Морфо-функциональное состояние плаценты у женщин разных возрастных групп

Пальченко, Наталья Александровна

Диссертации по медицине → Геронтология и гериатрия

Автореферат и диссертация по медицине (14.01.30) на тему:Морфо-функциональное состояние плаценты у женщин разных возрастных групп

ДИССЕРТАЦИЯ

АВТОРЕФЕРАТ

Пальченко, Наталья Александровна Санкт-Петербург 2011 г.

Ученая степень: кандидата медицинских наук

ВАК РФ: 14.01.30

Автореферат диссертации по медицине на тему Морфо-функциональное состояние плаценты у женщин разных возрастных групп

На правах рукописи

ПАЛЬЧЕНКО Наталья Александровна

МОРФО-ФУНКЦИОНАЛЫЮЕ СОСТОЯНИЕ ПЛАЦЕНТЫ У ЖЕНЩИН РАЗНЫХ ВОЗРАСТНЫХ ГРУПП

14.01.30 - геронтология и гериатрия

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

О з [.¡АР 2011

Санкт-Петербург - 2011

4839891

Работа выполнена в отделе клеточной биологии и патологии Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН

Научный руководитель:

доктор медицинских наук Князысин Игорь Владимирович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Малинин Владимир Викторович

доктор медицинских наук, профессор Доросевич Александр Евдокимович

Ведущая организация:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию

на заседании диссертащ , , , Санкт-

Петербургском институте биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН по адресу: 197110, Санкт-Петербург, пр. Динамо, 3.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН {197110, Санкт-Петербург, пр. Динамо, 3).

Автореферат разослан "_"_2011 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

доктор биологических наук, профессор Козина Л.С.

Защита состоится

часов

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы

Современные молекулярно-биологические исследования позволили значительно расширить представления о структурно-функциональной организации плаценты человека и представить ее как чрезвычайно своеобразный орган, важнейшей функцией которого является синтез и секреция широкого спектра биологически активных сигнальных молекул, посредством которых осуществляется регуляция процессов, обеспечивающих нормальное развитие плода [Айламазян Э.К. и др., 2004].

Многочисленные пептиды, биогенные амины, стероиды, цитокины и другие сигнальные молекулы (которых уже верифицировано в плаценте более 100) выполняют роль гормонов, ферментов, проферментов, ингибиторов, рецепторов, факторов роста, иммунорегуляторных агентов, транспортных и связывающих белков [Кветной И.М. и др., 2005].

Уникальность плаценты в плане механизмов интеграции выполняемых функций и присутствие в ней большого числа биологически активных веществ, действующих эндокринным, паракринным и аутокринным путем, позволяет рассматривать плаценту как исключительно важный отдел диффузной нейроиммуноэндокринной системы.

Убедительно доказано, что наиболее активной тканью плаценты в метаболическом и функциональном плане является эпителий ворсинчатого хориона, который в силу особенностей строения играет наиболее важную роль в осуществлении обменных процессов между кровью матери и плода [Сельков С.А., Павлов О.В., 2007].

Многочисленные исследования, проведенные в последние годы, убедительно свидетельствуют, что современные представления о механизмах репродуктивной функции не могут формироваться без учета огромного и важного вклада нейро-иммуно-эндокринных структурно-функциональных связей, формирующихся непосредственно в половых органах, эндометрии, плаценте, молочной железе.

Анализ современной литературы показал, что большинство авторов изучало развитие адаптационных механизмов при патологическом состоянии плаценты. Вместе с тем, необходимо отметить недостаточное внимание к вопросам развития компенсаторно-приспособительных реакций, степени их мобилизации в плацентах у женщин с нормальной физиологической беременностью в зависимости от их возраста.

Имеются сведения, касающиеся степени структурных и функциональных сдвигов в плацентах у женщин различного возраста с нормальной физиологической беременностью, тогда как исследование нормальной плаценты ограничивалось лишь констатацией процессов, свидетельствующих о функциональном старении органа. Между тем от степени выраженности этих изменений зависит выключение больших или меньших участков из обменной поверхности плацентарной ткани.

Плацента уникальна и как объект для геронтологических исследований, поскольку ее онтогенез четко очерчен по времени гестации, а плацентарная ткань удобна для поиска четких, согласованных критериев старения на органном, тканевом, клеточном и субклеточном уровнях.

Вышеизложенные обстоятельства свидетельствуют об актуальности и необходимости проведения специального исследования экспрессии гормонов и биологически активных веществ в ворсинчатом хорионе у беременных разного возраста.

Цель и задачи исследования

Целью диссертационного исследования является сравнительный анализ морфо-функционального состояния ворсинчатого хориона зрелой плаценты у беременных разного возраста, а также при доношенной и переношенной беременности.

Для достижения указанной цели были поставлены и последовательно решены следующие задачи:

1. Изучить возрастную динамику экспрессии гормонов — соматостатина и серотонина в клетках ворсинчатого хориона.

2. Изучить экспрессию фактора роста сосудов УЕвР для оценки микроциркуляции ворсинчатого хориона у женщин различных возрастных групп.

3. Верифицировать экспрессию пептида, ассоциированного с геном кальцитонина (СОБР) в ворсинчатом хорионе у женщин различных возрастных групп.

4. Выявить особенности экспрессии маркера молекул адгезии -интегрина СЮ61 как показателя устойчивости межклеточных связей в плаценте у женщин разного возраста.

5. Оценить влияние возраста беременной на процессы клеточного обновления в плодовой части плаценты.

6. Провести анализ морфо-функционального состояния плаценты при переношенной беременности у женщин нормального репродуктивного возраста.

Научная новизна работы

Впервые проведена верификация и анализ экспрессии гормонов соматостатина и серотонина, а также маркеров УЕвР, СОИР, СБ61, р53, Кл-67 в ворсинчатом хорионе зрелой плаценты у беременных разного возраста. Изучена возрастная динамика экспрессии исследуемых сигнальных молекул в ворсинчатом хорионе. Впервые выявлено снижение степени экспрессии соматостатина, серотонина, \ТЮР, ССПР, р53, Кл-67 клетками плодовой части плаценты в связи с увеличением возраста беременной женщины. При этом показано, что параметры экспрессии СвЯР в ворсинчатом хорионе достоверно снижаются у юных первородящих и беременных старше 29 лет по сравнению с таковыми у

женщин нормального репродуктивного возраста. Установлены отличия в степени экспрессии интегрина С061 в плаценте у женщин разного возраста. Впервые отмечено, что параметры экспрессии СБ61 в плаценте у женщин разного возраста неодинаковы, так площадь экспрессии маркера С061 в ворсинчатом хорионе достоверно увеличивается с возрастом беременной. Снижение васкуляризации ворсин хориона выявлено как у юных рожениц, так и у рожениц, старше 29 лет.

Результаты исследования свидетельствуют о снижении пролиферативной активности ворсинчатого хориона в связи с увеличением возраста беременной. При этом максимальная площадь экспрессии маркера пролиферации К>67 обнаружена в плацентах у женщин нормального репродуктивного возраста. Покзано, что число делящихся клеток прогрессивно увеличивается с возрастом беременной.

При оценке структурно-функциональной организации плаценты отмечается отсутствие отличий в экспрессии гормонов и сигнальных молекул (соматостатина, серотонина, УЕСР, С011Р, СБ61, р53 и Кл-67) в плацентах при доношенной и переношенной беременности, что свидетельствует о сохранении функциональной зрелости, а не о старении плаценты при увеличении продолжительности сроков гестации.

Практическая значимость работы

Полученные результаты позволяют расширить представления о морфо-функциональньгх изменениях плаценты в связи с возрастом беременной, что следует учитывать в акушерско-гинекологической практике для повышения эффективности профилактических и лечебных мероприятий.

Проведенные исследования позволили оценить диагностическую и прогностическую значимость иммуногистохимической верификации таких маркеров, как УЕОБ, СвЯР, СБ61, р53, Кл-67 при патогистологическом изучении плаценты после родов у женщин старшего репродуктивного возраста. Их применение позволяет оценить степень функциональной зрелости плаценты при прогнозе перинатального состояния новорожденных детей.

Установленное отсутствие различий в характере экспрессии гормонов при доношенной и переношенной беременности свидетельствует о сохранении гормональной функции плаценты при ее «старении».

Положения, выносимые на защиту

1. Экспрессия соматостатина, серотонина, "УБвР, СвЯР, р53 в клетках ворсинчатого хориона прогрессивно снижается в связи с увеличением возраста беременной женщины.

2. Экспрессия К1-67 в ворсинчатом хорионе, а следовательно и его пролиферативная активность с увеличением возраста матери прогрессивно снижается.

3. Достоверные отличия в концентрации и характере экспрессии соматостатина, серотонина, VEGF, CGRP, р53, CD61, и Ki-67 в ворсинчатом хорионе при доношенной и переношенной беременности отсутствуют, что дает основание считать, что при переношенной беременности не происходит «старческой» инволюции плаценты.

Апробация и реализация результатов исследования

Материалы диссертации доложены на научно-практической конференции молодых ученых «Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины», Санкт-Петербург (2009); на Весенней и Осенней геронтологических конференциях, Белгород (2009); на 1-ой ежегодной научной конференции молодых ученых и специалистов «Репродуктивная медицина: взгляд молодых», Санкт-Петербург (2010). Результаты исследований используются в научно-педагогической и практической деятельности Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН, НИИ акушерства и гинекологии им. Д.О. Отга СЗО РАМН, Центра Простатологии РАЕН (Санкт-Петербург), медицинском факультете Белгородского государственного университета.

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 8 научных работ, в том числе 3 статьи в журналах, включенных в Перечень ВАК Минобрнауки РФ для публикации материалов диссертационных исследований, 5 тезисов докладов.

Связь с научно-исследовательской работой Института

Диссертационная работа является научной темой, выполняемой по основному плану НИР Санкт-Петербургского института биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы с изложением материала и методов исследования, 3 глав собственных исследований, главы обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций и указателя литературы. Работа иллюстрирована 29 рисунками и содержит 4 таблицы. Текст диссертации изложен на 149 страницах. Список литературы содержит 267 источников (38 отечественных и 229 зарубежных).

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Объектом для морфо-функционалыюго исследования был избран ворсинчатый хорион 57 доношенных и 14 переношенных плацент, полученных при родах в родильном отделении НИИ акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта СЗО РАМН у женщин разного возраста. При анализе морфо-функционального состояния исследуемых плацент использовали заключения патогистологических исследований последов, проведенных в лаборатории патоморфологии указанного института.

Изучение функциональной активности ворсинчатого хориона в зависимости от возраста беременной проводили на гистологических препаратах, приготовленных из образцов доношенных плацент женщин различного возраста. Были отобраны плаценты первородящих женщин со срочными родами без осложнений.

Учитывая важное значение возраста беременных женщин в течении беременности и увеличение в последние годы доли беременных старшего репродуктивного возраста, нами в ходе проведения исследования материал был распределен на 5 групп в зависимости от возраста женщин (табл. 1). В качестве группы сравнения нами была выбрана группа 2 — плаценты женщин нормального репродуктивного возраста (возраст от 18 до 28 лет).

В плаценте объектом для исследования были выбраны стволовые, промежуточные и терминальные ворсины. Последние в силу особенностей строения играют наиболее важную роль в осуществлении обменных процессов между кровью матери и плода [Федорова М.В., Калашникова Е.П., 1986].

Для оценки функциональной активности плацент были использованы следующие иммуногистохимические маркеры:

• антитела к гормонам серотонину, соматостатину и СОЮ5 - для оценки гормонального статуса плаценты;

• антитела к УЕвР - маркеру эндотелия для оценки микроциркуляции ворсин хориона;

• антитела к интегрину С061 — для оценки межклеточных связей в плаценте;

• антитела к белкам К1-67 (маркер пролиферации) и р53 (антиапоптозный маркер) — для оценки процессов клеточного обновления в плаценте.

Распределение плацент по группам в зависимости от возраста женщин

N группы Возраст женщин Число обследованных женщин Соотношение обследованных женщин в каждой группе с общей численностью когорты, %

I группа до 18 лет 8 14

II группа 18-28 лет 22 38,5

III группа 29-35 лет 13 22,5

IV группа 36-40 лет 9 16

V группа Старше 40 лет 5 9

Гистологические и иммуногистохимические методы.

Кусочки плаценты объемом 1 см3 фиксировали в 10% нейтральном формалине (pH 7,2), обезвоживали и заливали в парафин согласно стандартной гистологической схеме. В качестве обзорной окраски использовали гематоксилин и эозин. Иммуногистохимическое исследование проводили с использованием моноклональных мышиных антител к соматостатину (1:200, Novocastra), CGRP (1:150, Novocastra), маркеру эндотелиальных клеток VEGF (1:100, Novocastra), маркеру пролиферативной активности Ki-67 (1:100, Novocastra), проапоптозному белку р53 (1:75, Novocastra). Для визуализации экспрессии серотонина использовали ультраспецифичные кроличьи антитела к серотонину (1:100, CIDtech Res. Comp.) В качестве вторых антител использовали универсальный набор, содержащий биотинилированные анти-мышиные и анти-кроличьи иммуноглобулины. Визуализацию окрасок проводили с применением комплекса авидина с биотинилированной пероксидазор (ABC-kit), с последующим проявлением пероксидазы хрена диаминобензидином (все реагенты от Novocastra).

Морфометрические исследования. Морфометрическое исследование проводили с использованием системы компьютерного анализа микроскопических изображений, состоящей из микроскопа Nikon Eclipse Е400, цифровой камеры Nikon DXM1200, персонального компьютера на базе Intel Pentium 4 и программного обеспечения «Видеотест-Морфология 5.0». В каждом случае анализировали как минимум 10 полей зрения при увеличении 400х. Оптическую плотность

экспрессии выявленных продуктов измеряли в условных единицах. Также определяли площадь их экспрессии, которая представляла собой отношение площади, занимаемой иммунопозитивными клетками к общей площади клеток в поле зрения, выражаемое в процентах. Указанные параметры отражают интенсивность синтеза или накопления исследуемых гормонов и сигнальных молекул.

Статистическая обработка результатов.

Результаты исследований обрабатывали с помощью компьютерных программ EXCEL и STATISTICA 5.0 (Statsoft). Для оценки межгрупповых различий (сравнения средних значений) применяли t-критерий Стьюдента. Взаимозависимость уровня экспрессии гормона и возраста матери устанавливали при помощи корреляционного анализа.

ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Иммуногистохимическое исследование доношенных плацент

На всех иммуногистохимических препаратах была отмечена выраженная экспрессия исследуемых нами маркеров: серотонина, соматостатина, CGRP, VEGF, CD61, Ki-67, р53. Характер экспрессии и распределение иммунопозитивных клеток в ворсинах хориона представлены в табл. 2.

Экспрессия гормонов - серотонина и соматостатина в клетках ворсинчатого хориона у женщин разного возраста

Экспрессия серотонина была выявлена во всех структурных элементах ворсинчатого хориона: синцитиотрофобласте, синцитиокапиллярных мембранах, синцитиальных почках и узлах, единичных клетках стромы и эндотелии сосудов.

Площадь экспрессии серотонина в 1, 3, 4 и 5 группах была достоверно меньше, чем в группе 2 - группе сравнения (р<0,05). Так, у юных рожениц величина площади экспрессии серотонина составила 0,40±0,02%, что в 17,7 раза меньше, чем в группе 2. У женщин 29-35-летнего возраста площадь экспрессии серотонина почти в 2 раза меньше (4,02±0,05), чем у женщин нормального репродуктивного возраста (7,31±0,03).

С увеличением возраста площадь экспрессии серотонина уменьшается (рис. 1). Между возрастом матери и значениями площади экспрессии серотонина выявлена положительная корреляция (к=0,06). Соматостатин-иммунопозитивные клетки обнаружены в СТБ, в том числе и в синцитиокапиллярных мембранах, а также в эндотелии сосудов.

Локализация иммуногистохимических маркеров в структурных элементах ворсинчатого хориона

Иммуно-гистохимические маркеры Структурные элементы ворсинчатого хориона

Синцитиотрофобласт Синцитиокапил-лярные мембраны Элементы стромы Эндотелий сосудов

Серотонин + + + +

Соматостатин + + - +

УЕОБ - - - +

ССЖР + + +

С061 - - + -

Кл-67 + + + +

р53 + 4 - -

Оптическая плотность в 1, 2, 3 и 4 группах достоверно не отличается; достоверно меньшая величина оптической плотности наблюдалась в плацентах у женщин старше 40 лет (р<0,05) (рис. 3). Оптическая плотность серотонина достигает максимального значения во 2-ой группе (0,34±0,01 у.е.), у женщин старше 36 лет (4 и 5 группа) наблюдается достоверное снижение этого показателя (р<0,05).

1 2 3 4 5

возрастные группы

в - значения достоверны по сравнению с 1 группой (р<0.05)

Рис. 1. Площадь экспрессии серотонина в плацентах беременных различных возрастных групп.

[

возрастные группы

Рис. 2. Оптическая плотность экспрессии серотонина в плацентах беременных различных возрастных групп.

1 2 3 4 5

возрастные группы

* - значения достоверны по сравнению с 1-4 группами (р<0.05)

Рис. 3 Оптическая плотность экспрессии соматостатина в плацентах беременных различных возрастных групп.

Площадь экспрессии соматостатина в плаценте у женщин старше 29 лет достоверно уменьшается (р<0,05) (рис. 4), что свидетельствует о сокращении числа иммунопозитивных клеток к соматостатину.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о снижении гормональной активности в плодовой части плаценты в связи с возрастом беременной.

Экспрессия эндотелиального маркера УЕСР в клетках ворсинчатого хориона у женщин разного возраста

Эндотелиальный маркер УЕОБ экспрессируется в эндотелиальных клетках и клетках-предшественниках эндотелия и поэтому по характеру его экспрессии можно судить о степени микроциркуляции ворсин.

* - значения достоверны по сравнению с 1 и 2 группами (р<0.05)

Рис. 4. Площадь экспрессии соматостатина в плацентах беременных различных возрастных групп.

Известно, что микроциркуляция ворсин является важным параметром функциональной активности плаценты. Положительная иммуногистохимическая реакция с антителами к VEGF наблюдалась на всех препаратах в эндотелии капилляров ворсин хориона. Степень экспрессии VEGF у женщин нормального репродуктивного возраста (2 группа) значительно превышает уровень экспрессии этого маркера в остальных возрастных группах как по площади экспрессии, так и по показателям оптической плотности.

Самая низкая оптическая плотность оказалась в группе юных первородящих и составила 0,22±0,01 у.е., что в 2 раза ниже, чем в группе 2 (0,43±0,02). В плацентах женщин 4 и 5 групп наблюдается достоверное снижение показателей оптической плотности в связи с увеличением возраста женщин (р<0,05). Между показателями оптической плотности и возрастом женщин выявлена корреляционная связь (к=0,23) (рис.5).

Наименьшая площадь экспрессии наблюдается у женщин старше 40 лет (2,5±0,06% от общей площади поля зрения), а наибольшая - у женщин нормального репродуктивного возраста (7,76±0,09%).

Также обнаружены статистически значимые отличия в площади экспрессии этого маркера (р<0,05) в группах 1 (5,09±0,03%), 3 (3,56±0,12%) и 4 (3,2±0,09%) (рис. 6).

Полученные результаты свидетельствуют о прямом влиянии возраста матери на степень васкуляризации ворсинчатого хориона.

Экспрессия CGRP в клетках ворсинчатого хориона у женщин разного возраста

Среди местных плацентарных вазодилататоров важная роль отводится CGRP. Проведенные иммуногистохимические исследования показали, что СТБ, синцитиокапиллярные мембраны, эндотелий

капилляров ворсин давали иммунопозитивную реакцию с антителами к CGRP.

2 3 4

возрастные группы беременных

* - значения достоверны по сравнению с 1-3 группами (р<0.05)

Рис. 5. Оптическая плотность экспрессии УЕОИ в плацентах беременных различных возрастных групп.

* - значения достоверны по сравнению с 1 группой (р<0.05)

Рис. 6 Площадь экспрессии УЕСР в плацентах беременных различных возрастных групп.

Особенно сильная экспрессия СОЯР наблюдалась в СТБ, что свидетельствует об участии трофобласта в контроле и поддержании низкого сосудистого сопротивления в системе плацентарно-плодового кровообращения.

Наименее выраженная экспрессия этого маркера наблюдалась в плацентах беременных 1 группы; оптическая плотность (0,18±0,02 у.е.); площадь экспрессии (4,56±0,08%) С ОКР в этой группе значительно ниже, чем во 2 группе (0,37±0,04 у.е. и 7,4±0,01% соответственно). Оптическая плотность СОРчР прогрессивно уменьшается с увеличением возраста беременной (у женщин 3, 4 и 5 групп) (р<0,05) (рис. 7).

0,45 0,4 0,35 0,3 0,25 0,2 0,15 0,1 0,05 0

2 3 4

возрастные группы

* - значения достоверны по сравнению с 1 группой (р<0.05)

Рис. 7. Оптическая плотность экспрессии СОМ5 в плацентах беременных различных возрастных групп.

Площадь экспрессии СИ^Р в этих группах также достоверно меньше, чем у женщин нормального репродуктивного возраста (Р<0,05) (рис. 8).

* - значения достоверны по сравнению с 1 группой (р<0.05)

Рис. 8. Площадь экспрессии СвЯР в плацентах беременных различных возрастных групп.

Таким образом, у юных первородящих и у беременных старше 29 лет наблюдается снижение функциональной активности СОИР в ворсинчатом хорионе.

Экспрессия интегрина Сйб 1 в клетках ворсинчатого хориона у женщин разного возраста

Для оценки устойчивости межклеточных связей в плаценте в связи с различным возрастом беременных был выбран интегрин €061. Позитивная иммуногистохимическая реакция на исследуемый маркер наблюдалась на всех препаратах.

£ 0,462 § 0,46 * 0,458 о 0,456

§ ¿0,454

Й >0,452 3 0,45 ® 0,448 х 0,446 с 0,444

2 3 4

возрастные группы

* - значения достоверны по сравнению с 1 и 3 группами (р<0.05)

Рис. 9. Оптическая плотность экспрессии С061 в плацентах беременных различных возрастных групп.

Единичные СБ61 -содержащие клетки локализуются преимущественно в строме стволовых и промежуточных ворсин, а также в просветах стромальных каналов. Следует отметить, что в значениях оптической плотности нами не найдено статистически достоверных отличий между группами (рис. 9).

* - значения достоверны по сравнению с 1-3 группами (р<0.05)

Рис. 10. Площадь экспрессии СОб 1 в плацентах беременных различных возрастных групп.

Однако, при оценке площади экспрессии данного маркера выявлены достоверные отличия между 4 и 2, а также 5 и 2 группами (р<0,05), причем площадь экспрессии у женщин старше 36 лет в 3 раза больше (0,55±0,02% в 4 группе и 0,56±0,11% в 5 группе), чем у женщин нормального репродуктивного возраста (0,18±0,02%) (рис. 10).

Проведенный анализ показал наличие корреляции между возрастом беременных и значениями площади экспрессии СОб] (к=0,37), что указывает на увеличение активности СБб 1 -презентирующих клеток в связи с возрастом беременной женщины.

Таким образом, нами впервые выявлено усиление экспрессии 0061 с увеличением возраста беременной.

Экспрессия маркеров клеточного обновления в ворсинчатом хорионе у женщин разного возраста

Иммунопозитивное окрашивание антителами к маркеру пролиферации К>67 наблюдалось практически во всех структурах ворсинчатого хориона: СТБ, синцитиокапиллярных мембранах, клетках стромы, эндотелии сосудов, что свидетельствует о высокой пролиферативной активности этих элементов даже на поздних сроках беременности.

Межгрупповых различий в значениях оптической плотности Кл-67 нами не выявлено (рис. 11), однако, была показана положительная корреляция между значениями оптической плотности и возрастом беременных (к=0,27).

2 3 4

возрастные группы

Рис. 11. Оптическая плотность экспрессии Кл-67 в плацентах беременных различных возрастных групп.

Площадь экспрессии Кл-67 максимальна в плацентах женщин норм&чьного репродуктивного возраста (7,81±0,07%). У женщин 1 группы площадь экспрессии составляет 6,9±0,03%, между этими величинами обнаружены достоверные отличия (р<0,05). Площадь иммунопозитивно окрашенных клеток в 3, 4 и 5 группе примерно одинакова и составляет 5,51±0,12%; 5,63±0,04% и 5,77±0,03% соответственно, что также достоверно ниже, чем в группе 2 (7,81±0,01%) (рис. 12).

Единичные клетки, вступившие в апоптоз и экспрессирующие протеин р53 встречаются в СТБ и в строме ворсин хориона. Прослеживается тенденция к прогрессивному увеличению числа р53-содержащих клеток в связи с возрастом беременной. Так, наименьшее число р53-позитивных клеток (1,15±0,013%) выявляется в плацентах женщин до 18 лет, в плацентах женщин из группы сравнения число позитивно окрашенных клеток в 2 раза больше (2,44±0,0019%). Наибольшая площадь экспрессии этого маркера наблюдается в плацентах женщин старше 40 лет (9,45±0,065%).

2 3 4

возрастные группы

* - значения достоверны по сравнению с 1 и 2 группами (р<0.05)

Рис. 12. Площадь экспрессии Ю-67 в плацентах беременных различных возрастных групп.

* *

П КМ

1 2 3 4 5

возрастные группы

* - значения достоверны по сравнению с 1 группой (р<0.05)

Рис. 13. Оптическая плотность экспрессии р53 в плацентах беременных различных возрастных групп.

Значения оптической плотности р53 также прогрессивно увеличиваются от 0,12±0,003 у юных рожениц до 0,48±0,002 у женщин старше 40 лет (Р<0,05) (рис. 13). Возраст беременной положительно коррелирует с площадью экспрессии белка р53 (к=0,43) и оптической плотностью (к=0,25).

Полученные результаты позволяют сделать вывод о снижении пролиферативной активности плаценты и увеличению числа клеток, вступивших в апоптоз, в связи с возрастом беременной.

Анализ морфо-функционального состояния доношенных плацент

По заключениям патогистологических исследований последов нами было проанализировано морфо-функциональное состояние исследуемых плацент (табл. 3).

Таблица 3

Распределение плацент (в процентах) по группам исследования в зависимости от их морфо-функционального состояния

Морфо-функциональное I И III IV V

состояние плаценты группа группа группа группа группа

Компенсированное состояние 0 32 22 16 0

Хроническая 14 38 22 0 0

компенсированная

недостаточность

Хроническая субкомпенсированная 14 0 22 50 20

недостаточность

Хроническая недостаточность 72 30 34 34 80

с острым расстройством кровообращения

Всего (%) 100 100 100 100 100

В плаценте юных рожениц (до 18 лет) в 72% случаев обнаруживались признаки хронической плацентарной недостаточности с острым расстройством кровообращения. Реже встречалась хроническая компенсированная плацентарная недостаточность (14%) и хроническая недостаточность с острым расстройством кровообращения (14%).

В 3-ей группе женщин (от 29 до 35 лет) в 34% случаев диагностировалась хроническая плацентарная недостаточность с острым расстройством кровообращения. С одинаковой частотой встречались плаценты с компенсированным состоянием (22%), хронической компенсированной недостаточностью (22%) и субкомпенсированной плацентарной недостаточностью (22%).

Хроническая недостаточность в 4-й группе беременных в 50% случаев имела признаки субкомпенсации, в 34% была осложнена острым расстройством кровообращения. 16 % плацент находились в компенсированном состоянии.

80% плацент у женщин старше 40 лет имели хроническую плацентарную недостаточность с острым растройством кровообращения и в 20% случаев плацентарная недостаточность была субкомпенсирована.

Таким образом, наиболее стабильное состояние фетоплацентарного комплекса обеспечивается у женщин нормального репродуктивного возраста (2-й группы). В плацентах у женщин старшего возраста степень тяжести недостаточности плаценты увеличивается с увеличением возраста беременной.

Иммуногнстохнмическое исследование «старения» плаценты

Для изучения феномена «старения» плаценты были исследованы 14 плацент, полученных при переношенной беременности у женщин 18-28 лет и проведен сравнительный анализ экспрессии исследуемых маркеров в зрелой и переношенной плаценте. В группу сравнения вошли доношенные плаценты женщин нормального репродуктивного возраста.

Экспрессия соматостатина, серотонина, VEGF, CGRP, CD61, Ki-67 и р53 была выявлена на всех препаратах при переношенной беременности.

Таблица 4

Экспрессия иммуногистохимических маркеров при доношенной и переношенной беременности

Исследуемые маркеры Средние значения показателей экспрессии маркеров при переношенной беременности Средние значения показателей экспрессии маркеров при доношенной беременности

Оптич. плотность (У-е.) Площадь экспрессии (%) Оптич плотность (У-е.) Площадь экспрессии (%)

Соматостатин 0,35±0,02 4,2±0,01 0,35±0,01 3,76±0,002

серотонин 0,35±0,01 7,2±0,01 0,34±0,009 6,89±0,012

VEGF 0,44±0,01 7,68±0,02 0,43±0,03 7,76±0,005

CGRP 0,38±0,02 7,0±0,03 0,37±0,01 7,4±0,032

CD 61 0,46±0,02 0,17±0,01 0,46±0,02 0,18±0,01

Ki-67 0,4±0,11 7,4±0,01 0,39±0,04 7,81±0,09

р53 0,22±0,01 2,45±0,01 0,23±0,03 2,44±0,01

Все исследуемые маркеры были визуализированы в плаценте при переношенной беременности в тех же структурах ворсинчатого хориона, что и при срочной беременности. Проведенный анализ данных, представленных в табл. 4, не выявил статистически значимых отличий в значениях оптической плотности и площади экспрессии всех иммуногистохимических маркеров в плацентах при доношенной и переношенной беременности.

Таким образом, полученные результаты позволяют сделать вывод о том, что при переношенной беременности концентрация и степень экспрессии соматостатина, серотонина, УЕОБ, СвЯР, СБ61, Кл-67 и р53 стабильно сохраняется на тех же уровнях, что и при доношенной беременности, что свидетельствует о продолжающейся ростовой и функциональной активности плаценты.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Анализ проведенного нами исследования гормональной активности ворсинчатого хориона на поздних сроках беременности показал, что все структурные элементы ворсинчатого хориона принимают активное участие в синтезе, депонировании и секреции гормонов и биологически активных веществ.

На всех иммуногистохимических препаратах была обнаружена выраженная экспрессия исследуемых нами маркеров: серотонина, соматостатина, УЕОР, СОКР, СБ61, К1-67, р53, при этом иммунопозитивные клетки к этим маркерам располагались во всех структурах ворсинчатого хориона. Наибольшей гормональной активностью характеризуется СТБ ворсин, который экспрессирует на своей поверхности все исследуемые нами маркеры (за исключением УЕОР - маркера эндотелиальных клеток). Повышенная гормональная активность СТБ, по-видимому, связана с многофункциональностью и высокой метаболической активностью этой структуры, которая непосредственно служит «плацентарным барьером», отделяя материнскую кровь от тканей плодового происхождения.

Проведенный анализ макро- и микроскопического строения плацент позволил выявить структурно-функциональные изменения этого органа в связи с возрастом беременной. Так, у беременных женщин от 18 до 28 лет в большем проценте случаев плаценты были в компенсированном состоянии. В них отмечались слабо выраженные инволютивно-дистрофические процессы и умеренно выраженные компенсаторно-приспособительные реакции.

У женщин старше 29 лет с возрастом прогрессивно увеличивается число случаев с хронической плацентарной недостаточностью и уменьшается число плацент с компенсированным состоянием. Наблюдается несоответствие плаценты сроку беременности и нарушение созревания ворсин чаще всего по диссоциированному типу. При этой форме наряду со зрелыми участками выявляются поля и группы ворсин с признаками незрелости: кроме зрелых, хорошо васкуляризированных терминальных ворсин в препаратах выявляются склерозированные ворсины, участки хаотичного ветвления ворсин и незрелые промежуточные ворсины с рыхлой стромой и дистрофически измененными клетками Кащенко-Гофбауэра.

В ряде случаев отмечались значительно выраженные инволютивно-дистрофические изменения: высокая степень фиброза стромы ворсин, содержания фибриноида в межворсинчатом субхориальном пространстве.

Одним из признаков хронической недостаточности является недостаточная степень выраженности компенсаторно-приспособительных реакций, часто встречаются воспалительные изменения в плаценте.

Частота встречаемости хронической субкомпенсированной плацентарной недостаточности плаценты с острым расстройством кровообращения в группе женщин старше 40 лет составляет 80%. Это

наиболее тяжелая форма хронической плацентарной недостаточности, которая сопровождается патологической незрелостью плаценты и нарушением созревания с преобладанием промежуточных зрелых или незрелых склерозированных ворсин. По структуре вариант зрелых промежуточных ворсин больше всего напоминает ворсинчатое дерево с 24 по 28 неделю беременности [Савельева Г.М. и др., 1991].

Степень выраженности инволютивно-дистрофических изменений с возрастом усугубляется: наблюдается высокая степень фиброза стромы, повышенное содержание фибриноида в межворсинчатом и субхориальном пространстве. Значительно выражены циркуляторные нарушения, встречаются инфаркты плаценты. При этом сосудистые компенсаторно-приспособительные реакции выражены слабо, характерным признаком является редукция сосудистого русла с нарушением плацентарного кровообращения.

Исследования других авторов также свидетельствуют о том, что чем старше возраст женщины, тем выше степень повреждения плаценты. Если в возрасте 18-23 лет межворсинчатое пространство почти свободно от крови, тромбов и фибрина, то уже в возрасте 24-29 лет появляются нарушения фетального и материнского кровообращения. В межворсинчатом пространстве выявляются обширные кровоизлияния, выпадение фибрина и образование фибриноида. В строме конечных ворсин отмечаются дистрофические процессы в виде отека, который чаще встречается и в большей степени выражен (иногда — с образованием конечных полостей и отслойкой симпласта) у женщин до 30 лет. В строме ряда ворсин обнаруживаются некротические изменения.

Гистохимическое исследование показало высокую степень зависимости выраженности поражений плаценты от возраста женщин. У женщин после 30 лет происходит уменьшение содержания кислых мукополисахаридов в строме ворсин и гликогена в плацентарных сосудах [Маисая Г.И., 1999].

Таким образом, возрастные процессы в плаценте проявляются комплексом изменений, захватывающих все структурные единицы плаценты: соединительную ткань и трофобласт, клеточные мембраны и систему кровообращения. Важнейшую роль в развитии возрастных изменений играет недостаточная васкуляризация [Брусиловский А.И., 1996].

Согласно полученным нами результатам по исследованию иммуногистохимического маркера эндотелиальных клеток УЕОБ, степень васкуляризации ворсинчатого хориона достоверно уменьшается с увеличением возраста женщины.

Эти данные согласуются с результатами других исследователей, наблюдавшими увеличение числа бессосудистых ворсин с возрастом женщины при уменьшении размера ворсин. Данный факт можно объяснить тем, что чем старше возраст женщины, тем синцитио-капиллярные мембраны толще, ход капилляров становится извилистее,

а просвет сужается, вплоть до облитерации. Судя по количественным показателям терминального звена микроциркуляторного русла можно установить, что с возрастом женщины оно претерпевает ряд изменений, способствующих снижению его функции. Обнаружена прямая зависимость между степенью васкулярйзации плаценты и массой плода.

Об уменьшении гормональной активности плаценты с возрастом матери свидетельствуют обнаруженное нами снижение экспрессии серотонина и соматостатина у женщин моложе и старше 18-28 лет.

Проанализировав данные статистического анализа экспрессии гормонов и морфо-функционального состояния плаценты нетрудно заметить, что прогрессивное уменьшение показателей экспрессии гормонов с возрастом матери сопровождается увеличением частоты и степени тяжести плацентарной недостаточности. Самая низкая степень экспрессии изучаемых гормонов выявлена в 5 группе у женщин старше 40 лет, 80% которой составляют женщины с хронической плацентарной недостаточностью с острым расстройством кровообращения.

Ранее проведенные исследования с использованием меченой флюоресцирующей высокоспецифичной антисыворотки показали, что соматостатин локализуется главным образом в межклеточном пространстве компактного слоя децидуальной ткани и в синцитиотрофобласте. В цитоплазме децидуальных клеток флюоресценция отсутствует. На основании этого было высказано предположение, что соматостатин синтезируется в СТБ, а затем переходит в межворсинчатое пространство, из которого с током крови переносится в децидуальную ткань [Федорова М.В., Калашникова Е.П., 1986]. Таким образом, выявленная в наших исследованиях экспрессия соматостатина в СТБ, синцитиокапиллярных мембранах с одной стороны означает, что здесь происходит синтез данного белка, а с другой стороны указывает на то, что эти структуры могут служить местом депонирования и транспорта соматостатина.

Нами выявлена экспрессия серотонина во всех структурных элементах ворсинчатого хориона: СТБ, синцитиокапиллярных мембранах, синцитиальных почках и узлах, единичных клетках стромы и эндотелии сосудов, что может свидетельствовать как о месте синтеза здесь этого гормона в плаценте, так и/или о его депонировании и передачи плоду. Впервые показана высокая степень экспрессии серотонина в плаценте у женщин нормального возраста по сравнению с юными роженицами и женщинами старшего репродуктивного возраста.

Сравнительный анализ степени экспрессии серотонина и данные морфо-функционального анализа плаценты показали, что достоверное снижение оптической плотности и площади экспрессии серотонина наблюдается в группах 4 и 5, т.е. у женщин старше 36 лет.

Известно, что при нарушении маточно-плацентарного кровообращения в тканях плода и матки наблюдаются явления деструкции, которые приводят к появлению в биологических жидкостях

эндогенных токсических продуктов, оказывающих повреждающее действие на сосудистую систему, тем самым, ухудшая и без того недостаточное кровообращение. Поскольку CGRP вырабатывается и эндотелием сосудов, которые разрушаются под действием токсических веществ, можно предположить, что в результате вышеупомянутых дегенеративных процессов синтез CGRP снижается.

Такие теоретические заключения в полной мере подтверждаются полученными результатами, согласно которым достоверное снижение экспрессии CGRP наблюдалось в плацентах у женщин с высокой частотой плацентарной недостаточности в возрасте старше и моложе 18-28 лет.

Полученные результаты об увеличении площади экспрессии маркера адгезии клеток - интегрина CD61 у женщин после 36 лет в 3 раза по сравнению с контрольной группой позволяют нам предположить об усилении межклеточных связей при нарушении созревания ворсин с целью сохранности их целостности при развитии воспалительных процессов в ткани плаценты (децидуитов, интервиллезитов, виллузитов, хорионамнионитов), риск которых возрастает с увеличением возраста беременной [Цинзерлинг В.А., 1993].

Изучение апоптозной и антиапоптозной активности является одним из наиболее информативных способов в изучении функциональной активности того или иного органа или ткани. Использование маркеров Ki-67 и р53 позволило установить снижение пролиферативной активности ворсинчатого хориона с возрастом беременных и увеличение числа клеток, вступивших на путь программированной клеточной гибели. Число иммунопозитивных клеток к маркеру Ki-67 достоверно ниже у женщин до 18 лет и старше 29 лет. Таким образом, максимальная пролиферативная активность плодовой части плаценты наблюдается при неосложненной беременности у женщин 18-28 лет. Число клеток, вступивших в апоптоз, прогрессивно увеличивается с увеличением возраста беременной, при этом обнаруживается положительная корреляция возраста женщины и значений оптической плотности и площади экспрессии бежа р53.

Полученные в диссертационном исследовании результаты согласуются с данными литературы, согласно которым эпителиальный покров уже после 24 лет подвергается дистрофическим изменениям и покрывает только часть ворсин, а после 30 лет уменьшается также количество синцитиальных почек, что связано с понижением способности трофобласта к пролиферативным процессам [Багдасарян A.A., 1982].

Таким образом, анализ данных, касающихся исследований морфо-функциональных изменений в плаценте беременных у женщин разного возраста, позволяет сделать вывод о том, что возрастное увеличение степени поражения плацентарной ткани сопровождается истощением компенсаторно-приспособительных механизмов, приводящих к снижению функциональной активности плаценты.

В основу клинической концепции «старения» плаценты положены исследования переношенной беременности [Fox Н., 1978] В связи с этим

нами было проведено иммуногистохимическое исследование плацент при переношенной беременности.

Анализ экспрессии маркера эндотелиальных клеток - VEGF показал, что число иммунопозитивных клеток к этому маркеру остается постоянным, как при доношенной, так и при переношенной беременности.

Следовательно, степень васкуляризации ворсин хориона и функциональная активность эндотелия при переношенной беременности в исследуемых нами случаях не меняется. В ряде работ, однако, было показано, что редукция васкуляризации ворсин в сочетании с фиброзом и появлением большого количества синцитиальных узелков развивается на фоне сохранения интактности плодовых артерий при маточно-плацентарной ишемии [Fox Н., 1978]. Следовательно, данные изменения во многом обусловлены не столько истинным старением, сколько нарушением материнского кровотока в плаценте.

Вопреки распространенному мнению сторонников теории «старения» плаценты о снижении гормональной активности плаценты, нами была обнаружена выраженная экспрессия серотонина и соматостатина не только в зрелой плаценте, но и при переношенной беременности. При этом количественные характеристики (оптическая плотность и площадь экспрессии) этих гормонов достоверно не отличались от таковых при доношенной беременности.

Следовательно, будучи мощной железой внутренней секреции, плацента продолжает синтезировать гормоны и биологически активные вещества не только на поздних сроках беременности, но и после 40 недели беременности.

Сохранение уровня экспрессии маркера Ki-67 на достаточно высоком уровне при переношенной беременности подтверждает доводы в пользу продолжения ростовой активности плаценты вплоть до конца беременности. Нами показано, что число клеток, подвергшихся апоптозу в 3 с лишним раза меньше, чем клеток, экспрессирующих антиапоптозные белки, и также остается постоянным у женщин со зрелой и перезрелой плацентой.

Важными аргументами противников концепции «старения» плаценты служат следующие факты. Установлено, что между 22 и 40 неделями беременности происходит семикратное увеличение массы тела плода, несмотря на то, что относительная площадь поверхности ворсинок при этом в 2 раза уменьшается [Teasdale F., 1980]. С другой стороны, морфологические изменения и перестройка в ворсинах увеличивают эффективность переноса веществ в плаценте с 16 недель до конца беременности в 6-7 раз [Aheme W., Dunnill M.S., 1966].

Таким образом, совокупный анализ вышеприведенных данных литературы и полученных нами результатов о скорости роста и функциональной активности плаценты во время последних недель беременности позволяет рассматривать их как проявление

морфологической и функциональной зрелости, а не признак старения плаценты.

Анализ проведенных нами исследований влияния возраста беременной на функциональную активность плаценты и изучение функционирования плаценты при переношенной беременности позволяет нам предложить собственную гипотезу «старения» плаценты. Согласно ей, «старение» плаценты обусловлено в большей степени общим состоянием организма беременной, нежели сроком беременности, иными словами, старение плаценты, как и любого органа в организме беременной женщины, происходит соответственно ее биологическому возрасту.

Подтверждением этого тезиса служат многочисленные морфологические «находки» плацентологов у беременных пожилого возраста, о которых упоминалось выше: увеличенное содержание фибриноида, истончение эпителиального покрова ворсин и другие, а также выявленное нами снижение экспрессии гормонов и биологически активных веществ в связи с увеличением возраста беременной. Наиболее низкие показатели исследуемых нами гормонов и биологически активных веществ были выявлены у женщин старше 40 лет, а самые высокие -у женщин нормального репродуктивного возраста.

Снижение пролиферативной активности плаценты и увеличение клеток с программированной клеточной гибелью также свидетельствует о дегенеративных процессах в этом органе, прогрессивно возрастающих с увеличением возраста беременной.

ВЫВОДЫ

1. Установлены достоверные корреляции между возрастом матери и степенью экспрессии гормонов и сигнальных молекул - соматостатина, серотонина, \T5GF, СвЯР, СБ61, р53, Кь67 в ворсинчатом хорионе зрелой плаценты.

2. Экспрессия соматостатина и серотонина в тканях ворсинчатого хориона прогрессивно снижается с увеличением возраста беременной.

3. Снижение васкуляризации ворсин хориона наблюдается как у юных рожениц, так и у рожениц, старше 29 лет.

4. Параметры экспрессии С ОКР в ворсинчатом хорионе достоверно снижаются у юных первородящих и беременных старше 29 лет по сравнению с таковыми у ж:енщин нормального репродуктивного возраста.

5. Параметры экспрессии СБ61 в плаценте у женщин разного возраста неодинаковы. Площадь экспрессии маркера СБ61 в ворсинчатом хорионе достоверно увеличивается с возрастом беременной.

6. Пролиферативная активность ворсинчатого хориона снижается в связи с увеличением возраста беременной. Максимальная площадь экспрессии маркера пролиферации Кл-67 обнаружена в плацентах у женщин

нормального репродуктивного возраста. Число делящихся клеток прогрессивно увеличивается с возрастом беременной. 7. Отсутствие отличий в экспрессии гормонов и сигнальных молекул в плацентах при доношенной и переношенной беременности свидетельствует о сохранении функциональной зрелости, а не о старении плаценты при увеличении продолжительности сроков гестации.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

При патогистологическом изучении плаценты после родов у женщин старшего репродуктивного возраста рекомендуется кроме рутинных окрасок использовать иммуногистохимические маркеры (особенно VEGF, CGRP, CD61, р53, Ki-67) для оценки степени функциональной зрелости плаценты при прогнозе перинатального состояния новорожденных детей.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

Статьи в журналах, включенных в Перечень ВАК Министерства образования и науки Российской Федерации

1. Выявление эндотелиальной NO-синтазы в плаценте и оксида азота в сыворотке крови беременных женщин в комплексной оценке эффективности лечения гестоза/Э.К. Айламазян, М.А. Алимхаджиева, И.Н. Костючек, Н.С. Линькова, A.B. Костылев, H.A. Пальченко, И.М. Кветной//Арх. патол. - 2009. - Т.72. - №1. -С. 26-29.

2. Пальченко H.A. Возрастные особенности иммунокомпетентных клеток плаценты женщины при сахарном диабете/А.О. Дурнова, В.О. Полякова, H.A. Пальченко//Усп. геронтол. - 2010. - Т. 23, № 2. -С. 208-212.

3- Экспрессия сигнальных молекул - регуляторов апоптоза в плаценте у женщин разного возраста/Е.А. Лапина, Н.С. Линькова, А.О. Дурнова, В.О. Полякова, H.A. Пальченко, A.B. Костылев, С.С. Коновалов, И.М. Кветной//Научн. ведом. Белгородского государственного университета. Серия «Медицина. Фармация», Геронтология и гериатрия. - 2010. - Т.22., №12. - С. 45-48.

Тезисы докладов

4. CD8 и другие маркеры угрозы выкидыша у женщин различных возрастных групп на фоне гестоза/Н. С. Линькова, А. В. Костылев,, И. Н. Костючек, А.О. Дурнова, H.A. Пальченко, В.О. Полякова//Тез. научно-практической конф. молодых ученых. Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины. - 2009. - С. 191.

5. Взаимодействие некоторых субпопуляций иммунокомпетентных клеток плаценты у женщин различного возраста на фоне гестоза/

Н.С. Линькова, A.B. Костылев, H.A. Пальченко, В. О. Полякова, И.Н Костючек//Тез. весенней геронтологической конференции. Белгород. - 2009. - С. 29-30.

6. Причины невынашивания беременности у женщин старшего фертильного возраста/Н.С. Линькова, A.B. Костылев, И.Н. Костючек, H.A. Пальченко, В.О. Полякова//Тез. осенней геронтологической конференции. Белгород. - 2009. - С. 19-20.

7. Роль CD4+ лимфоцитов в иммунологическом «старении» плаценты/ Н.С. Линькова, A.B. Костылев, В.О. Полякова, H.A. Пальченко, И.М. Кветной//Тез. осенней геронтологической конференции. Белгород. -2009.-С. 20-21.

8. Пальченко H.A. Участие Т-супрессоров в формировании иммунного статуса плаценты/В.О. Полякова, Н.С. Линькова, H.A. Пальченко//Матер. 1-ой ежегодной научной конференции молодых ученых и специалистов НИИ акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта СЗО РАМН «Репродуктивная медицина: взгляд молодых». Санкт-Петербург. -2010. С. 35-36.

ПАЛЬЧЕНКО Наталья Александровна МОРФО-ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ПЛАЦЕНТЫ У ЖЕНЩИН РАЗНЫХ ВОЗРАСТНЫХ ГРУПП//Автореф. дис. канд. мед. наук: 14.01.30-СПб., 2011. 27 с.

Подписано в печать «_09_» _февраля .2011. Формат 60*84 1/16, Бумага офсетная. Печать офсетная. Печ. л. 1,0. Тираж 100 экз. Заказ £__. Отпечатано с готового оригинал-макета. ЗАО "Принт - Экспресс" 197376, С.-Петербург, ул. Большая Монетная, 5 лит. А

Оглавление диссертации Пальченко, Наталья Александровна :: 2011 :: Санкт-Петербург

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Глава 1. НЕКОТОРЫЕ ОСОБЕННОСТИ ЭМБРИОГЕНЕЗА

ВОРСИНЧАТОГО ХОРИОНА.

1.1. Формирование и развитие ворсинчатого хориона в первой половине беременности.

1.2. Строение ворсинчатого хориона во второй половине беременности.

1.3. Плацентарный рост и функциональная активность плаценты в конце беременности.

1.4. «Старение» плаценты.

Глава 2. ЭНДОКРИННАЯ ФУНКЦИЯ ПЛАЦЕНТЫ.

2.1. Плацента как железа внутренней секреции.

2.2. Синтез и секреция «классических» гормонов плаценты.

2.2.1. Хорионический гонадотропин человека.

2.2.2. Кортикотропный рилизинг-фактор.

2.2.3. Стероидные гормоны: прогестерон и эстрогены.

2.2.3.1. Прогестерон.

2.2.3.2. Эстрогены.

2.2.4. Плацентарный лактоген.

2.2.5. Соматостатин.

2.3. Синтез и секреция некоторых биологически активных сигнальных молекул плаценты.

2.3.1. Плацентарный лептин.

2.3.2. Факторы роста.

2.3.2.1. Эпидермальный фактор роста.

2.3.2.2. Инсулиноподобный фактор роста.

2.3.2.3. Активины и ингибины.

2.3.3. Некоторые вазоактивные пептиды плаценты.

2.3.3.1. Эндотелины.

2.3.3.2 Система ренин-ангиотензин.

2.3.3.2.1. Ренин.

2.3.3.2.2. Ангиотензины.

2.3.3.3. СОЫР.

2.3.4. Серотонин.

2.3.5. Маркеры апоптоза в плаценте.

2.3.5.1. Белок р53.

2.3.5.2. Семейство Вс1-2.

2.4. Плацента как иммунокомпетентный орган.

2.4.1. Иммунокомпетентные клетки плаценты.

2.4.2. Иммуномаскирующие факторы плаценты.

2.4.3. Особенности экспрессии молекул главного комплекса гистосовместимости в плаценте.

2.5. Влияние различных факторов на гормональный статус плаценты.

2.5.1. Гормоны и биологически активные вещества как маркеры различных патологических состояний беременности.

2.5.1.1. Хорионический гонадотропин человека.

2.5.1.2. Кортикостероидный рилизинг-фактор.

2.5.1.3. Прогестерон.

2.5.1.4. Эстрогены.

2.5.1.5. Плацентарный лактоген.

2.5.1.6. Соматостатин.

2.5.1.7. Плацентарный лептин.

2.5.1.8. Факторы роста.

2.5.1.9. Вазоактивные пептиды.

2.5.1.10. СОКР.

2.5.1.11. Серотонин.

2.5.1.12. Маркеры апоптоза.

2.5.2. Влияние различных факторов на морфо-функциональный статус плаценты.

2.5.3. Влияние возраста беременной женщины на функциональную морфологию плаценты.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

Глава 3. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Исследуемый материал.

3.2. Методы исследования.

3.2.1. Гистологические методы.

3.2.2. Иммуногистохимические методы.

3.2.3. Морфометрические методы и компьютерный анализ микроскопических изображений.

3.2.4. Статистическая обработка результатов.

Глава 4. ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

ДОНОШЕННЫХ ПЛАЦЕНТ.

4.1. Экспрессия гормонов — серотонина и соматостатина в клетках ворсинчатого хориона у женщин разного возраста.

4.2. Экспрессия эндотелиального маркера УЕОБ в клетках ворсинчатого хориона у женщин разного возраста.

4.3. Экспрессия С ОКР в клетках ворсинчатого хориона у женщин разного возраста.

4.4. Экспрессия интегрина С061 в клетках ворсинчатого хориона у женщин разного возраста.

4.5. Экспрессия маркеров Кл-67 и р53 в клетках ворсинчатого хориона у женщин разного возраста.

Глава 5. АНАЛИЗ МОРФО-ФУНКЦИОНАЛЬНОГО

СОСТОЯНИЯ ДОНОШЕННЫХ ПЛАЦЕНТ. д

Глава 6. ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

СТАРЕНИЯ» ПЛАЦЕНТЫ.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

Глава 7. СИГНАЛЬНЫЕ МОЛЕКУЛЫ КАК МАРКЕРЫ

ЗРЕЛОСТИ И СТАРЕНИЯ ПЛАЦЕНТЫ У ЖЕНЩИН РАЗНОГО ВОЗРАСТА.

7.1. Особенности синтеза и секреции гормонов плодовой части плаценты.

7.2. Влияние возраста беременной на структурно-функциональные особенности плаценты.

7.3. Изучение феномена «старения» плаценты

Введение диссертации по теме "Геронтология и гериатрия", Пальченко, Наталья Александровна, автореферат

Актуальность темы

Многочисленные пептиды, биогенные амины, стероиды, цитокины и другие сигнальные молекулы [которых уже верифицировано в плаценте более 100] выполняют роль гормонов, ферментов, проферментов, ингибиторов, рецепторов, факторов роста, иммунорегуляторных агентов, транспортных и связывающих белков [Кветной И.М. и др., 2005].

Цель и задачи исследования

Для достижения указанной цели были поставлены и последовательно решены следующие задачи:

3. Верифицировать экспрессию пептида, ассоциированного с геном кальцитонина [СОМ5] в ворсинчатом хорионе у женщин различных возрастных групп.

4. Выявить особенности экспрессии маркера молекул адгезии — интегрина С061 как показателя устойчивости межклеточных связей в плаценте у женщин разного возраста.

5. Оценить влияние возраста беременной на процессы клеточного обновления в плодовой части плаценты.

Научная новизна работы

Впервые проведена верификация и анализ экспрессии гормонов соматостатина и серотонина, а также маркеров УЕОБ, СОЫР, СБ61, р53, Кл-67 в ворсинчатом хорионе зрелой плаценты у беременных разного возраста. Изучена возрастная динамика экспрессии исследуемых сигнальных молекул в ворсинчатом хорионе. Впервые выявлено снижение степени экспрессии соматостатина, серотонина, УЕОБ, СОШ5, р53, Кл-67 клетками плодовой части плаценты в связи с увеличением возраста беременной женщины. При этом показано, что параметры экспрессии СОИР в ворсинчатом хорионе достоверно снижаются у юных первородящих и беременных старше 29 лет по сравнению с таковыми у женщин нормального репродуктивного возраста.

Установлены отличия в степени экспрессии интегрина CD61 в плаценте у женщин разного возраста. Впервые отмечено, что параметры экспрессии CD61 в плаценте у женщин разного возраста неодинаковы, так площадь экспрессии маркера CD61 в ворсинчатом хорионе достоверно увеличивается с возрастом беременной. Снижение васкуляризации ворсин хориона выявлено как у юных рожениц, так и у рожениц, старше 29 лет.

Результаты исследования свидетельствуют о снижении пролиферативной активности ворсинчатого хориона в связи с увеличением возраста беременной. При этом максимальная площадь экспрессии маркера пролиферации Ki-67 обнаружена в плацентах у женщин нормального репродуктивного возраста. Покзано, что число делящихся клеток прогрессивно увеличивается с возрастом беременной.

При оценке структурно-функциональной организации плаценты отмечается отсутствие отличий в экспрессии гормонов и сигнальных молекул [соматостатина, серотонина, VEGF, CGRP, CD61, р53 и Ki-67] в плацентах при доношенной и переношенной беременности, что свидетельствует о сохранении функциональной зрелости, а не о старении плаценты при увеличении продолжительности сроков гестации.

Практическая значимость работы

Полученные результаты позволяют расширить представления о морфо-функциональных изменениях плаценты в связи с возрастом беременной, что следует учитывать в акушерско-гинекологической практике для повышения эффективности профилактических и лечебных мероприятий.

Проведенные исследования позволили оценить диагностическую и прогностическую значимость иммуногистохимической верификации таких маркеров, как VEGF, CGRP, CD61, р53, Ki-67 при патогистологическом изучении плаценты после родов у женщин старшего репродуктивного возраста. Их применение позволяет оценить степень функциональной зрелости плаценты при прогнозе перинатального состояния новорожденных детей.

1. Экспрессия соматостатина, серотонина, УЕОБ, СОКР, р53 в клетках ворсинчатого хориона прогрессивно снижается в связи с увеличением возраста беременной женщины.

2. Экспрессия К1-61 в ворсинчатом хорионе, а следовательно и его пролиферативная активность с увеличением возраста матери прогрессивно снижается.

3. Достоверные отличия в концентрации и характере экспрессии соматостатина, серотонина, УЕОБ, СОШ?, р53, С061, и Кл-67 в ворсинчатом хорионе при доношенной и переношенной беременности отсутствуют, что дает основание считать, что при переношенной беременности не происходит «старческой» инволюции плаценты.

Связь с научно-исследовательской работой Института

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы с изложением материала и методов исследования, 3 глав собственных исследований, главы обсуждения результатов, выводов, практических рекомендаций и указателя литературы. Работа иллюстрирована 29 рисунками и содержит 4 таблицы. Текст диссертации изложен на 145 страницах. Список литературы содержит 267 источников [38 отечественных и 229 зарубежных].

Заключение диссертационного исследования на тему "Морфо-функциональное состояние плаценты у женщин разных возрастных групп"

выводы

1. Установлены достоверные корреляции между возрастом матери и степенью экспрессии гормонов и сигнальных молекул — соматостатина, серотонина, УЕОБ, СОКР, СБ61, р53, К1-67 в ворсинчатом хорионе зрелой плаценты.

3. Снижение васкуляризации ворсин хориона наблюдается как у юных рожениц, так и у рожениц, старше 29 лет.

4. Параметры экспрессии СвИР в ворсинчатом хорионе достоверно снижаются у юных первородящих и беременных старше 29 лет по сравнению с таковыми у женщин нормального репродуктивного возраста.

6. Пролиферативная активность ворсинчатого хориона снижается в связи с увеличением возраста беременной. Максимальная площадь экспрессии маркера пролиферации Кь67 обнаружена в плацентах у женщин нормального репродуктивного возраста. Число делящихся клеток прогрессивно увеличивается с возрастом беременной.

7. Отсутствие отличий в экспрессии гормонов и сигнальных молекул в плацентах при доношенной и переношенной беременности свидетельствует о сохранении функциональной зрелости, а не о старении плаценты при увеличении продолжительности сроков гестации.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

При патогистологическом изучении плаценты после родов у женщин старшего репродуктивного возраста рекомендуется кроме рутинных окрасок использовать иммуногистохимические маркеры [особенно УЕвР, СвИР, СБ61, р53, Кл-67] для оценки степени функциональной зрелости плаценты при прогнозе перинатального состояния новорожденных детей.

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2011 года, Пальченко, Наталья Александровна

1. Брусиловский А.И. Развитие и строение тканей хориона в раннем онтогенезе человека // Автореф. дис.канд. мед. наук. — Новосибирск, 1963.-21 с.

2. Брусиловский А.И. Функциональная морфология плацентарного барьера человека. Киев, «Здоровье», 1976. - 129 с.

3. Волкова О.В., Тарабрин С.Б. Эмбриогенез человека и его регуляция. -М., 1973. 143 с.

4. Глуховец Б.И., Глуховец Н.Г. Патология последа. — Санкт-Петербург, «Грааль», 2002. 448 с.

5. Говорка Э. Плацента человека. Варшава, Польское государственное медицинское издательство, 1970. - 470 с.

6. Григорьев М.Ю., Имянитов E.H., Хансон К.П. Апоптоз в норме и патологии // Медицинский академический журнал. 2003. - Т. 3, № 3. - С. 3-11.

7. Зыбина Е.В. Цитология трофобласта. Л.: «Наука», 1986. — 192 с.

8. Калашникова Е.П., Зубжицкая Л.Б. Иммунолюминесцентное исследование плаценты при нормальной и патологической беременности -Труды Ленингр. науч. о-ва патологоанатомов, 1976.-вып. 17. С. 272-277.

9. Карева И.В. Факторы генетического и акушерского риска в пренатальной диагностике хромосомных болезней // Автореф. дис.канд. мед. наук. Санкт-Петербург , 1999. - 23с.

10. Кащенко Н. А. Эпителий человеческого хориона и его роль в гистогенезе последа. Харьков, 1884. - 33с.

11. Кветная Т.В., Князькин И.В. Серотонин: роль и значение в возрастной патологии. СПб.: ВМедА, 2003. - 93 с.

12. Кнорре А.Г. Краткий очерк эмбриологии человека. Л.: «Медгиз», 1959.-223с.

13. Князев Ю.А., Беспалова В.А. Проблемы перинатальной эндокринологии // Педиатрия. 1984. - № 4. - С. 59-64.

14. Кобозева Н.В., Гуркин Ю.А. Перинатальная эндокринология. Руководство для врачей. Л: Мед., 1986. - 311 с.

15. Колесников С.И. Периферический цитотрофобласт плаценты человека // Автрореф. дис. канд. мед. наук. Симферополь, 1973. - 22 с.

16. Маисая Г.И. К вопросу о некоторых гистохимических особенностях плаценты и плацентарной площадки матки женщины в разные сроки беременности. Тбилисси, 1979. - 45 с.

17. Мануйлова И.А. Баграмян Э.Р. Эндокринология беременности // Вопросы охраны материнства и детства. — 1972. Т. 17, № 11. — С. 38-42.

18. Милованов А.П. Патология системы мать плацента - плод. Руководство для врачей. -М., «Медицина», 1999. - 448 с.

19. Милованов А.П., Курик Е.Г. Функциональная морфология вневорсинчатого преферического. трофобласта плаценты человека // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1990. - № 10. - С. 77-82.

20. Михайлова Н.П. Гистоэнзиматические особенности плаценты в норме и при некоторой акушерской патологии. Горький, Горьковский медицинский институт, 1977 - 73 с.

21. Пальцев М.А., Волощук И.Н., Демидова Е.М., Мещерякова A.B., Носов В.Б. Иммунологические аспекты материнско-плодовых взаимоотношений // Вестник РАМН —.1999. № 5. - С. 32-36.

22. Пальцев М.А., Иванов A.A. Межклеточные взаимодействия. М., «Медицина», 1995. - 224 с.

23. Рыков В.А. Распределение а2-макроглобулина, ассоциированных с беременностью протеина-А и а2 гликопротерина в плаценте человека // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1990. - № 10. - С. 74-76.

24. Савельева Г.М., Федорова M.B. М.В., Клименко П.А., Сичинаева Л.Г. Плацентарная недостаточность. -М., «Медицина», 1991. 276 с.

25. Сельков С.А., Павлов О.В. Плацентарные макрофаги. -Товарищество научных изданий KHK. М., 2007. - 185 с.

26. Степанов С.А., Исакова М.И., Миронов и др. Введение в клиническую морфологию плаценты человека. Саратов, 1991. 168 с.

27. Субботин М.Я., Донских Н.В., Брусиловский А.И., Новиков В.Д. Плацента человека // Сборник научных статей: «Гистофизиология и гистопатология внезародышевых органов человека и млекопитающих». -Новосибирск, 1971. С. 67-71.

28. Таболин A.A., Лукина Л.И. Актуальные проблемы перинатальной эндокринологии // Педиатрия. — 1981. — № 2. С. 5-8.

29. Федорова М.В., Калашникова Е.П. Плацента и ее роль при беременности. Москва, «Медицина», 1986 - 256 с.

30. Цинзерлинг A.B. Современные инфекции. Патологическая анатомия и вопросы патогенеза. Санкт-Петербург., «Сотис», 1993. - 363 с.

31. Цинзерлинг В.А., Мельникова В.Ф. Перинатальные инфекции. Вопросы патогенеза, морфологической диагностики и клиникоморфологических сопоставлений. Практическое руководство. — Санкт-Петербург., «Элби СПб», 2002. 352 с.

32. Цирельников Н.И. Гистофизиология хориона в системе мать -плацента плод на различных сроках беременности // Автореф. дис. доктора мед. наук. - Новосибирск, 1974. - 34 с.

33. Цирельников Н.И. Гистофизиология плаценты человека. — Новосибирск: «Наука», 1980. 184 с.

34. Чернуха Е.А., Орлова В.Г., Афонина Л.И. Соотношение эстрагенов и прогестерона в плазме крови при перенашивании беременности // Акушерство и гинекология. 1986. - № 1 - С. 31-36.

35. Ширшев С.В. Иммунобиологические особенности антигенов плаценты //Успехи современной биологии. 2000. - Т. 120, № 3. - С. 279290.

36. Шорлуян А.П. Морфо-микроскопическое строение плаценты юных рожениц // Актуальные вопросы практического здравоохранения. -Ставрополь. 1984.- С 43-44.

37. Abraham S., Indrasingh I., Vettivel S. Gross morphology and ultrastructure of dendritic cells in the normal human decidua // Clin. Anat. — 2000.-V. 13, №3.-P. 177-80.

38. Aherne W., Dunnill M. S. Quantitative aspects of placental structure // J. of Pathol. Bacterial. 1966. -V. 91. - P. 123-139.

39. Al-Hijji J., Andolf E., Laurini R., Batra S. Nitric oxide synthase activity in human trophoblast, term placenta and pregnant myometrium // Reprod Biol Endocrinol-2003.-V. 1,№1.-P. 1-11.

40. Amonkwah K.S., Weberg A.D., Kaufmann R.C., Ultrastructure of human placenta. Effect of maternal drinking // Proc 39th Annu Meet Electron Microse Soc Amer Atlanta, Ga, Baton Rouge. 1981. - P. 546-547.

41. Andersen JR. Decidual prolactin. Studies of decidual and amniotic prolactin in normal and pathological pregnancy // Dan Med Bull 1990. - V. 37.-P. 154-165.

42. Ashworth C.J., Hoggard N., Thomas L. Placental leptin // Reviews of reproduction. 2000. - V. 5. - P. 18-24.

43. Asmussen I. Ultrastructure of the villi and fetal capillaries in placentas from smoking and nonsmoking mother // Brit J Obstet and Gynecol 1980. -V. 87, №3.-P. 239-245.

44. Aziziech F., Raghupathy R., Makheed M. Maternal cytokine production patterns in women with pre-eclampsia. // Am. J. Reprod. Immunol. 2005. - V. 54. - №1. - P. 30-37.

45. Bazan JF. Haemopoietic receptors and helical cytokines // Immunol Today-1990.-V. 11.-P. 350-354.

46. Benirschke K., Kaufmann P. // Patology of the Human Placenta. 3rd ed. - New York: Springer-Verlag, 1990. - 720 p.

47. Benyo D.F., Miles T.M., Conrad K.P. Hypoxia stimulates cytokine production by villous explants from the human placenta. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2000. - V. 82. -№5.-P. 1582-1588.

48. Bern HA, and Nicoll CA. The comparative endocrinology of prolactin // Rec Prog Horm Res 1968. - V. 24. - P. 681-720.

49. Bigazzi M., Pollicino G., Nardi E. Is human decidua a specialized endocrine organ? // J Clin Endocrinol Metab. 1979. - V. 49, № 6. - P. 847850.

50. Bocconi L., Mauro F., Maddalena S.E. Insuline-like growth factor 1 in controls and growth-retarded fetuses // Fetal Diagnosis and Therapy. 1998. -V.13. -P.192-196.

51. Boyd J.D., Hamilton W.J. The human placenta. Cambrige, Heffer, 1970.- 183p.

52. Boyd P.A. Quantitative studies of the normal human placenta from 10 weeks of gestation to term // Early Hum. Devel. 1984. - Vol. 9. - p. 297-307.

53. Braithwaite GD, Glascock RF, and Riazuddin S. Studies on the transfer of calcium across the ovine placenta and incorporation into the foetal skeleton // Br J Nutr 1972. - V. 27. - P. 417-424.

54. Bukovsky A, Cekanova M, Caudle MR et al. Variability of placental expression of cyclin E low molecular weight variants // Biol Reprod. — 2002. — Vol. 67, №2.-p. 568-74.

55. Bulmer JN, Morrison L, Smith JC. Expression of class II MHC gene products by macrophages in human uteroplacental tissue. // Immunology. 1988. -V. 63, №4. P. 707-714.

56. Buskila D, and Shoenfeld Y. Prolactin, bromocriptine and autoimmune diseases // Isr J Med Sci 1996. - V. 32. - P.23-27.

57. Cano A, Rivera J. Demonstration of P29, an oestrogen receptor-associated tumor marker, in human term placenta // Placenta. 1991 - V. 12, № 2-P. 153-160.

58. Challis JR, Smith SK. Fetal endocrine signals and preterm labor // Biol Neonate.-2001.-V. 79, №3-4-P. 163-167.

59. Chan J.S., Nie Z.R., Seidah N.G., Chretien M. Purification of ovine placental lactogen oPL. using high-performance liquid chromatography. Evidence for two of oPL // FEBS Lett 1986. - V.199, № 2.- P. 259 - 264.

60. Chao H-S, Myer S.E., Handwerger S. Endothelins inhibits basal and stimulated release of prolactin by human deciduals cells // Endocrinology -1994.-V. 133.-P. 505-510.

61. Cheville J.C., Robinson R.A., Benda J.A. p53 expression in placentas with hydropic change and hydatidiform moles //Mod Pathol. 1996. - V 9, № 4-P 392-396.

62. Clapp C, and De la Escalera GM. Prolactins: novel regulators of angiogenesis//News Physiol Sci 1997. - V.12. -P. 231-237.

63. Clavero-Nunez J.A. Patologa-placentario // Rev. Esp. Obstet. Gynecol. -1962. -V. 20. P. 208-215.

64. Clements J, Whitfeld P, Cooke N, Healy D, Matheson B, Shine J, and Funder J. Expression of the prolactin gene in human decidua-chorion // Endocrinology 1983. - V. 112. - P. 1133-1134.

65. Cook M., Graham C., Kavet R. Morning urinary assessment of noctural melatonin secretion in older woman // J. Pineal Res-2000.-Vol. 28. P. 41-47.

66. Cooke N.E., Coit D., Shine J., Baxter J.D., Martial J.A. Human prolactin cDNA structural analysis and evolutionary comparisons // J Biol Chem 1981. -V. 256.-P. 4007-4016.

67. Cronier L., Bastide A. Gap junctional communication during human trophoblast differentiation: influence of human chorionic gonadotropin // Endocrinology. 1994. -V. 135 1., № 6 - P. 402-408.

68. Csikos T., Gallinat S., Unger T. Extrarenal aspects of angiotensin II function // Eur J Endocrinol 1997. - V. 136. - P. 349-358.

69. Daniel I., Linzer H., Fisher S.J. The placenta and the prolactin family of hormones: regulation of the physiology of pregnancy. // Molecular Endocrinology. 1999. - V. 13, № 6. - P.837-840.

70. Dilioglou S., Cruse J.M., Lewis R.E. Costimulatory function of umbilical cord blood CD14+. and CD34[+] derived dendritic cells // Exp. Mol. Pathol. 2003. - V. 75, № 1. - P. 18-33.

71. Douglas GC, King BF. Isolation of pure villous cytotrophoblast from term human placenta using immunomagnetic microspheres // J Immunol Methods. 1989 - V. 119, № 2. - P. 259-268.

72. Dragovich T., Rudin C.M., Thompson C.B. Signal transduction pathways that regulate cell survival and cell death //Oncogene. 1998. — V. 24, №1725. - P. 3207-3213.

73. Duncan K.G., Haidar M.A., Baxter J.D., Reudelhuber T.L. Regulation of human renin expression in chorion cell primary cultures // Proc Natl Acad Sci USA. 1990. - V. 87. - P.7588-7592.

74. Ether J.-F., Findlay J.K. Roles of activin and its signal transduction mechanisms in reproductive tissues // Reproduction. 2001. - V. 121. - P. 667675.

75. Florio P., Cobellis L., Luisi S. Changes in ingibins and activin secretion in healthy and pathological pregnancies // Mol Cell Endocrinol 2001. - V. 30. -P. 123-130.

76. Fox H. Aging of the placenta // Arch Dis Child Fetal Neanatal Ed. -1997.-V. 77.-P. 171-175.

77. Fox H. Pathology of the placenta // Clin. Obstet. Gynecol. 1986. - V. 13, № 3. - P. 501-519.

78. Fox H., Agrafojo-Blauco A. Scaningelectron microscopy of the human placenta in normal and abnormal pregnancies // Eur. J. Ostet. Gyn. Reprod. Biol. 1974. - V. 4. - P. 45-50.

79. Fox H., Page Fack W. The human placenta as an experimental model // Clin Endocrin. Metaboll. 1981. - V. 10, № 1. - P. 57-72.

80. Frame L. T., Wiley L., Rogol A.D. Indirect immunofluorescent localization of prolactin to the cytoplasm of decidua and trophoblast cells in human placental membranes at term // J Clin Endocrinol Metab. 1979. - V. 49, №3.-P. 435-437.

81. Frank H-G., Malekzadeh F., Kertschanska S. Immunohistochemistry of two different types of placental fibrinoid // Acta Anat. 1994. - V. 150 - P. 5568.

82. Freeman M E., Kanyicska B., Lerant A., Nagy G. Prolactin: Structure, Function, and Regulation of Secretion // Physiol. Rev. 2000. - V. 80. - P. 1523-1631.

83. Frim D.M., Emanuel R.L., Robinson B. G. Characterization and gestational regulation of corticotropin-releasing hormone messenger RNA in human placenta // J Clin Invest 1988. - V. 82. - P. 287-292.

84. Fukuda M, Okuyama T, Furuya H. Growth and function of the placenta -with special reference to various enzymes involved in the biosynthesis of steroids in the human placenta // Nippon Sanka Fujinka Gakkai Zasshi. 1986. -V. 38, №3.-P. 411-416.

85. Fulop V., Mok S.C., Genest D.R., Gati I., Doszpod J., Berkowitz R.S. p53, p21, Rb and mdm2 oncoproteins. Expression in normal placenta, partial and complete mole, and choriocarcinoma //J Reprod Med. 1998. -V. 43, № 2 -P. 119-27.

86. Garcia-Lloret M.I., Yui J., Winkler-Lowen B., Guilbert L.J. Epidermal growth factor ingibits cytokine-induced apoptosis of primary human trophoblast // J Cell Physiol 1996. - V. 167. - P. 324-332.

87. Geier G., Schuhman R., Kraus H., Regional unterschliedliche Zell proliferation innerhalb der Placentome . reifer menschlicher Placenten: autoradiographische Untersuchungen // Arch Gynacol. 1975. - V. 218. - P. 31-37.

88. Goland R.S., Wardlaw S.L., Stark R.I. High levels of corticotropin-releasing hormone immunoreactivity in maternal and fetal plasma during pregnancy // J. Clin Endocrinol Metab 1986. - V. 63. - P. 1199-1203.

89. Golander A., Hurley T., Barrett J., Handwerger S. Synthesis of prolactin by human decidua in vitro // J Endocrinol. 1979. - V. 82, № 2. - P. 263-267.

90. Goldman B.D. Pattern of melatonin secretion mediates transfer of photoperiod information from mother to fetus in mammals // Sci STKE. — 2003. -V. 22.-P. 29.

91. Goldstein J, Braverman M, Salafia C, Buckley P. The phenotype of human placental macrophages and its variation with gestational age // Am J Pathol. 1988. - V. 133, № 3. - P. 648-659.

92. Grattan D.R. The actions of prolactin in the brain during pregnancy and lactation // Prog Brain Res 2001. - V. 133. - P. 153-171.

93. Haidacher S., Blaschitz A., Desoye G., Dohr G. Immunohistochemical evidence of p53 protein in human placenta and choriocarcinoma cell lines // Hum Reprod. 1995. -V. 10, № 4. - P. 983-988.

94. Halperin R., Peller S., Sandbank J., Bukovsky I., Schneider D. Expression of the p53 gene and apoptosis in gestational trophoblastic disease // Placenta. 2000. - V. 21, № 1 - P. 58-62.

95. Hambartsoumian E., Srivastara R.K., Seibel M.M. Differential expression and regulation of inducible nitric oxide synthase iNOS. mRNA in human trophoblast in vitro // Am J Reprod Immunol. 2001. - V. 45, № 2. - P. 78-85.

96. Handwerger S., Markoff E., Richards R. Regulation of the synthesis and release of decidual prolactin by placental and autocrine/paracrine factors // Placenta.-1991.-V. 12, №2.-P. 121-130.

97. Hassink S.G., de Lancey E., Shelow D.V. Placental leptin: an important new growth factor in intrauterine and neonatal development? // Pediatrics. 1997. -V. 100. -E1-E7.

98. Hatta K., van den Heuvel M.J., Croy B.A. NK cells detect changes in adaptive immunity within mouse decidua from gestation day eight. // Placenta. 2009. - V. 30. - №6. - P. 501-506.

99. Hayashi M., Hamada Y., Ohkura T. Elevation of granulocyte-macrophage colony-stimulating factor in the placenta and blood preeclampsia. // Am.J. Obstet Gynecol. 2008. - V. 190. - №2. - P. 456-461.

100. Healy D.L. The clinical significance of endometrial prolactin. // Aust N Z J Obstet Gynaecol. 1984. - V. 24. - N. 2. - P. 111-116.

101. Healy D.L., Burger H.G., Muller H.K. Hypothesis: placental membranes produce prolactin // Mol Cell Endocrinol. 1978. - V. 11, № 1. -P. 1-6.

102. Heap R.B. Paracrine and autocrine functions of the placenta: a key to the success of viviparity? // Exp Clin Endocrinol 1994. - V. 102, № 3. - P. 262-268.

103. Henson M.C., Swan K.F., O'neil J.S. Expression of placental leptin and leptin receptor transcripts in early pregnancy and at term // Obstet Gynecol. 1998. -V. 92. - P. 1020-1028.

104. Hill D.J., Petrik J., Arany E. Growth factors and the regulation of fetal growth // Diabetes Care. 1998. - V. 21 Supplement 2. B60-B69.

105. Hill J.A., Choi B.C. Maternal immunological aspects of pregnancy success and failure // J. Reprod. Fertil. Suppl. 2000. - V. 55. - P.91-97.

106. Hill N.C., Rivera J, Lopez Bernal A., MacKenzie I.Z. The effect of RU 38,486 on progesterone and oestrogen receptor concentrations in the decidua and placenta in early pregnancy // Hum Reprod. 1990. - V.5, № 4 -P. 464-467.

107. Hirohashi T., Hoshino A., Sudo Y. Dynamics of various peptide hormone receptors in human placental cell membranes // Nippon Sanka Fujinka Gakkai Zasshi 1984. - V. 36, № 6. - P. 904-910.

108. Hocker I., Briese V., Richter D.U. Investigations on regulation of CRH, ACTH and Cortisol in trophoblast cells in vitro // Zentralbl Gynakol. -2003 V. 125, № 10 - P. 409-14.

109. Hofman G.E., Rao C.V., Brown M.J. Epidermal growth factor in uterin of nonpregnant women and pregnant women throughout pregnancy and at delivery // Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. 1988. -V.66.-P. 119-123.

110. Huppertz , Frank H-G, Kingdom J.C.P., Reister F., Kaufmann P. Villous cytotrophoblast regulation of the syncytial apoptotic cascade in the human placenta // Histochemistry and Cell Biology 1999. - V 110, № 5 - P. 495-508.

111. Iggnarro L.J. Signal transdoction mechanisms involving nitric oxide // Biochem Pharmacol. 1991. - V. 41. - P. 485-490.

112. Inoe A., Yanagisawa M., Kimura S. The human endothelin family: Three structurally and pharmacological profile of a potent and selective endothelin B-receptor antagonist // Proc Natl Acad Sci USA 1989. - V. 86. -P.2863-2867.

113. Iorio D.R., Marinoni E., Cosmi E.V. New peptides, hormones and parturition // Gynecol Endocrinol 1998. - V. 12, № 6. - 429-434.

114. Iverson I.E., Farsund T. Flow cytometry in the assessment of human placental growth // Acta Obstet Scand. 1985. - V. 64. - P. 605-607.

115. Jackson M.R., Mayhew T.M., Boyd P.A. A quantitative description of the elaboration and maturation of villy from 10 weeks of gestation to term // Placenta. 1992. - V. 13. - P. 357-370.

116. Jaikihara H., Poisner A.M., Hirsch R., Handwerger S. Human uterine decidual macrophages express renin // J Clin Endocrinol Metab 1995. - V. 80. -P. 1273-1277.

117. John M., Rajalekshmy T.N., Nair M.B. et al. Expression of epidermal growth factor in gestational trophoblastic disease GTD. // Journal of Experimental Clinical Cancer Research 1997. - V.16. - P. 129-134.

118. Jones S.A., Challis J.R.G. Local stimulation of prostaglandin production by cortocotropin-releasing hormone in human fetal membranes and placenta // Biochem Biophys Res Commun 1989. - V. 159. - P 192-199.

119. Kalenga M.K., de GasparoM., Thomas K., De Hertogh R. Angiotensin II stimulates estradiol secretion from human placenta explants through AT-1 receptor activation // J Clin Endocrinol Metab 1995. - V.80. - 1233-1237.

120. Kammerer U., Schoppet M., McLellan A. Human decidua contains potent immunostimulatory CD83+. dendritic cells // Am. J. Pathol. 2000. -V. 157, № 1. -P.159-169.

121. Kara S.A., Toppare M.F., Avsar F., Caydere M. Placental aging, fetal prognosis and fetomaternal Doppler indices. // Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 1999. - V. 82, № 1. - P. 47-52.

122. Karlsson C., Lindell K., Svensson E. Expression of functional leptin receptors in the human ovary // J Clin Endocrinol Metab. 1997. - V. 82. - P. 4144-4148.

123. Kasai K., Shik S.S., Yoshida Y. Production and localization of human prolactin in placenta and decidua in early and term normal pregnancy // Int Biol Res Pregnancy. 1982. -V. 3, № 1 - P. 25-29.

124. Kaufmann P., Luckhard N., Leiser P. Three-dimensional representation of the fetal vessel system in the human placenta // Trophoblast Res. 1988. -V.3. - P. 113-137.

125. Kay H.H., Grindle K.M., Magness R.R. Ethanol exposure oxidative stress and impairs nitric oxide availability in the human placental villi: a possible mechanism of toxicity // Am J Obstet Gynecol 2000. - V. 182, № 3. -P. 682-688.

126. Kayem G., Batteux F. Immunology of pregnancy. // Presse Med. -2008.-V. 3711.-P. 1612-1619.

127. Kim J.S., Romero R., Kim M.R. et al. Involvement of Hofbauer cells and maternal T cells in villitis of unknown aetiology. // Histopathology. - 2008. -V. 52.-№4.-P. 457-464.

128. Kleim T. Proliferative activity in ectopic trophoblastic tissue // Hum. Reprod. 1995 - V. 10, № 9 - P. 2441-2444.

129. Kudo T., Izutsu T., Sato T. Telomerase activity and apoptosis as indicators of ageing in placenta with and without intrauterine growth retardation. // Placenta. 2000. - V. 21, № 5-6. - P. 493-500.

130. Kvetnoy I.M. Extrapineal melatonin in pathology: new perspectives for diagnosis, prognosis and treatment of illness // Neuroendocrinol Lett. -2002.-V. 231.-P. 92-96.

131. Kvetnoy I.M. Extrapineal melatonin: location and role within diffuse neuroendocrine system // The Histochemical Journal. 1999. - V.31. - P. 1-12.

132. Laskarin G., Cupurdija K., Tokmadzik V.S. et al. The presence of functional mannose receptor on macrophages at the maternal fetal interface. // Hum. Reprod. - 2005. - V. 20. - №4. - P. 1057-1066.

133. Lauszus F.F., Klebe J.G., Flyvbierg A. Macrosomia associated with maternal serum insulin-like growth factor-I and -II in diabetic pregnancy // Obstetrics and gynecology. 2001. - V. 97. - P. 734-741.

134. Lea R.G., Hannah L., Blades J. et al. Placental leptin in normal and abnormal pregnancies // Journal of Reprodaction and Fertility. Abstract Series -V. 21.-Abstract41.

135. Lea R.G., Riley S.C., Antipatis C. et al., Cytokines and the regulation of apoptosis in reproductive tissues: a rewiew // Am J Reprod Immunol — 1999. -V. 42.-P. 100-109.

136. LeeY.S. p53 expression in gestational trophoblastic disease // Int J Gynecol Pathol. 1995. - V 14, № 2. - P. 119-124.

137. Leontic EA, Tyson JE. Prolactin and fetal osmoregulation: water transport across isolated human amnion // Am J Physiol Regulatory Integrative Comp Physiol 1977. - V. 232. - P. 124-127.

138. Lepercq J., Cauzac M., Lahlou N. Oveexpression of placental leptin in diabetic pregnancy // Diabetes 1998. - V. 47. - P. 847-860.

139. Lessin DL, Hunt JS, King CR, Wood GW. Antigen expression by cells near the maternal-fetal interface // Am J Reprod Immunol Microbiol. -1988.-V. 16, № l.-P. 1-7.

140. Levy R, Smith S.D., Yusuf K. Trophoblast apoptosis from pregnancies complicated by fetal growth restriction is associated with enhanced p53 expression // Am J Obstet Gynecol. 2002. -V. 186, № 5 - P 1056-1061.

141. Levy R., Smith S.D., Chadler K. et al. Apoptosis in human cultured trophoblasts is enhanced by hypoxia and diminished by epidermal growth factor. // Am. J. Physiol. Cell Physiol. 2000. - V. 278. - №5. - P. 982-988.

142. Li R.H., Zhuang L.Z. Study of reproductive endocrinology of human placenta culture of highly purified cytotrophoblast cell in serum-free hormone supplement medium // Sci CHINA B - 1991. - V. 34, № 8. - P. 938-946.

143. Li Y., Zhu H. A study on the relation between nitric oxide and abnormal development of embryos // Wei Sheng Yan Jiu. 1997. - V. 26, № 3. -P. 162-166.

144. Linzer D.I.H., Fisher S.J. The placenta and the prolactin familyof hormones: regulation of the physiology of pregnancy // Molecular endocrinology 1999. -V. 13, № 6. - P. 837-840.

145. Liu J.P., Baker J., Perkins A.S. Mice carrying null mutations of the genes encoding insulin-like growth factor I Igf-1. and type 1 IGF receptor [Igf lr] // Cell. V. 75. -P.59-72.

146. Maaskant R.A., Bogie L.V., Gilger S. The human prolactin receptor in the fetal membranes, decidua, and placenta // J Clin Endocrinol Metab. 1996. -V. 81, № 1.-P. 396-405.

147. Maggi M., Vannellini G.B., Fantoni G. Endothelin in the human uterus during pregnancy // J Clin Endocrinol Metab 1994. - V. 142. - P. 385396.

148. Malassine A., Cronier L. Hormones and human trophoblast differentiation: a review. // Endocrine. 2002. - V. 19, № 1. - P. 3-11.

149. Malassine A., Cronier L. Hormones and human trophoblast differentiation: a review. // Endocrine. 2002. - V. 19. - № 1. - P. 3-11.

150. Malassine A., Cronier L., Mondon F. Localization and production of immunoreactive endothelin in the trophoblast of human placenta // Cell Tissue Res 1993. - V.271. -P.491-497.

151. Manku M.S., Mtabaji J.P., Horrobin D.F. Effect of Cortisol, prolactin and ADH on the amniotic membrane // Nature 1975. - V. 258. - P. 78-80.

152. Marzusch K., Ruck P., Horny H.P., Dietl J., Kaiserling E. Expression of the p53 tumour suppressor gene in human placenta: an immunohistochemical study//Placenta- 1995.-V 16, № 1-P. 101-104.

153. Masaki T. Endothelins: Homeostatic and compensator actions in the circulatoty and endocrine systems // Endocrin Rev 1993. - V. 14. - P. 256275.

154. Masuzaki H., Ogawa Y., Sagawa N. Nonapidose tissue production of leptin: leptin as a novel placenta-derived hormone in humans // Nat Med. -1997. V. 3, № 9. - P. 952-953.

155. McLean M., Smith R. Corticotropin-releasing hormone in human pregnancy and parturition // Trends in Endocrinology and Methabolism 1999. -V. 10.-P. 174-178.

156. Mellon S.H., Vaudry H. Biosynthesis of neurosteroids and regulation of their synthesis // Int Rev Neurobiol. 2001. - V. 46 - P. 33-78.

157. Moffett A., Loke Y.W. The immunological paradox of pregnancy: a reappraisal. // Placenta. 2004. - V. 25. - №1. - P. 1-8.

158. Moncada S., Palmer R.M.J., Higgs E.A. Nitric oxide: physiology, pathophysiology and pharmacology // Pharmacol Rev 1991. - V.43. - P. 109142.

159. Mondon F., Malassine A., Robaut C. et al. Endothelin-1 binding sites on trophoblast and blood vessels of human placenta. // J Clin Endocrinol Metab 1993. -V. 76. - P. 237-244.

160. Moore K.W., Waal Malefyt R. de, Coffinan R.L. et al. Interleukin-10 and the Interleukin-10 receptor. // Annu. Rev. Immunol. 2001. - V. 19. - P. 638-765.

161. Morrish D.W. Epidermal growth factor induces differentiation and secretion of human chorionic gonadotropin and placental lactogen in normalhuman placenta // Clin Endocrinol Metab. 1987. - V.65, № 12. - P. 12921290.

162. Muttukrishna S., Knight P.G., Groome N.P. Activin A and ingibin A as possible endocrine markers for preeclampsia // Lancet 1997. - V. 349. — P. 1285-1288.

163. Myatt L., Eis A.L., Brockman D.E. Inducible type II. nitric oxide synthase in human placental villous tissue of normotensive, preeclamptic and intrauterine growth-restricted pregnancies. // Placenta 1997. - V. 18, № 4. — P. 261-268.

164. Neidhart M. Prolactin in autoimmune diseases // Proc Soc Exp Biol Med 1998. - V. 217. - P. 408-419.

165. Nelson D.M. Apoptotic changes occur in syncytiotrophoblast of human placental villi where fibrin type fibrinoid is deposited at discontinuities in the villous trophoblast // Placenta. 1996. - V. 17, № 7 - P. 387-391.

166. Ni X., Chan E.C., Fitter J.T., Smith R. Nitric oxide inhibits corticotropin-releasing hormone exocytosis but not synthesis by cultured trophoblast // J Clin Endocrinol Metab. 1997. - V. 82, № 12. - P. 4171-4175.

167. Okatani Y., Okamoto K., Hayashi KL, Wakatsuki A., Tamura S., Sagara Y. Maternal-fetal transfer of melatonin in pregnant women near term // J. Pineal Res. 1998. -V. 25., № 3. - P. 129-134.

168. Okatani Y., Wakatsuki A., Shinohara K., Kaneda C., Fukaya T. Melatonin stimulates glutation peroxidase activity in human chorion // J. Pineal. Res. -2001. V.30, № 4. - P. 199-205.

169. Ota H., Igarashi S., Oyama N. Optimal levels of nitric oxide are crucitial for implantation in mice // Reprod Fertil Dev. 1999. — V. 11, № 3. — P. 183-188.

170. Otani T., Minami S., Kokawa K. Immunohistochemical localization of activin A in human endometrial tissues during the menstrual cycle and in erly pregnancy // Obstetrics and Gynecology. 1998. - V. 91 - P. 685-692.

171. Owerbach D., Rutter W.J., Cooke N.E., Martial J.A., Shows T.B. The prolactin gene is located on chromosome 6 in humans // Science 1981. - V. 212.-P. 815-819.

172. Ozenci C.C., Korgun E.T., Demir R. Immunogistichemical detection of CD45+, CD56+, and CD 14+ cells in human decidua during early pregnancy. // Early pregnancy. 2001. - V. 5. - №3. - P. 164-175.

173. Page N.M., Kemp C.F., Butlin D.J., Lowry P.J. Placental peptides as markers of gestational disease // Reproduction. 2002. - V. 123. - P. 487-495.

174. Pap E., Pallinger E., Falus A. et al. T lymphocytes are targets for platelet- and trophoblast-derived microvesicles during pregnancy. // Placenta. -2008. -V. 29.-P. 826-832.

175. Parmley T. Placental senescence. // Adv Exp Med Biol. 1984. - V. 176.-P. 127-132

176. Pearse A.G. The diffuse neuroendocrine system and the apud concept: related "endocrine" peptides in brain, intestine, pituitary, placenta and anuran cutaneos glands // Med Biol 1977. - V. 55, № 3. - P. 115-125.

177. Pepe G.J., Albrecht E.D. Actions of placental and fetal adrenal steroid hormones in primate pregnancy // Endocr. Rev. 1995. - V. 16, № 5. - P. 608648.

178. Pepe G.J., Albrecht E.D. Regulationof functional differentiation of the placental villous syncytiotrophoblast by estrogen during primature pregnancy // Steroids 1999. - V. 64, № 9. - P. 624-627.

179. Persaud V., Ganjei P., Nadji M. Cell proliferative activity and mutation of P53 suppressor gene in human gestational trophoblastic disease. // West Indian Med J. 1993 -V. 42, № 4 - P. 142-143.

180. Petit A., Belisle. Stimulation of intracellular calcium concentration by adenosine triphosphate and uridine 5-triphosphate in human term placental cells: evidence for purinergic receptors // J Clin Endocrinol Metab 1995. - V. 80, № 6. - P. 1809-1815.

181. Petraglia E., Sawchenko P.E., Rivier J., Vale W. Evidence for local stimulation of ACTH secretion by corticotropin-releasing factor in human placenta // Nature 1987. - V. 328. - P. 717-719.

182. Petraglia F., Florio P., Gallinelli A. Secretion and putative role of activin and CRF in human parturition // Annals of the New York Academy of Sciences 1994. - V. 734. - P. 380-386.

183. Pezzani I., Reis F.M., Leonardo C. Influence of non-gonadotrophic hormones on gonadal function // Mol Cell Endocrinol — 2000. — V. 30, № 161. -P. 37-42.

184. Poisner A.M. The human placental renin-angiotensin system // Frontiers in neuroendocrinology. 1998. -V. 19. - P. 232-252.

185. Poisner A.M., Downing G.J. Renin-angiotensin system in placenta. In: Sastry BVR, Placental Toxicology. Boca Raton: CRC Press, Inc., 1995. -P.175-196.

186. Poisner A.M., Wood G.W., Poisner R., Inagami T. Localization of renin in trophoblasts in human chorion laeve at term pregnancy // Endocrinology-1981.-V. 109.-P. 1150-1155.

187. Purcel T.L., Buhimschi I.A., Given R. Inducible nitric oxide synthase in present in the rat placenta at the fetal-maternal interface and decreases prior to labour // Mol Hum Reprod. 1997. - V.3, № 6. - P. 485-491.

188. Qiao S., Nagasaka T., Harada T., Nakashima N. p53, Bax and Bcl-2 expression and apoptosis in gestational trophoblast of complet hydatiform mole // Placenta 1998. - V. 19. - P. 361-369.

189. Rajagopal M., Moodley J., Chetty R. Nitric oxide: does it have an etiological role in pre-eclampsia? // Acta Obstet Gynecol Scand. 2003. - V. 82, №3.-P. 216-219.

190. Ranta T., Wahlstron T., Rutanen E.M. Setrum prolactin levels and immunohistochemical localization of prolactin in trophoblastic disease // Acta Pashol Microbiol Scand. 1981. - V. 89, № 3. - P. 235-239.

191. Reiter R.J. The pineal and its hormones in the control of reproduction in mammals //Endocr. Rev. 1980. -V. 1. - P. 109-131.

192. Reiter R.J., Tan D.X., Cabrera J., Arpa D., Sainz R.M., Mayo J.C., Ramos S. The oxidant/antioxidant network: role of melatonin // Biol. Signals Recept. 1999. -V. 8, № 1-2. - P. 56-63.

193. Reiter R.J., Tan D.X., Qi W., Manchester L.C., Karbownik M., Calvo J.R. Pharmacology and physiology of melatonin in the reduction of oxidative stress in vivo // Biol. Signals Recept. 2000 - V. 9, № 3-4. - P. 160-171.

194. Riley S.C., Walton J.C., Herlick J.M., Challis J.R.G.The lokalization and distributionof corticotropin-releasing hormone in the human placenta and fetal membranes throught gestation // J Clin Endocrinol Metab. 1991. - V. 72. -P. 1001-1007.

195. Robinson B. G., Emanuel R. L., Frim D. M., Majzoub J.A. Glucocorticoid stimulates expression of corticotropin-releasing hormone in human placenta. // Proc Natl Acad Sci USA 1988. - V. 85. - N. 5244-5248.

196. Rossellini M., Keller P .J., Dubey R.K. Role of nitric oxide in the biology, physiology and pathophysiology of reproduction // Hum Reprod Update 1998. - V.4, № 1. - P. 3-24.

197. Rossmanith W.G., Hoffmeister U., Wolfahrt S. Expression and functional analysis of endothelial nitric oxide synthase eNOS. in human placenta. // Mol Hum Reprod. 1999. - V. 5. - №. 5. - P. 487-494.

198. Rosso P. Placenta as an ageing organ. // Curr Concept Nutr 1976. -V.4-P. 23-41.

199. Rutherford R.A., Wharton J., McCarthy A. Differential localization of endothelium ETa ETb binding sites in human placenta // Br J Pharmocol -1993.-V. 109. -P.544-552.

200. Sadowsky D.W., Yellon S., Mitchell M.D., Nathanielsz P.W. Lack of effect of melatonin on myometrial electromyographic activity in the pregnant sheep at 138-142 days gestation term= 147 days gestation. // Endocrinology. -1991.-V. 128, №4.-P. 1812-1818.

201. Saijonmaa O., Laatikainen T., Wahlstrom T. Corticotropin-releasing factor in human placenta: localization, concentration and release in vitro // Placenta. 1988. -V. 9 - P. 373-385.

202. Saito S., Nakashima A., Myojo-Higuma S. et al. The balance between cytotoxic NK cells and regulatory NK cells in human pregnancy. // J. Reprod. Immunol. 2008. - V. 77. - № 1. - P. 14-22.

203. Sakbun V., Koay E.S., Bryant-Greenwood G.D. Immunocytochemical localization of prolactin and relaxin C-peptide in human decidua and placenta // J Clin Endocrinol Metab. 1987. - V. 65. - №.2 - P. 339-343.

204. Sands J., Dobbing J. Continuing growth and development of third trimester human placenta. // Placenta 1985. - V. 6. - P. 13-22.

205. Sanyal M., Nag T.S., Das C. Localization of nitric oxide synthase in human trophoblast cells: role of nitric oxide in trophoblast proliferation and différenciation. // Am J Reprod Immunol 2000. - V. 43. - № 2. - P. 70-77.

206. Satoh S. Immunohistochemical studies of the localisation of prolactin in human term chorion laeve // Nippon Naibunpi Gakkai Zasshi 1992. - V. 68.-P. 557-567.

207. Schenker S., Yang Y., Perez A., Acuff R.V., Papas A.M., Henderson G., Lee M.P. Antioxidant transport by the human placenta // Clin. Nutr. 1998. -V. 17, №4.-P. 159-167.

208. Schumacher A., Brachwitz N. Human chorionic gonadotropin attracts regulatory T cells into the fetal-maternal interface during early human pregnancy. // J. Immunol. 2009. - V. 1829. - P. 5488-5497.

209. Sessa V.C. The nitric oxide synthase family of protein // J Vase Res -1994.-V. 31.-P. 131-143.

210. Sham K.J., Do Y.S., Kjos S. Human decidua is a major sourse of renin // J Clin Invest 1989. - V.83. - P. 2085-2092.

211. Shen W., Yang M., Lu Y. Expression of endothelial nitric oxide synthase mRNA in human placenta. // Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi. 1999. -V. 34, №3.-P. 150-152.

212. Shennan DB. Regulation of water and solute transport across mammalian plasma cell membranes by prolactin // J Dairy Res 1994. - V. 61. -P. 155-166.

213. Shonfelder G., John M., Hopp H. Expression of inducible nitric oxide synthase in placenta of women with gestational diabetes // FASEB J. 1996. -V. 10, №. 7.-P. 777-784.

214. Shukovski L., Findlay J.K. Activin A inhibits oxitocin and progesteron production by preovulatory bovine granulosa cells in vitro // Endocrinology. 1990. -V. 126. - P. 2222-2224.

215. Shurbing C., Kiess W., Englaro P. Levels of leptin in maternal serum, amniotic fluid, and arterial and venous cord blood: relation to neonatal and placental weight // Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. 1997. -V. 82.-P. 1480-1483.

216. Sierra-Honigmann M.R., Nath A.K., Murakami C. Biological action of leptin as an angiogenetic factor// Science. 1998. -V. 281. - P. 1683-1686.

217. Sim M.K., Seng K.M. Development of angiotensin converting enzyme in fetal lung and placenta of the rat and human // Clin Exp Pharmacol Physiol -1984.-V. 11.-P. 497-501.

218. Singh H.J. Rahman A., Larmie E.T., Nila A. Endothelin-I in fetoplacental tissues from normotensive pregnant women and women with preeclampsia // Acta Obstetrics Gynaecology of Scandinavica. 2001. - V. 80. -P. 99-103.

219. Sirotkin A.V., Schaeffer H-J., Direct regulation of mammalian reproductive organs by serotonin and melatonin // Journal of Endocrinology. -1997.-V. 154.-P. 1-5.

220. Skreenathan R.N., Padmanabhan R. Singh Shamer. Structural changes of placenta following maternal administration of acetaldegyde in rat // Z. Mikrosk. Anat. Forch - 1984. - V. 98. - P. 594-604.

221. Smith S.C., Baker P.N., Symonds E.M. Placental apoptosis in normal human pregnancy // Am J Obstet Gynecol 1997. - V. 177, № 1. - P. 57-65.

222. Stojilkovic S.S., Catt K.J. Expression and signal transduction pathways of endothelin receptors in neuroendocrine cells // Frontiers in neuroendocrinology. 1996. -V. 17. - P. 327-369.

223. Sutton L, Gadd M, Mason DY, Redman CW. Cells bearing class II MHC antigens in the human placenta and amniochorion // Immunology. -1986.-V. 58, № l.-p. 23-29.

224. Symonds E.M., Stanley M.A., Skinner S.L. Production of renin by in vitro cultures of human chorion and uterine mescle // Nature 1968. - V. 217. -P. 1152-1153.

225. Tadokoro N., Koibuchi N., Ohtake H. Expression of prolactin gene in human decidua during pregnancy studied by in situ hybridization histochemistry // Endocr J. 1995. - V. 42, №. 4. - P. 537-543.

226. Takahashi N., Waelput W., Guisez Y. Leptin is an andogenous protective protein against the toxicity exerted by tumour necrosis factor a II Journal of Experimental Medicine. 1999. - V. 189. - P. 207-212.

227. Tartaglia L.A., Dembski M., Weng X. Identification and expression cloning of a leptin receptor, OB-R. // Cell. 1995. - V. 83. - P. 1263-1271.

228. Teasdale F. Gestational changes in the functional structure of the human placenta in relation to fetal growth. A morphometric study // Am J. Obstetr. Gynecol. 1980. - V. 137. - P. 560-568.

229. Thomas L., Drew J.E., Abramovich D.R., Williams L.M. The role of melatonin in the human fetus // Int. J. Mol. Med. 1998. - V. 1, № 3. - P. 539543.

230. Thomson A.J., Telfer J.F., Kohnen G. Nitric oxide syntase activity and localization do change in uterus and placenta during human parturition // Hum Reprod-1997.-V. 12, №. 11.-P. 2546-2552.

231. Tilburgs T, Scherjon S.A., Roelen D.L. et al. Decidual CD8+CD28- T cells express CD103 but not perforin. // Hum. Immunol. 2009. - V. 70. - №2. -P. 96-100.

232. Toth M. Role of tetrahydrobiopterin in the regulation of activity of human placental nitric oxide synthase in normal and pre-eclamptic pregnancies. II Orv Hetil. 2002. - V. 143, №. 8. - P. 391-398.

233. Trainer PJ. Corticosteroids and pregnancy. // Semin Reprod Med. -2002. V. 20, №. 4 - P. 375-380

234. Trayhurn P., Hoggard N., Mercer J.G., Rayner D.V. Hormonal and neuroendocrine regulation of energy balance the role of leptin // Archives of Tierernahr- 1998. -V. 51. - P. 177-185.

235. Varvarigou A., Mantzoros C.S., Beratis N.G. Cord blood leptin conxentrations in relation to intrauterine growth // Clinical Endocrinology Oxford.-1999.-V. 50.-P. 177-183.

236. Vincient R.A., Huang P.C., Parmley T.H. Proliferative capacity of cell cultures derived from the human placenta // In vitro. 1976. - V. 32. - P. 649653.

237. Vinnars M.T., Rindsjo E., Ghazi S. et al. The Number of CD68+ Hofbauer. Cells is decreased in Placentas with Chorioamnionitis and with Advancing Gestational Age. // Pediatr Dev. Pathol. 2009. - №1. - P. 38-43.

238. Voight S., Kaufmann P., Schweikhart G. Zur Abcrenzung normoler, artifizieller und patologischen Plazentazotten. II. Morphometrishen Untersuchengen zum Einfluss ous Fixationsmodes // Arch. Gynak. 1978. - Bd 226. - S. 347-362.

239. Vorherr H. Placental insufficiency in relation to posterm pregnancy and fetal postmaturity: evaluation of fetoplacental function: management of the postterm gravida // Am J Obstet Gynecol 1975. - V. 123. - P. 67-103.

240. Waston G., Palmer G., Burton W. Human chorionic gonadotropin release and tissue viability in placental organ culture // Hum. Reprod. 1995. -V.10,№ 8-P. 2159-2164.

241. Williams L.M., Martinoli M.G., Titchener L.T., Pelletier G. The ontogeny of central melatonin binding sites in the rat // Endocrinology. 1991. - V. 128., № 4. - P. 2083 - 2090.

242. Winick M, Coscia A., Noble A. Cellular growth in human placenta. 1. Normal cellular growth // Pediatrics 1967. - V. 39. - P. 248-251.

243. Wu X., Fan Z., Masui H. et al. Role for Bcl-XL in the regulation of apoptosis by EGF and TGF-1 in c-myc overexpressing mammary epithelial cells // J Clin Invest 1995. - V. 95. - P. 1897-1905.

244. Yagel O. Characterization of pure human first trimester cytotrophoblast cells in low term culture: growth pattern, markers and hormon production // Am. J. Obstet Gynecol. 1989. - V. 160, № 4 - P. 938-945.

245. Yuen B.H., Moon Y.S., Shin D.H. Ingibition of human chorionic gonadotropin production by prolactin from term human trophoblast // Am J Obstet Gynecol. 1986. -V. 154, №. 2. - P. 336-340.

246. Zhang N.M. Modulation by benzda I pyrene of epidermalgrowht factor receptor, cell proliferation and secretion of human chorionic gonadotropin in human placental cell lines // Biochem Pharmacol. 1995. -V.50, №. 8.-P. 1171-1180.

247. Zhang Z., Lin Y., Tan H. Histochemical locaization of nitric oxide synthase in the human placenta // Zhonghua Fu Chan Ke Za Zhi 1997. - V. 32, №. 11.-P. 662-665.

248. Zhou R., Ao S.Z. A Novel cDNA Encoding Ubiquitin-conjugating Enzyme of Homo sapiens // Sheng Wu Hua Xue Yu Sheng Wu Wu Li Xue Bao Shanghai. 1998. -V. 30, №2 -P. 125-131.

249. Zhou R., Li W., Cao Z. The changes and significance of transcription of endothelial nitric oxide synthase-mRNA in placental tissue from cases of pregnancy indused hypertension // Zhonghua Fu Ke Za Zhi 1998. - V. 33, № 12.-P. 709-710.145J

Автореферат и диссертация по медицине (14.01.30) на тему:Морфо-функциональное состояние плаценты у женщин разных возрастных групп

Автореферат диссертации по медицине на тему Морфо-функциональное состояние плаценты у женщин разных возрастных групп

Оглавление диссертации Пальченко, Наталья Александровна :: 2011 :: Санкт-Петербург

Введение диссертации по теме "Геронтология и гериатрия", Пальченко, Наталья Александровна, автореферат

Заключение диссертационного исследования на тему "Морфо-функциональное состояние плаценты у женщин разных возрастных групп"

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2011 года, Пальченко, Наталья Александровна

Похожие научные работы

Каталог диссертаций