Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Роль петидергических механизмов ретикулярной части черной субстанции в регуляции поведения и эпилептической активности

с* а*

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ ЫЕДИЦИЮИХ НАУК НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИЕСТИГУТ ОБЩЕЙ ПАТОЛОГИИ И ПАТОИСЗИОЛОГИИ

На правах рукописи

ПАНЕЕКО Анатолий Васильевич

РОЛЬ ПЕПТИДЕРГИЧЕСПИХ МЕХАНИЗМОВ РЕТИШЯРГОЯ ЧАСТИ ЧЕРНОЯ СУБСТАНЦИИ В РЕГУЛЯЦИИ ПОВЕДЕНИЯ И ЭПИЛЕПТИЧЕСКОЙ

АКТИВНОСТИ

14.00.16 - патологическая физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Москва - 1993

Работа выполнена на кафедре нормальной физиологии, на кафедре юрской медицины Одесского медицинского института имени К И Пирогова и в лаборатории общей патологии нервной системы Научно-исследовательского института общей патологии и патофизиологии Российской АШ

Научные руководители - доктор медицинских наук, профессор

А. А. Шандра - доктор медицинских наук, профессор, васлуженный деятель науки и техники Украины А. А. Лэбенко

Официальные оппоненты - доктор медицинских наук К К. Решетник

- доктор биологических наук, профессор С. А. Чэпурнов

Ведущэе учревдение - Российский государственный медицинский университет

Защита диссертации состоится Ь-и 1993 г. в/?часов

на заседании Специализированного совета Д 001.03.01 при Научно-исследовательской институте общей патологии и патофизиологии Российской АШ (125315, Москва, ул. Балтийская, 8).

Автореферат разослан " 1993 года.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института.

Ученый секретарь Специализированного совета

кандидат медицинских наук Л. а Скуратовская

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Эпилепсия представляет собой заболевание встречащееся у детей и взрослых, характеризуется тяжелым прогрессивный течением, которое приводит к значительному ограничению профессиональной пригодности и нередга к инвалидности. В нвстсяиео вре&а по данным Всемирной Организации Здравоохранения число больных составляет 2-52 и увеличивается га года в год в связи с ухудЕащ;а!Кся зкологичзскшш условгаьга, ростом травматизма, стрессов, различных инфекций (БЬогуоп, 1991). Ваесте с тем, эффективность пр;!ыэаяз1йк хзкврственных препаратов крайне низкая - 20£ от обс/эго чгхзла большее нечувствительны к лекарственной терапии (Д. К. Каибарова, 1991; Пипкап, 1989). При проведении фармакологического лечения у больных эпилепсией часто от-шчэгггся побочшгэ зффэкты препаратов, которые нередко носят токсический характер (А. И.Болдырев, 1984, Б. 11 Рачков, О. А. $едо-ренкова, 1987, Е А. Карлов, 1990, Е-уЛо, Тугог, 1980; 1?эупо1с1з, 1989, ^ЬзпеББэп, 1990). Таким образом, фармакотерапия эпилепсии требует дальнейшего совершенствования и рсвраСотки препаратов, отйг-щжит-СЯ внршжтшии прстстоБпилоптнчесгаш действие и и обла-дакцях мйнвашьнкин побочшгии аффекте!«.

Езйроттофтзпологцчйсхнй аспект разработки иетодов купирования эпилепсии связал с исследовашсе» шханкзьюв прекращения эпилептической активности. В последнее врекя рзссютрение вопросов ограничения и подавления эпилептогенева осуп^ствлявтся на основе системных ыэханизиов восстановления гоьгэостаза, обеспечиваемых активностью образований антизпилептнческой системы мозга (Г. Е Кръсяановский, 1980; Г. Е Крыжановский и др., 1992; Л. С. Годлевский, 1992). Щютивозпилептический эффект данной системы реализуется с участием транссинаптических и гуморальных ыеханивмов, в частности, пептидных факторов спинномозговой жидкости. Одним ив важных функциональных компонентов антиэпилептической системы является черная субстанция и, в частности, ее ретикулярная часть (ЧВр). Отличительной особенностью данного образования является

способность выступать в качестве релейной структуры и обеспечивать активация других коютонентов антизпклептической системы (Г. ЕКрыжановский и др., 1992). Шказано значение ЧВр в реализации противозпилептического действия препаратов обладающих ГАШ-мнмэ-тическим действием (Gale, 1988; GarGnt, Gale, 1986; King et al., 1987).

В деятельности антиэпилептической системы вашое значение имэиг пептидные факторы, которые шгут выступать в качестве как индукторов так и эффекторов ее активности. Одним га нейропепти-дов, для которых показано противозпилептическое действие является дельта сон-индуцирунций пептид (ДСИП). Установлена его проти-воэпилептическая эффективность в отношении гевераливованной эпилептической активности (ЭпА), вывиваемой системным введением бикукуллина, пикротоксгаа, а также коравола, очаговой ЭпА, вызываемой в коре головного мозга стрихнином н пенициллином (Г.R Крыжановский и др., 1987; О.С.Адрианов И др., 1988; L А. Шандра и др., 1969; L А. Шандра, Л. С. Годлевский, A. A. Jtoósmto и др., 1993). Однако, механизмы осуществления противоотийптм-ческого действия ДСШ, таккэ как и других нейропептидов, ейлада-пцих противоэпилептическим действием, роль ЧВр в развитии эффектов ограничения и подавления эшшптогепева, формирования других функциональных эффэктов остаются недостаточно изученными.

Цель и задача впеаэдования. Основной цэлью кссгодовалкя является выяснение poíüí ЧВр в реализации действия ряда кайрояэети-дов на судорожи» реакции, поведение и двигательную активность животных. Даннал цель достигалась в ходе решения следующих ва-дач:

1. Научить ыаянке введения в ЧВр ДСИП и его структурных аналогов - ЖЖ-1 - ДСКП-4 на поведение, двигательную активность крыс, а такеэ генерализованную ЭпА, вызываемую системным применением эпилептогенов.

2. Исследовать участие бенводиавепиновых рецепторов ЧВр в регуляции поведенческих реакций и судорожной готовности у животных в условиях фармакологического киндлинга.

3. Изучить характер двигательных повно-тонических «вменений, а такяэ судорожной готовности у животных в условиях

стимуляции каша-, дельта- и на- типов опиоидных рецепторов.

4. Исследовать влияние введения в ЧВр вещества П, соматос-татина и нейротензина на поведение, двигательную активность и генерализованную ЭпА.

Научная новизна исследований. Показана роль ЧВр в развитии ДСИП-индуцированных квиэнений цикла бодрствование - сон - увеличении иедленноволнового и парадоксального сна, развитии доза-ва-висииых контрлатеральных ротаций, увеличении шгзэчного тонуса, снйгзнии двигательной активности. Установлена роль опиатергичес-ких и дофаыинергических ьазханизиов в формировании данных эффектов ДОЖ Впервые показана зависимость изменений позно-тоничес-ких и двигательных реакций от структурных особенностей ДСЖ Показано участие бензодиавепиновых рецепторов ЧВр в регуляции повышенной судорожной готовности и механивках противоэпилепти-ческого действия дназепаиа при пикротоксин-индуцированном кинд-линге. Показана роль ошюидных рецепторов каппа-, дельта- и ыю-типа в формировании олито- акинезии, раавити опиоидной ригидности, а тага® в регуляции судородной готовности «озга. Впервые обнаружено развитие поено-тонических изг^нений при внутриниг-ральном применении соштостатина и нейротензина, показано их противоэпилептическое действие в условиях введения в ЧВр.

Теоретическое и практическое значение работы. В экспериментальных условиях выявлено значение пептидергических механизмов ЧВр в регуляции двигательной активности, поведенческих реакций, а также возбудимости гюзга. Показано участие данного образования в развитии ДСИП-обусловленных эффектов, роль опиоидных механизмов ЧВр- отдельных рецепторов, а таю® рецепторов тахикининов, в частности, вещества П, бензодиазепиновых рецепторов в развитии двигательных изменений и повышенной судорожной готовности. Полученные данные свидетельствуют о том, что ЧВр и, в частности, ее пептидергические иеханизны, являются ванным звеном деятельности антиэпилептической системы мозга Полученные результаты могут служить обоснованием к направленному созданию противоэпидемических препаратов на основе структуры отдельных нейропепти-дов, обладающих противоэпилептическим действием.

Положения, выносимые на защиту.

1. Введение ДСИГГ в ЧЕр приводит к снижению двигательной активности, повышению тонуса мышц, увеличение медленноволнового, парадоксального сна. Данные эффекты пептида реализуются с участием опиоидных и нейролептических механизмов. Структурные аналоги ДСШ. обладающие противоэпилептическим действием, оказывают снижение двигательной активности, в то время как ДСШ-4, облегчающий ЭпА, увеличивает двигательную активность.

2. В реализации эффектов пептидергических механизмов ЧВр на поведение и судорожную готовность принимают участие опиоидные, бензодиааепиновые рецепторы, а также рецепторы тахикининов, в частности, вещества Е Снижение двигательной активности и проти-восудорожное действие наблюдается в условиях стимуляции каппа- опиоидных рецепторов, а повышение двигательной активности и судорожной готовности - при стимуляции тахикининовых рецепторов, мю-опиоидных рецепторов, а также при блокировании бензодиазепи-новых рецепторов.

3. Взедение в ЧВр соштостатина и нейротенвина сопровождается формированием поано-тонических и двигательных расстройств по нейролептическому и ошюидному типу, а также сопровождается снижением судорожной готовности животных.

4. Полученные результаты имеют клиническую релевантность в качестве эквивалентов патогенеза нейропатологических синдромов, характеризующихся соответствующими изменениями двигательной активности и судорожной готовности.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на совместном заседании кафедр нормальной физиологии и морской медицины (Одесса, 1992), 9-й ежегодной конференции по эпилепсии Польского отделения Международной антиэпилептической Лиги (Варшава, 1993), 20-м международном конгрессе по эпилепсии (Осло, Норвегия, 1993).

Обьем и структура диссертации. Работа состоит из введения и обзора литературы, описания методик исследований, заключения, выводов. Общий обьем диссертации составляет 193 страницы машино-

гшсного текста, фактические данные иллюстрированы 30 рисунками и сведены з 10 таблиц. Указатель литературы включает 239 источников, из них 187 - иностранных.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Опыты проведены на 875 крысах-санцах линии Внстар массой 200-300 г. Операционную подготовку животных, стереотаксическуя имплантацию регистрирующих электродов и канюль для микроинъекций осу!?9ствляли по описанной з литературе методике (Я. Бурей и со-авт.1991). Запись биоэлектрических потенциалов осуществляли ш-нополярно на 16-канальном электроэнцефалографе "Мэс11сог"( Венгрия) . Ваутрииозговые введения препаратов осуществляли в условиях свободного поведения 'животных при помощи ыикроиньектора "3x7* (Австралия). Препараты вводили со скоростью 1,0 ыкл/шга в обьеие 0,5 -1,0 мкл. Животным контрольных групп в аналогичных усхозиях вводили 0,9% раствор ИеСЬ. Изучение эффектов внутриниграяьного применения пептидов осущэствляли на двух группах киделзй генерализованной ЗпА - острых генерализованных судорогах, индуцируемых системным введением ко резола (50 ыг/кг) и шгкротокскяа (2,0 мг/кг), а такжз вызываемых с помощью электроиоковго транскорне-ального раздражения (50 мА, 50 Гц, 0,5 с)(3*1пуагс!,1972). Другой моделью был фармакологический киндлинг, который формировали с помощью повторных введений пикротоксина в подпороговой дозе (1,0 иг/кг). Всего осугзэстзляли 21 иньекцио эпилептогена. Определяли латентный период первых судорожных проявлений, генерализованных клонико-тонических судорожных приступов, тягэесть судорог, а также число животных с генерализованными судоролнши реакциями.

Оценку двигательной активности осуществляли катодом суге/ар-яой двигательной активности - по числу колебаний подзияного пола, а такгэ в "открытом поле" (К. С. Лазарэнко и др., 1982; Е Г. Александрова и др., 1984). После разнесения крыс в центре "открытого поля" в течение 2 мин определяли число пересеченных квадратов, вертикальных стоек, заглядываний в отверстия пола. Оценивали такие поведение типа груминга по числу его эпизодов, а тага© компоненты стереотипного поведения - обнюхивания, лизания и грызения. Каталепсию исследовали путем определения времени удерживания животного в неудобной позе, опираясь передниш лапа-

ми на горизонтальную перекладину или в придаваемом положении на боку или спине (Ossowska et al., 1984). Выраженность мышечного тонуса исследовали по сопротивлению конечностей при их пассивном отведении, а также определяли показатель ригидности - обратную величину расстояния от затылка до основания хвоста (Г. ЕКрыжа-новский и др., 1990).

Исследование цикла бодрствование-сон - электрографические и поведенческие реакции у крыс регистрировали в звукоизолированной камере при постоянном уровне искусственного освещения. Выделяли фавы активного бодрствования, иедленноволнового и парадоксального сна, длительность каждой из которых определяли в течение 4 ч непрерывного наблюдения в утреннее время ( Pellegro et al., 1984). В отдельных сериях исследований изучали характер плавательного поведения по Vrijmoed-de Vries, Cools (1986). Пэсле помещения крыс в бассейн (35x45 см) у животных определяли наличие пассивно-адаптивных плавательных элементов - плавание вдоль стенки, плавание кругами вдали от стенки, "топтание" воды в центре, "топтание" воды у стенки, неподвижное погруяэние и неподвижное скольжение. Число данных плавательных элементов изменяется в связи с модуляцией активности дофаиинергических киг-ростриарных волокон (А. А.Щедра и др., 1990).

Оценку поэно-тонических и двигательных реакций осуществляли по методике Myslobodsky et al. (1981). Согласно данной методики, выявляемые у животных проявления могут быть детерминированы опи-оидными или нейролептическими механизмами. К первым относили аналгевию, оцениваемую по ответу животного на защипывание хвоста, наличие экзофтальма, отсутствие роговичного рефлекса, повышение тонуса хвоста, способность удерживать позу "мостик", а также флексорные проявления установки туловищ и конечностей. Отсутствие или противоположный характер названных проявлений свидетельствовали о преобладании нейролептических механизмов двигательных и позных изменений.

У киндлинговых крыс исследовали агрессивное поведение, которое определяли по величине тока необходимого для возникновения драк у попарно ссаживаемых крыс в камере с токопроводящим полом.

Синтез ДСИП и его аналогов осуществлен на базе лаборатории химии пептидов НИИ биоорганической химии им. U. U. Шемякина РАН

ведущим научным сотрудником И. И. Михалевой и м. н. с. И. А. Прудчен-ко. Пептиды растворяли в 0.9Z растворе NaCL непосредственно перед введением. ГЬ завершении опытов производили гистологическую верификацию локализации электродов и канюль, зон повреждений, результаты обрабатывали с применением общепринятых методов статистического анализа (Сепетлиев Д., 1968; Гублер E.R , Генкин А. А., 1973).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Одностороннее применение ДСИП (5-20 мкг) вызывало у крыс контрлатеральные доза-зависимые вращения, устраняющиеся галопери-долом (1,0 мг/кг) н налоксоном (1,0 мг/кг). В условиях билатерального введения ДСИП (10 мкг) в ЧВр у животных наблюдались замирания, во время которых отмечалась горбатость, ощущалось сопротивление при пассивном отведении конечностей. В "открытом поле" у животных регистрировалось снижение числа пересеченных квадратов (на 60Z, Р<0.02), отмечалось снияэние двигательной активности в тесте регистрации колебаний подвижного пола (в 4 рава по сравнению с контролем, Р<0,02) . Во время редких спонтанных или провоцируемых локоыоцкй у крыс отмечалась скованость движений, уменьшение длины пага. Указанные двигательные расстройства регистрировались на протяжении 1-1,5 ч с момента применения пептида. Введение ДСИП в меньшей дозе (5,0 мкг) или его введение в хвостатые ядра не сопровождалось поведенческими изменениями.

В условиях внутргашгралъного введения ДСИП у животных наблюдались изменения цикла бодрствование-сон. У крыс в этих условиях отмечалось уменьшение активного бодрствования животных (на 31Z),(P<0.05), увеличение фазы глубокого недленноволнового (на 20Z, Р<0.05), а тага© парадоксального сна (на 57%, Р<0.05). Указанные изменения цикла сочетались с уменьшением двигательной активности крыс, определявшейся в тесте суммарной акгометрии.

Исследование плавательного поведеши животных по методу Yrijmoed de Vries, Cools (1986) показало, что в условиях билатерального применения ДСИП отмечалось не более двух элементов пассивно- адаптивного плавательного поведения, что было меньше, чем в контроле (Р<0.05). В то же время избегание из бассейна значительно затруднялось или отсутствовало (Р<0.01). Аналогичные из-

менения плавательного поведения наблвдались у крыс в условиях внутринигрального применения 6-оксидофаыина, а также системного введения резерпина.

Таким образом, полученные результаты показали, что в условиях билатерального применения ДСШ у животных отмечалось сниже-неие двигательной активности, увеличение мышечного тонуса, а также увеличение выраженности глубокого медленнозолнового и парадоксального сна Исследование плавательного поведения показало, что в основе эффектов ДСШ может лежать снижение активности дофаминергической системы.

В задачу следующей серии исследований вошло изучение двигательной активности в тесте открытого поля у животных, которым билатерально в ЧВр применяли аналоги ДОИЛ - ДСИП-1 - ДСИП-4 (10 мкг). В условиях введения всех указанных пептидов у животных наблюдалось снижение числа заходов в центральные секторы открытого поля. В то время как большинство пептидов приводило к снижению числа вертикальных стоек (Р<0.01) и не изменяло выраженность груминга (Р>0.05), введение в 40? ДСИП-1, соответственно, не изменяло (Р>0.05) и увеличивало в 4,3 раза (Р<0.01) данные показатели. Применение ДСИП-1 и ДСИП-4 не «вменяло число пересеченных квадратов (Р>0.05). ДСИП-2 и ДСИП-З вызывали более выраженное чем ДСШ снижение числа пересеченных квадратов (Р<0.01).

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что изменение структуры молекулы ДОИЛ сопряжено с избиением выраженности эффектов пептида на двигательную активность и поведение животных.

Задачей следующей части исследований было сравнительное исследование эффектов введения в ЧВр ДСШ и его структурных аналогов на генерализованную ЗпА, вызванную системным применением пикротоксина (2,0 мг/кг). Применение эпилептогена животным в условиях введений ДСШ сопровождалось развитием генерализованных клонических, а также клонико-тонических реакции, латентный период которых бьш большим (на 24Х,Р<0.05), а интенсивность судорог - меньшей (на 20Х, Р<0.01), чем у животных контрольной группы. Пикротоксин-вызванные судороги в условиях введения в ЧВр ДСИП-1 не отличались от соответствиях данных у животных контрольной группы (Р>0.05). Под влиянием ДСИП-2 только у 2 из 9 животных

регистрировались клонико-тонические приступы - интенсивность судорог была меньшей, чем в контроле(на 45Z, Р<0.01), а также меньшей чем у крыс, которым в ЧВр применяли ДОИЛ (Р<0.05). ДСЖ1-3 также приводил к сниганию тяжести судорожных реакций животных (на 172, Р<0.01), в то вреуя как ДСИП -4, наоборот, утяжелял их проявления (на 182, Р<0.01) - у крыс наблюдались повторные генерализованные судорожные реакции.

Таким обравом, приведенные данные показали, что внутриниг-ральное применение структурных аналогов ДСИП колет вызывать как более выраженное по сравнению с ДСНП противосудорожное действие, так и мояоэт сопровождаться облегчением генерализованной судороя-ной активности.

Задачей следующей серии исследований явилось изучение эффектов внутринигрального применения пептида-триптического фрагмента (Ts) белка - ингибитора связывания диавепама (DBI) (10 ыкг) на порог развития агрессивных реакций у крыс с фармакологическим кинддингоы, а такга на судорожную активность вызываемую тестирующим введением животным пикротоксина (1,0 мг/кг). В условиях билатерального введения DBI не изменялась величина силы тока, подаваемого через электродный пол, необходимая для возникновения драк у попарно ссаживаемых крыс (Р>0.05). В то же время, антиагрессивное действие диавепама (1,0 мг/кг) сохранялось в условиях введения DBI в ЧВр. Интенсивность судорожных реакций, вызываемых у киндлинговых крыс в условиях билатерального применения DBI, показало ее увеличение на 302 по сравнению с контролем (Р<0.05). В этих условиях у крыс наблюдались повторные клонико-тонические судорожные приступы. В условиях введения DBI в ЧВр устранялось противосудорожное действие диазепама (1,0мг/кг).

Таким образом, приведенные результаты свидетельствуют о том, что блокирование бензодиазепиновых рецепторов ЧВр с помощью пептида DBI приводит к увеличению выраженности судорожных реакций у крыс, подвергнутых фармакологическому киндлингу, и не изменяет агрессивность животных. Под влиянием блокирования бензодиазепиновых рецепторов ЧВр снижается противосудорожная эффективность диазепама и не изменяется его антиагрессивное действие.

В следующей части исследований изучалось влияние стимуляции разных видов опиоидных рецепторов с помощью динорфина А1-13

(каппа-рецепторы), ОАЮО (мю-рецепторы) и [БЬЕТ (дельта-ошгаид-ные рецепторы) на двигательную активность животных, а также судорожную активность, индуцируемую электрошоком.

Под влиянием введения динорфина А1-13 (10 мкг) в Чвр отмечалось снижение всех исследуемых в "открытом поле" показателей (Р<0.01). При этом у животных отсутствовали вертикальные подъемы и заходы в центральные секторы поля. Сходный эффект отмечался при введении ОАЮО, (10 мкг) и СЫ-£Т, (10 мкг). Однако, в отличие от введения динорфина, в условиях активации мю-рецепторов наблюдалось увеличение эпизодов груминга - в 2,7 раза (Р<0.01), а при активации дельта-рецепторов выраженность груминга не отличалась от таковой у крыс контрольной группы (Р>0.05).

Тестирование судорожных проявлений, вызываемых электрошоком в условиях билатерального введения в динорфина А1-13 (10 мкг), показало подавление как тонической фазы судорог, так и снижение длительности клоннческой судорожной реакции (Р<0.01). В условиях аналогичного применения ОАШО, (10 мкг), увеличивалась продолжительность тонической фазы судорожного синдрома (Р<0.01), при введении ОБЬЕТ (10 мкг) вызванные электрошоком судороги не отличались от таковых у животных контрольной группы (Р>0.05).

Таким образом, приведенные данные показали, что в условиях стимуляции разных видов опиоидных рецепторов ЧВр у крыс снижается двигательная активность. Наиболее выраженное действие, в том числе и противосудорожное, отмечается при активации каппа-рецепторов. В условиях активации мю-рецепторов возрастает интенсивность тонических судорожных реакций, усиливается груминг.

Задачей следующей серии исследований явилось изучение эффектов введения вещества П в ЧВр на двигательную активность и поведение крыс в тесте "открытое поле", а также на судорожную активность, индуцируемую системным введением пикротоксина.

В условиях билатерального применения вещества П (5.0 и 10.0 мкг) у крыс отмечались жевания, обнюхивания, грызения, частые эпизоды груминга. Все исследовавшиеся показатели "открытого поля" возрастали по сравнению с аналогичными показателями у крыс контрольной группы (Р<0.01). Пикротоксин-вызванные (2,0 мг/кг) судороги в условиях введения вещества П в дозе 10 мкг характеризовались укорочением латентного периода первых и максимальных

судорожных реакций, соответственно, на 332 (Р<0.05) и 402 (Р<0.01) по сравнению с соответствующими показателями у животных контрольной группы. У животных отмечались повторные генерализованные клонико-тонические реакции - интенсивность судорожных проявлений была больше таковой в контрольных наблюдениях на 272 (Р<0.05) и 56,72 (Р<0.01), соответственно, при введении вещества П в дозах 5,0 и 10,0 мкг.

Таким образом результаты данной части исследований свидетельствуют о том, что внутринигральное применение вещества П усиливает двигательную активность крыс, вызывает стереотипные поведенческие реакции и повышает судорожную готовность мозга

Задачей следующей части исследований было изучение влияния введения в ЧВр соггатостатина, а также нейротен8Ина на поведение, двигательную активность крыс, а также на генерализованную судорожную активность, вызываемую системным введением коразола и пикротоксина

В условиях внутринигрального применения соматостатина в дозе 1,0 мг/кг отмечалось снижение числа заходов животных в центр открытого поля (Р<0.01); остальные исследовавшиеся показатели не отличались от таковых у животных контрольной группы (Р>0.05). Более высокая доза пептида СЮ мг/кг) вызывала полную редукцию горизонтальной и вертикальной двигательной активности при сохранении груминга В этих условиях животные принимали характерную позу - запрокидывали голову и вытягивали вперед передние конечности; способность длительное время (более 30 с) удерживать неудобную позу отмечалась на протяжении 68.7+6.2 мин с 'момента пршйнения пептида, что превышало соответствующий показатель при введении пептида в гшшокамп, миндалину и желудочки мозга (Р<0.01). В условиях билатерального применения соматостатина (10 мг/кг) пикротоксин-вызванные судороги характеризовались более продолжительным латентным периодом первых судорожных реакций (Р<0.01); у крыс отсутствовали генерализованные клонико-тоничес-кие проявления, интенсивность судорожных реакций была меньшей, чем в контроле (Р<0.01). В условиях коразол-провоцированной эпилептической активности у крыс наблюдались клонические судороги мышц туловищ и передних конечностей - их интенсивность была меньшей, чем у животных контрольной группы (Р<0.05).

Под влиянием билатерального введения в ЧЕр нейротензина (10 ыкг) у животных наблюдалось снижение числа пересеченных квадратов, подъемов животных на задние лапы, а такие числа заходов в центральные секторы открытого поля (Р<0.01). При этом не изменялась выраженность грушнга (Р>0.05). Пикротоксин-вызванные (2,0 мг/кг) судорожные проявления характеризовались клоническими судорогами мыпщ всего тела, а также генерализованными клони-ко-тоническими судорожными реакциями у части (3 из 7) животных. Интенсивность судорожных проявлений была меньше таковой у животных контрольной группы (Р<0.05). В условиях провокации судорожных реакций применением коразола (50 мг/кг) латентный период первых судорожных проявлений превышал аналогичный показатель у крыс контрольной группы (Р<0.05); у крыс регистрировались единичные судорожные вздрагивания и отдельные кдонические судороги мышц туловища и конечностей. Интенсивность судорог была ниже таковой у крыс контрольной группы (Р<0.01).

Таким образом, результаты данной части исследований показывают, что под влиянием внутринигрального применения соматостати-на и нейротензина происходят угнетение двигательной активности и судорожной готовности животных. Противосудорожное действие отмечается в отношении как шкротоксин-» так и коравол-вызванных судорог, Цри этом, если на модели корааол-вызванных судорог большее противосудорожное действие оказывал кейротензин, то в условиях судорожного синдрома, шдущфовакного пикрстоксином, более высокая эффективность наблюдалась при применении соыатос-татина. Установленная Zhang et al. (1989) нечувствительность ко-разол-вызванных судорожных проявлений к внутринигральному введению ГАМК-мю&зтиков и высокая эффективность бензодиазепиновых агонистов в данных условиях моделирования ЗпА позволяет полагать, что возможным механизмов действия нейротензина при его введении в ЧВр является активация бензодиазепиновых рецепторов.

выводы

1. ЧВр представляет собой структуру мозга, модулирующую судорожную готовность мозга, а также поведение и двигательную активность животных на основе интеграции пептидергических влия-

- 14 -

кий и формирования эфферентных нейромедиаторных эффектов.

2. Введение ДСИП в ЧВр снижает судорожную активность, провоцируемую системным введением эпилептогенов, и вызывает увеличение мышечного тонуса, снижение двигательной активности увеличение длительности медленноволнового и парадоксального сна. Развитие указанных эффектов пептида обусловлено стимуляцией опиатергических механизмов ЧВр и снижением нигростриарных дофа-минергических эффектов.

3. Аналоги ДСИП, оказывающие угнетение генерализованной ЭпА при их введении в ЧВр - ДСИП-2 и ДСИП-3, вызывают также развитие опиат-обусловленных поено-тонических и двигательных реакций, угнетают двигательную активность животных. ДСИП-4, усиливающий ЭпА, приводит к развитию преимущественно нейролептической каталепсии, не изменяет двигательную активность и усиливает груминг.

4. Бензодиазепиновые рецепторы ЧВр участвуют в механизмах противосудорожного действия диавепама. Внутринигральное применение блокатора Оенводиазепинозых рецепторов - триптического фрагмента белка Ts (DBI) усиливает интенсивность реакций у киндлин-говых животных, снижает противосудорояную эффективность диавепама DBI не оказывает влияния на двигательную активность и агрессивно-оборонительное поведение тавотных.

5. Стимуляция дельта-опиоидных рецепторов ЧВр введением DSLET, каппа-рецепторов динорфином А1-13 и мю-опиоидных рецепторов DAM30 приводит к снижению двигательной активности животных, изменению позно-тонических реакций по типу опиоидной ригидности. Стимуляция каппа-рецепторов сопровождается развитием Противосудорожного эффекта, в то время как мюрецепторов - усилением генерализованной ЭпА, вызываемой электрошоком. Активация дельта-опиоидных рецепторов не оказывает эффекта на ЭпА. В условиях активации мю-опиоидных рецепторов усиливаются стереотипные реакции.

6. Введение в ЧВр вещества П приводит к увеличению стереотипного поведения и двигательной активности животных, развитию нейролептических изменений поено-тонических реакций. Под влиянием данного пептида происходит повышение судорожной готовности.

7. Внутринигральное введение соматостатина сопровождается выраженными изменениями позы и снижением двигательной активности

животных; в структуре поено-тонических двигательных реакций преобладают проявления нейролептической каталепсии, наряду с усилением выраженности некоторых опиоидных компонентов. У животных отмечается снижение судорожной готовности по отношению к системному применению эпилептогенов.

8. Введение в ЧВр нейротенаина сопровождается развитием поено-тонических двигательных реакций по нейролептическому типу, снижением двигательной активности, а также снижением судорожной готовности животных по отношению к коразолу и пикротоксину.

9. Наиболее выраженные изменения позы и двигательной активности у животных наблюдается при введении в ЧВр соматостатина, динорфина А1-13 и вещества П. Введение в ЧВр ДСИП-2, динорфина А1-13 и ДСЮ1 вызывает выраженные противоэпидемические эффекта

СПИСОК ПЕЧАТНЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Влияние дельта сон-индуцирупцрго пептида на судорожную активность // йюиол. зхурн. им. M. М. Сеченова. -1992. -Т. 78, N5. -С. 16-30 (В соавт. с А.А.Шандрой, JL С. Годлевским, А.А.Лобенко, А. Ы-Наварати и И. И. Михалевой).

2. Contrai antleplleptio aotlon of delta sloop-lnduclnsr peptide analogs and fragments // Proc. of the 20-th International Epilepsy Congress. -1993 (в соавт. с А. А. Пйндрой, JL С. Годлевским, А. А. Ыаварати, IL И. Ыихалэвой и НА. Прудченко).

3. Влияние внутришвгового введения соматостатина и нейро-тензкна па двигательные корреляты судорожной активности // 2нви-ологкч. журнал. -199а -Т. 39,N2. -С. 15-21 (В соавт. с А.А.Шанд-рсй, JL С. Годлевским и Р. С. Вастьяновым).

4. Иовно-поведеачоскке Еарупкг-п'д при внутримоэговых введениях соматостатина и нэйротзквина // йаиол. журнал. -1993. -Т. 39, N2. -0.27-31. (В соавт. с А.А.Шаядрой, JL С. Годлевским, Р. С. Вастьяновым и А. А. Олайником).

5. Peptidergic mohanisms of pars reticulata substantia nlfirra (SNR) in suppression of eptloptlo activity // IX-th Conference on Epilepsy, Warsaw, May 13-15. -199a -P. 78. (В соавт. с А. А. Шандрой, JL С. Годлевским, А. А. Лобенко, И. А. Тк&чэнко я P. С. Вастьяновым).