Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Характер и механизмы нарушений неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты при остром отравлении веществом BZ

Характер и механизмы нарушений неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты при остром отравлении веществом BZ - тема автореферата по медицине
АВТОРЕФЕРАТ
Характер и механизмы нарушений неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты при остром отравлении веществом BZ - диссертация, тема по медицине
ДИССЕРТАЦИЯ
Сидельникова, Наталия Михайловна Саратов 2004 г.
Ученая степень
кандидат медицинских наук
ВАК РФ
14.00.16
 
 

Автореферат диссертации по медицине на тему Характер и механизмы нарушений неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты при остром отравлении веществом BZ

На правах рукописи

СИДЕЛЬНИКОВА НАТАЛИЯ МИХАЙЛОВНА

ХАРАКТЕР И МЕХАНИЗМЫ НАРУШЕНИЙ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА И СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ИММУННОЙ ЗАЩИТЫ ПРИ ОСТРОМ ОТРАВЛЕНИИ ВЕЩЕСТВОМ BZ

14.00.16 - Патологическая физиология 14.00.36 - Аллергология и иммунология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

САРАТОВ-2004

Работа выполнена в Саратовском государственном медицинском университете и. в Саратовском военном институте радиационной, химической и биологической защиты.

Научные руководители:

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Понукалина Е. В.

заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор Трошкин Н. М.

доктор медицинских наук, профессор Брилль Г. Е.

доктор медицинских наук, профессор Саяпина Л.В.

Ведущая организация:-Самарский государственный медицинский университет

Защита состоится « ^ »<3г. в » часов и а заседании диссертационного совета Д. 208.094.03 в Саратовском государственном медицинском университете по адресу: г. Саратов, Театральная площадь, 5

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Саратовского государственного медицинского университета.

Автореферат разослан <<Я£»> 2004 г.

Ученый секретарь диссертационного совета,

кандидат медицинских наук, доцент Бабиченко Н.Е.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. В современной медицинской науке проблемы, комплексной оценки характера и механизмов нарушений неспецифической резистентности организма (НРО) и специфической иммунной защиты при остром токсическом действии опасных химических веществ приобрели первостепенное значение в связи с необходимостью патогенетического обоснования и разработки научных принципов, средств и методов, с помощью которых удается проводить эффективную медикаментозную коррекцию постинтоксикационного иммунодефицитного состояния после, интоксикации токсичными химикатами. Фундаментальными работами отечественных и зарубежных авторов создана обширная теоретическая база, основанная на экспериментальных и клинических исследованиях, раскрывающих патогенез формирования иммунодефицитных состояний при самых разнообразных патологических процессах, вызванных токсическим действием ксенобиотиков [Денисенко П.П., 1980; Петров Р.В. и соавт., 1981а; Саватеев Н.В., Куценко С.А., 1982,1993; Ройт А., 1991; Хаитов P.M. и соавт., 1995; Забродский П.Ф., 1998, 2002; Забродский П.Ф. и соавт., 2003; Descotes J., 1986; Luster M. J. et al., 1987; Sullivan J. В., 1989].

Поэтому исследование изменений иммунного гомеостаза под влиянием м-холиноблокаторов является актуальной и важной научно-практической задачей патофизиологии и иммунотоксикологии. Атропиноподобный синтетический м-холиноблокатор - 3-хинуклидилбензилат (вещество BZ), является психотропным боевым отравляющим веществом (БОВ) и подлежит уничтожению согласно « Конвенции...». Однако не исключена вероятность применения данного высокоактивного психотомиметика и его аналогов рядом стран в качестве основы химического оружия. Возможно также использование вещества BZ для совершения террористических актов. К настоящему времени в результате целенаправленного научного поиска синтезированы и прошли всестороннюю военно-химическую оценку ряд аналогов 3-хинуклидилбензилата, которые отличаются более выраженной специфической психотропной эффективностью и способностью проникать через кожные покровы [Сокольский Г.А и соавт. 1983; Антонов Н.С., 1994; Rosenblatt D.H. et al., 1977; Wills J.H., 1982]j КромялТОГОн

I библиотека j

изучения 3-хинуклидилбензилата обусловлена тем, что м-холиноблокаторы широко исследуются и используются в качестве медикаментозных средств для антидотного лечения при интоксикации фосфорорганическими соединениями (ФОС) и другими ядами [Голиков С.Н., 1968; Саватеев Н.В., Куценко С.А., 1982, 1993; Забродский П.Ф., 1998, 2002]. Не исключено также и использование м-холиноблокаторов (атропиноподобных препаратов) в качестве наркотических средств [Крылов С.С. и соавт., 1999].

Известно, что острые интоксикации м-холиноблокаторами относятся к наиболее распространенным лекарственным отравлениям [Лужников Е.А., Костомарова Л.Г., 1998, 2000]. Возможно чрезмерное использование м-холиноблокаторов при интоксикации ФОС легкой степени тяжести [Могуш Г., 1984; Бадюгин И.С. и соавт., 1992; Маркова И.В. и соавт., 1998], а также их применение с суицидальными целями.

Исследованиями многих авторов доказано, что при остром токсическом действии на организм м-холиноблокаторов; в частности при интоксикации 3-хинуклидилбензилатом; возможны резко выраженные изменения гуморального иммунного ответа и клеточных иммунных реакций, что может приводить после интоксикации в дальнейшем к развитию инфекционных и онкологических заболеваний [Забродский П. Ф., 1993, 1995, 1998, 2002; Хаитов P.M. и соавт., 2000; Трошкин Н.М. и соавт., 2004; Ferluga J. et al., 1972; Loose L.D., 1986; Miller К., 1985; Tiefenbach В., Wichner S., 1985; Descotes J., 1986; Luster M. J. et al., 1987; Kimber I., 1996]. Изучение иммунотропных свойств вещества BZ позволит расширить существующие представления о влиянии большой группы м-холиноблокаторов на НРО и иммунный статус [Трошкин Н.М. и соавт., 2004]. В то же время комплексное состояние НРО и специфических иммунологических механизмов защиты после интоксикации веществом BZ и его аналогами практически не изучены и по этому поводу имеются лишь отдельные сообщения.

Недостаточно изученными остаются вопросы фармакологической коррекции нарушений иммунного гомеостаза в постинтоксикационном периоде под влиянием м-холиноблокаторов, в том числе и вещества BZ. Эта проблема имеет важное теоретическое и практическое значение и нуждается во всестороннем исследовании для целенаправленной разработки научных основ медикаментозной коррекции нарушений системы иммунитета с

применением иммунокорректоров из большого арсенала известных сейчас веществ данного класса [Ширинский B.C., Жук Е.А., 1991; Хаитов Р. М. и соавт., 1995; Забродский П.Ф. и соавт., 2001].

Таким образом, исследование по изучению характера нарушений НРО и специфических иммунологических механизмов защиты при остром токсическом действии м-холиноблокаторов с целью разработки способов фармакологической коррекции изменений иммунного гомеостаза в постинтоксикационном периоде является актуальным и важным как в теоретическом, так и в практическом отношении.

Цель исследования: изучить характер и механизмы нарушений неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты в условиях острой интоксикации отравляющим веществом BZ и разработать патогенетически обоснованные принципы медикаментозной коррекции сдвигов иммунного гомеостаза.

Задачи исследования:

1. Оценить комплексное состояние неспецифической резистентности организма и специфических иммунных механизмов защиты у животных при экспериментальной инфекции после острой интоксикации веществом BZ по величине летальности животных, среднелетальной дозы P. vulgaris и среднеэффективному времени жизни животных.

2. Выявить закономерности острого действия вещества BZ на состояние неспецифической резистентности организма в условиях экспериментальной инфекции по величине летальности крыс, среднелетальной дозы Е. coli и среднеэффективному времени жизни животных.

3. Исследовать характер и механизмы острого действия вещества BZ на факторы неспецифической резистентности организма (показатели бактерицидной активности сыворотки крови, сывороточной активности лизоцима, тромбоцитарного катионного белка, комплемента и фагоцитарной активности нейтрофилов).

4. Установить характер нарушений специфических иммунных механизмов защиты организма при воздействии возрастающих доз вещества BZ по ряду интегральных показателей оценки функционального состояния центральных и периферических органов иммунной системы.

5. Изучить влияние возрастающих доз вещества Б/ на Т-зависимый гуморальный иммунный ответ в различные фазы антителогенеза (титр антител в крови, содержание антителообразующих клеток в селезенке ) и на кооперацию Т- и В-лимфоцитов.

6. Оценить состояние Т-независимого гуморального иммунного ответа в различные фазы антителопродукции по титру антител в крови и показателям содержания антителообразующих- клеток в селезенке при остром отравлении веществом Б/.

7. Определить характер нарушений клеточного звена иммунного ответа при острой интоксикации веществом Б/ по реакции торможения миграции лейкоцитов, формированию гиперчувствительности замедленного типа, антителозависимой клеточной цитотоксичности, активности естественных клеток-киллеров.

8. Провести обоснование и разработать патогенетически обоснованную коррекцию нарушений неспецифической резистентности организма и основных гуморальных и клеточных иммунных, реакций при остром отравлении веществом Б/ с использованием антидота аминостигмина и иммуномодуляторов.

Научная новизна. В результате проведенного исследования впервые показано, что под влиянием вещества Б/ в дозах 0,2; 0,5 и 0,7 ЛД50 происходит снижение комплексных показателей состояния неспецифической резистентности организма и специфических иммунологических механизмов защиты, которое проявляется дозозависимым увеличением летальности крыс от экспериментальной инфекции, а также уменьшением ЛД50 Р.уи^айз и Е. соН и среднеэффективного времени жизни животных.

Экспериментально показано, что при острой интоксикации веществом Б/ в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50 происходит дозозависимое снижение бактерицидной активности сыворотки крови, сывороточной активности лизоцима, содержания тромбоцитарного катионного белка, фагоцитарной активности нейтрофилов.

Установлен характер нарушений специфических иммунных механизмов защиты организма при воздействии возрастающих доз вещества Б/, связанных с функциональным состоянием центральных и периферических органов иммунной системы. Показано, что вещество Б/

вызывает дозозависимое снижение числа КОЕ в селезенке. Установлено снижение числа Т-лимфоцитов в тимусе в течение 1-2 сут в прямой зависимости от дозы вещества BZ. Количество лимфоцитов в селезенке-через 1 сут после действия вещества BZ прямо пропорционально дозе уменьшается. Через 2 сут доза вещества BZ, составляющая 0,5 ЛД50, приводила к увеличению содержания лимфоцитов в селезенке крыс, а доза вещества BZ 1,0 ЛД50 вызывала противоположный сдвиг показателя. Вещество BZ через 1 сут дозозависимо повышает количество лимфоцитов в костном мозге и вызывает снижение содержания этих клеток в лимфоузлах, а через 2 сут реализуются противоположные эффекты.

Доказано, что острое действие вещества BZ вызывает прямо связанную с дозой (0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50) редукцию антителообразования. Иммунотоксический эффект вещества BZ более выражен в индуктивной фазе антителогенеза при иммунизации Т-зависимым антигеном и в продуктивной фазе иммуногенеза при иммунизации Т-независимым антигеном. Под влиянием вещества BZ in vitro происходит прямо связанное с концентрацией снижение кооперации Т - и

В-лимфоцитов вследствие преимущественного нарушения функции Т-клеток.

Выявлено, что вещество BZ вызывает прямо связанное с дозой снижение функции Т-клеток и реакции гиперчувствительности замедленного типа, супрессию активности антителозависимой клеточной цитотоксичности преимущественно спленоцитов по сравнению с тимоцитами. Острое отравление веществом BZ (0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50) в прямой зависимости от дозы уменьшало активность естественных клеток-киллеров спленоцитов крыс до 6 сут. Действие вещества BZ in vitro в прямой зависимости от концентрации вызывало редукцию активности естественных клеток-

киллеров.

Впервые экспериментально показано, что коррекция нарушений показателей неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты при острой интоксикации веществом BZ (1,0 ЛД50) достигается комбинированным применением иммуностимулятора имунофана и антидота аминостигмина..

Практическая значимость работы заключается в экспериментальном определении при острой интоксикации веществом BZ показателей неспецифической резистентности организма, параметров системы гуморального и клеточного иммунитета, свидетельствующих о развитии постинтоксикационного иммунодефицитного состояния, которое требует применения медикаментозных средств для его фармакологической коррекции. Обосновано и экспериментально доказано, что при остром отравлении веществом BZ восстановление показателей неспецифической резистентности организма и системы иммунитета достигается применением иммуностимулятора имунофана (ежедневная доза 10 мкг/кг в течение 3 сут) в комбинации с антидотом аминостигмином (в первые сутки в дозе 0,1 мг/кг 2 раза).

Положения, выносимые на защиту

1. Острая интоксикация веществом BZ в условиях эксперимента на животных в дозах 0,2 - 1,0 ЛДзо вызывает, прямо связанную с дозой супрессию комплексных показателей, неспецифической резистентности организма и специфических иммунологических механизмов защиты, основных параметров гуморальных и клеточных иммунных реакций.

2. Острое действие вещества BZ вызывает дозозависимую редукцию антителообразования. Иммунотоксический эффект вещества BZ более выражен в индуктивной фазе антителогенеза при иммунизации Т-зависимым антигеном и в продуктивной фазе иммуногенеза при иммунизации Т-независимым антигеном.

3. Механизмы снижения специфической иммунной защиты при действии вещества BZ обусловлены снижением миграции колониеобразующих единиц в селезенку; изменением содержания лимфоцитов в органах системы иммунитета в зависимости от воздействующей дозы и времени с момента интоксикации; нарушением кооперации Т - и В-лимфоцитов, приводящим к редукции антителообразования вследствие преимущественного поражения' Т-лимфоцитов; супрессией клеточных иммунных реакций.

4. Коррекция нарушений неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты после острой интоксикации веществом

Б/ достигается комбинированным применением аминостигмина и иммуностимулятора имунофана.

Апробация работы, публикации. Результаты исследований были доложены на заседаниях секции прикладных проблем безопасности хранения и уничтожения химического оружия Поволжского отделения АВН (март 2002 г., февраль 2003 г., апрель 2004 г.), на Российской научной конференции «Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты» (СПб, май 2004 г.), юбилейной научно-практической конференции «Актуальные вопросы корабельной токсикологии, радиологии, обитаемости кораблей и медицинского обеспечения личного состава ВМФ» (СПб, май 2004 г.), научно-практических конференциях Саратовского военного института радиационной, химической и биологической защиты (2002, 2003, 2004 гг.), совместном заседании кафедры нормальной физиологии, кафедры патологической физиологии Саратовского государственного медицинского университета, кафедры технологий уничтожения химического оружия и токсичных веществ Саратовского военного института радиационной, химической и биологической защиты, кафедры токсикологии, радиологии и медицинской защиты Саратовского военно-медицинского института (май 2004 г.).

По теме диссертации опубликовано 11 работ.

Внедрение результатов исследования. Результаты исследований и практические рекомендации внедрены в учебный процесс на кафедре технологий уничтожения химического оружия и токсичных веществ Саратовского военного института радиационной, химической и биологической защиты и на кафедре токсикологии, радиологии и медицинской защиты Саратовского военно-медицинского института. Материалы исследований широко используются при проведении лекций, практических и лабораторных занятий у курсантов и слушателей курсов повышения квалификации, первичной специализации и усовершенствования врачей. По материалам диссертации издано учебное пособие «Основы токсикологии».

Объем и структура работы. Диссертационная работа изложена на 168 страницах машинописного текста (включая таблицы и список литературы),

состоит из обзора литературы (глава 1); материалов и методов исследований (глава 2), собственных экспериментальных исследований (главы 3-7); заключения, выводов и практических рекомендаций. Работа иллюстрирована 33 таблицами Список литературы включает 241 наименование, из которых отечественных - 166 и зарубежных - 75

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ Материал и методы исследований

Исследования проводились на 1088 беспородных крысах и на 84 беспородных белых мышах обоего пола в равных соотношениях с массой тела соответственно 180-260 г и 18-24 г. Эксперименты на животных проводили в соответствии с требованиями Женевской конвенции «International Guiding Principles for Biomedical Research Inroling Animals» (Geneva, 1990)

Вещество BZ растворяли в 0,1 н. растворе НС1. Далее водные рабочие растворы вещества BZ вводили внутримышечно в дозах 0,2; 0,5 и (0,7) 1,0 ЛД50. Среднелетальные дозы вещества BZ для крыс и мышей при внутримышечном введении составляли соответственно и

В качестве иммуностимулятора использовали имунофан, который вводили в дозе 10 мкг/кг внутримышечно ежедневно в течение 3 сут. Первую дозу животные получали через 30 мин после острой интоксикации с применением и без применения антидотного средства (аминостигмина). Аминостигмин применяли внутрибрюшинно в дозе 0,1 мг/кг 2 раза в первые сутки.

Кровь для исследования факторов НРО и титра антител в динамике забирали из подъязычной вены животных. Органы системы иммунитета (тимус, селезенку, лимфоузлы, клетки костного мозга) извлекали у животных после цервикальной дислокации.

Комплексную оценку антиинфекционной неспецифической резистентности организма без предварительной иммунизации, а также НРО в сочетании со специфическими иммунологическими механизмами защиты с предварительной иммунизацией определяли по летальности крыс от

экспериментальной инфекции, по среднелетальной дозе соответственно Е. coli (перитонит) и P.vulgaris (пневмония) и среднеэффективному времени жизни крыс (Etjo) в опытной и контрольной группах [Забродский П. Ф., 1987], рассчитанных методом пробит-анализа [Беленький М.Л., 1963]. Факторы НРО - бактерицидную активность сыворотки крови (БАСК), содержание лизоцима, активность комплемента и тромбоцитарного катионного белка (ТКБ) в крови определяли общепринятыми методами, а фагоцитарную активность нейтрофилов в тесте с нитросиним тетразолием [Гембицкий Е.В. и соавт., 1987]. Влияние вещества BZ на обсемененность селезенки и циркулирующей крови крыс проводили общепринятыми методами [Ремезов А. И., Башмаков Г. А. , 1976] после внутрибрюшинного введения Е. coli в дозе 2,0 млрд микробных тел. Суспензию Е. coli вводили через 30 мин после применения вещества BZ. Селезенку и кровь брали у животных через 24 ч.

Влияние вещества BZ на функцию стволовых кроветворных клеток (СКК) проводили путем определения миграции колониеобразующих единиц в селезенку (КОЕс) из костного мозга (КМ) методом эндогенного колониеобразования [Till J. E., Me Culloch E. А., 1961; Петров Р.В., Хаитов P.M., 1972]. Вещество BZ вводили через 30 мин после облучения животных.

Лимфоциты в органах системы иммунитета подсчитывали исходя из их относительного содержания в окрашенных мазках исследуемого органа.

Исследование показателей Т-зависимого и Т-независимого гуморального иммунного ответа проводили у крыс по отрицательному двоичному логарифму титра антител (ОДЛТА) к эритроцитам барана (ЭБ) и Vi-антигену (Vi-Ag) в периферической крови через 5, 8 и 11 сут после иммунизации соответственно ЭБ и Vi-Ag, а также через 5 сут по числу антителообразующих клеток (АОК) в селезенке [Jerae N. К., Nordin А. А., 1963]. Иммунизацию проводили ЭБ клеток) и Vi-Ag (8 мкг/кг) при

изучении действия вещества BZ в индуктивную фазу гуморального иммунного ответа одновременно с их введением, а в продуктивную - после введения вещества BZ через 3 сут после иммунизации. Изучение кооперации Т- и В- лимфоцитов in vitro под влиянием вещества BZ для оценки роли Т- и В-лимфоцитов в обеспечении антителопродукции проводили по методу J. К. Thomas, T. Imamura (1986).

Изучение состояния клеточного звена системы иммунитета после действия вещества BZ проводилось путем определения функции Т-лимфоцитов по секреции ими фактора, ингибирующего миграцию лейкоцитов [Гембицкий Е.В. и соавт., 1987], реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) и показателя антителозависимой клеточной цитотоксичности (АЗКЦ) [Зимин Ю.И., Ляхов В.Ф., 1985]. Оценка активности естественных клеток-киллеров (ЕКК) проводилась в условиях in vivo и in vitro спектрофотометрическим методом [Гордиенко С. М., 1984].

Полученные данные обрабатывались с использованием общепринятых статистических методов [Урбах В.Ю., 1975]. Расчеты проводились на ЭВМ с использованием пакета программ Statgraphics.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Влияние вещества BZ на комплексные показатели специфических

иммунологических механизмов защиты и неспецифическую резистентность организма

В результате проведенных экспериментов установлено, что под влиянием вещества BZ в дозах 0,2; 0,5 и 0,7 ЛД50 происходит прямо связанное с дозой увеличение летальности крыс от экспериментальной пневмонии (после предварительной иммунизации), уменьшение ЛД50 P.vulgaris и Et50, что свидетельствует о редукции комплексного состояния неспецифической резистентности организма и специфических иммунологических механизмов защиты. Острое отравление веществом BZ приводит к дозозависимому увеличению летальности крыс от экспериментальной инфекции, статистически значимому при дозе вещества BZ, составляющей 0,7 ЛД50 (р<0,05), существенному снижению ЛД50 Е. coli и Etjo при дозах вещества BZ 0,5 и 0,7 ЛД50 .Под влиянием вещества BZ в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50 происходит прямо связанное с дозой увеличение содержания числа микробных тел Е. coli в циркулирующей крови и селезенке крыс после их введения по сравнению с контролем. Полученные данные свидетельствуют о снижении комплексной неспецифической резистентности организма.

Исследование БАСК у крыс под влиянием вещества BZ в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50 показало, что острая интоксикация приводит к редукции БАСК через 1-3 сут после отравления в дозах 0,5 и 1,0 ЛД50 (р<0,05). На 5/сут отмечалась тенденция к снижению БАСК, а на 7 сут происходило полное восстановление показателя. Так, через 1, 3, 5 сут после введения вещества BZ в дозе 1,0 ЛД50 БАСК уменьшалась соответственно в 1,27; 1,19 и 1,10 раза В дозе 0,2 ЛД50 вещество BZ существенного уменьшения БАСК по сравнению с контролем не вызывает.

Проведенные эксперименты показали, что острая интоксикация веществом BZ в дозе 0,2 ЛД50 существенно не влияет на активность лизоцима в крови. В дозах 0,5 и 1,0 ЛД50 вещество BZ приводит к снижению показателя соответственно через 1 и 1-3 сут. Так, через 1 и 3 сут после введения вещества BZ в дозе 1,0 ЛД50 активность лизоцима уменьшалась соответственно в 1,78 и 1,64 раза (р<0,05). На 5 сут сохранялась тенденция к снижению активности лизоцима (р>0,05) при действии вещества BZ в дозах 0,5 и 1,0 ЛД50. На 7 сут активность лизоцима восстанавливалась.

Нами установлено, что острая интоксикация веществом BZ в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50 вызывает прямо связанное с дозой снижение активности ТКБ через 1-3 сут. Статистически значимое уменьшение параметра отмечалось при дозе вещества BZ, составляющей 1,0 ЛД50, через 1 сут. Через 5 сут активность ТКБ восстанавливалась до контрольного уровня.

Наши исследования показали, что под влиянием вещества BZ в дозе 1,0 происходит незначительное снижение содержания комплемента в сыворотке крови крыс через 1-3 сут после интоксикации.

Экспериментально установлено, что под влиянием вещества BZ в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50 происходит дозозависимое снижение фагоцитарной активности нейтрофилов через 1-3 сут. Статистически значимые изменения отмечались при действии вещества BZ в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50 соответственно через 1 и 1-3 сут. Так, при дозах вещества BZ 0,2 и 0,5 ЛДя через 1 сут индекс активности нейтрофилов снижался в 1,24 и 1,35 раза (р<0,05). Показатель при дозе вещества BZ, составляющей 1,0 ЛД50, через 1 и 3 сут уменьшался соответственно в 1,64 и 1,20 раза (р<0,05). На 5-7 сут фагоцитарная активность нейтрофилов практически полностью восстанавливалась.

Таким образом, под влиянием острой интоксикации веществом Б/ происходит прямо связанное с дозой снижение НРО, редукция комплексного состояния неспецифической резистентности организма и специфических иммунологических механизмов защиты, основных факторов НРО - БАСК, сывороточной активности лизоцима, ТКБ, комплемента, фагоцитарной активности нейтрофилов.

Острое действие вещества Б/ на содержание лимфоцитов в органах системы иммунитета

Наши исследования показали, что под влиянием вещества Б/ в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50 происходит дозозависимое снижение числа КОЕс. Так, вещество Б/ в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50 снижало содержание КОЕс соответственно в 1,61 (р>0,05), 2,38 и 2,90 раза (р<0,05).

При исследовании числа Т-лимфоцитов в тимусе под влиянием вещества Б/ установлено, что в дозе 0,2 ЛД50 вещество Б/ через 1-2 сут после введения практически не влияет на содержание клеток в этом органе системы иммунитета. Статистически достоверное увеличение показателя (р<0,05) происходило при действии вещества Б/ в дозе 0,5 ЛД50 через 1 сут в 1,36, а через 2 сут число Т-лимфоцитов в тимусе достоверно снижалось в 1,43 раза. В дозе 1,0 ЛД50 острая интоксикация веществом Б/ приводила к достоверному снижению числа Т-лимфоцитов в тимусе через 12 сут соответственно в 1,31 и 1,26 раза. Восстановление показателя до контрольного уровня отмечалось при всех использованных дозах 3-хинуклидилбензилата через 4 сут. Аналогично изменялось содержание лимфоцитов в селезенке.

В ходе экспериментов установлено, что вещество Б/ в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 ЛД51) через 1 сут после его введения повышало содержание лимфоцитов в костном мозге соответственно в 1,06; 1,14 (р>0,05) и 1,24 раза (р<0,05). В лимфоузлах вещество Б/ в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50 через 1 сут после острого воздействия уменьшало количество лимфоцитов в 1,25 (р>0,05), 1,67 и 2,14 раза соответственно (р<0,05). Через 2 сут вещество Б/ вызывало прямо связанное с дозой снижение лимфоцитов в костном мозге и увеличение их содержания в лимфоузлах. Так, в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 вещество Б/

уменьшало содержание лимфоцитов в костном мозге соответственно в 1,09 (р>0,05), 1,23 и 1,35 раза (р<0,05). В лимфоузлах вещество BZ в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50 через 2 сут увеличивало число лимфоцитов в 1,15 (р>0,05), 1,31 и 1,54 раза (р<0,05) соответственно. Через 3 сут после введения вещества BZ содержание лимфоцитов в костном мозге и лимфоузлах восстанавливалось до контрольного уровня.

Вероятно, снижение миграции лимфоцитов из костного мозга и тимуса под влиянием вещества BZ приводит к уменьшению их числа в лимфоузлах [Петров Р В. и соавт., 1972, 1981; Петров Р.В, 1987; Хаитов P.M. и соавт., 2000]. Наши экспериментальные исследования свидетельствуют, что после прекращения действия вещества BZ эффекты, обусловленные ацетилхолином в синапсах нервных окончаний холинергической системы, иннервирующей КМ и лимфоузлы, временно усиливаются.

Влияние вещества BZ на В-звено системы иммунитета

При изучении содержания антителообразующих клеток (АОК) в селезенке к ЭБ у крыс после острой интоксикации веществом BZ в дозах. 0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50 через 5 сут после иммунизации в индуктивной и продуктивной фазах антителогенеза было установлено (таблица 1), что под влиянием вещества BZ отмечается дозозависимая редукция синтеза IgM, о чем свидетельствовало снижение числа АОК в селезенке животных.

Таблица 1

Влияние вещества BZ на число АОК к ЭБ (103), синтезирующих IgM,

в селезенке крыс через 5 сут после иммунизации ЭБ (M±m,n=5-8)

Доза, ЛД50 Время интоксикации после иммунизации, сут

Контроль 38,5+3,1

0,2 27,6+3,0* 31Д±3,2

0,5 23,6+2,8* 27,9+2,5*

1,0 19,9+2,9* 23,5+2,6*

Примечание: * - р<0,05 по сравнению с контролем.

При введении вещества BZ в дозах 0,2, 0,5 и 1,0 ЛД50 одновременно с иммунизацией число АОК к ЭБ в селезенке крыс снижалось соответственно в 1,39, 1,63 и 1,93 раза (р<0,05), а при введении вещества BZ через 3 сут после иммунизации ЭБ - соответственно в 1,24 (р>0,05), 1,38 и 1,64 раза (р<0,05) В среднем в индуктивном и продуктивном периоде антителогенеза при действии различных доз вещества BZ число АОК к ЭБ в селезенке крыс уменьшалось соответственно в 1,69 и 1,42 раза

Результаты свидетельствуют о снижении под влиянием вещества BZ функции ТЫ-лимфоцитов, индуцирующих синтез IgM [Pfeifer С. et al, 1991] плазмоцитами селезенки, в большей степени в индуктивной фазе антителогенеза по сравнению с продуктивной

В проведенных нами экспериментах установлено, что при введении вещества BZ в дозах 0,2, 0,5 и 1,0 одновременно с иммунизацией

(оценка в индуктивной фазе антителогенеза) число АОК к Vi-Ag в селезенке крыс снижалось соответственно в 1,15; 1,27 и 1,46 раза (р<0,05), а при введении 3-хинуклидилбензилата через 3 сут после иммунизации Vi-Ag (оценка в продуктивной фазе антителогенеза) - соответственно в 1,26 (р>0,05), 1,51 и 1,76 раза (р<0,05) В среднем в индуктивном и продуктивном периоде антителогенеза при действии различных доз вещества BZ число АОК к Vi-Ag в селезенке уменьшалось соответственно в 1,29 и 1,51 раза.

Результаты наших исследований свидетельствуют о том, что снижение под влиянием вещества BZ при иммунизации Т-независимым антигеном функции В-лимфоцитов, продуцирующих IgM [Ройт А. и соавт., 2000], характерно в большей степени в продуктивной фазе антителогенеза по сравнению с индуктивной

Нами показано, что вещество BZ in vitro в концентрациях 105, 104 и 10"3 М уменьшает функцию В-клеток в кооперации с Т-лимфоцитами соответственно в 1,16 (р>0,05), 1,32 и 1,70 раза (р<0,05), а функцию Т-клеток - в 1,46, 2,20 и 3,01 (р<0,05) раза соответственно

Таким образом, острое действие вещества BZ вызывает прямо связанную с дозой (0,2, 0,5 и 1,0 ЛД50) редукцию антителообразования Токсический эффект более выражен в индуктивной фазе антителогенеза при иммунизации Т-зависимым антигеном и в продуктивной фазе иммуногенеза при иммунизации Т-независимым антигеном.

Действие вещества BZ на клеточное звено системы иммунитета

В наших исследованиях установлено, что вещество Б/ вызывает дозозависимое снижение функции Т-лимфоцитов у крыс через 1 и 2 сут. Так, при дозах вещества Б/ 0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50 отмечалось увеличение реакции торможения миграции лейкоцитов (снижение функции Т-клеток) через 1 сут соответственно на 9,0 (р>0,05), 18,8 и 20,9% (р<0,05), а через 2 сут - на 8,1; 12,9 (р>0,05) и 18,8% (р<0,05) соответственно. Через 6 сут функция Т-клеток, оцениваемая по РТМЛ, полностью восстанавливалась.

Исследование реакции ГЗТ при остром действии вещества Б/ в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50 в экспериментах на крысах выявило редукцию формирования ГЗТ соответственно в 1,35; 1,51 и 1,90 раза (р<0,05).

Нами установлено (таблица 2), что при интоксикации веществом Б/ в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50 АЗКЦ спленоцитов дозозависимо снижалась через 5 сут после иммунизации ЭБ соответственно в 1,38; 1,88 и 2,76 раза (р<0,05) Отмечалась связанная с дозой редукция АЗКЦ тимоцитов через 5 сут после иммунизации ЭБ соответственно в 1,25 (р>0,05), 1,60 и 2,37 раза (р<0,05)

Таблица 2

Влияние вещества Б/ на АЗКЦ через 5 сут после иммунизации, %

Доза, ЛД5о К-клетки селезенки К-клетки тимуса

Контроль 15,2+1,2 9,0+1,0

0,2 11,0+1,1* 7,2+1,3

0,5 8,1±1,4* 5,6+1,2*

1,0 5,5±1,0* 3,8+0,6*

Примечание: * - р<0,05 по сравнению с контролем.

Экспериментально показано, что вещество Б/ (0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50) в прямой зависимости от дозы уменьшает активность ЕКК. Так, острое отравление веществом Б/ в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50 через 1 сут вызывает супрессию функции ЕКК соответственно в 1,59; 2,45 и 2,98 раза (р<0,05), а через 3 сут - соответственно в 1,36 (р>0,05), 1,72 и 1,93 раза (р<0,05). Через

6 сут происходило полное восстановление ЕЦ при дозе 0,2 ЛД50 и частичное восстановление активности ЕКК при дозах 0,5 и 1,0 ЛД50 (р>0,05).

В опытах in vitro нами установлено, что при концентрациях вещества BZ, составляющих 10 s, 104 и 10"3 М, происходит уменьшение активности ЕКК соответственно в 1,35; 2,13 и 3,74 раза (р<0,05).

Коррекция нарушений неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты при остром отравлении

веществом BZ

Нами установлено, что для снижения иммуносупрессивных эффектов может быть использован антидот вещества BZ аминостигмин, который, ингибируя ацетилхолинэстеразу, вызывает накопление ацетилхолина в синапсах холинергических структур лимфоидных органов. При этом вполне обоснованно можно ожидать иммунопротективного действия обратимого ингибитора холинэстеразы аминостигмина (АС). Кроме того, применение АС в комбинации с имунофаном может полностью восстановить нарушения НРО и иммунного гомеостаза, вызванные острым отравлением веществом BZ [Михайлова М.Н. и соавт., 2003; Забродский П.Ф., 2003,2004].

Установлено, что под влиянием вещества BZ происходило увеличение летальности крыс от экспериментального перитонита, снижение ЛД50 E.coli и а использование АС в качестве антидота статистически значимо (р<0,05) снижало супрессию данных показателей. При использовании АС после отравления крыс веществом BZ в дозе 1,0 через 3 сут отмечалось существенное уменьшение БАСК и сывороточного содержания лизоцима, достоверное повышение индекса активности нейтрофилов в НСТ-тесте, обсеменен кости периферической крови и селезенки Е. coli по сравнению с показателями при остром отравлении (р<0,05). При этом восстановления до контрольных значений сниженных действием вещества BZ показателей НРО не происходило (р>0,05). Применение АС в комбинации с имунофаном приводило к полному восстановлению показателей НРО.

Нами установлено, что применение АС или имунофана частично восстанавливает гуморальный иммунный ответ к Т-зависимому и Т-независимому антигенам при остром отравлении веществом Б/. Так, интоксикация веществом Б/ снижала число АОК к ЭБ в селезенке крыс в 1,93 раза (р<0,05), а применение АС и имунофана приводило к увеличению показателя соответственно в 1,31 и 1,33 раза. При этом он оставался ниже контрольного уровня (р<0,05). Комбинированное использование АС и имунофана полностью восстанавливало Т-зависимое и Т-независимое антителообразование.

Нами установлено (таблица 3), что применение только АС или имунофана частично восстанавливает основные показатели клеточного звена иммунитета при острой интоксикации веществом Б/. Так, по сравнению с контролем острая интоксикация веществом Б/ снижала реакцию ГЗТ, ЕЦ и АЗКЦ соответственно в 2,09; 2,08 и 2,15 раза (р<0,05).

Таблица 3

Влияние имунофана и аминостигмина на основные показатели клеточного иммунитета после острого отравления веществом BZ в дозе 1,0 ЛД» (M±m, n=7-12)

Препараты Реакция ГЗТ, % ЕЦ, % АЗКЦ, %

Контроль 33,5+2,0 32,1+3,1 12,5 ±1,4

BZ 16,0+2,1* 15,4+3,4* 5,8+1,3*

BZ +аминостигмин 25,8 + 1,9* 23,2 ±2,8* 8,7 ±1,0*

BZ +имунофан 26,0 ±1,8* 25,9 ±2,6 9,0 ±0,9*

BZ +аминостигмин +имунофан 35,3+2,2 34,3± 3,3 14,0 ±1,5

Примечание: ЕЦ определяли в конце 3-х сут после отравления веществом В1, * - р<0,05 по сравнению с контролем.

Экспериментально показано, что использование только АС или имунофана приводило к уменьшению реакции ГЗТ по сравнению с контролем собтветственно в 1,30 и 1,29 раза (р<0,05), при применении этих же препаратов ЕЦ оставалась сниженной по сравнению с. параметрами контрольной группы соответственно в 1,38 (р<0,05) и 1,25 раза (р>0,05). АС

и имунофан при их изолированном использовании сохраняли редукцию. АЗКЦ по сравнению с показателями в контроле соответственно в 1,44 и 1,39 раза (р<0,05). Комбинированное воздействие АС и имунофана полностью восстанавливало основные показатели клеточного иммунитета после острого отравления веществом BZ в дозе 1,0 ЛД50

Таким образом, после острого отравления веществом BZ в дозе 1,0 ЛД50 использование имунофана (10 мкг/кг ежедневно в течение 3 сут) в комбинации с аминостигмином (в дозе 0,1 мг/кг 2 раза в первые сутки) восстанавливало основные показатели НРО, гуморального и клеточного звена иммунитета.

1. Острая интоксикация веществом BZ в дозах 0,2; 0,5; 0,7 и 1,0 ЛД5о в условиях эксперимента на животных вызывает снижение неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты у животных при экспериментальной инфекции, редукцию основных гуморальных и клеточных иммунных реакций. Коррекция нарушений неспецифической резистентности организма и иммунного статуса при острой интоксикации веществом BZ достигается комбинированным применением антидота аминостигмина и иммуностимулятора имунофана.

2. Вещество BZ при остром действии вызывает прямо связанное с дозой увеличение летальности крыс от экспериментальной инфекции, вызванной Е. тоН, уменьшение ЛД50 Е. тоН и среднеэффективного времени жизни животных, а также аналогичные изменения данных параметров при использовании P.vulgaris после предварительной иммунизации, что свидетельствует о снижении неспецифической резистентности организма и специфических иммунных механизмов защиты.

3. При острой интоксикации веществом BZ в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 ЛДзо происходит дозозависимое снижение бактерицидной активности сыворотки крови, сывороточной активности лизоцима, тромбоцитарного катионного белка и фагоцитарной активности нейтрофилов в течение 1-5 сут.

4. Характер нарушения специфических иммунных механизмов защиты при воздействии возрастающих доз вещества BZ определяется

дозозависимым снижением числа колониеобразующих единиц в селезенке, фазовыми изменениями лимфоидного индекса тимуса и селезенки, содержания лимфоцитов в тимусе, селезенке, костном мозге и лимфоузлах в разные сроки интоксикации.

5. Острое действие вещества BZ вызывает прямо связанную с дозой редукцию антителообразования. Иммунотоксичность вещества BZ более выражена в индуктивной фазе антителогенеза при иммунизации Т-зависимым антигеном и в продуктивной фазе иммуногенеза при иммунизации Т-независимым антигеном. Под влиянием вещества BZ in vitro происходит прямо связанное с концентрацией

снижение кооперации Т- и В-лимфоцитов вследствие преимущественного нарушения функции Т-клеток.

6. Острое отравление веществом BZ приводит к дозозависимому снижению функции Т-клеток и активности естественных клеток-киллеров; реакции гиперчувствительности замедленного типа, антителозависимой. клеточной цитотоксичности преимущественно спленоцитов по сравнению с тимоцитами.Действие вещества BZ in vitro в прямой зависимости от концентрации снижает активность естественных клеток-киллеров.

7. Коррекция нарушений неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты при острой интоксикации веществом BZ в среднелетальной дозе достигается патогенетически обоснованным применением иммуностимулятора имунофана в комбинации с антидотом аминостигмином.

Практические рекомендации

1. В эксперименте на животных наиболее информативными тестами для оценки иммунотоксичности вещества BZ являются: определение содержания лимфоцитов в тимусе и селезенке, числа антителообразующих клеток в селезенке в различные фазы иммуногенеза, эффекта кооперации Ти В-лимфоцитов in vitro, реакции гиперчувствительности замедленного типа, активности естественных клеток-киллеров, антителозависимой клеточной цитотоксичности спленоцитов.

2. После острой интоксикации веществом Б/ возникает дозозависимая супрессия неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты, требующая применения медикаментозных средств для ее устранения с целью профилактики и лечения возможных инфекционных осложнений и заболеваний.

3. После острого отравления веществом Б/ для восстановления основных показателей неспецифической резистентности организма, гуморальных и клеточных иммунных реакций целесообразно применение алиностигмина в комбинации с имунофаном.

Основные публикации по теме диссертации

1. Сидельникова Н.М. Модуляция антидотами влияния опасных токсических веществ на неспецифическую резистентность организма / Н.М. Сидельникова, П.Ф. Забродский, Е.В. Понукалина: Научный отчет о НИР № 99. - Саратов, СВИ РХБЗ, 2003. - 95 с.

2. Сидельникова Н.М. Фармакологическая коррекция нарушений иммунного гомеостаза под влиянием вещества Би-зэд в постинтоксикационном периоде / Н.М. Сидельникова, Н.М. Трошкин, В.Г. Германчук: Научный отчет о НИР № 101.-Саратов, СВИ РХБЗ, 2004. -74 с.

3. Сидельникова Н.М. Влияние острой интоксикации ипритом и

веществом Би-зэд на неспецифическую резистентность организма / Н.М. Сидельникова, Н.М. Трошкин// Актуальные вопросы военной

медицины: Сб. науч. раб. под общ. ред. В.А. Решетникова. - Сарат. воен.-

мед. ин-т, Саратов, 2003. - С.119-121.

4.Сидельникова Н М. Изменение основных гуморальных и клеточных иммунных реакций при острой интоксикации серным ипритом и веществом Би-зэд / Н.М. Сидельникова, Н.М. Трошкин // Актуальные вопросы военной медицины: Сб. науч. раб. под общ. ред. В.А. Решетникова. - Сарат. воен.-

мед. ин-т, Саратов, 2003. - С.121-123.

5. Сидельникова Н.М. Иммунотоксические свойства вещества Б/ / Н.М. Сидельникова, П Ф. Забродский, Н.М. Трошкин // Медико-

биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты: Материалы Российской научной конференции. - СПб, 2004. - С. 55.

6. Сидельникова Н.М. Иммуномодулирующий эффект антидотов при нарушениях иммунного статуса различными ксенобиотиками / Н.М. Сидельникова, В.Г. Германчук, П.Ф. Забродский // Актуальные вопросы корабельной токсикологии,- радиологии, обитаемости кораблей и медицинского обеспечения личного состава ВМФ: Материалы юбилейной научно-практической конференции. - СПб, 2004. - С. 61.

7. Сидельникова Н.М. Изменение антиинфекционной неспецифической и иммунологической резистентности организма при-отравлении веществом Би-зэд / Н.М. Сидельникова, Н.М.Трошкин//Сб. науч. тр. СВИ РХБЗ. - Саратов, 2004.- Вып. №4. - С. 121.

8. Сидельникова Н.М. Влияние аминостигмина на изменение иммунотоксичности вещества Би-зэд / Н.М. Сидельникова, П.Ф. Забродский, Н.М. Трошкин // Сб. науч. тр. СВИ РХБЗ. - Саратов, 2004. -Вып. №4. -С.122.

9. Сидельникова Н.М. Оценка совместного действия аминостигмина и имунофана на основные параметры клеточного иммунитета при отравлении веществом Би-зэд / Н.М. Сидельникова, Н.М. Трошкин, С.М. Меркина//Сб. науч. тр. СВИ РХБЗ. - Саратов, 2004. - Вып. №4. - С.125.

10. Сиделъникова Н.М. Оценка неспецифических факторов защиты организма при интоксикации веществом Би-зэд / Н.М.Сидельникова, П.Ф. Забродский, Н.М. Трошкин // Сб. науч. тр. СВИ РХБЗ. - Саратов, 2004. -Вып.№4.-С147.

11. Сидельникова Н.М. Оценка влияния острой интоксикации веществом Би-зэд на Т-систему иммунитета / Н.М.Сидельникова, П.Ф.Забродский, Н.М.Трошкин//Сб.науч. тр. СВИ РХБЗ. - Саратов, 2004.-Вып.№4.-С.182-185.

Перечень сокращений

АЗКЦ АОК

- антителозависимая клеточная цитотоксичность

- антителообразующие клетки

АС - аминостигмин

БАСК - бактерицидная активность сыворотки крови

ГЗТ - гиперчувствительность замедленного типа

ЕКК - естественные клетки-киллеры

ЕЦ - естественная цитотоксичность

КОЕс - колониеобразующая единица селезенки

КМ - костный мозг

НРО - неспецифическая резистентность организма

РТМЛ - реакция торможения миграции лейкоцитов

СКК - стволовая кроветворная клетка

ТКБ - тромбоцитарный катионный белок

ЭБ - эритроциты барана

ЛД50 - средняя смертельная доза

^ - иммуноглобулин

Ейо - среднеэффективное время жизни

ТЫ, ТЬ2 - Т-лимфоциты- хелперы типа 1,2

Уьантиген - тимуснезависимый Уьантиген брюшнотифозной

(УьА^ вакцины

Лицензия ИД № 06268 от 14.11.01

Подписано в печать 16.06.04 Формат 60x84 1/16

Бум. тип. Усл.-печ.л. 1,0 Уч.-изд. л. 1,0

Тираж 100 экз. Заказ 280 Бесплатно

Саратовский государственный технический университет 410054, г. Саратов, ул. Политехническая, 77 Копипринтер СГТУ, 410054, г. Саратов, ул. Политехническая, 77

 
 

Оглавление диссертации Сидельникова, Наталия Михайловна :: 2004 :: Саратов

Перечень сокращений.

Введение.

Глава 1 Современные представления о нарушениях неспецифической резистентности организма и специфических иммунологических механизмов защиты при действии м-холиноблокаторов(обзор литературы).

1.1 Общая характеристика м-холиноблокаторов.

1.2 Токсикологическая характеристика вещества BZ.

1.3 Нарушения неспецифической резистентности организма и специфических иммунологических механизмов защиты при действии мхолиноблокаторов.

Глава 2 Материал и методы исследований.

2.1 Объекты исследования и применяемые препараты.

2.2 Исследование комплексного состояния неспецифической резистентности организма и специфических иммунологических механизмов защиты.

2.3 Исследование комплексного состояния неспецифической резистентности организма.

2.4 Бактерицидная активность сыворотки крови.

2.5 Сывороточная активность лизоцима.

2.6 Тромбоцитарный катионный белок сыворотки крови.

2.7 Комлементарная активность сыворотки крови.

2.8 Определение фагоцитарной активности нейтрофилов.

2.9 Исследование функционального состояния лимфоидных органов.

2.9.1 Оценка функции стволовых кроветворных клеток.

2.9.2 Оценка лимфоидного индекса тимуса и селезенки.

2.9.3 Определение содержания Т-лимфоцитов в тимусе и лимфоцитов в селезенке, лимфатических узлах и костном мозге.

2.10 Исследование гуморального звена иммунного ответа.

2.11 Оценка кооперации Т- и В - лимфоцитов in vitro.

2.12 Исследование клеточного звена иммунного ответа.

2.12.1 Оценка функции Т-лимфоцитов.

2.12.2 Исследование реакции гиперчувствительности замедленного типа

2.12.3 Исследование антителозависимой клеточной цитотоксичности.

2.12.4 Исследование естественной цитотоксичности.

2.13 Методы статистической обработки результатов исследований.

Глава 3 Влияние вещества BZ на комплексные показатели специфических иммунологических механизмов защиты и неспецифической резистентности организма.

3.1 Изучение комплексного состояния неспецифической резистентности организма и специфических иммунологических механизмов защиты.

3.2 Оценка комплексных показателей антиинфекционной неспецифической резистентности организма.

3.3 Влияние вещества BZ на обсемененность селезенки и циркулирующей крови.

3.4 Действие вещества BZ на бактерицидную активность сыворотки крови.

3.5 Сывороточная активность лизоцима при остром действии вещества

3.6 Влияние острого действия вещества BZ на активность тромбоцитарного катионного белка в сыворотке крови.

3.7 Комплементарная активность сыворотки крови при острой интоксикации веществом BZ.

3.8 Определение фагоцитарной активности нейтрофилов после острого отравления веществом BZ.

Глава 4 Острое действие вещества BZ на содержание лимфоцитов в органах системы иммунитета.

4.1 Влияние вещества BZ на изменение миграции колониеобразующих единиц в селезенку.

4.2 Определение лимфоидного индекса тимуса при остром действии вещества BZ.

4.3 Определение лимфоидного индекса селезенки при остром действии вещества BZ.

4.4 Определение числа Т-клеток в тимусе при остром действии вещества BZ.

4.5 Определение числа лимфоцитов в селезенке при остром действии вещества BZ.

4.6 Изучение влияния вещества BZ на содержание лимфоцитов в лимфатических узлах и костном мозге.

Глава 5 Влияние острого отравления веществом BZ на В-звено системы иммунитета.

5.1 Оценка влияния вещества BZ на Т-зависимое звено гуморального иммунного ответа.

5.1.1 Изучение воздействия вещества BZ на антителообразование к Т-зависимому антигену по титру антител в крови.

5.1.2 Определение острого действия вещества BZ на число антителообразующих клеток в селезенке.

5.2 Оценка влияния вещества BZ на Т-независимую гуморальную иммунную реакцию.

5.2.1 Изучение воздействия вещества BZ на антителопродукцию к Т-независимому антигену по титру антител в крови.

5.2.2 Определение острого действия вещества BZ на число антителообразующих клеток в селезенке к Т-независимому антигену.

5.2.3 Определение острого действия вещества BZ на кооперацию Т - и

В-лимфоцитов in vitro.

Глава 6 Влияние острого отравления веществом BZ на Т-звено системы иммунитета.

6.1 Оценка функции Т-лимфоцитов при остром действии вещества BZ.

6.2 Изучение реакции гиперчувствительности замедленного типа при остром действии вещества BZ.

6.3 Оценка антителозависимой клеточной цитотоксичности при остром действии вещества BZ.

6.4 Изучение активности естественных клеток-киллеров при остром действии вещества BZ.

6.5 Оценка действия вещества BZ на активность естественных клетоккиллеров in vitro.

Глава 7 Коррекция нарушений неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты при остром отравлении веществом BZ.

7.1 Обоснование применения различных иммуностимуляторов для коррекции нарушений неспецифической резистентности организма и иммунного гомеостаза после острого отравления веществом BZ.

7.2 Влияние аминостигмина и его комбинации с имунофаном на показатели неспецифической резистентности организма и системы иммунитета после острой интоксикации веществом BZ.

7.3 Действие аминостигмина, имунофана и их комбинации на основные показатели В-звена иммунитета при остром отравлении веществом BZ.

7.4 Оценка влияния аминостигмина, имунофана и их комбинации на основные параметры клеточного иммунитета при остром отравлении веществом BZ.

 
 

Введение диссертации по теме "Патологическая физиология", Сидельникова, Наталия Михайловна, автореферат

Актуальность темы. В современной медицинской науке проблемы комплексной оценки характера и механизмов нарушений неспецифической резистентности организма (НРО) и специфической иммунной защиты при остром токсическом действии опасных химических веществ (ОХВ) приобрели первостепенное значение в связи с необходимостью патогенетического обоснования и разработки научных принципов, средств и методов, с помощью которых удается проводить эффективную медикаментозную коррекцию постинтоксикационного иммунодефицитного состояния после интоксикации токсичными химикатами. Фундаментальными работами отечественных и зарубежных авторов создана обширная теоретическая база, основанная на экспериментальных и клинических исследованиях, раскрывающих патогенез формирования иммунодефицитных состояний при самых разнообразных патологических процессах, вызванных токсическим действием ксенобиотиков [Денисенко П.П., 1980; Петров Р.В. и соавт., 1981а; Саватеев Н.В., Куценко С.А., 1982, 1993; Ройт А., 1991; Хаитов P.M. и соавт., 1995; Забродский П.Ф., 1998, 2002; Забродский П.Ф. и соавт., 2003; Descotes J., 1986; Luster М. J. et al., 1987; Sullivan J. В., 1989].

Поэтому исследование изменений иммунного гомеостаза под влиянием м-холиноблокаторов является актуальной и важной научно-практической задачей патофизиологии и иммунотоксикологии. Атропиноподобный синтетический м-холиноблокатор - 3-хинуклидилбензилат (вещество BZ), является психотропным боевым отравляющим веществом (БОВ) и подлежит уничтожению согласно « Конвенции.». Однако не исключена вероятность применения данного высокоактивного психотомиметика и его аналогов рядом стран в качестве основы химического оружия. Возможно также использование вещества BZ для совершения террористических актов. К настоящему времени в результате целенаправленного научного поиска синтезированы и прошли всестороннюю военно-химическую оценку ряд аналогов З-хинуклидилбензилата, которые отличаются более выраженной специфической психотропной эффективностью и способностью проникать через кожные покровы [Сокольский Г.А. и соавт. 1983; Антонов Н.С., 1994; Rosenblatt D.H. et al., 1977; Wills J.H., 1982]. Кроме того, актуальность изучения З-хинуклидилбензилата обусловлена тем, что м-холиноблокаторы широко исследуются и используются в качестве медикаментозных средств для антидотного лечения при интоксикации фосфорорганическими соединениями (ФОС) и другими ядами [Голиков С.Н., 1968; Саватеев Н.В., Куценко С.А., 1982, 1993; Забродский П.Ф., 1998, 2002]. Не исключено также и использование м-холиноблокаторов (атропиноподобных препаратов) в качестве наркотических средств [Крылов С.С. и соавт., 1999].

Известно, что острые интоксикации м-холиноблокаторами относятся к наиболее распространенным лекарственным отравлениям [Лужников Е.А., Костомарова JI.Г., 1998, 2000]. Возможно чрезмерное использование м-холиноблокаторов при интоксикации ФОС легкой степени тяжести [Могут Г., 1984; Бадюгин И.С. и соавт., 1992; Маркова И.В. и соавт., 1998], а также их применение с суицидальными целями.

Исследованиями многих авторов доказано, что при остром токсическом действии на организм м-холиноблокаторов, в частности при интоксикации 3-хинуклидилбензилатом, возможны резко выраженные изменения гуморального иммунного ответа и клеточных иммунных реакций, что может приводить после интоксикации в дальнейшем к развитию инфекционных и онкологических заболеваний [Забродский П. Ф.,1993, 1995, 1998, 2002; Хаитов P.M. и соавт., 2000; Трошкин Н.М. и соавт., 2004; Ferluga J. et al., 1972; Loose L.D., 1986; Miller K., 1985; Tiefenbach В., Wichner S., 1985; Descotes J., 1986; Luster M. J. et al., 1987; Kimber I., 1996]. Изучение иммунотропных свойств вещества BZ позволит расширить существующие представления о влиянии большой группы м-холиноблокаторов на НРО и иммунный статус [Трошкин Н.М. и соавт., 2004]. В то же время комплексное состояние НРО и специфических иммунологических механизмов защиты после интоксикации веществом BZ и его аналогами практически не изучены и по этому поводу имеются лишь отдельные сообщения.

Недостаточно изученными остаются вопросы фармакологической коррекции нарушений иммунного гомеостаза в постинтоксикационном периоде под влиянием м-холиноблокаторов, в том числе и вещества BZ. Эта проблема имеет важное теоретическое и практическое значение и нуждается во всестороннем исследовании для целенаправленной разработки научных основ медикаментозной коррекции нарушений системы иммунитета с применением иммунокорректоров из большого арсенала известных сейчас веществ данного класса [Ширинский B.C., Жук Е.А., 1991; Хаитов Р. М. и соавт., 1995; Забродский П.Ф. и соавт., 2001].

Таким образом, исследование по изучению характера нарушений НРО и специфических иммунологических механизмов защиты при остром токсическом действии м-холиноблокаторов с целыо разработки способов фармакологической коррекции изменений иммунного гомеостаза в постинтоксикационном периоде является актуальным и важным как в теоретическом, так и в практическом отношении.

Цель исследования: изучить характер и механизмы нарушений неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты в условиях острой интоксикации отравляющим веществом BZ и разработать патогенетически обоснованные принципы медикаментозной коррекции сдвигов иммунного гомеостаза.

Задачи исследования:

1. Оценить комплексное состояние неспецифической резистентности организма и специфических иммунных механизмов защиты у животных при экспериментальной инфекции после острой интоксикации веществом BZ по величине летальности животных, среднелеталыюй дозы P. vulgaris и среднеэффективному времени жизни животных.

2. Выявить закономерности острого действия вещества BZ на состояние неспецифической резистентности организма в условиях экспериментальной инфекции по величине летальности крыс, среднелетальной дозы Е. coli и среднеэффективному времени жизни животных.

3. Исследовать характер и механизмы острого действия вещества BZ на факторы неспецифической резистентности организма (показатели бактерицидной активности сыворотки крови, сывороточной активности лизоцима, тромбоцитарного катионного белка, комплемента и фагоцитарной активности нейтрофилов).

4. Установить характер нарушений специфических иммунных механизмов защиты организма при воздействии возрастающих доз вещества BZ по ряду интегральных показателей оценки функционального состояния центральных и периферических органов иммунной системы.

5. Изучить влияние возрастающих доз вещества BZ на Т-зависимый гуморальный иммунный ответ в различные фазы антителогенеза (титр антител в крови, содержание антителообразующих клеток в селезенке ) и на кооперацию Т- и В-лимфоцитов.

6. Оценить состояние Т-независимого гуморального иммунного ответа в различные фазы антителопродукции по титру антител в крови и показателям содержания антителообразующих клеток в селезенке при остром отравлении веществом BZ.

7. Определить характер нарушений клеточного звена иммунного ответа при острой интоксикации веществом BZ по реакции торможения миграции лейкоцитов, формированию гиперчувствителыюсти замедленного типа, антителозависимой клеточной цитотоксичности, активности естественных клеток-киллеров.

8. Провести обоснование и разработать патогенетически обоснованную коррекцию нарушений неспецифической резистентности организма и основных гуморальных и клеточных иммунных реакций при остром отравлении веществом BZ с использованием антидота аминостигмина и иммуномодуляторов.

Научная новизна. В результате проведенного исследования впервые показано, что под влиянием вещества BZ в дозах 0,2; 0,5 и 0,7 ЛД50 происходит снижение комплексных показателей состояния неспецифической резистентности организма и специфических иммунологических механизмов защиты, которое проявляется дозозависимым увеличением летальности крыс от экспериментальной инфекции, а также уменьшением ЛД50 P.vulgaris и Е. coli и среднеэффективного времени жизни животных.

Экспериментально показано, что при острой интоксикации веществом BZ в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 ЛД5о происходит дозозависимое снижение бактерицидной активности сыворотки крови, сывороточной активности лизоцима, содержания тромбоцитарного катионного белка, фагоцитарной активности нейтрофилов.

Установлен характер нарушений специфических иммунных механизмов защиты организма при воздействии возрастающих доз вещества BZ, связанных с функциональным состоянием центральных и периферических органов иммунной системы. Показано, что вещество BZ вызывает дозозависимое снижение числа КОЕ в селезенке. Установлено снижение числа Т-лимфоцитов в тимусе в течение 1-2 сут в прямой зависимости от дозы вещества BZ. Количество лимфоцитов в селезенке через 1 сут после действия вещества BZ прямо пропорционально дозе уменьшается. Через 2 сут доза вещества BZ, составляющая 0,5 ЛД50, приводила к увеличению содержания лимфоцитов в селезенке крыс, а доза вещества BZ 1,0 ЛД50 вызывала противоположный сдвиг показателя. Вещество BZ через 1 сут дозозависимо повышает количество лимфоцитов в костном мозге и вызывает снижение содержания этих клеток в лимфоузлах, а через 2 сут реализуются противоположные эффекты.

Доказано, что острое действие вещества BZ вызывает прямо связанную с дозой (0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50) редукцию антителообразования. Иммунотоксический эффект вещества BZ более выражен в индуктивной фазе антителогенеза при иммунизации Т-зависимым антигеном и в продуктивной фазе иммуногенеза при иммунизации Т-независимым антигеном. Под влиянием вещества BZ in vitro происходит прямо связанное с концентрацией (105, 104 и 103 М) снижение кооперации Т - и В-лимфоцитов вследствие преимущественного нарушения функции Т-клеток.

Выявлено, что вещество BZ вызывает прямо связанное с дозой снижение функции Т-клеток и реакции гиперчувствительности замедленного типа, супрессию активности антителозависимой клеточной цитотоксичности преимущественно спленоцитов по сравнению тимоцитами. Острое отравление веществом BZ (0,2; 0,5 и 1,0 ЛДзо) в прямой зависимости от дозы уменьшало активность естественных клеток-киллеров спленоцитов крыс до 6 сут. Действие вещества BZ in vitro в прямой зависимости от концентрации

10 , 10 и 10 М) вызывало редукцию активности естественных клеток-киллеров.

Впервые экспериментально показано, что коррекция нарушений показателей неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты при острой интоксикации веществом BZ (1,0 ЛД50) достигается комбинированным применением иммуностимулятора имунофана и антидота аминостигмина.

Практическая значимость работы заключается в экспериментальном определении при острой интоксикации веществом BZ показателей неспецифической резистентности организма, параметров системы гуморального и клеточного иммунитета, свидетельствующих о развитии постинтоксикационного иммунодефицитного состояния, которое требует применения медикаментозных средств для его фармакологической коррекции. Обосновано и экспериментально доказано, что при остром отравлении веществом BZ восстановление показателей неспецифической резистентности организма и системы иммунитета достигается применением иммуностимулятора имунофана (ежедневная доза 10 мкг/кг в течение 3 сут) в комбинации с антидотом аминостигмином (в первые сутки в дозе 0,1 мг/кг 2 раза).

Положения, выносимые на защиту

1. Острая интоксикация веществом BZ в условиях эксперимента на животных в дозах 0,2 - 1,0 ЛД50 вызывает прямо связанную с дозой супрессию комплексных показателей неспецифической резистентности организма и специфических иммунологических механизмов защиты, основных параметров гуморальных и клеточных иммунных реакций.

2. Острое действие вещества BZ вызывает дозозависимую редукцию антителообразования. Иммунотоксический эффект вещества BZ более выражен в индуктивной фазе антителогенеза при иммунизации Т-зависимым антигеном и в продуктивной фазе иммуногенеза при иммунизации Т-независимым антигеном.

3. Механизмы снижения специфической иммунной защиты при действии вещества BZ обусловлены снижением миграции колониеобразующих единиц в селезенку; изменением содержания лимфоцитов в органах системы иммунитета в зависимости от воздействующей дозы и времени с момента интоксикации; нарушением кооперации Т - ,и В-лимфоцитов, приводящим к редукции антителообразования вследствие преимущественного поражения Т-лимфоцитов; супрессией клеточных иммунных реакций. *

4. Коррекция нарушений неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты после острой интоксикации веществом BZ достигается комбинированным применением аминостигмина и иммуностимулятора имунофана.

Апробация работы, публикации. Результаты исследований были доложены на заседаниях секции прикладных проблем безопасности хранения и уничтожения химического оружия Поволжского отделения АВН (март 2002 г., февраль 2003 г., апрель 2004 г.), на Российской научной конференции «Медико-биологические проблемы противолучевой и противохимической защиты» (СПб, май 2004 г.), юбилейной научно-практической конференции «Актуальные вопросы корабельной токсикологии, радиологии, обитаемости кораблей и медицинского обеспечения личного состава ВМФ» (СПб, май 2004 г.), научно-практических конференциях Саратовского военного института радиационной, химической и биологической защиты (2002, 2003, 2004 гг.), совместном заседании кафедры нормальной физиологии, кафедры патологической физиологии Саратовского государственного медицинского университета, кафедры технологий уничтожения химического оружия и токсичных веществ Саратовского военного института радиационной, химической и биологической защиты, кафедры токсикологии, радиологии и медицинской защиты Саратовского военно-медицинского института (май 2004 г.).

По теме диссертации опубликовано 11 работ.

Внедрение результатов исследования. Результаты исследований и практические рекомендации внедрены в учебный процесс на кафедре технологий уничтожения химического оружия и токсичных веществ Саратовского военного института радиационной, химической и биологической защиты и на кафедре токсикологии, радиологии и медицинской защиты Саратовского военно-медицинского института. Материалы исследований широко используются при проведении лекций, практических и лабораторных занятий у курсантов и слушателей курсов повышения квалификации, первичной специализации и усовершенствования врачей. По материалам диссертации издано учебное пособие «Основы токсикологии».

Объем и структура работы. Диссертационная работа изложена на 168 страницах машинописного текста (включая таблицы и список литературы), состоит из обзора литературы (глава 1); материалов и методов исследований (глава 2); собственных экспериментальных исследований (главы 3-7); заключения, выводов и практических рекомендаций. Работа иллюстрирована 33 таблицами. Список литературы включает 241 наименование, из которых отечественных - 166 и зарубежных - 75.

 
 

Заключение диссертационного исследования на тему "Характер и механизмы нарушений неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты при остром отравлении веществом BZ"

1. Острая интоксикация веществом BZ в дозах 0,2; 0,5; 0,7 и 1,0 ЛД50 в условиях эксперимента на животных вызывает снижение неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты у животных при экспериментальной инфекции, редукцию основных гуморальных и клеточных иммунных реакций. Коррекция нарушений неспецифической резистентности организма и иммунного статуса при острой интоксикации веществом BZ достигается комбинированным применением антидота аминостигмина и иммуностимулятора имунофана.

2. Вещество BZ при остром действии вызывает прямо связанное с дозой увеличение летальности крыс от экспериментальной инфекции, вызванной Е. coli, уменьшение ЛД50 Е. coli и среднеэффективного времени жизни животных, а также аналогичные изменения данных параметров при использовании P.vulgaris после предварительной иммунизации, что свидетельствует о снижении неспецифической резистентности организма и специфических иммунных механизмов защиты.

3. При острой интоксикации веществом BZ в дозах 0,2; 0,5 и 1,0 ЛД50 происходит дозозависимое снижение бактерицидной активности сыворотки крови, сывороточной активности лизоцима, тромбоцитарного катионного белка и фагоцитарной активности нейтрофилов в течение 1-5 сут.

4. Характер нарушения специфических иммунных механизмов защиты при воздействии возрастающих доз вещества BZ определяется дозозависимым снижением числа колониеобразующих единиц в селезенке, фазовыми изменениями лимфоидного индекса тимуса и селезенки, содержания лимфоцитов в тимусе, селезенке, костном мозге и лимфоузлах в разные сроки интоксикации.

5. Острое действие вещества BZ вызывает прямо связанную с дозой редукцию антителообразования. Иммунотоксичность вещества BZ более выражена в индуктивной фазе антителогенеза при иммунизации Тзависимым антигеном и в продуктивной фазе иммуногенеза при иммунизации Т-независимым антигеном. Под влиянием вещества BZ in vitro происходит прямо связанное с концентрацией (105, 104 и 103 М) снижение кооперации Т- и В-лимфоцитов вследствие преимущественного нарушения функции Т-клеток.

6. Острое отравление веществом BZ приводит к дозозависимому снижению функции Т-клеток и активности естественных клеток-киллеров; реакции гиперчувствительности замедленного типа, антителозависимой клеточной цитотоксичности преимущественно спленоцитов по сравнению тимоцитами. Действие вещества BZ in vitro в прямой зависимости от концентрации (105, 104и 103М) снижает активность естественных клеток-киллеров.

7. Коррекция нарушений неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты при острой интоксикации веществом BZ в среднелетальной дозе достигается патогенетически обоснованным применением иммуностимулятора имунофана в комбинации с антидотом аминостигмином.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. В эксперименте на животных наиболее информативными тестами для оценки иммунотоксичности вещества BZ являются: определение содержания лимфоцитов в тимусе и селезенке, числа антителообразующих клеток в селезенке в различные фазы иммуногенеза, эффекта кооперации Т- и В-лимфоцитов in vitro, реакции гиперчувствительности замедленного типа, активности естественных клеток-киллеров, антителозависимой клеточной цитотоксичности спленоцитов.

2. После острой интоксикации веществом BZ возникает дозозависимая супрессия неспецифической резистентности организма и специфической иммунной защиты, требующая применения медикаментозных средств для ее устранения с целью профилактики и лечения возможных инфекционных осложнений и заболеваний.

3. После острого отравления веществом BZ для восстановления основных показателей неспецифической резистентности организма, гуморальных и клеточных иммунных реакций целесообразно применение аминостигмина в комбинации с имунофаном.

 
 

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2004 года, Сидельникова, Наталия Михайловна

1. Адо А.Д. Некоторые вопросы нервной регуляции иммунных и аллергических реакций об отношении холиновых и антигенсвязывающих рецепторов / А.Д. Адо // Эксперим. И клин, фармакология.-1995.- № 3.-С. 43-45.

2. Адо А.Д. О влиянии некоторых соединений холина на розеткообразование лимфоцитов у мышей / А.Д. Адо, Т.А. Алексеева // Бюл. эксперим. биол. и мед.-1983.- Т. 46.- №7. С. 75-77.

3. Адо А.Д. О взаимодействии холиновых и иммунных рецепторов В-лимфоцитов человека / А.Д. Адо, Т.А. Алексеева, Т.А. Авдеева // Иммунология. 1985а.- №4. - С. 57-59.

4. Адо А.Д. О взаимодействии иммунных и медиаторных рецепторов лимфоцитов мышей / А.Д. Адо, Т.А. Алексеева, С.А. Кравченко // Бюл. эксперим. биол. и мед.-1985б.-Т.99. №5. - С. 513-515.

5. Адо А.Д. Ацетилхолининдуцированная подвижность лимфоцитов интактных и сенсибилизированных мышей / А.Д. Адо, М.М. Гольдштейн, В.И. Донцов // Бюл. эксперим. биологии и медицины.-1983. № 4. - С. 6667.

6. Адо А.Д. Влияние холино- и адреномиметичеких веществ на пролиферацию В-лимфоцитов мыши во время первичного иммунного ответа на белковый антиген / А.Д. Адо, М.М. Гольдштейн, В.И. Донцов // Бюл. эксперим. биол. и мед.-1985.- Т.100. № 5.-С. 587-588.

7. Адо А.Д. Индукция подвижности В-лимфоцитов мыши ацетилхолином и веществами, увеличивающими уровень цГМФ / А.Д. Адо, В.И. Донцов // Бюл. эксперим. биол. и мед.-1984.-Т.47.- №2.-С.177-178.

8. Адо А.Д. Регуляция клеточного цикла В-лимфоцитов мыши веществами, увеличивающими уровень внутриклеточного цАМФ и цГМФ / А.Д. Адо, В.И. Донцов, М.М. Гольдштейн // Бюл. эксперим. биол. и мед.-1985в.- Т.99. №4.- С. 455-458.

9. Адо А.Д. М-холинорецепторы В-лимфоцитов мыши в процессе иммунного ответа / А.Д. Адо, М.М. Гольдштейн, С.А. Кравченко // Бюл. эксперим. биол. и мед.-1986.- Т.101. № 5,- С. 587-588.

10. Адо А.Д. Влияние антиглобулиновой сыворотки на экспрессию М-холинорецепторов лимфоцитов селезенки интактных и иммунизированных крыс / А.Д. Адо, М.М. Гольдштейн, С.А. Кравченко // Бюл. эксперим. биол. и мед.- 1987. Т. 104. - №9. - С. 325-327.

11. Александров В.Н. Гуморальный иммунный ответ после травмы различной тяжести / В.Н. Александров // Пат. физиол. и эксперим. терапия. -1983.-№4.-С. 70-72.

12. Александров В.Н. Отравляющие вещества: Учебное пособие / В.Н. Александров, В.И. Емельянов. 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Военное издательство, 1990. - 271 с.

13. Аничков С.В. Нейрофармакология / С.В. Аничков. JL: Медицина, 1982.-384 с.

14. Аничков С.В. Учебник по фармакологии / С.В. Аничков. JI.: Медицина, 1968. - 295 с.

15. Антонов Н.С. Химическое оружие на рубеже двух столетий / Н.С. Антонов. М.: Прогресс, 1994. - 174 с.

16. Арион В.Я. Иммунологически активные факторы тимуса / В.Я. Арион // Медиаторы иммунной системы: Сер. Иммунология. Т.9. - М.: ВИНИТИ, 1981.- С. 232.

17. Арион В.Я. Принципы иммунокоррегирующей терапии препаратом тимуса Т-активином / В.Я. Арион, Е.Ф. Иванушкин // Хирургия,- 1984.-№11.-С. 44-48.

18. Арион В.Я. Принципы иммунокоррегирующей терапии препаратом тимуса Т-активином: А. с. 1673122 СССР, МКИ 5 А 61 К 35/26. -Красноярский мед. ин-т. № 4452382/12 / В.Я. Арион, Е.Ф. Иванушкин // Заявл. 1988.-31 мая. - Опубл. 1991. - 30 авг. - Бюл. №32.

19. Арион В.Я. Изменения некоторых иммунологических и биохимических параметров Т-активина у безмикробных животных / В.Я. Арион, Ю.В. Караулов, Ю.И. Хроменков // Бюл. эксперим. биол. и мед. -1987. Т. 104. - №9. - С. 332-334.

20. Бадюгин И.С. Военная токсикология, радиология и защита от оружия массового поражения / И.С. Бадюгин, П.Ф. Забродский, В.П. Поляруш. М.: Военное издательство, 1992. - С. 132-150.

21. Базарный В.В. Действие некоторых иммуномодуляторов на гемопоэз / В.В. Базарный, А.П. Ястребов // Бюл. эксперим. биол. и мед. -1993. Т.115. - №2. - С. 53-54.

22. Барышников И.И. Влияние холинергических препаратов на миграционную активность лейкоцитов / И.И. Барышников, О.И. Смирнова // Фармакол. итоксикол. 1981. -№1. - С. 85-87.

23. Беленький M.J1. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта / M.JT. Беленький. 2-е изд. - JI.: Медицина, 1963. - 235 с.

24. Беликов В.Г. Коррекция тимогеном нарушений физиологических механизмов регуляции иммуногенеза при остром отравлении токсичнымихимическими веществами: Дисс. . канд. мед. наук / В.Г. Беликов. -Саратов, СГМУ, 2001.- 149 с.

25. Большаков И.Н. Влияние Т-активина на антителообразующие клетки селезенки / И.Н. Большаков, Л.В. Хороших, В.Я. Арион // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1991. - №6. - С. 644-646.

26. Брюхин Г.В. Антителообразующая способность клеток селезенки потомства крыс с хроническими поражениями печени / Г.В. Брюхин, Г.И. Михайлова // Физиол. журн. Киев. - 1989. - Т. 35. - №2. - С. 97-99.

27. Бухарин О.В. Лизоцим и его роль в биологии и медицине / О.В. Бухарин, Н.В. Васильев. Томск, 1974. - 209 с.

28. Бухарин О.В. Система р-лизина и его роль в клинической и экспериментальной медицине / О.В. Бухарин, Н.В. Васильев. Томск, 1977.- 166 с.

29. Бухарин О.В. Иммунологические сдвиги у экспериментальных животных при воздействии комплекса химических веществ / О.В. Бухарин, Н.П. Сетко, Г.Н. Желудева // Гигиена труда. 1985. - №3. - С. 45-46.

30. Бухарин О.В. Способность микроорганизмов к инактивации бактерицидного действия тромбоцитарного катионного белка (Р-лизина) / О.В. Бухарин, К.Г. Сулейманов, О.Л. Чернова // Бюл. эксперим. биол. и мед.- 1998.-№7.-С. 66-67.

31. Фармакология (общая, частная и основы клинической) / Под ред. В.М. Виноградова. Л.: Изд-во ВМА, 1986. - 515 с.

32. Гембицкий Е.В. Оценка иммунного статуса организма в лечебных учреждениях Советской Армии и Военно-Морского Флота: Метод, пособие / Е.В. Гембицкий, Л.А. Кожемякин, A.M. Королюк. М.: Изд-во ЦВМУ МО СССР, 1987.-С. 24-25.

33. Генес B.C. О едином математическом подходе к выявлению хронического действия малых концентраций промышленных ядов / B.C. Генес, Л.М. Шмутер, З.И. Буркина-Вовк // Гигиена труда. 1981. - №1.-С. 30-31.

34. Германчук В.Г. Нарушения регуляции физиологических механизмов иммуногенеза при остром отравлении нитрилами: Дисс. . канд. Мед. наук / В.Г. Германчук. Саратов, СВИ РХБЗ, 2000. - 121 с.

35. Глебов Р.Н. Функциональная биохимия синапсов / Р.Н. Глебов, Г.Н. Крыжановский. М.: Медицина, 1978. - 326 с.

36. Голиков С.Н. Общие механизмы токсического действия / С.Н. Голиков, И.В. Саноцкий, Л.А. Тиунов. М.: Медицина, 1986. - 280 с.

37. Гольдберг Е.Д. Состояние лимфоидной ткани при введении рубомицина С / Е.Д. Гольдберг, И.Б. Штернберг, Т.Н. Михайлова // Пат. Физиол. и эксперим. Терапия. 1972. - №2. - С. 67-68.

38. Гонтова И.А. Механизмы влияния ацетилхолина на интенсивность гуморального иммунного ответа / И.А. Гонтова, Н.Ю. Громыхина, В.А Козлов // Иммунология. 1989. - №4. - С. 52-55.

39. Горизонтов П.Д. Система крови как основа резистентности и адаптации организма / П.Д. Горизонтов // Физиол. журн. — Киев,- 1981а. — Т.27.-ЖЗ.- С. 317-321.

40. Горизонтов П.Д. Стресс. Система крови в механизме гомеостаза. Стресс и болезни / П.Д. Горизонтов. -М.: Медицина, 19816. С. 538-573.

41. Гордиенко С.М. Приемлемый для клинической практики метод оценки активности естественных антителозависимых киллерных клеток / С.М. Гордиенко // Лаб. Дело. 1983. - №9. - С. 45-48.

42. Гордиенко С. М. Нерадиометрические методы оценки естественной цитотоксичности на эритроцитарные клетки-мишени / С.М. Гордиенко // Иммунология. 1984. - №1. - С. 31-36.

43. Гублер Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов / Е.В. Гублер. Л.: Медицина, 1978. - 296 с.

44. Гущин Г.В. Участие холинергических механизмов в регуляции иммунологических реакций иммунитета / Г.В. Гущин, Э.К. Шхинек // Бюл. Эксперим. Биол. И мед. 1979 .- №6. - С. 635-639.

45. Гюллинг Э.В. Модуляция реактивности базофилов низкомолекулярными тимическими препаратами / Э.В. Гюллинг, Т.Ю. Гоц, В.А. Гремяков//Докл. АН УССР. 1991. -№6.-С. 174-175.

46. Денисенко П.П. Роль холинореактивных систем в регуляторных процессах / П.П. Денисенко. М.: Медицина, 1980. - 296 с.

47. Денисенко П.П. Взаимное влияние нервных и иммунных процессов / П.П. Денисенко, Р.П.Чередниченко // Фармакологическая регуляция жизнедеятельности через холинергические системы: Тез. докл. конф. — Л.: Ленинград, сан.-гиг. мед. ин-т, 1970. С. 25.

48. Денисенко П.П. Влияние синаптотропных препаратов на специфический и неспецифический гуморальный иммунитет / П.П. Денисенко, Р.П. Чередниченко // Фармак. и токсик. 1974. - №1. - С. 66.

49. Денисенко П.П. Состояние холино- и адренергических структур, циклические нуклеотиды и интенсивность иммунных реакций / П.П.

50. Денисенко, Р.П. Чередниченко // Тез. докл. всесоюз. симпоз.: Физиология иммунного гомеостаза. Ростов-на-Дону, 1977. - С. 60-61.

51. Диксон М. Ферменты / М. Диксон, Э. Уэбб. Пер. с англ. М.: Мир, 1982.-806 с.

52. Долго-Сабуров В.Б. Молекулярные механизмы функционирования мускариновых холинорецепторов / В.Б Долго-Сабуров, Ю.А Шорохов // Химиотерапевтические средства: Сер. фармакология. ВИНИТИ, 1989. -Т.19. - С. 156.

53. Дешевой Ю.Б. Ранняя реакция кроветворных органов на стресс-воздействие в зависимости от состояния периферических М-холинорецептивных систем / Ю.Б. Дешевой // Пат. физиол. и эксперим. терапия. 1982. - №3. - С. 25-27.

54. Дешевой Ю.Б. Влияние препаратов, действующих преимущественно в области периферических М-холинореактивных систем на эозинофилы костного мозга / Ю.Б. Дешевой, П.Д. Горизонтов // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1982. - Т.94. - №5. - С. 61-63.

55. Дешевой Ю.Б. Реакция эозинофилов костного мозга у интактных и адреналэктомированных крыс на введение препаратов, действующих преимущественно в области периферических М-холинорецепторов / Ю.Б. Дешевой // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1984. - №10. - С. 51.

56. Дешевой Ю.Б. Влияние ацетилхолина на миграцию зрелых эозинофилов из костного мозга в циркулирующую кровь / Ю.Б. Дешевой // Пат. физиол. и эксперим. терапия. 1985. - №5. - С. 48-50.

57. Долгушин И.И. Иммунология травмы / И.И. Долгушин, Л.Я. Эберт, Р.И. Лифшиц. Свердловск: Изд-во Урал, ун-та, 1989. - 188 с.

58. Жук Е.А. Тимоген в лечении сахарного диабета I типа / Е.А. Жук, В.А. Галенюк // Тер. архив. 1996. - Т.68. - №10. - С. 12-14.

59. Евсеев В. А. Стресс в механизмах развития вторичных иммунодефицитных состояний / В. А. Евсеев, Е.В. Магаева // Вестн. АМН СССР. 1985.-№8.-С. 18-23.

60. Ершов Ф.И. Иммуномодуляторы новое поколение противовирусных средств / Ф.И. Ершов // Эксперим. и клин, фармакол.-1995.-Т.58.-№2.-С. 74-78.

61. Забродский П. Ф. Влияние армина на факторы неспецифической резистентности организма и первичный гуморальный ответ / П. Ф. Забродский // Фармак. и токсик. 1987. - Т.49. - №2. - С. 57-60.

62. Забродский П. Ф. Механизмы иммунотропных эффектов фосфорорганических соединений / П. Ф. Забродский // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1993. - Т.116. - №8. - С. 181-183.

63. Забродский П.Ф. Влияние антидотных препаратов на иммунные реакции при острой интоксикации диметилдихлорвинилфосфатом / П. Ф. Забродский // Эксперим. и клин, фармак. 1995. - №2. - С. 49-51.

64. Забродский П.Ф. Изменение антиинфекционной неспецифической резистентности организма под влиянием холинергической стимуляции / П. Ф. Забродский //Бюл. эксперим. биол. и мед. 1995. - №8. - С. 164-167.

65. Забродский П. Ф. Влияние тимогена на постинтоксикационное иммунодефицитное состояние, вызванное острым отравлением ацетонитрилом / П. Ф. Забродский // Эксперим. и клин, фармак. 1999.-Т.62. -№3. - С. 48-49.

66. Забродский П. Ф. Влияние ксенобиотиков на иммунный гомеостаз / П.Ф.Забродский // Общая токсикология / Под ред. Б.А. Курляндского, В.А. Филова. М.: Медицина, 2002. - С. 352-384.

67. Забродский П.Ф. Антихолинэстеразный механизм как фактор иммунотоксичности различных химических соединений / П.Ф. Забродский // Бюл. эксперим. биол. и мед. 2003. - Т. 136. - №8. - С. 202-204.

68. Забродский П. Ф. Изменение неспецифической и иммунологической резистентности организма при остром отравлении дихлорэтаном / П.Ф. Забродский, В.Ф. Киричук, А.В. Грызунов // Бюл. эксперим. биол. и мед. -1997.-Т.123.-№1.-С. 51-53.

69. Забродский П. Ф. Иммунотропные свойства ядов и лекарственных средств / П. Ф. Забродский. Саратов: Изд-во СГМУ, 1998. -213 с.

70. Забродский П.Ф. Фармакологическая коррекция постинтоксикационных иммунодефицитных состояний / П.Ф. Забродский, В.Ф. Киричук // Докл. АВН. 1999. - №2. - С. 45-54.

71. Забродский П.Ф. Влияние холинергической стимуляции на формирование гиперчувствительности замедленного типа / П.Ф. Забродский, А.К. Мышкина // Иммунология. 1989. - №6. - С. 88.

72. Влияние средств медикаментозной защиты на иммунотоксичность химических ксенобиотиков: Научный отчет о НИР №99 / П.Ф. Забродский, Н.М. Сидельникова, Е.В Понукалина и др. Саратов, СВИРХБЗ, 2003. -95 с.

73. Земсков В.М. Неспецифические иммуностимуляторы / В.М. Земсков // Усп. соврем, биол. 1991. - Т. 111. - №5. - С. 707-721.

74. Зимин Ю. И. Эффект кооперации в реакции зависимой от антител клеточной цитотоксичности / Ю.И. Зимин, В.Ф. Ляхов // Иммунология.-1985. -№1.- С. 27-30.

75. Измайлова Ф. А. Упрощенный метод химического исследования дегидрогеназ с применением П-нитротетразолия фиолетового (методика Р.П. Нарциссова) / Ф.А. Измайлова // Здравоохр. Таджикистана. 1985. -№1. - С. 93.

76. Измеров Н. Ф. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии / Н.Ф. Измеров, И.В. Саноцкий, К.К. Сидоров. -М.: Медицина, 1977. 239 с.

77. Иванова А. С. Характер вовлечения эндокринной системы в стресс -ответе на отравления нейротропными средствами / А.С. Иванова // Токсик. вестник. 1998. - №4. - С. 16-19.

78. Калинкович А.Г. Влияние веществ, увеличивающих внутриклеточное содержание цГМФ, на функциональную активность В-клеток у мышей / А.Г. Калинкович, Л.С. Борисова, С.М. Инжеваткина // Иммунология. 1988. - №4. - С. 33-36.

79. Конвенция о запрещении разработки, производства, накопления и применения химического оружия и его уничтожении // Междунар. конф. по подписанию Конвенции. Париж, 1993. - 124 с.

80. Корнева Е.А. Нарушение нейрогуморальной регуляции функций иммунной систем / Е.А. Корнева // Вест. АМН СССР. 1990. - №11. - С. 36.

81. Кузнецов С.Г. Синтетические атропиноподобные вещества / С.Г. Кузнецов, С.Н. Голиков. Л.: Медгиз, 1962. - 314 с.

82. Кузник Б.И. Иммуногенез, гомеоетаз и неспецифическая резистентность организма / Б.И. Кузник, Н.В. Васильев, Н.Н. Цыбиков.- М.: Медицина, 1989.-256 с.

83. Кульберг А.Я. Регуляция иммунного ответа / А.Я. Кульберг. М., 1986.-224 с.

84. Клиническая токсикология лекарственных средств. Холинотропные препараты / С.С. Крылов, Г.А. Ливанов, А.П. Петров и др. СПб. - Изд-во «Лань», 1999. - 160 с.

85. Лазарева Д. Н. Стимуляторы иммунитета / Д.Н. Лазарева, Е. К. Алехин. М.: Медицина, 1985. - 256 с.

86. Лакин Г. Ф. Биометрия / Г.Ф. Лакин. М.: Высш. шк., 1980. - 293 с.

87. Ледванов М.Ю. Введение в клиническую иммунологию / М.Ю. Ледванов, В.Ф. Киричук. -М.: Медицина, 1996. 141 с.

88. Лошадкин Н.А. Военная токсикология и вопросы медицинской защиты от химического оружия / Н.А. Лошадкин, Ю.М. Полумисков. М.: ВАХЗ, 1985. - 188 с.

89. Лоуренс Д.Р. Клиническая фармакология / Д.Р. Лоуренс, П.Н. Беннитт. Пер. с англ. в 2 т. М.: Медицина, 1991. - Т.2. - 704 с.

90. Лужников Е.А. Клиническая токсикология / Е.А. Лужников. М.: Медицина, 1982.-368 с.

91. Лужников Е.А. Острые отравления / Е.А. Лужников, Л.Г. Костомарова. М.: Медицина, 1989. - 432 с.

92. Лужников Е.А. Острые отравления / е.А. Лужников, Л.Г. Костомарова. М.: Медицина, 2000. - 434 с.

93. Машковский М.Д. Лекарственные средства / М.Д. Машковский. 12-е изд., перераб. и доп. В 2 т. М.: Медицина, 1993. - 736 с. - 688 с.

94. Маянский Д.Н. Система фагоцитов: методические проблемы / Д.Н. Маянский // Пат. физиол. и эксперим. тер. 1986. - Вып. 2.- С. 83-86.

95. Маркова И.В. Клиническая токсикология детей и подростков / И.В. Маркова, В.В. Афанасьева, Э.К. Цыбулькин. СПб.: Интермедика, 1998. -304 с.

96. Михельсон М.Я. Ацетилхолин / М.Я. Михельсон, Э.В. Зеймаль. -Л.: Наука, 1970.-С. 28-41.

97. Молотков А.О. Нарушения физиологических механизмов регуляции системы иммунитета при остром отравлении фосфорорганическим соединением карбофосом: Автореф. дис. . канд. мед. наук / А.О. Молотков. Саратов, СГМУ, 2002. - 24 с.

98. Морозов В.Г. Характеристика и изучение механизма действия фактора тимуса (тимарина) / В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон // Докл. АН СССР. 1978. - Т.240. - №4. - С. 339-346.

99. Морозов В.Г. Новый класс биологических регуляторов многоклеточных систем цитомедины / В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон // Усп. соврем, биол. - 1983. - Т.96. - №3. - С. 1004-1007.

100. Невидимова Т.И. Психотропные эффекты тимогена / Т.И. Невидимова // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1995. - Т.119. - №2. - С. 199.

101. Новикова Л.В. Иммунологические методы исследования / Л.В. Новикова, К.М. Лебедева, Э.М. Яковлева. Саранск, 1981. - 92 с.

102. Осипов С.Г. Биологические функции системы комплемента / С.Г. Осипов, В.Н. Титов // Иммунология. 1984. - №6. - С. 82-83.

103. Осипова Л.О. Исследование влияния иммуномодулятора тимогена на функцию «активных» розеткообразующих лимфоцитов in vitro у больных туберкулезом легких / Л.О. Осипова // Матер. 18 науч-практич. конф. учен, и спец. КГИУВ. Киев, 1990. - С. 3-4.

104. Могуш Г. Острые отравления / Г. Могуш. Пер. с рум. Бухарест: Медицинское издательство, 1984. -С. 440-464.

105. Петров Р. В. Иммунология / Р.В. Петров. М.: Медицина, 1987.416 с.

106. Петров Р.В. Синтетические иммуномодуляторы / Р.В. Петров. М., 1991.- 199 с.

107. Петров Р.В. Миграция стволовых клеток из экранированного костного мозга у неравномерно облученных мышей / Р.В. Петров, P.M. Хаитов // Радиология. -1972. №1. - С. 69-76.

108. Петров Р.В. Контроль и регуляция иммунного ответа / Р.В. Петров, P.M. Хаитов, В.М. Манько. М.: Медицина, 1981а. - 312 с.

109. Петров Р.В. Подавление эндоколонизации селезенки у сублетально облученных мышей при трансплантации аллогенных лимфоидных клеток / Р.В. Петров, P.M. Хаитов, JI.C. Сеславина // Радиология. 1970. - №4. -С. 532-535.

110. Петров Р.В. Иммунологические механизмы клеточного гомеостаза / Р.В. Петров, P.M. Хаитов // Гомеостаз. М.: Медицина, 19816. - С. 312-365.

111. Плецитый К.Д. Витамин А стимулирует иммунный ответ к тимусзависимым антигенам и повышает активность естественных киллеров / К.Д. Плецитый, Г.Г. Сухих // Докл. АН СССР. 1984. -Т.278. - №4. -С. 1017-1019.

112. Плецитый К.Д. Экспериментальный анализ иммуностимулирующих свойств витамина А / К.Д. Плецитый, Г.Г. Сухих // Бюл. экспер. биол. и медицины. 1985. - Т. 100. - №11. - С. 600-602.

113. Попова Е.А. Иммунофармакотерапия имунофаном в лечении больных с гнойными менингитами / Е.А. Попова, И.И. Лисун, А.Д. Алимов // Internatinal J. on Immunorehabilitation. Физиология и патология иммунной системы. 2003. - Т.5. - №2. - С.252.

114. Раевский К.С. Медиаторные аминокислоты: нейрофармакологические и нейрохимические аспекты / К.С. Раевский, В.П. Георгиев. М.: Медицина, 1986. - 240 с.

115. Ремезов А.И. Методы определения естественной (неспецифической) резистентности организма / А.И. Ремезов, Г.А. Башмаков. Л., 1976. - 65 с.

116. Ройт А. Основы иммунологии / А. Ройт. Пер. с англ. М.: Мир, 1991.-327 с.

117. Ройт А. Иммунология / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл. Пер. с англ. М.: Мир, 2000. - 582 с.

118. Рыболовлев Ю.А. Прогнозирование действия ксенобиотиков на человека / Ю.А. Рыболовлев // Фармак. и токсик. 1982. - №1. - С. 110-114.

119. Саватеев Н.В. Характеристика токсического действия веществ, представляющих опасность при разрушении промышленных объектов / Н.В. Саватеев, С.А. Куценко. Л.: Изд-во ВМА, 1982. - 44 с.

120. Саватеев Н.В. Ядовитые вещества, выделяющиеся при разрушении промышленных объектов, и мероприятия по оказанию медицинской помощи пострадавшим / Н.В. Саватеев, С.А. Куценко // Воен.-мед. журн. -1993.-№6. -С. 36-40.

121. Садритдинов Ф.С. Фармакология растительных алкалоидов и их применение в медицине / Ф.С. Садритдинов, А.Г. Корму ков. Ташкент.: Медицина, 1980.-218 с.

122. Саноцкий И.В. Критерии вредности в гигиене и токсикологии при оценке химических соединений / И.В. Саноцкий, И.П. Уланова. М.: Медицина, 1975.-С. 5-18.

123. Селиванова А.Г. Холинергические механизмы высшей нервной деятельности / А.Г. Селиванова. Л.: Медицина, 1975. - 234 с.

124. Семина О.В. Замена акцессорных Т-лимфоцитов синтетическими пептидами в процессе формирования селезеночных кроветворных колоний /

125. О.В. Семина, В.И. Семенец // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1993. - №2. -С. 298-299.

126. Семина О.В. Стимуляция тимогеном (GW- дипептидом) восстановления кроветворения у облученных и подвергнутых действию цитостатика мышей / О.В. Семина, В.И. Семенец, В.И. Дейгин // Иммунология. 1997. - №1. - С. 33-35.

127. Сепетлиев Д.Н. Статистические методы в научных медицинских исследованиях / Д.Н. Сепетлиев. М.: Медицина, 1975. - 296 с.

128. Сокольский Г.А. Холинергические синапсы и антихолинергические вещества / Г.А. Сокольский, В.И. Савчук, В.В. Ежов. -М.: Изд-во ВАХЗ, 1983. 190 с.

129. Старченко А.А. Система индивидуальной психо- и иммунотерапии в нейроанестезиологической практике / А.А. Старченко, С.В. Красковская // Анестез. и реанимат. 1996. - №3. - С. 53-57.

130. Судаков К.В. Основы физиологии функциональных систем / К.В. Судаков. М.: Медицина, 1983. - 272 с.

131. Сухих Г.Т. Интерлейкин-2 и его возможная роль в патогенезе стрессорных изменений иммунной системы / Г.Т. Сухих, В.В. Малайцев, И.М. Богданова//Докл. АН СССР. 1984. - Т. 278. - №3. - С. 762-765.

132. Таранов В.А. Действие Т активина на макрофаги in vitro / В.А. Таранов, М.Н. Короткова // Интерлейкины и другие медиаторы в клинической иммунологии. - М., 1989. - С. 56-60.

133. Тихонов В.Н. К оценке изменений массы внутренних органов животных в токсикологических исследованиях / В.Н, Тихонов // Гиг. и сан. -1981.-№7.-С. 58-59.

134. Фармакологическая коррекция нарушений иммунного гомеостаза под влиянием вещества Би-зэд в постинтоксикационном периоде: Научный отчет о НИР №101 / Н.М. Трошкин, П.Ф. Забродский, Н.М. Сидельникова, В.Г. Германчук Саратов, СВИ РХБЗ, 2004. - 73 с.

135. Урбах В. Ю. Статистический анализ в биологических и медицинских исследованиях / В.Ю. Урбах. М.: Медицина, 1975. - 295 с.

136. Утешев Б.С. О некоторых методологических вопросах скрининга иммунотропных средств / Б.С. Утешев // Фарм. и токе. 1984. - №3. - С. 5.

137. Утешев Б.С. Анализ современных направлений в создании иммунотропных средств / Б.С. Утешев, А.С. Сергеев, С.А. Коростелев // Эксперим. и клин, фармак. 1995. - Т.58. - №3. - С. 3-7.

138. Хавинсон В.Х. Иммунокоррегирующая терапия тимогеном при заболеваниях и травмах / В.Х. Хавинсон, В.Г. Морозов, С.В. Серый // Взаимодействие нервной и иммунной систем: Тез. докл. Всесоюз. симп. -Ростов-на-Дону, 1990. С. 163.

139. Фримель X. Основы иммунологии / X. Фримель, Й. Брок. Пер. с нем. 5 изд. - М.: Мир, 1986. - 254 с.

140. Хавинсон В.Х. Иммуномодулирующее действие фактора тимуса в патологии / В.Х. Хавинсон, В.Г. Морозов // Иммунол. 1981. - №5. - С. 28.

141. Хавинсон В.Х. Экспериментальное клиническое изучение нового иммуномодулирующего препарата тималина / В.Х. Хавинсон, В.Г. Морозов // Воен.-мед. журн. - 1982. - №5. - С. 37-39.

142. Хаитов P.M. Экологическая иммунология / P.M. Хаитов, Б.В. Пинегин, Х.И. Истамов. М.: Изд-во ВНИРО, 1995. - 219 с.

143. Хаитов P.M. Иммунология / P.M. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидорович. М.: Медицина, 2000. - 430 с.

144. Ханафиева И.В. Воздействие Т-активина и тималина на лейшманийную инфекцию в эксперименте / И.В. Ханафиева, Р.С. Добржанская, Х.Х. Хусейнова // Цитология. 1992. - Т.34. - №4. - С. 158.

145. Хусинов А.А. Нейроэндокринная система и специфические факторы иммунитета при отравлении пестицидами / А.А. Хусинов, Д.С. Хайдарова, Г.В. Гущин // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1991. - Т. 111. - №12. - С. 623-624.

146. Чертков И.Л. Примитивная стволовая кроветворная клетка / И.Л. Чертков, Е.И. Дерюга, Н.И. Дризе // Вест. АМН СССР. 1990. - №9. - С. 35.

147. Шафеев М.Ш. Влияние хлорофоса на некоторые показатели иммунологической реактивности организма / М.Ш. Шафеев // Изучение экстремальных состояний. Казань, 1976. - С. 60-63.

148. Шафеев М. Ш. Влияние некоторых пестицидов и их комбинаций на показатели иммунитета и неспецифической реактивности организма: Автореф. Дис. . канд. мед. наук/М.Ш. Шафеев. Казань, 1978. - 26 с.

149. Ширинский B.C. Проблемы иммуностимулирующей терапии / B.C. Ширинский, Е.А. Жук//Иммунология. 1991. - №3. - С. 7-10.

150. Ширинский B.C. Проблемы фармакодинамики и фармакокинетики иммуностимулирующих препаратов / B.C. Ширинский, Е.А. Жук // Иммунология. 1994. - №6. - С. 27-29.

151. Ширшев С.В. Зависимость внутриклеточного уровня цАМФ интактных спленоцитов от популяционного состава клеточной суспензии и активности циклооксигеназы / С.В. Ширшев // Бюл. эксперим. биол. и мед. -1998. №6.-С. 66-69.

152. Шляхов Э. Н. Т-активин иммуномодулирующий препарат тимуса / Э. Н. Шляхов, В.В. Гылка// Здравоохр. - Кишинев, 1989. - С. 20-23.

153. Шмидт Р. Физиология человека /. Р. Шмидт, Г. Тевс. Пер. с англ. М.: Мир, 1996.-641 с.

154. Щеглова М.Ю. Клиническая эффективность применения имунофана у больных бронхиальной астмой / М.Ю. Щеглова, Г.А. Макарова // Internatinal J. on Immunorehabilitation. Физиология и патология иммунной системы. 2003. - Т.5. - №2. - С. 222.

155. Юшков В.В. Выявление и анализ противовоспалительной активности иммуномодуляторов / В.В. Юшков, В.Х. Хавинсон // Патол. физиол. и эксперим. терапия. 1993. - №2. - С. 11-13.

156. Яковлев Г.М. Современные представления о цитомединах и проблемы биорегулирующей терапии / Г.М. Яковлев, В.Г. Морозов, В.Х. Хавинсон // Воен.-мед. журн. 1987. - №6. - С. 37-40.

157. Яковлев Г.М. Резистентность, стресс, регуляция / Г.М. Яковлев, B.C. Новиков, В.Х. Хавинсон. JL: Наука, 1990. - 237 с.

158. Abood L.G. Summery of acute and chronic toxicity data in various mammalian species with the anticholinergic test agents / L.G. Abood // Washington: National Academy Press, 1982. Vol.1. - P. 61-62.

159. Atkinson E.R. Parasympatholytic (anticholinergic) esters of the isomeric 2-tropanols. 1. Glycolates / E.R. Atkinson, D.D. McRitchie, L.f. Shoer //J. Med. Chem.- 1977. -№12.-P. 1612-1617.

160. Baum B.M. Anticholinergic drugs / B.M. Baum, H. Stange. -Пат.4465834 США. Опубл. - 1984. - 14 авг.

161. Becker E.Z. Concerning the mechanism of complement activity by di-isopropilfluorophosphate. / E.Z. Becker // J. Immunol. 1956. - Vol.77. - №6. -P. 462-468.

162. Becker E.Z. Mechanisms of immunologic injury of rat peritoneal mast cells. I. The effect of phosponate inhibitors on the homocytotropic component of rat complement / E.Z. Becker, K.F. Austen // J. exp. med. 1966. - Vol.124. -№3. - P. 379-395.

163. Becker E.Z. Phosphonate inhibition of the accumulation and retention of K+ by rabbit neutrophils in relation to chemotaxis / E.Z. Becker // J. Immunol.- 1971. Vol.106. - №3. - P. 689-697.

164. Becker E.L. The requirement for esterase activation in the anti-immunoglobulin-triggered movement of В lymphocytes / E.L. Becker, E.R. Unanue // J.Immunol. 1976. - Vol.117. - №1. - P. 27-32.

165. Becker E.L. Biochemical characterization of the activated esterase required in the complement-dependent chemotaxis of rabbit polymorphonuclear leucocytes: Partia 1 / E.L. Becker, P.A. Ward // J.Exp.Med. 1967. - Vol.125. -№6.-P. 1021-1030.

166. Boman H.G. Peptid antibiotics and their role in innate immunity / H.G. Boman. //Ann. Rev. Immunol. 1995. - Vol.13. - P. 61-92.

167. Costa L.G. In vitro and in vivo modulation of cholinergic muscarinic receptors in rat lymphocytes and brain by cholinergic agents / L.G. Costa, G. Kaylor, S.D. Murphy // Int. J. Immunofarmacol. 1990. - Vol.12. - №1. - P. 67.

168. Descotes J. Immunotoxicology of drugs and chemicals / J. Descotes. -Amsterdam N. Y. - Oxford: Elsiver, 1986. - 400 p.

169. Descotes J. Immunotoxicology / J. Descotes, G. Mazue // Adv. Vet. Sci. а Сотр. Med. 1987. - Vol.31. - P. 95-119.

170. Domianjanovic M. The influence of acetylcholine upon lymphocyte activation / M. Domianjanovic, V. Vidakovic, S. Fhjstolski // Acta biol. iugosl. C.- 1989. Vol.25. - №3. p. 238-243.

171. Dulis B.H. Identification of muscarinic binding sites in human neutrophilis by direct binding / B.H. Dulis, M.A. Gordon, J.B, Wilson // Molec. Pharmacol. 1979. - Vol.15. - №1 .- P. 28-34.

172. Durant S. In vivo effects of catecholamines and glucocorticoids on mouse thymic cAMP content and thymolysis / S. Durant // Cell Immunol. 1986.- Vol.102.-№1.-P. 136-143.

173. Hong R. Immunobiology of the Macrophage / R. Hong // Reticuloendothelial. Syst.: A comprehensive treaties. New York. - London, 1984.-Vol.6.-P. 1-11.

174. Elsbach P. Oxygendependent and oxygenindependent mechanisme of microbiological activity of neutrophilis / P. Elsbach, J. Weise // Immunol. Leet.- 1985. Vol.11. - №3-4. - P. 159-163.

175. Fergula J. The effect of organophosphorous inhibitors, p-nitrophenol and cytocholasin-B on cytotoxic killing of tumor cells and the effect of shaking / J. Fergula, G.L. Ashercon, E.L. Becker // Immunol. 1972. - Vol.23. - №4. - P. 577.

176. Garoroy . M.R. Antibody-dependant lymphocyte mediated cytotoxicity mechanism and modulation by cyclic nucleotides / M.R. Garoroy, T.B. Strom, M. Kaliner // Cell. Immunol. 1975. - Vol.20. - №2. - P. 197-204.

177. Georgiev V.St. Cytokines: Immunomodulation drugs / V.St. Georgiev, J.E. Albright // Ann. of the N.-Y. Acad. Sci. 1993. - Vol. 685. - P. 284-602.

178. Gilbert R.V. cAMP is essential signal in the induction of antibody production by В cells but inhibits helper function of T cells / R.V. Gilbert, M.K. Hoffmann // J. Immunol. 1985. - Vol.135. - №3. - P. 2084-2089.

179. Gordon M.A. Muscarinic cholinergic receptors in murine lymphocytes: demonstration by direct binding lymphocytes / M.A. Gordon, J.J. Cohen, I.B. Wilson // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1975. - Vol.76. - №6. - P. 2902-2904.

180. Grabczevvska E. Receptory muskarinowe na limfocytach ludzkich stymulowanych fitohemaglutynina / E. Grabczewska, H. Lascowska-Bozek, M. Maslinski, J. Ryzewski // Rreumatologia. 1990. - Т. XXVIII. - №4. - P. 171.

181. Janik G. Levamisol-induced neopterin synthesis: Immunomodulation drugs / G. Janik, W.C. Kopp // Ann. of the N.-Y. Acad. Sci. 1993. - Vol.685. -P. 252-258.

182. Jerne N. K. Plaque formation in agar by sirgte antibody producing cells / N.K. Jerne, A.A. Nordin // Seince. 1963. - Vol. 140. - №4. - P. 405.

183. Khaitov R.M. Vaccines based on synthetic polyions and peptides: Immunomodulation drugs / R.M. Khaitov // Ann. of the N.-Y. Acad. Sci. 1993.-Vol.685. - P. 788-802.

184. Kimball E.S. Experimental modulation of IL-1 production and cell surface molecule expression by levamisol: Immunomodulation drugs / E.S. Kimball // Ann. of the N.-Y. Acad. Sci. 1993. - Vol.685. - P. 259-268.

185. Kimber I. Chemical Induced Hypersensitivity / I. Kimber // In.: Exper. Immun. - Boca Raton, New York, London, Tokyo. - 1996. - P. 391-417.

186. Kimber I. Mechanism and regulation of natural cytotoxicity. Minireview on cancer research / I. Kimber, M. Moore // Exp. Cell Biol. -1985. -Vol.53.-№2.-P. 69-84.

187. Kondo M. Immunomodulators and the complement system / M. Kondo, H. Kato, T. Yoshikowa // Meth. and Find. Exp. and Clin. Pharmacol. 1986. -Vol.2. - №2. - P. 67-72.

188. Loose L.D. Immunotoxicology-1985 / L.D. Loose // Year Immunol. -1985-1986. Vol.2. - 1986. - P. 365-370.

189. Luster M.J. Molecular and cellular basis of chemically induced immunotoxicity / M.J. Luster, J.A. Blank., J.H. Dean // Annu. Rev. Pharmacol. And Toxicol. Vol.27. - Palo Alto, Calif. - 1987. - P. 23-49.

190. Mac Manus J.P. Aceytlcholine-induced initiation of thymic lymphoblast DNA synthesis and proliferation / J.P. Mac Manus, A.L. Bounton, J.F. Whitefield // J. Cell. Physiol. 1975. - Vol.85. - №2. - P. 321-330.

191. Madden K.S. Catecholamine action and immunologic reactivity / K.S. Madden, S. Livnat // In: Psychoneuroimmunology, Second Edition. Academic Press, Inc. - 1991.-P. 283-310.

192. Marshak-Rothstein A. Properties and application of monoclonal antibodies directed against determinants of the Thy-1 locus / A. Marshak-Rothstein, P. Fink, T. Gridley // J.Immunol. 1979. - Vol.122. - P. 2491.

193. Masini E. Mast cell heterogenity in response to cholinergic stimulation / E. Masini, R. Fantozzi, A. Conti // Int. Arch. Allergy and Appl. Immunol. 1985. - Vol.77. - №1-2. - P. 184-185.

194. Maslinski W. Cholinergic receptors of lymphocytes / W. Maslinski // Brein. Behav. and Immunol. 1989. - Vol.3. - №1. - P. 1-14.

195. Maslinski W. Muscarinic antagonist binding to intact rat thymocytes / W. Maslinski, E. Grabczewska, T. Bartgai // Acta chem. scand. 1990. - Vol.44. -№2.-P. 147-151.

196. Maslinski W. Expression of Muscarinic cholinergic receptors during T cell maturation in the thymus / W. Maslinski, E. Grabczewska, H. Laskowska -Bozek // Eur. J. Immunol. 1987. - Vol.17. - №7. - P. 1053-1059.

197. Maslinski W Muscarinic acetylcholine receptors of rat lymphocytes / W. Maslinski, K. Krystyniak, E. Grabczewska//Biochim. biophis. Acta. 1983. -Vol.758. -№1.- P. 93-97.

198. Maslinski W. Nicotinic receptors of rat lymphocytes during adjuvant polyarthritis / W. Maslinski, H. Laskowska Bozek, H. Ruzewski // J. Neurosci. Res. - 1992. - Vol.31. - №2. - P. 336-340.

199. Marx J.L. How killer cells kill their targets / J.L. Marx // Science. -1986. Vol.231. - №4744. — P. 1367-1369.

200. McGrath J. Immunotoxicology of inhalants and methods of evaluation / J. McGrath, S. Wong // Inhal. Toxical. 1987. - P. 255-291.

201. Menard L. Nicotine induces T-suppressor cell: modulation by the nicotinic antagonist d-tubocurine and myastehenic serum / L. Menard, M. Rola-Pleszczynski // Clin. Immunol, and Immunopathol. 1987. - Vol.44. - №1. -P. 107-113.

202. Miller K. Immunotoxicology / K. Miller // Clin, and Exp. Immunol. -1985. Vol.61. - №2. - P. 219-223.

203. Minich E. Biological response modifiers: subcombite report / E. Minich, A. Fefe //Nat. Cancer Inst. Monograf. 1983. - Vol.63. - P. 173-252.

204. Moody-Corbert F. Acetylcholine reduces rectification on thymus-derived macrophage cells in culture / F. Moody-Corbert, P. Brehm // Can. J. Phisiol. and Pharmacol. 1987. - Vol.65. - №3. - P. 348-351.

205. Nansieda P.A. Mioclonic jumping behaviour: a potential animal model for screening hallucinogenic agents / P.A. Nansieda, R. Weerts, P. Carvey.-Soc. Neurosci. Abstr. 1984. - 10 (2). - P. 1066.

206. Nogueira N. Intracellular mechanisms of killing / N. Nogueira // Immunobiol. Parasit. and Parasitic. Infec. New York - London. - 1984. - P. 53.

207. Nouragargh S. Inhibition of human neutrophil degranulation by forskolin in the presence phosfodiesters inhibitors / S. Nouragargh, J.R.S. Holt // Eur. J. Pharmacol. 1986. - Vol.222. - №2. - P. 205-212.

208. Park B.H. The use and limitations of the nitro blue tetrasolium test as a diagnostic aid / B.H. Park. // L. Pediatr. 1971. - Vol.72. - №2. - P. 375-378.

209. Pfeifer C. Selective activation of Thl- and Th2-like cells in vivo: Response to human collagen IV / C. Pfeifer, J. Murrey, J. Madri // Immunol. Rev.- 1991.-Vol.123.-№2.-P. 65-84.

210. Quliroz L. Immunologic phagocytosis by macrophages: effect of cholinergic drugs and cyclic GMP / L. Quliroz, L. Oliveina // Rev. brasil. pes quesis med. biol. 1975. - Vol.8. - №2. - P. 119-123.

211. Richman D.P. Nicotinic acetylcholine receptor: evidence for a functionally distinct receptor on human lymphocytes / D.P. Richman, B.G.W. Arnason // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1979. - Vol.76. - №9. - P. 4632-4635.

212. Rinner I. Cholinergic signals to and from the immune system / I. Rinner, P. Felsner, A. Falus // Immunology Letters. 1995. - Vol.44. - P. 217.

213. Rinner I. The parasympathic nervous system takes part in the immuno-neuroendocrine dialogue / I. Rinner, K. Schauenstein // J. of Neuroimmunollogy.- 1991.-Vol.34.-№2.-P. 165-172.

214. Segal A.W. Nitro blue tetrasolium test / A.W. Segal // Lancet. - 1974.- Vol.2. №7. - P. 1248-1252.

215. Shapiro H.M. Electrophysiology of T lymphocyte cholinergic receptors / H.M. Shapiro, T.B. Strom // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1980. - Vol.77. - №1. -P. 4317-4321.

216. Function of accesser cells in В cell responses to thymus-independent antigens / A.A. Sinha, C. Guados, Loo Kwok-Choy, E. Diener // J. Immunol. -1987. Vol.138. - №12. - P. 4143-4149.

217. Solberg С. O. Phagocytic cell in host defense / C.O. Solberg // Acta oto-laryngel. 1984. - Vol.98. - №407. - P. 5-13.

218. Sosa M. Immunopharmacologic properties of inosine 5- methyl monophosphate (MIMP): Immunomodulation drugs / M. Sosa, A. Sana // Ann. of the N.-Y. Acad. Sci. 1993. - Vol.685. - P. 458-463.

219. Stevens G. Immunomodulation drugs: where and whither: Immunomodulation drugs / G. Stevens // Ann. of the N.-Y. Acad. Sci. 1993.-Vol.685. - P. 430-431.

220. Strom T.B. Cholinergic augmentation of lymphocyte-mediated cytotoxicity. A study of the cholinergic receptor of cytotoxic T lymphocytes / T.B. Strom, A.T. Sytkowski, C.B. Carpenter // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1974. Vol.71. - №4. - P. 1330-1333.

221. Sullivan J.B. Immunological alterations and chemical exposure / J.B. Sullivan // J. Toxicol-Clin. Toxicol. 1989. - Vol.27. - №6. - P. 311-343.

222. Techima H. Changes in T-cell subpopulations induced by autonomic neurotransmitters and hormone / H. Techima, H. Sogawa, T. Navagava // Fufuoka acta med. 1991. - Vol.82. - №7. - P. 428-436.

223. Tiefenbach B. Studies on the action of dimethoate on the immune system / B. Tiefenbach, P. Lange // Arch. Toxicol. 1980. - Suppl. 4. - P. 167.

224. Tiefenbach В. Dosisabhangigkeit und Mechanismus der acuten Wirkung von Methamidophos auf das Immunsystem der Maus / B. Tiefenbach, S. Wichner// Z. gesamte Hyg. und Grenzdeb. 1985. - Bd.31. - №4. - S. 228-231.

225. Tominaca K. Effects of cholinergic agonists on the protein synthesis in a cultured thymic epithelial cell line / K. Tominaca, Y. Kinoshita, F. Hato // Cell, and Mol. Diel. 1989. - Vol.35. - №6. - P. 679-686.

226. Till J.E. A direct measurement of the radiation sensitivity of mouse bone marrow cells / J.E. Till, E.A. Mc Culloch // Radiat. Res. 1961. - Vol.14. -№2.-P. 213-222.

227. Witfield J.F. The possible variation by cyclic AMP of the stimulation of thymocyte proliferation by cyclic GMP / J.F. Witfield, J.P. MacManus, D.J. Franks // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1971. - Vol.137. - №2. - P. 453-457.