Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.02) на тему:Действие на организм животных препаратов комплексной переработки крови

*

На правах рукописи

Степанекко Максим Валериевич

Действие на организм животных препаратов комплексной переработки крови

16.00.02. - Патологии. онгапогмя и морфология животных

детпаяв&ЕРАт диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

¥$а-1998

Работа выполнена на кафедре «Анатомия, гистология и патологи: Башкирского государственного аграрного университета, ЦНИЛ Башкирско государственного медицинского университета и НПФ «Биовет», г. Уфа.

Научный руководитель -

Научный консультант -

член-коррэспондент ААО, доктор ветеринарных наук, профессор В Н. Байматое. кандидат медицинских наук В.Л.Шишкин.

Официальные оппоненты -

заслуженный деятель науки РФ, член-корр. ААО, доктор ветеринарных наук, профессор В.М. Мешков; доктор медицинских наук профессор, Ю.А. Медведев

Ведущее предприятие -

Республиканская научно-производственная лаборатору

Защита состоится

А

1998 г. в

№

l'X/ l

часов на з<

седании диссертационного совета К. 120. 87. 02-. при Башкирском государс венном аграрном университете.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Башкирского roc; дарственного аграрного университета.

Адрес: 450001, г. Уфа, ул. 50 лет Октября, 34>.

Автореферат разослан

Ученый секретарь диссертационного совета канд. вет. наук, доцент

; J

>

Ф.А. Каримо

»

1. Общая характеристика работы

з

Актуальность темы. Несмотря на то, что фармацевтической промышленностью выпускается более 70-ти лекарственных средств, оказывающих стимулирующее или корректирующее действие на иммунную систему животных и человека (Машковский М.Д., 1993), иммуноглобулины остаются высоко значимыми препаратами в терапевтической практике (Чернуха В.К., Бе-регогой Г.В., 1975; Слободняк В.И. и др., 1995; Кирилов ВТ., 1996).

Однако производимые ныне иммуноглобулиновые препараты имеют два существенных недостатка. Первый из них - это невозможность их 55едз.чия внутривенно из-за развития после этого анафилактоидных реакций (Петров Р.В., 1976; Ring I. etal., 1977,1978). Вторым недостатком иммуьоглооулинорых препаратов является их высокая стоимость, которая определяется не только себестоимостью сырья (крови), но и тем, что при производстве препаратов остается много неиспользуемых отходов.

Цель и задачи. Цель денной работы - выяснить влияние на организм животных в норме и патологии препаратов, получаемых в процессе комплексной безотходной технологии производства иммуноглобулиновых препаратов: «Иммунодеза» и альбумин-этакридиновой мази.

Для реализации поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- изучить влияние «Иммунодеза» на неспецифические и гуморальные факторы защиты организма животных в сравнении с 10 %-ной формой иммуноглобулина, и 5 %-ным раствором поливинилпирролидона;

• выяснить влияние альбумин-этакридиновой мази на процесс раневого заживления итечение конъюнктивита у животных;

- провести клинические и производственные испытания препаратов при различных патологиях у животных.

Научная новизна работы. На основании комплекса биохимических, токсикологических, иммунологических и клинических исследований было изучено действие «Иммунодеза» на неспецифические факторы защиты организма и гуморальное звено иммунитета. Нами научно обоснован метод внутривенного введения препаратов иммуноглобулинов, а также использование альбумин-

зтакрмджовсного комплекса (отход производства иммуноглобулинов рива нольным методом) в составе мази в лечение патологий кожи и слизистых обо лочек у жм&этних. На основания полученных данных разработана комплекс ная безотходная технология переработки препаратов крови.

Практическая ценность работы. Установлена высокая стимулирующа! активность-- «Игшунодёза» на неспецифическиа факторы защиты организма I гуморальное звено иммунитета. Доказана розможность использования его дл< повышения резистентности у домашних р сельскохозяйственных животных.

Апробировано на практике использование альбумин-этакридиновогс комплексе г составе мази, обладающей антисептическими и стимулирующими ранозаживление свойствами.

Испытанные препараты, полученные при переработке крови, позволяют расширить ассортимент эффективных и дашевых лекарственных средств, производимых из неё, повысить рентабельность производства иммуноглобулинов.

Нами модифицирована методика исследования хемилюминесценции крови крупного ротою скота.

По материалам исследования подготовлены рекомендации по использованию препаратов «Йммунодез» и «Альбумин-этакридиновая мазь».

Научные положения, изложенные а диссертации и опубликованных работах, могут быть использованы в учебном процессе в подготовке врачей или псвышлнии их квалификации а соответствующих высших и средних учебных заведениях,

Основные положения диссертации, выносимые на защиту.

1. Влияние препаратов «Иммунодеэ» и «Альбумин-этакридиновая мазь» ка защитные механизмы организма животных.

2. Показатели состояния йеспецифической защиты и гуморального им' мунитета животных при воздействии 10 %-ным раствором иммуноглобулина,

препаратом «Иммунодез» и 5 %-ным раствором поливинилпирролидона.

3. Влияние внутризенного введения «ИммуноДёэа» на состояние свободно-радикального окисления крови телят, больных катаральным бронхитом.

Апробация работы. Материалы исследований рассматривались на:

- заседаниях кафедры «Анатомия, гистология И патология сельскохозяй-

:твенных животных» Башкирского ГАУ;

- научной конференции молодых ученых региона Южного Урала и По-зопжья;

- заседаниях научно-производственного совета НПФ «Биовет», г. Уфа.

На альбумин-этакридиновую мазь подана заявка на получений патента,

регистрационный № 63106375 в ФИПС.

Публикация результатов 'исследований. В различных научных изданиях опубликовано 2 статьи, отражающих основное содержание диссертации.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, заключения, выводов, практических предложений, дополнительных материалов в форме приложения и списка литературы. Библиография 458 источника, из них 67 иностранных. Объем диссертации 168 страниц, включая 26 таблиц, 24 рисунков и 5 фотографий.

2. Материаль: и методы исследований

Лабораторные, клинические и научно-производственные исследования проводились в период 1596 - 1998 гг. Диссертационная работа выполнялась на кафедре «Анатомия, гистология и патология» Башкирского государственного аграрного университета и ЦНИЛ Башкирского государственного медицинского университета, научно-производственные эксперименты проводились на базе учебно-опытного хозяйства Башкирского ГАУ и НПФ «Биовет», г. Уфа. Научным консультантом по вопросам иммунологии и производства изучаемых препаратов является кандидат медицинских наук Шишкин В.Л.

В опытах использовано 17 телочек черно-пестрой породы в возрасте 1,5 - 2 месяцев массой 35,00 - 40,00 кг, 30 морских свинок средней массой 0,35 ± 0,04 кг, 30 крыс, имеющих среднюю массу 0,145 ± 0,03 кг, 5 золотистых хомячков массой 0,09 - 0,13 кг, 30 кроликов породы «Шиншилла» со средней массой 2,80 ± 0,25 кг, 20 беспородных собак при средней массе 8,30 ± 1,00 кг и 8 собак породы доберман-пинчер массой 32,00 ± 3,30 кг.

Исследуемые препараты испытаны в производственных и клинических условиях на 49 коровах и 35 телятах черно-пестрой породы, 250 собаках и 43 кошках разной породы и массы при инфекционных, внутренних незаразных,

гинекологических и хирургических патологиях.

Опытные партии иммуноглобулинов, гомологичных для каждого вида опытных животных получали осаждением сывороток этанолом модифицированным методом Кона (Холчев И.В.,1947) с помощью фракционного стола «Frigera» согласно регламенту «Иммуноглобулин человеческий нормальный» № 131-79.

Концентрацию растворов иммуноглобулина до требуемых величин осуществляли ультрафильтрацией через мембрану ХМ-300 («Amicon»).

Концентрацию белка в исследуемых растворах определяли с помощью рефрактометра (Кондрахин И.П. и др, 1985). Фракционирование иммуноглобулинов осуществлялось колоночной хроматографией с седефаксом G-200 (Вязов O.E., и др., 1967).

Антикомплементарную активность препаратов иммуноглобулина определяли в реакции связывания комплемента (РСК) в модификации Тукачинско-го С.Е. с соавторами (1970). Использовали лиофипизированный комплемент морской свинки производства Уфимского НИИВС им. И И. Мечникова и гемолитическую сыворотку производства Пермского НИИВС. Рабочую дозу комплемента определяли по общепринятой методике (Вязов O.E., 1973). Результаты выражали в антикомплементарной дозе (АКД).

О внутривенной переносимости животными изучаемых препаратов судили по клинико-морфологическим наблюдениям

Постановку реакции гиперчувствительности немедленного типа на «Иммунодез», 10 %-ный иммуноглобулин и 5 %-ный поливиниппирролидон (ПВП) делали по общепринятой методике (Вязов O.E. и др, 1967).

Общую гемолитическую активность комплемента в сыворотке крови животных определяли в реакции связывания комплемента (РСК) по 50 % гемолизу (Резникова П.С., 1867).

Сравнительную оценку влияния препаратов иммуноглобулина, ПВП и иммунодеза на шспородзавиашый метаболизм нейтрофигюв (in vitro) осуществляли с помощью теста «Тест спонтанного восстановления нитросинего тет-разопия» (НСТ-тест) (Методические указания, БГМИ, 1987,1938)

Уровень антител в крови против золен истого стафилококка, вульгарного протея, синегнойной папочки определяли в реакции пассивно-! гемакпюишд-

ии формалинизирооанных эритроцитов (РПГА) с использованием цитоплаз- 1 ¡этических растворимых антигенов (ЦПА) указанных возбудителей, получен- '

I

ых в лаборатории анатоксинов Уфимского НИИВС им. И.И. Мечникова. Титры нтител логарифмировали по основанию 2. (Методические указания, БГМИ, 987,1988).

При исследовании влияния изучаемых препаратов на местный воспали-ельный процесс, раны воспроизводили путем прижигания- кожи 1редварительно выбритой и продезинфицированной) раскаленным до красна пециальным клеймом а течении 1 - 1,5 с. Спустя 30 минут крысам на пора-сенный участок наносили 0,5 млрд. микробных клеток золотистого стафило-окка, собакам - 2 млрд. микробных клеток.

Составление лейкограмм осуществляли по стандартной методике Антонов В.Я., Блинов П.Н. и др, 1974, Кондрахин И.П. и др, 1985).

Исследования свободно-радикального окисления крови проводилось на емилгаминометре ХЛ - 03, с использованием при изучении образцов крови 5-1мино,2,3-дегидро1-4фталззидиона (люминола), как индуктора, усиливающего «ечение и соли двухвалентного железа при изучении образцов сыворотки рови (Фархутдинов Р.Р., Лиховских В.А., 1995).

Биометрическую обработку проводили по обычной методике Плохинский Н.А., 1969) с применением ПЭВМ в программе «Microsoft Excel

3. Результаты исследований

Поскольку все гомологичные иммуноглобулиновые препараты для каждого вида опытных животных были произведены нами собственными силами в 1абораторных условиях, необходимо было убедиться, что они соответствуют эпределенным существующим стандартам. В качестве эталона для сравнения 5ыл выбран коммерческий нормальный человеческий иммуноглобулин, произведенный ГП НПО «Иммунопрепарат», г. Уфа. Результаты исследований показали, что величины таких показателей произведенных препаратов как, общий белок, мономерные, агрегированные и фрагментированные компоненты и антикомплементарная доза (АКД), были практически аналогичны с таковыми у

человеческого иммуноглобулина.

3.1. Изучение токсичности, аллергенности препаратов комплексной переработки крови

Как показали результаты лабораторных, клинических исследований и производственных испытаний препараты технологии комплексной переработки крови малотоксичны и гипоаллергенны. «Иммунодез» хорошо переносится внутривенно телятами, .кроликами, морскими свинками, и не вызывает у данных животных снижение комплемента сыворотки крови (см. таб. 1.) (на телятах данный опыт не проводился).

Таблица 1.

Влияние внутривенного введения 10 %-ного иммуноглобулина, 5 %-ного ПВП и «Иммунодеза» на уровень комплемента сыворотки крови морских сви-

нок, кроликов.

№ Препараты Вид животных Кол-во ЖИВ - X Содержание комплемента (СН 50), гем. ед.

до введения после введения

1 Иммуноглобулин м.свинки 10 273,60 ± 22,00 202,70 ± 10,201

кролики 10 27,10 ± 1,35 13,40+1,101

2 . ПВП м.свинки • 10 260,20 ± 22,70 255,20 ± 7,40

кролики 10 27,10 ±1,35 27,45 ±1,45

3 Иммунодез м.свинки 20 269,50 ±31,00 264,05 ± 27,40

: ролики 20 27,10 ±3,60 27,00 ± 2,40

Примечание. 1 Разница между показателями достоверна (Р=0,999).

У собак существует видовая непереносимость ПВП - составляющего компонента «Иммунодеза». В результате чего у 60,00 % животных при внутривенном и у 5,30 % при внутримышечном введении препарата в дозе 1 мл/10 кг наблюдаются аллергические реакции. Их можно избежать, если использовать

*анное лекарственное средство интроназально, или внутримышечно, разводя iro в последнем случае физиологическими растворами или 0,5 %-ным ново-гаином в соотношении 1:1,

3.2. Изучение влияния исследуемых препаратов на меспецифические факторы защиты организма

На рис. 1. представлены результаты сравнительной оценки стимулирующего действия препаратов 10 %-ного иммуноглобулина, 5 %-ного ПВП и «Иммумодеза» на функциональную активность и кислородзависимый метаболизм нейтрофилов (in vitro), по которым видно, что «Иммунодез» оказывает более выраженное (Р=0,999) и длительное стимулирующее действие, чем остальные препараты.

—♦— Иммуноглобулин • ••»••■ПВП —а — Иммунодез

Время, мин

Рис. 1. Функциональная активность и кислородзависимый метаболизм нейтрофилов под воздействием изучаемых препаратов (in vitro) через 30 минут (1), 90 минут (2), 300 минут (3) и 1080 минут (4) после их добавления.

«Иммунодез» при парентеральном применении приводит к достаточно существенным изменениям в лейкограмме у животных. Так, на 5 день у здоровых собак наблюдалось увеличение в 2,50 раза доли палочкоядерных нейтрофилов (Р=0,95) и уменьшение на 40,00 % доли лимфоцитов (Р=0,95). У телят, больных бронхитом, после применения препарата уменьшилось содержа-

ние эозинофилов (Р=0,999) и возросла доля сегментоядерных нейтрофилов

(Р=0,95).

Хемилюминесцентные исследования крови телят, больных катаральным бронхитом, показали, что после внутривенного введения «Иммунодеза» не происходит достоверных изменений в динамике свободно-радикального окисления цельной крови и ее сыворотки.

3.3. Изучение влияния исследуемых препаратов на специфический гуморальный иммунитет

На рис. 2. представлены результаты исследований по влиянию 10 %-ного иммуноглобулина, 5 %-ного ПВП и «Иммунодеза» на антигенфиксирую-щую способность крови собак после внутримышечного введения препаратов.

Во всех трех тестах показатели средних 1_од2 титров к микроорганизмам у данных животных на 15-й день после введения «Иммунодеза» был статистически достоверно больше ^Р=0,999) таковых после введение 10 %ного иммуноглобулина, 5 %-ного ПВП и контроля.

с ф н £

Ё го

3 о. н

5

10 8 6

4

0 »

М

О Иммуноглобулин И ПВП

ШИммунодез □ Контроль

Виды микрофлоры

Рис. 2. Сравнительная характеристик?! антигенфиксирующей способности сыворотки крови собак на 15-й день после внутримышечного введения изучаемых препаратов к золотистому стафилококку (1), вульгарному протею (2) и си-

негнойной палочки (3).

и

3.4. Изучение влияния «Иммунодеза» на течение местного воспалительного

процесса

На рис. 3. показаны данные исследований влияния препаратов 10 %-ного иммуноглобулина, 5 %-ного ПВП и «Иммунодеза» на течение местного воспалительного процесса у морских свинок.

«Иммунодез» оказывает достоверно больший стимулирующий эффект (Р=0,9) на процессы репарации раны у данных животных, чем 10%-ный иммуноглобулин и 5 %-ный ПВП.

— Иммуноглобулин ни—ПВП

--а-- Иммунодез

Время, дни

Рис. 3. Степень ранозаживпения у морских свинок при лечении ран изучаемыми препаратами на 3 день (1), 0 день (2), 12 день (3) и 15 день (4).

3.5. Изучение влияния альбумин-этакридинсвого комплекса в составе мази на местный воспалительный процесс

В процессе производства иммуноичобулинов риванольным способом после осаждения альбумина получается плотный осадок, представляющий собой альбумин-этакридиновый комплекс. Он является отходом, идущим на у тилизацию.

Как один из путей решения проблемы рациональною использозаиия альбумин- эгакридиховгго комплекса нами предлагается производить на его основе лечебную мазь. \

В результате экспериментальной проверки терапевтической эффективности Мазей с различной долей действующего вещества была признана наиболее оптимальной концентрация альбумин-этакридинового комплекса в 9 -11%. '

Результаты изучения влияния альбумин-этакридиновой мази на заживление экспериментально смоделированных кожных инфицированных (0,5 млрд. клеток культуры золотистого стафилококка) ран у крыс представлены на рис. 4. В качестве аналога, с которым сравнивалась мазь, было выбрано лекарственное средство «Левомиколь». Альбумнн-зтакридиновая мазь оказала достоверно (Р=0,999) выраженн'ое стимулирующее действие на ранозаживление у данных животных, не уступая в этом официнальной мази «Левомиколь».

>—Альбумин-этакрцциновая мазь

• --Левомиколь

- Вазелин

' 1 6 4 Время, дни

Рис. А. Степень ранозаживления у крыс при лечении ран изучаемыми препаратами на 3 день (1), 9 день (2), 12 день (3) и 16 день (4).

Практически аналогичные показатели и динамика ранозаживления были у собак, которым для лечения инфицированных ран, использовались выше указанные препараты.

Альбумин-этакридиновая мазь обладает профилактическим действием к некоторым заболеваниям вымени коров.

Таким образом, иммуноглобулиноеый препарат «Иммунодез» оказывает стимулирующее действие на неспецифические и гуморальные факторы защи-

ты организма, и примененный парентерально, ускоряет процессы репарации ран.

Альбумин-этакридиновая мазь является высокоэффективным лечебным средством, обладающим противомикробным и стимулирующим ранозаживле-ние свойствами, и она не уступает по терапевтическому действию официналь-ным мазям, выпускаемым фармацевтической промышленностью.

Выводы.

1. Стимуляция защитных иммунных механизмов у животных при патологии «Иммунодезом», 10 %-ным раствором иммуноглобулина и 5 %-ным раствором поливинилпирролидона во многом обуславливается видовой принадлежностью, индивидуальной чувствительностью и способом введения, препарата.

2. Раствор иммуноглобулина сыворотки крови морских свинок, из которого изготовлялся препарат «Иммунодез», содержит в среднем 9,50. ± 0,35 % общего белка, при этом иммуноглобулиновая фракция включает 83,30 ± 1,40 % мономерных, 12,20 ± 0,75 % агрегированных и 4,50 ± 1,40 % фрагментиро-ванных компонентов, а антикомплементарная доза равна 0,09 ± 0,04 мг. Внутривенное введение морским свинкам «Иммунодеза» не приводит у них к снижению комплемента крови.

3. Раствор иммуноглобулина сыворотки крови кроликов, из которого производился препарат «Иммунодез», содержит в среднем 9,70 ± 0,4 % общего белка, при этом иммуноглобулиновая фракция состоит из 85,80 ± 0,75 % мономерных, 11,80 ± 1,00 % агрегированных и 2,30 ± 1,40 % фрагментирован-ных компонентов, антикомплементарная доза равна 0,07 ± 0,02 мг. Внутривенное введение кроликам «Иммунодеэа» не вызывает у них снижение комплемента крови.

4. В иммуноглобулине сыворотки крови собак, из которого изготовляли препарат «Иммунодез», содержится в среднем 9,60 ± 0,2 % общего белка, и иммуноглобулиновая фракция состоит из 81,60 ± 1,40 % мономерных, 12,50 ± 0,80 % агрегированных и 6,00 ±1,40 % фрагментированных компонентов, ан-

г

тикомг!лементарная доза равна 0,09 ± 0,04 мг. Внутривенное ведение собака» «Иммунодеза» вызывает у них отрицательные клинико-физиологические из менения в виде анафилактоидных реакций, которые не приводят к гибели, i быстро- Исчезают после применения соответствующей десенсибилизирующее терапии. Причиной данной реакции является видовая непереносимость поли винилпирролидона (составляющих компонентов препарата) собаками. Под кожные и внутримышечные инъекции «Иммунодеза» в рекомендуемых дози ровках собаками переносятся хорошо, не вызывая нежелательных клиниче ских и гематологических изменений. При этом отмечается на 5 день достовер ное увеличение доли палочкоядерных нейтрофилов на 153,00 % и уменьше ние доли лимфоцитов на 29,00 %. У 6,30 % собак, которым применяли внутримышечно «Иммунодез» отмечали аллергические реакции, выражающие клинически в виде беспокойства, брадикардии и тахипноэ, гиперемии, зуда ^ отека в области морды. Однако подобные реакции отсутствовали при введении препарата с 0,5 %-ным раствором новокаина или 5 %-ным раствором глюкозы, или 0,9 %-ного натрия хлорида в соотношении 1:1.

5. У собак «Иммунодез» стимулирует специфический гуморальный иммунитет, повышает антигенфиксирующую способность сыворотки крови к золотистому стафилококку в 13,30 раза по сравнению с контролем, к вульгарному протею в 25,30 раза и в 11,60 раз к синегнойной палочке, a in vitro усиливает кислородзависимый метаболизм нейтрофилов на 83,00 ± 4,00 % через 30 минут после внесения препарата в культуру данных клеток.

6; Внутривенное и внутримышечное введение телятам «Иммунодеза» не приводит у них к каким-либо отрицательным последствиям. После внутривенного введения препарата у больных катаральным бронхитом животных снизилось содержание эозинофилов и'достоверно возросла доля сегментоядерных нейтрофилов. При этом не было обнаружено достоверных изменений в динамике свободно-радикального окисления цельной крови и ее сыворотки.

7. При экспериментальных моделях местных воспалительных процессов отход производства иммуноглобулинов риванольным методом - альбумин-этакридиновый комплекс, в составе мази у крыс и собак ускоряет в 2 раза ра-нозаживление по сравнению с контролем и не уступает по своему терапевтическому действию официальному препарату «Левомиколь». «Иммунодез»,

введенный в организм парентерально статистически достоверно сокращает сроки регенерации ран у морских свинок по сравнению с 5 %-ным раствором поливинилпирролидона и 10 %-ным раствором иммуноглобулина.

Практические предложения

1; «Иммунодез» можно вводить внутривенно, внутримышечно и подкожно морским свинкам, кроликам и крупному рогатому, скоту в дозах, превышающих среднюю терапевтическую (1 мл/10 кг) в 2 - 5 раз. Наиболее желательным является внутривенный способ применения лекарственного средства, поскольку при этом отмечается самый максимальный терапевтический эффект.

2. У собак препарат во всех случаях- внутривенного введения вызывает анафилактоидные реакции в дозах выше средней терапевтической (1 мл/10 кг), поэтому данным животным «Иммунодез» вводить внутривенно нежелательно. Клинические испытания показали, что анафилактоидные реакции возникают также в 5,30 % случаев после внутримышечных инъекций в дозах равной средней терапевтической, поэтому, практически полностью исключить возможность патологических реакций организма необходимо непосредственно перед инъекцией разбавить препарат в пропорции 1:1 с раствором 0,5 %-ного новокаина или 5 %-ной глюкозы, или 0,9 %-ного натрия хлорида.

3. Отход производства иммуноглобулинов риванольным методом аль-бумин-этакридиновый комплекс можно использовать при производстве мазей в качестве основного действующего вещества. Наиболее оптимальным является следующий состав мази при соотношении компонентов, масс., %:

альбумин-этакридиновый комплеяс........................9 -11 ,

стабилизатор...........................................................4 - 5 ,

вазелин.................................................................остальное.

Мазь с вышеуказанным составом малотоксична и обладает хорошими антисептическими и стимулирующими ранозаживление свойствами. Она может использоваться в лечение поражений кожных и слизистых покровов животных различной этиологии и для профилактики заболеваний вымени у дойных коров.

4. Предложенная нами комплексная безотходная технология переработ-

, ки крови сельскохозяйственных животных и домашних плотоядных может быть

1 .

, использована для промышленного изготовления широкого ассортимента дешевых лекарственных средств для ветеринарии.

5. На практика следует использовать переносные модели хемилюмине-метров, и проводить исследования сразу после взятия крови в помещении, где содержатся животные. Этим -исключается неточность в получение данных свободно-радикального окислени^ крови, связанная с транспортировкой, охлаждением крови при перевозке в лабораторию, отстаиванием крови, перемешивании, повышенной температурой в лаборатории и т.д.

6. Научные положения, изложенные в диссертации и опубликованных работах, могут использоваться в учебном процессе в подготовке врачей или повышения их квалификации в соответствующих высших и средних учебных заведениях.

Слисок опубликованных работ по теме диссертации

1. Степаненко М.В. Стимуляция «Иммунодезом» специфических защитных свойств у собак I Проблемы агропромышленного комплекса на Южном Урале и Поволжье // Мат. научно-практической конф. молодых ученых и специалистов, 1997. - С. 119 -122. •

2. Степаненко М:В. -Хирургия. домашних 'Плотоядных ьвне стационара / Ветеринария, N22,1998. - С. 47 - 50.

Подписано к печати 29.11.98 г. Формат 60 х Û4/16. Объем 1 п л. Бумага писчая. Печать офсетная. Тираж 100 окз. Уфа, БГАУ. Заказ№ 185.