10 + 0,39, крупных - 14,1 + 1,29 мкм?

Среднии_ объем ядер для малых нейронов 4938,73 + 333,33, средних

- 8053,3 + 301,44, крупных - 9725,76 + 745,09 мкм3.~

Ядерно-плазматическое отношение составляет 0,345 + 0,031, 0,170 + 0,009 и 0,089 + 0,006 в мелких, средних и крупных нейронах, соответственно. 3 двухядерных нейронах базоГильное вещество нередко сконцентрировано меяду ядрами или же располагается по периферии. Ка-^ый нейрон окружен несколькими глиоцитами. Для малых нервных клеток нейрон-глиальный индекс составляет в среднем 2,78 + 0,22, для средних 3,23 + 0,18 и для крупных 4,0 + 0,28.

Между нейронами располагаются мгагочисленные лемкопиты и стро-мальные слементы. В пределах долек микрососуды представлены капиллярами. Перикарионы нервных клеток характеризуются неодинаковой способностью к импрегнации азотнокислым серебром. Так, нами обнаружены аргиро^ильиые, гипераргиро?ильные и арпгрогобнье клетки. Вся популяция нейронов представлена мультиполярными клетками. Hai.® выделены нейроны как I так и П типа Догеля.

Многочисленные нервные отростки поодиночке проходят ме'кду телами клеток или группируются в магистральные пучки. Глп нейронов с двумя ядрами характерно сксцентричное расположение ядер. Такие нейроны относятся, как правило, к средним и крупнил. Их ядра имеют типичное для нервных клеток строение с 1-3 ядртаками с различной локализацией в кариоплазме.

Б цитоплазме нейронов четко прослеживается безо., ильное вещество, представленное мелкими зернам! и глибками различной величины. мног.кестЕа нейронов оно сконцентрировано на периферии. Бресте с тем, • нами обнаружены нейроциты с относительно равномерни.! распределением базофильного ве^зства. Для малых нейронов характерна концентрация

тигроида па одной из полюсов клетки. Несколько крупных гипераргиро-гильных магистральных пучков как бы пересекают чревный ганглий по его длинной оси, остальное пучки имеют иную векторную ориентацию».

Па телах и вблизи от оснований нейронов нами выявлены синапсы в виде двух форм: транзиторных и концевых. Транзиторные синапсы образуются разветвлениями преганглионарных еолокон, которые по своему ходу горигруют контакты с отростками и телами нервных клеток.

Концевые синапсы обычно крупнее и сильнее воспринимают соли серебра. ^та разновидность синапсов образована терминальными разветвления, м преганглионарных волокон и имеют вид колечек или пуговок. НеПроСибрплллрный остов синапсов чаье всего уплотнен. Обе формы синапсов располагаются ;;ак на отростках, так и на теле некрона.

Ка гистосрезах, отра;;:аю;.их распределение АХЭ в нейронах чревного узла в нероле, могио выделить три группы нервных клеток. К первой относятся нейроны, в которых практически отсутствует продукт реакции на ¿иГЭ /слабая активность/. Тамих нейронов обнаружено около 50?5 от всех клеток узла. Вторая группа клеток - составляет большую /около 50?У популяцию ганглия /умеренная активность/. К третьей группе относятся нейроны с высокой активностью АХ?. Таких нейронов 20СЛ.

Отложение конечного продукта гистохимической реакции в нервных волокнах указывает на их гетероморГность. При качественном анализе нейронов н:от установлено, что распределение в них нуклеиновых кислот /НК/ сходно с распределением базооильного вещества.

¡'¡етодом цитоготоыетрки нами прослежено различие в количественном содержании ПК в нейронах с неодинаковым объемом перикариона. Так, средняя величина содержания НК в двухядерных малых нейронах равняется 50,10 + 0,40, в средних - 42,02 + 0,57, в крупных клетках - Зо,12 + 0,С7 усл.ед. Следовательно биосинтетические процессы более интенсивно протекают в малых нейронах. Количественное представительство в них КК на ГС, ¡Ж выше по сравнению со средними и на 28,1% — по сравнению с крупными нейронами. В средних нейронах содержание КК на 7,415^ выше, чем в крупных клетках.

¡.лектронноьикроскспически установлено, что нейроны характеризуются неоднородной електронной плотностью ядра и цитоплазмы.

Ядркшковый аппарат представлен филаментозной и зернистой частями.

Гетерохроматин относительно равноглерно распределен по всей кариоплазме. Нередко его скопления вплотщто прилегают к внутренней мембране ядра, которая может иметь как совершенно ровные, так и извитые контуры.

Цитоплазма нейронов характеризуется обилием органелл. Значительное место среди них занимает аппарат синтеза, образовании'! рибосомами, полисомами и множеством коротких и средней -длины цистерн хранулярного ретикулума. Величина и форма их скоплений варьирует,что мы регистрировали татке на светооптическом уровне при характеристике строения базофильного вещества.

Цистерны гранулярного ретикулума не имеют каких-либо ориентации в локализации. Однако ча^е они концентрируются ка периферии нейрона. Отдельные цистерны гранулярного ретщ-зд.-.г- гъгут л'нть несколько расширены в центральных или периферических зонах.

Элементы агранулярного ретикулума единичны, йюгочисленние элементы пластинчатого аппарата находятся или в различных участках пери-кариона или вблизи ядра. В зоне расположения глементов комплекса Гольджи встречаются единичные митохондрии и лизосош. Здесь число рибосом заметно снижается вплоть до их отсутствия. ;.мтохондрии распределены по всему перикариону и имеют чрезвычайно разнообразную форму и размеры. Рхаиболее частой формой является округлая и округло-удлиненная до овальной, реже - палочковидная и изогнутая, характерная для мелких по размера»,I митохондрий, '.¡сибраны имеют, как правило, четкие формы и очертания. Кроме того, нами выявлены конденсированные формы с Електронно-плотным ыатриксом и тесно расположенными кристами, а также промежуточные - с параллельно расположенными, хорошо выраженными кристаг.ги и матриксом средней электронноч- плотности. Нередко встречались и ортодоксальные митохондрии с просветленным матриксом и укороченными кристами.

Лизосош располагаются одиночно, роже - скоплениями по 2-3 и более лизосом, которые могут плотно соприкасаться. Отмечены также вторичные лизосош. Кроне того, встречаются мультивезикулярные тельца, содержащие до 3-5 светлых пузырьков.

Нейрофиламенты имеют вид нежной сеточки, лежащие в зонах, лишенных органелл. Нейротубулы нередко располагаются перпендикулярно плазмолемие и следуют через всю толь ину цитоплазм; в гентр тела клетки.

Вместе с тем, регистрируются нейроны с разягеккли 1;орфологи-ческими изменениями деструктивного гекеза. При с.лектрокномикроскопи-ческом анализе ¿ни затрагивают основные структуры нейроцита и различны по структурному выражению. Одни из них характеризуются наличием в ядре слектронно-прозрачных.отделенных от нуклеоплазмьг одиночной мембраной вакуолей /ВйВ/, форма и размер которых варьируют. 11ри етом оставшаяся часть кариоплазмы, ядрышко и глтопллзма могут

сохранить свою нормальную структуру. В других нейронах имеет место резкое набухание отдельных митохондрий, некоторое расширение цис-. терн гранулярного ретикулума, уменьшение количества рибосом и полисом в околоядсрной области, значительное расширение и вакуолизация диктисом комплекса Гольджи. В отдельных нейронах выявлено повышение содержания лизосом.

К ка;ядому нейрону прилегает несколько глиоцитов, окружающих тело нейрона. Глиоциты имеют одно ядро, в большинстве случаев округлой или овально!: Формы с гладкими или умеренно извилистыми контрами. Локализация хроматина различная. Большинство ядер с дисперсным распределением глыбок хроматина, концентрация которых увеличивается по периферии кариоплазмы. В других с:луч;-;;-х обнаруживаются многочисленные очаги скопления гргнул хроматина по Есеку лерикариону, что придает ядру пятнистый вид. Такие ядра более характерны для лешоцитов.

В узком ободке цитоплазмы глиоцитов и леммоцитов содержатся специфические органеллк - митохондрии, цистерны гранулярного ретикулума, лизосомы, ыпкротрубочки, Фибриллярные структуры, отдельные глектроннопрозрачше везикулы, ¡.мтохондрии отличаются более повышенной электронной плотностью с хорошо Биршсеннши кристами и умеренно слектронноплотным м триксом. Как правило, перикарион глиоцита прилегает но всему периметру нейрона где не наблюдается отхондения денд-ригов. В ряде случаев глиоциты прилегают к нейрону по периметру лишь частично и тогда отмечаются "обнаженные", не покрытые глиалыюй оболочкой, участки нейрона. Глиальнке капсулы различной толщинч. Они образованы пе тольго глзюцитами, но и их отростками, в которых встречаются рибосомы, единичные митохондрии и лизосомы.

Некоторые глиальнке клетки одновременно участвуют в Формировании капсулы нейрона и оболочек нервных волокон.

Наш выявлено несколько Форм контактов отростков сыелзшх глиоцитов. Наиболее часто один глиальньм отросток наслаивается на другой и капсулы нейрона в таком случае приобретают двухслойное строение. Возможен прямой стык ыезду двумя отростками смежных глиоцитов, когда края их примыкают друг к другу. Иногда терминальные отделы отростков перисоматических глиоцитов образуют взаимонаправленные выросты /ди-гитопнвагинации/, которые плотно контактируют друг с .другом.

Отростки глиоцитов в ряде случаев могут глубоко внедряться в нейроны, а так.се образовывать влагалища для перицеллюлярных нервных волокон, преимущественно аксонов. Глиальнал капсула нейронов снаружи покрыта соединительной тканью, в которой проходят кровеносные сосуды

:ч «::•<* 'ег иг.ш«с:-ь< с .--чг-кь рео:-1 ¡'е.иадоух вблслн. астреиаю'гег. ¡;> ^ггД'о го^окно. »шхоля!Циеся ни начальных стадиях и.с-линизации.

Чревный ганглий кролика богат холинсргическими аксодендричес-кими и реже акпосоматическики контактами.

В пресинаптической части холинергичсских синапсов располагается множество электронносветлых синаптических пузырьков круглой формы. Их наибольшее скопление отмечается вблизи активной зоны, имеющей сплошные осмиофильные утолщения ейнаптическсго контакта. Наряду с мелкими светлыми имеются, хотя и в меньшем количестве, крупные пузырьки с плотной сердцевиной. Детальнее активной синаптииеской зоны встречаются 2-4 крупные, округлые митохондрии различной электронной плотности и фибриллярные структуры, единичные лизоеомы и отдельные круглые мультивезикулярные гельца.

Пресинаг.тическая мембрана, как правило, тоньше, чем постсинап-тическая. На обеих мембранах наблюдается усиленное отложение элект-ронноплотного материала. Б постсинэптической'части обнаруживается несколько округлых митохондрий, микротрубоиек, которые нереско припевают вплотную к гтостсинаптической мембране.

3.2.Морфо-функциональные изменения структур чревных ганглиев половозрелых кроликов при введении карбзхолина

На;/и установлено, что кар*а*солин инициирует развитие в чревных узлах у кролика комплекса морфологических изменений, который проявляется на всех уровнях его структурной организации..

Микроскопически отаечается значительное увеличение их васкуля-ркзации и уменьшение плотности нейронов. В ганглиях обнаружены как нормальные по форме и тинкториальным свойствам, так и морфологически изьененные нейроны: деструктивные к пигсноморфные .темные)клетки)

В то же время относительное количество нейронов трех групп изменяется незначительно: в среднем малых 22-24, средних 43-43, крупных 25-28% клеток.

Нейроны трех групп по своим морфометрическим показателям также претерпевают изненения в сторону укрупнения, особенно отчетливо это прослеживается на примере малых нейронов, -минимальные размеры которых увеличиваются на 42.5. а максимальные - на 8.8%, тогда как для средних клеток эти значения составляют'8,8 и 1,7$.а для крупных - 1.7 и 1,2^. соответственно.

Тела нервных клеток приобретают различную форму: прямоугольную, треугольную, трапецевидную, пирамидальную, овально-удлиненную, тогда как тела с округлыми и овальными очертаниями встречаются относитель-

но тэедко.

Прослежено достоверное увеличение объемов тел нейронов во всех трех группах. Для малых нейронов они составляют 21180.54 ^ 1445.6, средних 62043.98 ^ 2257.1. крупных 123644.93 _>4723,9мкуэ, что на 5.6: 8 и 1,03% соответственно выше, чем у интактных животных.

Средние показатели объемов цитоплазмы малых нейронов уменьшаются до 14002,52 _+ 1360,65 .'/км3, в то время как в других популяциях клеток они, напротив, увеличиваются и составляют в средней 55608,72+ 1387,49, крупных 123387.07 + 4613.8 мкм3ней?он»х, соответственно. Форма ядер нейронов в основном не изменяется, а у -пик-ноуорфных нейронов она мотет быть бобовидной. Основная масса нейронов имеет одно или два ядра, но имеют место крупные"клетки с тремя и даже с четырьмя ядрами.

Обращает на себя внимание тенденция к уьеньшению на 1:,5%) средних расстояний между двумя ядрами в малых нейронах., тогда как в средних и крупных клетках эти показатели увеличиваются на 17.4 и 22%, соответственно.

Введение карбахолина сопровождается достоверным увеличением объемов ядер в малых и крупных нейронах на 4,4 и 15.7$, в средних по размеру нейронах объемы ядер уменьшаются на 8.Г& в сравнении с интактныш животными.

Ядерно-плазматическое отношение для малых нейронов составляет 0,422 + 0,45, средних - 0,142 + 0.006. крупных клеток -0,095 + 0,006. Нейрон-глиальный индекс во всех трех группах имеет тенденцию к увеличению и равняется в мелких клетках 3,00 + 0,28. средних -3.46 + 0,19 и крупных 4,41 +0,22.

Ядрышки в ядрах крупные и отличаются округлой формой, их количество варьирует и может достигать 3-4.

Выявляется изменение содержания, расположения и размеров базо-фильного вещества. Так, в одних нейронах его глыбки укрупняются, местаьи теряют свою' обособленность и сохраняется большая их концентрация в периферической части клеток или у одного из их полюсов.

В других нервных клетках незначительное скопление глыбок ба-зофильного' вещества наблюдается в околоядерной зоне.

У третьих нейронов оно распределено относительно равномерно в виде зерен по всему перикардону. В некоторых нейронах имеет место периферический хроматолиз. Большинство нейронов отличаются ар-гиро- и гипераргирофилией. В аргирофобных нейронах нейрофибрилляр-ный аппарат разрыхляется и грубеет, приобретая сетчатый рисунок. В редких случаях прослеживается вакуолизация периферической части цитоплазмы. Такие нейроны вьщеляются утолщением и склеиванием нитей

нейрофибриллярного аппарата. Е них обнаруживаются ».ногочисленные отростки с варикозными утолщениями.

Ва'-но подчерк-нуть, что введение карбахолина•способствует значительное увеличение синаптических контактов. Тончайшие концевые разветвления преганглиарных волокон утолщаются, приобретая при это.', варикозный еид. синаптические петельки и пуговки набухают и оказываются резко аргирсфильныуи.

Отмечается повышение активности АХЭ в некронах и в волокнах и равномерное усиление окрашивания по всему перикариону.

Выявлено, что 1<Ж нейронов характеризуются низкой активностью ЛХЭ, 35% - средней и Ы>% - высокой. В нейронах со средней активностью лХЗ отьечается скопление коричневого осадка ферроцианида (.еди по периферии клеток, а в клетках с высокой акгивностыо АХЗ имеет место как равномерное отложение конечного продукта гистохимической реакции по всему перикариону, так и некоторое увеличение е/о в пе-ринуклеарной зоне и по периферии нейронов.

Возрастают объемы ядер и ядрьгшек, при одновременно;/ повышении количества НК вс всех типах нейронов в мелких нейронах на 9,45, в средних на 13,9 и крупных на 8.52$ в сравнении с интактными животными). У экспериментальных особей содержание НК в мелких нейронах выше на 9 '!%, чем в средних и на 29й, чем в крупных, тогда как в средних нейронах содержание НК на 17/7% превосходит таковое в крупных клетках.

При ультрыь-икроскопическо!. исследовании чревных ганглиев пело-Еозрслых кроликов, подвергнутых действию карбахолина, отмечены различные по степени Еьтраженности изменения основных элементов ганглия. Так, в ядрах нейронов имеет место укрупнение ядрышек с увеличенной гранулярной зоной и различная их легализация вплоть до контакта с внутренней мембраной кариолеммы. Гетерохроматин образует в центральных и периферических частях ядра глыбчатые 'скопления различного диаметра и формы.. Кариолемма чаще ьсего имеет неровные контуры. Внутренняя мембрана утолщается и отличается большей ос-'.иофидией. Перпендикулярное пространство в некоторых частях сильно расширяется. Отмечаются многочисленные ядерные поры. Ядра нередко занима ют крайне эксцентричное положение.

Обращает на себя внимание увеличение количества рибосом и' полисом. Встречаются участки цитоплазмы, где гранулярный ретикулум концентрируется вокруг ядра или те по периферии перикариона, что хорошо согласуется с полученными нами данньки световой микроскопии. Ширина цистерн канальцев гранулярного ретикулума колеблется.

В цитоплазме нервных клеток наблюдаются многочисленные набухшие

митохондрии. В раде случаев они приобретают самую причудливую фор-1у и анастог. озируют ме^ду собой и лизосомами.

Отмечено существенное увеличение особенно в околсядерной зоне элементов комплекса Гольдки. Количество лизосо" возрастает, нередко они дистигают гигантских размеров и имеют округлую или овальную форму. Выявляются также расположенные группами липофусциноЕые гранулы со вторичными лизосомаги и вариабельные по фор?е. Отмечается некоторое утолщение нейрофиламентов и нейротубул при одновременном их количественно;/ уменьшении, особенно в околоядерной зоне. По сравнению с тела:,-и нейронов глиоциты характеризуются повышенной электронной плотностью. Их ядрышко может располагаться как в центре, так и по периферии. Скопление гетерохро^атина обнаруживается на периферии кариоплазмы глиоцита.

В глиоцитах и леммоцитах присутствуют многочисленные ядерные поры. Отмечаются контакты е^ду наружным листком кариолеммы глиоцита или лем.моцита с мембранам гранулярного ретикулума перикарионов клеток. В цитоплазме глиоцитов увеличивается количество рибосом и полисом. Цистерны гранулярного ретикулума расширены. Митохондрии набухают, увеличиваются в объеме и приобретают округлую форму. В одних из них внутренняя структура при этом сохраняется, в других набухание сопровождается частичным или полным исчезновением крист. В реактивно измененных участках цитоплазмы уожно видеть не выявляемые у интактных животных, пластинчатые тела, множество фибриллярных структур и микротрубочек.

Усложняются отношения нейрон-глия за счет возникновения плотных контактов между мембранами отростков глиоцитов в перикорионом нейронов.

Вместе с тем чаще чем в контроле, присутствуют нейроны, тело которых на продолжительном расстоянии не имеет глиальной капсулы. В нейроне узла у животных опытной группы по сравнению с конт

рольной, обращает на себя внимание большая вариабельность в диаметра осевых цилиндров безмиелинэвых нервных волокон.

Имеет место некоторое обеднение нейрофиламентами и нейротубулам дендритов. Наиболее выраженные структурные перестройки, обусловленны воздействиям карбахолина зарегистрированы в синаптическом аппарате. Они проявляются увеличением количества и протяженности активных зон синапсов. Нами обнаружены крупные по размеру аксональные бутоны, имеющие на своей терминале до 2-3 активных синаптических зон с дендритами, что у интактных животных не отмечено. В морфологически измененных синапсах, в пресинаптических зонах увеличивается количество мультивезикулярных телец, в также наблюдается разрыхление и

:з

утончение мембран синапсов с приобретением неправильной извитой фор-м>1 в местах активных зон. ВыяБляетбя 'йа^ухшие митохондрии. Вместе с тем, некоторые пресинаптические хепг.икали имеют округлые митохондрии с разрушенными кристами вблизи от активной зоны, лизосо:.ы, а такте мелкие осмиофильные образования, напоминающие лкпофусциновые

гранулы. Основная масса синаптическкх пузырьков мало отличается от

хо гя

таковых, описанных з контроле и имеют место и различные, изменения с основном мелких электронносветлвх пузырьков. Они выражаются в их скоплении и склеивании, утрате контуров, уплотнении, сморщивании. изменении формы к обеднении синят ическими пузырьками.

У отдельных синапсов утрачивается четкость границ пре-и псст-синаптической мембран... а синаптичесчая щель представлена диффузно осмиофильным материалом. Пресинаптические бутоны таких синапсов характеризуется наличием лизосомноподобнык образований. В ганлиях животных, подвергшихся влиянию карбахолина, обнаружены многочисленные синапсы, характерные для контрольных особей, а тпк~е аксо-аксоналэные контакты, которые у интактнкх животных выявлялись значительно рече. В таких синапсах м.еется большое чол/.чество синаг.ти-ческих пузырьков, митохондрий с плотно упакованными криегш/и, мулв-тивезикулярные тельца и др. Отчетливо выражены ;:ре-и постсинаптичес-кие ;ембраны.

н. в 1-1 В С Д и

].Нейроны в чревно». ганглии половозрелых кроликов характеризуются дольчатым, групповым расположением. Кх плотность распределения выше по периферии, чем в центральной части уллл. В клеточном составе гачглия имеются одно- и двуядерные нейроны, ибе разновидности обнаруживают признаки полноценно функционирующих" клеток. Базо-фильное вещество клеток варьируется по строению у. локализации. Оно представлено л ел кип,и глнбками различной величины, концентрация которых преимущественно снижается от периферии к ядру. В друядерных нейронах базофильное вещество уочет концентрироваться ме*;ду двумя .ядрами. Мультиполярные нейроны характеризуются различны?.* мос^о: и количеством отростков и отточщением от тела клетки. Синапсы представлены в виде двух форм: транзиторные и концевые, которые располагаются преимущественно на отростках аксо-дендричегкие) и ремз на теле нейронов .аксо-сомлтическио).

2.Морфометрически выделены мелкие нейроны с объемом, равным. 7165,в! _ 29351,39 мкм,3; средние нейроны - £9361.39 ^ 95027.54-.км3; и крупные нейроны 95027,Г>4 19459и.В1 мкм3. Количественно преобладали средние нейроны - 51%, доля крупных составила 2?Х, а уалых - 22%.

- З.Гистэхимическк выявлено, uto активность ацётилхолиностеразк варьирует: ЗОЙ'йейроног проявляют слабую. Ьй% умеренную и 2056 высокую активность уровня фермента.

дито.\ ор!>о.\ етрически обнару-ено, чтс 'синтез нуклеиновых кислот более интенсивно протекает в малых нейронах: на 19,23? выше по сравнению со средними v, на 23', по сравнению" с крупными клетка;.и. Б средних нейрона* содержание нуклеиновых ккслсг на 7,4% выше, чем в крупных нейронах. • - '

4. Нейроны чревного ганглия характеризуются ультраструктурными признаками, свидетельствующими об их разной'функциональной активности. которая выражается в особенности распределения и морфологии ор-ганелл. б нервуо очередь аппарата синтеза белка.

5.Граница.нейро-глия может и'-еть рознее контуры или'множество взаимоинвагинаций. Часть глиоцитор участвует одновременно в формировании капсулы некрона и оболочек нервных волокон.

6.Введение карбахолина вызывало:

-увеличение васхуляриззции узла, уменьшение плотности расположения нейронов и. избиение их формы:

-повышение метаболической активности некоторых нейронов, глиоцитов, усложнение нейрон-глиальньгх отношений и синаптических контактов. Об oton могут свидетельствовать увеличение размера и количества ядрышек в ядрах нейронов и глиоцитов, укрупнение зернистости базофиль-нэго вещества, гиперсингпсия;

-увеличение количества деструктивно измененных ¡.эйронов .хроматолиз, вакуолизация нейронов, варикозные утолщения нервных волокон).

7.Морфометрически установлено, чтс введение карбахолина сопровождается:

-незначительными сдвигами-в количественном составе нейронов и изменением в сторону укрупнения предельных значений всех трех групп клеток;

-возрастание средних объемов тел нейронов;

-увеличение объема, ядер и ядерно-плазматического отношения в малых

и крупных нейронах и уменьшение в средних;

-увеличение во всех трех группах нейрон-глиальногс индекса.

8.Введение карбахолина приводит к увеличению количественного представительства клеток с высокой активностью ацетилхолинэстеразы и количества нуклеиновых кислот во всех группах нейронов;

9.Ультраструктурная перестройка нейронов и синаптических контактов под влиянием карбахолина характеризовалась: , " ■ '"-образованием извилистости ядерных мембран и глыбчатых скоплений гетерохроматина вблизи' кариолеммы;

-увеличением зернистой части ядрышек;

-гипертрофией органелл. набухание; митохондрий, накоплением лизосс> в цитоплазме нейронов и глиоцигов:

- усложнением нейрон-глиальных взаи'. оотнршений с образование«-, многочисленных взаиуоинвагинаций и пояьлениег. десг.,осоь'5

- появлением большой вариабельности б дшпегрс осевых цилиндров нейропиля и безг.иелиновых нервных волокон,

- гиперсинапсией и появлением крупных аксонлльнык бутонов, икеящих на своих тер;.;иналях до 2-3 активных синаптических зон с девдритами;

- изменением светлых синаптических г.узырьков в пресикащической части синапса.

Ь.ПРЕ&ЛОЖШ ОБ ИиЮЛЬЬСВАШИ НАУЧШХ

полокени.*;

Результаты исследования целесообразно использовать:

- при каписачии соответствующих разделов учебников и справочных руководств по сравнительной и видовой топографической морфологии животных:

- при чтении лекций и проведении лабораторных занятий по курсу гистология, фармачология и патофизиология;

- в научно-исследовательских лабораториях занимающихся проблемами экспериментальной некромерфологии при анализе механизмов пластичности вегетативной нервной системы:

- при разработке научнообоенлванных реког.ендаций по корректированию режимов содержания в крелиководегье.