Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Сравнительное изучение лимфотропного действия димефосфона, мексидола и кеторолака

На правах рукописи

МУХУТДИНОВ ДАМИР АЛЬБЕРТОВИЧ

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ЛИМФОТРОПНОГО ДЕЙСТВИЯ ДИМЕФОСФОНА, МЕКСИДОЛА И КЕТОРОЛАКА

14.00.25 - ФАРМАКОЛОГИЯ, КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ

АВТОРЕФЕРАТ на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

ООЗ162824

Казань - 2007

003162824

Работа выполнена в ГОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет Росздрава»

Научный руководитель:

Доктор медицинских наук, профессор Хафизьянова Рофия Хафизьяновна

Официальные оппоненты: Доктор медицинских наук, профессор

Данилов Валерий Иванович

Доктор медицинских наук, профессор Кузин Владимир Борисович

Ведущее учреждение: ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет»

Защита диссертации состоится « 14 » ноября 2007 г. в час на заседании диссертационного Совета Д. 208 034.01 при ГОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет Росздрава» (4210012, г. Казань, ул. Бутлерова, д. 49)

С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке ГОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет Росздрава» (4210012, г. Казань, ул Бутлерова, д. 49, корпус Б)

Автореферат разослан ¿££££¿^2007 г,

Ученый секретарь диссертационного Совета

Р Р Нигматуллина

доктор биологических наук, профессор ^^

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Лимфатическая система, являясь одним из ключевых звеньев гомеостаза и гуморального транспорта, независимо от этиологии и патогенеза конкретного заболевания вовлекается во все патологические процессы (ММ Миннебаев и соавт., 1989; AB. Ефремов, АР. Антонов, ЮВ. Начаров, 2005; ЮИ. Бородин Ю. И., Асташов В В., 2006; D. Greitz, 2002, R Т Lee, 2003; С. Mouta, М. Heroult, 2003 S Kurbel, 2005). Структура, функции и метаболизм лимфатической системы являются мишенью для воздействия лекарственных препаратов, а результат их влияния рассматривается как лимфотропность (A.A. Зыков, 2002) В настоящее время внимание исследователей привлекают методы воздействия на лимфатическую систему, которые позволяют влиять на регуляторные и восстановительные процессы, как в самой системе, так и в других органах функциональных системах (ИВ., Ярема, И.А Мержвинский, В.К. Шишло, 1999; ГС Чилингиров, Л.И. Лескин, Л.И. Юновидова, 2000; Ю.И. Левин, 2001, 2006, М.С. Любарский, 2004; S. Petrov, 2003). Однако ни в фармакопеях, ни в справочниках лекарственных средств отдельно лимфотропные лекарственные препараты не выделяются В то же время, немаловажной проблемой является то, что лимфопротективное действие большинства лекарственных препаратов было выявлено уже после того, как они вошли в клиническую практику, поэтому этот эффект лекарственных средств не всегда учитывается и используется

В связи с этим, важной проблемой современной фармакологии является раскрытие механизмов действия и поиск лекарственных препаратов, корригирующих изменения в лимфатической системе и поддерживающих лимфатический ресетинг и лимфостат при различных заболеваниях (А В. Ефремов, А.Р. Антонов, Ю.В. Начаров, 2005). Выяснение механизмов лекарственной регуляции лимфатического дренажа тканей, насосной и емкостной функций лимфангионов позволят проводить целенаправленную фармакокоррекцию в клинике

Настоящая работа посвящена выяснению действия на лимфатическую систему лекарственных препаратов димефосфона, мексидола и кеторолака у интактных крыс и при моделировании экспериментальной лихорадки Ранее подобные исследования с

избранными для изучения лекарственными средствами не проводились

Цель работы - сравнительное исследование влияния димефосфона, мексидола, кеторолака на лимфообращение, микролимфоциркуляцию, цитологический состав и токсичность центральной лимфы интактных животных и при пирогеналовой лихорадке.

Задачи исследования:

1. Оценить влияние димефосфона, мексидола и кеторолака на температуру тела интактных крыс и на фоне лихорадочной реакции (ЛР)

2 Изучить воздействие препаратов на скорость лимфотока в грудном лимфатическом протоке (ГЛП) интактных крыс и при экспериментальной пирогеналовой лихорадке

3. Выявить характер изменений параметров

микролимфоциркуляции лимфатических микрососудов (JIM) брыжейки тонкой кишки крыс в норме и при лихорадке на фоне введения димефосфона, мексидола и кеторолака.

4 Определить влияние изучаемых препаратов на изменение количественного и качественного цитологического состава и токсичности центральной лимфы в норме и при лихорадке

5. Провести сравнительную оценку влияния димефосфона, месидола и кеторолака на лимфообращение, микролимфоциркуляцию, клеточный состав и токсичность лимфы ГЛП крыс при ЛР.

Научная новизна. Впервые доказано наличие лимфотропного компонента в реализации терапевтического эффекта димефосфона, мексидола и кеторолака, который в условиях патологии (при экспериментальной пирогеналовой лихорадке) более выражен, чем в норме. Он проявляется в интенсификации лимфообращения, активации деятельности компонентов лимфангиона ЛМ брыжейки тонкой кишки, усилении транспортной функции лимфатической системы по отношению к лейкоцитам и уменьшении токсичности центральной лимфы крыс.

Выявлено, что по продолжительности и интенсивности проявления лимфатического компонента исследуемые

лекарственные препараты можно расположить в следующем порядке: мексидол, димефосфон, кеторолак

Показано, что димефосфон у интактных животных усиливает функциональную активность лимфангиона, а мексидол и кеторолак - повышают лимфообразование.

Приоритетными являются данные, доказывающие, что на фоне JIP эти лекарственные препараты способствуют увеличению тока лимфы в ГЛП за счет активации сократительной деятельности миоцитов стенки и створок клапанов ЛМ брыжейки тонкой кишки

Теоретическая значимость и практическая ценность работы. Результаты исследования расширяют представления о фармакологических свойствах димефосфона, мексидола и кеторолака с учетом их воздействия на лимфатическое звено, что является вкладом в фармакотерапию заболеваний, сопровождающихся изменениями в деятельности лимфатической системы.

Итоги исследования могут быть использованы при проведении рациональной фармакотерапии лихорадочных состояний

Материалы диссертационной работы будут иметь прикладное значение для врачебной практики, так как обосновывают возможность и необходимость направленного лекарственного воздействия на функциональную активность лимфатической системы при патологии Димефосфон, мексидол и кеторолак могут рассматриваться как лимфостимулирующие лекарственные препараты.

Результаты исследований MoiyT быть использованы в научно-исследовательской работе и учебном процессе в преподавании базисной и клинической фармакологии.

Положения, выносимые на защиту:

1. Димефосфон, мексидол и кеторолак обладают лимфотропным действием, которое более выражено у крыс при ЛР, по сравнению с интактными животными. Он проявляется в повышении скорости лимфотока в ГЛП, активации микролимфоциркуляции, усилении транспортной функции лимфатической системы по отношению к лимфоцитам и уменьшении токсичности центральной лимфы.

2. Все изученные лекарственные препараты при лихорадке обладают прямым эффектом на лимфообращение, стимулируя сократительную активность стенки и створок клапанов ЛМ

3 По силе лимфотропной активности препараты располагаются в следующем порядке: мексидол, димефосфон, кеторолак.

Личный вклад автора. Научные положения и выводы диссертации базируются на результатах собственных экспериментальных исследований автора, выполненных на кафедре фармакологии Казанского государственного медицинского университета (номер госрегистрации 01.2 007 03479) Опыты по изучению микролимфоциркуляции проведены в лаборатории патологии микрогемолимфоциркуляции ГУ НИИ общей патологии и патофизиологии РАМН. Общий объем публикаций - 4,01 условных печатных листов, в том числе авторское участие - 3,40 условных печатных листов.

Апробация работы. Основные результаты исследования и положения диссертации доложены и обсуждены на следующих научных форумах: XI, XII межвузовской конференции молодых ученых «Актуальные проблемы патофизиологии» (Санкт-Петербург, 2004, 2005), I и II Всероссийской научной конференции «Микроциркуляция в клинической практике» (Москва, 2004, 2006); V и VI научно-практической конференции «Методы исследования регионарного кровообращения и микроциркуляции в клинике и в эксперименте» (Санкт-Петербург, 2005,2007), У1 и УП научно-практической конференции с международным участием «Санкт-Петербургские научные чтения» (Санкт-Петербург, 2004, 2005), XI международной конференции «Новые медицинские технологии и квантовая медицина» (Москва, 2005), межрегиональной научно-практической конференции «Типовые патологические процессы» (Уфа, 2005); Ш Международной конференции «Болезни цивилизации в аспекте учения В И.Вернадского» (Москва, 2005); XIII и Х1У Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2006, 2007)

Публикации результатов исследования. По материалам диссертации опубликовано 27 печатных работ, из них 5 -моноавторство и 22 - с соавторами (85%) 9 статей опубликовано в рецензируемых научных журналах, определенных Высшей аттестационной комиссией.

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 136 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, 2 глав, отражающих результаты собственных исследований, обсуждения,

выводов и указателя литературы, включающего 231 источников. 164 отечественных и 67 иностранных. Диссертация иллюстрирована 26 рисунками, цифровой материал представлен 15 таблицами.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты выполнены на 245 беспородных белых крысах обоего пола массой 180-220 г, из которых было сформировано пять серий У крыс первой серии (интактных) изучалось влияние лекарственных препаратов на динамику ректальной температуры, второй - влияние воды для инъекций на изучаемые показатели (1-я контрольная группа), третьей - влияние препаратов на микролимфоциркуляцию у контрольных животных (2-ая группа), четвертой - влияние пирогенала на изучаемые показатели, пятой -влияние препаратов на параметры микролимфоциркуляции на фоне экспериментальной лихорадки

В исследованиях использовали парентеральное введение терапевтических доз димефосфона (50 мг/ кг), фармакологические свойства которого изучены на кафедре фармакологии Казанского медицинского университета (И А. Студенцова, 1989, P.C. Гараев, 1990; Л.ЕЗиганшина и соавт., 1992; Р.Х. Хафизьянова, И А Студенцова, В. И. Данилов, 1993), мексидола (5 мг/кг) и кеторолака (0,5 мг/кг) интактным животным и через 30 мин после моделирования пирогеналовой лихорадки (100 мкг/кг) ЛР у крыс протекала классически - в три стадии. Интактных животных брали в эксперимент через 2-2,5 час после инъекции препарата, а опытных крыс - через 2-2,5 и 4-4,5 час от начала введения пирогена (соответственно в первую и третью стадии патологического процесса). Для наркоза использовали этаминал натрия (внутримышечно в дозе 50 мг/кг массы тела).

Лимфу для исследования получали путем прокола устья ГЛП крыс. Микролимфоциркуляция и сократительная активность стенки и клапанов ЛМ брыжейки тонкой кишки крыс изучалась в условиях витальной микроскопии с помощью телевизионного микроскопа. Подсчитывали частоту фазных сокращений миоцитов стенки и смыкания створок клапана за 1 мин (П.Н. Александров, В.К Хугаева, 1989). Определяли число лимфангионов с лимфотоком (%), количество лимфангионов, обладающих спонтанной сократительной активностью стенки (%), количество лимфангионов

с работающим клапаном (%), количество сосудов с одновременным функционированием клапанов и стенки лимфангиона (%), диаметр ЛМ (в мкм). Амплитуду сокращений стенки ЛМ в межклапанной части лимфангиона вычисляли в процентах к исходному диаметру по формуле (Е И. Галанжа, 2004):

max ~~ D шш

А= ----------------------X 100%, где

D шах

D тах и D mm - соответственно, максимальный и минимальный диаметр сосуда во время фазного сокращения

Подсчет общего числа лейкоцитов в центральной лимфе проводили в камере Горяева Процентное содержание отдельных видов лейкоцитов исследовали в мазках, окрашенных по методу Романовского-Гимза, а токсичность лимфы ГЛП определяли по лимфоцитраному индексу интоксикации (ЛфИИ) (В Ф. Стащук, В Я. Цудечкис, 1986) Этот параметр рассчитывается по формуле:

(4М + ЗЮ + 2П + С) (Пл+1)

ЛфИИ = 291--, где

( Лф + Мон ) • (Э + 1 )

в числителе — клетки «борьбы»' М - миелоциты, Ю - юные, П -палочкоядерные лейкоциты , С - сегментоядерные лейкоциты, Пл -плазматические клетки; в знаменателе — клетки «относительного благополучия»: Лф - лимфоциты, Мон - моноциты, Э -эозинофилы; 291 - коэффициент пересчета.

Экспериментальный материал подвергнут статистической обработке с помощью компьютерной программы «Statistica» версия 6 0 для Windows.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Влияние димефосфона, мексидола и кеторолака на температуру тела, лимфообращение, микролимфоциркуляцию, цитологический состав и токсичность лимфы ГЛП интактных

крыс. Введение интактным животным всех исследуемых лекарственных препаратов не сопровождалось изменением общего состояния и поведения двигательная активность и реакции на внешние раздражители сохранялись, состояние кожных покровов и

Таблица 1. Влияние димефосфона, мексидола и кеторолака на скорость лимфотока в грудном протоке и показатели микролимфоциркуляции лимфангиона лимфатических

Исследуемые параметры Контрольные животные Введение препа ратов

Димефос-фон Мексидол Кеторолак

Скорость лимфотока (в 10 2 мл/100 г в 1 с) 0,45±0,04 и=8 0,62* ±0,07 п=1 0,76** ±0,08 п=8 0,69* ±0,06 и=7

Частота сокращений стенки (мин) 8,10±1,03 w=10 12,10* ±1,56 и=7 8,43 ±1,67 и=7 7,78 ±1,27 ir=8

Частота сокращений створок клапанов (мин) 5,70±0,76 «=6 8,50* ±0,72 п=7 6,17 ±0,81 я=7 6,12 ±0,84 я=7

Диаметр лимфатического микрососуда (мкм) 138±4 №=10 147±3 п=1 144±7 и=7 135±8 и=8

Амплитуда сокращений стенки (%) 23,5±6,4 п=10 25,2±5,3 п=1 24,1±6,7 п=1 24,8±4,9 п=8

Примечание: * р<0,01; ** р<0,001; п - количество животных

шерсти не изменялись. Показатели ректальной температуры на фоне применения лекарственных препаратов не отличались от таковых у здоровых крыс

Введение крысам димефосфона в дозе 50 мг/кг массы тела (табл. 1) способствовало увеличению скорости тока лимфы в ГЛП на 38% (р<0,05), а частоты спонтанных вазомоций стенки и створок клапанов JIM брыжейки тонкой кишки на 49% (р<0,01), что свидетельствует о прямом влиянии препарата на лимфоциркуляцию Амплитуда сокращений и диаметр JIM оставались без изменений. В частоте встречаемости различных типов функциональной активности лимфангионов JIM по

сравнению с контрольными животными достоверных сдвигов не наблюдалось (табл. 2)

Мексидол в дозе 5 мг/кг массы тела вызывал повышение центрального лимфотока на 69% (р<0,001). Количество JIM с функционированием миоцитов стенки на фоне введения лекарственного препарата возрастало на 35% (р<0,01).

Кеторолак в дозе 0,5 мг/кг массы тела крыс ускорял лимфоток на 53% (р<0,01), а так же приводил к значимому увеличению количества JIM, в которых одновременно функционировали стенка и клапаны на 23 % (р<0,05)

Мексидол и кеторолак не меняли сократительную активность стенки и створок клапанов лимфангиона JIM, диаметр и амплитуду сокращений стенки, что, по данным литературы (В К. Хугаева, 1993, A.K.Chan et al., 2004), свидетельствует о косвенном их влиянии на лимфообращение, обусловленном увеличением площади функционирующих капилляров, повышением коллоидно-осмотического давления в терминалях лимфатической системы, а также усилением фильтрационной способности JIM, и способствует усилению процессов лимфообразования Подобное действие препаратов может приводить к быстрому заполнению

лимфатического русла новыми порциями лимфы и усиливать механическое давление на стенку JIM Сосуды растягиваются, и это, в дальнейшем, вызывает активацию их моторики (Р А Гареев, 1989; А.А Гашев и соавт, 1996, В.М Петренко, 2007; М Jeltsch М, 2003, R.T. Lee, 2003, М J. Davis, 2006)

Ни один из исследуемых нами лекарственных препаратов значимо не влиял на динамику числа лимфангионов, в которых регистрировался лимфоток, клеточный состав и токсичность лимфы ГЛП

Динамика параметров микролимфоциркуляции, скорости лимфотока в ГЛП, клеточного состава и токсичности центральной лимфы крыс при пирогеналовой лихорадке.

Итоги исследования показали (рис 1 и 2), что введение крысам пирогенала в дозе 100 мкг/кг массы тела сопровождалось учащением спонтанных вазомоций и смыкания створок клапанов, по сравнению со здоровыми животными На стадии подъема температуры тела частота смыкания створок клапанов JIM крыс возрастала на 95% (р<0,001), а стенки - на 52% (р<0,01). Причем, периоды частых сокращений с высокой амплитудой чередовались

Таблица 2 Влияние димефосфона, мексидола и кеторолака на частоту встречаемости (%) различных типов функциональной активности лимфангионов JIM брыжейки тонкой кишки крыс интактных животных и при лихорадочной реакции

Тип функционирования ЛМ Интак-ные животные л=10 Введение препаратов интактным жив Пирогенал Пиро] димес ",енал+ )осфон Пирогенал+ мексидол Пирогенал+ кеторолак

Диме-фос-фон п=1 Мек-сидол п=1 Кето-ролак и=8 2-2,5 час п=9 4-4,5 час п=9 2-2,5 час п-9 4-4,5 час п=8 2-2,5 час п=8 4-4,5 час я=8 2-2,5 час и=8 4-4,5 час п-%

Отсутствие сокращений 47 32 13** 24* 13** 15* 9 6 1* з* 2* 4*

Сокращение стенки 26 39 61** 25 33 33 15* 27 31 39 40 45*

Сокращение клапанов 5 5 5 6 2 3 4 3 4 6 5* 5

Сокращение стенки и клапана 22 24 21 45* 52* 49* 72* 64 64* 52 53 46

Примечание: * р<0,05, ** р<0,01, п - количество животных

фазами отсутствия вазомоций и сокращениями малой амплитуды. Наибольших значений исследуемые параметры достигали на стадии падения температуры тела- частота сокращений миоцитов стенки возрастала в 2 (р<0,001), а клапанов - в 2,4 (р<0,001) раза соответственно. У части животных регистрировались групповые («пачечные») сокращения стенок числом от 3-5 до 10-12 в «группе», за которыми следовали фазы покоя. Амплитуда возомоций возрастала на 50% (р<0,01) и 72% (р<0,001) (рис 3), диаметр лимфангионов уменьшался на 19% (р<0,05) и 17% (р<0,05), а степень увеличения скорости тока лимфы составила 67% (р<0,001) и 84 % (р<0,001) (рис. 4) по сравнению со здоровыми животными, в первую и третью стадии JIP соответственно. В некоторых JIM имелось скопление форменных элементов крови в их просвете и в «карманах» клапанов, лимфа содержала большое количество эритроцитов. Наблюдались

перилимфатические кровоизлияния и экстравазаты, что свидетельствовало о повышении сосудистой проницаемости При анализе различных вариантов функционирования JIM установлено, что в первую стадию лихорадки количество сосудов с одновременным функционированием компонентов лимфангиона возрастало на 30% (р<0,01), а в третью - на 27% (р<0,05). На стадии подъема температуры тела наблюдалось снижение числа лейкоцитов на 27% (р<0,05), процента зрелых лимфоцитов и увеличение содержания малодифференцированных форм (бластов, больших лимфоцитов и пролимфоцитов), которое на стадии снижения температуры сменялось повышением содержания лейкоцитов на 23% (р<0,05) (табл. 3). В течение всего периода наблюдения значимо возрастало процентное содержание эозинофилов. Токсичность лимфы ГЛП в первую стадию ЛР повысилась на 34% (р<0,05), а через 4-4,5 час - на 25% (р<0,05) соответственно

Влияние однократного парентерального введения димефосфона в дозе 50 мг/кг массы тела на лимфообращение, микролимфоциркуляцию, клеточный состав и токсичность лимфы ГЛП крыс при лихорадке. Димефосфон при лихорадке на стадии подъема температуры тела ускорял лимфоток вдвое (р<0,001) (рис 4), сократительная активность стенки ЛМ увеличилась в 2,6 (р<0,001), а клапанов-в 2 (р<0,001) раза по сравнению с контрольными животными (рис 1 и 2). На 20%

■ Пирогенал

В Пирогенал +Димефос фон Ш Пирогенал +Мексидол

и Пирогенал +Кеторолак

2,0-2,5 ч 4,0-4,5 ч

час

Рис. 1. Влияние димефосфона, мексидола и кеторолака на частоту вазомоций JIM брыжейки тонкой кишки крыс при лихорадке. Примечание: по оси абсцисс - частота сокращений в мин, по оси ординат - сроки исследования; * р<0,001; **р<0,01 по сравнению с животными второй серии; +р<0,001; ,+р<0,01 по сравнению с животными четвертой серии.

(р<0,05) увеличилось количество сосудов, в которых одновременно функционировали стенка и клапаны за счет уменьшения числа JIM, в которых сокращалась только стенка (табл. 2). Через 4-4,5 ч от начала JIP частота сокращений стенок JIM оставалась увеличенной на 54% (р<0,01), хотя лимфоток достоверно не отличался от такового у крыс, не получавших лекарственный препарат. Сократительная активность створок клапанов JIM животных в третью стадию патологического процесса также не изменялась. На всех сроках эксперимента димефосфон способствовал возрастанию амплитуды вазомоций: на 75% (р<0,001) и на 36% (р<0,01) соответственно в первую и третью стадии JIP. В то же время, диаметр JIM не претерпевал изменений. Мы полагаем, что повышение сократительной активности гладкомышечных клеток стенки и створок клапанов JIM при JIP, связано со способностью препарата активировать окислительный синтез АТФ в митохондриях (Анчикова Л. И., И. X. Валеева, 1999). Кроме того,

лимфопротективное действие димефосфона, вероятно, проявляется и вследствие его кальциймодулирующего эффекта (В.Н Цибулькина, 1999), поскольку внеклеточный кальций является основным источником для фазных сокращений JIM (Р.С Орлов и соавт, 1983; Г И. Лобов и соавт, 2006, А. А Gashev, 2002) Вместе с тем, по-видимому, сказывается и антиоксидантный эффект димефосфона, обусловленный снижением активности

фосфолипазы А2 в тканях (Л Е.Зиганшина и соавт., 1992; А У.Зиганшин и соавт., 1992).

При ЛР независимо от сроков исследования препарат способствовал увеличению содержания лейкоцитов, транспортируемых с лимфой в общую циркуляцию на стадии повышения температуры на 21% (р<0,05) и 33% (р<0,01) - на стадии спада температуры тела (табл 3). Причем, в первую стадию процесса возрастал процент циркулирующих в лимфе зрелых (малых и средних) лимфоцитов. Димефосфон снижал токсичность лимфы, в первую стадию JIP - на 23% (р<0,05), а в третью - на 27% (р<0,05) соответственно. В то же время, препарат в этой дозе не оказывал влияния на степень повышения температуры тела животных.

Влияние однократного парентерального введения мексидола в дозе 5 мг/кг массы тела на параметры функционирования компонентов лимфангиона ЛМ, скорость тока, цитологический состав и токсичность центральной лимфы крыс при пирогеналовой лихорадке. Мексидол не влиял на течение лихорадки у животных. При ЛР введение препарата крысам способствовало возрастанию на стадии подъема температуры тела, лимфотока - в 2,4 (р<0,001) (рис 4), сократительной активности миоцитов стенки JIM-в 2,9 (р<0,001), створок клапанов-в 2,5 (р<0,001) раза, амплитуды вазомоций - на 82% (р<0,001) (рис 3), на 12% (р<0,05) увеличилось количество сосудов с одновременным функционированием компонентов лимфангиона по сравнению с животными, которым не вводили мексидол. Причем, у большинства JIM отмечалось почти полное закрытие их просвета (рис. 5). При введении мексидола у крыс через через 44,5 час от начала введения пирогенала, число спонтанных вазомоций стенки возрастало на 85% (р<0,001), клапанов - на 77% (р<0,001),скорость тока лимфы из ГЛП - на 72 % (р<0,001), а амплитуда сокращений стенки ЛМ-в полтора раза(р<0,01). На

■ Пирогенал

в Пирогенал +Димефос фон Ш Пирогенал +Мексидол

0 Пирогенал +Кеторолак

2,0-2,5 ч

4,0-4,5 ч

Рис. 2. Влияние димефосфона, мексидола и кеторолака на частоту сокращений сворок клапанов JIM брыжейки тонкой кишки крыс при лихорадке. Примечание то же, что на рис. 1

всех сроках исследования при применении препарата на фоне JIP сокращения стенки и клапанов становились синхронными, исчезали групповые вазомоции, практически не

регистрировались JIM с отсутствием сокращений компонентов лимфангиона. Лимфа в просвете сосудов становилась прозрачной.

Количество лейкоцитов, транспортируемых с током лимфы в общую циркуляцию, при лихорадке у крыс на фоне инъекции мексидола значимо не изменялось как в первую, так и в третью стадию патологического процесса. Однако на стадии подъема температуры тела в лимфе ГЛП повышался процент зрелых, а в третью - больших лимфоцитов. Кроме того, на стадии подъема температуры тела в этой группе животных вдвое (р<0,01) увеличился транспорт с лимфой эозинофилов. Мексидол снижал токсичность лимфы ГЛП: через 2-2,5 час после моделирования лихорадки - на 41 % р<0,01 ), на стадии спада температуры тела - на 32 % (р<0,05) (табл. 3).

Установлено, что выполнение лимфангионами функции по продвижению лимфы возможно только при условии полной релаксации их миоцитов (Р.П. Борисова, 1992; C.B. Петров с соавт.,

I Пирогенал

а Г1ирогенал+ Димефосф он

Ш Пирогенал+ Мексидол

И Пирогенал+ Кеторолак

2,0-2,5 ч

4,0-4,5 ч

Рис. 3. Влияние димефосфона, мексидола и кеторолака амплитуду сокращений стенки JIM брыжейки тонкой кишки крыс при лихорадке. Примечание: по оси абсцисс - амплитуда вазомоций в %, по оси ординат - сроки исследования; * р<0,001; **р<0,01 по сравнению с животными второй серии; +р<0,001; ++р<0,01; г 'р<0,05 по сравнению с животными четвертой серии.

2002; Г.И. Лобов и соавт., 2006; D. F. Van Yelden, J. Zhao, 2000; A.A. Gashev, 2002; D.C. Zawieja, 2005; B. Whitehurst, 2006). Следовательно, лимфотропный эффект мексидола при ЛР, по-видимому, связан с его способностью активировать аргининзависимый путь синтеза вазодилятирующего фактора оксида азота (NO) в клетках эндотелия сосудов с участием индуцируемой NO-синтетазы (О.Л. Белая, Л.М. Байдер, З.В. Куроптева, 2006). Вместе с тем, являясь антигипоксантом и мембраномодулятором (Л.Д. Лукьянова, 1999), лекарственный препарат, вероятно, может изменять микроокружение мембранных рецепторов, расположенных на клеточной поверхности. В результате диффузного распределения антиоксиданта в клетке происходит его воздействие на мембранные структуры, приводящие к ингибированию процессов ПОЛ и замедлению выхода его метаболитов в межклеточное пространство. С другой

щмШШШ

£ 1,4 о

t 1.2

- • у

'ч ..:■•.,'; V: *

—;—-—- ж у.

^-.л.';-^ ■■ -у.-=■

-»»¡Ж ■

Норма

2,0-2,5 ч

час

4,0-4,5 ч

Пироге нал

_ Пирогенал

+Димефос

фон

- -А- Пирогенал

+Мексидол

- - - Пирогенал

+Кеторолак

Рис. 4 Влияние димефосфона, мексидола и кеторолака на скорость лимфотока в ГЛП крыс при лихорадке. Примечание: по оси абсцисс - скорость лимфотока в 10 2 мл /100 г в 1 с, по оси ординат - сроки исследования; * р<0,001 по сравнению с животными второй серии; 'р<0,001; ++р<0,01 по сравнению с животными четвертой серии.

стороны, сукцинат, входящий в состав мексидола, участвует в регуляции кальциевого обмена, что сопровождается повышением уровня Са2+-АТФ -азы (Левитина. 2002). Не исключается, что при лихорадке проявляется способность мексидола ингибировать свободнорадикальные стадии синтеза простагландинов, катализируемые циклоксигеназой, и снижать активность фосфолипазы А2 (А.П. Власов и соавт., 2003; Т.А. Воронина и соавт., 2006; Т.А. Мепп& 2003).

Мы предполагаем, что увеличение числа транспортируемых с током лимфы лейкоцитов на фоне применения димефосфона и мексидола при ЛР возрастает не только за счет ускорения лимфотока, но и благодаря усилению лимфопоэза и вымыванию лимфоцитов из лимфоузлов. Снижение же токсичности центральной лимфы свидетельствует о способности препаратов

Таблица 3. Влияние димефосфона, мексидола и кеторолака на цитологический состав и токсичность лимфы ГЛП крыс при лихорадочной реакции (М±т)___

Исследуемые показатели Интакт Живот п=8 Пирогенал Пирогенал+ димефосфон Пирогенал+ мексидол Пиро кето генал+ ролак

2-2,5 ч п=8 4-4,5 ч и=8 2-2,5 ч п=9 4-4,5 ч п=9 2-2,5 ч п=7 4-4,5 ч п=6 2-2,5 ч и=8 4-4,5 ч п=П

Содержание лейкоцитов (в мкл) 13716 ±723 10080** ±426 16881** ±492 12195+++ ±496 22455++ ±641 11793 ±451 19413 ±597 10466 ±429 17,569 ±683

Малые и средние лимф (%) 95,71 ±1,69 84,99* ±1,13 97,17 ±1,96 96,08++ ±3,08 96,98 ±2,51 94,15+ ±2,31 95,33 ±2,73 85,22 ±2,74 97,12 ±2,39

Большие лимф (%) 3,06±0,22 7,80±0,44* 1,02±0,11* 2,89±0,19+ 1,20±0,16 3,22±0,23+ 2,78±0,16+ 7,69±0,63 1,10±0,09

Пролимф (%) 0,51±0,10 4,09±0,33* 0,39±0,12** 0,48±0,12+ 0,43±0,13 0,47±0,14+ 0,35±0,10 4,15±0,29 0,45±0,10

Властные формы (%) 0Д1±0,03 2,11±0,18* 0,12±0,05 0,13±0,04+ 0,15±0,03 0,15±0,03+ 0,13±0,03 1,99±0,13 0,10±0,04

Эозинофилы (%) 0,62 ±0,18 1,00** ±0,11 1,30* ±0,19 0,43+ ±0,15 1,35 ±0,18 2,00^ ±0,14 1,43 ±0,22 0,94 ±0,13 1,21 ±0,11

Токсичность (уел ед) 1,54 ±0,22 2,07*** ±0,15 1,92*** ±0,18 1,59+"н~ ±0,19 1,41+++ ±0,21 123*+ ±0,19 1,31^ ±0,22 2,17 ±0,36 1,79 ±0,28

Примечание- * р<0,001; ** р<0,01, *** р<0,05 по сравнению с животными второй серии, +р<0,001; ++ р<0,01,+++ р<0,05 по сравнению с животными четвертой серии, п ~ количество животных

Б

Рис. 5. Биомикроскопия сокращений стенки ЛМ брыжейки тонкой кишки крысы через 2-2,5 час от начала моделирования лихорадки при введении мексидола: А - стенка в состоянии сокращения. Просвет сосуда почти не определяется, Б - стенка в состоянии релаксации. Об. х10, ок. х12,5.

повышать барьерно-фильтрационную и дренажно-детоксикационную функции лимфатических узлов при этом патологическом процессе, то есть обеспечивать поддержание адекватной лимфоаттракции, а, следовательно, и лимфатического ресетинга.

Влияние однократной парентеральной инъекции кеторолака в дозе 0,5 мг/кг массы тела на лимфообращение, деятельность компонентов лимфангиона JIM, клеточный состав и токсичность лимфы ГЛП крыс при лихорадке. При введении кеторолака на фоне лихорадки объем вытекающей из ГЛП лимфы возрастал на 44 % (р<0,01) (рис. 4), частота сокращений миоцитов стенки ЛМ - на 76 % (р<0,001), створок клапанов - на 61 % (р<0,001) (рис. 1 и 2), амплитуда вазомоций - на 64% (р<0,001) (рис. 3), уменьшалось количество нефункционирующих ЛМ и возрастало число сосудов с действующим клапаном (табл. 2) Регистрируемый эффект кеторолака может быть обусловлен торможением синтеза простагландина Е2, который, как известно, является медиатором ЛР (В.Н. Гурин, 1993, С.М. Blatteis et al., 2003, 2005; CA Dinarello, 2004, CD. Bradford et al., 2007) и ингибитором фазной активности лимфангионов (С А. Hanley et al, 1989). Кроме того, имеются данные о том, что адекватная циркуляция крови в капиллярах, окружающих брыжеечные ЛМ -необходимое условие поддержания сократительной активности их миоцитов (P.C. Орлов и соавт, 1983; DC. Zawieja, 2005). Следовательно, улучшая микрогемоциркуляцию (Лебедева Р Н., НикодаВ.В., 1998, Назаров H.A., Мишунин Ю.В., Никифоров А.В , Крымов СВ., 2001; Нимаев В.В., Ракитин А А., 2001), при лихорадке препарат поддерживает функциональную активность лимфангионов ЛМ Через 4-4,5 час после воздействия пирогена амплитуда вазомоций возрастала на 69% (р<0,001) и на 12% (р<0,05) увеличилось количество сосудов с функционированием стенок.

Кеторолак при ЛР не влиял на клеточный состав и токсичность центральной лимфы. Препарат оказывал значимый антипиретический эффект При его введении подъем ректальной температуры через 60 мин от начала инъекции пирогена составил лишь 0,4±0,03°С (р<0,05). На всех других сроках регистрации температура тела не отличалась от таковой у контрольных крыс.

Таким образом, на основании результатов исследований можно заключить, что, несмотря на некоторые различия в лимфотропном эффекте у интактных крыс, димефосфон, мексидол и кеторолак активируют лимфоциркуляцию При JIP все препараты, обладая лимфотропным эффектом, оказывают протективное действие на лимфообращение, стимулируют сократительную активность миоцитов стенки и створок клапанов JIM, с одной стороны, и регулируют лимфообразование - с другой, что, в целом, улучшает резорбционную и транспортную функции лимфатической системы Лимфатический компонент у мексидола более выражен как по силе, так и по длительности, по сравнению с другими исследованными лекарственными препаратами.

ВЫВОДЫ

1. Димефосфон усиливает сократительную деятельность компонентов лимфангиона брыжейки тонкой кишки и ускоряет лимфоток в грудном лимфатическом протоке интактных крыс

2 Мексидол и кеторолак повышают скорость тока лимфы в грудном лимфатическом протоке интактных крыс, не влияя на функционирование стенки и клапанов лимфатических микрососудов.

3. Димефосфон и мексидол при лихорадке у крыс, в отличие от кеторолажа, не оказывают антипиретического эффекта.

4. Лимфотропное действие димефосфона и мексидола при лихорадке реализуется- активацией сократительной деятельности миоцитов стенки и створок клапанов лимфатических микрососудов, повышением амплитуды вазомоций,

- ускорением транспорта лейкоцитов в общую циркуляцию,

- снижением степени токсичности центральной лимфы.

5 Кеторолак проявляет лимфотропный эффект при лихорадке у крыс только на стадии подъема температуры тела- усиливает функционирование компонентов лимфангиона, увеличивает амплитуду вазомоций и скорость тока центральной лимфы.

6 Димефосфон, мексидол и кеторолак у интактных крыс и на фоне лихорадки проявляют лимфотропное действие По силе действия препараты располагаются в следующем порядке мексидол, димефосфон, кеторолак.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1 Лекарственные препараты. димефосфон, мексидол и кеторолак могут быть использованы в качестве лимфостимули-рующих средств при коррекции заболеваний, сопровождающихся нарушением лимфоциркуляции

2 На этапе доклинических исследований новых лекарственных препаратов рекомендуется изучать их влияние на функции лимфатической системы.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Мухутдинов Д А Влияние димефосфона на лимфообращение при лихорадочной реакции / Д. А Мухутдинов // Сборник трудов VI научно-практической конференции с международным участием «Санкт-Петербургские научные чтения». - 2004. - С. 154155.

2. Хафизьянова Р. X. Димефосфон стимулирует микролимфо-циркуляцию при лихорадочной реакции / Р X Хафизьянова, Д. А Мухутдинов // «Ангиология и сосудистая хирургия»- Труды Всероссийской научной конференции «Микроциркуляция в клинической практике » - 2004 - Т. 10, № 3 - С 51

3. Хафизьянова Р. X Влияние мексидола на микролимфо-циркуляцию при лихорадочной реакции / Р X. Хафизьянова, Д. А Мухутдинов // Регионарное кровообращение и микроциркуляция Труды V научно-практической конференции «Методы исследования регионарного кровообращения и микроциркуляции в клинике». - СПб, 2005. - С 142-144.

4. Хафизьянова Р. X. Мексидол способствует интенсификации лимфообращения при лихорадочной реакции / Р. X. Хафизьянова, Д. А. Мухутдинов // Сборник трудов XI международной конференции «Новые медицинские технологии и квантовая медицина» - М , 2005 - С 206.

5 Мухутдинов Д. А Влияние димефосфона на клеточный состав лимфы при лихорадочной реакции / Д. А Мухутдинов // «Вестник Российского государственного медицинского университета». Труды Пироговской студенческой научной конференции. - М., 2005.-С. 182.

6 Мухутдинов Д А Сранительное влияние димефосфона и диклофенака натрия на лимфообращение при лихорадочной

реакции / ДА. Мухутдинов, Д. Р. Тагирова // «Актуальные проблемы патофизиологии». Материалы X конференции молодых ученых. - СПб., 2005 - С. 57-59

7 Мухутдинов Д А. Влияние мексидола на клеточный состав лимфы при лихорадочной реакции / Д. А Мухутдинов // Труды X Всероссийской научно-практической конференции «Молодые ученые в медицине», посвященной 1000-летию г Казани - Казань, 2005.-С. 205.

8 Хафизьянова Р. X Влияние димефосфона на динамику лимфообращения, микролимфоциркуляции, сократительную активность стенки и створок клапанов лимфатических микрососудов и цитологический состав лимфы при лихорадочной реакции / Р. X. Хафизьянова, Д А. Мухутдинов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2005. - № 6. - С. 647650.

9. Хафизьянова Р. X. Модификация кеторолаком трометами-ном лимфообращения, сократительной активности компонентов лимфангиона лимфатических микрососудов, клеточного состава и токсичности лимфы при лихорадочной реакции / Р X Хафизьянова, Г. Н Алеева, Д А. Мухутдинов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2005 - № 10. - С. 394-398

10 Хафизьянова Р. X. Лимфотропное действие мексидола при лихорадочной реакции / Р X Хафизьянова, Д А Мухутдинов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины - 2005 - № 10.-С. 433-435

11. Мухутдинов Д А. Особенности моделирования лихорадочной реакции у крыс введением пирогенала /ДА Мухутдинов, Р X Хафизьянова // Здравоохранение Башкортостана - 2005 - № 7 (специальный выпуск)- Труды межрегиональной научно-практической конференции «Типовые патологические процессы» -С.155-157.

12. Хафизьянова Р X. Лифообращение при лихорадочной реакции на фоне введения кеторолака трометамина / Р X. Хафизьянова, Д. А. Мухутдинов // Здравоохранение Башкортостана - 2005 - № 7 (специальный выпуск) Труды межрегиональной научно-практической конференции «Типовые патологические процессы». -С. 206-207

13. Мухутдинов Д. А. Сравнительное влияние димефосфона и диклофенака натрия на сократительную активность стенки и створок клапанов лимфатических микрососудов при лихорадочной реакции / Д. А. Мухутдинов, Р X. Хафизьянова, Д. Р Тагирова // Сборник трудов III Международной конференции «Болезни цивилизации в аспекте учения В И. Вернадского». - М., 2005 - С. 254-256

14. Мухутдинов Д. А. Мексидол и димефосфон влияние на лимфообращение при лихорадочной реакции / Д. А. Мухутдинов // Сборник трудов Международного молодежного медицинского конгресса «Санкт-Петербургские научные чтения». - СПб., 2005 -С. 155.

15. Хафизьянова Р. X Лимфатическая система как мишень воздействия лекарственных средств / Р X Хафизьянова, Д. А Мухутдинов // Нижегородский медицинский журнал - 2006 - № 2 - С. 92-99

16 Хафизьянова Р. X. Фармакологическая регуляция функций лимфатической системы / Р. X Хафизьянова, Д. А Мухутдинов // Нижегородский медицинский журнал -2006. -№ 4. -С 74-81

17. Мухутдинов Д. А Сократительная активность лимфагиона при экспериментальной лихорадке у крыс на фоне применения кеторолака / Д. А. Мухутдинов, Р. X Хафизьянова // Сборник трудов XIII Российского национального конгресса «Человек и лекарство» - М , 2006. - С. 223

18 Мухутдинов Д А Сравнительная оценка мексидола и димефосфона при лихорадочной реакции- влияние: на сократительную активность компонентов лимфангиона / ДА. Мухутдинов, Р X. Хафизьянова // «Ангиология и сосудистая хирургия»: Труды II Всероссийской научной конференции с международным участием «Микроциркуляция в клинической практике». - 2006 - С. 91.

19. Мухутдинов Д А. Цитологический состав центральной лимфы при экспериментальной пирогеналовой лихорадке на фоне применения димефосфона и мексидола / Д. А. Мухутдинов // «Актуальные проблемы патофизиологии-2006»: материалы XII межвузовской конференции молодых ученых. - СПб , 2006 - С 7880.

20. Мухутдинов Д А. Лимфотропный компонент в механизме действия димефосфона, мексидола и кеторолака / Д. А

Мухутдинов, Р. X. Хафизьянова // «Проблемы экспериментальной, клинической и профилактической лимфологии». материалы I Сибирского съезда лимфологов - Новосибирск, 2006 - С 218-221

21 Мухутдинов Д. А. Сравнительная оценка лимфотропного действия диклофенака натрия и кеторолака при лихорадочной реакции /ДА Мухутдинов, Р. X. Хафизьянова // Нижегородский медицинский журнал. -2006. -№ 3 -С 99-102.

22. Мухутдинов Д. А Состояние микролимфоциркуляции при воздействии лекарственных препаратов на фоне лихорадочной реакции / Д. А Мухутдинов, Р. X Хафизьянова, Д Р Тагирова // Регионарное кровообращение и микроциркуляция - 2006 - Т 5, № 2. - С. 82-89.

23. Мухутдинов Д А Оценка эффективности влияния димефос-фона и кеторолака на микролимфоциркуляцию при лихорадочной реакции / ДА. Мухутдинов, Р X. Хафизьянова // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. - 2007. - Т 6, № Г Материалы 6-ой научно-практической конференции «Методы исследования регионарного кровообращения и микроциркуляции в клинике и в эксперименте» - С. 167-169

24. Хафизьянова Р. X Фармакологические свойства, механизмы действия и аспекты практического использования мексидола в клинике / Р X Хафизьянова, Д. А. Мухутдинов, Г. Н Алеева // Нижегородский медицинский журнал - 2006, спец выпуск № 2. -С 162-174.

25. Хафизьянова Р X Лимфотропное действие димефосфона, мексидола и кеторолака реализуется посредством активации деятельности лимфангиона и усиления лимфообразования / Р. X Хафизьянова, Г. Н Алеева, Д А Мухутдинов // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины - 2007. - Т 143, № 4. -С 423-426

26. Мухутдинов Д. А. Лимфоток и микролимфоциркуляция при введении мексидола /ДА Мухутдинов, Р. X Хафизьянова, Г Н. Алеева // Материалы XIV Российского национального конгресса «Человек и лекарство». - М., 2007. - С. 412

27. Мухутдинов Д А Димефосфон и мексидол при лихорадке активируют транспорт лейкоцитов с лимфой в общую циркуляцию /ДА. Мухутдинов, Р. X Хафизьянова // Материалы XIV Российского национального конгресса «Человек и лекарство». - М., 2007 -С 568-569

Подписано в печать 08 10 2007 Формат 60x84 1/16 Тираж 100 экз Бумага офсетная Объем 1,0 п л Заказ № 10/297 Печать ризографическая

Отпечатано с готового оригинал-макета в ООО "КУРАТОР" Казань, ул. Сибирский тракт, 34, корп 10. Тел. 513-00-88

Актуальность проблемы.

Лимфатическая система, являясь одним из ключевых звеньев гомеостаза и гуморального транспорта, независимо от этиологии и патогенеза конкретного заболевания вовлекается во все патологические процессы. Причем сдвиги в лимфатической системе и нарушения ее функций предопределяют исход процесса. Следовательно, лекарственная коррекция нарушенных функций в этой системе является обязательным условием патогенетической терапии [23, 57, 107, 170, 192, 200, 202, 211, 213]. В настоящее время внимание исследователей привлекают методы воздействия на лимфатическую систему, в основе которых лежат способы ее лекарственного насыщения [2, 16, 25, 26, 37, 45, 48, 52, 63, 74, 79, 215].

Структурные образования лимфатической системы способны реагировать на воздействие лекарств. Через них имеется возможность влиять на регуляторные и восстановительные процессы, как в самой лимфатической системе, так и в других органах и системах [88, 98, 158, 164, 192, 215, 228]. Однако, ни в фармакопеях, ни в справочниках лекарственных средств отдельно лимфотропные лекарственные препараты не выделяются. В то же время, немаловажной проблемой является то, что лимфопротективное действие большинства лекарственных препаратов было выявлено уже после того, как они вошли в клиническую практику, поэтому лимфотропный эффект лекарственных средств не всегда учитывается и используется.

В свете изложенного, настоящая работа посвящена выяснению наличия «лимфатического» компонента в механизме действия отечественных лекарственных препаратов димефосфона, мексидола и кеторолака у интактных крыс и при моделировании экспериментальной лихорадки. Ранее подобные исследования с избранными для изучения лекарственными средствами не проводились, что и послужило основанием для выбора темы настоящей диссертационной работы.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы является сравнительное исследование влияния димефосфона, мексидола, кеторолака на лимфообращение, микролимфоциркуляцию, цитологический состав и токсичность центральной лимфы интактных животных и при пирогеналовой лихорадке.

Для достижения поставленной цели в работе решались следующие задачи:

1. Оценить влияние димефосфона, мексидола и кеторолака на температуру тела интактных крыс и на фоне лихорадочной реакции.

2. Изучить воздействие препаратов на скорость лимфотока в грудном лимфатическом протоке интактных крыс и при экспериментальной пирогеналовой лихорадке.

3. Выявить характер изменений параметров микролимфоциркуляции лимфатических микрососудов брыжейки тонкой кишки крыс в норме и при лихорадке на фоне введения димефосфона, мексидола и кеторолака.

4. Определить влияние изучаемых препаратов на изменение количественного и качественного цитологического состава и токсичности центральной лимфы в норме и при лихорадке.

5. Провести сравнительную оценку влияния димефосфона, месидола и кеторолака на лимфообращение, микролимфоциркуляцию, клеточный состав и токсичность лимфы ГЛП крыс при JIP.

Научная новизна. Впервые доказано наличие лимфотропного компонента в реализации терапевтического эффекта димефосфона, мексидола и кеторолака, который в условиях патологии (при экспериментальной пирогеналовой лихорадке) более выражен, чем в норме. Он проявляется в интенсификации лимфообращения, активации деятельности компонентов лимфангиона JIM брыжейки тонкой кишки, усилении транспортной функции лимфатической системы по отношению к лейкоцитам и уменьшении токсичности центральной лимфы крыс.

Выявлено, что по продолжительности и интенсивности проявления лимфатического компонента исследуемые лекарственные препараты можно расположить в следующем порядке: мексидол, димефосфон, кеторолак.

Показано, что димефосфон у интактных животных усиливает функциональную активность лимфангиона, а мексидол и кеторолак — повышают лимфообразование.

Приоритетными являются данные, доказывающие, что на фоне JIP эти лекарственные препараты способствуют увеличению тока лимфы в ГЛП за счет активации сократительной деятельности миоцитов стенки и створок клапанов JIM брыжейки тонкой кишки.

Теоретическая значимость и практическая ценность работы. Результаты исследования расширяют представления о фармакологических свойствах димефосфона, мексидола и кеторолака с учетом их воздействия на лимфатическое звено, что является вкладом в фармакотерапию заболеваний, сопровождающихся изменениями в деятельности лимфатической системы.

Итоги исследования могут быть использованы при проведении рациональной фармакотерапии лихорадочных состояний.

Материалы диссертационной работы будут иметь прикладное значение для врачебной практики, так как обосновывают возможность и необходимость направленного лекарственного воздействия на функциональную активность лимфатической системы при патологии. Димефосфон, мексидол и кеторолак могут рассматриваться как лимфостимулирующие лекарственные препараты.

Результаты исследований могут быть использованы в научно-исследовательской работе и учебном процессе в преподавании базисной и клинической фармакологии.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Димефосфон, мексидол и кеторолак обладают лимфотропным действием, которое более выражено у крыс при JTP, по сравнению с интактными животными. Он проявляется в повышении скорости лимфотока в ГЛП, активации микролимфоциркуляции, усилении транспортной функции лимфатической системы по отношению к лимфоцитам и уменьшении токсичности центральной лимфы.

2. Все изученные лекарственные препараты при лихорадке обладают прямым эффектом на лимфообращение, стимулируя сократительную активность стенки и створок клапанов ЛМ.

3. По силе лимфотропной активности препараты располагаются в следующем порядке: мексидол, димефосфон, кеторолак.

Личный вклад соискателя. Научные положения и выводы диссертации базируются на результатах собственных экспериментальных исследований автора, выполненных на кафедре фармакологии Казанского государственного медицинского университета (номер госрегистрации 01.2.007 03479). Опыты по изучению микролимфоциркуляции - в лаборатории патологии микрогемолимфоциркуляции ГУ НИИ общей патологии и патофизиологии РАМН П.Н. Александров}).

Апробация работы. Основные результаты исследования и положения диссертации доложены и обсуждены на следующих научных форумах: XI, XII межвузовской конференции молодых ученых «Актуальные проблемы патофизиологии» (Санкт-Петербург, 2004, 2005); I и II Всероссийской научной конференции «Микроциркуляция в клинической практике» (Москва, 2004, 2006); V и VI научно-практической конференции «Методы исследования регионарного кровообращения и микроциркуляции в клинике и в эксперименте» (Санкт-Петербург, 2005,2007); У1 и УП научно-практической конференции с международным участием «Санкт-Петербургские научные чтения» (Санкт-Петербург, 2004, 2005); XI международной конференции «Новые медицинские технологии и квантовая медицина» (Москва, 2005); межрегиональной научно-практической конференции «Типовые патологические процессы» (Уфа, 2005); Ш Международной конференции «Болезни цивилизации в аспекте учения зав. - д.м.н., профессор

В.И.Вернадского» (Москва, 2005); XIII и Х1У Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2006, 2007).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 27 печатных работ, из них 5 - моноавторство и 22 - с соавторами (85%). 9 статей опубликовано в рецензируемых научных журналах, определенных Высшей аттестационной комиссией. Общий объем публикаций - 4,01 условных печатных листов, в том числе авторское участие - 3,40 условных печатных листов.

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 136 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, 2 глав, отражающих результаты собственных исследований, обсуждения, выводов и указателя литературы, включающего 231 источников: 164 отечественных и 67 иностранных. Диссертация иллюстрирована 26 рисунками, цифровой материал представлен 15 таблицами.

выводы

1. Димефосфон усиливает сократительную деятельность компонентов лимфангиона брыжейки тонкой кишки и ускоряет лимфоток в грудном

V, лимфатическом протоке интактных крыс.

2. Мексидол и кеторолак повышают скорость тока лимфы в грудном лимфатическом протоке интактных крыс, не влияя на функционирование стенки и клапанов лимфатических микрососудов.

3. Димефосфон и мексидол при лихорадке у крыс, в отличие от кеторолака, не оказывают антипиретического эффекта.

4. Лимфотропное действие димефосфона и мексидола при лихорадке реализуется:

- активацией сократительной деятельности миоцитов стенки и створок клапанов лимфатических микрососудов, повышением амплитуды вазомоций;

- ускорением транспорта лейкоцитов в общую циркуляцию;

- снижением степени токсичности центральной лимфы.

5. Кеторолак проявляет лимфотропный эффект при лихорадке у крыс только на стадии подъема температуры тела: усиливает функционирование компонентов лимфангиона, увеличивает амплитуду вазомоций и скорость тока центральной лимфы.

6. Димефосфон, мексидол и кеторолак у интактных крыс и на фоне лихорадки проявляют лимфотропное действие. По силе действия препараты располагаются в следующем порядке: мексидол, димефосфон, кеторолак.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Лекарственные препараты: димефосфон, мексидол и кеторолак целесообразно использовать в качестве лимфостимулирующих средств при коррекции патологических процессов и заболеваний, сопровождающихся нарушением лимфоциркуляции.

2. На этапе доклинических исследований новых лекарственных препаратов рекомендуется изучать их влияние на функции лимфатической системы.