Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Влияние анаэробной микрофлоры кишечника на клиническое проявление дизентерии свиней

.ШНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА И ПРОДОВОЛЬСТВИЯ % РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

МОСКОВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ И БИОТЕХНОЛОГИИ им. К.И. СКРЯБИНА.

На правах рукописи

ДРИАЕВА МЕРИ ДМИТРИЕВНА

ВЛИЯНИЕ АНАЭРОБНОЙ МИКРОФЛОРЫ КИШЕЧНИКА НА КЛИНИЧЕСКОЕ ПРОЯВЛЕНИЕ ДИЗЕНТЕРИИ СВИНЕЙ

16. 00. 03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ

ДИССЕРТАЦИИ НА СОИСКАНИЕ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ КАНДИДАТА ВЕТЕРИНАРНЫХ НАУК

МОСКВА -1998

Работа выполнена в Московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина.

НАУЧНЫЙ РУКОВОДИТЕЛЬ - доктор ветеринарных наук профессор Конопаткин A.A.

Официальные оппоненты:

1. Доктор ветеринарных наук, профессор Бурлаков В. А.

2. Кандидат ветеринарных наук Тихонов Л.И.

Ведущая организация - Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко.

со

Зашита состоится " 1998 г. в -^О часов

нг. заседании диссертационного совета К 120.36.05 по защите диссертации на соискание ученой степени кандидата наук в Московской гс су дарственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии им. К И. Скрябина (109472, Москва, ул. Академика Скрябина, 23, тел.: 377-93-83).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке академии.

Автореферат разослан "_"_ 1998 г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Меньшикова З.Н.

I. 0HIM ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Проблема алиментарных инфекций свиней ос-ается далеко нерешенной и эта группа болезней в современном сви-оводстве продолжает занимать доминирующее положение. Особую ак-уальность приобрела дизентерия свиней.

Дизентерия широко распространена в странах, занимающихся ин-енсивным свиноводством ( D.L.Harris,R.D.Llock , C.J.Riley,

987; K.Ruidi, 1989; M.Popovic, M.Lasrcin, 1990). Экономический щерб определяется потерей животных, снижением упитанности, боль-ими затратами кормов при очень низких приростах и высокой стои-остью лечебно-профилактических мероприятий (И.4>.Поспеев, I975; .К.Панасенко, 1977; R.Lysons, 1979; С.И.Прудников, В.Н.Павлов, 983; J.Hicolet, 1986; Т.Jakubowski, K.Dsiatoa, li.Binek, 1992).

Возрастающий интерес исследователей к дальнейшему изучению слезней желудочно-кишечного тракта, включая ДС, объясняется ее гшзоотологической и экономической значимостью (¿.С.Воронин и др., 993; Л.А.Конопаткин, 1993). Удельный вес гастроэнтеритов от об-leii заболеваемости свиней в хозяйствах промышленного типа может юстигать 83 i, среди них ДС составляет I2-3Q % (В.Н.Павлов,1990;

К.Белых, .•и.К.Миносуев, 1993).

ДС все еще продолжает оставаться в ряду алиментарных инфек-(ионннх болезней с недостаточно изученной, этиологией (R.a .v/hiting ■t al, L9^I; R.Sollwood et al , 1992; A.K.Hanglund, IS92), ЧТО )бусловливает определенные трудности в диагностике и борьбе с >той болезнью в условиях крупных промышленных хозяйств. Поэтому 1 неслучайно, что в последние годы было уделено особое внимание 1зучению этиологии, патогенезу и разработке на этой основе эффективных специфических средств диагностики, профилактики и терапии.

Главный этиологический агент дизентерии свиней - облигатный 111 аэроб Treponema hyodysenteriaoB настоящее Время КлаССИфИЦИруеТ-:я в новый биологический род Serpuiinan называется serpuiina hyo-lyocnteriae. Род включает также 5.innocens(T.*.Stanton et ni,I99I;

Б.Stanton, 1992). Вместе с тем, в патогенезе данного заболева-щя не исключается значение индигенной микрофлоры кишечника, в гсобенности анаэробных как условно патогенных, так и нормальных ie представителей (А.К.Завирюха и др., 1983; В.И.Бобровский и ip., 1988; М.М.Интизаров, 1994).

Следует отметить, что одного выделения анаэробов из исследу-:мого материала недостаточно для определения этиологического зна-

чения в конкретном случав. Необходимо определить количественные соотношения изолированных микробов в патологическом материале, наличие у них патогенных свойств, а также учитывать стадию и тяжесть проявления болезни. Остается неясной роль каждого отдельно взятого микроорганизма в возникновении и развитии клинических при знаков дизентерии.

Ряд авторов считает, что в современных условиях веления свиноводства возникновение новых эпизоотических очагов дизентерии связано с вводом в стадо свиней-серпулинопосителей (А.И.Белых, 1989; <1.й.1| Мота, 1992). В зависимости от возраста свиней серпу-линоносительство может составлять 15-15 '%. В хозяйствах, неблагополучных по ДС, до 73 % мышей и до 100 % крыс являются носителями возбудителя ДС С ИЛШИюГГ, 1989).

Учитывая вышесказанное, выбор и актуальность темы диссертационной работы несомненно значимы в научно-практическом отношении

Цель и задачи исследований. Целью наших исследований было изучение влияния анаэробной микрофлоры кишечника свиней на клиническое проявление ДС. Для выполнения поставленной цели нам необходимо было решить следующие задачи:

а) изучить количественный и качественный состав анаэробной микрофлоры кишечника клинически здоровых и больных дизентерией свиней;

б) изучить культуральные, мордалогические и биохимические свойства выделенных анаэробных микроорганизмов;

в) изучить патогенные свойства выделенных штаммов анаэробов;-

г) изучить клиническое проявление ДС в зависимости от качественного и количественного состава анаэробов кишечника свиней;

д) экспериментально воспроизвести дизентерию на свиньях с целью подтверждения этиологической роли З.Иуо<Эуееп1ег1ае ;

е) изучить в сравнительном аспекте терапевтическую эффективность препаратов, применяемых при ДС.

Научная новизна работы. Подтверждено значение з.ЬуоаусыгЬе-г!ае как главного этиологического агента дизентерии свиней. Изучены качественный и количественный состав анаэробной кишечной микрофлоры клинически здоровых и больных дизентерией свиней в неблагополучных по ДС хозяйствах промышленного типа. Установлена-этиологическая взаимосвязь между £.11уосЗузег^ег1ае и анаэробами ( С1.регГг1п£епс, Р.песгорЬогиБ , 1ас^его1(Эес ) В патогенезе ДС.

3.

зучена зависимость клинического проявления дизентерии свиней от ачественного и количественного состава анаэробной микрофлоры ки-ечника. Дана сравнительная оценка терапевтической эффективности нтидизентерийных препаратов.

Практическая значимость работ». Результаты комплексных иссле-;ований, проведенных в базовых хозяйствах, учебных и научных ла-юраториях .'ЛГАШиБ им. К.И.Скрябина, ВНЭВ им. Я.Р.Коваленко, ВГНКИ ю теме диссертационной работы позволяют более э^рективно прово-[ить диагностические, лечебные, профилактические и оздоровительное мероприятия при дизентерии свиней. В базовых свиноводческих :озяйствах испытал и внедрен антидизентерийный препарат тиамутин.

На основании результатов исследований нами разработаны и из-цшы методические рекомендации "Выделение и идентификация анаэроб-юй микрофлоры из кишечника здоровых и больных дизентерией свиней" I "ьзоляция и изучение энтеропатогенных свойств возбудителя дизен-'ерии свиней".

.Материалы исследований и методические рекомендации используется в учебном процессе .ЛГАВл1иБ им. К.И.Скрябина

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены 1;] семинаре главных ветеринарных врачей свинокомплексов России, госвященном применении в свиноводческих хозяйствах препарата тиа-1утина при дизентерии, плевропневмонии и энзоотической пневмонии ¡виней (13 мая 1993 г., .Лосква), юбилейной научно-практической юнференции ветеринарного факультета КНГСХА С1Э—¿1 октября 1993г., ¡альчик), а также Ученом совете и учебно-методической комиссии факультета ветеринарной медицины ¡ЛГАгШБ им. К.И.Скрябина.

Публикация научных исследований. По материалам диссертации опубликовано 7 стате!:.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов иссле-юваний, выводов, практических предложений, списка литературы и триложений. Материалы иллюстрированы {& таблицами, £ рисун-;ами. Список литературы включает '¿'¿I источник, из которых НИ шостранных авторов.

11. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

¡¿.I. Материалы и методы исследований

Исследования выполнены в 1992-95 гг. на кафедре эпизоотолс гии и инфекционных болезней МГАВМиБ им. К.И.Скрябина, в стационарно неблагополучных по ДС свинокомплексах "Белая дача" и "Подольский" Московской области, а также лаборатории эпизоотологии диагностики и профилактики болезней овец В1Ш им. л.Р.Коваленко лаборатории анаэробных инфекций НГНКИ. Проделанная работа является частью комплексной темы по НИР ЛТАВМиБ им. К.И.Скрябина (этап 4, номер гос. регистрации 81045346 от 8 мая 1981 г.).

В экспериментальной работе использовано ¿'¿5 нелинейных белых мышей, II свиней для экспериментального воспроизведения болезни, 441 свиней для изучения клинического проявления дизентерии, 76 трупов свиней с целью изучения патологоанатомических из менений при ДС. Для бактериологического исследования было взято 760 проб фекалий и содержимого толстого отдела кишечника, в т.ч 360 от клинически здоровых и 400 от больных дизентерией свиней.

В научной работе использовали зпизоотологический, клиничес кий, патологоанатомический, микроскопический, бактериологически и биологический методы диагностики инфекционных болезней.

Исходным материалом для эпизоогологического анализа служил данные документов ветеринарной отчетности, а также результаты обследования опытных хозяйств за период 1983-93 гг. согласно "Методическим указаниям по эпизоотологическому исследованию" (11 .А.Баку лов и др., 198<2) и "Методики проведения эпизоотологиче ского обследования хозяйства, анализа полученных сведений, офор млению акта" (Ь.М.Велик, 1988).

Течение и клиническое проявление дизентерии изучали на бол ных свиньях. При патологоанатомическом исследовании принимали В' внимание макроскопические изменения в органах и ткандх свиней, павших или убитых с диагностической целью.

Бактериологически исследовали пробы фекалий, содержимого прямой, ободочной и слепой кишок согласно "Методическим указаниям по лабораторным исследованиям на дизентерию свиней, вызываемую трепонемой", утвержденным Главным управлением ветеринарии Минсельхоза СССР '¿5 декабря 1983 г. (Б.П.Антонов, 1983).

Для выделения и культивирования анаэробных микроорганизмов

использовали питательные среды: триптиказосоевый агар (ТСА), Бла-урокка, Вильсон-Блера, №0-4, Китт-Тароцци, иШБ, М11А, неомицино-вый агар, тиогликолевый бульон, дифференциально-диагностические среды Гисса.

Питательные среды для выделения Б.Ьуо<1у8егиег1аеготовили в анаэробных условиях на основе триптиказосоевого перевара по методике А.В.Голикова и др. (1980) и А.В.Голикова, В.В.Бондика (1982).

Для культивирования выделенных штаммов анаэробов использовали термостаты и анаэростаты типа 111-115 "ЛАБОР ¿ЛИМ" (Венгрия), создавая анаэробиоз путем откачивания воздуха и заполнения их смесью газов из «¿0 I 00^ и 80 % Н^. Для поглащения остаточного кислорода использовали хромовокислые квасцы.

Для получения чистой культуры, выросшие при первичном посеве изолированные колонии пересевали вторично на плотные питательные среды по методу Дригальского или в жидкие - методом серийных разведений (Г.С.Костенко и др., 1989).

Культуральные, морфологические, тинкториальные и биохимические свойства изолированных штаммов оценивали общепринятыми методами с использованием световой, фаэово-контрастной и темнополь-ной микроскопий.

Для определения патогенных свойств выделенных штаммов ставили биопробу на нелинейных белых мышах по методике К.И.Матвеева (1973). Окончательную идентификацию анаэробов проводили согласно "Определителю бактерий" Вег^А (Е<1. \Y.ii.Hensyl, 1984). Количественный состав анаэробов определяли по КОЕ на твердых дифференци-алыю-диагностических средах (В.Г.Петровская, О.Г.:Ларко, 1976).

Экспериментальное заражение дизентерией проводили на поросятах 2-х месячного возраста, полученных в свиносовхозе "Подольский" ..¡осковской области. Для заражения использовали эпизоотические штаммы з.Иуоауаег^еггае , изолированные нами от больных ДС. За 18-24 ч до введения культуры Б.Ьуо<ау8егаег1ае свиней лишали корма, а непосредственно перед заражением им вводили внутрь с помощью шприца лапе «¿00 мл 5 ,2-ного раствора гидрокарбоната натрия. Каждому опытному поросенку задавали ежедневно на протяжении 3-х дней по ¿00 мл материала, приготовленного путем суспендиро-вания в стерильном физиологическом растворе ^-гемолизированных зон 2.¿-ного триптиказосоевого агара с ростом 72-х часовой культуры з Л1уо(Зу.чеп1ег1ае , доводя общее количество микробных тел в

инокулируемой дозе до 180 КОк. Пнокулят вводили внутрь с помощью шприца }дане. Контрольным животным давали внутрь стерильную агаровую среду по той же схеме. Основными критериями, свидетельствующими о развитии дизентерии, служили: I) наличие в кале серпулина с характерными морфологическими, тинкториальными и культуральны-ми свойствами; 2) выделение несформированных или жидких фекалий, содержащих слизь и кровь. Учитывали также общее состояние.

Средние арифметические значения полученных показателей и их

ОШИбКИ ИЛИ Стандартные ОТКЛОНеНИЯ ВЫЧИСЛЯЛИ, ИСПОЛЬЗУЯ Scientific calculator fx- зоо A (Cacio) , имеющий соответствующие запрогра-мированные рункции и "Математические методы в эпизоотологии" Ы.Г.'Гаршис, Константинов, 1975).

Ш. РЕЗУЛЬТАТЫ ¿.ССЛЕДОНАИЫ

3.1. Краткий хозяйственно-экономический и эпизоотоло-гический анализ хозяйств

Особенности эпизоотического процесса при ДС изучали в неблагополучных по заболеванию свинокомплексах "Lieлая дача" и "Подольский" .Московской области»

Эпизоотологическим анализом комплексных материалов выявлено, что в этих хозяйствах сформировались стационарные очаги ДС, проявляющиеся в рорме эпизоотических вспышек с постоянным нарастанием количества больных животных и невысокими уровнями заболеваемости и летальности (энзоотический характер). Заболеваемость при эпизоотических вспышках в этих хозяйствах доходила до 40,г летальность - до 49,6 t. Эпизоотическим вспышкам дизентерии, как правило, предшествовало воздействие на организм свиней неблагоприятных i>aкторов, в особенности смена кормов, перегруппировки животных, нарушение микроклимата. Активизация эпизоотического процесса в осенне-зимний и зимне-весенний периоды связана с особенностями хозяйственно-экономической деятельности хозяйств промышленного типа. К заболеванию наиболее восприимчивы свиньи па откорме. Летальность в этой группе колеблется в пределах 17,5-^3,0 J.

В поддержании стационарности эпизоотичеокого очага дизентерии в хозяйствах, несомненно, способствует периодический ввод новых животных из хозяйств-поставщиков. Не исключается также участие грызунов, обнаруживаемых нами в помещениях и па территории,

которые могут являться резервуаром и переносчиками возбудителя дизентерии.

При анализе ветеринарном отчетности в агрофирме "Белая дача" за 1393-91 гг. пало ¿ЗЗг свиньи, в т.ч. от алиментарных болезней 1353 гол. (58,0 /о). Удельный вес ДС среди желудочно-кишечных болезней, такш образом, составляет 01,3 %,

З.н. ллинико-эпкзоотологическое проявление дизентерии свиней в хозяйствах промышленного типа

У заболевших свиней симптомы ДС проявлялись в зависимости от тяжести болезни и характеризовались поносом, угнетением, усиливаю-цейся жаждой, пониженным аппетитом и исхуданием. Каловые массы становились кашицеобразными от серо-грязного до красно-коричневого и темно-каштанового цветов с примесью слизи и крови. При усилении диареи они становились более водянистыми и содержали слизисто-рйбрипозные включения. Температура тела находилась в пределах (физиологической нормы или была незначительно повышена до 40,1-40,5°. Гипертермия наблюдалась у ¿1,6 % животных. Ь начальной стадии заболевания (кашицеобразный кал грязно-серого цвета с примесью слизи) свиньи подвижны, незначительно угнетены, аппетит сохранен. Но мере развития ДО клинические признаки становились все более отчетливыми и характерными: живот подтянут, западение пахов, хвост и кожа промежностей мокрые и загрязненные фекалиями,с дальнейшим нарастанием угнетения, снижения аппетита до полного отказа от корма. Животные выглядели хуцнми, слабыми, с последующим нарушением координации движений и повышением возбудимости, которая сменялась полной прострацией и гибелью на 5-7-й день болезни. При неправильном или бессистемном лечении животные болеют до '¿-х недель и дольше. Свиньи быстро худели, становились слабыми, малоподвижными и обычно подвергались вынужденному убою.

Данные патологоанатомического вскрытия трупов больных свиней подтвердили острое, подострое и хроническое течение дизентерии. Типичные морфологические изменения отмечали преимущественно в желудочно-кишечном тракте. Макроскопически они выражались в виде гиперемии, набухания и катарального воспаления слизистой оболочки желудка и тонких кишок при остром течении болезни, а в толстом отделе кишечника, кроме того, геморрагической ин[мльтрацией слизистой оболочки. На более поздних стадиях болезни слизистая оболочка

в.

толстого кишечника покрывалась крошковатыми серо-желтого цвета рыхлыми пленками фибрина (геморрагическо-диутеритический колит).

Ободочная кишка вовлекается в патологический процесс наиболее интенсивно. Слизистая оболочка ободочной кишки била гипереми-рована, местами лекротизирована с множественными кровоизлияниями и покрыта серо-беловатой, мучнистой или отрубиевидной, легко смывающейся массой некротического детрита. Резко выступала ее складчатость. При затяжном течении болезни развивался некротический колит.

Результаты патологоанатомического вскрытия показали также, что у павших свиней преобладало гюдострое и хроническое течение ■ ДС (74,7 2), однако болезнь протекала острее среди животных из групп доращивая и я (¿J,Ü t), чем на откорме (13,3 '„').

3.3, Результаты бактериологического исследования

содержимого биотопов толстого кишечника здоровых и больных дизентерией сниней

Учитывая наличие определенной последовательности в развитии клинического синдрома ДС и то обстоятельство, что такие симптомы как угнетение, ослабление аппетита, диарея, истощение, грязноватый или темно-коричневый кал дают основание лишь предполагать болезнь, мы провели сравнительные бактериологические исследования рекалий и содержимого толстого отдела кишечника у клинически здоровых, больных и подозрительных по заболеванию дизентерией свиней.

При темнопольной микроскопии рекалий от животных с типичными признаками ДС серпулины были обнаружены в IJü I случаев. У 8,ü Z клинически здоровых поросят в кале просматривались единичные экземпляры серпулип в поле зрения микроскопа, что, возможно, говорит о микробоносительстве. В подозрительных случаях у ¿3,8 % исследованных животных удалось выделить серпулины.

В ходе бактериологического исследования анаэробной шжрорло-ры .уекалий и содержимого биотопов толстого кишечника клинически здоровых и больных дизентерией свиней нами были выделены анаэробы, которые по культуральным, .морфологическим и тинкториалышм свойствам были отнесены: к группе индигенннх - Liictobüciiius , Lifirlobactorinn , Lactcroidcc ; условно-патогенных -Cl.perfrin^c-na, F.necropliomi! к n;i ГОГОННЫХ - ~ .! yodyionter ine, ^ССГО было ИССЛС-

цовано 7J проб от клинически поровнх и - от больных цизенте-

рией подсвинков.

При анализе результатов бактериологического исследования были установлены дисбиотические нарушения микрофлоры биотопов толстого кишечника у. больных дизентерией подсвинков, характеризовавшиеся, прежде всего, обнаружением З.Ьуоаузехиегхае у всех животных с клиническими признаками дизентерии (1,56 х 10 КОЕ/г), тогда как у здоровых животных серпулины обнаружены не были. Показателем дисбиотических изменений служило также увеличение частоты выделения условно-патогенных анаэробов: С1.регГг1пзепз -8,94 х КОЕ/г и Р.песгорЬогшп - 5,09 х 10 КОЕ/г. У здоровых животных эти показатели соответствовали 4,2 х 10° КОЕ/г С1.регГг1-п^опя и 3,71 х 10й КОЕ/г р.песгорЬогшп. Вместе с тем, заметно .уменьшилось количество "носителей колонизирующей резистентности" бичмдо5актерий и лактобактерий (4,31 х 10й и 4,91 х 10° КОЕ/г соответственно), у здоровых животных эти показатели были: 7,30 х 10^ лот/г -1ЛПаоЬас1ег1ит и 9,29 х Ю9 КОЕ/г - 1,«с1:оЪа-

сЩия

изменение микробного пейзажа происходит во всех отделах толстого кишечника, при этом в динамике четко прослеживались два этапа: I) развивался заметный дефицит количественного содержания молочнокислой ¿шоры. Среднее содержание би^идобактерий составило в слепой кишке 1 ,-¿7 х 10^, ободочной - 4,17 х 10а, прямой -5,41 х КОЕ/г. У клинически здоровых эти показатели составляли: б слепой - ¿,<¿3 х Ю-1-, ободочной - 7,11 х 10^, прямой -о, II х и10 нОЕ/г. Количество лактобактерий у больных животных снижалось: в слепой до 4,40 х 10^, ободочной до 3,58 х 10^, прямой до 4,73 х 10^ КОЕ/г. У здоровых животных эти показатели были: 6,58 х 10а, 8,58 х 10^, 5,¿6 х 10? КОЕ/г соответственно; 2) наряду с этим ог.ич^лось увеличение условно-патогенных анаэробов. В слепой кишке среднее количество С1.регГгхпзепз составило 4,32 х 10^, Р. иссгорЬогит - ¿,88 х 10Ь КОЕ/г; ободочной -С1".рс1-1Ч'1п^оия 8,35 х Ю"1, Р.песгорЬогшп 4,47 х 10^ КОг./г; прямой -С1 .рс.'гГг1п^епя 3,63 X Ю7, Р.песгорЬогит - 6,56 х Ю^КОЕ/г. У здоровых животных эти показатели соответствовали: в слепой -1,71 х 10° и 3,11 _х Ю4, ободочной - ¿,23 х 106 и 2,81 х Ю1, прямой - 1,8 х 10° и 3,12 х 10э КОЕ/г.

Обряжает на себя внимание тот ракт, что у больных животных увеличивалось содержание бакте1оидов. В слепой кишке их обнаружи-

}

валось 3,85 х 10^, ободочной - 4,96 х Ю10, прямой - 7,45 х Ю^ КОЕ/г. У здоровых - соответственно 6,57 х Ш7, 7,42 х Ю7 и 7,01 х Ю7 КОЕ/г. Однако, исходя из литературных данных (з.и.Пау-ликас, 1994), эти значения не превышали нормальных величин в слепой и прямой кишках, за исключением ободочной, где происходило незначительное превышение этих норм.

Общее количество анаэробов имело тенденцию к уменьшению у больных животных: в слепой - 4,33 х 109 (¿,¿1 х 10*£ КОЕ/г у здоровых), ободочной - 5,85 х Ю10 (7,1г х 10^ КОЕ/г), прямой -7,51 х 10^ (5,42 х 10 КОЕ/г). Среднее количество всех выделенных из кишечника анаэробных микроорганизмов также было меньше у больных животных - 7,03 х 10*°, чем у здоровых (7,4 х Ю1^ КОЕ/г). Уменьшение общего количества анаэробов было вызвано преимущественно за счет резкого понижения доли молочнокислых бактерий. Дисбио-тические изменения наиболее выражены были в ободочной кишке.

Повышение Количества С1.регГгл.гусп8 , Р.песгорЬогит , Бас^егоа-йеа позволяет нам сделать вывод о том, что эти микроорганизмы принимают участие в патогенезе дизентерии свиней, но тот .ракт, что 8.11уос1уоепЛег1ае не выявляли у клинически здоровых поросят, указывает на то, что этот микроорганизм является главным этиологическим агентом при дизентерии.

Динамику микробиоценоза толстого кишечника более рельефно отражает индекс дисбактериоза (НД), который определяется по ¿юр-муле:

VIп - Общее количество условно-патогенных (КОЕ/г) .. г 11П д ' ибщее количество индигенных (кии/г) л ~

Ь,99 х 10 х 1000 _ г что больше нормы в 143 ¿5 раз.

6,13 х ТО10

3.4. Результаты изучения количественного и качественного состава анаэробов толстого кишечника в зависимости от клинической картины дизентерии свиней

Анализ результатов наших опытов показал, что количество сер-пулин, клостридий, фузобактерий и бактероидов в I г ракалий, а значит и во всем содержимом кишечника, находятся в прямой зависимости от тяжести-проявления симптомов дизентерии. Так, наибольшее количество упомянутых микроорганизмов (серпулил - 5,~в, клостридий - 3,01, -дозоб'зктерий - 7,1о, бактероидов - и,У К0ь 1с/'г)

5ыло выделено от поросят, у которых заболевание протекало наиболее тяжело с признаками изнурительной диареи и выделения красно-кори-шевого или темно-каштанового цвета кала с примесью большого коли-iecTBa крови, слизи и содержанием фибринозных пленок.

У. поросят со средней тяжестью проявления симптомов заболева-шя с легкими признаками угнетения, понижением аппетита, поносом зо слизью и следами крови количественные показатели патогенных и условно-патогенных анаэробов были выше нормальных физиологических, но ниже показателей группы поросят с тяжелыми признаками дизентерии (выделили серпулин 4,о7, клостридий - 0,50, урузобактерий -¡5,90, бактероидов - 9,57 КСЬ lc/г. У животных со стертыми клиническими признаками выделили: серпулин - 3,71, клостридий - 7,32, рузобактерил - 5,оЗ, бактероидов - 8,91 КОЕ "Lg/r. Эти показатели ближе к нормальным физиологическим. Количество би.ридо- и лактоба-ктерий пропорционально уменьшалось с наростанием интенсивности инфекционного процесса, а следовательно - тяжестью проявления клинических признаков.

3.5. Результаты экспериментального заражения свиней

Для подтверждения роли S.hyodysenteriae как главного этиологического агента был поставлен опыт по экспериментальному воспроизведению ДС на II поросятах-отъемншах с последующим изучением клинического проявления болезни и выделения серпулин. И ходе эксперимента выявили высокую чувствительность поросят к энтеральному заражению. 9 поросят [йг 1) пало за время опыта (¿1 день). Результаты эксперимента показали, что длительность инкубационного периода подопытных животных была различной и варьировала в пределах 4-14 дней. Симптомы ДС отмечали у всех животных опытной группы, однако степень их проявления и соответственно тяжесть течения болезни были неодинаковы. Первые признаки заболевания появились на 1-ый день у '¿-х поросят и характеризовались вялостью, ухудшением аппетита, выделением уекалий кашицеобразной консистенции со слизью. С развитием инфекционного процесса и появлением первых клинических признаков температура тела у всех зараженных свиней повышалась до 10-40,8 G, а с развитием диареи - снижалась до нормы, независимо от исхода болезни. Клинические признаки легкой степени стали появляться у поросят Ж 7 и I на 5-й день, jf< И - 6-й, Je 97-й, .'W 10 и II - 9-й, J{# 8 и 5 - И-й, Jr 4 - на 14-й день. Через

тг.

некоторое время у животных наблюдалось нарастание диареи. Каловые массы приобретали грязно-серый цвет с примесью большого количества слизи. Эту стадию течения болезни мы условно характеризовали как среднюю степень. Такие признаки отмечали у животных 3 й 6 на 7-й день наблюдений, И 7 - 8-й, & 12 - 9-й, № 9 - 10-й, № 40 -13-й, № II - 12-й, И 5 и 8 - 14-й, № 4 - на 17-й день. В последующие З-о дней в испракнениях обнаруживали,наряду со слизью,' следы крови. Наиболее характерное проявление ДС наблюдали у поросят № 2,9,IJ,II. Болезнь сопровождалась типичной кроваво-слизистой диареей, возникшей через 10—15 дней после заражения и длившейся 7-12 дней (до падежа свиней).

По мере развития слизисто-геморрагического синдрома у животных наблюдали сильное угнетение, слабость, залеживание, полный отказ от корма при сохранившейся жажде, истощение, -етина и кожа были загрязнены уекалиями характерного цвета, брюшная стенка подтянута, бока запавшие, хвост раскручен; кал водянистой консистенции, содержащий большое количество слизи и крови, а также сл!-зис-то-рибринозных пленок.

¿контрольные поросята, получавшие одинаковый корм с подопытными, но помещенные отдельно, в течение всего периода наблюдения оставались клинически здоровыми, серпулин в кале не обнаруживали. Патологоанатомическое вскрытие трупов и специально убитых экспериментально зараженных свиней Шё 4 и 8) подтверждали клинический диагноз на дизентерию.

3.6. Результаты бактериологического исследования толстого отдела кишечника экспериментально зараженных поросят

С развитием инфекционного процесса у экспериментально зараженных животных увеличивается степень дисбиотических изменений, которые выражались в увеличении количества серпулин, клострпдий, 4гузобактерий. Гак, в инкубационном периоде болезни от поросят удалось выделить в среднем: серпулин - ¿,8, клостридий - ь,41, уузобактерий - 5,37 kOÜIg /г. При легкой степени болезни в ректальных пробах находили серпулин - 3,25, клостридий - ¿,92, фу-зобактерий - 5,51 дОЕ1е /г. С появлением водянистых фекалий с примесью слизи из проб высевали серпулин - 1,5, клостридий -7,61, уузобактерий - 6,72 лОл^ /г. Максимальное количество патогенной и условно-патогенной анаэробной ¿лоры обнаруживали у

поросят 'при тяжелой степени болезни со слизисто-геморрагической диареей: серпулин - 5,75, клостридий 9,23, Фузобактерий - 7,25 КОЕ 1с/г. На протяжении всего периода наблюдения количество бактероидов находилось Енше ризиологичесди нормальных показателей и увеличивалось пропорционально нарастанию инфекционного процесса. Наряду с этим, мы отмечали уменьшение уровня облигатной бифидо-и лантоулорн. Особенно резкие изменение наблюдались при исследовании ректальных проб при тяжелой ртепени дизентерии со слизисто-геморрагическим поносбм: бифидобактери$ - 7,90, лактобактерий -5,67 КОЕ 1е/г (соответственно 12,эз и 10,17 КОЕ 1ц/г у контрольных поросят;.

Изолированные от больных ДС спирсдотообразные микроорганизмы обладали характерными для з.Ьуо<1узег^ег1ае культуральннми, морфологическими и энтеропагогенными свойствами, Экспериментальное вн.у-трижелудочное заражение поросят культурами серпулин вызывало типичную форму ДС с характерными для нее кдаическими признаками. . При этом заболеваемость и летальность составляли 100 и 82 % соответственно. Инфицированные поросята начинали выделять серпулины с 9-16 дня после заражения чистой культурой. При этом, выявлены цисбиотические изменения, характеризующиеся резким увеличением количества анаэробной условно-патогенной и уменьшением молочнокислой [угоры. Из суспензии воспаленных участков слизистой оболочки от павших экспериментально зараженных прросят мы получили обильный рост ^-гемолитических культур серпулин на 2 .'¿-ном ГСКА.

6.1. Результат« изучения терапевтической эффективности поотиводизентерийных препаратов

В целях изыскания новых средств профилактики и лечения свиней при дизентерии нами были испытанц £ сравнительном аспекте ти-амутин, тетрациклин, тетрамутин и трихопол. Исследования проводили в свинокомплексе "Подольский", Лечебную эффективность препаратов определяли на 84 подсвинках, больных дизентерией. Наблюдение осуществлялось в течение 10 дней со двд обнаружения клинических признаков и начала лечения.

В подопытных группах тетрамутин применяли в виде 10 #-го порошка для перорального применение, в I г которого содержалось тетрациклина гидрохлорид - 900 и тиамутина - 100 мг. Тиамутин применяли в виде 80 3-го порошка для перорального применения.

Трихолол и тетрациклин длительное время применялись специалистами хозяйства для лечения свиней при дизентерии. Лечение проводили в соответствии с наставлениями по применению препаратов по схеме. Микрофлору желудочно-кишечного тракта поросят изучали до и после дачи препаратов на ¿г-э-7 дай опыта, критериями оценки эффективности лечебных препаратов служили изменение консистенции 'фекалий, продолжительность болезни, обнаружение з.Ьуойусег^ехиае в фекалиях, выздоровление и падеж животных. Для групповой обработки ' больных свиней делали расчет потребности препаратов, исходя из количества и веса животных в одном станке. Свиньям, отказавшимся от корма, препараты задавали индивидуально. .

Результаты опыта показывают, что лечебная эффективность тет-рамутина после разовой дачи составила 71,1 тиамутина - 50, тетрациклина - <¡9,4, трихопола - зЭ,0 после 2-х кратной'дачи препаратов эффективность соответственно составила: 77,8;

41,1 и с$Ь,0 %. Б группах поросят, обработанных тетрамутином и ти-амутином на 2-3-й день лечения нормализовалась деятельность желудочно-кишечного тракта, улучшилось общее состояние, животные активно поедали корм, становились более подвижными. Применение тиамутина и тетрамутина достигали 94 и 100 '% лечебного эффекта на 6-7-й дни лечения. При лечении тетрациклином и трихополом полного терапевтического эффекта достичь не смогли, поэтому указанные препараты пришлось заменить другими. Наблюдения также показали, что свиньи, обработанные тетрамутином и тиамутином освобождались от серпулин и повторно не заболевали в течение 30-45 дней.

Подводя итоги проведенных наблюдений, можно считать, что антидизентерийные препараты - тетрамутин и тиамутин дают стойкий терапевтический эффект и потенциально могут быть использованы для санации желудочно-кишечного тракта свиней от патогенных серпулин при отсутствии у последних резистентности к названным лекарственным средствам.

ВЫВОДЫ

1. В свиноводческих хозяйствах промышленного типа дизентерия свиней преимущественно проявляется энзоотически с формированием стационарных эризоотических очагов, в которых эпизоотический процесс поддерживается за счет постоянного поступления новых восприимчивых групп животных, массового и длительного микробоносительс-тва, а также возможного резервуара З.Ьуоаузег^егАае среди синант-ропных грызунов. Удельный вес дизентерии среди алиментарных инфекций свиней в откормочных хозяйствах составляет около 61 %.

2. В наблагополучных по ДС хозяйствах эпизоотический процесс имеет склонность к сезонной активизации в осенне-зимний и зимне-весенний периоды, что связано с особенностями технологических циклов в свиноводческих хозяйствах промышленного типа. Заболеваемость в период сезонного подъема превышает среднюю межсезонную в 3,6 раза при коэффициенте сезонности - ¿8,7 и индексе сезонности - 1,7.

3. Эпизоотическим вспышкам ДС, как правило, предшествует воздействие на животных неблагоприятных .факторов: формирование новых производственных групп животных, задержки в кормлении и поении, резкая смена кормов, нарушение микроклимата, ветеринарные обработки и другие стрессовые воздействия. В группах поросят-отъ-емышей и подсвинков, вводимых на доращивание и откорм, при эпизоотических вспышках дизентерии заболеваемость достигает 50 % и более.

4. При экспериментальном заражении свиней З.Нуойуяег^егАае

и у естественно больных дизентерией наступает выраженное нарушение микробиоценоза толстого отдела кишечника, проявляющееся резким уменьшением количества бактерий родов Ъас1:оЬас1ег1ш1 и ЫПйоЬас-ЬегЗ-шп и увеличением количества бактероидов и представителей условно-патогенных анаэробов - клостридий и фузобактерий. Индекс дисбактериоза составляет 2,17.

5. Анаэробы, изолированные на селективных питательных средах эт экспериментально зараженных серпулинами и естественно больных дизентерией свиней, характеризовались присущими для з.Ьуоаусе^е-г1ае , клостридий, дозобактерий, бактероидов, бифидо- и лактобак-герий культурально-морфологическими и тинкториальными свойствами. Экспериментальное заражение поросят культурой серпулин вызывает типичную дизентерию, что указывает на главное этиологическое зна-

1 I

чение з .Ьуос1уБег^ег1ае . Развивающийся при этом дисбактериоз, как вторичное явление, становится определяющим в последующем формировании инфекционно-патологического процесса дизентерии.

6. Тяжесть проявления клинических симптомов дизентерии у свиней находится в прямой зависимости от количества серпулин, клост-ридий, фузобактерий и бактероидов. Их общее количество на стадии типичного проявления заболевания с выделением слизисто-геморраги-ческих фекалий в 1,3 раза больше, чем на начальной стадии болезни, проявляющийся выделением кашицеобразных фекалий.

7. При бактериологическом и патологоанатомическом исследованиях трупов при дизентерии свиней установлено наибольшее накопление серпулин в ободочной кишке относительно других отделов толстого кишечника и соответственно наиболее ярко выраженное геморраги-чески-дифгеритическое воспаление этого отдела кишечника.

В. При дизентерии свиней установлена высокая терапевтическая эррективность новых препаратов: тиамутина - полусинтетического деривата дитерпенового антибиотика плевромулина и тетрамутина -смеси тиамутина и окситетрациклина. Т'рупповое применение их с кормом в дозах 0,35 и 1,5 г/кг один раз в день в течение ¿-х суток обеспечивает санирующий эффект организма свиней в течение 30 дней. Терапевтическая эффективность препаратов при ДС равна 100 и 94,4 % соответственно.

СВЕДЕНИЯ 0 ПРАКТИЧЕСКОМ ИСПОЛЬЗОВАНИИ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИИ

Результаты исследований по диссертационной теме вошли в разработанные нами и изданные методические рекомендации.

I.."Выделение и идентификация анаэробной микрофлоры из кишечника здоровых и больных дизентерией свиней" (, А .А .конопаткин, М.Д.Дриаева, А.И.Иванов). Утверждены отделением ветеринарной медицины РАСЯН 7 мая 1994 г.

2. "Методические рекомендации по изоляции и изучению энтеро-патогенных свойств возбудителя дизентерии свиней " (А.А.Конопаткин М.Д.Дриаева, А.И.Иванов и др.). Одобрены отделением ветеринарной медицины РАСХН 20 марта 199Ь г.

3. В свиносовхозе "Подольский" на комплексе по выращиванию и откорму свиней нами впервые применен антидизентерийный препарат тиамутин в лечебных целях внутримышечно в дозе 15 мг/кг 2 дня подряд в виде масляного раствора. Терапевтическая эффективность сос-