Автореферат и диссертация по медицине (14.00.06) на тему:Сдвиги протеиназно-ингибиторной системы плазмы крови и пути их коррекции у больных с наследственной гиперхолестеринемией

ВСЕСОЮЗНЫЙ КАРДИОЛОГИЧЕСКИЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР АМН СССР

НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ КАРДИОЛОГИИ им. А. Л. МЯСНИКОВА

УДК 616.153.922-008 + 616.15 : 615.355

АЛИДЖАНОВА Хафиза Гафуровна

СДВИГИ ПРОТЕИНАЗНО-ИНГИБИТОРНОЙ СИСТЕМЫ ПЛАЗМЫ КРОВИ И ПУТИ ИХ КОРРЕКЦИИ У БОЛЬНЫХ С НАСЛЕДСТВЕННОЙ ГИПЕРХОЛЕСТЕРИНЕМИЕЙ

14.00.06 — Кардиология 03.00.04 — Биохимия

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

На правах рукописи

Москва 1990

Работа выполнена в Институте кардиологии им. А. Л. Мясникова ВКНЦ АМН СССР.

Научные руководители:

доктор медицинских наук В. В. Кухарчук, доктор биологических наук О. Г. Оглоблина.

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук Ю. Б. Белоусов, доктор медицинских наук, профессор В. Н. Титов.

Ведущая организация — 1 Московский государственный медицинский институт им. И. М. Сеченова МЗ СССР.

Защита состоится « У.^ » . . . . 1990 г.

/г

в « ;*'. т» часов на заседании специализированного совета

К 001.22.01 в Институте кардиологии им. А. Л. Мясникова ВКНЦ АМН СССР( Москва, 121552, 3-я Черепковская, д. 15а)

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ВКНЦ АМН СССР.

Автореферат разослан « ^<4 . . 19 ^ г.

Ученый секретарь специализированного совета, кандидат медицинских наук

Т. Ю. Шваб

*• •• •mi:

■тж.-л ертаций

ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Ввиду большой распространеннос-сердечно-сосудистнх заболеваний, поиски методов и средств ^активного лечения их составляют ва"шу:э задачу кардиологии.

Тяжелой формой гипорлипопротепдемип является семейная ;i¡ наследственная гиперхолестеринемия 2 а типа, которая доводит к раннему атеросклерозу, начинающемуся в детстве.

Важным звеном патогенеза атеросклероза является состоя-:е сосудистой стенки ( Martuveя J. et al.,1988),в которой in этом патологическом процессе происходит нарушение мета-шизма его основных структурных компонентов / эластина, кол-ireira / (Нозз R., 1981). Эти изменения могут возникать на иших стадиях атеросклеротического процесса, предшествуя исопленню лпппдов в стенке артерий (G°rog р., 1985). Таким ¡разом, начальные проявления заболевания тесно связаны с фуиением проницаемости эндотелиалыюго барьера ( Вихерт М. и соавт., 1981 ; Чазов Е.И., 1983 ¡Reidy М., 1985; Hanson G. et al 1986}Хотя причины этого нарушения остаются не-шененными, недавно опубликована работа, в которой доказы-ются причастность к этим процессам катиокного химотрипси-шодобного фермента - катепсина a (Peterson м., 1989).В эследние годы появились указания на участие эластазоподоб-IX протеиназ в деструкции соединительной ткани стенки сосу-)B (Balo J.,1963;Robert L.,1984jBrechemier D. et al.,1984 ), также на повышение активности этих протеиназ в крови боль-£Х атеросклерозом(Bibary-Varga М.,1?84;Rehm S. et al., 1988).,

В связи с вышеуказанным, изучение протеиназно-ингиби- • I эрной'системы плазмы кровн у этой категории больных являэт-í актуальным, так как дает возможность подойти к пониманию зкоторых патогенетических механизмов нарушения целостности ртериальной стенки при атеросклеротическом процессе.

Цель исследования. Выявить отклонения в протеиназно-^гибиторной. системе плазмы крови у больных с наслодствен-эй гиперхолестеринемией и разработать подходы к коррекции гих отклонений.

Основные задачи исследования.

1. Изучить некоторые компоненты протеиназно-ингибито ной системы плазмы крови больных наследственной ГХ.

2. Сопоставить особенности клинических проявлений за болсваняя к традиционные биохимические показатели крови показателей протеиназного баланса.

3. Изучить динамику активности протеиназ в плазме кр ви у больных наследственной ЕС, получавших лечение гиполи пидеыичесюиз! медикаментами и методам а^ереза Л11НП.

4. Провести клиническую апробацию плазмосорбции прот наз у больных наследственной ГХ с использованием иммобили рованного на сефарозе кислотостабильного ингибитора проте: наз из мочи человека (КСП-сефароза).

Научная новизна. Впервые произведено исследование не которых компонентов протеиназно-пнгибпторной системы плаз, крови у больных наследственной ГХ, в результате которого ; данной категории больных выявлена повышенная активность х; мотрипсиноподобных протеиназ.

Впервые произведена коррекция повышенной активности протеиназ у больных наследственной ГХ с использованием сп< цифнческой плазмосорбции протеиназ на КСИ-сефарозе, разработанной в ¡Ьституте экспериментально!: кардиологии БКПЦ АШ СССР под руководством доктора биологических наук О.Г. Оглоблиной.

Практическая значимость. Подробное изложение особенностей течения и клиники наследственной К может использоваться для ранней диагностики этого заболевания.

Результаты исследования по направленному меднкментоз-ному воздействию на уровень липадов плазмы крови больных < наследственной ГХ с применением ловастатина и коррекции равновесия протеиназно-ингибиторной системы плазмы крови, играющего вакную роль в развитии и прогрессировал:!и данно: заболевания, имеют практическое значение для разработки н< вых комплексных методик эффективного лечения наследствен!« ГХ.

Внедсение. Коррекция повышенного протеолиза плазмы коови больных с наследственной ГХ путем плазмосорбции 1шо-

тейназ на колонке с КСИ-сефарозой была произведена в лабо-

.тории гемодиализа и п.павь,-гфереза У.пстг.тута ьлрдиологнн [. А.Л. Гяснлкова ЕКНЦ А.',Н СССР,

Апробация работа. Основные материалы диссертации били >локены на XI научной конференции болгарских аспирантов в !СР с международном участием ( .'.'осква, июнь 1289). Апробация юсертацни состоялась на мехотдсленческой конференция Ннсти-гта кардиологии им. А. Л. Улсникова В1£Щ АМН СССР (ноябрь, 1989)

Публикации. По теме диссертации опубликованы 3 печатные 1боты.

Структура и объём работы: диссертация изложена на границах машинописи, иллюстрирована таблицами и рн-такамп. Состоит из введения, обзора литературы, материалов методов, главы собственных результатов, обсуждения, выводов, рактических рекомендаций и библиографического указателя, ко-зрый включает гд отечественных и Ло иностранных источников.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Обследовано 72 больных. Наследственная IX диаглостироьа-а у 57 больных в возрасте от 6 до 58 лет. Из них у троих омозпготная форма заболевания и у 54 - гетерозиготная. Больно ИБС с нормальным уровнем липлдов крови составили группу равнения, в которую вошли 15 человек в возрасте от 28 до 60 ет. Контрольную группу составили 70 здоровых человек с нор-альнкм уровнем лиоидов крови в возрасте от 18 до 43 лет. аспределение больных и здоровых лиц по возрасту и полу пред-тавлени в таблице I.

У больных с повышенным уровнем липидов крови (I группа), также у 15 доноров из' контрольной группы, определение актив-ости протеиназ проводили после предварительного делипадирова-ия образцов плазмы крови.

Больные I группы были распределены на подгруппы А, Б, В, ' в зависимости от характера проводимой терапии. Кроме того, з больных I группы (наследственная ГХ) в связи с расширени-м конкретных экспериментальных задач, былл сформированы две .ополнительнне группы IV, у (см. рис. I).

В лабораториях Института кардиологии им. А.Л. 1/ясникова !КНЦ СССР больным проводили рентгенологическое, электрокардио-'рафическое, ультразвуковое исследование сердца, брахиоцефаль-

Рис. I Распределение обследованных больных I группы с наследственной гипераолестерине-ыией на дополнительные подгруппы в связи с поставленными экспериментальными задачами.

I ГРУППА (наследственная гх)

< ПОДГРУППА (ПС нд КСИ-сефароэе) 4 ПОДГРУППА (ЛОЬАСТАТЦИ)

2 ПОДГРУППА (гр. С РАВНЕНИЯ 2 ПОАГИППА СНММ.С0РБ. ЛПИП+ДОВАСТДТин)

ых сосудов, магистральных сосудов н:;:шпх конечностей, ультра-зуковое исследование органов бркялнол полости, коронароангио-рафпческое ис следование.

Таблица I

'аспределенпе бодхлщх наследственной DL, ПЕС с нормальным ровном липидов крови, здоровнх ладей по возрасту и полу

Показатель П о л Соедини

Группы п муячинн :>:евдшы возраст, лет

I Наследственная ГХ 57 31 26 37,0 +J,8

П ИБС с нормальным уровнем лииидоз крови 15 12 3 52,0+2,8

Ш Контрольная группа: доноры (делиплдирова-ние) доноры (без делилидирования ) 15 55 п / 35 8 20 31,2+5,2 30,8+3,8

Всего 142 85 5? -

Ультразвуковое исследование брахпоцефальных сосудов и ма-'истрачьннх сосудов нижних конечностей проводили на аппарате Vasoscan VL" (Великобритания ) ; " Асизоп 126", " Acusón 128" CHÍA ).Ультразвуковое исследование сердца проводили в состоя-ии покоя на аппарате " Sonos-iooo " С США ).

Суточное мониторироьание СКГ проводилось с помощью оте-:сственного аппарата для мониторирования и отечественного де-ифратора нового поколения "Лента-МТМ".

Белоэргометрическая проба проводилась на аппарате "Multi-acriptor EX. 36" фирмы " Heilige"(ФРГ).

Исследование липидного спектра крови проводили ка апиара-е " Progress " о>1рглы " копе'Ч Финляндия ) в лаборатории клл-ической биохимии и клинико-диагностических методов исследова-| ля Института кардиологии им. А.Л. 1,1ясникоБа ВКНЦ Aíffi СССР, укозодилюи профессором В.Н. Титовым.

• Спектрофотометрическое исследование активностей, фермен-ов и их ингибиторов проводилось в спектрофотометре марки "Spectronic-2000n фирмы " Bausch and Xomb"(CIM ). ХИМОТРИПСИНО-.одобную активность в делипидированных и нативных образцах ге-:ариновой плазмы крови определяли спектрофэтометрическим методам по гидролизу этилового эфира N- бензоил-1-тирозина и выжали в нмоль гидролизированного за I мин субстрата, отнесенных к I мл плазмы или I мг бежа плазмы кроьи. Активность

альфа-1-ингибитора протеиназ в плазме крови измеряли по торможению гидролиза этилового эфира н-бензоил-L- аргинина трипсином,

Делипидированные образцы плазмы крови получали, добавляя в сыворотку крови гепарин из расчета 200 ед. на I мл и хлорид марганца до конечной концентрации 50 мМ с последую- ' щим центрифугированием.

Процедуры специфической плазмосорбции протеиназ на КСИ-сефарозе проводил при нашем участии старший научный сотруднш кандидат медицинских наук Г.А. Коновалов в лаборатории гемодиализа и плазмафереза Института кардиологии им. Л.Л. Мясни-кова ВКНЦ АШ СССР, руководимой доктором медицинских наук В.В. Кухарчуком.

В работе использовали колонки с КСИ-сефарозой объёмом 20 мл л ёмкостью 25 мг по связыванию трипсина. Процедуру плазмосорбции протеиназ проводили на клеточном сепараторе крови IBM 2997 (США ).

Процедуры специфической плазмосорбции протеиназ проводили с интервалом 4-6 дней. Курс лечения составил 1-4 процедур! после чего больрые наблюдались в течении 2-х месяцев.

Длительность процедур составила в среднем 97,7+6,8 мин, скорость плазмотока - 14,6+1,0 мл/мин, объём перфузированной плазмы составил в среднем 1256,2+6,0 мл за процедуру. Всего было проведено 12 процедур плазмосорбции протеиназ на КСИ-се-фарозе больным с наследственной IX. На рис.2 продемонстрирована схема процедуры плазмосорбции протеиназ на КСИ-сефарозв в контуре с клеточным сепаратом крови IBM 2997.

Клиренс активности химотрипсиноподобных протеиназ на колонке с КСИ-сефарозой измеряли по формуле: п _ п ВХОД ^ВЫХОД • у

ивход

C„Yn - активность химотрипсиноподобных протеиназ на входе ш-од в колонку ;

Cnuvrvn - активность химотрипсиноподобных протеиназ на выходе выход и3 колонки ;

v - скорость перфузии плазмы крови через колонку,мл/мин.

Полученные данные обрабатывались на компьютере "Labtam-зооо" с использованием пакета статистических программ для сравнения средних величин - статистика Стьюдента для независимых и парных вариант, а также метода корреляционного анализа.

Рис. 2 Схема процедур плазыосорбции протеиназ на КСИ-сефарозе в контуре с клеточным сепаратом крови 1ВУ 2997.

е

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУГД2НИЕ

Клиническая характеристика больных с наследственной Г/ Наследственность отягощена у 50( 87,7$ обследованных больн1 У 7 пациентов (12?!) не удалось получать четких данных о заболевании родственников.

ИБС диагностирована в 72$ случаях (41 человек), первьн симптомы которой появлялись у гетерозиготных больных на 3-4 декаде жизни. Стенокардия диагностирована в 56$ (32 человекг безболевая форма ИБС - в 15,85» ( 9 человек ) случаях заболевания. Инфаркт миокарда перенесли в прошлом 20 пациентов. Среди обследованного контингента больных выявлено двое пациенте с гомозиготной формой наследственной IX, у которых ИБС проявилась в шести- и четырнадцатилетнем возрасте.

Данные коронароангиографического исследования у 34 боль ных наследственной IX выявили: трехсосудистое поражение коро нарного русла у 12 обследованных пациентов, двухсосудастое -у 9 больных, однососуднстое поражение у 10 пациентов. В одном случае были выявлены лнтактные коронарные сосуды и в двух случаях дифтузное поражение коронарного русла.

Данные исследования ЭКГ у больных с наследственной IX в 65$ случаях (37 пациентов ) выявили изменения, характерные для ИБС ( рубцово-очаговые поражения, "ишеьшческие" изменения конечной части желудочкового комплекса). Результаты холтеров-ского кониторирования ЭКГ показали, что для больных с наследственной IX характерно появление изменений "ишемического" типа при физической нагрузке и в покое, часто безболевого характера. Подобные изменения обнаружены у детей, а также пациентов с наследственной IX, страдающих безболевой формой ИБС 25 пациентов (44$ ) с наследственной IX даловалпсь на перебои в работе сердца вне зависимости от перенесенного ими инфаркта миокарда. При суточном мониторированин ЭКГ в таких случаях чаще регистрировались как желудочковая так и суправентрику-лярная экстрасистолкя. При проведении велоэргометркческой пробы у 40 пациентов с наследственной ГХ имелись изменения, характерные для ИБС, которые проходили при прекращении нагрузки. Причём у больных с положительной пробой и низкой толерантностью к физической нагрузке отмечались, как правило, выраженные изменения конечной части желудочкового комплекса

(горизонтальные депрессия сегмента" эт " достигающие 3 и более мм) .

Результаты эхокардиографяческого исследования выявили отсутствие изменений у 21 пациента ( 36,8$ ) , уплотнение стенкл аорты у 10 пациентов (17,, изменения клапанного аппарата сердца у 9 человек ( 15,8$ ) и у 4 пациентов, перенесших инфаркт миокарда, признака аневризмы левого желудочка.

Ультразвуковое исследование 5рахиоцефальной зоны у 22 больных выявило: в 12 случаях стенозирующее поражение сонных артерий, в 4 случаях утолщение интимы этих сосудов."

У большее с наследственной ПС средняя концентрация общего ХС крови равнялась 369,1+12,8 мг£, ТГ - 145,0+8,7 мг#, ХС-ЛПШ - 33,4+1,7 ХС-ЖШП - 306,7ЛЗ,2 ХС-ШТОШ -28,9+1,6 мг#. Отношение общего ХС к ХС-ЛПШ составляло II, 1,1. Для больных с наследственной IX было характерным повышение коагулирующих свойств крови, повышенная СОЗ, которые по мере лечения нормализовывались.

х х

х

Исследование протеиназной системы плазмы крови доноров и групп обследованных больных показало 4-х кратное повышение активности химотрипсиноподобных протеиназ (р4. 0,005) в дели-пидированной плазме крови пациентов с наследственной ГХ (группа I )по сравнению с делипидированными образцами плазмы крови 15 доноров. Достоверных различий активности этих протеиназ в плазме крови больных ИБС с нормальным уровнем липя-дов (группа П) и доноров без делипидпрования но обнаружено. ' Антитриптяческая активность, отражающая активность альфа-1 ингибитора протеиназ, в плазме крови больных I и П групп не отличалась от нормальных величин

• Активность химотрипсиноподобних протеиназ в плазме крови больных с наследственной IX была одинакого высокой у детей, мужчян и женщин и не зависела от возраста пациентов.

Активности химотрипсиноподобних протеиназ плазмы крови в подгруппах больных,перенесших и неперенесших инфаркт мяо-карда, а также пациентов с безболевой формой ИБС, страдающих наследственной: ГХ, практически не отличалась.

Таблица 2

Активность химотрипсиноподобных протеиназ в плазме крови больных наследственной IX, ИБС с нормальным уровнем липидов КРОЕИ и доноров

Группы п Химотрипсиноподобные протеиназы, нмоль/мл/мин

I. Наследственная IX (делипидирование) 57 4,4 + 0,4

П. ИБС с нормальным уровнем липидов крови ( без де-липидирования ) 15 2,1 + 0,4'

Ш. Контрольная группа доноры (делипидирование ) доноры (без делипидиро-вания ) 15 55 1,0 + 0,2 2,9 + 0,2

В число химотрипсиноподобных протеиназ, активность которых измеряется з плазме крови больных наследственной IX, входят внутриклеточные протеиназы типа катепсина Известно, что катепскн а, гидролизуя коллаген и слабее эластин, потенцирует действие эластазоподобных протеиназ, поступающих в кровоток из клеток крови (нейтрофилов ) и тканей. Таким образом, химотрипсиноподобные протеиназы, наряду с эластазопо-добными, по-видимому, способствуют деструкции соединительнотканных компонентов стенки сосудов. Известно, что катепсин (} будучи катионным белком, монет увеличивать проницаемость эвдотелиального слоя сосудистой стенки за счет пололи:тельного заряда его молекулы.

Нами проведено сравнение данных коронароангиографическо-го исследования с активностью химотрипсиноподобных протеиназ в плазме крови пациентов с наследственной IX. Как видно из рис. 3, отмечается повышенная активность протеиназ в группе больных с трехсосудистым (р/. 0,001) и двухсосудистым (р£0,05) поражениями коронарного русла по сравнению с однососудистым. Прослежена положительная корреляционная зависимость между активностью химотрипсиноподобных протеиназ плазмы крови у больных с наследственной. ГХ и степенью поражения коронарного русла: одно-, двух-, трехсосудистое поражение(г =0,52 ; р<0,001 ).

Активность химотрипсиноподобных протеиназ плазмы крови

Рис.3 АКТИВНОСТЬ ХИМОТРИПСИНОПОДОБНЫХ ПРОТЕИНАЗ ПЛАЗМЫ КРОВИ У БОЛЬНЫХ НАСЛЕДСТВЕННОЙ ГИ П ЕРХОЛ ЕСТЕ РИНЕМИЕЙ С РАЗЛИЧНЫМИ СТЕПЕНЯМИ ПОРАЖЕНИЯ КОРОНАРНОГО РУСЛА.

■аагоиаой

ОДНОСОСУДИСТОЕ ПОРАЖЕНИЕ КОРОНАРНОГО РУСЛА

ДВУХСОСУДИСТОЕ ПОРАЖЕНИЕ КОРОНАРНОГО РУСЛА

ТРЕХСОСУЛИСТОЕ

ПОРАЖЕНИЕ

КОРОНАРНОГО

РУСЛА

---...... .-ШЦЧЧ.И1И

имела прямую корреляционную зависимость с общим ХС крови (г = 0,34 ; р ¿0,01) , с ХС-ЛПНП ( г = 0,35 ; р< 0,01; рис.4, 5 ) , индексом атерогенности ( г = 0,28 ; р^ 0,05 ) , что в известной мере свидетельствует об участии этих протеиназ в патогенезе атеросклероза, возможно при гаперлипопротеидемиях. Отсутствие? ли нейной зависимости мевду активностью этих протеиназ и количеством лейкоцитов в крови предполагает происхождение этих протеиназ не из лейкоцитов крови, а из деструктурированной сосудистой стенки.

При измерении активности хвмотрипсиноподобнкх протеиназ пла да крови больных с наследственной ГХ в зависимости от проводимого лечения, выявлена достоверно более высокая активность этих протеиназ в группе больных, ранее не получавших лечение ( рис.6), по сравнению с группой пациентов, которые длительное время получали процедуры икмуносорбции ЛПНП и гиполипидемические препараты

Лечение больных с наследственной ГХ иммуносорбцией ЛПНП в комбинации с гиполипидемическкми препаратами ( никотиновая кислота, холестирамин и их комбинации ) приводило не только к сниг-жению и нормализации уровней липидоз крови и улучшению клинического состояния, но и к снижению актпзностей хшотрипсиноподобных протеиназ до субнормальных величин за одну процедуру, стабильно сохраняющихся в течении 7 дней и поддерживающихся при длительном ( 6 мес ) лечении ( табл. 3 ) .

Таблица 3

Динамика активности хнмотрипсиноподобных протеиназ плазмы крова больных, получавщих^процедуры иммуносорбции. ЛПНП

еженедельное

Процедура п Химотрипсино-подобные про-теиназы, нмоль/мд/мин Снижет Р Ч

Иммуносорбция ЛПНП: 10 4,8+0,8

I. до процедуры 10 4, ¿0,8

2. после процедуры 10 2,1+0,5 -66,0 .1-2'0,001

3. через 24 ч 7 1,9+0,5 -60,4 1-3< 0,005

4. через 72 ч 7 2,8+0,8 ■ -41,6 1-4^0,05

5. через 168 ч 7 1,7+0,5 -64,6 1-5-0,005

6. через 6 мес лечения 7 1,9+0,9 -60,4 1-6-'0,01

ПпиЛТЯН1ГПО П11И1.-ВИРНИЙ пггаютпт тлшгппп.гтбтШ ЛПНП С ТШСИМ

эффективным препаратом, как ловастатин, в дозе 20-40 мг в сут-

ДЬ/ШI

шг

10

9 8 7 6 5

4 3 2 I

100 200 300 400 -500 600 700 800 900 1000^

4 Корреляционная зависимость мезду уровнем активности химоврапсиноподобных протеиназ и уровнем общего ХС плазмы крови больных с наследственной гиперхолестерине-мией.

ль/ид

10

9 8 7 6 5 4 3

2

I О

100 200 300 400 500 600 700 800 S00 1000

\¡s%

;. 5 Корреляционная зависимость мезду уровнем активности химотшпсиноподобных протеиназ и уровнем ХО-ллш плазмы крови больных с наследственной гиперхолестерине-шей.

НЙОДЬ/МЛ I

6 АКТИВНОСТЬ ХиНОТРИПСМНОПОДОБНЬ'Х ПРОТЕИНЛЗ ПЛАВКЬ' ШЭД БОАЬНЬ'Х НАСЛЕАСТЬЕННОЙ ГИПЕМОДЕСТЕРШ1ЕИШЙ Ь 3ÀDUCUMOCTU ОТ ХАРАКТЕРА

способствует нормализации активности шмотрплслноподобнше гекпаз плазмы крови в течении I мзс лечения и последующему Иорданию па нормальных величинах.

Результаты исследования показали, что за ка'кдую процедуру ¡шосорбщш ШШ происходит параллельное снижение уровня I и активности хпмотрлпепноподобннх протеинчз ( на 5б£ ) в зме крови больных наследственной' IX, однако механизм этого хеки я пока не ясен, .'.'.о.т.но предположить, что по аналогии с стазой, хлмотрлпенноподобные протелназн входят в состав сор-уекых ЛП-комллехсов (¿асо 1. к. et 1 ¿62 : резулъта-чего является паратлельное снижение и активности протеиназ. Процедуры плаз.\:а:Тереза бнлл проведены 7 больным с каслед-еиноЛ IX короткими курсам! (1-3 раза в год ). Результаты ледовакия показачи, что каждая процедура плазмафереза на о% ( р4 0,001) снижает активность хпмотрипепноподобных про-наз. Необходимо отметить, что к моменту следующего поступил пациентов на повторный курс лечэш!я, активность протеи-вновь оказывается высокой. Выявленное нами снижение активности химотрипсиноподобных теиназ в динамике лечения больных с наследственной IX им-осорбцией ЛШЛ и плазмаферезом, может служить для оценки ективности этих видов лечения, способствующих регрессии су-твующего поражения в артериальной стенке.

Учитывая повышенную активность химотрипсиноподобных про-наз плазмы крови больных с наследственной IX, мы сделали ытку коррекции гиперпротеолиза процедурами плазмосорбции теиназ на КСИ-сефарозе. Эффективность плазмосорбции на КСИ-арозе оценивали сравнением двух подгрупп больных. I Под-ппу составили"5 пациентов с наследственной IX, которые ране лечились. Они получали процедуры плазмосорбции протеина КСИ-сефарозе в сочетании с приемом никотиновой кислоты уточной дозе 1,5-2,0 г. 2 Подгруппа - 6 пациентов с на-дствонной IX, которые ранее не лечились и начали прием циановой кислоты в суточной дозе 1,5-2,0 г. Процедуры плазмосорбции протеиназ проводились на колонке

СИ-сефарозой - иммобилиз__ованном на сефарозе КСИ протеиназ

мочи человека, разработанный в Институте экспериментальной диологии ВКНЦ АШ СССР.

Процедуры специфической плазмосорбции протеиназ на КСИ-арозе больные переносили удовлетворительно, без развития шнонай. Существенно не изменялось артериальное давление,

частота сердечных сокращений. Некоторое увеличение веса т после процедуры на 115,4+18,9 г было связано с введением жидкости во время процедуры.

Всего было проведено 12 процедур специфической плазы сорбции протеиназ на КСИ-сефарозе, под контролем активное химотрипсиноподобных протеиназ в плазме крови и состояния больных.

Измеряли клиренс химотрипсиноподобных протеиназ на к лонке с КСИ-сефарозой. На 30 млн работы колонки клиренс равен 2,9+0,5 мл/мин, на 60 мин - в среднем равнялся 3,2+ мл/мин.

Активность химотрипсиноподобных протеиназ плазмы кро ви больных, получавших процедуры специфической плазмосорб: протеиназ -на КСИ-сефарозе, колебалась от 17,2 до 34,8 нмол ыг/мин и в среднем составила 25,5 нмоль/мг/мин при норме 13,3+1,3 нмоль/мг/мин. В среднем за первую процедуру спец фической цлазмосорбции протеиназ протеолитическая активно' снижалась на 34^, на второй - на 33# по сравнению с исход: величиной до начала каждой процедуры ( для активностей, о1 несенных к I мг белка в плазме крови) . В табл. 4 показа активность химотрипсиноподобных протеиназ плазмы крови бо. них с наследственной ГХ до и после процедур специфической цлазмосорбции протеиназ на КСИ-сефарозе.

Результаты исследования показали, что в среднем акти: ность протеиназ плазмы крови за одну процедуру и за курс . чения снинаотся соответствешю на 43$ и 50JZ. Необходимо 0' метить, что через I мес после проведения последней процед; рц плазмосорбцли протеиназ на КСИ-сефарозе, эффект снижен] .активности химотрипсиноподобных протеиназ в плазме крови i циентов I подгруппы частично сохраняется и составляет около 12%, тогда как в подгруппе сравнения, в которой больные принимали только никотиновую кислоту, активность этих про; наз остается за 2 мес лечения практически без динамики. № рис._ 7 представлен частный случай изменения активности химотрипсиноподобных протеиназ в плазме крови больной А. с наследственной К в динамике лечения плазмосорбцией на KCl сефарозе.

Таким образом, процедуры цлазмосорбции протеиназ на КСИ-сефарозе в сочетании с приемом никотиновой кислоты более действенно снижают активность химотрипсиноподобных прс

Акт;шность хинотршюиноподобных прото^шаз плазмы крови большее с наследственной гиперхолестеринемией до и после процедур плазмосорбции протеиназ на лСИ-сефарозе

Хпглотрнис ¡пюподобпиз протепнаси

Пациент Процедура с Дата ныоль/плДпш Н|.;оль/;.1г/:.;пн

до после % снижения до | после % сниче- Ш1Л

I I 13.10.88 1,84 1,2 35 22,4 16,9 25

2 19.10.88 0,76 0,56 26 8,9 8,0 II

I 05.Св.88 1,65 0,9 45 17,2 10,0 42

2 2 16.08.88 1,24 0,62 50 12,6 5,7 47

3 22.08.88 1,2 0,84 30 тг,х 9,3 ■¿I

4 26.08.88 0,98 0,78 20 11,5 '8,9 22

3 I 18.10.88 1,6 •0,9 45 20,5 15,6 24

4 I 25.10.88 2,5 2,0 22 32,3 25,1 22

2 01.II.88 2,0 1,8 10 26,0 21,3 18

I 08.08.88 3,1 0,99 63 34,8 .13, о о!

5 2 12.СБ.88 1,6 0,83 48 23,3 10,5 55

3 19.08.88 2,4 1,2 47 25,9 17,3 33

Рис.7

ММОАЬ/МГ мин

40«

ДИНАМИКА АКТИВНОСТИ ХНМОТРИПСИНОПОДОБНЫХ ПРОТЕИНАМ ПЛАЗМЫ КРОВИ БОЛЬНОЙ А., 50 ЛЕТ НА ПРОЦЕДУРАХ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПЛАЗМОСОРБЦИИ . ПРОТЕИНАЗ, В ПРОЦЕССЕ ДЛИТЕЛЬНОГО НАБЛЮДЕНИЯ .

30*1

20«

5.0«

НОРМА

СЕ

пк •>■> пя пя

НРРМЯ

иназ но сравнению с подгруппой пациентов, применявших толь-I никотиновую кислоту ( соответственно на 50% и 13,5^ в мо~ !нт времени соответствующий окончанию курса плазмосорбции ) .

При проведении специфической плазмосорбции протеиназ на 1И-сефарозе происходит изменение некоторых биохимических подателей крови, происходящее параллельно с улучшением кли-неского состояния больных наследственной IX.'За одну про-гдуру специфической плазмосорбции. протеиназ происходит снижи о уровней многих компонентов липидного спектра плазг.сы зови ( рис. 8 ) , за исключением ХС-ЛПБП, уровень которых тактически ке меняется.

Необходимо отметить, что достигаемое снижение уровня змпонентов липидного спектра крови больных после проведения сазмосорбвдш протеиназ на КСИ-сефарозе существенно превос-эдит эффекты от их неспецифической сорбции на расходном ма-зрпале и от использования необходимых при экстракорпоральной зроузик крова доз вводимого больному гепарина, обладающего зполпшщшгеескям действием,.

Дпнаг/лческое наблюдение за лппидкым спектром крови Левиных плазг.:осоро'цией на КС;!-сефарозе больных наследственной X показалоснижение уровней ллпкдов крови за курс лечения и евденцию к последующему снижению общего ХС и ХС-ЛПНП в те-енпи двух месяцев.

В результате проведения процедур специфической плазмо-орбцпп протс:-:наз на КСИ-сефарозе у больных происходит сменив не только уровня химотрипсиноподобных протеиназ и не-оторцх компонентов липидного спектра крови, но и улучшаются оологические свойства крови.

У больных, которым были проведены процедуры специфичес-ой плазмосорбции протеиназ на КСИ-сефарозе, отмечали улуч-енке в клиническом состоянии, которое проявлялось урежением риступов стенокардии и уменьшением количества принимаемых .нтиангинал'ных препаратов. Эффект процедур сохраняется в ечении I мес, после чего активность химотрипсиноподобных ротеиназ вновь повышается, снижается уровень ХС-ЛПБП и отучается возобновление исходных данных клинического состояли.

Па основании полученных результатов молено'предположить ■частие химотрипсиноподобных протеиназ плазмы крови в пато-■енезе атеросклероза при гиперлипопротеидекиях, учитывая,

{ОС «

с. <я с=

I

о

X

ш

1кУ.

с

з: о

с ■<

1

о

X

□

ДО ПРОЦЕДУР

НОСИ ПРОЦЕДУР

о

ДКН1КИК« «ИПИДНОГО СПЕКТРА КРОВИ К 0 1 Ь И Ь1 X С « А С 1 £ Л с Т В Е Н Н О Й ГЙПСРХОЯЕС ГЕРИНЕМИЕЙ ВО БРЕКЯ ПРОЦЕДУР СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПЛАЗИОСОРБЦИИ ПРОТЕИНЛЗ

:то протеиназы участвуют в деструкции соединительнотканных лементсв сосудистой стенки, нарушая целостность эндотелия способствуя проникновению в сосудистую стенку атерогенных лассов ЛП, а также самостоятельное участие катепсина о повышении проницаемости эндотелиального покрова. Кроме тоо, согласно литературным источникам, протеиназы участвуют деградации белковой части ЛП, в результате чего происходит арушение не тол!ко процессов катаболизма ЛП за счет изме-ения их рецепции, но и образование модифицированных форм П, обладающих выраженным атерогенным свойством.

При проведении процедур плазмосорбции протеиназ на КСИ-ефарозе, по-видимому, происходит ослабление вышенеречислен-ых процессов, имеющих отношение к атеросклеротическому пора-енлю сосудистой стенки.

Корматизация липидного обмена у больных с наследственной X путем проведегая процедур иммуносорбции ЛШШ и плазмафе-еза в сочеташп! с гиполиш1,цомически:л1 препаратами, а также овастатиком способствуют снижению активности хпмотрипсинопо-обных протеиназ в плазме крови этих пациентов пли их под-ер;глш!е на субнормальных величинах, что подтверждает липо-ротеин - протекназную взаимосвязь. Получешше в работе дан-ые, по нашему млению, могут способствовать решению сложной роблемы изучения патогенеза атеросклероза при наследствен-ых гиперлипопротеидемиях.

ВЫВОДЫ

1. Активность химотрипсппоподобных протеиназ ( катеп-ан з и др. ) в плазме крови больных с наследственной аперхолестерпнемпей превышает эти активности в группе цоровых людей в 4 раза.

2. Одна процедура плазмосорбцпи протеиназ на колонке с ^И-сефарозой у больных с наследственной гиперхолестерине-■1ей приводит к снижению активности химотрипсиноподобных ротеиназ на 41$.

3. Курс лечения больных с наследственной гиперхолесте-шемисй плазмосорбцией протеиназ на КСЛ-сефарозе ведет к шжешюдкпшюсщ хпмотрипсиноподобных протеиназ плазма крови 1 50/в, эффект сохраняется в течении месяца.

4. Выявлена прямая корреляционная зависимость активност химотрипсиноподобных протеиназ плазмы крови с содержанием атерогснных лппоиротеидов в плазме крови больных с наследств нол гиперхолестеринемией и однонаправленный характер изменения активности указанных протеиназ и уровней птерогенных ли-попротоидов при лечении иммуносорбцией ЛП1Ш, плазмосорбцией на КСП-сефаропе, ловастатином.

5. Выявлена положительная корреляционная связь активности химотрипсиноподобных протеиназ с числом поражения коронарных артерий сердца у больных с наследственной гиперхолестери-немией.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКО'ЙЦШШ

1. Определение активности химотрипсиноподобных протеиназ в плазме крови больных с наследственно;; гиперхолестери-неиаей может служить критерием эффективности лечения экстракорпоральными методами и гиполишщемическиш препаратами.

2. Плазмосорбция протеиназ на КСИ-сефарозе может быть рекомендована в качестве одного из методов в комплексном лечении больных с наследственной гиперхолестерикемией.

СПИСОК РАБОТ,

ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Дисбаланс протеиназно-ингибиторной системы плазмы крови при семейной гиперхолестеринемии / Х.Г. Алиджанова, О.Г. Оглоблина, В.В. Кухарчук, Г.А. Коновалов, Г.А. Парфен-кова, Л.А. Белова //Кардиология.-1?89.-& 7.-С*115-116.

2. Повышенный протеолиз плазмы крови больных наследственной. гиперхолестерикемией Д.Г. Алиджанова //Актуальные проблем современной науки-89: Тезисы выступлений XI научной конференции болгарских аспирантов в СССР с международным участи ем. -1,!о сква, 1989. -С. 31.

3. Коррекция повышенного протеолиза плазмы крови больше наследственной гиперхолеатеринемией Д.Г. Алиджанова //Актуальные проблемы современной науки-89: Тезисы выступлений XI научной конфер£ищии болгарских аспирантов в СССР с международным участием.-Москва,1989.-С.32.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ, ИСПОЛЬЗОВАННЫХ В ТЕКСТЕ- АВТОРЕФЕРАТА'.

IX - гкперхолестор::нсг«яя

ЖС - ишемическая болезнь сердца

КСИ - кислотостабильннй ингибитор •

ЛП - липопротеиды

ТГ - триглицериды

ХС - холестерин

ХС-ЛПВП - холестерин липопротеидов высокой'плотности

ХС-ЛГИП - холестерин липопротеидов низкой плотности

ХС-ЛПОНП - холестерин лппопротепдов очень низкой плотности