Автореферат и диссертация по медицине (14.00.30) на тему:Исследование по разработке аэрозольного метода иммунизации людей против сибирской язвы

рге 08

,п00 государственный комитет

- й 1,1х1саннтарно-эпидемиологического надзора российской федерации

центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии

На правах рукописи

ШУСТИКОВ Виктор Михайлович

ИССЛЕДОВАНИЕ ПО РАЗРАБОТКЕ АЭРОЗОЛЬНОГО МЕТОДА ИММУНИЗАЦИИ ЛЮДЕЙ ПРОТИВ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ

(14.00.30 — Эпидемиология)

автореферат диссертации на соискание учёной степени доктора медицинских наук

Москва —

1992

Работа выполнена в Военно-медицинской ордена Ленина Краснознаменной академии имени С. М. Кирова.

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Болотовский В. М.; доктор медицинских наук, профессор Воронцов И. В.; доктор медицинских наук, профессор Мединский Г. М.

Ведущая организация — Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. почетного академика Н. Ф. Гамалеи РАМН.

Защита диссертации состоится « » ^99% г. &

на заседании специализированного совета Д 074.19.01 в Центральном научно-исследовательском институте эпидемиологии по адресу: 111123, г. Москва, ул. Новогиреевская, За.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института.

Автореферат разослан «-^М»—- 199З г<

Ученый секретарь специализированного совета кандидат медицинских наук

Пименова М. Н.

3.

I. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

I; Актуальность теш.

■На Первой (ШТ) сессии Общего собрания РАМН (24-25 марта . 1992г.) в докладе академика В.И.Покровского представлена программа долгосрочной стратегии сохранения здоровья населения и определены принципы организации научных медицинских исследований в условиях рыночной экономики. Госкомитетом саязпиднадзора при Президенте Р£ сформулированы программы профилактики инфекционных заболеваний. Признано необходимым расширить исследования по экологической иммунологии, от дальнейших успехов которой зависит решение многих народно-хозяйственных задач (Р.В.Петров, 1987).

Разработка эффективных средств и методов общей и специфической профилактики заболеваний зоонозной природа остается важнейшей проблемой ветеринарии и медицина {В.П.Шшпнов, 1985). Б группе зоонозов особое место занимает сибирская язва, распространенная среди кивотных и людей во всех странах мира. Начиная с 60-х гг. настоящего столетия заболеваемость сибирской язвой населения.страны снизилось до нескольких сотен случаев в год. Однако за,последние два десятилетия в стране наблюдается ста-, бшшзация уровня заболеваемости людей сибирской язвой. На фоне спорадических случаев продолжают регистрироваться групповые заболевания (П.М.Марчук, Б.Л.Черкасский, 1968; Г.Н.Николаевский, 1974; Б.Л.Черкасский с соавт., 1978; А.И.Коядрусев, О.М.Федоров/ 1989).

Анализ научных исследований, проведенных Межведомственной комиссией по борьбе с сибирской язвой, позволил определить основные причины, обуславливающие заболеваемость сибирской язвой сельскохозяйственных животных и людей в современный период. Речь идет о недостаточно полном охвате вакцано-профилактикой сельсно-

хозяйственных животных в эпнзоотичных по сибирской язве местностях и контингентов населения, подлежащих обязательной плановой вакцинации (П.й.Бургасов с соавт., 1974; В.Я.-Скляров с соавт., 1974; БЛ.Черкасский, 1974, 1978; Э.Н.Шлнхов, 1981).

Существующая в настоящее время иммунизация людей в неблагополучных по сибирской язве пунктах, охватывающая лишь отдельные контингента населения, не препятствует возникновению групповых заболеваний. В этой связи поставлен вопрос об эффективности её проведения в настоящем виде (Т.Н.Николаевский, 1974; ал.Шляхов с соавт., IS8I; Б.ДЛеркасскгй с соавт., 1978, 1984).

£ определенных эпидемических ситуациях успех прививочной кампании зависит не только от напряженности иммунитета, но и от полноты охвата,прививками угрожаемых контингентов и темпов её проведения. Ишуяологически эффективный препарат не в состоянии обеспечить надлежащую эпидемиологическую эффективность, если метод его применения исключает возможность создания широкой иммунной прослойки (Н.И.Александров, 196I-; A.A.Воробьев, Б.А.Лебеда-ский, 1977).

Применяемый в настоящее время трудоемкий метод накожной иммунизации ■ людей против сибирской язвы вакциной СТИ, эффективность которого во многом зависит от индивидуальной техники скарафикаци-онных манипуляций, не.позволяет в сжатые сроки обеспечить ыассо-. вую вакцинацию, а более эффективная подкожная иммунизация этой вакциной, используемая в ветеринарной практике, не нашла в'эпидемических очагах практического применения в силу присущих ей недостатков (трудоемкость, болезненность при введении препарата).

Оптимизация системы иммунопрофилактики сибирской язвы должна осуществляться в направлении поиска высокопроизводительного метода вакцинации, который бы обеспечил надежную эффективность

при массовом охвате прививками значительных контингентов людей. Производительный подкожный метод вакцинации с применением безыгольных инъекторов в настоящее время приостановлен из опасения передачи и распространения ВИЧ-инфекции. В этом аспекте разработка эффективного аэрозольного метода иммунизации людей против сибирской язвы приобретает особую актуальность как в.теоретическом, так и в практическом плане.

2. Цель и задачи исследования.

Учитывая актуальность проблемы аэрогенной ваквднопрофилак-тики людей против сибирской язвы нами поставлены следующие задачи:

- изучить оптимальные условия приготовления сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакцинн;

- определить величины аспирационяых; доз сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакцины; ...

- изучить.безвредность.и иммунологическую эффективность сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакцины в опытах на животных;

- испытать препарат на людях о целью определения реактогенности, безвредности, и иммунологической эффективности;

- внедрить аэрозольный метод иммунизации людей против сибирской язвы в практику здравоохранения;

- разработать практические рекомендации по использованию аэрозольного метода иммунизации населения по эпидемическим показаниям.

3. Научная'новизна исследований.

Разработан массовый экспрессный метод вакцинации людей про-.тив сибирской язвы. Выявлена более высокая идауногенная активность вакцины СТИ при её аэрогенной аппликации по сравнений с ■накожным и подкожным введением. Иммунизация людей сухой твой аэрозольной сибиреязвенной вакциной оказалась безвредной и аре-акгсгеяяой. В комиссионных опытах на обезьянах установлено,что

тслькс иьс/удизгвгя■сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вак-:гнс£ обеспечивает им надежную специфическую резистентность к аэрогенному заражению вирулентной культурой сибиреязвенного микроба.

Исследованиями принципиально показано, что при аэрогенном введении в организм вакцинных: препаратов осуществляется одномоментное массовое проникновение антигена в общий лимфо- и кровоток, которое заметно повышает степень ответной защитной реакции организма. При этом в вакцинный процесс вовлекаются многочисленные регионарные лимфатические узлн головы, шеи, груда и брюшной полости, что подтверждается увеличением в. иммунокошетеятнчх органах плазмоцитаряой реакции, а также наростанием в.них ангите-лообразующнх клеток.

В целях исключения быстрой резорбции ь низких отделах легких аитигеяЕых, аллергенных и анафилогеншх веществ и снижения • реактогенного действия биоаэрозоля предложено использование в рецептуре полидасперсной..сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакцины инертного вещества-наполнителя? замедляющего всасывания препарата и снижающего его реактогенность.

4. Практическая и теоретическая ценность работы .'

В результате проведенных исследований подготовлены временные межреспубликанские технические, условия на сухую зшву» аэро-зольнув сибиреязвенную вакцину (МРГУ-42 $ 147-67) и лабораторный регламент ее получения, утвержденный Комитетом вакцин и сывороток Минздрава СССР.

На основе полученных обнадеживающих результатов приказом Ушяздрава СССР Л 485 от 17.6.1968 г. сухая живая аэрозольная сибиреязвенная вакцина внедрена в противоэпидемическую практику.

Впервые проведенная нами в 196В-1969 гг. массовая аэрозоль-'

х - приготовлен по специальной технологии

ная' иммунизация населения пяти стационарно неблагополучных по сибирской язве районов Азербайджана, дозволила, резко снизить заболеваемость в контролируемых пунктах республики.

По данным С.Л.Григорян (1979, 1983), испытание аэрогенной вакцинации сельскохозяйственных животных против сибирской язвы показало её. большое преимущество перед подкожным методом. Она позволяет в условиях производства в 5 раз повысить производительность труда ветеринарных, работников. Эксплуатационные затраты, связанные с вакцинальным процессом, сокращаются в 3,7 раза.

Практическая значимость:аэрозольной иммунизации против сибирской язвы людей и сельскохозяйственных животных далеко внхо^-дит за пределы действущей в стране системы комплексных медико-ветеринарных противосибиреяэвенных мероприятий и приобретает важное не только народнохозяйственное, но и оборонное значение. Приказом МО СССР № 61 от 21.5.1967 г. разрешена аэрозольная вакцинация личного состава ВС против сибирской язвы по ешщемичес-ним показаниям.

Сухая живая аэрозольная вакцина, предназначенная для массовой экспрессной иммунизации людей против сибирской язвы, экспонировалась на ВДНХ СССР и Главным Комитетом выставки награжде- 1 на дипломом П ст. и серебряной медалью (Достаннвление Л 325-Н от 15.7.1974 г.).

В теоретическом аспекте показана принципиальная возможность конструирования стандартных аэрозольных вакцин, как нетрадаци-оачых препаратов для специфической профилактики ряда других инфекционных заболеваний.

5. Апробация работы

Материалы диссертации доложены и обсуждены на:

научных конференциях -и заседаниях Ученого совета научно-исследовательской лаборатории -К I ВМА им. С.М.Кирова, Ленинград, 1966, 1969; Центрального научно-исследовательского института вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова МЗ СССР, 1965, 1967, 1972, 1975; Комитета вакцин и сывороток МЗ СССР; Всесоюзном научном симпозиуме (IX Пленарное заседание межведомственной научно-методической ко-, миссии по борьбе с сибирской язвой), Москва, 1974; Межкафедральной конференции (эпидемиологии, микробиологии, инфекционных болезней, лаборатории иммунологии) ВМА им. С.М.Кирова, Ленинград,' 1986; Научной конференции кафедры общей и военной эпидемиологии ВМА им. С.М.Кирова и Научно-исследовательского института военной медицины МО, Санкт-Петербург, 1992.

6. Объем и. структура работы. . -

Диссертация изложена на. 305 страницах .машинописи; содержит . введение, обзор литературы (три главы), собственные исследования • (пять глав), заключение, выводы и указатель литературы. Работа . иллюстрирована 39 таблицами и 21 рисунком. Список литературы включает 236 работ, принадлежащих отечественным, авторам и 132 зарубежным.

Л'. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ I. Материалы и методы исследований

Исследования по разработке аэрозольного метода, иммунизации людей против сибирской язвы проведены в течение 1965-1986 гг. в лаборатории ВМА. им. С ,М.Кнрова. -

Экспериментальная часть работы выполнена на белых мышах, 2500 морских свинках,' 600 кроликах и 300 обезьянах. Поставлено 1250 экспериментов.

Приступая к работе мы руководствовались решением Комитета вакцин и сывороток о целесообразности испытания аэрозольной сибиреязвенной вакцины на широких конгингектах людей (Я- 12, 16.5.59).

а) Исследования на экспериментальных животных.

Испытанию на людях предшествовало тщательное изучение сибиреязвенного поствакцинального иммунитета на ряде экспериментальных животных (морские свинки, кролики и обезьяны).

В экспериментальных исследованиях на животных испнташш были под вергнуты 25 серий сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакцины, полученных в условиях полупроизводства.

Необходимые для исследований сибиреязвенный референс-шташ СТИ-Т П вакцина Ценковского, стандарты мутности были получены из Государственного научно-исследовательского института стандартизации и контрол* медицинских и биологических препаратов нн.Л.А.Тараеевича. Типичные свойства эталонного вакцинного штамма СТИ-1 ежегодно подвергались комиссионной проверке с участием представителей производственной лаборг торий, ОБКМНШ БС им.И.И.Мечникова и. ГИСК им.Л.А.Тарасевича.

Сибиреязвенный аллерген-химический антраксин (серии 21, 23, 41 и 42) Молдавского научно-исследовательского института эпидемиологии, микробиологии и гигиены, использованный для определения иммунологической реактивности как людей, так и'животных, обладал стандартными свойствами ж высокой биологической активностью.

Безвредность сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакцннн быль изучена на кроликах (шшшша) весом 2,0-2,5 кг, которым препарат в дозе 250 шш спор вводили как подкожно, так и интраназально.

Иммунизацию морских свинок сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакциной осуществляли следующими дозами препарата: 9,8, 22,5, 50,0, 91,2 млн спор. Испытание напряженности иммунитета к сибирской язве проводили подкожным заражением животных оттитрованной дозой Л вакцины Ценковского (штамм 71/12) равной I млн спор (200 ¿Х> 50) на 21 сутки после иммунизации.

Б острых опытах на обезьянах была изучена степень напрякенности цротивосибиреязвенного иммунитета к ингаляционному заражению животных Еирулентной сибиреязвенной культурой. Обезьян иммунизировали сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакциной в дозах 54, 405, 1300 млн спор и подкожно сибиреязвенной вакциной СТИ в дозе 52 млн спор. Контрольное заражение обезьян производили через 21 день после иммунизации вирулентным штаммом 3<зс. ал/Леа/и* в доэе 310 гас-спор (15 СТ5д).

Для вакцинация лэдей и животных использовали накожную живую сибиреязвенную вакцину СТИ Тбилисского НШ ВС (серии 39 , 40, 41 и 42).

В целях изучения сенсибилизирующих свойств аэрозольной сибиреязвенной вакцины были использованы белые ыышя, которым препарат зво-дшш подкожно в дозах от 10 до I ш спор; доза вакцины, использованная для разрешения опыта, варьировала от 100 до 10 шг спор.

В другой серии опытов сенсибшшзнрувщее действие аэрозольной вакцинации было изучено на морских свинках, которые, как известно, \ являются стандартной моделью для воспроизведения анафилактического шока. При этом морские свинки эмигрировали аэрозольную сибиреязвенную вакцину в дозе 50 млн спор; разрешающая доза вакцины была равна-100 млн спор.

Сенсибшшзирушще свойства препарата были изучены и на кроликах. Дня воспроизведения феномена Шварцмана бала использована аэрозольная сибиреязвенная вакцина, вводимая внутрикозшо в дозах 20, 100 , 500 млн спор. Разрешение опыта производили внутривенным введением эталонного штамма СТИ-1 в дозах 1,5-2,0 млрд спор.

Морфологические изменения, возникающие в организме после одно-1фатной аэрозольной и подкожной иммунизации сибиреязвенной вакциной, изучались в опытах на кроликах. В первой серии опытов аспирационная и подкожная дозы вакцины были однозначными и равны 500 млн спор,

во второй - 850 млн спор. Кроликов забивали через I, 3, 7, 14, 30, 90 и I8Q суток после вакцинации. Для гистологических исследований при вскрытии брали кусочки из:'.легких, сердца, печени, почек, селезенки и лимфатических желез. Препараты фиксировали и окрашивали с помощью общепринятых методов: пиронином - метиловым зеленым по Брате, по Гольдаану, гематоксилин-эозином и пирофукси-ном по Ван-Гизону ц резорцин-фуксином по Вейгерту.

б) Испытание реактогенности и безвредности аэрозольного

метода иммунизации на людях.

Реактогепность определяли по общепринятой методике, включавшей медицинский осмотр прививаемых контангентов, клинические исследования крови и мочи, рентгенологическое исследование органов грудной клетки и электрокардиографию. За привитыми устанавливали медицинское наблюдение в течение 2 недель с регулярным измерением температуры тела через 5, 12, 24, 48 и 72 часа. В соответствии с установленными методами оценка реактогенности вакцин реакции людей на вакцинацию подразделялись на общие ж местные.

Для оценки безвредности аэрозольного метода иммунизации комиссионно изучены материалы 5-летнего медицинского наблюдения за группой людей, привитых против сиЗирркой язвы (1186). Ежегодная диспансеризация привитых и контрольных групп осуществлялась'врачами-специалистами , а выявление текущей заболеваемости возложено на врачей санитарных частей предприятий, где проводилась иммунизация.

в) Иммуноаллергические и серологические реакции у-людей, привитых против сибирской язвы аэрозольно и накожно.

По данным литературы, до последнего времени не были получены какие-либо практически приемлемые лабораторные тесты, позволяющие

судить о практической защищенности человека шш животного от заболевания сибирской язвой. Такие общеизвестные серологические тесты, как реакции агглютинации ( ¿fc?^-, 1935), связывания комплемента (Ме 1961), диффузионной преципитации в геле (Ла1л* <?. ßetto» 1957), нейтрализации снворотаамн привитых сибиреязвенного токсина в коже кролика ( &<?&ot, et. #airc/ez.st>n.t 1956) оказались мало надежными в силу их низкой чувствительности.

Метод оценки иммунитета по превентивным свойствам сывороток крови привитых против сибирской язвы, разработанный П.Н.Бургасовым и Г.Н.Рожковнм (1972), был апробирован нами, но практически не был использован по причине утраты превентивной актишости сывороток крови к 6-му месяцу после вакцинации. В условиях длительного наблюдения за привитыми это принципиальное положение позволило нам для оценки поствакцинального протжвосибиреязвенного иммунитета, создаваемого у привитых аэрозольным и накожным методами вакцинации, остановить выбор ~ на простом, доступном методе, нашедшем признание многих иммунологов -нокно-аллергической пробе с сибиреязвенным -аллергенов - антраксиноы.

Аллергическая проба "с антраксином для выявления иммунологической перестройки организма при сибирской язве была с успехом применена целым рядом авторов (Э.Н.Пкяхов, 1964; P.A.Салтыков с сравт., 1965; Т.Г.Сенчук, 1968.; Э.Н.Шлахов с соавг., 1968; 1974; П.А.Бургасов с соавт., 1974; В.М.Шустиков с соавт., 1967, 1972, 1974).

Иммунитет и аллергия все реке расцениваются как независимые, а тем более протнвополошые реакции организма. Фактический материал последних десятилетий все более свидетельствует о диалектическом единстве этих состояний (И.И.Рогозин, В.Д.Беляков, 1965).

Кожно-аллергическая проба с антраксином, предложенная Э.Н.Шляхо-вым (1957) и внедренная в иммунологическую практику Э.В.Шляховнм я

С.А.Шварцем (1961), по мнению большинства отечественных авторов, шеет несомненное преимущество перед другими тестами. Н.Н.Гинсбург (1964) считает, что кожно-аллергическая реакция с антраксином дает отчетливый ответ на принципиальный вопрос о пригодности того или иного метода иммунизации (накожного, аэрозольного и др.).

ТСожно-аллергические пробы с антраксином, поставленные привитш против сибирской язвы накожным а аэрозольным методами, свидетельствовали об Еммуно-аллергических сдвигах в организме, протекавших по ■ типу гшерчувствнтельных реакций замедленного действия.

Параллельно с кожно-аллергической пробой для выявления иммунологической перестройки организма Еа введение изучаемых вакцинных препаратов намя бкла предпринята попытка использовать реакцию пас-сявной гемагглютпнации. Ранее прп испытании РИГА с целы» серологической диагностики и изучения иммуногенеза прл сибиреязвенной инфекции рядом отечественных авторов (М.И.Лези, Н.Н.Басова ж др., 1962;* Т.А.Цурденко, 1967; М.И.Леви, Ю.В.Езепчук, 1968) были получены обнадешвапщие результаты, однако трудности, связанные с получением достаточно чувствительного антигена, ограничивали сферу применения этого серологического геста.

Нами в качестве•антигена была апробирована сибиреязвенная культура вакцинного шгамыа СТИ-1, выбор которого был теоретически обоснован строгой специфичностью его взаимодействия с гомологичными иммунными телами лвдей, привитых против сибирской язвы вакциной СТИ,

Для иммунизации людей против сибирской язвы была применена сухая гивая аэрозольная сибиреязвенная; вакцина в дозах 50 и 300 млн спор. При массовой аэрозольной вакцинации ладей доза препарата варьировала в пределах 70+20 шш сяор. Доза сибиреязвенной вакцины ИИ для накоЕного применения соответствовала общепринятой официальной инструкции. Ревакцинация проводилась через месяц в тех же дозах.

г) Определение аспирационных доз сухой, живой аэрозольной сибиреязвенной • вакцины.

В целях создания достаточной концентрации аэрозоля вакантны в закрытых помещениях (камерах) использована оригинальная конструкция распылительных приборов ПАВ-65 и ПАВ-65М, позволившая диспергировать Еаквдну без предварительного помола и получать более высокодисперсный бшаэрозоль, чем с прибором ПАВ-61.

Благодаря применении современного пятиканального электронного даеперсиометра ЭД-2 удалось подробно изучить фракцзояно--дасперсный состав аэрозоля вакцины и оценить весовую концентрацию згаздой регастрируемай.фракции. Отбор проб аэрозоля вакцины осуществляла асшрациошоы: методом с помощью стеклянных ишиндао-ров с 10 мл ' улавливаящей зрдаости^дастшшироваяная вода) , при этом скорость просасывакий воздуха через. Еяипдщеры составляла в среднем 3 л/мин. и регистрировалась ротаметром..

Для определения концентраций аэрозоля сибиреязвенной вакцины в пробах, кроме электронного дисп.ерсиоглетра, были применены и другие ызтодйки: с помощью электронного фшоорометра ЗФ-ЗМ, оп-. редалением белка по Лоури и методом прямого - подочета спор в камере Горяева. Сопоставление расчетных доз с ингалиргуемыш' подтвердило возможность применения описанных методов контроля препарата на практике. •

Среднюю весовую концентрацию аэрозоля вакцины в помещении расчитывали по формуле: _

С~ — С«« ' ^Узп > л, / >

= ---- СкФ/л). где

(2 - средняя весовая концентрация, емкости шпандаера (мг/мл);

IV»* ~ объем шадаости в вышндаере (мл); •у* - объемная скорость цросасывания воздуха через ^ - время взятия проб аэрозоля (ыин).

Весовая аспирационная доза сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакцины, полученная человеком или животным в течение сеанса- иммунизации, вычислялась как результат произведения средних величия объема легочной вентиляции на концентрацию аэрозоля и экспозицию ( АДцц,, =С((±Т-ЬК в мг)- При этом коэффициент задержки аэрозольных частиц в дыхательных органах человека (К) принимается за единицу. Биологическая и весовая расчетные аспирационные дозы связаны соотношением АДбиол = АД^ '//• , где У - исходная ак- . тивность вакцины, указанная в её паспорте и определяемая числом спор в I г препарата, - показатель степени совпадения АДвес и ■^иол} Условно называемый "коэффициентом инактивации" (для сибиреязвенной вакцины равен единице).

Статистическая достазерность полученных данных определялась методом.вычисления средних ошибок и доверительных интервалов средней арифметической. Существенность разности показателей двух опытов определялась .исчислениемвеличины Опытная величина сравнивалась с теоретически!,1 значением £ в распределении Стьюдента для определения уровня значимости показателя."Цифровой материал исследований обработан с использованием методов вариационных статистических анализов (И.П.Ашмарин,- А.А.Воробье?, 1962; А.Н.Зайдель, 1968).

•РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

I. Краткая характеристика сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакцины.

Проведенные исследования, связанные с теоретической и практической разработкой аэрозольного метода иммунизации людей против сибирской язвы, на первом этапе включали рациональное конструирование сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакцины и техническую оснащенность метода.

Сухая живая аэрозольная сибиреязвенная вакцина представляет собою пористую, лнофшЕьно-вксушенную взвесь живых спор сибиреязвенного вакцинного штамма СТИ-1 и шертного вещества (наполнителя), расфасованную в ампулы. Она является новым вакцинным препаратом, предназначенным дан специфической профилактики сибирской язвы у людей методом аэрозольной иммунизации. При этой аэрозоль вакцины поступает в организм иммунизируемых людей через дыхательные пути, конъюнктиву глаз ж частично через пищеварительный тракт. Действующи началом вакцины являются живые спори вакцинного сибиреязвенного штамма СТИ-1, обладаю-' щего наследственно закрепленной ослабленной вирулентностью и высокими иазуногеннвшг свойствами.

Всестороннее изучение сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакцины позволило выработать определеннее требования к рецептурной, форте препарата, изложенные в МРТУ-42 Л 147-67. Разработана, технология, .производства сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакцины, отличапщзя-ся простотой и удобством выполнения. Примененное культЕЗщ&ваЕпхе сзбд-реязвенного нггаша СТИ-1 в специальных аппаратах (АК?<!-12) Дало вознож- ■ ность, по сравнению с выращиванием на матрацах, максимально упростить накопление исходной биомассы и получать•препарат в количестве, необходимом дая детального изучения.

Было показано, что биологическая активность сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакциин зависит в основном от качества -вакцинного знрьн и количества инертных в ней приыесбй. Вакцина, приготовленная за полноценной питательной среде Вейбридг, как ка матрацах, так и в аппаратах культивирования (АШ-Ш), обладала достаточно высокой биологической активностью - в I г препарата содержалось соответственно -Г25,6+27,1 ж 146,0+18,8 млрд спор; число живых спор составило 90-95$.

Хорошее спорообразование (не менее 8С$ зрелых спор в культуре 5-ти суточного возраста) отмечено на Корсаковском вымороженном светлом агар-агаре, входившем в состав питательной среды Вейбридж.

Существенное влияние на качество вакцинного сырья оказывал и режим аэрации культуры в АКМ-Ш. Было установлено, что для получения качественного препарата необходимо аэрировать культуру на протяжении всего периода культивирования (5 суток).

При конструировании аэрозольной сибиреязвенной вакцины были учтены данные е£<зс. (Г963) о возможных пределах колебания числа высушенных спор йсе. о^^Ню^ в I г порошка (281-633 млрд). Эти сведения получили полное подтверждение при сопоставлении их с расчет-но-бнологическиш данными, полученными со штаммом СТМ-1. Колебания числа спор в I г составили от 400 до 600 ылрд спор и зависали превде всего от качества использованной суспензии, наличия в ней примесей детрита и вегетативных клеток.

Биологическая активность 25 серий сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакцины, приготовленных на воде без стабилизирующих доба-■ вок, колебалась от 65 до 100 млрд спор в I г и зависела в основном от качества использованной споровой взвеси.

Изучение рациональной рецептурной формы препарата показало высокую устойчивость ее к воздействиям внешней среды, в частности, к высушиванию. Аэрозольная сибиреязвенная вакцина, приготовленная методом лиофилизации, в высушенном состоянии хорошо сохраняла исходное количество живых спор в течение года (срок наблюдения).

Исключение стабилизатора (пептон, сахароза) из состава рецептуры аэрозольной сибиреязвенной вакцины позволило повысить удельный вес спор в составе препарата и использовать его более экономично.

По фракционно-дксперсному составу сухая кивая аэрозольная сибиреязвенная вакцина представляет собою полидисперсную систему. Исследования, проведенные с помощью пятиканального электронного дисперсио-метра (ЭД-2), позволили раскрыть полный спектр размеров частиц аэрозоля приготовленных серий вакцины, который характеризовался следующим составом: частицы аэрозоля размером от 3,5 до 30 мв составили по весу 80^, в том числе 30^ частиц были размером до 10 мк. Эти данные, полученные при использовании современного метода контроля фракционно-дисперсного состава аэрозолей, свидетельствуют о том, что приготовленные серии аэрозольной сибиреязвенной вакцины в своем составе тлели значительное количество мелкодисперсных частиц при сохранении ппли-дисперсности препарата.

2. Изучение величины -расчетных аспирационных доз сухой кивой аэрозольной сибиреязвенной вакцины

Несмотря на известное несовершенство методов отбора и контроля проб аэрозоля, обычное для аэрозольных систем полидисперсного состава, удавалось получать удовлетворительно воспроизводимые результаты в определении величин расчетных аышрациошых доз как прибором -флв-орометром (ЭФ-ЗШ, так ж методом прямого счета спор в камере Горяева. Все испытанные серии вакцины были кондиционными, так как при диспергировании навески вакцины 0,05 г/м3 в I литре воздуха создавалась концентрация препарата не менее 0,007 мг (по прибору ЭФ-354), что соответствовало требованиям лабораторного регламента. Величина концентрации аэрозольной сибиреязвенной вакцины с учетом ее исходной биологической активности была прямо пропорциональна величине удельной навески препарата.

Применение полидисперсных и высокоактивных аэрозолей сибиреязвенной вакцины от1фывает возможность создания необходимых концепт-

раций, обеспечивающих расчетные аспирационные дозы-для людей (70+ 20 шш спор) с применением сравнительно небольших удельных навесок препарата (0,01-0,02 г/м3).

Снижение удельной навески препарата при аэрозольной вакцинации людей против сибирской язвы способствовало увеличению коэффициента использования препарата и повышении экономичности метода.

Упомянутые методы контроля концентраций и величин аспирацион-ных доз аэрозольной сибиреязвенной вакцины при ее диспергировании усовершенствованным распылителем ПАВ-65 позволили наиболее полно изучить аэродинамические свойства препарата.

3. Изучение безвредности и иммунологической эффективности сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакцины в опытах на животных

В целях получения исчерпывающего объективного ответа на вопрос, насколько безвредна сухая живая аэрозольная сибиреязвенная вакцина по сравнению с накожной, был Еыполвен ряд'дополнительных исследований, связшшый с изучением сенсибилизирующего, токсического и пиро-генвого действия препарата, а также морфологических изменений, возникающих в организме животных после аэрозольной иммунизации. Результаты исследований, полученные как в опытах воспроизведения анафилактического шока и феномена Шварцмана на морских свинках, так и при постановке'- кожно-аллергическихпроб у животных, а в последующем и у людей, свидетельствовали о том, что аллергизирующие свойства аэрозольной сибиреязвенной вакцины выражены в равной степени"с сенсибилизирующей способностью накожной сибиреязвенной вакциной СТИ. Установлено, что интенсивность аллергизации находятся в прямой зависимости от величины иммунизирующей дозы и степени дисперсности аллергенов.

Токсичность аэрозольной сибиреязвенной вакцины, изученная на кроликах, была крайне незначительной. При морфологическом изучении внутренних органов кроликов, подвергнутых аэрозольной иммунизации дезами препарата, превысившими в несколько раз оптимальные, никаких дистрофических, некротических и воспалительных изменении в органах не наблюдалось, что подтверждало безвредность сибиреязвенной вакцины при ее аэрозольной аппликации.

4. Изучение реактогенности, безвредности и иммунологической эффективности аэрозольного метода иммунизации против сибирской язвы при испытании на людях

Изучение реактогенности и иммунологической эффективности аэрозольного метода иммунизации против сибирской язвы при испытании на людях было проведено в два этапа: в ограниченно!,! опыте на континген--тах взрослого населения Молдавской ССР численностью 3517 человек (1965 г.) ж в условиях массовой тмунпзацю! против сибирской язвы • взрослого населения Азербайджанской ССР (1968-1969 гг.), где количество лиц, привитых только аэрозольным методом, составило 50143 человека.

Оценка реактогенности проводилась по результатам температурных реакций, изученных у 357 человек, иммунизированных аэрозольно, и у 584 человек - накокно.

Как показали наблюдения, ни у одного из числа привитых против сибирской язвы аэрозольным методом не было выявлено клинически выраженной реакции. Субшшшческие реакции, проявлявшиеся в кратковремен ном, в течение 7 суток, умеренном нейгрофшгьном лейкоцитозе (850011000 ы3) ж незначительном ускорении РОЭ, были отмечены у привитых как аэрозольным, так и накожным методами.

При этом установлена прямо пропорциональная зависимость субклинической реакции привитых от величины аспирируемой дозы вакцины:

у привитых дозой вакцины 50 млн спор лейкоцитоз был отмечен в 33%, а у привитых дозой 300 млн спор - в 95,8$. Анализ лейкоцитарной формулы- группы людей, иммунизированных аэрозольно дозой 300 млн спор, позволил установить наличие нейтрофильного лейкоцитоза с незначительным ядерным сдвигом влево за счет палочкоядерных форм и в то же время - отсутствие подобных изменений в гемограмме прпвитых. аэрозольпо оптимальной дозой препарата 50 млн спор.

При рентгенологическом и электрокардиографическом обследовании, привитых ни в одном случае не удалось обнаружить каких-либо патологических изменений в легких, регионарных лимфатических узлах и в деятельности сердца.

Для более полной оценки аэрозольного метода иммунизации с точки зрения безвредности были изучены результаты 5-летнего комиссионного наблюдения за группой людей, аэрозольно привитых против сибирской язвы. Под медицинским наблюдением состояло 1186 рабочих и служащих Кишиневских мясокомбината и кожевенного завода. Изученные материалы позволили объективно судить о том, что аэрозольная иммунизация не влияла отрицательно на состояние здоровья привитых. Частота первичных обращений как в группе привитых, так и в контрольной, практически была одинаковой. Анализ структуры первичной обращаемости по отдельным нозологическим формам указывал на принципиальное сходство характера заболеваемости в обеих группах. В частности, следует отметить, что аэрозольная иммунизация не вызывала у привитых увеличения числа легочных и аллергических заболеваний.

Еа первом этапе испытаний аэрозольную иммунизацию осуществляли однократно и двугфатно с месячным интервалом дозами вакцины 50 и 300 млн. спор.

Эффективность иммунизации контролировали путем изучения ответных реакций привитых на внутрикожное введение антраксина (серия 21 ж 23) через 7,14,20,30,45,90 дней после вакцинации. Комплектование груш (по 100 и более человек в каздой) для проведения иммуно-аллер-гического обследования осуществляли методом случайной выборки в соответствии с требованиями, предъявляемыми к эпидемиологическому опыту.

Иммуно-алдергические данные при сравнении эффективности аэрозольной и накожной вакцинации подучены в результате учета 671 -реакции у привитых аэрозольно, 172 - у привитых накожно и 28 - у непривитых; 328 реакций учтены у лиц, ингалировавших нейтральное вещество (плацебо). Учет реакций проводили в соответствии с инструкцией через 24 и 48 часов после введения препарата.

Показатели кохно-аллергических реакций, учтенных в различные сроки после иммунизации, представляли закономерные циклические изменения как количественного, так и качественного порядка. В проведенных исследованиях ш попытались ответить.на вопрос, существует ли зависимость между числом положительных реакций с антраксином и ■ величиной ингалируемой дозы, методом иммунизации и кратностью вакцинации. Наблюдение за привитыми проводили в интервале от 3 дней до 3 месяцев.

Насколько можно судить по результатам проведенных испытаний, примененные доЗы сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакцины вызывали иммунную перестройку в организме привитых ладей уже на 3-й день после вакцинации. Наибольшее число положительных реакций зарегистрировано в период с 15 по 45 день наблюдения за привитыми как аэрозольным, так и накожным методами. В этот период реакции достигли максимальной выраженности и составили в группах людей, привитых аэрозольно дозами 50 и 300 млн спор, соответственно 63 и 7С$, а в груше

людей, привитых нанокно - 61$. Спустя 3 месяца после иммунизации, число положительных реакций у людей, вакцинированных аэрозольно, снизилось до 40,'5С)$, а в группе людей, привитых накожно - до 20$.

Зависимость иммуно-аллергической реакции от дозы аэрозольной сибиреязвенной вакцины выражалась в несколько замедленном подъеме реакции в первые 2 недели от дозы 50 млн спор по сравнению с дозой 300 млн спор. При этом количество положительных реакций составило соответственно 28 и 35$. Однако при дальнейшем наблюдении через I и 3 месяца после вакцинации число положительных реакций в обеих группах лщдей, привитых аэрозольным и накожным методами, выравнилось до однозначных величин 47,52$.

Исследования показали, что интенсивность кожно-аллергических реакций зависела как от срока наблюдения, так и метода вакцинации, достигая максимального значения на 14-30 день после аэрозольной вакцинации. Так, в упомянутый срок обследования с использованием дозы аэрозольной вакцинации в 50 млн спор индекс интенсивности соответствовал 37,5%, а при накожной вакцинации он составил только 24,5$. Крайность вакцинации не влияла ни на число положительный реакций, ни на ее интенсивность.

Характерно отметить, что число неспецифических реакций на внутрикожное введение антраксина у непрнвитых не превышало 3,5$ и существенно не отражалось на оценке иммуно-аллергической перестройка привитых.

На втором этапе испытаний иммунологическая эффективность сухой живой аэрозольной сибиреязвенной СГИ была изучена на контингенте людей общей численностью 1208 человек, в том числе 624 человека были привиты аэрозольно, а 584 - накожно.

Отобранные контингент людей обследованы в сроки 3, 7, 14, 30 и 90 дней после вакцинации отдельными неловторящшися группами по 100 и более человек в каждой.

Для аэрозольной вакцинации использовали оптимальную иммунизирующую дозу вакцины 70+20 шш спор. Доза накожной сибиреязвенной вакциЕЫ СТИ около 200 млн спор соответствовала общепринятой официальной инструкции ("Инструкция по клинической и лабораторной диагностике, лечению и профилактике сибирской язвы у ладей", утвержденная.Минздравом СССР 23 июня 1959 года).

В результате проведенных исследовании представилось возможным установить некоторые закономерности, характеризующие аэрозольный и накожный методы иммунизации людей против сибирской язвы. Глк и на первом этапе испытаний отмечено быстрое численное нарастание положительных иммуно-адлергических реакций в течение первой недели после прививки. При этом уже на 3 день (срок наблюдения) высота показателей по количеству и интенсивности у привитых аэрозольно в 2 раза превышала ответные реакции у привитых накожно £30,0+2,5$ против 15,0+2,1$; индекс интенсивности II,2+2,1$ против 6,0+1,4$). Планомерное нарастание числа положительных ответных реакций как у привитых аэрозольно, так и накожно, имело место через 7 дней после прививки. Число положительных ответных реакций у привитых аэрозольным и накожным методами составило соответственно 42,3+3,2$ и 44,1+3,4%; через 14 дней - соответственно 47,6+4,1$ и 48,0+4,2$.

Максимальной выраженности реакция достигла через месяц после прививки. Данные наблюдения на этом сроке характеризовались наличием показателей, которые при сравнении друг с другом существенно не отличались: 60,0+3,1$ - у привитых аэрозольно и 51,4+3,2$ - накожно при ин-дбксах интенсивности: 25,8+3,1$ ж 20,9+3,3$. Через 3 месяца имело

место незначительное снижение положительных ответных реакций в обеих" группах привитых (45,5+3,5^ против 41,3+3,2$ при индексах интенсивности 23,6+2,9? против 19,3+2,6?').

На более отдаленных сроках наблюдения (6,9 и 12 месяцев) отставание показателей положительных реакций в группе людей, привитых ка-кояно, в сразнгшш с показателям привитых аэрозольным методом, становилось статистически значимым. Так, через год показатели привитых аэрозольным методом составили 32,5+4,4$, а накожным - 25,0+3,7^; интенсивность реакций при этом характеризовалась индексами 15,5+3,3^ и 9,8+2,5%. Таким'образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что шмуно-аллергическая перестройка организма людей в ответ на вакцину СТИ, введенную аэрозольным методом, выронена в такой"же степени, как и при введении ее методом скарификация.

Результаты наблюдений, проведенных на втором этапе изучения иммунологической эффективности сухой живой сибиреязвенной вакцины при ее аэрозольной аппликации, полностью согласуется с данными постановки кояно-аллергичоских проб у привитых людей, полученными нами на первом этапе в 1965-1966 гг.

Для оценки степени иммунологических сдеигов при сибирской'язве, создавай,аос у привитых аэрозольным и накожнш методами вакцинации, наряду с кожно-аплергической пробой, изучена возможность применения . реакции пассивной гемагглютинации. Поиск ж использование серологических методов для изучения закономерностей поствакцинального иммунитета при сибирской язве представлял интерес с точки зрения подтверждения данных, полученных с помощью антраксшовых проб и корреляции имыуно-аллергических показателей с шмуно-серологическими.

- Основываясь на данных титрования сывороток при постановке РПГА, следует отметить, что степень" иммунологических сдвигов у людей,

привитых аэрозольным методом против сибирской язвы, не уступала таковой у людей, иммунизированных накожным методом (срок наблюдения 3 месяца). Так, через месяц после вакцинации процент положительных реакций в диагностических титрах у привитых аэрозольно составил 88,1+14,5, а у привитых пакожно - 80,3+9,0. Спустя 3 месяца после прививки, процент положительных реакций снизился незначительно и сохранился почти в тех же соотношениях (84,0+12,0 и 77,7+8,7). Средние титра сывороток крови привитых аэрозольным методом были равнозначны средним титрам сывороток крови, полученных от привитых Еакокной вакциной СИ. Через месяц после вакцшгации аэрозольным и накожным методами средние титры сывороток крови привитых была равны соответственно 1:51,3 и 1:35,5; через 3 месяца - 1:47,9 и 1:35,5. Между показателями иммуно-аллергж-ческих реакций с антраксином к данныйя ишуно-серологическнх реакций, полученными с сыворотками Ерови привитых в реакции пассивной гекаг-глютинации установлено наличие коррелятивной связи.

Полученные даннне позволяет считать РИГА высокочувствительным, специфичным методом определения напряженности поствакцинального" иммунитета при сибирской язве, ^/ветвкгехьность реакции зависит от качества антигена и его способности адсорбироваться на эритроцитах.

5. Внедренде аэрозольного метода шмузгазацин против сибирской язвы в практику здравоохранения

В течение 1965-1975 гг. были завершены основные исследования по разработке аэрозольного метода иммунизации лшдей против сибирской язвы сухой живой вакциной. Б результате проведенных исследований были получены необходимые данные для обоснования и составления временных МРТУ-42 и лабораторного регламента приготовления сухой «ивой аэрозольной сибиреязвенной вакцинации" в условиях экспериментального производства.

Комитет вакцин и сывороток, рассмотрев обобщенные материалы изучения сухой живой аэрозольной сибиреязвенной вакцины, разрешил применение .препарата для иммунизации населения страны по эпидемическим показаниям. На основании решения Комитета вакцин и сывороток МЗ СССР санкционировало внедрение аэрозольного метода иммунизации против сибирской язвы в противоэпидемическую практику (приказ № 485). Приказом была предусмотрена, начзгаая с 1968 года, массовая аэрозольная иммунизация населения стационарно неблагопо-'" лучных, по сибирской.язве пунктов.Азербайджана.

Одновременно Молдавскому НИИ эпидемиологии, микробиологии и гигиены было поручено совместно с противоэпидемическими учреждениями Азербайджанской ССР и. ША. км.С.ГЛ.Кирова на комиссионных началах ^провести сравнительное изучение аэрозольного и накожного методов иммунизации людей против сибирской язвы. Программа и методика -исследований, а также разработанный план практического при-1 менешм аэрозольного метода иж^низации населения против сибирской язвы, согласованы с -НИИ микробиологии и гигиены ш.Мусабекова и республиканской СЗС (г.Баку).

Постановке" опыта предшествовало тщательное изучение, заболеваемости людей сибирской язвой, в республике. Наблюдениями установлено, что те местности в.Закавказье, которые были пора&ены сибирской язвой до революции,-дают основщт заболеваемость и в - настоящее время. Наиболее-неблагополучной по сибирской язве является Куро-Араксинская низменность, территория которой в основном находится- в пределах Азербайджана.

В республике насчитывается около 600 стационарно неблагополучных по сибирской язве пунктов, больйинство из которых расположено в.низменной полосе, что обусловлено несомненно почвенными а климатическими условиями.

Начиная с 1937 года (год статистического учета заболеваемости зоонозными инфекциями в республике), заболеваемость лвдей сибирской язвой в Азербайджанской ССР носит волнообразный характер без залетной тенденции к снняению. В 1968 г. заболеваемость сибирской язвой в республике по сравнению с 1333 годом, годом относительного благополучия, увеличилась в 2 раза. За последние годы показатель заболеваемости незначительно снизился и стабильно удерживается в пределах 2,00 на 100.000 населения.

Более 90% заболеваний людей сибирской язвой регистрируется в сельской местности. Основным источником заражения людей является -больной скот, находящийся в Еедениц Ендивидуальных скотодергателей (до 95$). Фактором передачи заболевания в большинстве случаев служит кясо, полученное от больных сибирской язвой домашних .животных (овцы, коровы) при вынунденнои тайной убое и разделке туш (78,8). Профессии опальные заболевания отмечены в единичных случаях и в отдельные года составляют от 2 до 5$,

За последние 10 лет в республике регистрируется кожная форма заболевания людей сибирской язвой с преимущественной локализацией карбункулов на верхних конечностях-(91-92$); летальность составляет 0,4$. Подъем заболеваемости сибирской язвой отмечается в летне-осенние месяцы (июль-октябрь - 70$). Изучение заболеваемости сибирской язвой за последние годы свидетельствует о сохранении выраженной сезонности этой инфекции.

Исхода из эявдемяологдчееккх особенностей сибирской язвы е Азербайджанской ССР, наш при испытании аэрозольной иммунизации на больших контингентах взрослого населения, был и:спользован метод основного массива. С этой цель® бшш отобраны пять наиболее неблагополучных по сибирской язве районов (Шамхор, Т£уз, Казах, Агдам;- Агджабеда).

Численность населения упомянутых пяти районов составляет 450 тыс. человек, которые дают около 30$ всех случаев заболеваний сибирской язвой в республике. Население каждого из 5 районов было разделено методом случайной выборки на две равнозначные группы. Население первой группы численностью 50143 чел. было иммунизировано против сибирской язвы аэрозольным методом, население второй группы (69853 чел.) - накожным.

Для иммунизации населения аэрозольным методом было приготовле-. но 14 серий .сухой живой сибиреязвенной вакцины общим весом 1084,0 г. Все серии аэрозольной сибиреязвенной вакцины были отконтролированы в ОБК МНИИ ВС ш.И.Мечникова, а образцы 3-х серий (37А, 24М и 25М) в соответствии с существующим положением по .контролю медицинских биологических препаратов направлены в ГЙСК им.Л.А.Тарасевича.

Аэрозольную сибиреязвенную вакцину/диспергировали с .помощью прдбора ПАВ-65, мощность и технические данные которого позволяли за один 'сеанс иммунизации, продолжавшийся 15 минут, охватить прививками 150-250 человек. В течение рабочего дня (.8 час.), пользуясь одним прибором ПАВ-65, вакцинировали-свыше 5 тыс.человек.

Серии аэрозольной сибиреязвенной вакцины, использованные в опыте, характеризовались высокой биологической активностью (до 163 млрд спор в I г), поэтому для получения оптимальной иммунизирующей дозы 70+20 млн спор достаточно было иметь навеску препарата,"равную 0,01 г/м3. Контроль величины биологической аспирационной дозы производили отбором проб аэрозоля вакцин в двух различных точках помещения с помощью калиброванных ишшнжеров и определяли путем прямого счета спор в камере Горяева.

Для накожной иммунизации использовали живую сибиреязвенную вакцину СТИ Тбилисского НИИ ВС (серии 41 и 42, контроль В 1190).

Патронажное наблюдение за прпвгткыи осуществляли врачи райошвгх СЗС в течение 1969-1970 гг. Наблюдениями установлено, что среди привитых как аэрозольным, так и накожным методами в контролируемых районах не было зарегистрировано ей одного случая заболевания сибирской язвой. *

Эпидемическая обстановка по сибирской язве в Азербайджанской ССР в 1969 году по сравнению с 1963 годом характеризовалась снижением заболеваемости ладей з 2 раза. Интенсивный показатель заболеваемости людей сибирской язвой, удерживавшийся в последние годы по республике на уровне 2,00, а в контролируемых районах 6,0+1,7 (на 100 тыс.населения), после проведения массовых прививок в 1959 году снв-звлся до 1,00. Кроме того, массовые привязки населения, проведенные весной 1969 года, т.е. накануне эпидемического сезона, предотвратили ежегодно повторявшийся летне-осенний подъем 'заболеваемости снбщ>-ской язвой в республике. ■ •

Характерно отметить, что заболеваемость сибирской язвой среди привитых аэрозольным методом в течение всего 1969 года (срок наблюдения) не регистрировалась, однако среда привитых накожным методом случаи заболевания вмели место .уже спустя 7-8 месяцев после вакцинации.

Таким образом, опыт 'внедрения аэрозольного метода иммунизации против сибирской язвн в противоэпидемическую практику, поставленный на крупных конгиЕгентах населения Азербайджанской ССР, показал, что с помощью этого метода возможно в сжатые сроет, осуществить массовую вакцинацию с незначительной затратой сил е средств и обеспечить заметное снижение заболеваемости людей сибирской язвой.

4. Сравнительная иммунологическая эффективность накожной и аэрозольной вакцинации людей против сибирской язвы / Н.Е.Гефен,

С¿А.Шварц, В.М.Щустиков и др. // Иммунологическая реактивность организма при введении бактерийных препаратов. - М., 1970. - С. 32-33.

5. Изучение реактогенности, безвредности и иммунологической эффективности аэрозольного метода иммунизации против сибирской язвы при испытании на людях / Н.Е.Гефен, Б.М.Шустиков, О.А. ' Руднева и др. // Еурн, микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. - 1970. - С. 81-85.

_6. Эффективность живых аэрозольных вакцин против чумы, сибирской язвы и бруцеллеза в эксперименте на животных и при испытании" на людях / Н.И.Александров, Н.Е.Гефен, Б.М.Шустиков, Г.И.Крем-лев // Аэрозольные вакцины и их применение. - М., 1972. - С. 7.

7. Опыт внедрения аэрозольного-метода иммунизации против сибирской язвы в противоэпидемическую-'практику / В.М.Щустиков, С;Ф.Федяев, С.А.Шварц и др. // Аэрозольные вакцины и их применение. - М., 1972. - С. 67-70. -

8. Иммунологическая эффективность аэрозольного и накожного мето-. дов иммунизации против сибирской язвы / В.М.Щустиков,"С.Ф. Федяев, С.А.Шварц, Б.Р.Трескунов // Вопросы эффективности про-тивосибиреязвенных мероприятий. - М., 5974. - С. 96-97.

9. Шустиков В.М., Федяев С.Ф., Шимановская Д.Т. Опыт внедрения аэрозольного метода иммунизации против сибирской язвы в практику здравоохранения // Вопросы эффективности противосибире-язвенных мероприятий. - М., 1974. - С. 98-99.

10. Шустиков В.М. Использование кожно-аллергической пробы на аят-раксин в качестве теста оценки сенсибилизирующих свойств живой сухой сибиреязвенной вакцины // Тезисы конференции "Критерии оценки иммунологической эффективности и безопасности бактерийных вакцин". - М., 1976. - С. 181.

ОС .

11. ¡Цустиков Б.М. Применение реакции пассивной гекагглютинации для оценки поствакцинального иммунитета против сибирской язвы при иммунизации аэрозольным и накожным методами // Тезисы конференции "Критерии оценки иммунологической эффективности и безопасности бактерийных вакцин". - М., 1976. - С. 161-162.

12. Усманходжаев А., Адилов Д.А., Щустжков В.М. Применение реакции гемагглютинации для оценки поствакцинального иммунитета у людей, вакцинированных против- сибирской язвы аэрозольным и накожным методами // Ташк. мед. ин-т. Материалы респуб. научной конф. - Ташкент, 1980. - С. 195-197.

13. Гоголев М.И., Качалов И.А., Щустшсов В.М. Подготовка подвижных противоэпидемических отрядов и специализированна противоэпидемических бригад // Подготовка невоенизированных формирований и учреждений медицинской службы ГО, - М., 1977.

14. Прогностические решения при организаций,-СНАВР в чрезвычайных■ ситуациях / Н.И.Проценко,-А.П.Демидов, В,М.Щустиков и др.-'// Воен.-мед.журн. - 1991. - 11 3. --С.19-22. :

15. Противоэпидемические мероприятия в чрезвычайных ситуациях / И.В.Новинов, В.С.Ласкавый, В.М.Шустиков и др. // Обеспечение безопасности людей в чрезвычайных ситуациях .( Учебник для вузов). - изд.^Образование".■ - Л.,1992. - вып.З.

Тир. ЬР . Зак--2£.

Предприятие «ПАТЕНТ». Москва, Г-59, Бережковская наб., 24