Автореферат и диссертация по медицине (14.00.16) на тему:Экспериментальное моделирование и изучение механизмов аутоиммунного поражения сосудов

19.0&90-?. /7 73

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РСФСР

Казанский государственный медицинский институт имени С. В. Курашова

На правах рукописи

ШЕРМАТОВ Хамдам Хамитовнч УДК 611. 13/16 + 576. 8. 097. 2

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ МОДЕЛИРОВАНИЕ И ИЗУЧЕНИЕ МЕХАНИЗМОВ АУТОИММУННОГО ПОРАЖЕНИЯ СОСУДОВ

(иммунологические, биохимические и морфологические исследования)

14.00.1(> — патологическая физиология

Автореферат диссертации на соискание ученей степени доктора медицинских наук

Казань — 1990.

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РСФСР

Казанский государственный медицинский институт имени C.B. Курашова

Не правах рукописи EEPMATQB Хаыдаы Хаыитович

УДК 611.13/16 + 576.8.097.2

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ МОДЕЛИРОВАНИЕ И ИЗУЧЕНИЕ МЕХАНИЗМОВ АУТОИММУННОГО ПОРАЖЕНИЯ СОСУДОВ

( иммунологические, биохимические и морфологические исследования )

14.00.16 - патологическая физиология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Казань - 1950

Работа выполнена в Андияаиском государственной медицинском институте имени U.U. Калинина и ДНИЛ 2-ой МОЛШ имени Н.И. Пи -рогова

Официальные оппоненты:

Доктор медицинских наук, профессор A.A. КУЕДТИЕВ Доктор медицинских наук, профессор LII.U. ЫИННЕЕАЕВ Доктор медицинских наук, профессор И.В. ПЕТРОВА

Ведущее учреждение - Университет Друабы Народов имени П. Лумумбы

Защита диссертации соотоится 1990 г.

в _ часов на заседании Специализированного совета -

Д 089.29.03 Казанского государственного медицинского института кцшщ C.B. Курашова ( 420012, Казань, Бутлерова ул., 49 )..

С диссертацией мозно ознакомиться з библиотеке института ( ул. Бутлерова, 49 "ö" ).

Автореферат разослан " " 1990 г.

ученый секретарь

Специализированного совета, кандидат медицинских наук

Р.2. АЖБДЗЯНШ

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Атеросклероти-чеокое пораясеиие сосудов занимает одно из ведущих ыест в этиологии и патогенезе сердечно-сосудистых заболеваний.

В экспериментальных исследованиях последних лет убедительно показано значение ряда причин, приводящих к повреждению и гибели интикы сосудистой стенки (С.Г. Осипов, З.Н. Титов, 1982; Е.й. Чазов, 1982; Ю.В. Ивановский, Е.Г. Зота, 1983; В.А. Нагорнев я со-авт., 1983; Т.А. Войно-Ясенецкая, О.й. Стенина, 1988; r.rosb, 1983).

Повреждение эндотелиальных клеток монет быть вызвано воздействн -ем различных факторов: высохни уровнем 'сывороточного холестерина (В.А. Лапотников, С.И. Моисеев, 1988; E.Batz, 1987), артери -виной гипертен8иэй, токсинэыи, гормональными и Еэзсзкгивныаи веществами (P.M. Махмудов и соавт., 1984; В.В. Тенюков, Д.С. Гор -дон, 1984).

В ряде работ дана подробная характеристике повреждений эндотелия при действии разнообразных повреждаюпдах факторов, на последних стадиях сопровождаются однотипными ыорфологичаокииц изысканиями (Л.Д.Балашов,1987; Т.А.Войно-Ясенецкая, 0Л1.Ствнииа ,1988).

В настоящее вреыя накоплено значительное количество неблв -доний, свидетельствующее о значительном роста заболеваний, в автогенезе которых существенную роль arpaes зузоиыыуиный аэхаыЕэа (Ю.Н. Зубяицкий и созвт., 1974? А.Но Кяияез и сзсавт., 1982). Есть ряд работ, в которых показана роль аутоиммунного иехакйуэ и в развитии атеросклероза (Ä.H. Кшзаоз, В.1. Нагорнэв, 0<Л0 8уб» гицкий, 1979; А.Н. Климов, IS86). Пробпэыа тробуаг дальнейшего экспориыентаяьного обоснования.

В свете этого особый интерес приобретает выяснение участия эуто -иммунного компонента в механизме повреждения (аамерации) оооуди-г стой стенки. При этом аутоиммунному компоненту отводится либо ве?-дущая роль, либо второстепенная. Однако и в последнем случае,, включаясь в патогенез аутоиммунный компонент может отать ведущим звеном, замыкающий "порочный круг" (причинно-спедственвых взаимо-г отношений) в механизме повреждения сосудистых структур (Н,И. Пао-тернак, 1970).

Несмотря на больше успехи, достигнутые в последнее время в изучении роли аутоиммунного фактора в механизме повреадения сосудистой стенки, многие вопросы этиологии и патогенеза этого слоя -ного процесса до сих пор остаются нераскрытыми (В.А, Нэгорнев и соавт., 1985).

Участие аутоиммунного фактора в возникновении сосудистых повраа -дений окончательно еще не изучены. Отсутствует чёткое представление о состоянии сооудистой стенки при формировании аутоиммунного процесса. Практически не исследованы показатели, характеризующие аутоиммунный процесс в сооудистой стенке в разные периоды его развития. Не проведены еще комплексные иммунологические, биохимические и морфологические исследования, которые показали бы роль и место каждого звена и этапа аутоиммунного процесса в ыеханиз -ие альтерации сосудистой стенки.

Иежду тем результаты такого исследования могут иметь значение в совершенствовании диагностики и лечения сердечно-сосудистых габо-леваний (В.П. Шпак, 1987).

Решение этого круга вопросов ыокет быть достигнуто путем поиска новых подходов к'jeгодов, открывающих перспективы более глубокого вокрытия иммунных механизмов, позволяющих понять роль s место каждого конкретного звена в повревденшз сосудиотой стенки при

аутоиммунном процессе (А.Н. Чередеев, 1981; Т.А. Литвиненко и со-авг., 1989).

Дяя решения этой проблемы необходимо проведение опытов с целью определения наиболее ранних сдвигов, предшествующи полному развертыванию процесса, а также обусловленных детерминирующими, причинно-следственными и коррелятивными отношениями пэтофиэиоло -гических, иммунологических, биохимических и морфологических изменений, лежащих в основе развития патологического процесса, сля -занного с выработкой противоорганных антител. Изложенное выше явилось определяющим в постановке цели и задач настоящего исследования.

Цель работы. Разработать новую экспериментальную модель аутоаллергической альтерации сосудов, сходную с соответствующей патологией человека, и изучить формы участия, механизмы и роль аутоиммунных факторов в возникновении и развитии сосудистых повреждений.

Задачи исследования. I. Воспроизвести адекватную патологии человека экспериментальную модель аутоиммунного повреждения сосудов путем парентерального введения гоыоло -гичного антигена.

2. Провести сравнительное изучение иммуностимулирующих свойств нормальной гомологичной сыворотки с эдыов8нтом Фрейндэ.

3. В динамике аутоиммунного процесса изучить:

- характер иммунологических и биохимических изменений

крови;

- картину иммунологических и морфологических изменений в сооудах (эортэ, сонные и бодренные артерии);

- проницаемость сосудистой стенки и тонус оосудов.

Ь. йзтоу ооаосяс.«лешн: вре«енаой динамики выявить ведущий

фактор (факторы) поражения сосудов при введении гомологичного антигена .

5. Провести многофакторный корреляционный и дисперсионный анализ с целью установления степени (удельного веса) влияния не организм гомологичного антигена сосудов и гомологичной сыворотки и выявления связи ыенду иммунологическими, биохимическими, морфологическими и другими изменениями в организме.

Научная новизна. Новым в настоящей работе является следующее: Разработана и воспроизведена оригинальная экспериментальная модель аутоиммунного повреждения сосудов путем парентерального введения гомологичного аортально-тканевого анти -гена в нормальной гомологичной сыворотке.

Показано, что по характеру морфологических изменений сосудов модель наиболее адекватна патологическому процессу - атеросклерозу.

Впервые при иммунизации животных гомологичным антигеном оо -судов вместо одъшанта Фрейнда использована нормальная гомологичная сыворотка, установлены её преимущества: высокие иммуностиму -дарувдио свойства при отсутствии побочных эффектов.

В условиях хронического эксперимента впервые проведено ком -иааксноа изучение иммунологических, биохимических, ыорфологичео -них и других факторов, определяющее динамику и картину повредде -шш сосудов при сенсибилизации животных гомологичным антигеном, показана ведущая роль аутоиммунного фактора (опережаюадай характер клеточных и гуморальных иммунологических реакций) в патогенезе артериосклероза.

Установлен циклический характер колебания иммунологических (уровень АТСК, геыагглитинируккрх и преципитирувдх антител, О-РБ, лизисе лейкоцитов, альтерации нейтродинов и дегрануяяции

базофилов) и биохимических (сдвиги общего балка, в белковых фракциях и уровне липопротеидов, дисбаланс свободных аминокислот, эндогенных факторов проницаемости сосудов и факторов гемостаза) показателей, что указывает на чередование фаз обострения к ремиссии вутоаллергического процесса.

С помощь» регрессионного, корреляционного и дисперсионного анализе экспериментальных данных установлена чёткая зависимость иегду морфологическими нарушениями интимы и других структур сосудов и аутоиммунными процессами общего и местного характера.

Комплекс полученных данные позволяет утверждать, что аутоиммунный фактор монет быть первичным в патогенезе артериосклероза.

Представлена концепция патогенеза аутоиммунного поврэддевип оосудов, в которой ведущая роль аутоиммунных процессов впервые увязаны с биохимическими изменениями в крови и морфофункционзяь -ными нарушениями сосудов.

Основные положения, выносимыэ на аэщиту. Не защиту выносятся следующие основные положения:

1, Разработана новая, приближенная к естественной патологии человека экспериментальная модель аутоиммунного повреждения сосудистой стенки (аорты, крупных артерий), которая воспроизводится путем парентерального введения аортально-хкаиавого гоиоантигена. Показэно, что вутоимыунное поражение сосудов морфологически ваа -более адекватна атеросклерозу.

2. На основании комплексного исследования зремеяиоа данзив -ки основных сдвигов з организме (иммунологических, биохимических, морфологических а других) постулируется, что биохимические сдай -га в крова, морфологические и функциональные нзрушэния сооудио -той стенка детерминированы опережающими клеточными (вухешиузвиэ

процессы в сосудах и органах иммуногенеза) и гуморальными (циркулирующие ткакевоспецифические антчтела и иммунные комплексы) им -мунопогическими реакциями.

3. Установлены иммуностимулирующие свойства нормальной гомологичной сыворотки при иммунизации животных гомологичным антиге -ном сосудов, которую можно использовать вместо адъюванта Фрейнда.

Научно-теоретичеокая и практи -ч е с к а я значимость работы.

Разработка новой экспериментальной модели повреждения сосу -дов, близкой к патологии человека, и комплексное изучение иммунологических, морфологических, биохимических и других факторов,, определяющих возникновение и развитие патологии сосудов, имеют важное теоретическое и практическое значение.

Указанная модель может быть использована в экспериментальных исследованиях с целью дальнейшего изучения этиологии и патогенеза сосудистых заболеваний аутоиммунной природы, особенно их донозо -логических форм, поиске новых лекарственных средств, в том числе шшуномодулирущих и отработки новых методов лечения атеросклероза сосудов.

Апробированный комплекс иммунологических, биохимических,морг фологических и инструментальных методик может быть внедрен в эк -спериыентадьную практику для объективного тестирования патологи -ческих сдвигов в организме, индуцированных аутоиммунным процес -сом, и выявления характера и степени повреждения сосудов.

Для дальнейшего изучения конкретных механизмов аутоиммунно -го повреждения сосудов большое значение имеет установленная в эксперименте последовательность этапов патологического процеоса: альтерация сосудиотой (артериальной) стенки тканевым гомоантиге -вой, изменяя характер её защитных свойств, создает благоприятный

дон для возаякяовеиая ин«|яяьтрзгазя«х яроцоссов - развитие лилоя-Ю39, очагового ила диффузного огяозоняя гликозэцизогликонов,пра-штивзние белкой, разрастание соединительной ткани.

Дзшшз о характере и временной дияанияе наиболее существен -lux нзрусзнкЗ з оргаяизие (игжуяогогкчвекях и других) могуг cTrjex-шйояьзозэны яра разработке рвяояеадзцки для кзинячесяой кэргхо -хогл:: и ангиологии в ягаяз жзчеяия и ярс^яяэягекя ссрдвчпб-сеоу -ïkcïiîx эутсзлггзргкческих ззбояозаяий.

Внедрение ре з уяьэа. гоа в я р з к г и к у »

I. Результаты эхеяернзеягэяьвкх исслодоззяяЯ кегггк з ссяову >"рационапаззгорсяих ярздлогевиЯ (й 25 от 15.02.77 г.; й 1';9 ос 33.06.82 г.; ЁЙ 165-164 oí 05.ЭД.8? г.; 83 I84-X85 02 ôi.06.85 г.), зндаизяе БРИЗоа Айдкйзйского госудероззевзого яедяцяяского 3h02ís2y23 а зявдрзня из шзфздоз язтовогячесяой ^изйогогия ЛпдГос-Ш, аз яафздре яэзоЗязяошгкя львозского яйдяцззсяого а

аа язфвдрэ кйяребяогоука Русского ивдаяявского зявсагуга.

2» fia еззоззяяя яояучеязих лаяпих едэяэяа ярзггэтгакяв gezo-авадада дзя кардиологически таяваий гарэяезгяявеязх хгшяс ; ИвдГсйШ, г. Яеязясаэ ДядазэясясЗ otfsaara я (ЬзясЯ обаасааой бо-гшияда Ки$!ГЯ8СЯ0й CS?»

3. Издзнэ адгодечесязз рэаемздвцвз "Сяособ зосярояззвдвйяя зуггЕкгцуяййРо яезрйзяеяга восуяоз8 (Длдисзя, 1983). йвотдааэ яодрезэведяша яояэзш ауяшигуяяой аяызрздии сосудов ката з esaoBj яэберэморяка заяшгяй по разделу ""Предмет и иетодя кссеэкозз2яяя я Езкцасяиого курса по разделу "Патофизиология евр-ДОЗО-ССвуЯРОгО!} 0Й022УЫ",

£3 з з з р я о " •< л г: с о з п з ') ц :: л а п р о б и р оз з и ч ня 2-я е 3- i Зззвоззйаа оз-эидэ патофизиологов (1976,

1982 гг.), многократно докладывались на итоговых конференциях учёных Андиаанского медицинского института (1976-1988 гг.), на сов -местном заседании научного Совета по иммунологии и кардиологии с участием кафедр нормальной и патологической физиологии, патологической анатомии, фармакологии, детских болезней, судебной медицины, пропедевтики внутренних болезней, субординатуры № X, 2, 3, ЩШ Андижанского государственного медицинского института (июнь, 1989), на Ученом Совете АндГосМИ (июль, 1989), на совместном за -седании общества патофизиологов - кафедр патофизиологии и общей патологии Казанского государственного медицинского института, общей патологии и ЦН11Л ГИДУВ, патофизиологии ВИ (октябрь, 1989). Сдан отчет по НИР (номер государственной регистрации 81.007.280).

По теме диссертации опубликовано 24 научных статей, внесено 6 рационализаторских предложений, практических рекомендаций, оформлены акты на их внедрение, выпущена методическая рекомендация.

Объём и структура диссертации. Материал диссертации излокеи на 337 листах машинописи, содераит 26 ¡таблиц со статистически обработанным цифровым материалом, 84 рисунка, 39 микрофотографии и 2 схемы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы (глава I), описания материала и ме тодик (глава 2), излоаения результатов собственных исследований (гкзвн 5, 4, 5, 6, 7), заключения (обоукдения полученных результатов) (глава 8), выводов. Список литературы содераит 685 найме-, 1Ю£вний (443 не русском языке и 242 на иностранных языках).

СОДБРШИЕ РАБОТЫ

Наторкал и методы исследования. Для решения поставленных а работе задач были выполнены иммунологические, биохимические, инструментальные и патоморфологичеокие

исследования в условиях хронических опытов на собаках, кроликах и крысах.

Изучение аутоиммунных заболеваний человека на эксперимента явных моделях немыслимы без адъюванта, поскольку при использовании его для инъекции значительно сокращается количество вводимого антигена и усиливается его эффект (Л. йегер, 1986).

Поиск подходящих стимуляторов (В.И. Земсков, 1969) в связи о задачей приготовления антигена гомологичных сосудов, исключающих применение бактериальных адъовантов типа Фрейнда, иыеощих ряд недостатков ¿наличие балластных белков и других веществ, вызывающих дополнительное нецелесообразное антигенное раздражение организма (A.A. Воробьев, H.H. Васильев, 1969), эллергизирующее действие па кожу и слизистые оболочки микробных компонентов (Н.Д. Беклеыивев, Г.С. Суходоева, IS79), канцерогенность (ВОЗ, 1965), возникновение аутоиммунных реакций (И.Я. Учитель, Э.Л. Хвсмвв, 1965)J показав возможность применения взвеси гомогенизированной гомологичной ткани сосудов в нормальной гомологичной сыворотке для изучения различных аспектов реактивности организма.

В поелвдаие годы накопились многочисленные данные (О.Н. 3y<J-жицкий, А.Н. Нвгорнев, 1972; В,И. Иоффе и ооавт., 1973; А.Н. Климов и ооавт., 1975; А.Н. Климов и соавт.,.1979), свидетельствуй -щие о важной роли аутоиммунного фактора в механизме развития ore-росклеротического процесса, требующего дальнейшего эксперимента -льного обоснования путем проведения исследований в атом направлении о поиском моделей максимально приближенных к подобны» ттио-виям у человека.

iСходя из вышесказанного, нами разработана экспериментапьнвя но -цель аутоиммунного поражения сосудистой стенка, максимально араб-шженнув в подобным поражениям у человека. Лабораторные кнвотяыз

не подвергались холестериновой нагрузке, удалению или подавления функции щитовидной железы. Нами учтены данные и.3. Сигал, 1952; Е.З. Сухоруково, 1953; H.A. Федорова, C.B. Скурковича, 1955; H.H. Пастернакв, 1969, I97I и результаты собственных (проверочных) исследований, свидетельствующих о слабых гомоэнтигенных свойствах нормальной гомологичной сыворотки. Всё это дало нам основание использовать нормальную гомологичную сыворотку в качестве своеоб -разного стимулятора (адьювзнта) при получении экспериментальной модели поражения сосудистой стенки.

Примененный в опытах антигенный комплекс ярздставляя собой взвесь гоыогеиата гомологичной ткани сосудов s нормальной гомологичной сыворотке. Гоыогенаа: ткани сосудов готовили по описанному способу. Сооудистую ткань (аорту, сонные и бедренные артерии) тде тельно освобождали ох крови, аира, промывали, взвешивали и гомо -генизирозали в гомогенизаторе Потерз, а затем кварцевым песком. 1 приготовленной ыелкодиспероиой тканевой взвеси, из расчете 1:5 д< бавляли нормальную гомологичную сыворотку и помещали в холодит. • ник ( + ) при постоянном встряхивании на магнитной мешалке m 72 чеса. Через трое суток для получения стерильного материала, очищенную ох взвешенных твердых и низкомолекулярных примесей, со оудиотую ткань, ковхактировенную с нормальной гомологичной оыво роткой фильтровали через бумажный фильтр, а затем пропускаой че рев стерильный фильтр Зайца с прокладкой "Миллипор". Из колбы Бунзена в стерильном боное экстракт разпивели s предав рительно приготовленные отерильныо пеиищшиновые флаконы» Полу чанный акотракт (антиген) проверяли не стерильность, бозврздноо! в огоутотвио аокоичвоогн.

Днотша белкового ооотава нормальной гомологичной оыворош; ûHBopoTOî, конгактарованяой о гоногенотоу ткани сосудов, прово

денный рефрактометрически (1969), по Лоури (X95I) и электрофоре -тичеоки на бумаге по А.Е. Гурвичу (1955) на 3, 7, 10, 13-е оутки, показал: количество общего белка рефрактометрически и по Лоури в сыворотке контэктированной о гомогензтом ткави сосудов по сравнению с нормальной гомооывороткой, начиная о 3-го дня ( 78,5 и 75,0 г/л) постепенно увеличивалось, достигая своего максимума на I3-Q сутки ( 84,9 и 79,5 г/л).

Электрофоретическое изучение белковых фракций показало, что относительный процент всех фракций ( 99,62% ) в антактной (нормаль -ной) сыворотке постепенно снижался и достигал исходных величин на последний день исследования ( 72,95% ). А в контэктированной с го-ногенатоы ткани аорты сыворотке относительный процент всех белковых фракций на 13-й день больше (95,75%), чем в интактной сиво -ротке (72,95 % ).

Содержание общего белка в норыэльной гомологичной сыворотке и сыворотке, контэктированной с гоыогенатоа ткани сосудов, поодо определения в г % рефрактометрически (С.Г. Аптекарь, A.A. Пок -ровский, 1969) и по Лоури (1951), предварительно перед введением стандартизировали по общему азоту (по ыикро-ыетоду Келъдалю). Он содераал 65-75 ыг бедка в I ил экстракте.

Предварительно, до постановка основных опытов на 5 собаках провели поисковые исследования о целью оовоения и отлааизания иммунологических, биохимических и инструиентаиьных методов исследования, Для изучения возрастных особенностей сердца и сосудов (аорто, сонные и бодренные артерии) прозодизм предварительные пэ-тоысрфокогичоскио исследования на 20 собаках в возрасте от I года до 5 пот.

Впяяа.че ¡паугасго рзздрэадапиа на иынунологические, бпскнш -чсс-..K (беиювий я дашгииВ ярорааь крозн, оооаоянио геаоотгэ«.

эндогенные факторы проницаемости) и патоыорфопогические измене -ния в динамике их возникновения изучались в опытах на собаках, при нахождении их в станках и после установления спокойного сос -тояния и полной адаптации к обстановке с соблюдением правил про -ведения работ при использовании экспериментальных животных.

Ввиду того, что органоспецифическая сенсибилизация вызывз -лась. введением тканевого антигена сосудов в нормальной гомологичной сыворотке, опыты ставили с тремя контрольными (12) группами собак. Дивотные первой группы (1-й контроль) оставались интактны-ыи в продолжение всего периода проводимой работы, но параллельно в одни и те же дни с опытными динамично подвергались комплексному обследованию, квотные второй группы (2-й контроль) по схеме введения антигена подвергались введениям соответствуюадах доз норма -кьной гомологичной сыворотки без сосудисто-тканевой взвеси.

Данные исследования лервой группы (контроль 1-й) давали нам возможность сравнивать их в динамике с результатами, полученными у опытных.

При исследовании второй контрольной группы ставилась задача лшенкгь ззозиоянш ъгяятк пораепъаой гомологичной сыворотки из уровень антител, клеточные реакции, белковый и липидный профиль крова, состояние свертывающей - противоевзртьшаищай и ферментной систем крови и систсиы гиелуровидзза - антигиалуронидаза, s также сосудистую проницаемость и тем самым получить объективные данные для мяапония эффекта дойствия тканевого (сосудистого) гоыоанти -гене и нормальной гомологичной сыворотки.

Для сравнения действия нормальной гомологичной сыворотки со савмупятороа Фре-йыда и зыяснения возможности его использования в мчеоме своеобразного адагаакта ставилась серия опытов на соба -кгх, иммунизировании*. стимулятором Фрейвдо. Схема введения стику-

лятора, взятия крови, постановка опытов и их продолжительность была аналогична сериям опытов с животными, которым вводилась только нормальная гомологичная сыворотка.

В серии опытов с введением антигена гомологичных сосудов исследованиям подвергалось 25 собак. Проводились иммунологические, биохимические и инструментальные исследования. После завершения иммунологических, биохимических и инструмента льных исследований собак (25) по срокам соответствующим патоморфо -логическим исследованиям выводили из опыте (умерщвлялись) с соб -падением приказа министра здравоохранения СССР (1977) путем вве -дения летальной дозы гексенала ( 50-100 иг/кг); немедленно вскрывались, и в условиях, исключающих возможность наступления посмертных изменений в сердце и крупных сосудах, извлекались (подверга -лись морфоыетриа по Г.Г. Автандилову (1970, 1980) до и после оу -данирования) и немедленно помещались и фиксировались в 10$ ней -тральном формалине. В дальнейшем срезы подвергались гистологическим и гистохимическим исследованиям.

Определение уровня антителосодержащшс клеток (АТСК) проводили в органах 23 кроликов. Животные были разделены на 3 группы: I - контрольная группе - десенсибилизированные (ипгактныа) крошки, 2 - контрольная группа - кролики, сенсибилизированные норма -льной гомологичной сывороткой, 3 - группа - кролики, сенсибилизированные сосудистым антигеном в омеси с гомологичной сывороткой. В соответствующие ороки животные умерщвлялись путей сбеокровляяб-аия. При вскрытии брали для исследования кусочка аз правой доли печени, из нижней доли левого легкого; тимусе, селезенка, грубого и бршного отделов аорты, аз вредней грета сердца, еового подключичного лимфатического узла.

Постановка исследований проводилась по о ведущей ох ей о: яэ -

рзд введением антигене в пределах месяца у собак производили фоновые исследования, благодаря которым получали исходные показатели. Затем контрольным животным вводилась (контроль 2) нормальная гомологичная сыворотка, (контроль 3) стимулятор Фрейнда, опытным (группа сравнения) - внтиген гомологичных сосудов пятикратно, подкожно с интервалом в 3 дня из рвочета 0,5 мл (32-37 мг белка) не I кг наосы животного кз наружно-боковую поверхность в области живота и грудной клетки, после удаления те ротного покрове на ограниченном учаогяе выстригавиеы волос с последующим бритьём и дезинфекцией кожи 75-80#-ным спиртом.

Б последующем иммунологические, биохимические и инструментальные иооледовения проводили в динамике по определенным периодам - после последнего (пятого) введения нормельной гомологичной сыворотки, стимулятора Фрейнда и антигена гомологичных сосудов, в даль -вейшем на каждые 15-е сутки в течение 3-х месяцев. Патоморфологические исследования на 30, 90, 180, 360, 720 и 900-е оутки после последнего введения антигене гомологичных сосудов о учетом динамики развития структурных изменений.

Бое эксперименты проводились с соблюдением общих ыетодичео -ких принципов. В. опыт брались ообэки одного помета, массой 10-25 кг преимущественно оанцы большей частью после дегельминтизации примерно одного возрасте (1-2 года), что определялось общеизвестный традиционным методом (по зубвы). До опыта животные 7-10 дней содержались интактвыми, чтобы иметь возможность удостовериться в их нормальном физиологической ооотоянии. Содержание, кормление ообах до опыта и в процессе экспериментальных исследований были идентичными.

Кровь для воех анализов забиралась в одно и so же время утром, строго натощак на вен бедра в голени о обязательным собяодо-

нием условий всоптики. Все анализы проводились оразу после забора крови. Исследования проводили в строго стандартизированных уело -виях (о соблюдением предосторожностей, необходимых для изучения системы свертывания крови), в определенные периоды. Показатели последних сравнивались с исходными (при необходимости сравклва -лись показатели отдельных периодов].

Наблюдения проводились в условиях хронического опыта (имму -нологические, биохимические и инструментальные исследования в течение 3-х месяцев, а патоморфологические в течение 2,5 лет) в динамике развития процесса.

Для изучения состояния микроциркуляторного локэ брыжеечных сосудов опыты проводились на 50 половозрелых крысах - самцах. Приготовление гомологичного енгагена сосудистой ткани ивтакзных крыс, сенсибилизация и изучение динамики микроциркуляторных изменений проводились по вышеописанной схеме.

Для изучения влияния иммунизации антигена гомологичных сосудов на формирование аллергического (аутоаллергического) поражения интимы сосудов был использован комплекс классических иммунологи -ческйх, биохимических и патоморфологических методов, направленных на выявление степени сенсибилизации организма и развития патоло ~ гического процесса.

Для обнаружения противоорганных антител были применены: непрямой метод инмунофяюоресценциц тканей ( А.Соопв, 1954), реакция пассивной гемагглютинации ( й.воуаеп, 1951) и преципи -тации в геле ( о.оис2гЬег1опу, 1949).

Из клеточных реакций включилась реакция аутокейкоцитояиза по А.П. Карапага (1971), реакция аллергической альтерации нейтрофалол по В .Л. Фрадюпу (1962), роакияя непрямой догрэяующии базофияов ('.ее-.: Шелли) ( 7,5:-. 1962) з модификации А.Л. Польн^ра

<15Ч>5).

При этом для изучения клеточных реакций предварительно производили подбор разведения (рабочей дозы) антигена гомологичных оосу -дов, при которой происходило наименьшее повреждение нейтрофилов и базофилов.

С-реактивный протеин (С-РП) определяли методом н.Andereсп, Мс Carty (1950) в модификации A.A. Яыпольского (1958) и М.П. Пашнина (1961).

Концентрация общего белка в оыворотке определялась рефрактометрически ( г/л ).

Белковые фракции сыворотки разделялись методом горизонталь -ного электрофореза (аппаратом ЭФА-1) на бумаге по А.Е. Гурвичу.

Электрофорезом на бумаге ( B.swann, 1953; в модификации Л.К. Бауман, X96I) и в полиакриламидноы геле (Дель - Куру -Кальке в модификации К.Я. Маграчевой, 1973) разделялись фракции липопро-тоидов сыворотки.

Концентрация свободных аминокислот ( САК ) сыворотки крови (ныодь/п) определялась методом бумажной, нисходящей хроматографии по К.Х. Ходниеву и Ю.М. Ыусаеву (1965); общего холестерина (миОЛЬ/я) - ПО S.llcti (1962), фосфолипидов (ыыоль/л) - по A.Svanborg, L.Sveneroholm (1Э61), триглицеридОВ (мыоль/л) - ПО L.Carloon (I960, 1963) и H.Ignatcneca (1964), связанного с белками йода (СБЯ) (ныоль/л) - по модифицированному методу s. Barker (1961).

Липидные компоненты (фоофолипиды, Н8Ж, свободный холесте -рин, триглицериды, вфиры холестерина) сыворотки (шоль/л) определялись путем тонкослойной хроматографии по методу Ю.А. Барышкове ( 1965, 1967 ).

Для изучения функционального состояния свертывающей и проти-восвертывакдей системы крови использован комплекс тестов, которые

достаточно полно характеризовали все фазы свертывания крови -концентрация фибриногена (г/л) определялась экспресс методой по Ю.И. Голикову (1971); уровень антиплазмина (в титрах) - по модифицированному методу В.П. Казначевва (i960); концентрация гепарина (мг%) - по методу З.С. Баркаган (1971); фибринолитичвскоя активность цельной крови - по М.А. Котовщиковой, Б.И. Кузник (I97I). Кроме того, производилась тромбозластографическая регистрация процесса свертывания крови (U.A. Котовщикова, I97X; С.П. Пинкус, 1972; К. Раби, 1974; H.Harter, 1948).

Состояние эндогенных факторов и проницаемости капилляров изучалось путем определения гиалуронидазной (В.И. йоффе, 1962) а внтигизлуронидэзной ( R.Quinn, . 1948; w.Kochler, 1959) активности (в титрах) сыворотки крови а при поыовда флворесцеинозой пробы (мин.) - по методу H.A. Ойвина, В.И. Ойвина, B.C. Богдаво -вой (1950, 1951).

Артериальное давление определялось на изолированном кожном лоскуте (по Ван-Лееpcyuy, X9II) сонной артерии аускультативпо (по Н.С. Короткову - Ц.В. Яновскому, 1905), при нахождении собак в станках после установления у них спокойного состояния и полной адаптации к обстановке.

Ыикроциркулазерное русло брыжеечных сосудов изучалось на беспородных половозрелых белых крысах (сенцах) весом в 200-300 г (A.U. Чернух и ооавт., 1975), наркотизированных пентабарбктэлоы (нембуталом) внутри^брюашнно из расчета 3-5 ыг на 100 г. мессы кивотного о использованием устройства A.n. Гусейнова (1969).

Изучение закономерностей развитая аутоиммунного процесса* основанное на данных объективной оценки качественных в количественных изменении магистральных сосудов (аорта, сонные и бедрев -¡ше артерии), производили путем морфометрии (планиметров) по

Г.Г. Автандилову (1970, 1980).

Состояние клеточного состава, степень инфильтрации липидаыи и реактивного разрастания элементов соединительной ткани (зласти-чеоких и коллагеновых волокон) в сосудистой стенке определялось путем проведения патоыорфологических исследований окрашиванием срезов сердца и крупных сосудов (аорта, совные и бедренные артерии) геызтоксилин-эозиноы, по Ван-Гизону пикрофуксиноы, по Гей -денгвйну азокармином, по Вегерту, Суданом Ш и 1У.

Цифровой материал обрабатывали методами вариационной статистики (Е.Л. Ноткин, 1965; N.Baiiejr, 1963), логарифмированием, о применением одно- и двухфвкторного дисперсионного, корреляционного и регрессионного (H.A. Плохинский, 1969; A.U. Ыерков, Д.Е. Поляков, 1974; Е.В. Гублер, 1978) анализа.

- о 0 о -

Считаю своим долгом выразить глубокую благодарность доктору медицинских неук, професоору Г.Г. Автандилову, доктору медицин -ских наук, профессору Е.П. Фролову и доктору биологических ваук, профессору В.Г. Ерысину за помощь в организации работы и постоянную консультативную поддержку при её выполнении. Приношу свою -признательность доктору медицинских наук, професоору Ю.А.Князеву, кандидату мед.неук I.1I. Туркиной за помощь в выполнении фрагмента работы (тонкоалойная хромахография и злоктрофоретичеокое разделение шшопротеидов в полиекриламидном геле), аоо. кафедры микро -биологии кандидату мед.наук Н.К. Улугходкаевой в выполнении реакции иммунофлюореоценции тканей по Кунсу, авм. директору вычисли -тельного центра Андиканокой области кандидату каукВ.П. Апрокойку за помощь в стагиогичеокой обработке результатов исследований (вычисление коэффициента корреляции и регрессии).

РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТОВ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Для выяснения, кэкое дейотвие оказывает введение в организм экспериментальных животных (собак) отимуляторз Фрейнда и нормальной гомологичной сыворотки на антигенный "состав гомологичной ткани сосудов, на характер реактивных сдвигов был проведен комплекс (иммунологических, биохиыичеоких, инструментальных) контрольных исследований.

I. Исследования влияния стимулятора Фрейнда

Проведенные исследования показали, что стимулятор Фрейнда вызывает небольшую активацию образования геыагглютинирующих антител (Р<.0,05), увеличение показателя лейкоцитолиза (КЛЛ) (Р < 0,001), % повреждения нейтрофилов (ППН) и С-РБ (Р <-0,01), продолжающееся по 15-30-е сутки. В дальнейшем их уровень начинал уменьшаться, достигая исходных величин нэ 60-75-е сутки исследования. Тест Шелли (ПДБ) постепенно нарастая, достигал своего предела на 30-е сутки исследования (Р >0,10). В последующие сроки исследования % дзгрэнуляцаи бэзофилов уыеньыался. Это уменьшение ПДБ продолжалось по 75-е сутки, достигая исходного уровня на.20-е сутки исследования.

Таким образом, введение в организм собак одного полного стимулятора Фрейнда вызывает в начальные периоды исследования невы -рэжанные изменения уровня геыаггдютивирующих антител, клеточных реакций (йейколизис, ППН), С-РБ и функциональные сдвиги со стороны дегрануляции базофилов (тест Шелли).

Количество общего белка незначительно увеличивалось (Р<0,05) после последнего введения стимулятора Фрейнда, а начиная-о 15-го дня постепенно начинало снижзться, прлояиаэяоь к исходному уровню

не 75-е сутки.

Белковые фракции сыворотки крови несколько уменьшались: фракция альбуминов (Р<0,05), о() и ^ -глобулинов (Р'0,10), незначительно увеличивались и ¿'-глобулины (Р>0,10). С 15 дня исследования уровень фракций альбуминов, сА, и ^-глобулинов начинал нарастать и достигал исходного уровня на 75-90 сутки. С?^ и К -глобулины постепенно уменьшались и приближались к уровню фона.

Стимулятор Фрейнда вызывал вначале некоторое увеличение (Р< 0,001) -фракции и уменьшение (Р<0,001) ^-фракции липопро -теидов. В последующие сроки отмечалось постепенное умевьиение фракции и нарастание ^-фракции липопротеидов и приближение их к исходному уровню.

Таким образом, введение в организм собак стимулятора Фрейнда не сопровождалось значительными сдвигами общего бедке, белковых фракций и липопротеидов сыворотки крови.

Проведенные исследования показали, что стимулятор Фрейнда существенного влияния на дипиды (холестерин, лецитин, 2риглицеради) сыворотки крови не оказывает. Вначале отмечалось незначительное уменьшение их уровня (Р>0,10). С 15 дня концентрация яипидов начинала нарастать, выравниваясь на 30-е сутки о уровнем фона и удерживаясь в этих пределах в течение последующих сроков исследования.

Таким образом, введение стимулятора Фрейнда не оказывало заметного влияния на уровень липидов (холестерина, лецитина, три -глицеридов) сыворотки крови.

Изменения факторов гемостаза проявлялось начальной активацией (Р >0,10) фибринолитической сиотемы плазминоген - плазмин, которая с 15 дня проявляла признаки уменьшения активности и прибли-

жения к активности уровня фона. На 45-е сутки происходило вырзв -нивэние с исходным уровней.

Введение стимулятора Фрейнда вызывало некоторое уменьшение активности внтиплазнина (Р -г 0,05)^ концентрации фибриногена и гепарина (Р <0,05). В дальнейшем, начиная с 15 дня исследования титр антиплазмина, концентрация фибриногена и гепарина постепенно нарастали, достигая исходного уровня на 45-е сутки.

Введение стимулятора Фрейнда вызывало незначительные изменения факторов проницаемости. Они характеризовались небольшим увеличением гиалуронидазной активности (Р<0,05), некоторым нарастанием антигиалуронидазной активности (Р>0,10) и уменьшением времени свечения флюоресцентна (Р> 0,10). Нэчиная с 15 дня исследо -вавия происходил процесс нормализации и выравнивание факторов проницаемости с уровнем фона. В последующие сроки исследования они удерживались в пределах исходного уровня.

Таким образом,стимулятор Фрейнда оуцесгаенио не влиял на состояние факторов гемостаза и ферментативной активности эндогенных факторов проницаемости.

Функциональное состояние цитовидной зелезы по покэзэтеляа СБЙ и уровень артериального давления после введения стимулятора Фрейнда незначительно изменялись в начальные периоды исследования в виде уменьшения (Р> 0,10) СБЙ и повышения (Р>0,10) АД. В последующе сроки исследования происходило быстрое выравнивание их (СБЕ и АД) о исходными показателями и далее они удерживались в этих пределах до конца (по 90-е сутки) исследования.

Таким образом, незначительно повышая функцию щатовидлой га козы в начальные периоды исследования, стимулятор Фрейнда сусдеотаоз-но не изменяет уровень АД у исследуемых собак.

2. Исследования влияния нормальной гомологичной сыворотки

Проведенные исследования показали, что в ответ на введение нормальной гомологичной сыворотка происходила незначительная (начальная) стимуляция образования гемагглютинирующих антител (Р < 0,05), некоторое увеличение показателя лейкоцитолиза (Р< 0,001) повреждаемости нейтрофилов (Р< 0,05) и уровня С-РБ (Р = 0,05). В дальнейшем начиная с 30-го дня их уровень постепенно уменьшался (Р ? 0Д0) и прибликался к фоновому показателю. Индекс дегрэнуляции базофилов (тест Шелли) в ответ на введение нормальной гомологичной сыворотки не изменялся.

Действие нормальной гомологичной сыворотки обусловило следующие изменения общего белка, белковых фракций и липопротеидов оы -воротки крови. Тек, после последнего введения нормальной гомоло -гичной сыворотки происходило некоторое увеличение общего белка (Р<.0,01Ь (р>°Д°)» ^ (Р <0,05) фракций глобули-

нов; уменьшение фракции альбуминов (Р> 0,10) и ^ (Р>0,10) глобулинов. Начиная с Х5-30 дня концентрация общего белка и белковых фракций постепенно нормализовалась и приближалась к фоновому уровню. Липопротеиды изменялись следующим образом: незначительным начальным увеличением сК -фракций (Р <0,001) и уменьшением ^-фракций (Р< 0,001), которые начиная о 30-го дня исследования такао выравнивались и приближались к фоновому показателю.

Полученные результаты обмене дисидов - холестерина, фоофоня-пиаов, триглицеридов - показан отсутствие нарушения о их стороны, так как нормальная гомологичная сыворотка не оказывала существенного влияния на их уровень (концентрацию) в сыворотке крови (Р> 0,10).

Денные, полученные при исследовании андогеявьсс факторов про-

ницаеыости и факторов гемостазе показали, что после последнего введения нормальной гомологичной сыворотки отмечалась незначительная начальная актизация фибринолятической системы плззыиноген--плазмин и гиалуронидазной активности (Р> 0,10), в то время кэк уровень антиплазыина, гепарина и фибриногена незначительно снижался (Р>0,10).

Начиная с 15-го дня исследования происходила постепенная их нормализация и выравнивание с фоновым показателем. Со стороны антигиэлуронидазной активности и капиллярной прони -цаемости существенных отклонений от фонового уровня не отмече -лось (Р? 0,10).

Полученные результаты показали, что взедение одной нормальной гомологичной сыворотки существенно не отражалось на состоя -нии эндогенных факторов проницаемости я факторов гемостаза, что является важным моментом в анализе и оценке изменений у животных опытных серий.

При оценке данных о функциональном состоянии щитовидной железы и уровня АД в течение всего периода исследования отиочагзоь некоторая тенденция к их увеличении (Р ?0,Х0).

Слабые антигенные свойства и отсутствие заметного влияния нормальной гомологичной сыворотки на иммунологические и биохимические показатели крови подтвердилось данными, полученными при проведении одяофзнгорного дисперсионного анализа. Проведенные исследования показали, что доля влияния силы нормальной гомологач -ной сыворотки на уровень геиагглютивируЕдих аитихая и квэгочаыз показатели (Р ? 0,10), белковые фракции и пипопротеадов сыворотка яровн (Р <• 0,05), уровень лшшдов и функциональное состотше видной аояезы (Р > 0,10), состояния фибрнпокса и факторов гзйо -стаза (Р »0,10), эндогенных факторов яронпцаеаоогя ао арзаяезио

со стимулятором Фрейнда несущественна - менее 40 % ( от 1,7 до 37,8) и статистически незначима (Р>0,10).

Обобщая подученные результаты, ложно заключить, что нормальная гомологичная сыворотка обладает олабыми гомоантигенными свой-' ствами и её роль в механизме образования противоорганных антител крайне ограничена, об этом свидетельствовал их низкий уровень и отсутствие в период сенсибилизации (по 90-е сутки). Низкий уровень С-РБ, невыраженные сдвиги клеточных реакций (яейкодизиса, ППН и теста Шелли); отсутствие существенных биохимических сдви -гов, изменения эндогенных факторов проницаемости при введении

I

нормальной гомологичной сыворотки, свидетельствовало о целесооб -разности её использования в качестве своеобразного эквивалента адшвавта (стимулятора) Фрейяда (Х.Х. Шерматов, Н.И. Пастернак, 1985) при приготовлении антигенов гомологичных сосудов и модели -ровании поражения оосудов.

3. Исследования влияния антигена гомологичных оосудов

Исследования антителосодержащих клеток (АТСК) (рис. I), гем-агглютинирующих и преципитирующих антител, С-РБ, клеточных реак -ций - лизиса лейкоцитов, альтерации найтрофилов и дегрануляциа бааофилов показали, что их уровень после гомоантигенной стимуля -ции чётко нараотал (Р с 0,001), достигая при этом значительно вы -ооких величин в продолжение всего периода исследования, двухфаа -нов течение процессе - смена периодов увеличения и уменьшения их количества - характерно для различных фаз аллергичеокого процао -оа - сенсибилизации и десенсибилизации.

При атом отмечалось проявление гипорчувствительнооти аамад -сенного типа не только в ранние ороки сенсибилизации, но и длительное о'ё сохранение (не менее *t-x месяцев), что имеет серьёзное

УРОВЕНЬ ЛНТКТСЛОСОДПРЖЛЩИХ КЛГгТОК В ОРГ/ЧНАХ

иголккоз пгк дтмгнил гомопоплчнык сосудов

г>гг>

!

. г;,,'1__

!

ом:

I

Р1У

9 от

001

Пг

ТОН v ' 10 60 75

дни ИССЛЕДОВАНИЯ

нитЛШЧ:" Е23- П'УДНЛЯ АОРТА " " ЕЯ- С1.ЛСЭСИКЛ

С'.ТЗ- Ы'ЮШНЛЯ.' АСРГЛ 1 ■'•'■1- ТИМУС

СПИ- ЛИМФА УЗЛЫ •

ГО

-о

30

Рисунок I

значение для исследования механизмов иммунологических процессов (А.Г. Артемова, 1970).

В комплексе реактивных сдвигов имелись как специфические иммуно -логические механизмы, так и ряд неспецифических, приобретающих специфическое значение.

Изучение белкового и липопротеинового спектра сыворотки крови собак при иммунизации антигеном гомологичных сосудов показало, что концентрация общего белка и уровень ^-фракции глобулинов начинали постепенно нарастать, достигая своего максимума к концу исследования (Р.*. 0,001), в то время как альбуминовая, с^, % -фракции глобулинов постепенно в течение всего периода исследований уменьшались (Ра0,001).

Фракции ^-глобулинов и Р-липопротеидов в начальные периоды исследования то увеличивались, то уменьшались, в поздние периоды исследования происходило стабильное увеличение (Р <0,001) их количества.

Анализ сдвигов свободных аминокислот показал, что на ранних эта -пах исследования они волнообразны, что, аозыогно, связано о фаз -ностью течения аллергического процесса.

На поздних этапах исследования количество всех аминокислот увеличивалось (Р< от 0,05 до 0,001), кроме аргинина и триптофане, концентрация которых резко уменьаалзсь.

Изучение характера нарушений уровня шзпидов (холестерина,ле-цншка, гркгдицэридои) а фракций общих яипидов (фосфолнпидов, ШШС, свободного холестерина, триглицерцдоз, афиров, холестерина) при иммунизации сосудисто-тканевым гомоанхигеноа показало, что для начальных стадий исследования характерна смена периодов уве -икчоаия и уменьшения их количества и активности. В поздние периоды аессадозания концентрация липидов сыворотки крови резко уволи-

- 29 -

чивалвсь (Р ¿0,001) и сохранялась до конца исследований.

Исследования функционального состояния щитовидной зелезы показали, что с первых недель опыта происходило постепенное поаизэ-ние <Р -í0,001) функции щитовидной железы и в разгар развитая аутоиммунного процесса она существенно понизилась. Результаты проведенных исследований требуют еще более глубокого изучения патогенетических механизмов этого процеоса, что будет предметов дальнейшие наша исследований.

Антигенное воздействие гомологичной ткани сосудов на функ -циенэльное состояние систем плазмииогев-плазкин-аитиалззшш, вы -зывало волнообразное течение процесса, смену периодов повысания я понижения их активности. При атом, если в поздние сроки посла окончания введения сосудисто-тканевого гомоантигена происходило угнетение фибринолитической активности систеиы плазминоген-плаз -мин, то её ингибиторная часть (антиплазыия), напротив, актшшзи -ровалась.

Сенсибилизация антигеном гомологичных сооудов вначале вызывала увеличение {Р <0,001) концентрации свободного гепарина оыворотш! крови, а в дальнейяои в конце исследования - его уыеньаениэ (Р < 0,05). Обратная зависимость по сравнению о уровнем гепарина отвечала сь со стороны фибриногена сыворотки крови - начальное yuons -шение (Р* 0,001) сменялось в дальвейЕеы aro постепенным увеяаче -ниеи (Р<0,001), продолжавшимся в течение всого периода исосэдо -ваний.

Результаты изучения одвигов сиотемы гиапуровадазы-вптагиалу-ронндаза показали, что в ответ на введение антигена гсаапогнчншс сосудов возникали определенные авиененяя в фупнциоиошюы соогоя-вии кинетика згой систеин - увеличение гвояурсвидовзой и уиоаьсо-ние ангнгкаяуронидазной активности (Р< 0,001).

Наблюдения аа изменением капиллярной проницаемости по показателям флаоресцеиновой пробы позволили установить усиление проницаемости на 45-е и 60-е сутки (Р^ 0,001), а в остальные сроки исследования волнообразный характер - смена периодов увеличения и уменьшения проницаемости.

В ответ на антигенную стимуляцию наблюдалось изменение цифр артериального давления: его повышением (Р* 0,001), значительным изменением в микроциркуляторном русле брыжеечных сосудов о замедлением кровотока, изменением реологических свойств крови; досхо -верными сдвигами в процессе I и П-ой фазы овертывания крови, появлением наклонности к гиперкоагуляции, проявляющейся в понижении времени реакции, величины константы свертывания и константы уп -лотнения, признаков уменьшения константы тотального свертывания крови (Р^-0,01).

Таким образом, проведенные исследования показали возникновение специфических аутоантитвл к тканям сосудов, уровень которых зависел от степени развития повреждения соответствующего гомоан -тигену оргвна; повышение уровня общего белка и лисидов крови, сдвиги в белковых фракциях и р~пшопротеидов,, диобалано свободных аминокислот, эндогенных факторов проницаемости и факторов гемостаза при воздействии антигеном гомологичных сосудов. При этом сдвиги биохимических показателей крови характеризовались волнообразными колебаниями в их концентрации, что является достоверным в свете последних представлений о патогенезе аутоиммунных заболеваний, для которых характерна двухфазность ферментативных сдвигов. Это обстоятельство имеет важное практическое значение, так как позволяет углубить представление о патофизиологическом механизме аутоиммунного процесоа.

Обработка результатов проведенных исследований нашла подт -

верждение при количественном определении значимости и силы влияния антигена гомологичных сосудов, определении их достоверности - двухфакторным и одвофзкторным дисперсионным анализом, который показал, что для исследованного комплекса характерна значихель -ная доля влияния организованных факторов (Р< 0,001) (таблицы 1-3). Это означает, что введение антигена гомологичных сосудов в нормальной гомологичной сыворотке определило в значительной степени все сдвиги со стороны иммунологических и биохимических показате -пей. В исследованном комплексе влияние сипы антигена гомологичных сооудов на иммунологические и биохимические показатели более резко выражено (Р< 0,001), чем нормальной гомологичной сыворотки, оказывающей слабое действие (0,55 - 10,2$; 1,1 - 26,9%).

При определении значимости фактора времени однофакторным дисперсионным анализом было выявлено, что выраженность иммунологи -чееких и биохимических сдвигов зависит от продолжительности наб -людения (Р^-0,001) и развития патологического процесоа.

Для изучения степени поранения аорты в зависимости от коли -чественных изменений иммунологических показателей (РПГА, АТСК) производили вычисление коэффициентов регрессии. Сравнение' меры количественной связи РПГА и АТСК проводили с атеросклеротичесним показателем, степень пиоцэди лкпоидоза аорты производили на 30-е и 90-е сутки, а такзе ИИФ органов с уровнем РПГА (таблица 4).

Результаты анализов показали: Увеличение АП приводило к уменьшению РПГА и ИИ® тимуса и увеличению ИИФ грудного и бршного отделов аорты, селезенки и лимфатического узла.

При анализе количественной связи площади липоидоза аорты (им) о иммунологическими показателями выявлено: увеличение площади ли -яоидоза приводило к увеличению РПГА, ИИФ брюшного отдела аорты а

ХАРАКТЕРИСТИКА ВЛИЯНИЯ ВВЕДЕНИЯ АНТИГЕНА ГОМОЛОГИЧНЫХ СООУДОГЗ НА УРОВЕНЬ ГПМАГГЛЮТИИИРУЮЩИХ АНТИТЕЛ И гСЛГгЮЧНЫЕ. ПОКАЗАТЕЛИ ПРИ СОПООТАВЛКНИИ С СВЕДЕНИЕМ

ГОМОЛОГИЧНОЙ СЫВОРОТКИ

'ЛМ'Д 11 слокии 1 ига тео т Ш Ь К А И ЛШ0ЛМ5ИС П ПН

г1г [оуфсштигш .69,7;"" у ^ *» » * 67 ххх* б>. У"*

V гоу.мямротки 8.6 хх 0.55 10,2 *** 2.2

сочетякноошшио 0Г-ОЦХ фС.КТОГОЕ 1:4 6,6 " 4 х 8,6 *хх 2,6

Г, 2 СЧММЭДНф^ ДСЙС|?И5 оргенизоганнмх и ф а к.торс-6 79,6хх/ 85 УХ* Ъ8.1

к5 СЧММС1РН00 В«ЙС1ВИ' | И^0рГШИ0««ННИХ ¿з, /"СДУЧс го?о к * ¡6,2 19.9 Ю 28.5

¡1

Примешие : х- р < о,о?

ух-Р < «.о)

ХУХ-р < 0,001

ХАРАКТЕРИСТИКА ВЛИЯНИЯ ВВЕДЕНИЯ АНТИГЕНА ГОМОЛОГИЧНЫХ СОСУДОВ НА УРОВЕНЬ ОБЩЕГО БЕЛКА, БЕЛКОВЫХ ФРАКЦИИ И ЛИПОПРОТЕИДОЗ КРОВИ ПРИ СОПОСТАВЛЕНИИ С ВВЕДЕНИЕМ

ГОМОЛОГИЧНОЙ СЫВОРОТКИ

■ -■■■..... ; т$}«гем1 дмдепстомюи \ ИСПАНИИ • * р&лко&ие Фракции шмротеидм

05ШШ кш # Г А 0 5 V Д И Н М

ОС а

1 1 - £ <Г

! 1 и* \ гсмоантигена- ; а< , 14 -- ---

72.8 "" 9 *" 60 00.8 >т 91.3 11.2"' ИтРЖ 39,2 УХ XV 40.5

п " II ~ ' 1 ~ ! и' 3 ^ ГфМОШОрОТКИ 5.7 " 3,4 5.8* М 1.1 х 8.5 хш* 24.6 28Л*"

г г сочегсшмое ми^аие. [и ОЮИХ 4><КТОГОР —10с» 15.2" 16 0,2 1 « 23 ■«Г 24.3 «ас 18,7

О п2 суммарное яейстрке I сргаии>0б0инмх 1 , ♦ 8 0,7'" 27,6' 67"* 92"* «¿Г 42.7" 88 87,6

п» суммарно« действие (суч-аитиИ^чорэ*. 11.5 64.9 28.6 '6.7 "" 5.9 59,1 15.5 13.5

ПРИМЕЧАНИЕ: *

1аблица 3

ХАРАКТЕРИСТИКА ВЛИЯНИЯ ВВЕДЕНИЯ АНТИГЕНА ГОМОЛОГИЧНЫХ СОСУДОВ НА УРОВЕНЬ ЛИЛИДОВ КРОВИ И ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ПРИ СОПОСТАВЛЕНИИ С ВВВДЕНИЕМ

ГОМОЛОГИЧНОЙ СЫВОРОТКИ

имзмми э'дадаош дздекяи ТйВДтЧ холесторин фосфшвдм СБИ

. | гомоантигш уу *<** е>2 хх" 45*"* 22.3х"

(| 3 -с 6 х*х 10.9 17

<\ Е л г мчекшешние Ьб ^5оих факторе* 6 --- 10,2 *хх xxx

-С п2 счммарное дейстю 89 "" 75 *хх 1У ***

1 * 1 ° о2 шчсш&рйшиене- 1 »д. 0рг«нц}о&сших /случс1й | нмх/^актот. . Я5 26.6 22 564

примечание: х-р<$,05

xx" р < 0,01- .

х*х -р < о.001

уменьшению ИИФ грудного отдела аорты, селезенки, лимфатического узла и химуоа.

РПГА выявляет увеличение ИИФ грудного отдела аорты, вначашэ уменьшая РОГА, в последующем его увеличивало, то есть увеличение антитепооодеркащих клеток в грудном отделе аорты приводило к по-выазнию уровня гемагглютинирущих антител;

- увеличение ИИФ брюшного отдела аорты сопровождалось с оэмого на чада увеличением РПГА, so есть уровня гемагглютинирующих антител;

- увеличение ИИФ селезенки приводило к небольшим сдвигам в сторону увеличения уровня гемагглютинирующих антител;

- увеличение ИИФ лимфа узла и тимуса сопровождалось резким пони -гением уровня гемагглютинирующих антител.

Таким образом, проведенные исследования по выявлению мбры количественной связи показали, что площадь (мм) поражения (липои-доеа) аорты непосредственно зависит от количества антителосодер • аащах клеток (АТСК) органов и уровня гемагглютинирующих антител.

При атом, чем больие антителосодоржащих клеток в грудном и бршыоы отделе аорты, тем иеиьас юс в имиунокомпатентных органах (селезенка, тимусо и лимфатическом узла).

Проведенный двухфакхоргшй и однофакторный дисперсионный и регрессионный анализ дает оснозание утверкдать, что иа более вы ооккй уровень иммунологические и биохимических показателей крови собой опытной группы оказывал достоверное влияние фактор иммуни задав антигенов гомологичных сосудов и фактор времени, о также и оуиуариоо действие.

13 пользу вышесказанного говорах факх отсутствия существенных сдвигов со стороны иммунологических и биохимических показателей аром под действием нормальной гоаовсгачиой сыворотки как ородк организованных факторов в опытной rpv¡mo собак, так и у skboihlt

- 3? -

ишлувизированных только норнальной гомологичной сывороткой. Б то ае время нормальная гомологичная сыворотке в комплекса оо специфическим антигеном гомологичных сосудов определяет и з значительной степени обуславливает все сдвиги - стимулирующее алия -нио и повышение уровня антителосодерзащих клеток (АТСК), протгаю-сосудистых антител и клеточных реакций; усиление эндогенного синтеза высокого уровня биохимических показателей. Всё зто свидетельствует о слабых гомознтигенных свойствах нормальной гомологичной сыворотки, действие которой модно расценить пан здъювавтное.

Пзтоморфологичэскиыи исследованиями отмечено увеличение площади изменения интимы аорты.

ЫорФомвтрические (планиметрические) исследования выявили поста -пенное увеличение липоидоза интимы сосудов, достигающего своего максимума на 180-е сутки опытов, в дальнейшем оно ослабевало а начинали преобладать явления склероза.

Гистологически выявлялось постепенное изменение формы зндотеяи -ельных клеток. О сечением времени это явление становилось всё более выраженный, появлялись признаки их дистрофии. Субавдоталиэльный слой постепенно разрыхлялся и истончался, то -гами во выявлялся. Отмечались признаки накопления гдиказешгнопгк-кэнов, которые образовывали очаги скопления. Эластичвокая оболочка истончалась и разрыхлялась, происходило накопленке белковых зещеога я пропнгывааие та тканевых целей, Выявлялась узоскэпш зоякчеотвэ элементов соединительной тканы, кояяаголовых п рогпиу-ливовда волокон. Зги изменения развивались тдпввтв в грудяся отдало, чем в области дуга в бршвем от до лих аорты собак. Шоопа -довония показали, что ояяоявнио пиппдов по сравнения о еошзчйой -пом гт1ко8оиипогшкаяов и белковых яощосгз канас вырзкэпо. Вяачз-

ле дипнды откладывались в субэндотелиальном слое, пропитывая ин -тиму. В дальнейшем они появлялись и мезду эластическими волокнами. В поздние сроки - 720 и 900-е сутки эксперимента определялись одиночные фиброзные бляшки.

В миокарде реакцией на повреждение являлись деструктивные процессы - дистрофические, некробиотические, некротические, пе -реходя&дае в поздние этапы исследования в фиброз.

Таким образом, у интактных животных с учетом их всеядности моино воспроизвести эутоалпергическую альтерацию эндотелия сосудов без дополнительного кормления холестерином (алиментарная ги-перхолестеринеыия). Созданную модель повреждения сосудов следует рассматривать с экспериментальной и клинической точки зрения кэк феномен предрасположенности к различным морфофункциональным нарушениям как эндотелия, так и всей сосудистой стенки.

Анализ результатов иммунологических, биохимических и паю -морфологических исследований позволяют считать, что реакция организма экспериментальных животных на воздействие антигена гомоло -гичных сосудов обусловлена появлением антител. В динамике развития процесса они обнаруживались циклично, предопределяя его обострения, что является достоверным в свете послед «них представлений о патогенезе аутоиммунных заболеваний, для ко -торых характерна двухфазность процесса (А.Л. Мясников, 1965). Однако, независимо от причин и механизмов нэрастения противосооу-дистых антител и завязывания аутоадлергической ситуации, местом первичной специфической их фиксации, образования комплекса анти -ген-антитело и его катализа являются рвтикудо-эндотеливльные (со-оздиете) структуры.

Интима оооудов становится местом, откуда начинается аллоргичеокая альтерация а развитие органного аллергического процесса, динвыика

которой складывается соответственно фазаы, описанным А .Д. Адо (1963). Этим объясняемся первичность и преимущественная поракзе-ыость сосудов при аллергии вообще, э также наиболее вырэггонныв тканевые изменения при аллергических реакциях в крозеносных со -судах (А.И. Абрикосов, Е.А. Рудник, 1935; H.A. Скворцов, i960; H.A. Куршаков, 1962).

Нервномедиаторные вещества, обуславливающие характер аллергической реакции, первично накапливаются в интерстиции. Отсюда понятна та преимущественная пораыаеыость его при аллергических про -цессех, которая давно отмечалась (А.И. Абрикосов, Т963; й.Л. Рапопорт, 1957).

Возникновение подобной ситуации связано с фактором первичного повреждения клеточно-тканевых, белковых структур, образованием большого количества эутоантигенных комплексов, обуславливающих пассивный, гипериьшунизированный эффект и высокую напряженность выработки противососудистых антител. Поэтому независимо от характера повреждающего фактора, детерминирующего развитие патологи -ческого процесоа, в его патогенез включается аутоэллергический компонент, замыкая тем самым "порочный круг" процесса, обуслав -ливая хроническую альтерацию сооудов и длительность течения по -тологического процесса.

Противососудистые антитела могут стать ведущим звеном патогенеза в поддераэнии напряженности и длительности течения патологичес -кого процесса, обуславливая его обострение при кагдой новой продуктивной фазе иммуногенеза.

Специфическая направленность воздействия антигена гомологичных сосудов подтвердилась преимущественным поврездениеы аорта и крупных артерий, ткань которых использовалась s качестве антигене, и возяккловениоы свойственных зля поврежденных сосудов ииму-

вологячеовдх, биохаиачеота и азтоморфологических кзменониЗ.

В эксвершевто аоано воспроизвести только иодзнь яэгояоги -чсского процесса, который патогенезачески связав с возникновением ¿¡о-зояогических форв патологии, а частности сосудов.

Так как основный i:p:;xep¡reu в построен;:« патогеветаческой вракговкн эксперимента e»boü иодзки является степень её эдакзат -BOCS1J повреждении соохветстзуЕ^сго органа, so введением антигена гомологичных сосудов в воруэкьвой гомологичной сыворотке дости-

гззтся ЗОСПроИЗЕвДЗВКЗ ор-ГиВОЕЬПОИ 130дэш ЯОрЭЕОВЯЯ EBÍUMU со -

судов, когорзя макбате бжзкз к язяевеншш в сосудах, которое всхрэдаозся у чееовекз.

Суезсгвуог к srакая гочкз зрзвш, чго вазаквзыв явлеввя пое-рагдоЕЛп иаг^ш сосудов коrys осуедсхяшн&ся as еоеько аузсс^г -иуиакиа вошхязкезш: шюярогеядаоЗ вргроду, во и друиш; шшуа -«uatí ийшлексгви, зоззикаащиая зз oprasasue ладей как рзаадга в 0S232 з:а раазшчвые чуяеродвыз u scús'issnmo анклавы (E.ÍL Сггир-ксг, 1;.С. Гарии, 1932).

Исходя дэ эхого, паойходйло csasessiss, «20 язкеяввгя, ярвкезэяпад Ера Еззяовда ааяа'оаа ушояэккенг ССО^ЙЗЗ, еогус вата ссзяшв-ен догазурзиша базлае ssu езк в норждазоЗ cuso -

рехкэ а усгашах огсукиэуш: ззшяогыа еггшгшш юшгэк-

«и, го 320 ясззолязг es» зазгрзпогзроззгь еа с вуювтяааооЛ са-гсрсязоа (яорва»воЗ сгзэроггоа jq?csa чзшгэгз), a дондоЗ швзс вг&гщзгься вадзйлэз ¿aceniin щш рззюкзш: сзгшайачазЕгз сззмп-jusss, «120 обосясзшсзз? ярзгшарзозх* ватах сзагаа.

Анааза рээулыазаз кгвуаэшкизедах, C^xzízkssixz, #52кцдо-еввьзах, адэр^нкшяесз» «ссаэдогавяа о гшзжвзеи сзага сведу вк«:, о Т&22Э звашаш hisopa saaiyasaegja а выявив орозедзош йдцвицо-азхсцойагоикосшй а&$звдши позвояязг очвгазаь, тао ссс-

бенности, вызываемые введение« в организм собак антигена гомологичных сосудов, обусловлены альтеративныы действием комплекса противотканевых антител и собственно антигенов сосудистой стен -ки, что свидетельствует о зависимости механизма развития последних от поврездения соответствущего гомоантигену органа. Коып -леке иммунологических, биохимических и патоморфологических изменений в воспроизведенной модели вутоаллергической альтерации оо-оудистой стенки овязэн с аутоиммунными механизмами, так как введение в организм собак одной нормальной гомологичной сыворотки не вызывало вышеописанных изменений. Таковые также не обнаруаи -вались у интактных собак при параллельной обследовании их о опытными.

ВЫВОДЫ

1. В исследованиях, проведанных не разработанной нами эк -спериыентальной модели хронического аутоиммунного поврездения сосудов (пятикратная иммунизация аивотных антигеном гоыологич -вых сосудов в нормальной гомологичной сыворотке) установлен комплекс нарушений, заключающийся в иммуннологической переотройке, изменениях метаболизма и деструктивных изменениях интимы сосудов.

2. Иммунный ответ организма на введение сосудистого гоыозн-тигена характеризуется образованием специфических антител и формированием состояния общей и тканевой аутосенсибилиэ8ции, чзо подтверждается реакциями преципитации в геле, пассивной гемэггин тинации, а такае увеличением количества антителосодергащих клэ -ток (АТСК) в лимфоидвых органах ив стенке сосудов, повыввяивы уровня специфической альтерации нейтрофилов, дегронуляцин бэзо -фипов. Установлено, что АТСК, выявленные реакцией йммунофпворао-

ценции, располагаются преимущественно в интима грудной аорты.

3. В ответ на введение антигена гомологичных сосудов в кро-вй животных изменяется содержание общего белка, липопротеидов и липидов, которые максимально выражены на 45-60 дни иммунизации

и характеризуются в уменьшении уровня с^-липопротеидов и увеличении ^»-липопротеидов, холестерина, фосфолипидов и триглицери-дов.

4. Существенные изменения обнаружены в параметрах свергы -восдай и противосвертьгаающей систем крови с максимумом сдвигов но 30-й день иммунизации, в активности (повышение) плазминоген --плазнина, отмечены уменьшение концентрации гепарина и фибриао -гена, снижение титра активности антиплазмина.

У сенсибилизированных животных отмечается также укорочение времени реакции, уменьшение величины константы свертывания кро -ви, константы уплотнения и константы тотального свертывания крови, что свидетельствует о тенденции к гиперкоагуляции.

5. Повышение у иммунизированных животных капиллярной проницаемости (увеличение гиалуронидазной и уменьшение антигиэлурони-дазной активности) сочетается с нарушением микрогемоциркулиза -ции: сужение капилляров, неравномерность и извитость их калибра, замедление (не 15-30-е сутки) кровотоке, наличие ыаятникообрза -ного и ретроградного движения, резкое уменьшение количества функционирующих и истинных капилляров, появление участков гене -ревизованного стаза. В последующем (45-90-е сутки) наблюдается уоугубление этих изменений: появляются крупные бесформенные аг -регаты из эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов, отмечается беспорядочное расположение капилляров, их удлинение, извитость и деформация.

6. Вызванные гомоантигеном структурные изменения в сооудвх 1

развиваются, прежде всего, в интиме сосудистой стенки и закяю -веются в повреждении эндотелиальных клеток, липоидозе (максимум развития к 180-му дню), очаговом и диффузном накоплении кислых а нейтральных мукополиоахаридов, белковых масс и разрастании зоединительной ткани. Указанные нарушения укладываются в кзрти-;;у хронического аутоиммунного воспаления, поддерживаемого реакцией аутоантиген-аутоантитело. По картине морфологических иэру-аений эти изменения сосудов наиболее адекватны артериосклерозу.

7. Нарастание иммунологических изменений предшествуют био-сйыическим сдвигам и морфологическим нарушениям стенки сосудов, 1уо указывает на ведущую роль аутоиммунных процессов в генезе юрфологических изменений интимы сосудов склеротического харак-;ер8.

СПИСОК ПЕЧАТНЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Шерматов Х.Х. Состояние систем гиаяуронидаза-антигиалу-рощдазз и сосудистая проницаемость при ангиоспецифической сен -сибилизацли. // Тезисы 2-го Всесоюзного съезда патофизиологов. -Ташкент, 1976. - Т.2. - С. 300.

2. Шерматов Х.Х. Липидный профиль крови к состояние зндо -генных факторов проницаемости при ангиоспецифической оенсцбили -вации.// Кардиология. - 1977. - te 8. - С. 146.

3. Шерматов Х.Х. Липидный профиль при экспериментальном атеросклерозе. // Актуальные вопросы кардиологии и нефрологии. -Ташкент. - 1977. - С. 13-14.

4. Шермзтов Х.Х. Фибринолитическэя и антисвертывающая сис-теш при ангиоспецифической сенсибилизации. // Актуальные вопросы кардиологии и нефрологии. - Ташкент, - 1977 - С. 136.

5. Шерпатов Х.Х. Липидный профиль крови и состояние зндо -генных.факторов проницаемости при ангиоспецифической сенсибили -аации. // Механизмы патологических процессов. - Ташкент, 1978. -ВыПоЗ. - С. 38-43.

6. Иерматоз Х.Х. К методике определения содержания триглк-цоридов, разделенных с помощью тонкослойной хроматографии. // Лоб. дело, - 1979. - te 3. - С. 188.

7. Шерматов Х.Х. К методике определения хриглицоридов,раз-дзшшешх с помощью тонкослойной хроматографии. // Достижения неуки, внедренные в практику здравоохранения. - Аьдшизв, I98X. -С. II7-II8.

8. Шераатов Х.Х., Дкалмлов Ц.М. Влияние гомологичных тка -новых антигенов гелудка и сосудов на состояние эндогенных факторов проницаемости.// Тезисы докладов 3-го Всесоюзного сьееда

патофизиологов: "Повреждение и рэгулягорныз процессы организма", Москва-Тбилиси, 1982. - С. 42-43.

9. Шерматов Х.Х. Прибор для массовой окраски мазков.// Лаб. доло, - 1983. -6 7. - С. 13-М.

10. Шераатов Х.Х., Турсунов С.О. Влияние антигена гомоло -гичной ткани сосудов на уровень свободных аминокислот сыворотки крови (экспериментальное исследование).// Мед.журнал Узбекисга -на, - 1984. - К 7. - С. 58.

11. Шерпатов Х.Х. Нарушение обмена яипидов и эндогенных факторов проницаемости в патогенезе ишемической болезни при эк -спериментальном атеросклерозе. // Сб.научных трудов "Ииеиичес -кая болезнь сердца", - Ташкент, т 1984. - С. 110-117.

12. Иерыатов Х.Х., Пвотернак Н.И.• Использование нормальной гомологичной сыворотки при моделировании атеросклероза.// Мод. курная Узбекистана, - 1985. - й 6. - С. 52-54.

13. Шерматов Х.Х., Пастернак Н.И. Влияние иммунизации со -судисто-тканевыц гоыоактигеном на беякова-кипидный профиль крови собак.// Депонированные научные работы, - ВИНИТИ, 1985. - й 12.-С. 966.

14. Шермэтоз Х.Х., Паотераак Н.И. Модель аутоэллергичеоко-го поражения сооудоз о использование!) нормальной гомологичной сыворотки в качеотзе здъвванта. // Депонированные научные рабо -ты, - ВИНИТИ, 1985. - ш 12. - С. 967.

15. Церыахов Х.Х,, Пастернак ll.il. Влияние иммунизации со судиото-хканевым гомоэнтигенон но иекозорые иммунологические показатели крови собак.// Депонированные научные работы, - ВИНИГЙ, 1985. - 12. - С. 963.

16. Нэриатов Х.Х. Способ получения эиопэрчкэвтальвого ого-рооклэроза путей введения гомологичной ткани оооудоз (оэтйоопэ -

цифическая сенсибилизация).// Достижения иед.науки практ.здравоохранению, - Андижан, 1985. - Вып.2. - С. XI7-II8.

17. Шерматов Х.Х. Применение прибора для массовой окраски крови при аллергической альтерации нейтрофилов. // Достижения мед.науки практ.здравоохрзнен., Андижан, 1985.- Вып.2.- С.67-68.

18. Шерматов Х.Х., Арсланова М.Х. К методике определения внтигиалуронидазной активности.// Достижения мед,науки практическому здравоохранению, - Андиеэн, 1985. - Вып.2. - С. 66.

19. Шерматов Х.Х., Каюмова И.П. К методике определения эн-типлззмина в сыворотке крови. // Достижения ыед.науки практическому здравоохранению, - Авдииав, 1985. - Вып.2. - С. 68.

20. Шерматов Х.Х., Брысин В.Г. Динамика изменения белков и липидов крови собак при введении антигене гомологичных оооудов./, Мед.аурнал Узбекистана, - 1987. - ÍÍ2 12. - С. 66-69.

21. Шерматов Х.Х., Брыоин В.Г. Способ воспроизведения аутоиммунного повреждения оосудов: "Методическая рекомендация", - Андижан, 1988. - 6 с,

22. Шерматов Х.Х. Аутоиммунные механизмы поражения арте -риальных сосудов в эксперименте. // Тезисы доклоВсесоюзн.съезда патофизиол.: "Нарушение механизмов регуляции и их коррекция", -Москва, 1989. - Т. Г. - С. 363.

23. Шерматов Х.Х., Брысин В.Г. Аутоиммунные процессы при экспериментальном атеросклерозе как форме иммунодефицита. /Де-зисы докп.респубк.конф.: "Иымунодефициты и HI Д система", -Ташкент, 1989. - С. 100-102.

24. Шерматов Х.Х. Аутоиммунные механизмы эксперимента ль -ного артериосклерозе. // Тезисы докл.первого Всеооюзн.иммувол. съезда. - M., 1989. - Т.2. - С. 148.