Автореферат и диссертация по медицине (14.00.30) на тему:Иозоэнзимная характеристика штаммов лейшманий и их использование в сероэпидемиологических исследованиях в Гвинейской Республике

РОССИЙСКАЯ ЖАШШ ЩЩЦШСКИХ НАЛС

НаучЕО-нсййбДоаательскиЗ ордена 'Грдаогого Красного Знамени институт знядэмеояогш и шгкробиалогия имени почетного • академика; Н.Ф.Гг-алея

красах рукописи

ЛАНСЖ1 ЖАМ'РА БСШ. ЙШШЗШАЯ 2&РМТВРИСТША 1Ж® ДШЙНГШШЙ; И Ж ИСПОЛЬЗОВАНИЕ

в с^шдадажйшескиг ютщцаашш в гвинейской рвсптелйкв

14о00.30 - Этвдемнологюг

Автореферат дасеертацкн на сскстпиъ ученой стэневн кандгдата б&ологнчэетшх наук

Москва - 1332

Работа Ешсшена в Ыауаю-зсгшедовагаз^сксы ордена Трудового Красяого Заамзни янсзетутв эвддадаоаогна и ынкробясшогш.шеш лочвтяого академика Н.Ф,Гашлен,>

Научный ррошдаедь; доктор биолотшнсшх. наук, профессор В»М«Сафышова

Офацаалъвые шшояенгн: докзор недицинских наук8 профессор

В.В„Тарасов

доетор шдвцнасках шук Т„А.Воронцова, Ведущая оргшшзацадг Научно- нее ледова, еюркай инсгпху? иедвциые «ой парааиюлогия и гропической медицины ии, д-.И/арциновекого.

Защита состоится " ьШ 1932 г. Е «асов,

на заседании еяедаализирошяного совета Д 001,07.02 в НИИЗУ еы. Н.Ф.Ганалеи (123098, г»Мо&ша, ул.Га«алеа, д,18)-

С тщссартацией шшо ознакомиться е бвйиотекв НИИЗ& ш.Н.Ф.Гамалеп. Арторефэрат разослан " ^ "_Г _1992 г.-

Учеянй секретарь специализированного совета каядвд.мадлшшеккх яауг,

Н.Б.СшшчеЕа

«ОНДАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

^льность темы. Лейшмаяиозы - группа протозойяых инаек-ЕызыЕаешх различными гадами паразитов, относящихся к роду unía Rosa . Ояи играет Еажнейшув роль е тропической патоло-По последним даяяым Всемирной Организации здравоохранения, дно е мирэ болев? лвйпмаяиозами яе менее 12 шя. •человек и 1,5 млрд., прояинающих е эндемичной по лэйшмаякозам зоне, ятся под угрозей заражения.

Большое значение имеют лейилаяиозы дал Африканского кояти-, на территория которого циркулируют невольно видов лейш-- возбудителей коишх я Еисцеральяых форт лейшманиозоЕ. в одном только Судане за последние 5 лет от нисцеральяогс аниоза погибли 40000 человек. Снециальные исследования, прошв в районе Хартума, выявила около 25£.дн$1Щироваяннх леЗш-т среди ьестпого населения (тин news , IS9I, П 37). ¡ерьезную проблему здравоохранения предстазляпт лейдаанизк Яше, Кении, Тунисе, Алжире, Морокко, Сенегале я другие сс Африки- Однако следует отметить, что для многих айрякан-»тран информация.о лейшаяиозах почти полностью отсутствует, ix никаких исследований на их территории пока не проводилось, ■нэстя, до начала нашей работы это относилось и к Гвинейской лике, где вполне можно бшю предполагать наличие лейшма-, поскольку они поражают население на территории соседних • ■ еей Сенегала и Мали, э сходннх эколог; ¡ecKíjjs условиях, ведения о возбудителях лейшаяиозов, циркулирующих на Аф-ком континенте, к настоящему Еремеяи таюсэ являются далеко кши.Этот информационный пробел затрудняет создание видо-с^еских лзГяиманийных диагностикумов. Такие дпагяоетикуш

необходимы, поскольку на эндемичных по лейшаянозам территория как правило, циркулирую? несколько сдапатрических евдое лейшз пай, каядай из которых служит Еоь^удателем самост ятальной ног формы» Вопрос ослозняется еще я тем обстоятельством, что £ последнее Еремя днскрадитировался кжшшчэский критерий дафферен-циации .различных форм лейшманнс. эе. Например, оказалось, что

I. inientun (ВОЗбуДНТьЛЪ СрЭДИЗеМНОМОрСКОГО ВИСЦвралЬКОГО лейш-маьлоза) човвт вызывать коаяый лейшланшз и, наоборот, ь« tropics (возбудитель антропонозяого кожного л.вйшаниоза) - висцеральную форму болезни.

Вое сказанное свидетельствует о большой актуальности нако: ления с мнительных данных об африканских, штаммах лейвманий, к использования для создания ввдосиецифичэских диагностакумов и проведения рекогносцировочных сероэпвдешологкческих исследова киях на территориях тех стран Африки,'для которых информация о лейаланиозах до сих пор отсутствует. ';

Цель работы заключалась в отборе (на основе сравнительно!« лзоэнзимного анализа Эталонных штаммов лейшаний для приготовж "ея специфических антигенов и получения с их помощью первых, pi когносцировочннх данных о наличии лэйшаниозов на .территории Гвинейской республики.

Основные задачи исследования:

1. Провести сравнительное изоэпзшное изз'чзние шташои лайшаниз? из криобанка ЕШЭ»! им. Н,Ф.Гамалеи, в том числе айрш ских итакаов.

2. Определить диапазон ьзмеячиЕости штадаов, полученных иг различных регионов Старого Света.

3. "Заявить эталонные штаммы для использования е серодиаг-стических тест-системах на территории.Гвинейской республики.

4. С ях помощью об'следоЕат^ на наличие лейшманийных анти-л население различных районов страны»

5. Обследоватв местные популяции грйзуноЕ на носнтельстЕО ЙВМаИИЙ.

6а Пронести рекогносцировочное поиски переносчиков лейв-ниоза - москитово

Научная новизна. Ери использовании ГШ'*-я шй^офэрлентного аяиза с набором корпускулярные антигенов. йз. эталонных штаммов злачных видов лайшашй Старого Света шерЕыа показано. наличие тнтел против 1е1о1шзл1а у яасачения ТЕИНёйской республики. Изу~ ао распределение серопознтягных лиц по территории -странн, езяе-за ях нредаушст-ееяная локализация е. районах-, пограничных с Се-гадом я Мала, а' ландшафтах сухих.саванн.

Зпервне на территории Гвинейской республики установлено ес-зтеоняоз есимльотео лейп?,га*шй грчзуната: гололшой песчанкой

^■ьэха еапъ1ат )} жщс.шш иаа1жпув егу«!го1еиси9 и ц. еоамвгюэ

здедшй вид вообще ранее был отечен в числе носителей лейша-\0 Таким образом, впервые для науки показано наличие цнркуля-I лейшаний на территории Гвинейской республики.

Обнаружен новый ейд москита из рода зегееп^Еу1а (лодрод

И1ип1и8 ) . »

Практическое значение работе. Полученные данные позволяют кяить Гвинеи в эадемичкув по лейшаниозу зону и обязывают 5отиккое здравоохранения этой страны проводить в целях диффе-щиалыюЯ дкаяостики серологическое, ларазитологическое и клп-

кичесг.ое обследование на лейшаяиоз больных с когнкии поражениями, а такае лихорадящих больно с геяато- и силеноыегалией,

Материалы диссертации могу* быть использовали в вузах пр] прзаодашяяи курсов "Эпидемиологи", "паразитология"„ "парази-гарные и тропические болезни".

Положения. Енявитаемне я. защиту.

На территории ¿нинейской республики имеет место циркуляция лойшманий, в тоги числе I. ое^ог - возбудителя зоояозного к< ноге лейшаниоза.

Наиболее интенсивный контакт ' аселешы с лейшман&яш отл] чается е ландшафте сухих саванн, в районах, граничащих с Сенегалом 1 Мали, где кояеый дейвшаняоз представляет серьезную пр< лему здравоохранения.

Гвинейская республика долзша быть Ектшчена е эндемичную ) лейшваниозам зону Африки.

Апробация работы. Материалы диссертации доли?.еш на копии решил Отдала природноочагоЕнх инфекций _ШШ2?Л т. Н.Ф.Гамалеи.

Публикации. По материалам диссертации офэршшнн и сданы : печать (е журнал "Медицинская паразитология и паразитаряне болезни") 2 статьи.

Объем и структура •работы. Диссертация представляет собой рукопись объемом 92 отранит?мазвкноиисного текста. Она сое га из введеиЕЯ, 6 глаг, зрйточзнля и выведсе. Иллюстрирована 8 т; лшамк к 7 гясункэш. ¿пкксг. лктзратуры включает 20 русских и 'десубгжньч -

Содержание работы I* Мдтэриад и метода.

При проведении сравнительного пзоэязимяого .анализа испсль-эваны 34 штамма лвйшиаиий из кркобаяка НИИШ им. Н.Ф.Гамалеи, деленные в различных географических районах Старого Света от одей, больных ка-нш я висперальным лейшаяиозом, ;а такае от зкзунов - естественных носителей паразитов (табх. I). В тем куге:

10 штаммов аз Африки: Эйгспяя - 3 штамма, Тунис - 2, Марокко - J, Сенегал - 4;

12 штаммов из Срвдаей Азии: Туркменистан - 10, Узбекистан - 2; 3 штамма нз Закавказья (Азербайджан) ;

G штаммов с Ближнего Востока: Ирак - 3, Афганистан - I, Израиль -- I, Саудовская Арагия - I; 2 штамма из Монголжя; I штамм из Иядыя.

Среда перечисленных били эталонные втаимн 7 видов лейшмаяий:

. raajor, Ь. tropica, Ь. infantas, L, dono-ra.nl, Ь. aethiopica, Ъ. turanica, , arabica.

Лейшании культввпроЕалн на двухфазной среде (дат-агар с эгащающей еядкостью) . Промастстоты лейпманий яа 14 день куль-зиронаяия осат-далп центрифугированием вдкой фазы среда (при 3g е течение 15 мин.). Осаздрняые пршаогигда^.поете 3-х iTHoro промывания подеергалк лизису добавлением раеаого объема щого раствора стабилизаторов знзшое (дитиогреитола, 6-аетно-фояоЕой кислоты и ЭДГА} в концентрации I ïi.l каждого реагзнта.

Акалпзируешо штамлц

Таблица I

6,

Географический район Страна Наименование шта*.моз Клиническая л ма: кохнаяСс1 впои,эральиая('

АФРИКА Сенегал I ,ШО^ГТ/75ДЖ-99 г .гтт/зн/79/Е£-хоо ЗД,ШАБ/Би/77/Ж-58 4.1211Л5/31!/77/ГК-66 сь та та та

Тунио Э.шэк'к^зэ/хкм та та

Марокко та

Эфиопия 1 0.№С5УЕР/'аГ/ХО54 з.шоьт/яъ^г/ь-юо * 20.ИЮЬ/ЕТ/б7/ШЗ сх " "" а, та

СРЕДНЯЯ АЗИЯ Туркменистан 1г.йнмИзч/'90/гй сх. сь

хз.ияор/зя/эо/гз 14.ЖОГУЗЧ/. /24 15.МГОГ/£И/84/ГК 17.1.5Ю1УШ/87/392 18.Ш)14/50/87/393 1д.мюг^еи/Б7/4ХО го.кк/51/а7Л27 сх. сь та та сх. сь с г, сь

Узбекистан гх.м;01узи/90/гга гг.июи/зц/ао/шп _г сь ст.

: .ШВНАЗБЕ Азербайдаг " гздаюггу'ат/75/к-25 24,И10М/Еи/С0/К"2? * 25 сь сь

ЕШШШ ВОСТОК . Ирак 26 .ыия/ю/во/ьш 27-Ш®/1<У79/Ы1-1 сь та та

Афганистан гэ.кнсч/АР/б^'м и!-

йзпаиль зо и'п/шано О].

1 Сауд.Арзвия 31 ./вЗ/Лад-220 а,

1 А3ы1 Монголия зг.Юи'Д.'хк/язАчя-х * П. ино/лм/бУ^т-з сь сь

Шугая

134.; и.»

>Аи/80/РПЗ *

п,

Эталонтае шсаамв: 6-1**вЪса1Л.а 1. ппЬш, <!-1.а»Шср1се, Х1-1.ЕаЗзг,

1Я оке чательяого разорения клеток суспензию замораживали в изком азоте, оттаивали н центрифугировали при 100000 <• в течете I ч, хгри +4°С. Супернатант -чазланали малыми дозаш е мелкие гасткаесогыо пробярки, замораживали и хранили в жидком азоте до ¡пользования его ъ электрофорезе.

Электрофорез проводили ча аг<зтат~цаллюлозных даастинках по ■годам Kreutzer et ai, 1587 на стандартном оборудовании

JMH Helene Ifiboratory (США.), при ИСЛОЛЬЗОЕаНШ рбаКТИВОЕ фирМЬ Igra.

Все использованные в работе атаШ^исследсхеэлйсЬ на 12 sh-иов:е-бн>я, 6-pgdh, ш:, сот, je-, ди>, imt íc?, áu?,h:, pk, ra.

Сбор сывороток от населения Гкийёйской республики проводился [990-1991 гг., в 8 районах« располоааяяых разлйчщиГ частях эригорш страны» Обследовались: Сигира, Канкан, Курусса {севе--Еосток, восток)„ Кундара. Mató, Лабе (северо-запад, севе"), сдаа» Коваярн (вго-зашд). Всего собрано 7ID cafcoporös, зашифрованных ""о 2 т я сохранишься'а замороженном состоянии ; температуре -20°С„ ■

Сыворотки были изучена в реавцйй ябнрялой' !эй,гунофасоресцен-■ {Р3®)„ при использовании лшшисцентного микроскопа orthopian ite, по стандартной методике (Титова, Грачева, 1982), а такяе редством ишуноферелентного анализа с корпускулярным лейдаа-аны антигэнш (C-eltsí.), по методике, ра^райа^анной в НИКЭМ

H.5>"„Гатлез (Сыкора и др., 1989; Гончаров и др„ 1991). В

sx реакциях применялись лиофшшзированкые лейшманЕйкые аяти-

I, приготовленные в НИИЗМ т. Н.Ф.Гэмалеи, по методике, раз-

«

тнной в этом институте (Титова, ГрачеЕа 1982).

С дельв выяснения во.-адшюстя перекрестных реакций лейдаакий >збудителем сонной болезни, распространенной ГмшеЕской рее-

публике был использован в ЕГО© антиген, приготовленный яз ютадаа "Тхур" ' ( Tryxianospna eacbiense )« S Тех Ж0 ДОЛЯХ 33 СЬПЕОСОТКИ, ПО-лозятальныэ на лэ&шаниоз, были . зучеш в реакцш. агглютинации (РА) с антигеном итгур» по стандартной методике ЬиЗ {lestryp зв-tt smith nine- kit, sa, 1932 ) \ Тест-система дом этой реакции била любезно предоставлена д-ром Э„Г гыякоеой (ЧСФР, Прага).

Ларазнтологячес-.ллу обследовании на носительство л.ейшаний бы: подвергнуты ISO особей грызунов, отловленных на территории Гвинейской республики в районах Сатира, Канкан, Курусса, Кундара, Ki—диа е 1990 и 1991 гг. Окраинные -о методу Романовского мазки .и отпечатки-внутренних органоа животных (печень, селезенка) просматривались под микроснопом Olympus.

Был проведен рекогносцировочный отлое москитов на липкую бумагу, смазаяную касторовая маслом, которая развешивалась в ки-,шх помещениях, в окрестностях Кивдиа, е 1991 г., в количестве 50 шт.

. 2. Изоэнзимная характеристика штаммов лейшмааий.

34 штамма лейшанвй» проанализированные на 12 энзшое , показали 13 вариантов изоэнзшинх профилей.

На основании анализа совладения энзимограш л близости изо-эвзишкх профилей эталонных и асаледуэмых 'штаммов {таблица 2) определен видовой статус лейюшшй. По идентичности изоэнзимного профиля штаммы i.,majcr (исего 12) разделились па 3 группы (.1,2,3 иаогнзишшв профили) соответственно географическим районам."'Первая гругша (среднеазиатская) включает шташа из Туркменистана и Узбекистана, вторая (африканская)" - из Сенегала, третья (ближневосточная) - из Израиля и Ирака. В осноенсм штамма, относящиеся к b.aajor , выделены из кояшх лоразеяю: человека. Однако среди

Таблица 2

Количество совпадающих энзкмограмм анализируемых штаммов лейшгладий

Виды •йананий.

L.mjar.

I.tropica.

L.dDrovcni

sensu lato. Г' Г

rr t

а

о • о ^ I Л

2 is а. i 1

I 2 3 4 5 S 7 8 9 10 II 12 13

I 12 9 о 0 T X 2 0 0 ' 0 3 4 3 3

.¿ох-. 2 g 12 3 n I 0 0 0 0 3 3 3 -3

3 8 8 12 .1 0 I 2 ?. I 3 2 3 4 ,

4 0 0 T 12 . .8 10 4 4 4 4 2 3 5

roplca, 5 I T 0 3 12 9 4 4 4 2 2 3 4

G 2 0 I 10 9 12 5 5 5 5 3 3 4

7 ü 0 2 4 4 5 12 8 7 2 I . I 2

элсгап! a 0 0 2 Л, 4 5 8 12 II 3 2 0 3

a si lato. 9 0 0 I i 4 5 7 II 12 3 2 0 3

10 3 3 3 4 2 5 2 3 3 12 0 , 5

irjuica. II 4 3 2 2 л 3 I 2 2 9 12 5 3

12 3 3 3 О 3 3 I 0 0 3 5 T2 4

t,:u opica. 13 3 3 4 5 4 4 <■> t 3 5 3 4 12

Группа цдоитпчвгп: вкздвсв яо .тешам взозязшюго днзлязп

го.

четырех штаммов из Сенегала, имеющих общий изоэнзимный профиль один выделен из конного поражения человека, а три - из внутрен них органон грызунов.

.Штаммы ь.tropica (всего 10) также разделились на 3 группы Первая (среднеазиатская-закавказская, изоэнзимный профиль 4) Еключает 4 штамма из Туркмении л 2 из Азербайджана. Все эти штаммы Ецделены из коаных поранений человека. Вторая группа (ai рикаиск; :, изоэнзимный профиль 5) включает I штамм из Туниса, выделенный из внутренних органов человека, и I из Эфиопии - из конных поражений чалоиека. Третья („лизшеносточная, изоэнзимяы; профиль 6) - 2 шта».ащ из Ирака, выделенных из е утренних орган! челове: .i. В эту se группу входит I чтада из Эсгиопии, выделенны: из кожных поражений человека.

В пределах ь. aomreni seneu lato мы получили такне 3 варю та изоэнзишшх профилей {7,В,9). Референс-шташ l. donovani s.&. (ИНДИЯ, ИЗОЭНЗИМНЫЙ профиль 9) и 5 штаммов I.infantum из разли ¡¿.их районов мира (профиль 8) показали незначительную Еариабэль-ность только до одному энзиму С503), и лишь азербайджанский ттг 'профиль 7) - по 5 энзимам. От ДРУГИХ штаммов Ъ. infantum 3TOT штаьи отличается по 4 энзимам (ты, мр ,аср ,ке ).Своеобразие азэрба£даанского штамма заключается в том, что он выделен из кояяых поражений человека.

В предела^ l. turanica (3 штажа) выявлены отличия по трем энзимам (к>к ficv ,alí ) меаду туркменским шташо.к, выделенным, согласно паспорту, из внутренних органов ребенка (изоэнзимный профиль 10) я двумя штаммами из Монголии, выделенными от больше печанки (гзоэнзишыЁ аройиль II).

Среди всох изученных птаммов не обнаружено аналогичных Ь. araЬ.tea (профиль 12) И ь. (,jtíiiopicn. (профиль 13).

Та^лм образом, из таблицы 2 ввдно, что африканские штаммы major, L.tropica И I.infartuc ПО СЕОКИ ИЗОЭЯЗПМЕНМ ХараКТври-икам отличаются от штаммов со гветствующия гидов лейшашй из утих частей юс ареалов (Средняя Азия, Закавказье, Ближний Во- , ок). Учитывая это обстоятельство, ын сочли целесообразным из-ать дая использования в се; олог чеекюс тестах при проведении когяо'цяровочного обследования населения Гвинейской республики стщгй штамм i.oajcr - ЩСИ/sh /79/ДК-9Э, выделенный па террито-и сопредельного с Гвинеей Сенегала.

Поскольку на территории Гвинейской республики можно было предлагать наличке па только ко;.лого, но и висцорального лейшанпо-, я при этом ш яе шаля в своем распоряжении штамма возбуди-<1Я висцерального лейшааяиоза из Западной Африки, т были вняук-ш использовать в серологических исследованиях международный реренс-штатаз х.аопотай. - ИНСМ/4н /Б0/ДП8. Бил также испол: jo-i штамм МНСМ/Ьи /67/ь , so своим антагешгкы характеристикам от-япшй к сер .группе i..'<5orwani вепси into (Снкора и др., 1983; !ода л дро 1ЭЭГ). О наличия зтсго паразита в Агряке ранее ни-'о но бито гзЕестнэ» На основе изоэнзямного анализа тот vl ЮСИТСЯ К ВИДУ birsniea (Strelkova И Др., 1991), КОТОрнЙ, ПО :яым Стрелковой и соавторов (1990), широко распространен на ¡риториа Азия (Средняя. Азия, Монголия), в пределах ареала i.mjor зляется по отношент к этому паразиту сшпаТрЗческйы впдом. дстачлякось ннтерсспшд выяснить, имеет ¡ra место совместная куллция гтих даух видов и на крайнем напала ареала i.rajor , fia ритории, примглзЕщей к Атлантическому побережью.

3» Серологическое обслелевавиа на дейжаяеоз населения Гвинейской РВСПУбДИКИ.

Нами проведено первое, рекогносцировочное серологическое обследование на лайвшняоз населения Гвинейской республики.

Результаты этого обследования с антигенами ть и ДК-93 е тестах ЕНИФ и с-еыза представлен в таг&шщх 3 и 4« С анткгенпа Д58 ( х.аоштап! $.8. ) ни одаа из 720 ебследонаяных сывороток на дала пояснительного результата. ■

Как еидно ш таблрт, процент положительных сывороток с антигеном та колебался е Ш© от I до .«,1. а в с-зыба - от 0,84 до 4,08 (табл. 3). С антигеном Ж-99 процент пол штельпых сыео-роток составил в от зльных районах гураны, согласно ИВ®.- от I, до 5,0; согласно о-вш* - от 1,69 до 4,76 (табл. 4). Уровень а* тител пологиталькых снвороток при использовании обоих антигенов колебался в те с: те с-ьыза от 1:400 до.1:1600, а в тесте РШФ - от ' 1:16 до 1:32. ■

Как показали предыдущие исследования (Гябода, Гончаров я д; 1991), эти титры еероясигсштельнах снвороток достаточно убедите; . л свидетельствует о контакте населения с возбудителями ла&ша-япозон: титр 1:400 в с-шш яеяявтся специфичным для представь тедей рода х/ЛеЬгкша (без разделения на кида) а титры 1:800 к ешо рассматриваются как нвдоспещфгческие. По назвал данным, ре гультаты РЕ® к с-£Ы5л в большинстве случаев соотЕетствуют дру дату. Однако в некоторых случаях при отрицательной бшш

получены полааительяаа результате в РШ1Ф (см, табл. 3, сыворотки 39:96^61 и др.; табл. 4 - 66,30,33 и др.).

Учитывая большую чувствительность и специфичность с-еыза . по сравнению с РН®, мокчо предположить. что положительные рез^

»г о n

CD to

ш «

ci

о

13.

О} С4

M ® « • « (С

СО M СО ft n H

-J* .* •» f •> ••

m w w о m m

8 W M

oí iO ■ «o

СО M M

^

m oi h

M о

• СО

л w f

о w

о? СЭ

nJ w

«Ol со

со о

■d«

о

О

• to

gí M

o w

¿ ® á со M so

M

CO

о

со со о со с*г о

M

8 о о 8 О О • о о о о » 8

00 & СХ5 ОО g- л H P« H ■ СИ

M w о M Í—t о о о w w о w

DD СО СО M to

n n kl n

M

CS!

и

¡й I 1 И

о [jtf3 d5t~l>ocpc)*fm й to я n w

& ИНЙ^'ЛЙЛМЙОИ^ФОКШ

Ö

о

«

о

о й

о о

в -о к

со д

& &

о а

з< я

я &

S M î>» св

W хз

. cd

и Ï=5

о

1

M

1 г 3 4 5 6 7 0 9

ЛАБЕ Тунтурун 49 ж. 19 1:400. .отр.

Цаякел-бори 53 м 23 1:800 1,53$ 1:32 1,70/2

КИЩЩ Сугета 14х М ' 30 отр. Х:1£

Мчмбиа 51х м 19 отр. 0,84$ 1:32 1,69$

г.Киндаа 108 и 24 1:400 охр.

КОНАКРИ г.Конакря 2 ж 24 1:400 отр.

8 ж - 28 1:600 2,942 1:20 1,47

П; мечааия: х - сыворотки положительные с анткгенал "Тгур" (см.табл. б);

а - титр положитолькой реакции;

6 - прощэнт положительных сывороток от общего числа обследованных в данном района.

Таблица 4. Сыварог.чИ, юлокительннэ а РШФ и о-еыеа й антигеном Ж-99.

( тгпзог ) из различных, районов Гвинейской республики

Район1 ■■'Г ------- ...... 1 Населенный j пункт. 1 (Ь О'ЫБОр. Пол. .........."г ¡Воараст. | | I I I Результат теста

с-ЕЫСА РШ®

а ! б а ; б

I ! 2 3 4 ! 5 5 Б ! 7 8 ! 9

СИГИРИ Лоно 15 ж . . 34 1:400 1:15

Кинткниа и 41 м . 35 1:400 отр.

66 к ' ЗЬ отр. 3,06$ 1:16 3,06$

г.Сигири 81 ' и 40 1:800 1:32

КА1ЖЫ ' Баланду 13 ж 22 . 1:400 отр.

30 и 33 . отр. . 1:16

Батенсфай 33х и 36 отр. 3,12* 1:16 4,68Й

г.Канкан 56х' м 28 1:400 1:16

КУРУСА' Сангиана 10 м 21 ОТр, 1:16

19 я 23 1:400 4,76* отр. 4,76$

Балато 33 . м 25 1:800 1:32

Семба1!ло 5 ж 33 1:400 1:32 К

м 9 № 27 1:1600 1:32

8

m 0

«

s ai

A О

и

Q

со

4

pi

о. (S

s я ь g

I

H г?

ь £

о>

«J «

à у

о №

•ö

ÍS

►à s

Œ>

ex a.

о »Ö

a in

W

S

PS О О

З € ß

а >o ex

8й CX ÍÜ

<«! O Sfe

И tó S

COtOMMMtOCO-Jits-(H-JCnW СО СП N M M ■ Ю <t О 00 -О СО

-j w œ о,

M

t

MMyWMÜtdHÜH

oí «o' o >>• o ton о ш

m го to

M Ol Ol I

M о

•• >3

Ol >o

о •

о

M о

ô t» со

M w

о ч

CO ü ООО» ООО

W о fi

M о • • и

со о о

M

ел

ÜJ

■гл

со О

ъг

to

V!.

О

fó

о ч •о

M о го •

о

H •Ö

• * M M о M о M w

* • *• HI • •

СО tjj со ■a w •cl со

«о tv M (T> en >0

ег-to

Ol ел

to

to го гч

ci

'аты ИЗ© в титре 1:16 иногда возникают за счыт перекрестного »еагироЕагая ле£илаяяйяого антитела с антигенами против какого-то другого (по-видимому, близкого к лзйшкакюш) организма. Обследо->анная территория эндемична по африканскому трипаносомозу. Поэтому мы ",очли необходимым проверить положительно реагирующие в ШФ на л^Чшмани&шй аниден сыворотки в том не тесте, & так~е 3 РА С антигеном !,1гур" /приготовленным ИЗ Тгуйапоаои. Дспое, Результаты исследования представлены в табл. 5, из которой следует, что некоторые из испытанных сывороток положительно реагировали на трипаносокный аитаген. Следует отметить, однако, что титр положительно реагируй жх на антиген «ггур« сывороюк ни в одном случае не превышал 1:16. Возникает предположение о возможном контакта населения, проживающего на обследованной территории, с возбудителями как леБшманиозоЕ, так и сонной болезни, хотя нельзя полностыз исключать наличие перекрестных реакций мввду этими простейшими в самом низком титре РНИФ.

Обращает на себя внятные ¿от факт, что одни к те зе сыворотки по-разному рзагирувт в тесто с антигенаад у?, я ДК-55. Полагая, что это связало с наличием в сыворотках вцдошещф'.чес--хжх антител, г.ш сопоставили в "аблпце 6 уровень г угигсл всех положительных в эгсм тэств; сыЕороток по отношения к обош нс11сл.1— зованшш антитезаи. Эта таблица достаточно ярко дллвотрпрует ви-доспецкфичнесть с_еыза » Кавдая сыворотка характеризуется боле>э высоким уровнем антител по отношении к какому-то одному антигену, во сравнению о другим» Во многих случаях (сыворотки Д'З 47,87,54, 33,09,23,109) тктрн 1:800 д 1:1600, которые мк считаем впдосп«-. цгс£ичоскями, получены только о одна» из испытанных актпгг-'ов, тогда как с другпм реакшя дала отрицательный-результат.

таблица 5, СыЕоропш положительные на лбйиманиоз, реагирующие С аН7'ЯГ;5НОМ г"11ури (lryi.3nooo.-m gambiense ) И »

: Наоелеышй i J'VHKT 6 г----------------------- i * i сыворотки Т* Т Гезультсл.' теста

Patea Пол : Возраст i PA

i " í i i i i i i ü í ¿ "I • X i i ■■>

КЛИКАН Батенафай 33 м 36 1:5 T:I6

■ г.КантаА 56 M 28 отр. 3,12$ I: IG 3,12%

SI ж 28 1:5 OTp.

КГ.ЩДРА г.&увдара • 100 и se T:ö стр.

КИЩША Сугота 14 M 30 JIT" i :1c

Ышлбиа 51 M - 19 отр. 1:16 . ,

Примечание: то же, что Е таол. 4. 00

^ . ------- ----- ~-----~------"

б сыворотках людей из различных райояоЕ Гвинейской республики

Район .......г--------- — — — ! 1 Населенный пункт ! 1 (. .......Г 1 й 1- ;сыворотки{ Результат т. _;та та: { ДК-99

( 1 1 1 а ! б | 1 а ; б

С'ИГИРН Доко 15 1:800 1:400

Кинтиниа 41 отр. 1:400

\ 47 1:1600 4,08$ отр. 3,06%

57 1:400 отр.

3г,Сигири 81 отр. 1:600

87 1:800 отр.

КЛНКАН Баконко 13 1:800 1:400

Батанафай 34 1:800 3,12$ отр. 3,12$

г.Кан^. а 56 отр. 1:400

КУРУСЛ Соягиапа 19 отр. 1:400

Балато 34 отр. 1:800 4,76$

К1ИДДРА Самбайдо 5 отр. 1:400

Э отр. 1:1600

23 отр. 1:800 ю •

î

я 'ö

о

ti

4

W Ш

1

S

s

so w да

i? ex

ra .

Г-4 И

g

¿x О

w

►-3 ч у

ГО

S» ix О J

Vi g m 'ö о g

>а >5 .13 s

<<j w n

S

S

vi

ÍE

►3 о

ñ о

tr3

Сз о. ti

GJ M

M О

to

го м 01 Л со

U1 ifc. CJ to

M ГО

-S1

о

а>

оэ. со

СП СП

и •с о fcl

со

Cl

о

м о и

¡fc. tJ

M о о M M о w с о M о

a < s H • • • • я • 1 ч • « H

►tí ►d fo tí сю •-Ö л •о

о о о о • • о »

о о о о о

о о

►а

¡U

о.

ILO lb. '¡А

а>

lö.

ai ос.

í—i

•ja

го о

и о H 1-4 M (Ч д GT (-1 о Г?' 1-1 о » 2 M о 1-3

п: V И 13 >0 СО 'ri 43

о о о • * г~> о о • o »

о О о о о CJ о

го

ti

На рис. I показано распределение положительных • са-роток по территория Гвинейской республики. Как видно из этого ^унка, сыворотки, полояителышэ'с антигеном ДК-99 в титрах 1:800 зыше, преобладают в районе населенных пунктов Кундара, Ката и 5е, на границе с Сенегалом, откуда и происходит этот штата воз-дателя к-здого лейшашгоза. СкЕоротки, яололительяые в тех зе грах с антигеном ть , преобладают г районе Сигири, на граница с ш„ Следует отметить, однако, что такое "преобладание" тлеет гасительный характер, т.к. яатачие положительных на оба анти-а сывороток (как в РЕ®, так я е е-идек ) отмечается, практи-!кк, н районах всех обследоЕаннык населенных пунктов. Даже на »-западе страт:, в районах Киядаа и Конакрк швьтся от?, ль ныв :одкя полоиителыаи сывороток как с одним, так и с друга ан-енсм, хотя в целом -их количество в этом районе значительно ьдга, чем на северо-востока и северо-западе.

Таким образом, полученные данные показывают, что на . зрря-пи Гвинейской республики имеем1 место контакт населения как с бущтгелем какного лейшюняоза - ь. «-¿о? , тяч и с сопутствую-и.:у сишатрическим еидом - х. чагш^са , подобно тому, чти на-даэтся в центральной д восто'гной частях ареала гих паразитов.

4. Результата обследояак:и гшзуяов на естествешгд» зара-тость лейпмаягоат и даяние о москитах.

Б таблица 7 представлены результаты обследования яа естест-юе носительетао ^¿гстпго? лейиманий пяти видов грнзуноз, от-ттих р 5 районах страны. Пз нее еядно, что общий процент ял-кос с амасгаготами лейпмаякй от числа всех обследоЕгллкх ока- - . :я доесльно высоким (4,25). Наибольший процент зарагонп с леГак- ' шми аивоттех вкявлен в районе Чулддра (на хранит с С'чегалом),

к= и

1С

m in

fr. i SC =>

и о

Ä п

tV •%)

о ft

(О *Г. fí

t5 s

fe» ci I

« m к ф а <<

• . s

•-» К «о H я

o

o (H CO o CI P) CO

o

t 3 i?B C. c .o o g ■h 9 & w FU

Si

O

a -r-i a o C ira o q W

« si 3 ca

D

w 2 02 <1) fT'3 ii ci tr> £ !? w rt o

3-.

ji-

a -Q pi

o li (I o

g c! n ^ fi .u 3.' ¡3 SI

«

o

n? Pi !

CO CO

tO

c*

H M

10

C3~

6' b

i 1 I I

o

ITJ

cn

CO

oi ^ o o

M H fi-

ll I ! lilt

CO

n n J1 H

till

1(11

11.8

to

CO

to , o i-i 1 M !

m i m t

o tc

to CO M M

CT> cn

t£1 O

I I t^ Ol

1 I M M

to M

W . M M

m o

to n

CO

in <JI (D M

g a,

ej I

to

CJ

o

o to

M

cv co

!

CM

« • -

M

It J K!

fri

o

<J a

CJ o

to —H

«

a

LO ftt

to O

hj

lO o

o

OJ

o

m

<a

<r> <£t

to

J

r-t ca

m

t> 5

■ a

CO P

ID

M CI

r* R

3

a

3 t=)

S3

M

O &

w

o

a

a

« HI

o

a XJ

o

cu tt

a &

o r-(

CD 0" <3

o

M

o

El ti H

o M K

Jrt

a §

o

X

s5 5« o W

9

i I

ca w o

o W W M

o f*

i") H

FS

а такие s районе Скгяря(погракичвом с Мали) и е ргйояе Канкан. При сопоставлении этих данных с геограйаческш распределением псяокительных яа лейшанийше антигены а_>оротох (рис. I) еядло, что наибольший процент зараженных лейшланиями гркзуноЕ и человеческих сыЕороток, полоаителъно реагирующие яа лбйшанкЁные антигены, еняелея е одних я тех же раЧояах.

AmcTiroTii леАмаякЕ с. ларуяены у трех из пяти обследованных ВИДОВ rpl .унон: голопятсй песчанки ( Tatera garaMana ) и ДЕуХ ЕНДОВ крыс рода Kaetonyst lUgaaniams И К. erjthraleaois ИЗЕ8СТНЫ как резервуар т.major в Сенегале, где этот паразит был Ендеден из внутренних органов кивотннх. Ин тогэ ео всех без исключения случаях обнаружила амастигсты лейаманМ ео внутренних органах (печень, селезенка) грызунов. Ясражечие лейыаяяями коки отмечено не было.

На липкую бумагу в районе Кавдиа есйго было отловлено 7 эк-ЗеКПЛЯрОЕ ЮТоКИТОЕ. 3 ÜJ НИХ определены КЭК Eergentosyia ( '¿¿rcento-rajria ) dubia , 4 - KEK S„ ( Eintonius ) ер. фООШ, бЛИЗКаЯ К S.( Sint

christopiiex-E^ но отдичагэдаяся от этого вида по ряду признаков. По мне нею А.А.Артемьева, проверявшего наше определение, эта корма, по-ЕЕДШому, цредстаЕляет новый вид я заслуживает описания.

Закллченяз.

Проведенное Епервые на территории Гвинейской республики се-

роэшщешологяческое обследование населения на лейиы ниоз, при

Koropo?vi применялись таст-систьиЩ с антигенами из затадно-афрякан-

i

скогс зимодеыа b.mjcr , дознания) гшошта антитела к зтоцу паразиту у значительного числе обследованных лип (порядка 1-5$). Большинстве полоялтельно реагирующих сывороток получено лз района Кун-дара_ (сензро-западная Тшиея, граничащая с Сенегалом). Эти дашив

свидетельствуют о контакте населения о .еозбудитэлем конного лейи-гганиоза прашущестЕеняэ в зоне сухих с-агаяя, т.е. в тех ~е ланд-иа<}тшгх условиях, что я £ пограничных с Ггинеай районах Сенега-, ла ч IÚали. Быеод о циркуляции леЯшманлй на территории Гзсиейской республики юдтверядается паразятологгчвсккмн находками - обнаружением • мастигот лейшмаяйй с лпченк и селезянке трех еидое

грнзукое, кз которых 2 ( T.cacrtiena ) И К. erythr.jleucu3 П3-<2СТНК как реззрЕуар i,. -aje.- на территории Сенегала.

Таким обрагсм, Глияейскап республика может быть с достаточным основанием отнесена к числу территорий Западной Африка, потенциально опасных е отношении кошого лвйяланизза.

Данных о циркуляция за территории этой страны г, dc-o-reni нам пока получить не удалось: ни одна из испытанных онвороток с этим, антигеном не реагировала. !Ьш материал, конеччо, не достаточен, чтобы отршить цяркуляцга» :-оабудителя нисцэрального лейш-«ониоза в ГмткейсздЗ ррспуЛглкэ. Исследования г.этом нас^аЕлейии следует продолжить. - • ' ■

Вместе с тем представляет лктэр-зс еблартюние сыЕороток, ио-лояитвльно реагирующих с антигерои из etsamü vi, относящегося к серогрунпи I.. doiicvavi а. 1а и . Í'.C, даННШ ИЗОЭ. JKMH ОГО а ГЛ.Ti! 33,

tíTOT a¡T5?"JÍ ОТНОСИТСЯ К ír.lursiniia - ЕВДУ, СЮТаТрИЧНШу Ь.шг.-)ог

в центральных л еосточннх часЬп ареала последнего. Моако предполагать на осяогании яаьлсг (¿осзспякг) даякнх, что и s западных частях apeaba i.aijcT? , на Территория;;: примыкагщгх к Атлаятячес-yo:,7j океану, скпгучтркчсское сосуввстеезание .указанных ыщов такие шест кеото, з -тал: череэ укус ммштоз доатакгяру/л с обоими ш*-. рэзитокп.

В ¡¡в о да .

1. Проведен изознзккный анализ (на 12 энзимов) 34 штаммов, предстаЕпякших 7 ендое дейшаний Старого С-л-а, в том числе 10

л

африканских штаммов возбудителей конного и висцерального лейшма-ниозов.

Показано, ЧТ~ штамма I.ssjor, I.tropica ----- и I.iniantuo

в африканском ближневосточном и среднеазиатская регионах представлены самосиягельными зшодешмк, отличавшаяся друг от друга по 3-5 -нзрмзм.

2. На оснозаши результатов анализа внбраиы 3 штамма для^ приготовления антигенов в гелях их использования при проведении серологического обследования на лвйшаниоз населения Гвинейской республики. Б их числе: итамм MHGM/sk/79/EK~95 ( i.major. наделенный на территории Сенегала от больного лейшманиозом), MEOM/ib/BI ДДЗ (международный референсчаташ ieisfcnania aonovani ) и МНШ^О /67/ VX V L.turanlca , ОТНОСИТСЯ К СерОГруППЭ L.donovani senou

Into).

3. На территории Гвинейской республики ьперные проведено серологическое обследование ва лейпмаяиоз мастного населения на основе тестов РЧИФ и c-kusa , в которта использовались тест-системы с антигена!«® из трех вышеперечисленных штаммов лойшманий. Выявлены сыЕоротки, положительно реагирующие на антигены ДК-99 и та в титрах I:80U & ьышз ( 0-EUSA ) и 1:32 и выше (РКИФ).

4/ Согласно с-еыеа цроцент серопозитиЕНЫХ лиц колебался в отдельных райбнах страны от 0,8 до 4,8; согласно РНЖ - от 1,0 до 5. Болылшстео снЕорсгок, лолоеитзльно реагирующих на антиген ДК-99, получено из района Куадара (с е е еро--западная Гвинея, граничащая.о Сенегалом), & с антигеном - яз районов Пнгирн 2 Канкан (северо-восточная Гвинея, граничащая с Ь'али).

5. Обнаружены амастиготы лейканий в печени и селезенке представителей трех видов грызунов, отловленных-на территории Гвикей-зкой рзспублики: latera gacbiana, Ifestcsys exythroleueun, jí.gambíams Гаиболртий процент естественно зараяеншх леЕпманаягя! грызунов заявлен в тех se районах страны (Кундара, Сигира, Канкан), где збнарупено наибольшее качество человеческих сывороток, поло-штельно реагирующих на лейпмани&ше антигены.'

6. Полученные данные свидетельствуют о контакте населения "винейской республики как с x.=ajor так и с сопутствующим ему

:шпатри4еским ЕДДОМ - I.turanica.

7. 3 результате иссле; ЕанЕя впервые получат паразлг-оло-■ическкз и серологические доказательства циркуляции лейшмгчий в 'вияейской республике., которая могсет бить с достаточным осн^ва-¡ием отнесена к числу -территорий Западной Африки, потенциально шаспых в отношении кожного лейпшаниоза.