Автореферат и диссертация по медицине (14.00.14) на тему:Прогностическая роль маркера LU-BCRU-G7 при ранних стадиях рака молочной железы pT#31-2#1N#30#1M#30#1
- Ученая степень
- кандидата медицинских наук
- ВАК РФ
- 14.00.14
Оглавление диссертации Шинкарев, Сергей Алексеевич :: 2004 :: Москва
ВВЕДЕНИЕ.
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
ИММУНОФЕНОТИПИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ, АССОЦИИРОВАННЫЕ С ПРОГНОЗОМ НА РАННИХ СТАДИЯХ ЗАБОЛЕВАНИЯ
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.
Глава 3. Экспрессия терминального дисахарида ваф 1 -3 С1сЫАс, выявляемого моноклональными антителами Ьи-ВС1Ш-07, при ранних стадиях рака молочной железы Т^гМоМо.
Глава 4. Влияние клинико-морфологических характеристик рака молочной железы на прогноз заболевания при рТ].2 N0 М0 стадиях.
Глава 5. Прогностическое значение экспрессии ва1р 1-3GlcNAc, выявляемого моноклональными антителами Ьи-ВС1Ш-07, при раке молочной железы начальных стадий рТ^Мо М0.
Введение диссертации по теме "Онкология", Шинкарев, Сергей Алексеевич, автореферат
Актуальность темы исследования.
Рак молочной железы в структуре заболеваемости злокачественными новообразованиями женского населения России в 1996 году занял первое место и второе по смертности (Трапезников H.H., Аксель Е.М. 1998 г.). Рак молочной железы является гетерогенным заболеванием, течение которого варьирует у разных больных от высоко агрессивного до относительно доброкачественного.
В настоящие время тактика лечения напрямую зависит от установленной стадии опухолевого процесса. Общепринятой является система стадийной классификации по размерам первичной опухоли, поражению регионарных лимфатических узлов, наличию отдаленных метастазов (TNM).
Развитие диагностики и все большая информированность женщин ведет к тому, что рак молочной железы выявляется на более ранних стадиях.
Для прогнозирования течения и выработки рациональной лечебной тактики используются различные маркерные признаки, которые по своей сути связаны с биологическими особенностями опухолей.
При десятилетнем сроке наблюдений за больными, отнесенными к категории T1.2N0M0, отдаленные метастазы выявлены у 28,1% пациенток, не получавших адыовантного системного лечения (Семиглазов В.Ф., 1998г). Эта группа больных в настоящее время, при планирования лечения, может быть определена с высокой степенью достоверности после детального исследования опухоли и комплексного учета известных прогностических факторов, включая оценку степени злокачественности по Блюму-Ричардсону, пролиферативной активности по фракции клеток в S -фазе, анеуплоидии, инвазии кровеносных и лимфатических капилляров, определения ряда онкогенов (IIER2\neu, мутации гена р53), изучения факторов ангиогенеза и рецепторов к стероидным гормонам. Больные, отнесенные к группе «умеренного риска», нуждаются в адыовантном лечении, объем которого определяется индивидуально с учетом признаков, характеризующих опухоль и организм пациента (размер опухоли, ее гормоночувствительность, репродуктивный статус, возраст больной и т.д.) (Goldhirsch А., et al., 2003 г.)
Имеющийся опыт свидетельствует о том, что ни один из выше перечисленных факторов или даже их комбинация не могут обеспечить точный прогноз заболевания для конкретной больной (Моисеенко В.М., 1998г).
Современным направлением в разработке новых подходов к прогнозированию течения рака молочной железы на ранних стадиях является поиск опухолеспецифических антигенов, экспрессия которых не отмечается в ткани нормальной молочной железы, но наблюдается при раке. Были созданы моноклональные антитела (МКА) с целью определения подобных антигенов, оценена их роль в качестве независимых факторов прогноза. Однако большинство известных моноклональных антител определяют муцины с высоким молекулярным весом, которые, присутствуя в большом числе карцином, определяются и в нормальной ткани молочной железы.
Исследуя в качестве факторов прогноза при помощи моноклональных антител опухолеассоциированные антигены, обнаружили, что HMFG1 и NCRC11 определяют антигены, связанные с дифференцировкой опухолевых клеток (Baldam A.D., 1988; Walker R.A., 1990).
Экспрессия антигена СаМВг8 связана с метастазами в лимфоузлы, высокой митотической активностью и усилением экспрессии егЬВ-2. Лектин Helix pomatia связан с прогнозом вследствии корреляции с состоянием лимфатических узлов (Walker R.A., 1993). Исследования антитела МашЗЬ показали, что оно дает прогностическую информацию, но не лучше стандартных методов (Rasmussen В.В., 1985), а группа антител Маш 6 не обеспечивает прогностической информации (Walker R.A., 1993).
P.D. Rye и R.A.Walker в 1994 году сообщили о создании моноклоналыюго антитела LU-BCRU-G7, определявшего новый связанный с опухолью молочной железы гликопротеин массой Mr 230000. Этот гликопротеин выявлялся в 72% случаев рака молочной железы и не определялся в доброкачественной ткани молочной железы, включая атипичную протоковую гиперплазию. Не было обнаружено связи между реактивностью моноклоналыюго антитела и состоянием стероидных рецепторов, стадией или состоянием регионарных лимфоузлов. При этом была выявлена связь между отсутствием реакции с LU-BCRU-G7 и большим безрецидивным периодом, а так же, в меньшей степени, выживаемостью.
Особый интерес вызывает то, что LU-BCRU-G7 определяет различия внутри группы больных без метастазов в регионарные лимфоузлы (No).
Последующие исследования позволили установить химическую природу антигена — терминальный дисахарид Galßl-3GlcNAc, а также возможности клинического использования моноклональных антител к этой детерминанте для очистки биологических жидкостей от контаминации опухолевыми клетками (Власова Е.В., 1997; Rye P.D., 1995).
Учитывая тот факт, что дисахаридный антиген Galßl-3GlcNAc, выявляемый моноклональными антителами LU-BCRU-G7, является опухолеассоциированным маркером клеток рака молочной железы, и его экспрессия взаимосвязана с прогнозом заболевания, представляется актуальным оценить взаимосвязь между экспрессией антигена, выявляемого моноклональными антителами LU-BCRU-G7, иммунофенотипической и морфологической характеристиками опухоли, а также. результатами лечения рака молочной железы Т^Т^Мо, то есть определить ценность моноклонального антитела Ы1-ВС1Ш-07 как прогностического маркера.
Цель работы: изучить роль антигена, выявляемого моноклональными антителами Ьи-ВС1Ш-07, как прогностического маркера, при ранних стадиях рака молочной железы (рТ^МоМо).
Задачи:
1. Изучить экспрессию углеводного антигена, выявляемого моноклональными антителами Ьи-ВС1Ш-07, при раке молочной железы ранних стадий (рТ^Т^Мо).
2. Оценить клинические особенности Ьи-ВС1Ш-07-позитивного рака молочной железы ранних стадий.
3. Изучить взаимосвязь экспрессии антигена, выявляемого моноклональными антителами Ьи-ВС1Ш-07, с морфологическими особенностями рака молочной железы ранних стадий (гистологический вариант, степень злокачественности, выраженность лимфоидной инфильтрации опухоли, наличие инвазии опухолевыми клетками сосудов, степень дифференцировки опухолевых клеток).
4. Представить детальную иммунофенотипическую характеристику рака молочной железы ранних стадий (рТь гЫоМо) в ее взаимосвязи с экспрессией маркера Ы1-ВС1Ш-07.
5. Оценить роль экспрессии маркера, выявляемого моноклональными антителами Ьи~ВСЯи-С7, в прогнозе рака молочной железы ранних стадий (рТ^МоМо).
Научная новизна.
В работе впервые изучены клинические, морфологические и иммунофенотипические особенности рака молочной железы ранних стадий, характеризующегося экспрессией маркера LU-BCRU-G7. Наличие на опухолевых клетках рака молочной железы специфической антигенной детерминанты — терминального дисахарида Galßl-3GlcNAc, выявляемого моноклональными антителами LU-BCRU-G7, имеет достоверную взаимосвязь с размером опухоли более 3 см в пределах стадии PT2N0M0. Показано, что опухоли, позитивные в реакции с моноклональными антителами LU-BCRU-G7, не имеют специфических морфологических особенностей. Установлена достоверная взаимосвязь экспрессии дисахарида Galßl-3GlcNAc с наличием трансферринового рецептора CD71 на клетках рака молочной железы стадий pTi^NqMq. Рак молочной железы ранних стадий, при котором в ходе прогрессирования, развиваются метастазы в легкие, характеризуется достоверно более частой экспрессией дисахаридного антигена, выявляемого моноклональными антителами LU-BCRU-G7.
Научно-практическая значимость.
В работе впервые установлено, что экспрессия дисахарида Galßl-3GlcNAc, выявляемого моноклональными антителами LU-BCRU-G7, на опухолевых клетках существенно ухудшает безрецидивную выживаемость больных раком молочной железы ранних стадий (pTi2NoMo).
Достоверное влияние на прогноз отмечается только при опухолях III степени злокачественности, опухолях низкой или умеренной степени дифференцировки или опухолях, характеризующихся умеренной или выраженной инфильтрацией лимфоидными клетками.
Прогностическая роль экспрессии антигенного дисахарида нарастает по мере увеличения длительности безрецидивного периода.
Эти данные позволяют выделять группу неблагоприятного прогноза среди больных раком молочной железы ранних стадий рТ^ТМоМо, что может быть использовано для индивидуализации лечебных подходов у этой категории пациенток.
Учитывая неблагоприятную роль экспрессии дисахарида Оа1(31-301сЫАс, выявляемого моноклональными антителами Ьи-ВС1Ш-07, при ранних стадиях рака молочной железы в определенных категориях пациенток, перспективным представляется, исходя из полученных в работе данных, проведение иммунотерапевтических исследований, направленных на создание вакцины на основе специфического дисахарида Оа1[31-ЗС1сЫАс или на разработку лечебных антител на основе 1ХГ-ВС1Ш-07.
Заключение диссертационного исследования на тему "Прогностическая роль маркера LU-BCRU-G7 при ранних стадиях рака молочной железы pT#31-2#1N#30#1M#30#1"
ВЫВОДЫ
1. Онухолеспецифический терминальный дисахаридный антиген Саф1-ЗС1с№Ас выявляется с помощью моноклональных антител 1Л1-ВС1Ш-С7 при раке молочной железы начальных стадий рТ1-2ШМ0 в 56% случаев. Реакция варьирует как по интенсивности, так и по числу позитивных клеток.
2. Рак молочной железы, позитивный в реакции с Ш-ВС1Ш-С7, не имеет клинических и морфологических особенностей. Экспрессия антигена характерна для опухолей размером более 3 см.
3. Маркер не 1шеет взаимосвязи с экспрессией на клетках рака молочной железы молекул НЬА-1, НЬА-ЭК, МиС-1 (1СО-25), С029, а также уровнями лимфоиднон (СБ45+), Т-клеточной (СЭ7+) и макрофагальной (СЭ163+) инфильтрации опухоли. Наблюдается достоверная ассоциация реакции Ы1-ВС1Ш-С7 с экспрессией рецептора трансферрина (СЭ71) на опухолевых клетках.
4. Результаты лечения ранних стадий рака молочной железы рТьз^Мо характеризовались 5-летней безрецндивной выживаемостью 70,6±4,8%, общей выживаемостью 80,5±4,3%. Ни одни из клинико-морфологичеекпх показателей (за исключением размера опухоли > Зсм) ие имел достоверной связи с прогнозом.
5. Экспрессия на опухолевых клетках дисахарида, выявляемого моноклональными антителами ЫГ-ВСШ!-в7, существенно ухудшает безрецидивную выживаемость больных ранними стадиями рака молочной железы (различия близки к достоверным).
6. Экспрессия антигена Са1|31-ЗС1с№Ас на клетках рака молочной железы имеет взаимосвязь с последующим развитием у больных метастазов в легкие.
7. При длительных сроках наблюдения достоверное ухудшение безрецидивной выживаемости в группе Ы1-ВС1Ш-07-позитивного рака молочной железы отмечается на ранних стадиях рТ1-2№)М0, характеризующихся 3 степенью злокачественности, умеренной и выраженной лимфоидной инфильтрации опухоли, умеренной или низкой степенью дифференцировки.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
В лечении рака молочной железы достигнуты немалые успехи. Они заключаются в создании новых классов химиотерапевтических средств, гормональных препаратов и даже клиническом применении лечебных моноклональных антител (герцептин). В этой связи все большее значение приобретает, наряду со стандартными подходами, индивидуализация лечения с учетом рецепторного статуса гормонов, а также рецепторов ростовых факторов (Her-2neu).
Вместе с тем, результаты лечения рака молочной железы, как на ранних, так и на распространенных стадиях, вряд ли можно назвать утешительными. Нуждается в совершенствовании система стадирования с определением микрометастазов у больных, совершенно не задействован потенциал иммунотерапии при данном заболевании. Актуальной является проблема поиска таких маркеров опухолевых клеток, экспрессия которых имеет связь с клиническим течением и прогнозом.
По этим причинам наше внимание привлекла статья норвежских авторов Rye & Walker (1994), которые представили результаты большой работы по созданию диагностикумов, способных определять опухолеспецифические антигены на клетках рака молочной железы человека. Авторы прошли долгий путь от получения антисыворотки до выделения специфического иммуногена in vitro, иммунизации in vitro и создания уникальных моноклональных антител LU-BCRU-G7. Характеристика специфической детерминанты, распознаваемой этими антителами, была достаточно сложна. Удалось установить, что эта детерминанта углеводной природы, которая присутствует в составе высокомолекулярного гликопротеина с мол. массой 230 кДа. Опыты с обработкой гликозидазой показали, что во взаимодействии с моноклональными антителами Ьи-ВС1Ш-07 участвует терминальная р1-3 или Р1-4 галактоза.
Антитела имели уникальный характер взаимодействия с клетками молочной железы: реакция не отмечалась в норме и при доброкачественных образованиях в молочной железе, но с высокой частотой обнаруживалась при раке.
Подобный спектр реактивности привлек внимание отечественных ученых-химиков профессора Н.В.Бовина и Е.В.Власовой. Использование разработанного ими уникального подхода с сорбированными на полиакриламиде синтетическими олигосахаридами позволило установить точную природу антигена - терминальный дисахарид Оа1р1-ЗС1сКАс или Ьес (Власова Е.В., 1997). В норме этот дисахарид присутствует в составе гликопротеинов мембран клеток человека, но он не является доступным для антител, так как обычно скрыт другими углеводными детерминантами или в силу особенностей конформации углеводных цепей. Нарушение процессов гликозилирования при раке ведет к обнажению этого дисахарида, он становится доступным для антител и иммуногенным.
В дальнейшем совместные работы российских и норвежских ученых были продолжены, в ходе их проведения была установлена мембранная экспрессия антигена на раковых клетках и возможность очистки с помощью моноклональных антител различных биологических жидкостей организма человека, больного раком молочной железы, от опухолевых клеток.
Уже в первых публикациях по клиническому использованию этих моноклональных антител для иммунологического изучения рака молочной железы была показана высокая частота экспрессии Са1р1-301сЫАс (более 70% случаев). Особый оптимизм вызывало то, это экспрессия данной иммуногенной молекулы (потенциальная мишень для иммунотерапии) при ранних стадиях рака молочной железы (I - II стадии, больные с индексом
N0) позволяла выделить группу больных с неблагоприятным прогнозом (более короткая общая и безрецидивная выживаемость).
Эти сведения привлекли наше внимание, и мы решили провести исследование прогностической роли использования моноклональных антител LU-BCRU-G7 в иммуногистохимической диагностике рака молочной железы. Антитела были любезно предоставлены д-ром Phil Rye (Норвегия). Для исследования были отобраны 89 больных раком молочной железы начальных стадий pTi.2N0 М0, радикально прооперированных в Липецком областном онкологическом диспансере в 1994-95 гг. Таким образом, продолжительность наблюдения за больными составила более 8 лет. В другой группе пациенток (28 больных) антиген был изучен на криостатных срезах опухолей, что позволило дать подробную иммунофенотипическую характеристку опухолей, позитивных в реакции с антителами LU-BCRU-G7.
Клиническая характеристика больных, включенных в исследование, свидетельствовала о том, что на ранних стадиях рака молочной железы (I-На) какие-либо надежные маркеры прогноза отсутствуют. Неблагоприятным течением характеризовались, однако, опухоли размером более 3 см. Это подтверждает обоснованность поиска новых биологических маркеров опухолевых клеток, ассоциированных с прогнозом на ранних стадиях рака молочной железы.
Экспрессия терминального дисахарида Galpl-3GlcNAc наблюдалась более чем в половине случаев (56%) и характеризовалась выраженной гетерогенностью как по интенсивности экспрессии антигена, так и по количеству антигенпозитивных клеток (от незначительного числа до мономорфной реакции).
Интересно отметить, что из числа клинико-морфологических показателей при раке молочной железы ранних стадий только размер опухоли коррелировал с экспрессией дисахарида Gaipi-3GlcNAc. При опухолях размером более 3 см как правило наблюдалась экспрессия антигена, в то время как при отсутствии реакции с МКА Ьи-ВС1Ш-07 опухоли превышавшие Зсм выявлялись лишь в 7,9% случаев. Применение направленных статистических оценок для качественных непорядковых переменных (коэффициент неопределенности) показало, что с наибольшей вероятностью независимой переменной в данном случае является экспрессия дисахарида 0аф1-301сКАс. Иными словами, размер опухоли, являющийся наиболее важным по нашим данным фактором прогноза при раке молочной железы ранних стадий, может зависеть от экспрессии на раковых клетках дисахарида. Этот вопрос нуждается в детальном изучении, так как на сегодняшний день не понятно, что является решающим фактором, определяющим подобную взаимосвязь, особенности роста 0а1р1-301сМАс-гюзитивных опухолей или их взаимоотношение с иммунной системой организма. Для углеводных антигенов опухолевых клеток особенности иммунореактивности организма могут иметь решающее значение так как хорошо известно, что именно на эти детерминанты, являющиеся мощными иммуногенами, развивается антительный ответ, результатом которого может быть разрушение единичных циркулирующих или микрометастатических клеток с помощью различных эффекторных механизмов. Иммуногенность дисахарида Оа1р1-ЗС1сМАс не вызывает сомнений, свидетельством тому является сам факт получения моноклональных антител Ы7-ВС11и-С7.
Что касается возможных взаимоотношений экспрессии дисахарида с иммунной реакцией организма на опухоль, то этот вопрос сложен и мы не располагали точными подходами для его изучения - это не входило в задачи исследования. Рассмотренные нами признаки, такие как уровень лимфоидной инфильтрации опухоли, оцениваемый на гистологических срезах, инфильтрация опухоли Т-лимфоцитами, изучаемая иммуногистохимически, указывали на отсутствие достоверной взаимосвязи экспрессии дисахарида Galßl-3GlcNAc с Т-клеточной реакцией. Возможно, более информативной, учитывая специфику индукции гуморального иммунного ответа углеводными антигенами, была бы оценка интратуморальных B-клеток и плазмоцитов. Косвенным указанием на то, что экспрессия дисахарида Galßl-3GlcNAc имеет неоднозначное отношение к прогнозу заболевания на ранних стадиях рака молочной железы является то, что при опухолях 1 степени злокачественности и высокодифференцированных раках мы не наблюдали ухудшения результатов лечения в С7-позитивной группе больных. Напротив, анализ кривых выживаемости свидетельствовал о несколько более благоприятном прогнозе в этих случаях, что, однако, не являлось достоверным.
Общей закономерностью явилось то, что экспрессия G7 ухудшала прогноз рака молочной железы ранних стадий. Детальный анализ причин этого явления показал, что антиген прогностически не благоприятен при раке III степени злокачественности и цитологически низкодифференцированных опухолях. Особенно отчетливо неблагоприятная роль дисахарида Galßl-3GlcNAc проявляется при длительных сроках наблюдения. В работе Rye & Walker (1994) показано, что влияние антигена на прогноз наибольшее после 42 мес наблюдения. Используя более однородную по клиническим показателям группу больных с ранними стадиями рака молочной железы (больные, имеющие IIb стадию, не включались в исследование) и большую длительность наблюдения за больными (в среднем 96,2 ±3,7 мес. в нашей работе; в цитируемой статье Rye & Walker прослеженность составила в среднем 35 мес.), нам удалось установить временной интервал после операции, в котором маркер G7 является информативным. Судя по кривым выживаемости, неблагоприятная прогностическая роль антигена реализуется через 3 года наблюдения, в максимальной степени - через 5 и более лет. Однако статистические расчеты показывают, что наиболее достоверные различия в безрецидивной выживаемости между Galpl-3GlcNAc-no3iiTHBHori и Gaipi-3GlcNAc-HeraTiiBHHoft группами наблюдаются при исключении из анализа группы больных, у которых прогрессирование рака молочной железы наступило в течение первого года после выполнения радикальной операции. Эта группа больных представляет собой серьезную проблему с точки зрения правильности определения стадии рака молочной железы при первичной диагностике. Совершенно очевидно, что у больных раком молочной железы, у которых метастазы и рецидивы выявляются в течение 12 мес. после операции, осуществлять прогноз на основании экспрессии G7 не представляется возможным. Подобные наблюдения хорошо согласуются с ролью углеводных детерминант в прогрессии рака. Сам факт появления отсутствующих в норме на поверхности клетки углеводных детерминант является отражением нарушения процессов гликозилирования при раке и служит одним из проявлений опухолевой прогрессии в целом. Реализация неблагоприятной роли неоэкспрессии ряда углеводов осуществляется за счет контактных взаимодействий антиген-позитивных клеток с клетками и стромой различных органов. Дело в том, что многие улеводные детерминанты являются лигандами клеточной поверхности для взаимодействия с различными лектинами и адгезинами. Прикрепившаяся за счет этих взаимодействий к субстрату опухолевая клетка имеет преимущества в выживании и реализации метастатического потенциала. Именно по этим причинам в настоящее время активно (пока еще, в основном, на предклиническом уровне) разрабатывается направление исследований, связанное с введением антител к углеводным антигенам или с вакцинацией этими антигенами (Livingston P.O. et al., 2002). Цель подобных работ заключается в том, чтобы заблокировать углеводные детерминты на опухолевой клетке с помощью антител и, тем самым, предотвратить взаимодействие Сахаров с лектинами клеток различных органов. Таким образом, предотвращается рост метастазов и ухудшается выживание разносимых с током крови раковых клеток. Совершенно очевидно, что подобные преимущества в росте углеводы клеточных мембран раковых клеток могут дать единичным циркулирующим клеткам, приклепление которых к субстрату в различных органах может дать рост и манифестацию метастазов спустя длительные сроки наблюдения. Именно подобную ситуацию мы наблюдаем на примере экспрессии дисахарида Са1р1-ЗС1с1ЯАс: прогностическая роль антигена реализуется спустя годы после выполнения радикальной операции.
Относительно субстрата, то есть клеточного рецептора и или молекулы адгезии неклеточной стромы, с которым взаимодействует дисахарид Оаф1-ЗС1сКАс, на сегодняшний день нет полной ясности. Результаты нашей работы указывают на то, что вероятнее всего, комплементарная для дисахарида Са1р1-ЗС1сЫАс структура располагается в ткани легкого. Об этом свидетельствует высокая степень ассоциации между экспрессией антигенов и развитием метастазов в легких у больных раком молочной железы начальных стадий в сроки, превышающие 12 мес после проведения радикальной операции.
Одним из интересных и в определенной степени неожиданных результатов нашей работы явилось установление прогностической роли дисахарида 0а1р1-301с1>ТАс только в группе пациенток, у которых отмечена умеренная или выраженная инфильтрация опухоли лимфоидными клетками. Прогностическая роль подобной инфильтрации при раке молочной железы не совсем ясна: есть данные о благоприятном влиянии на прогноз выраженной лимфоидной инфильтрации (как отражение реакции иммунной системы), есть противоположные данные. Целенаправленный анализ субпопуляций интратуморальных лимфоцитов позволил установить, что на ранних стадиях рака молочной железы решающее значение имеет не столько общая выраженность лимфоидной инфильтрации, сколько уровень Т-киллерных (CD8+) интратуморальных лимфоцитов. Именно этот показатель является определяющим в прогнозе безрецидивной выживаемости больных на ранних стадиях рака молочной железы (Артамонова Е.В., 2003). Косвенным подтверждением того, что выраженность лимфоидной инфильтрации не во всех случаях может ассоциироваться с благоприятным прогнозом, являются данные по оценке взаимосвязи этого фактора с наличием микрометастазов в костном мозге больных операбельным раком молочной железы. Как оказалось, наличие микрометастазов в костном мозге положительно коррелирует с выраженностью лимфоидной инфильтрации опухоли (Крохина О.В., 2003). Биологические основы данной ассоциации на сегодняшний день не совсем понятны. Полученные нами данные дают основание для выделения группы неблагоприятного прогноза при ранних стадиях рака молочной железы рТ]. 2N0M0 на основе обнаружения экспрессии дисахарида Galßl-3GlcNAc. Это совершенно новый показатель и ранее указаний на прогностическую роль дисахарида Galßl-3GlcNAc при раке молочной железы ранних стадий в зависмости от уровней лимфоидной инфильтрации опухоли опубликовано не было.
И, наконец, чрезвычайно важной, интересной и новой явилась установленная в работе достоверная ассоциация экспрессии дисахарида Galßl-3GlcNAc с наличием на опухолевых клетках трансферринового рецептора CD71. Неблагоприятная роль этого антигена при раке молочной железы была показана в целом ряде работ (Тупицын H.H. и соавт., 2001; Васильев М.Б., 2001). Установлено, что маркер информативен в прогнозе и на ранних стадиях рака молочной железы при отсутствии метастазов в регионарные лимфатические узлы (Артамонова Е.В., 2003). Этот белок (CD71) давно привлекает к себе внимание, поскольку, исходя из экспериментальных данных, полученных на животных, и из данных о нормальной функции в транспорте железа, можно предполагать важную роль данного маркера в прогрессии рака молочной железы. Прогностическая роль ТФР, так же как и дисахарида Galpl-ЗGlcNAc выявлется, как правило, при длительных сроках наблюдения за больными и не реализуется в течение первого года после хирургического удаления опухоли. Можно предположить, что маркеры СБ71 и дисахарид Оа1Р1-ЗСкИАс являются взаимодополняющими и их одновременное появление на клетках рака молочной железы в ходе опухолевой прогрессии является чрезвычайно неблагоприятным показателем. Клетки, экспрессирующие дисахарид СаЩЬЗСЬЫАс, имеют большую вероятность связаться субстратом (клетками и стромой различных органов) за счет углевод-лектиновых взаимодействий. В свою очередь, экспрессия на них рецептора трансферрина способствует выживанию этих клеток в условиях ограниченных факторов питания, что убедительно доказано в ряде экспериментальных работ, представленных нами в обзоре литературы.
И еще одно сходство в прогностической роли С071 и дисахарида Са1р1-ЗС1сЫАс. Внимательный анализ кривых безрецидивной выживаемости в тех ситуациях, когда прогностическая роль этих маркеров реализуется, указывает не столько на ухудшение прогноза в антигенпозитивных группах, сколько на улучшение прогноза у больных с ранними стадиями рака молочной железы, не экспрессирующих С071 или дисахарид Са1р1-ЗС1сКАс на мембране опухолевых клеток. Полученные данные создают прецедент к идентификации при раке молочной железы не только групп неблагоприятного прогноза для усиления в них терапии, но и групп благоприятного прогноза, в которых существующие каноны лечения рака молочной железы можно считать вполне адекватными.
Таким образом, при раке молочной железы начальных стадий стандартные клинические и морфологические факторы не позволяют прогнозировать течение болезни и возникновение рецидивов.
Исключением является лишь размер опухоли свыше 3 см, в этой группе пациенток прогноз достоверно хуже. Изученный нами в работе новый маркер - дисахарид Galßl-3GlcNAc - выявляется при раке молочной железы начальных стадий в 56% случаев. При наличии данного антигена на раковых клетках чаще выявляются опухоли более крупного размера. Иммунофенотипической особенностью экспрессии дисахарида Galßl-3GlcNAc является его высокая ассоциация с экспрессией трансферринового рецептора на опухолевых клетках
Обнаружение маркера, выявляемого моноклональными антителами LU-BCRU-G7, в целом ассоциируется с неблагоприятным прогнозом при ранних стадиях рака молочной железы pT^NoMo (меньшей длительностью безрецидивного периода) при длительном наблюдении за больными, различия близки к достоверным (р < 0,1). На начальных стадиях рака молочной железы III степени злокачественности, при наличии умеренной или выраженной лимфоидной инфильтрации опухоли, а также при опухолях низкой или умеренной степени дифференцировки прогностическое влияние маркера является достоверным. Антиген, выявляемый моноклональными антителами LU-BCRU-G7, более характерен для опухолей метастазирующих в легкие и встречается в этих случаях почти у 90% больных.
Все сказанное позволяет констатировать, что маркер, выявляемый моноклональными антителами LU-BCRU-G7, является перспективным для прогнозирования безрецидивного течения рака молочной железы начальных стадий.
Список использованной литературы по медицине, диссертация 2004 года, Шинкарев, Сергей Алексеевич
1. Аптон Г. Анализ таблиц сопряженности. — М.: Финансы и статистика. 1982.-С.143.
2. Артамонова Е.В. Иммунологическая микрогетерогенность рака молочной железы. // Автореф. дис. . канд. мед. наук. Москва. — 1992. -28 С.
3. Артамонова Е.В. Роль имунофенотипирования опухолевых клеток в диагностике и прогнозе рака молочной железы. //Автореф. дис. . д-ра мед. наук. Москва. - 2003. - 48С.
4. Бююлъ А., Цефель П. SPSS: искусство обработки информации. Анализ статистических данных и восстановление скрытых закономерностей. // М.: ДиаСофт, 2002.- 602 с.
5. Барышников А.Ю., Кадагидзе З.Г., Короткова О.В. и др. II Вестник ВОНЦ АМН СССР. 1991.-N1.-C.9-11.
6. Барышников А.Ю., Тоневщкий А.Г. Моноклональные антитела в лаборатории и клинике. Москва, типография ВНИТЦ. - 1997. - С.99-105.
7. Барышников А.Ю. Моноклональные антитела в биотерапии рака. // Мат. I Всерос. Научно-практ. Конф. «Биотерапия рака». Москва, 18-20 июня 2002г.-С.15-17.
8. Васильев М.Б. Иммунофенотипическая характеристика рака молочной железы и ее клиническое значение. Автореф. дис. .канд. мед. наук. — Москва.-2001.-23С.
9. Власова Е.В. Получение и изучение эпитопной специфичности моноклональных антител к углеводным детерминантам с использованием синтетических антигенов. Автореф. дис. .канд. хим. наук. Москва. - 1997. - 24 С.
10. Кампова-Полевая Е.Б., Огнерубов H.A. Иммунология и иммунотерапия рака молочной железы. // Изд-во Воронежского Унив., 1994. 175С.
11. Кармакова Т.А., Немцова Е.Р., Безбородова O.A. Имутеран — новый препарат в иммунотерапии рака. // Мат. I Всерос. Научно-практ. Конф. «Биотерапия рака». Москва, 18-20 июня 2002г. - С.33-35.
12. Летягин В.П. Опухоли молочной железы (клиника, диагностика, лечение, прогноз). // Москва. 2000 - С.5.
13. Моисеенко В.М. Клиническое значение прогностических факторов при раке молочной железы. // Переводчикова Н.И. (ред.). Новое в терапии рака молочной железы. М.: Рон-Пуленк Рорер. - 1998. - С.25-31.
14. Овсянников C.B., Давыдов М.И., Тупицын H.H. и др. Иммуноморфологическое обоснование расширенных лимфодиссекций при раке желудка. // Онкология и радиология Казахстана. — 2002. — T.1,N2. С.42-48.
15. Семиглазов В.Ф. Адьювантное лечение больных раком молочной железы. // Переводчикова Н.И. (ред.). Новое в терапии рака молочной железы. М.: Рон-Пуленк Рорер. - 1998. - С.48-56.
16. Трапезников H.H., Аксель Е.М. Статистика рака молочной железы. // Переводчикова Н.И. (ред.). Новое в терапии рака молочной железы. -М.: Рон-Пуленк Рорер. 1998. - С.6-10.
17. Тупицын H.H., Артамонова Е.В., Кадагидзе З.Г. и др. Субпопуляции иммуноцитов в гистологических срезах рака молочной железы. // Вопросы онкологии. 1994. - Т.40, №7 - 12. - С.314-318.
18. Тупицын Н.Н, Летягин В.П., Паничепко A.B. и др. Новые иммунологические маркеры (CD71, LU-BCRU-G7), взаимосвязанные с прогнозом рака молочной железы.// Современная онкология. 2001. -Т.З, N4. — С.161-163.
19. Якубовская P.M. , Кармакова Т.А., Барышников А.Ю. и др. Иммуногистохимическое изучение антигенов мембран жировых глобул женского молока с помощью моноклональных антител. //Архив патологии. -1991. N6. - С. 11 -16.
20. Якубовская Р.И., Казачкина H.H., Кармакова Т.А. и др. Изучение интегрального антигена мембран жировых глобул женского молока. // Эксперим. онкология. 1990. - Т. 12. - N4. - С.61-65.
21. Abe М. and Kufe D. Identification of a family of high molecular weight tumor-associated glycoproteins. // J. Immunol. 1987. - V.139, N1. — P.257-261.
22. Arklie J., Taylor-Papadimitriou J., Bodmer W.F. et al. Differentiation antigens expressed by epithelial cells in the lactating breast are also expressed in breast cancer. // Int. J. Cancer. 1981. - V.28, N1. - P.23-29.
23. Baldam A.D., Howell A., Barnes D.M. et al. Expression of differentiation antigens within human mammary tumours is related to response to endocrine therapy and survival. // Int. J. Cancer. 1988. - V.42, N1. - P.154-158.
24. Barclay A.N., Birkeland M.L., Drown M.H. et al. In: The leucocyte antigen facts book (ed. A.N. Barclay et al.). // Academic Press, London, 1993. - P. 258-259.
25. Barnstable C., Bodmer W., Brown G. Production of monoclonal antibodies to group A erythrocytes, HLA and other human cell surface antigens new tools for genetic analysis. // Cell. - 1978. -V. 14, N1. - P. 9-20.
26. Berry N., Jones D.B., Smallwood J., Taylor I., Kirkham N., Taylor-Papadimitriou J. The prognostic value of the monoclonal antibodies HMFG1 and HMFG2 in breast cancer. // Br. J. Cancer. 1985. - V.51(2), - P. 179186.
27. Blockzjil A., Nilsson K., Nilsson O. II Tumor Biology. 1998. - V.19, suppl.l.-P. 46-56.
28. Bramwell M., Bhavanandah V., Wiseman G., Harris H. Structure and function of the Ca antigen. // Br. J. Cancer. 1983. -V.48. - N2. - P.177-183.
29. Braun S., Kentenich C., Janni W., et. al. Lack of effect of adjuvant chemotherapy on the elimination of single dormant tumor cells in bone marrow of high-risk breast cancer patients. // J. Clin. Oncol. 2000. - Vol.18 -issue l(Jan.)-P.80.
30. Braun S., Pantel K. Clinical significane of occult metastatic cells in bone marrow of breast cancer patients. // The oncologist. 2001. - V.6, N2 - P. 125-132.
31. Burchell J., Gendler S., Taylor-Papadimitriou J. et ah Development and characterization of breast reactive monoclonal antibodies directed to the core protein of the human milk mucin. // Cancer Res. -1987. V.47, N20. -P.5476-5482.
32. Cavanaugh P.G., Jia L., Zon Y. et al. Transferrin receptor overexpression enchances transferrin responsiveness and the metastatic growth of rat mammary adenocarcinoma cell line. // Breast Cancer Res. Treat. 1999. -V.56, N3. -P.203-217.
33. Cavanaugh P.G., Nicolson G.L. Selection of highly metastatic rat MTLn2 mammary adenocarcinoma cell variant using in vitro growth response to transferrin. // J. Cell. Physiol. 1998. - V. 174, N1. - P.48-57.
34. Chang S. and Taylor-Papadimitriou J. Modulation of phenotype in cultures of human milk epithelial cells and its relation to the expression of a membrane antigen. // Cell Differ. -1983. -V.12, N3. P.143-154.
35. Colcher D., Horan-Hand P., Nuti M., Schlom J. A spectrum of monoclonal antibodies reactive with human mammary tumour cells. // Proc. Natl. Acad. Sci USA. 1981. - V.78. - P. 3199-3202.
36. Conha A., Cabrera T., Ruiz-Cabello F., Garrido F. Can the IILA phenotype be used as a prognostic factor in breast carcinomas? // Int. J. Cancer. 1991. - V.6. - P. 146-154.
37. Corcoran D.t Walker R.A. Ultrastructural localization of milk fat globule membrane cantigens in human breast carcinomas. // J. Pathol. 1990. -V.161.-P.161-166.
38. Diel I.J., Kaufmann M., Costa S.D., et al. Micrometastatic breast cancer cells in bone marrow at primary surgeiy: prognostic value in comparison with nodal status. // J. Nat. Cancer Inst. 1996. - V.88 - P. 1652-1658.
39. Drewinko B., Moskwa P., Reuben J. Expression of transferrin receptors is unrelated to proliferative status in cultured human colon cancer cells. // Anticancer Res. 1987. - V.7, N2. - P. 139-141.
40. Ellis I.O., Robbins R.A., Ehton C.W., Blarney R.W., Ferry B., Baldwin R.W. A monoclonal antibody NCRC-11 raised to human breast carcinoma: production and immunohistological characterization. // Histopathology. -1984.-V. 8.-P. 501-516.
41. Ellis I.O., Bell J., Todd J.M. et al. Evaluation of immunoreactivity with monoclonal antibody NCRC-11 in breast carcinoma. // Br. J. Cancer. 1987. -V. 56.-P. 295-299.
42. Elliott R.L., Elliott M.C., Wang F., Head J.F. Breast carcinoma and the role of iron metabolism. //Ann. N.Y. Acad. Sci. 1993. - V.698. - P. 159-166.
43. Elston C.JV. Grading of invasive carcinoma of the breast. // In Page DL, Anderson TJ, eds. Diagnostic Histopathology of the Breast. Edinburgh, Churchill Livingstone. 1987. - P.300-311.
44. Facheris P., Perrone J.F., Menard S., et al. Study of the biological and prognostic significance of the antigen CaMBr8 on breast carcinoma. // Br. J. Cancer. 1992. - V.65. - P. 466-470.
45. Foster C.S., Edwards P.A.W., Dinsdale E.A., Neville A.M. Monoclonal antibodies to the human mammary gland: distribution of determinants in nonneoplastic mammary and extramammary tissues. // Virchows Arch. Pathol. Anat.. 1982. - V.394. - P. 279-293.
46. Frankel AE, Ring DB, Tringale F, Hsieh-Ma ST. Tissue distribution of breast cancer-associated antigens defined by monoclonal antibodies. // J. Biol Response Modifiers. 1985. - V.4. - P. 273-286.
47. Eds, R.S.Metzgar. M.S.Mitchell, A.R.Liss. New York. - 1988. - V.99. -P. 11-23.
48. Goding J. W. and Burns G.F. Monoclonal antibody OKT9 recognizes the receptor for transferrin on human acute lymphocytic leukemia cells. // J. Immunol. 1981.-V. 127, N3. - P. 1256-1258.
49. Goding J.W., Dubljevic V., Sali A. CD71 Workshop Panel report. // In: Leucocyte typing VI. (Kishimito et al., eds). Harlan Publishing Inc. New York. - 1997.-P.524-527.
50. Goldhirsch A., Glich J.H., Gelber R.D. et al. Meeting highlights: Updated International Consensus Panel on the Primary Therapy of Early Breast Cancer. //J. Clin. Oncol. -2003. -V.21. P. 3357-3365.
51. Guckel B., Rentzsch C., Stumm S. et al. Cellular vaccinatio strategies in the treatment of breast cancer. // An. Oncol. 2002. - V.13, Suppl.5. - P.58.
52. Harbeck N., Untche M., Pache L., Eiermann W. Tumour cell detection in the bone marrow of breast cancer patients at primary therapy: results of a 3-year median follow-up. // Br. J. Cancer. 1994. - Vol.69 - P. 566-571.
53. Hilkens J., Buijs F., Hilgers J., et al. Monoclonal antibodies against human milk fat globule membranes detecting differentiation antigens of the mammary gland and its tumours. // Int. J. Cancer. -1984. V. 34. - P. 197206.
54. Inoiie T., Cavanaugh P.G., Steek P.a. et al. Differences in transferrin response and numbers of transferrin receptors in rat and human mammary carcinoma lines of different metastatic potentials. // J. Cell. Physiol. 1993. - V.156, N1. -P.212-217.
55. Kovar J., Seligman P., GelfandE.W. Lymphocyte lines under iron depriving conditions: transferrin receptor expression related to various growth responses. // Immunology Letters. 1994. - V.42. - P. 123-127.
56. Lee Q.H., Happerfield L.C., Millis R.R., Bobrow L.G. Inflammatory infiltrate in invasive lobular and ductal carcinoma of the breast. // Br. J. Cancer. 1996. - V.74, N5. - P.796-801.
57. Livingston P.O., Ragiipathi G. Carbohydrate-based vaccines. // In: Encyclopedia of cancer. Elseiver Science (USA). 1997. - V.2. - P.337-344
58. Machetti A., Buttitta F., Bertacca A. et al. mRNA markers of breast cancer nodal metastases: comparison between mammaglobin and carcinoembryonic antigen in 248 patients. //J.Pathol. 2001. -V. 195, N2. - P. 186-190.
59. Maiorana A., Cesinaro A.M., Fano R.A. et al. Expression of MHC class I and class II antigens in primary breast carcinomas and synchronous nodal metastases. // Clin. Exp. Metastasis. 1995. - V. 13, N1. - P. 43-48.
60. Mansi J.L., Easton D., Berger U. et al. Bone marrow micrometastases in primary breast cancer: prognostic significance after 6 years' follow-up // Eur. J. Cancer 1991. - Vol.27, №12. - P. 1552-1555.
61. Mathieu M.C., Friedman S., Bosq J., et al. Immunohistochemical staining of bone marrow biopsies for detection of occult metastasis in breast cancer. // Breast Cancer Res. Treat. 1990. - Jan. - Vol. 15, N1.- P. 21 -26.
62. Mesa-Tejada R., Palakodety R.B., Leon J.A., Khatcherian A.O., Greaton C.J. Immunocytochemical distribution of a breast carcinoma associated glycoprotein identified by monoclonal antibodies. // Am. J. Pathol. 1988. -V.130.-P. 305-314.
63. Nicolson G.L. Paracrine and autocrine growth mechanisms in tumor metastasis to specific sites with particular emphasis on brain and lung metastasis. // Cancer Metastasis Prev. 1993. - V. 12, N3-4. - P.325-343.
64. Norum L.F., Varaas T., KierulfB., Nustad K. Carcinoma-associated MUC-1 detected by immunoradiometric assays. // Tumor Biology. 1998. - V.19, Suppl.l. - P. 134-146.
65. Nouri A.M.E., Torabi-Puor N., Oliver R.T.D. Isolation of human leucocyte antigen (HLA)-associated peptide(s) in the absence of HLA-restricted specific cytolytic T lymphocytes (CTL). // Eur. J. Cancer. 2001. - V.37, Suppl. 6-Abstr. 400, SI 10.
66. Papsidero L.D., Croghan G.A., O'Connell M.J. et al. Monoclonal antibodies (F36/22 and M7/105) to human breast carcinoma. // Cancer Res. 1983.-V.43.-P. 1741-1747.
67. Perez M., Cabrera 71, Lopez Nevot M.A. et al. Heterogeneity of the expression of class I and II HLA antigens in human breast carcinoma. // J. Immunogenet. 1986. - V.13, N2-3. -P.247-253.
68. Petrakou E., Murray A., Price M.R. Epitope mapping of anti-MUC-1 Mucin protein core monoclonal antibodies. // Tumor Biology. 1998. - V.19, Suppl.l.-P. 21-29.
69. Price M.R., Rye P.D., Petrakou E. et al. Summary report on the ISOBM TD-4 Workshop: analysis of 56 monoclonal antibodies against the MUC-1 mucin.//Tumor Biology. 1998.-V.19, Suppl.l.-P. 1-20.
70. Pytowski B., Judge T. W., and McGraw T.E. J.Biol. Chem. 1996. - V.270. -P.9067-9073.
71. Raaf H.N., Jacobsen D. W., Savon S. et al. Serum transferrin receptor level is not altered in invasive adenocarcinoma of the breast. // Am. J. Clin. Pathol. -1993. V.99, N3. - P.232-237.
72. Rasmussen B.B., Pederson B. V., Thorpe S.M., Hilkens J., Hilgens J., Rose C. Prognostic value of surface antigens in primary human breast carcinomas detected by monoclonal antibodies. // Cancer Res. 1985. - V.45. - P. 14241427.
73. Rye P.D., Walker R.A. Analysis of glycoproteins released from benign and malignant human breast: changes in size and fucosylation with malignancy. // Eur. J. Cancer Clin. Oncol. -1989. V. 25. - P. 65-72.
74. Rye P.D., Walker R.A. Immunoyistochemical distribution of a breast cancer associated glycoprotein. I I Disease Markers. 1993. - V.l 1. - P. 91-101.
75. Rye P.D. and Walker R.A. Prognostic value of a breast cancer-associated glycoprotein detected by monoclonal antibody LU-BCRU-G7. // Eur. J. of Cancer. 1994. - V.30A, №7. - P.1007-1012
76. Rye P.D., McGuckin M.A. MUC1: antibodies and immunoassays. // Tumor Biology. 2001. - V.22, N4. -n P.269-272.
77. Sahadori B., Squicciarini P., Rovini D. et al. Use of monoclonal antibodj MBr 1 to detect micrometastases in bone marrow specimens breast cancer patients. // Eur. J. Cancer 1990 - Vol.15 - P. 21-26.
78. Schol D., Meulenbroek M, Snijdewint et al. // Tumor Biology. 2001. -V.22, N4. -P.34-35.
79. Simmons R., Hoda S., Osborne M. Bone marrow micrometastases in breast cancer patients. // Am. J. Surg. 2000. - Oct. - Vol. 180. - N4. - P.309-312.
80. Singletary S.E., Larry L., Trucker S.L. et al. Detection of micrometastases tumor cells in bone marrow of breast carcinoma patients. // J. Surg. Oncol. -1991.-Vol. 47.- P. 32-36.
81. Smets L.A., van Beek W.P. Carbohydrates of the tumor cell surface. // Biochim Biophys Acta. 1984. - V.738. - P. 237-249.
82. Sutherland R., Delia D., Schneider C. et al. Proceedings of the National Academy of Sciences. USA. - 1981. - V.78. - P. 4515-4519.
83. Solomayer E.F., Diel I.J., Salanti G. et al Time independence of the prognostic impact of tumor cell detection in the bone marrow of primary breast cancer patients // Clin Cancer Res. -2001.- V.7, N12. P.4102-4108.
84. Taylor-Papadimitriou J., Gendler S.J. Molecular aspects of mucins. // Cancer Rev. 1988. - V.l 1/12. -P.l 1-24.
85. Taylor-Papadimitriou J. Report on the First International Workshop on Carcinoma-Associated Mucins. // Int.J.Cancer. 1991. - V.49. - P. 1-5.
86. Thompson C.H., Jones S.L., Whitehead R.H., MacKenzie I.F.C. A human breast tissue-associated antigen detected by a monoclonal antibody. // J. Natl. Cancer Inst. -1983. V.70. - P. 409-419.
87. Towbin H., Staehelin T., Gordon J. Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1979. - V. 76(9). - P. 4350-4354.
88. Trowbridge I,S. and Omary M.B. Proceedings of the National Academy of Sciences. USA. - 1981. - V.78. - P. 3039-3043.
89. Trowbridge I.S., Collawn J.F. and Hopkins C.R. // Annual Review of Cell Biol. 1993. -V.9. — P. 129-161.
90. Untch M., Harbech N., Eirmann W. Micrometastases in bone marrow in patients with breast cancer. // Br. Med.J. 1988. - Vol. 296. - P. 290.
91. Vitale M., Rezzani R., Rodella L. et al. HLA class I antigen and transporter associated with antigen processing (TAP-1 and TAP-2) down-regulation in high grade primary breast carcinoma lesions. // Cancer Research. 1998. - V.58, N4. - P. 737-742.
92. Walker R.A., Day S.J. Transferrin receptor expression in non-malignant and malignant human breast tissue. // J. Pathol. 1986. - V.148, N3. - P. 217-224.
93. Walker R.A. Assessment of milk fat globule membrane antibodies and lectins as marcers of short-term prognosis in breast cancer. // Br. J. Cancer. — 1990.-V.63.-P. 462-466.
94. Walker R.A. Helix promatia and prognosis of breast cancer. // Br. J. Cancer. 1993. - V.68. - P. 453-454.
95. Warren L, Buck CA. The membrane glycoproteins of the malignant cell. // Clin. Biochem.- 1980.-V.13.-P. 191-197.
96. White C.A., Dulbecco R., Allen R., Bowman M., Armstrong B. Two monoclonal antibodies selective for human mammary carcinoma. // Cancer Res. 1985. - V.45. - P. 1337-1343.
97. Whitford P., George W.D., Campbell A.M. Flow cytometric analysis of tumor-infiltrating lymphocyte activation and tumour cell MHC class I and II expression in breast cancer patients. // Cancer Lett. 1992. - V.61, N2. -P.157-164.
98. Wilkinson M.J.S., Howell A., Harris M., Taylor-Papadimitriou J., Swindell R., Sellwood R.A. The prognostic significance of two epithelialmembrane antigens expressed by human mammary carcinomas. // Int. J. Cancer. 1984. - V.33. - P. 299-304.
99. Wintzer H.O., Benzing M., von Kleist S. Lacking prognostic significance of beta 2-microglobulin and MHC class I and class II antigen expression in breast carcinomas. // Br. J. Cancer. 1990. - V.62, N2. - P. 289-295.
100. Xing P.X., Tjandra J., Reynolds K. et al. Reactivity of anti-human milk fat globule antibodies with synthetic peptodes. // J.Immunol. 1989. - V.142. -P. 3503-3509.
101. Zuk J.A., Walker P.A. Immunohistochemical analysis of HLA antigens and mononuclear infiltrates in benign and malignant breast. // J. Pathol. -1987. V.152, N4. -P. 275-285.