Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.06) на тему:Совершенствование системы обеспечения безопасности объектов ветеринарного контроля мегаполиса Москва

ДИССЕРТАЦИЯ
Совершенствование системы обеспечения безопасности объектов ветеринарного контроля мегаполиса Москва - диссертация, тема по ветеринарии
АВТОРЕФЕРАТ
Совершенствование системы обеспечения безопасности объектов ветеринарного контроля мегаполиса Москва - тема автореферата по ветеринарии
Туник, Александр Николаевич Москва 2007 г.
Ученая степень
кандидата ветеринарных наук
ВАК РФ
16.00.06
 
 

Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Совершенствование системы обеспечения безопасности объектов ветеринарного контроля мегаполиса Москва

На правах рукописи

003053337

Туник Александр Николаевич

СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ СИСТЕМЫ ОБЕСПЕЧЕНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ ОБЪЕКТОВ ВЕТЕРИНАРНОГО КОНТРОЛЯ МЕГАПОЛИСА МОСКВА

16.00.06 - Ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и ветеринарно-санитарная экспертиза

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Москва-2007

003053337

Работа выполнена в отделе технического регулирования, стандартизации и сертификации ГНУ ВНИИВСГЭ и в Московской городской ветеринарной лаборатории ГУ «Московское объединение ветеринарии».

Научный руководитель:

академик РАСХН доктор ветеринарных наук,

профессор Анатолий Михайлович Смирнов

(ГНУ ВНИИВСГЭ)

Официальные оппоненты:

- заслуженный деятель науки РФ, Михаил Павлович Бутко

доктор ветеринарных наук, профессор (ГНУ ВНИИВСГЭ)

- доктор ветеринарных наук, профессор Фомичев Юрий Павлович

(Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт животноводства)

Ведущая организация: Московский Государственный Университет прикладной биотехнологии

Защита состоится «21» февраля 2007 г. в 10.00 на заседании диссертационного совета Д.006.008.01. при ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной санитарии, гигиены и экологии (123022, г. Москва, Звенигородское шоссе, 5).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНУ Всероссийского научно-исследовательского института ветеринарной санитарии, гигиены и экологии.

Автореферат разослан «_ /г » ____ 2007 г.

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат биологических наук

Е.С. Майстренко

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы.

Москва является крупнейшим субъектом с постоянно развивающимися внешнеэкономическими и межрегиональными связями, огромным количеством перемещаемой, в том числе из-за рубежа, продукции, значительным количеством предприятий и объектов, подконтрольных государственной ветеринарной службе.

Под государственным ветеринарным контролем (надзором) и на ветеринарном обслуживании находится около 4500 предприятий, деятельность которых связана с убоем скота, хранением, переработкой, транспортировкой и реализацией пищевых продуктов и продовольственного сырья.

Обеспечение ветеринарного благополучия мегаполиса Москва требует решения сложных и многоплановых зацач.

В задачи ветеринарной службы входит поддержание устойчивой эпизоотической обстановки в городе, проведение противоэпизоотических и лечебно-профилактических мероприятий, в том числе иммунизация животных, проведение лабораторно-диагпостических исследований клинического материала с целью выявления возбудителей болезней общих для человека и животных. Существует необходимость профилактических работ и лечения животных, организации ветеринарного обеспечения животных на выставках. Очень важным направлением является проведение ветеринарно-санитарной экспертизы, контроль качества и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов на предприятиях по убою скота, предприятиях по хранению и переработке продукции животного происхождения, на продовольственных рынках, ярмарках и других предприятиях торювли, где осуществляется реализация продуктов литания непромышленной выработки, и продукции растительного происхождения.

В своей деятельности Комитет по ветеринарии руководствуется нормативными документами Ветеринарного законодательства.

Исходя из позиций реформы технического регулирования необходимо провести совершенствование одного из основных ее элементов -Государственного контроля и надзора, чтобы, с одной стороны, обеспечить гармонизацию с международными нормами, с другой - защитить интересы национальной безопасности, обеспечить безопасность и качество продукции.

Важной задачей при этом является совершенствование приборно-методической базы лабораторного ветеринарного контроля, переоснащение Московской городской ветеринарной лаборатории современными приборами и тест-системами, отвечающими международным стандартам Для лабораторий на рынках необходимо оснащение экспрессными тест-системами для проведения ветсанэкспертизы.

Актуальным является внедрение современных методов ДНК-диагностики для идентификации микробных контаминаций. Эти методы позволяют выявлять микроорганизмы и вирусы в смешанных культурах, дифференцировать патогенные формы от непатогенных форм.

Одной из основных целей принятия технических регламентов, определенных Федеральным законом «О техническом регулировании», является предупреждение действий, вводящих в заблуждение приобретателей, поэтому важными элементами в контроле безопасности и качества продуктов животного происхождения являются идентификация продукции и определение фальсифицирующих примесей и, в частности, определение видовой принадлежности мяса и генетически модифицированных примесей.

Гармонизация ветеринарного надзора требует развития системы мониторинговых исследований качества и безопасности пищевых продуктов в соответствии с международными критериями.

Таким образом, совершенствование системы обеспечения безопасности объектов ветеринарного контроля в мегаполисе Москва является одной из актуальных задач в современных условиях реформы технического регулирования.

Цель и задачи исследований.

Целью исследований являлось совершенствование системы обеспечения безопасности объектов ветеринарного контроля в мегаполисе Москва.

В задачи исследований входило:

- совершенствование правовой и нормативной базы ветеринарного контроля в мегаполисе Москва;

- совершенствование структуры и научно-методического обеспечения ветеринарно-лабораторного контроля в специализированных лабораториях и в лабораториях на рынках;

-совершенствование методов определения показателей безопасности и качества сырья и пищевых продуктов на основе ДНК-диагностики и иммуноанализа;

- разработка системы ветеринарного лабораторного мониторинга в мегаполисе Москва.

Научная новизна.

Разработана усовершенствованная система ветеринарного лабораторного контроля пищевых продуктов и продовольственного сырья, включающая критерии и методы, гармонизированные с международными стандартами.

Осуществлена адашация методов оценки качества и безопасности в ветеринарном отношении продукции к стационарным условиям высокоспециализированных лабораторий, а также для лабораторий на рынке.

Разработаны и внедрены для использования в Северном и Центральном административных округах подвижные лаборатории ветсрииарно-сапитарной экспертизы - ПЛВСЭ (на базе автомобилей Газель и ЗИЛ). В настоящее время создается ПЛВСЭ (на базе автобуса ПАЗ) в Юго-Восточном административном округе.

Разработан ряд методических указаний для ветеринарных специалистов, являющихся составной частью встеринарно-санитарного контроля и способствующих обеспечению безопасности, находящейся в

обороте города Москвы продукции животного и растительного происхождения.

Эти документы устанавливают порядок ветеринарно-санитарной оценки и использования продукции не только по результатам лабораюрных исследований, а с учетом всего комплекса имеющихся факторов -результатов ветсанэкспертизы, наличия или отсутствия сопроводительных документов, маркировки, условий поставки, хранения продукции и т.д.

На основе ДНК-ДНК гибридизации с ДНК-зондами, меченными биотином, разработана методика идентификации листерий и сальмонелл в продуктах животного происхождения.

Усовершенствованы процедуры идентификации мяса и мясопродуктов с использованием методов иммунодиффузии.

Разработана система государственного ветеринарного лабораторного мониторинга в городе Москве.

Практическая ценность.

На основании проведенных исследований разработана и внедрена структура государственной ветеринарной службы, обеспечивающая выполнение функций контроля (надзора) и оказания ветеринарных услуг, подготовлен ряд нормативных правовых и методических документов, внедрены новые методы и средства (и том числе мобильные) лабораюрного контроля, что позволило усовершенствовать систему обеспечения безопасности объектов ветеринарного контроля. Утверждено 11 НТД.

Созданная структура службы и система обеспечения безопасности объектов ветеринарного контроля успешно реализована на практике в городе Москве, приемлема и рекомендуется для реализации в других субъектах Российской Федерации.

Подготовлен, принят Мосгордумой и утвержден мэром Москвы закон № 33 от 29.06.2005 г. "Об эпизоотическом и ветеринарно-санитарном благополучии города Москвы".

Введена практика участия в различного рода программах, в частности в "Программе по развитию оптовой торговли продовольствием в городе Москве на 2005-2007 годы".

Принято участие в разработке Концепции и проекта закона города Москвы "О продовольственной безопасности города Москвы", который принят в 2006 г.

Подготовлен и находится в стадии утверждения проект постановления Правительства города Москвы "О неотложных мерах по обеспечению безопасности в ветеринарном отношении пищевых продуктов и продовольственного сырья животного происхождения, находящихся в обороте на потребительском рынке города Москвы".

Апробация работы.

Материалы диссертации доложены и обсуждены на:

- заседании Ученого совета ВНИИВСГЭ (2004 г.);

- межлабораториом совещании ВНИИВСГЭ (2006 г.);

- IV международной научно-пракгической конференции «Аюуальные проблемы ветеринарной медицины и ветерипарно-санитарпого конгроля сельскохозяйственной продукции» в г. Москве (2002 г.);

VI международной конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины, ветерииарно-санитариого контроля и биологической безопасности сельскохозяйственной продукции», г. Москва (2004 г.).

- Всероссийских ветеринарных конгрессах, г. Москва 2005, 2006 гг.

Публикации. Результаты исследований отражены в 5 научных статьях,

в том числе в журнале «Ветеринария», определенным Перечнем ВАК РФ.

Структура и объем работы.

Диссертация состоит из введения, литературного обзора, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка использованной литературы и приложении.

Диссертация изложена на 139 страницах машинописного текста, содержит 7_таблиц и 23 рисунка. Список литературы включает 181 источник отечественных и зарубежных авторов.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы исследований.

Работа проводилась в период с 2000 по 2006 гг.

Экспериментальная часть работы выполнена в отделе технического регулирования, стандартизации и сертификации и лаборатории санитарной микробиологии ГНУ ВНИИВСГЭ и в Московской городской ветеринарной лаборатории.

Мы благодарны сотрудникам ГНУ ВНИИВСГЭ: профессору Светличкину В.В., к.б.н. Кононенко А.Б., к.б.н. Гуненковой Н.К.: сотрудникам государственной ветеринарной службы города Москвы: к.в.н. Буркову В.И., к.в.н. Сорокину Ю.А., Петровой Л.В., Розановой И.И., Крюкову O.A., Нестеровой А.И., Зубковой И.С. за неоценимую помощь в выполнении практических и организационных элементов работы.

В работе использовались образцы проб, взятых для мониторинг овы.-; исследований, поступивших по обращению физических и юридических лиц, а также образцы для лабораторных испытаний. При этом применялись различные методы исследования продукции для определения показателей безопасности и качества животноводческой продукции, включая биохимические, микробиологические. хроматснрафические,

радиологические, иммунологические методы и методы генной диагностики.

2.2. Результаты исследований

2.2.1. С'овсршенс! вование правовой и норма гибкой базы ветеринарного контроля в мегаполисе Москва

На первом этапе, с учетом анализа международных и отечественных нормативных документов, была проведена работа по совершенствованию правовой и нормативной базы, используемой в ветеринарной практике.

Был подготовлен, принят Мосг ордумой и утвержден мэром Москвы закон № 33 от 29.06.2005 г. "Об эпизоотическом и ветеринарно-санитарном благополучии города Москвы".

Законом предусмотрено регулирование отношений в области обеспечения эпизоотического и ветеринарно-санитариого благополучия в целях защиты населения от болезней, общих для человека и животных, производства и реализации безопасной в ветеринарном отношении продукции животноводства, предупреждения появления и распространения заразных и массовых незаразных болезней животных.

В законе разграничиваются функции ветеринарного контроля (надзора) и оказания ветеринарных услуг в городе, а также регламентируется деятельность должностных лиц государственной ветеринарной службы, предпринимателей в области ветеринарии, хозяйствующих субъектов и граждан в вопросах обеспечения эпизоотического и ветеринарно-санитарного благополучия города.

Выполнен значительный объем работы по созданию банка нормативной правовой базы, а также по разработке методических рекомендаций и указаний для функционирования ветеринарной деятельности.

Были разработаны Методические рекомендации по заполнению формы «Акт отбора проб продукции животного и растительного происхождения» для лабораторных исследований.

Для ветеринарных специалистов Объединения ветеринарии мегаполиса Москва нами разработаны ме1 одические рекомендации по оформлению и выдаче «Ветеринарного удостоверения».

Кроме того были разработаны: «Пособие по метрологии для специалистов ГЛВСЭ на рынке», 2004 г; «Мясо птицы. Порядок отбора проб. Ветерштрно-санитарные требования при переработке. Порядок хранения и реализации в торговой сети», 2004 г.; методические указания «Порядок проведения ветсанэкспертизы квашено-соленых, маринованных

овощей и салатов по-корейски», 2005 г.; методические указания «По проведению подтверждения соответствия ветеринарно-санитарным требованиям предприятий по убою сельскохозяйственных животных (птицы), хранению, переработке и реализации продовольственного сырья и продуктов питания на территории г. Москвы», 2005 г.; методические указания «Компьютерная программа по учету импортного мясосырья, предназначенного для промышленной переработки по категории С», 2006 г.; методические указания «Компьютерная программа по обучению ветеринарных специалистов ПГВЭ на перерабатывающих предприятиях с учетом требований Директив ЕС и наличия «критических контрольных точек», 2006 г.

Разработанные методические рекомендации и методические указания являются составной частью ветеринарно-санитарного контроля и способствуют обеспечению безопасности находящейся в обороте мегаполиса Москва продукции животного и растительного происхождения.

Эти документы устанавливают порядок экспертизы, ветеринарно-санитарной опенки и использования продукции не только по результатам лабораторных исследований, а с учетом всего комплекса имеющихся факторов - результатов ветсанэкспертизы, наличия (отсутствия) и качественного состояния сопроводительных документов, маркировки, условий поставки, транспортирования и хранения.

2.2.2. Совершенствование научно-методической базы встерннарно-лабораторного контроля в мегаполисе Москва.

Реформа технического регулирования предопределяет гармонизацию структур ветеринарного надзора и требований оценки безопасности и качества продукции. С целью совершенствования работы ветеринарной службы города Москвы нами проведена соответствующая реорганизация. Создан орган исполнительной власти, уполномоченный в области ветеринарии, — Комитет ветеринарии города Москвы с государственной ветеринарной инспекцией и профильными подразделениями в своем составе.

призванными осуществлять контрольные (надзорные), исполнительно-распорядительные функции и взаимодействие с федеральными и городскими органами власти, а также ветеринарными учреждениями, осуществляющими функции оказания ветеринарных услуг:

- ГУ «Мосветобъединепие» (в составе Городской ветеринарной лаборатории, 10-ти станций по борьбе с болезнями животных административных округов города (СББЖ), 6-ти участковых ветеринарных лечебниц, 16-ти ветеринарных участков, 75-ти лабораторий ветеринарно-санитарной экспертизы на рынках (ГЛВСЭ), а также подразделений госветслужбы на предприятиях по хранению и переработке продовольственного сырья и пищевых продуктов животного происхождения);

- ГУ «Мосветстанция», выполняющая задачи по профилактики особо опасных болезней животных являющаяся карантинной базой города.

Значительное внимание уделено подготовке ветеринарных специалистов. Регулярно проводится их обучение на курсах повышения квалификации.

Организуются тематические семинары, мастер-классы. Не реже, чем один раз в 5 лет ветеринарные врачи проходят аттестацию. С 2002 года аттестация проводится на рабочих местах, и это дает возможность не только оценить теоретические знания, но и практические навыки.

Проводятся конкурсы «Мастер по профессии», что является стимулом для повышения квалификации специалистов.

2.2.2.1. Совершенствование ветеринарно-лабораюрного контроля на рынках

Ветеринарно-санитарная экспертиза на рынках требует ускоренных методов анализа.

Лаборатории на рынках исисыьзуюг классические методы ветсаюкспертизы, основанные на органолептических исследованиях, а также с использованием приборов, таких, например, как трихинеллоскоп, рефрактометр и другие. В тоже время, ве ¡еринарно-санигарная экспертиза на рынках требует применения ускоренных методов анализа. В последнее время для проведения анализов нами стали внедряться экспрессные тесты на основе иммунологических методов с использованием гест - полосок.

Одним из основных элементов контроля качества и безопасности продукции, согласно Федеральному закону «О техническом регулировании», является ее идентификация. Появление в обороге недоброкачес Iвенной, фальсифицированной мясной продукции, несоответствующей международным и национальным стандартам, представляет серьезную угрозу для здоровья населения, либо приводит к значительному снижению ее качественных характеристик и потребительских свойств.

Для решения некоторых аспектов проблемы качества, безопасности и подтверждения соответствия продукции возникает необходимость внедрения эффективных методов и тест-сисчем, отвечающих требованиям международных стандартов.

Целью следующего этапа наших исследований являлось внедрение тест-систем производства США для идентификации мяса и мясных продуктов. Наборы реагентов выпускаются под контролем системы качества сертификации по стандарту ИСО - 9001. Тест - системы на основе иммунодиффузии дают возможность определить видовую принадлежность мяса и мясопродуктов иммунологическим методом. Принцип реакции (метод иммунодиффузии по Оухтерлони) основан на диффузии диагностических антител и испытуемого антигена из пропитанных дисков в гель, при этом в случае их взаимодействия образуется полоса преципитации между противоположными дисками. Постановка реакции иммунодиффузии занимала по времени 10-20 минут (без учета времени доведения всех компонентов набора до комнатной температуры).

В процессе испытаний были получены результаты, подтверждающие высокую специфичность и чувствительность определения видовой принадлежности мяса (до 5% козлятины и баранины в фаршевых смесях).

Простота постановки эксперимента и скорость анализа позволили использовать данную методику в лабораториях на рынках.

Для организации ветеринарного обслуживания ярмарок выходного дня, а так же в целях осуществления контроля безопасности и качества пищевых продуктов, реализуемых на ярмарках и рынках, где отсутствуют ГЛВСЭ, государственной ве!еринарной службой города, совместно с префектурами Северного и Центрального административных округов, разработаны и созданы подвижные лаборатории ветеринарно-санитарной экспертизы (ТТЛВСЭ) на базе автомобилей Газель и ЗИЛ. ПЛВСЭ оснащены анализаторами качества молока «Клевер», нитратомерами «Микон-100», микроскопами, трихинеллоскопами, рефрактометрами «ИРФ-454». овоскопами, радиометр-спектрометрами универсальными РСУ-01 «Сигнал», дозиметрами ДРГ-01 Т1, газоанализаторами «Хоббит-Т», а также химической посудой и реактивами.

ПЛВСЭ позволяют мобильно и оперативно производить радиометрические, физико-химические, бактериоскопические исследования, вегеринарно-санитарную экспертизу меда, трихинеллос копию мяса, овоскопию яиц, исследование на содержание нитратов, исключать случаи фальсификации пищевых продуктов в различных районах города с применением современного оборудования и методов, включающих стандартизованные по международным требованиям тест-систсмы, а также тест-системы отечественного производства, отвечающие международным стандартам.

Системы жизнеобеспечения лабораторий позволяют работать как от внешнего источника питания 220 В, так и от автономного бензогенератора 1,7 Квт. Имеется возможность выполнять работу в течение 4-х часов от

бортового аккумулятора. Лаборатории оснащены автомобильными холодильниками, ноутбуками для обработки и анализа информации.

Проверка продукщш проводилась на 39 продовольственных рынках н продуктовых ярмарках I. Москвы. 1де 0тс>1ствуюг ГЛВСЭ. В 2005 г. -сделано 26 выездов, проведено 257 исследований.

2.2.2.2, Совершенствование ветерииарно-лзбора горного контроля в Московской городской ветеринарной лаборатории

В случае необходимости уточнения и подтверждения диагностики в соответствии с установленным порядком, исследуемые пробы направляются в Московскую городскую ветеринарную лабораторию.

Лаборатория проводит широкий спектр плановых исследований с использованием современных методов. С целью гармонизации ветеринарного лабораторного контроля в Московской городской ветеринарной лаборатории внедрены современные высокоспештфичные и высокочувствительные методы определения безопасности и качества продукции, подлежащей ветеринарному контролю, а также методы диагностики болезней животных. Среди этих методов, в первую очередь, следует отметить методы ДНК-диагностики: ПЦР, 1ЩР в реальном времени, методы ДНК-гибридизации с использованием люминесцентной метки, иммунологические методы, методы определения качественных показа гелей пищевых продуктов.

Внедрение этих методов позволило значительно расширить спектр проводимых анализов по диагностике заболеваний животных, а также контроль сырья и продуктов питания по всем необходимым критериям безопасности и качества.

В настоящее время лаборатория проводит диагностику болезней домашних животных (собаки, кошки), птиц, рыб, пчел и других видов животных.

Таким образом, нами усовершенствован ветеринарный лабораторный контроль в мегаполисе Москва, который представляет собой систему, состоящую из первичных элементов - лабораторий на рынкак, подвижных

лабораторий, лабораторий клинической дчашоетикн, которые могут работать как в автономном режиме, так и во взаимосвязи с Московской городской ветеринарной лабораторией - центральным элементом системы.

Система способна выполнить соответствующие задачи ветеринарного лабораторного контроля: начиная от экспрессных скрининговых анализов до высокоспецифичных арбитражных исследований. Проведенные работы по гармонизации системы позволяют проводить диагностику болезней животных и контроль продукции в соответствии с международными требованиями с использованием методов и тест-систем, отвечающих международным стандартам.

2.2.3. Совершенствование ветеринарного лабораторного контроля микробных контаминации на основе ДНК-днпгноа нкн Идентификацию бактерий рода Salmonella, а также Listcria monocytogenes в пищевых продуктах, проводили методом твердофазного гетерогенного гибридизационного ДНК-РНК анализа с хсмилюминссцентным детектированием, а также по разработанной нами модифицированной методике на основе ДНК-ДНК i ибридизации с использованием ДНК-зондов, меченных биотипом.

Метод ускоренного выявления бактерий родов Salmonella и Listeria предусматривает высев определенных количеств исследуемых образцов (пищевых продуктов или смывной жидкости) б специальные неселективиые и селективные питательные среды, инкубирование посевов для накопления микроорганизмов, обработку культуральной жидкости лизирующнм буфером для денатурации бактериальной рибосомальной РНК, гибридизацию фрагментов денатурированной РНК с комплементарным ей меченым зондом, входящим в набор «Люмипроб~24», хсмилюминесцентным детектированием продуктов реакции.

Разработанная нами модифицированная методика предусматривает обогащение культур на неселективных пли селективных питательных средах, лизис культур, очистку, денатурацию и иммобилизацию ДНК на мембранные

нитроцеллюлозные фильтры, точечную гибридизацию с ДНК-зондями, меченными биотином, реакцию с конъюгаюм, субстратом и красителем и оценку конечного результата по интенсивности окрашивания точек с гибридными молекулами.

Нами проведены сравнительные испытания методов ДНК-диагностики микроорганизмов на основе биотииилированных зондов и с использованием прибора Люмипроб.

ДНК-зонды, меченные биотином или люминесцентной меткой, гибридизовались с собственными нуклеиновыми кислотами и не наблюдалось гибридизации с гетерологичными нуклеиновыми кислотами.

Гибридизация ДНК-зондов на сальмонеллы специфично проявлялась в смесях, содержащих сальмонеллы и гетерологичные культуры микроорганизмов.

Как показали сравнительные исследования, оба метода обладают высокой специфичностью и быстродействием. Однако, метод с хемилюминесцентным детектированием имеет более высокую чувствительность. Вместе с тем, преимущество меюдики с ДНК-зондом, меченным биотином, заключается в более простом способе детектирования, не требующем приборной реализации. Вследствие сказанного, оба метода, имеют перспективу в плане практического использования: метод на основе хсмишоминесцентного детектирования может применяться в специализированной ветеринарной лаборатории; метод с использованием биотинилированного ДНК-зонда в лабораториях нестационарного типа.

2.2.4. Разработка системы лабораторного ветеринарного мониториш а в ма аяолисе Москва.

2.2.4.1. Обеспечение эпизоотического благополучия Москвы.

В целях обеспечения эпизоотического благополучия столицы, с учетом показаний и наличия восприимчивых животных, ежегодно вакцинируется против бешенства - около 300,0 тыс. гол., лептоспироза - более 80,0 тыс.

гол., гриппа пищ - около 34,0 тыс. гол., ящура - 0,5 тыс. гол., сибирской язвы - 0,8 тыс. гол.

Карантинирустся для исключения бешенства - 400 - 450 животных.

Ежегодно проводится более 500 исследований биологического материала на бешенство. Учитывая опасность бешенства для человека, организуется от 800 до 900 выездных (при ДЕЗах) прививочных пунктов. Информация о проведении "прививочной компании" до населения доводится через городские и муниципальные печатные издания, кабельное телевидение и объявления.

По 79 соглашениям с негосударственными ветеринарными клиниками осуществляется работа по упорядочению вакцинации мелких домашних животных.

Во всех случаях выявления заболевания животных карантинными и особо опасными болезнями, в том числе общими для человека и животных, организуются и проводятся специальные ветеринарные мероприятия по их локализации и ликвидации.

В целях не допущения заноса возбуди i еля гриппа птиц в Москву из неблагополучных регионов предприняты дополнительные специальные меры профилактики: усилен контроль ввоза и реализации птицы в городе; активизирован мониторинг за циркуляцией вируса гриппа птиц путем исследования биоматериала от различной птицы; создан запас дезинфицирующих средств; приобретена специальная защитная одежда для выполнения специальных мероприятий в возможных эпизоотических очагах.

Общее количество привитой птицы на 20.11.06 г. составило 34 тыс. голов (80%), из них декоративной птицы и голубей 29 тыс, голов (74%).

Сельскохозяйственная (домашняя) птица в количестве 4,0 тыс. голов вакцинирована в полном объеме (100%), в том числе в зонах риска.

Учитывая, что декоративная птица и голуби также могут являться фактором передачи (носителями) инфекции проводится дополнительная работа по полному охвату их вакцинацией. На постоянной основе

осуществляется еженедельный осмотр лшцы в зооуголках школьных и дошкольных учреждений Департамента образования города Москвы.

В 2006 году исследовано 25,6 тыс. проб различного биоматсриала от птиц (из них сыворотки крови - 1,6 тыс., методом генной инженерии - 24 тыс., в том числе 914 трупов птиц). Все результаты исследований отрицательные, что подтверждает отсутствие циркуляции вируса гриппа птиц на территории города.

В государственных лечебных клиниках оказана ветеринарная помощь более 211 тыс. домашним животным. Ежегодно проводится ветеринарное обеспечение около 300 мероприятий с участием животных (выставки, соревнования).

2.2.4.2. Обеспечение безопасности продовольствия, находящегося в обороте на территории Москвы

Работа по совершенствованию в целом системы обеспечения безопасности подконтрольных объектов позволила практически реализовать и вопросы обеспечения безопасности продовольствия, находящегося в обороте на территории Москвы, являющиеся важнейшими для государственной ветеринарной службы города.

По результатам ветеринарно-санитарной экспертизы и лабораторных исследований только в 200Ó юду не допущено к реализации более 4956,62 тонн пищевой продукции.

Благодаря отлаженной системе контроля ежегодно при проведении 1,52,0 млн. экспертиз и более 400,0 тыс. лабораторных исследований выявляется около 30 тысяч случаев болезней различной этиологии, в том числе до 100 инфекционных и 12- 13 тыс. инвазионных заболеваний. Одним из показателей эффективности выстроенной системы контроля является выявление в текущем году возбудителя сибирской язвы в мясе, уже прошедшем ветсанэкспертизу в регионе, на одном из предприятий потребительского рынка города (ГУЛ «Кунцевский»). Тем самым предотвращена реальная угроза здоровью и жизни людей.

Нами нроведены расчет ы предотвращенного материального ущерба на основании Методических указаний института медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И.Марциновского, ММА им. И.М.Сеченова (от 16.05.2005 г. № -1239) из которых следует, что только в результате своевременно выявленных и не допущенных к реализации продуктов, зараженных финнозом в 2006 году, при возможном инфицировании от 10 до 50% людей употребивших такие продукты, предотвращенный возможный ущерб в денежном выражении составил от 420.0 млн. до 2,0 млрд. руб.

Из данных расчетов ясно видна значимость результатов работы специалистов госветслужбы для сохранения здоровья и жизней людей и предотвращения ущерба для бюджета города. Тем самым, учитывая общее количество выявленных инвазионных заболеваний, предотвращено заражение сотен тысяч человек болезнями, общими для человека и животных.

При проведении мониторинговых исследований продовольственного сырья и пищевых продуктов в Городской ветеринарной лаборатории в текущем году выявлено значшельное количество продукции с содержанием возбудителей заразных болезней, гормонов, антибиотиков, а также других вредных и токсичных веществ, в том числе радионуклидов.

Продукция, не соотве^твующая нормативным критериям, в дальнейшем изымалась из оборота и подвергалась переработке в соответствии с ветеринарным законодательством.

Кроме этого, нами предложен механизм обмена информацией госветслужбы г. Москвы с территориальными органами Россельхознадзора, который способствовал бы обеспечению строгого контроля и учета продукции, не предназначенной для свободной реализации.

2.2,4.3. Мониторинг продукции но количее! венному определению

ГМИ с помощью 11ЦР в реальном временя

Следующим этапом наших исследований была организация мониторинга продукции на количественное содержание Г МИ с помощью ПЦР в реальном времени. При этом руководствовались действующими нормативными документами СанПиН и указанием Роспотребнадзора

Мониторинговые исследования по количественному определению генетически модифицированных источников (ГМИ) осуществлялись с помощью ПЦР в реальном времени.

В настоящее время совместно с Департаментом потребительского рынка и услуг города Москвы, другими заинтересованными органами подготовлен и прошел согласование проект постановления Правительства Москвы «О дополнительных мерах по обеспечению качества и безопасности пищевых продуктов, информированию потребителей в городе Москве», регулирующий использование продукции, содержащей ГМИ, и обязательное ее маркирование и лабораторный контроль.

Мониторинговые исследования на количественное определение ГМИ проводили с использованием термоциклера «ABI PR1ZM-7000».

По результатам анализов за 2005-2006 j оды из 165 исследованных образцов нами было обнаружено 25 образцов, содержащих ГМИ в количестве более 0,9%. При этом наличие в продуктах ГМИ не было декларировано.

Нами выработаны и практически реализованы пути совершенствования контроля за оборотом пищевых продуктов, полученных с использованием ГМИ, в городе Москве. Таким образом, разработанная и внедренная нами система мониторинга позволяет обеспечить безопасность и качество находящейся в обороте мегаполиса Москва продукции.

ВЫВОДЫ:

1. Создана структура государственной ветеринарной службы в мегаполисе Москва, разграничивающая функции ветеринарного контроля (надзора) и оказания ве!еринарных услуг.

2. Сформирована нормативная правовая база государственной ветеринарной службы города (закон, постановления и распоряжения Правительства Москвы, приказы, методические указания и рекомендации, формы учетных документов), формирующая правовую основу государственной ветеринарной службы и обеспечивающая четкую и эффективную работу ветеринарных специалистов,

3. Благодаря усовершенствованию материальной базы создана система ветеринарного лаборагорного контроля, позволяющая решать вопросы ветеринарно-санитарной безопасности в государственных лабораториях и подразделениях ветеринарно-санитарной экспертизы (ГЛВСЭ, ТТГВЭ) на предприятиях потребительского рынка и перерабатывающих предприятиях продовольственного комплекса города.

4. Созданы подвижные лаборатории ветеринарно-санитарной экспертиза! (11ЛВСЭ), работающие как в автономном режиме, так и во взаимодействии с городской ветеринарной лабораторией - центральным элементом системы, способной выполнять от экспрессных (скрпнинговых) анализов до высокоспецифичных арбитражных исследований.

5. Внедрены современные высокоспецифичные и высокочувствительные методы определения качества и безопасности пищевой продукции; жидкостной и газовой хроматографии, 1ЩР, 1 ОДР в реальном времени, ДНК-гибридизации с использованием люминесцентной метки.

6. Усовершенствована методика лабораторных исследований в ГЛВСЭ на рынках путем внедрения экспрессных методов ветеринарно-санитарной экспертизы (методики идентификации мясной продукции на основе иммунодиффузии), а также ускоренных методов обнаружения листерий и сальмонелл на основе ДНК-диагностики.

7. Повышена чувствительность, специфичность и сокращены сроки проведения лабораторных исследований путем совершенствования методов идентификации сальмонелл и листерий на основе твердофазного гетерогенного гибридизационного ДНК, РНК- анализа с хемилюмипесцентным детектированием, а также с использованием разработанной нами модифицированной методики на основе ДНК-гибридизации на фильтрах с ДНК-зондами, мечеными биотипом.

8. Разработана система государственного ветеринарного мониторинга остаточного количества вредных и токсичных веществ в пищевых продуктах и продовольственном сырье, находящихся в обороте на потребительском рынке Москвы, позволяющая контролировать качество и безопасность продукции, обращаемой в городе.

9. Разработана усовершенствованная система обеспечения безопасности объектов ветеринарного контроля в мегаполисе Москва, позволяющая обеспечивать эпизоотическое и ветеринарно-санит арное благополучие, безопасность и качество продовольствия, сохранять здоровье и жизни шодей, предотвращать значительный экономический ущерб от заболеваний человека, вызываемых инфекционными и инвазионными болезнями.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРАКТИКИ

На основании результатов исследований разработаны:

1. Правила и нормы отбора проб пищевой продукции и продовольственного сырья для лабораторных исследований (утверждены ГУ Объединение ветеринарии города Москвы 23.12. 2003г. №3-03\ 1891).

2. Рекомендации по оформлению и выдаче Ветеринарно) о удостоверения ('утверждены ГУ Объединение ветеринарии города Москвы 03.06.2004 г. №3-08\ 1035).

3 Пособие по метрологии для специалистов ГЛВСЭ на рынках, 2004 г.

4. Методические рекомендации по определению видовой принадлежности мяса и мясопродуктов на основе иммунодиффузии

(утверждены Отделением ветеринарной медицины Россельхозакадемни, 18.03.2004 г.).

5. Методические рекомендации по определению видовой принадлежности мяса и мясопродуктов на основе ДНК-диагностики (утверждены Отделением ветеринарной медицины Россельхозакадемии, 18.03.2004 г.).

6. Методические указания по выдаче Заключения - предписания об использовании продовольственного сырья и пищевых продуктов, 2005 г. (утверждены ГУ Объединение ветеринарии города Москвы 27.10.2004г. №3-08X2143).

7. Методические указания «Мясо птицы. Порядок отбора проб. Ветеринарно-санитарные требования при переработке. Порядок хранения и реализации в торговой сети», 2004 г.

8. Методические указания по проведению подтверждения соответствия ветеринарно-санитарным требованиям предприятий по убою сельскохозяйственных животных (птицы), храпению переработке и реализации продовольственного сырья и пищевых продуктов на территории города Москвы, 2005 г.

9. Методические указания «Порядок проведения ветсанэкспертизы квашено-соленых, маринованных овощей и салатов по-корейски», 2005 г.

10. Методические указания «Компьютерная программа по учету импортного мясосырья, предназначенного для промышленной переработке по категории «С», 2006 г.

11. Методические указания «Компьютерная программа по обучению ветеринарных специалистов 111 НЭ на перерабатывающих предприятиях, с учетом требований Директив ЕС и наличия «критических точек», 2006 г.

12. Подвижные лаборатории ветеринарно-санигарной экспертизы (ПЛВСЭ).

13.Система государственного ветеринарного мониторинга в городе Москве.

СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ

1. Туник А.Н. / Ветеринарное обеспечение города Москвы // «Ветеринария» 2,2004, стр. 3-6

2. Туник А.Н /Состояние и пути совершенствования обеспечения безопасности пищевых продуктов и продовольственного сырья в ветеринарном отношении в городе Москве // Продовольственная безопасность России; сборник материалов научно-практической конференции, Москва 2005, стр. 47-56

3. Смирнов A.M., Туник А.Н., Светличкин В.В., Писарева В.М., Кононенко А.Б., Морозова E.H. / Определение видовой принадлежности мяса и мясопродуктов на основе ДНК-диагностики и иммунодиффузии // «Ветеринария», 2005,5 стр.52-54

4. Туник А.Н. / Реформа технического регулирования и задачи Московской городского ветеринарного надзора // Труды ВНИИВСГЭ "Проблемы ветеринарной санитарии и экологии", Москва, 2006, том. 118, стр. 7-11

5. Туник А.Н / Обеспечение эпизоотического и вегеринарно-санитарного благополучия Москвы. // Труды ВНИИВСГЭ "Проблемы ветеринарной санитарии и экологии", Москва, 2006, том 11В, стр. 12-17.

ВНИИВСГЭ г. Москва, Звенигородское шоссе, 5 Заказ У 3 j f . Тираж 80 экз.

 
 

Оглавление диссертации Туник, Александр Николаевич :: 2007 :: Москва

ВВЕДЕНИЕ.

1 ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1 Реформа технического регулирования и задачи обеспечения 11 безопасности объектов ветеринарного контроля

1.2 Сравнительный анализ зарубежных и отечественных 15 критериев и методов оценки безопасности и качества продуктов животного и растительного происхождения.

2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1 Методы исследований.

2.1.1 Бактериологический метод.

2.1.2 Иммунологические методы идентификации микроорганизмов

2.1.3 Методы ДНК-диагностики микроорганизмов.

2.1.4 Методика идентификации патогенов с помощью ДНК-РНК 31 гибридизации на приборе Люмипроб.

2.1.5 ДНК-гибридизация с использованием тест-набора с ДНК- 33 зондами, меченными биотином.

2.1.6 Методика определения видовой принадлежности мяса на 38 основе иммунодиффузии.

2.1.7 Методика определения ГМИ на основе ПЦР и 42 электрофоретического детектирования.

2.1.8 Методика количественного определения ГМИ на основе ПЦР 43 в реальном времени.

2.1.9 Статистическая обработка результатов.

2.2 Результаты исследований

2.2.1 Совершенствование правовой и нормативной базы ветеринарного контроля в мегаполисе Москва.

2.2.2 Совершенствование научно-методической базы ветеринарно- 51 лабораторного контроля в мегаполисе Москва

2.2.2.1 Совершенствование ветеринарно-лабораторного контроля на 56 рынках.

2.2.2.2 Совершенствование ветеринарно-лабораторного контроля в 63 Московской городской ветеринарной лаборатории.

2.2.3 Совершенствование ветеринарного лабораторного контроля 70 микробных контаминаций на основе ДНК-диагностики.

2.2.4 Разработка системы лабораторного ветеринарного 75 мониторинга в мегаполисе Москва.

2.2.4.1 Обеспечение эпизоотического благополучия Москвы.

2.2.4.2 Обеспечение безопасности продовольствия, находящегося в 79 обороте на территории Москвы.

2.2.4.3 Мониторинг продукции по количественному определению 102 ГМИ с помощью ПЦР в реальном времени.

3 Обсуждение результатов.

Выводы.

 
 

Введение диссертации по теме "Ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и ветеринарно-санитарная экспертиза", Туник, Александр Николаевич, автореферат

Актуальность темы.

Москва является крупнейшим субъектом с постоянно развивающимися внешнеэкономическими и межрегиональными связями, огромным количеством перемещаемой продукции, в том числе из-за рубежа, значительным количеством предприятий и объектов, подконтрольных ветеринарному надзору.

Под государственным ветеринарным надзором и на ветеринарном обслуживании находится 4500 предприятий, деятельность которых связана с убоем скота, хранением, переработкой и реализацией продовольственного сырья и пищевых продуктов.

Обеспечение ветеринарного благополучия мегаполиса Москва требует решения сложных и многоплановых задач.

В задачи ветеринаров входит поддержание устойчивой эпизоотической обстановки в городе, проведение противоэпизоотических и лечебно-профилактических мероприятий, в том числе иммунизация животных, проведение лабораторно-диагностических исследований клинического и патологического материала с целью выявления возбудителей болезней, общих для человека и животных. Существует необходимость профилактических работ и лечения животных, организации ветеринарного обеспечения животных на выставках. Очень важным направлением является проведение ветеринарно-санитарной экспертизы, контроль качества и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов на предприятиях по убою скота, предприятиях по хранению и переработке продукции животного происхождения, на продовольственных рынках, ярмарках и других предприятиях торговли, где осуществляется реализация продуктов питания непромышленной выработки, и продукции растительного происхождения.

Комитет ветеринарии города Москвы является одной из структурных единиц системы государственного ветеринарного надзора Российской Федерации. В своей деятельности он руководствуется нормативными документами Ветеринарного законодательства.

Совершенствование системы обеспечения безопасности ветеринарного благополучия пищевых продуктов и продовольственного сырья в городе Москва в настоящее время проходит в условиях реформы технического регулирования.

Федеральный закон «О техническом регулировании» создал основу для проведения государственной реформы технического регулирования. Суть преобразований сводится к тому, чтобы на основе рационального сочетания государственного регулирования и свободного предпринимательства, гармонизации с международной практикой этой деятельности обеспечить безопасность продукции и повышение ее конкурентоспособности (3, 13, 31, 47,61-62, 68-71,109).

Установление и регулирование обязательных требований к продукции и процессам производства является одним из инструментов государственного регулирования экономики.

Одним из основных условий вступления России в ВТО является соблюдение принципов в области технического регулирования, установленных в Соглашении по техническим барьерам в торговле, Соглашении по применению санитарных и фитосанитарных мер, а также в Кодексе добросовестной практики.

В то же время в соответствии со статьей 137 Договора, страны-члены ВТО имеют право на национальном уровне устанавливать требования, касающиеся охраны здоровья, защиты окружающей среды, защиты потребителей, а также в отношении других социальных аспектов.

Исходя из этих позиций реформы технического регулирования, необходимо провести совершенствование одного из основных ее элементов-государственного контроля и надзора, чтобы, с одной стороны, обеспечить гармонизацию с международными нормами, с другой, защитить интересы национальной безопасности, обеспечить качество и безопасность продукции.

Важной задачей при этом является совершенствование приборно-методической базы лабораторного ветеринарного контроля, переоснащение Московской городской ветеринарной лаборатории современными приборами и тест-системами, отвечающими международным стандартам, включая оборудование для газовой и высокоэффективной жидкостной хроматографии, для иммуноферментного анализа и ПНР в реальном времени. Для лабораторий на рынках необходимо оснащение экспрессными тест-системами для проведения ветсанэкспертизы.

Одним из основных критериев безопасности продукции является микробная контаминация. Наиболее перспективными, в плане чувствительности и специфичности индикации и идентификации микроорганизмов, показали себя методы генной диагностики (ДНК-гибридизация, амплификация генов). Они позволяют выявлять микроорганизмы и вирусы в смешанных культурах, дифференцировать патогенные и L-формы (2, 5-6, 14-20, 28, 36, 38-40, 42, 45, 47, 53, 55, 57, 65, 69, 73-75, 79-80, 83-84, 87, 89, 93-94, 99-100, 102, 106, 110, 114, 118-121, 128, 131-132, 135, 138-141, 144-145, 148-149, 151, 157, 160-161,165-166,177).

Одной из основных целей принятия технических регламентов, определенных Федеральным законом «О техническом регулировании», является предупреждение действий, вводящих в заблуждение приобретателей, поэтому важными элементами в контроле безопасности и качества продуктов животного происхождения являются идентификация продукции и определение фальсифицирующих примесей и, в частности, определение видовой принадлежности мяса и генетически модифицированных примесей (13, 43, 61-62, 70).

Таким образом, совершенствование системы обеспечения безопасности объектов ветеринарного контроля в мегаполисе Москва является одной из актуальных задач в современных условиях реформы технического регулирования.

Цель и задачи исследований.

Целью исследований являлось совершенствование системы обеспечения безопасности объектов ветеринарного контроля в мегаполисе Москва.

В задачи исследований входило:

- совершенствование правовой и нормативной базы ветеринарного контроля в мегаполисе Москва;

- совершенствование структуры и научно-методического обеспечения ветеринарно-лабораторного контроля в специализированных лабораториях и в лабораториях на рынках;

-совершенствование методов определения показателей безопасности и качества сырья и пищевых продуктов на основе ДНК-диагностики и иммуноанализа;

-разработка системы ветеринарного лабораторного мониторинга в мегаполисе Москва.

Научная новизна.

Разработана усовершенствованная система ветеринарного лабораторного контроля пищевых продуктов и продовольственного сырья, включающая критерии и методы, гармонизированные с международными стандартами.

Осуществлена адаптация в ветеринарном отношении методов оценки качества и безопасности продукции к стационарным условиям высокоспециализированных лабораторий, а также для лабораторий на рынке.

Разработаны и внедрены для использования в Северном и Центральном административных округах подвижные лаборатории ветеринарно-санитарной экспертизы - ПЛВСЭ (на базе автомобилей Газель и ЗИЛ). В настоящее время создается ПЛВСЭ (на базе автобуса ПАЗ) в Юго-Восточном административном округе.

Разработан ряд методических указаний для ветеринарных специалистов, являющихся составной частью ветеринарно-санитарного контроля и способствующих обеспечению безопасности, находящейся в обороте города Москвы продукции животного и растительного происхождения.

Эти документы устанавливают порядок ветеринарно-санитарной оценки и использования продукции не только по результатам лабораторных исследований, а с учетом всего комплекса имеющихся факторов -результатов ветсанэкспертизы, наличия или отсутствия сопроводительных документов, маркировки, условий поставки, хранения продукции и т.д.

На основе ДНК-РНК гибридизации с ДНК-зондами, меченными биотином, разработана методика идентификации листерий в продуктах животного происхождения.

Усовершенствованы процедуры идентификации мяса и мясопродуктов с использованием методов иммунодиффузии.

Разработана система государственного ветеринарного лабораторного мониторинга в городе Москве.

Практическая ценность.

На основании проведенных исследований разработана и внедрена структура государственной ветеринарной службы, обеспечивающая выполнение функций контроля (надзора) и оказания ветеринарных услуг, подготовлен ряд нормативных правовых и методических документов, внедрены новые методы и средства (в том числе мобильные) лабораторного контроля, что позволило усовершенствовать систему обеспечения безопасности объектов ветеринарного контроля. Утверждено 11 НТД.

Созданная структура службы и система обеспечения безопасности объектов ветеринарного контроля успешно реализована на практике в городе

Москве, приемлема и рекомендуется для реализации в других субъектах Российской Федерации.

Был подготовлен, принят Мосгордумой и утвержден мэром Москвы закон № 33 от 29.06.2005 г. "Об эпизоотическом и ветеринарно-санитарном благополучии города Москвы".

Введена практика участия в различного рода программах, в частности в "Программе по развитию оптовой торговли продовольствием в городе Москве на 2005-2007 годы".

Принято участие в разработке Концепции и проекта закона города Москвы "О продовольственной безопасности города Москвы", который принят в 2006 г.

Подготовлен и находится в стадии утверждения проект постановления Правительства города Москвы "О неотложных мерах по обеспечению безопасности в ветеринарном отношении пищевых продуктов и продовольственного сырья животного происхождения, находящихся в обороте на потребительском рынке города Москвы".

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на:

- заседании Ученого совета ВНИИВСГЭ (2004 г.);

- межлабораторном совещании ВНИИВСГЭ (2006 г.);

- IV международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины и ветеринарно-санитарного контроля сельскохозяйственной продукции» в г. Москве (2002 г.);

- VI Международной конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины, ветеринарно-санитарного контроля и биологической безопасности сельскохозяйственной продукции», г. Москва (2004 г.).

- Всероссийских ветеринарных конгрессах г. Москва 2005,2006 гг.

Публикации. Результаты исследований отражены в 5 научных статьях, в том числе, в журнале «Ветеринария», определенным Перечнем ВАК РФ.

Положения, выносимые на защиту.

Усовершенствование системы ветеринарного лабораторного контроля сырья и продуктов питания в мегаполисе Москва, включающей критерии и методы, гармонизированные с международными стандартами.

Адаптация методов оценки безопасности и качества продукции к стационарным условиям высокоспециализированных лабораторий, а также для лабораторий ветсанэкспертизы на продовольственных рынках.

Разработка подвижных лабораторий ветсанэкспертизы.

Усовершенствование нормативной документации при ветеринарно -лабораторном контроле.

Сравнительные исследования методов определения листерий и сальмонелл в продуктах животного происхождения на основе ДНК-диагностики. Чувствительность, специфичность и быстродействие методики твердофазной гетерогенной ДНК-РНК гибридизации с последующей флуоресцентной детекцией и методики ДНК-ДНК гибридизации с ДНК-зондами, меченными биотином.

Усовершенствованы процедуры идентификации мяса и мясопродуктов и определения ГМО с использованием методов иммунодиффузии и ПЦР в реальном времени.

Создана эффективная система Государственного ветеринарного лабораторного мониторинга в обеспечении безопасности объектов ветеринарного надзора в городе Москве.

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

 
 

Заключение диссертационного исследования на тему "Совершенствование системы обеспечения безопасности объектов ветеринарного контроля мегаполиса Москва"

ВЫВОДЫ:

1. Создана структура государственной ветеринарной службы в мегаполисе Москва, разграничивающая функции ветеринарного контроля (надзора) и оказания ветеринарных услуг.

2. Сформирована нормативная правовая база государственной ветеринарной службы города (закон, постановления и распоряжения Правительства Москвы, приказы, методические указания и рекомендации, формы учетных документов), формирующая правовую основу государственной ветеринарной службы и обеспечивающая четкую и эффективную работу ветеринарных специалистов.

3. Благодаря усовершенствованию материальной базы, создана система ветеринарного лабораторного контроля, позволяющая решать вопросы ветеринарно-санитарной безопасности в государственных лабораториях и подразделениях ветеринарно-санитарной экспертизы (ГЛВСЭ, ПГВЭ), на предприятиях потребительского рынка и перерабатывающих предприятиях продовольственного комплекса города.

4. Созданы подвижные лаборатории ветеринарно-санитарной экспертизы (ПЛВСЭ), работающие как в автономном режиме, так и во взаимодействии с городской ветеринарной лабораторией - центральным элементом системы, способной выполнять от экспрессных (скрининговых) анализов до высокоспецифичных арбитражных исследований.

5. Внедрены современные высокоспецифичные и высокочувствительные методы определения качества и безопасности пищевой продукции: жидкостной и газовой хроматографии, ПЦР, ПЦР в реальном времени, ДНК-гибридизации с использованием люминесцентной метки.

6. Усовершенствована методика лабораторных исследований в ГЛВСЭ на рынках путем внедрения экспрессных методов ветеринарно-санитарной экспертизы (методики идентификации мясной продукции на основе иммунодиффузии), а также ускоренных методов обнаружения листерий и сальмонелл на основе ДНК-диагностики.

7. Повышена чувствительность, специфичность и сокращены сроки проведения лабораторных исследований путем совершенствования методов идентификации сальмонелл и листерий на основе твердофазного гетерогенного гибридизационного ДНК, РНК- анализа с хемилюминесцентным детектированием, а также с использованием разработанной нами модифицированной методики на основе ДНК-гибридизации на фильтрах с ДНК-зондами, меченными биотином.

8. Разработана система государственного ветеринарного мониторинга остаточного количества вредных и токсичных веществ в пищевых продуктах и продовольственном сырье, находящихся в обороте на потребительском рынке Москвы, позволяющая контролировать качество и безопасность продукции, обращаемой в городе.

9. Разработана усовершенствованная система обеспечения безопасности объектов ветеринарного контроля в мегаполисе Москва, позволяющая обеспечивать эпизоотическое и ветеринарно-санитарное благополучие, безопасность и качество продовольствия, сохранять здоровье и жизни людей, предотвращать значительный экономический ущерб от заболеваний человека, вызываемых инфекционными и инвазионными болезнями.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРАКТИКИ

На основании результатов исследований разработаны:

1. Правила и нормы отбора проб пищевой продукции и продовольственного сырья для лабораторных исследований (утверждены ГУ Объединение ветеринарии города Москвы 23.12. 2003г. №3-03\ 1891).

2. Рекомендации по оформлению и выдаче Ветеринарного удостоверения (утверждены ГУ Объединение ветеринарии города Москвы 03.06.2004 г. №3-08\ 1035).

3. Пособие по метрологии для специалистов ГЛВСЭ на рынках, 2004 г.

4. Методические рекомендации по определению видовой принадлежности мяса и мясопродуктов на основе иммунодиффузии (утверждены Отделением ветеринарной медицины Россельхозакадемии, 18.03.2004 г.).

5. Методические рекомендации по определению видовой принадлежности мяса и мясопродуктов на основе ДНК-диагностики (утверждены Отделением ветеринарной медицины Россельхозакадемии, 18.03.2004 г.).

6. Методические указания по выдаче Заключения - предписания об использовании продовольственного сырья и пищевых продуктов, 2005 г. (утверждены ГУ Объединение ветеринарии города Москвы 27.10.2004г. №3-08\ 2143).

7. Методические указания «Мясо птицы. Порядок отбора проб. Ветеринарно-санитарные требования при переработке. Порядок хранения и реализации в торговой сети», 2004 г.

8. Методические указания по проведению подтверждения соответствия ветеринарно-санитарным требованиям предприятий по убою сельскохозяйственных животных (птицы), хранению переработке и реализации продовольственного сырья и пищевых продуктов на территории города Москвы, 2005 г.

9. Методические указания «Порядок проведения ветсанэкспертизы квашено-соленых, маринованных овощей и салатов по-корейски», 2005 г.

10. Методические указания «Компьютерная программа по учету импортного мясосырья, предназначенного для промышленной переработки по категории «С», 2006 г.

11. Методические указания «Компьютерная программа по обучению ветеринарных специалистов 111 ВЭ на перерабатывающих предприятиях, с учетом требований Директив ЕС и наличия «критических точек», 2006 г.

12. Подвижные лаборатории ветеринарно-санитарной экспертизы (ПЛВСЭ).

13.Система государственного ветеринарного мониторинга в городе Москве.

 
 

Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2007 года, Туник, Александр Николаевич

1. Александрова Н.А. и др. Методы оценки качества мяса и мясопродуктов за рубежом // М., 1997, стр. 156.

2. Алехина Л.В., Андреенко В.И., Ивашов В.И. Современные методы анализа качества мяса и мясопродуктов // Мясная промышленность, АгроНИИТЭИММП, М., 1991, стр. 35.

3. Антонов А.С. Молекулярные основы геносистематики // Изд. МГУ, М., 1980, с. 24-31.

4. Блохина И.Н., Леванова Г.Ф. Геносистематика бактерий // М., 1976.

5. Бровкина А.Н. Характеристика поливалентных сальльмонеллёзных диагностикумов для реакции латекс-агглютинации.// Сб. науч. Трудов ВНИИВСГЭ, том 107, М., 1999, с.22-26.

6. Бурков В.И., Боровков М.Ф., Колесниченко И.С., Касаткин B.C. Ветсанэкспертиза мяса и жира диких животных и пернатой дичи // Ветеринария, Москва, 2003, №2, с. 55 60.

7. Ю.Бутко М.П. Организация и современные методы проведения ветеринарно-санитарной экспертизы. Киев 1984.

8. И.Бутко М.П., Шапкина Л.П. Санитарно-гигиенические проблемы экспертизы мяса пернатой дичи // Сб.трудов 7-го всероссийского конгресса « Здоровое питание населения России» Москва, 2003, с.90.

9. Вельков В.В., Соколов М.С., Медвинский А,Б. Оценка агроэкологических рисков производства трансгенных энтомоцидных растений // Агрохимия, 2003,№ 2, с 74-96.

10. Версан В.Г. Актуальные проблемы введения в действие Федерального закона «О техническом регулировании» // Стандарты и качество, 2003, № 5, с. 30-32.

11. Ветеринарная микробиология. Под ред. Е.В. Козловского, П.А. Емельяненко//М., изд. «Колос», 1982, с. 138-141.

12. Воробьев А.А., Бондаренко В.М., Шабанова Н.А., Фиалкина С.В. ПНР тест-системы для геноиндикации энтерогеморрагических эшерихий // Журнал микробиологии, эпизоотологии и иммунологии, 2000, № 6, стр. 90-94.

13. Гинцбург А.Л. Генодиагностика инфекционных заболеваний // Журнал микробиологии, эпизоотологии и иммунологии, 1998, № 3, с. 86-95.

14. П.Гинцбург А.Л., Народицкий Б.С. Подходы к оценке биобезопасности генетически модифицированных микроорганизмов, используемых в пищевой продукции // Сб.трудов 7-го всероссийского конгресса « Здоровое питание населения России» Москва, 2003, с. 123-124.

15. Гинцбург А.Л. Современное состояние и перспективы молекулярно-генетических методов и решение задач медицинской микробиологии // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии, 1999, № 5, с.22-26.

16. Глотов А.Г., Орешкова С.Ф.; Кувшинов В.Н., Ильичев А.А. Выявление ДНК- вируса болезни Ауески гибридизацией с биотинилированными зондами // Ветеринария, 2001, № 2, с. 21-24.

17. Горбовицкая М. Диагностика болезни Марека с использованием ДНК-зондов // Птицеводство, М., 1996., № 2, с. 27-28.

18. Громов Б.В., Павленко Г.В. Экология бактерий // Д., изд. ЛГУ. 1989.

19. Дерюшева С.Е. Биотинилирование ДНК-зондов с помощью полимеразной цепной реакции // Труды ВНИИ генетики и разведения с/х животных, Санкт- Петербург, 1993, с.43-45.

20. Долгов В.А., Лавина С.А. Методические аспекты оценки качества и безопасности пищевой продукции и продовольственного сырья // Сб.трудов 7-го всероссийского конгресса «Здоровое питание населения России» Москва, 2003, с. 162.

21. Дубцова Г.Н., Кирюхина М.Н., Дубцов Г.Г. Мясные кулинарные изделия, обогащенные растительным белком // Сб.трудов 7-го всероссийского конгресса « Здоровое питание населения России» Москва, 2003, с.166-168.

22. Езерская Е.Я., Галочкин В. А. Идентификация видоспецифичных мышечных белков сельскохозяйственных животных и птицы.// Сельскохозяйственная биология. Сер.биология животных, 1999, № 6,с.З-9.

23. Кабанова Е.М. Определение видовой принадлежности мяса домашних и диких животных.// Автореферат диссертации кандидата ветеринарных наук, Чуваш, с.-х. акад. Чебоксары, 1999, с.23.

24. Комаров А.А. Методы оценки качества и безопасности кормов и кормовых добавок // Ветеринария, №1, 2001, стр. 51-56.

25. Комарова И.Н. / Разработка ПНР тест-систем для видовой идентификации и количественной оценки мясного сырья в составе мелкоизмельченных полуфабрикатов и готовых мясных продуктов/ автореферат, Москва,2005.

26. Комаров А.А., Обухов И.Л. Определение видовой принадлежности мясных ингридиентов в кормах для собак и кошек методом ПЦР // Восьмой международный конгресс по проблемам ветеринарной медицины мелких домашних животных. М., 2000, е., 27-28.

27. Комаров А.А., Обухов И.Л., Сорокина М.Ю., Панин А.Н. Определение видовой принадлежности тканей жвачных животных.// Ветеринария 2000., №3., с. 59-62.

28. Маккреди Б.Д., Чимера ДА. Обнаружение и идентификация патогенных микроорганизмов молекулярными методами // В кн. Молекулярная клиническая диагностика, М., изд. «Мир», 1999, с.496-506.

29. Малахов Ю.А., Душук Р.В. Специфическая профилактика и диагностика бактериальных болезней животных // Ветеринария, 2001, № 1, с. 35-39.

30. Маниатис Т, Фритч Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование//М., изд. «Мир»., 1994, с. 159-172.

31. Методы общей бактериологии. (Под ред. Герхардта Ф. и др.) // М., изд. «Мир», 1984, с. 89-96.

32. Микерин С.М. Способ бактериологической диагностики пищевых токсикоинфекций сальмонеллезной этиологии. Тез. докл. Нижний Новгород, 1991, т. I.e. 107-108.

33. Морозова Е.Н. /Гармонизация критериев и методов оценки качества и безопасности продуктов животного происхождения/ автореферат, Москва, 2005.

34. Николаева М.А., Лычников Д.С., Неверов А.Н. Идентификация и фальсификация пищевых продуктов // М., Экономика, 1996, стр. 84-95.

35. Паников Н.С. Кинетика роста микроорганизмов. Общие закономерности и экологические положения //М., «Наука», 1991, с.4-72.

36. Печуркин Н.С. Популяционная микробиология // Новосибирск, "Наука", 1978, с. 39-46.

37. Писарева В.М. Идентификация белков животного происхождения в пищевых продуктах электрофоретическим методом // Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук. Москва 1999.

38. Писарева В.М, Кононенко А.Б., Галкин А.В., Морозова Е.Н. Тихомирова Т.А., Маргиева С.А., Соколова Ю.Н. /Видовая принадлежность мяса на основе ДНК-диагностики// «Практик», № 3-4, 2004 г., стр. 30-33

39. Поляков А.А. Ветеринарная санитария//М., "Колос"., 1989, с. 14-24.

40. Поставин В.А. Пищевые токсикоинфекции // М., изд. "Медицина", 1980, с. 6-49.

41. Рогов И.А. Новые технологии производства продуктов здорового питания // Сб.трудов 7-го всероссийского конгресса « Здоровое питание населения России» Москва, 2003, с. 440-441.

42. Родин В.И. Сравнительная оценка методов ветеринарно-санитарного контроля пищевого сырья и готовых продуктов.// Материалы международной научно-технической конференции «Пищевой белок и экология». М. 2000, с. 188-189.

43. Романова JI.B., Мишанкин Б.Н., Сучков И.Ю. Полимеразная цепная реакция: генотипический скрининг штаммов Fran, tularensis сиспользованием неспецифических праймеров//Биотехнология, 1993, № 6, с. 8-9.

44. Руководство по методам анализа качества и безопасности пищевых продуктов. Под редакцией Скурихина И.М., Тутеляна В.А. // М., Изд. «Брандес»,« Медицина», 1998, стр. 232

45. Самуйленко А .Я., Кузнецов Д.П., Кузнецова С.В. иммуноферментный анализ в ветеринарной медицине //Ветеринария, № 12, с. 20-24.

46. Санитарные правила и нормы. СанПиН 2.3.2. 560-96. Гигиенические требования к качеству и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов // М., 1997, п.6, с.22-50.

47. Светличкин В.В. / Совершенствование контроля качества и безопасности продуктов животного происхождения в соответствии с требованиями Федерального закона «О техническом регулировании»// Труды ВНИИВСГЭ.

48. Сенченко Б.С., Кабанова Е.М. Определение видовой принадлежности мяса по температуре вспышки наружного и внутреннего жира некоторых видов животных.// Кубанский государственный аграрный университет, 1999, Вып.375,с.119-121.

49. Сидоров М.А., Билетова Н.В. Корпелаева J1.M. Микробиология мяса, мясопродуктов и птицепродуктов // М., Агропромиздат, 1996, с. 45-48.

50. Слесаренко Н.А., Курмакаева Т.В., Якушев С.В. Морфологические критерии определения видовой принадлежности мяса.// Современные вопросы интенсификации кормления, содерж. животных и улучшения качества продуктов животноводства, М.,1999, с.103-105.

51. Смирнов A.M., Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены, экологии и пути их решения // Тезисы докладов международной научной конференции "Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии (дезинфекция, дезинсекция, дератизация)", 1999, с 3-8.

52. Смирнов А.М, Светличкин В.В. Ветеринарно-санитарная и экологическая безопасность продукции животноводства// «Аграрный вестник Урала»,2006, № 3 (33), с.51-55.

53. Смирнов A.M., Симецкий М.А., Таланов Г.А. Состояние и перспективы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии // Ветеринария, 2001, № 10, с. 3-7.

54. Стикланд Ю.Е. Получение зондов и их мечение // В кн. Молекулярная клиническая диагностика. М, изд. «Мир», 1999, с. 329-372.

55. Тимошин В.Б., Замараев B.C., Антонов В.А., Липницкий А.В. Видоспецифический ДНК-зонд для идентификации токсигенных штаммоввозбудителя сибирской язвы. // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология, 1994, № 1, с. 30-33.

56. Турова Т.П. Определение таксономического положения микроорганизмов с помощью метода гибридизации ДНК // Биологические науки, 1989, № 2, с. 26-28.

57. Фрумгарц Л.Ф., Киприянов С.М., Калачиков С.М. и др. Получение флуоресцентной меченой ДНК и использование ее в качестве зонда при молекулярной гибридизации // Биоорганическая химия, 1986, №11, с. 1508-1513.

58. Хвыля С.И. Микроструктурный анализ, идентификация и фальсификация мясных продуктов// Пищевая промышленность, 1998, № 5, с. 68-69.

59. Хвыля С.И., Авилов В.В., Кузнецова Т.Г. Практическое применение гистологических методов анализа// Мясная промышленность, 1994, №6, с.9-11.

60. Херрингтон С., Макги Дж. Молекулярная клиническая диагностика // М, изд. «Мир», 1999, с.558.

61. Чан Т.В.Т. Гибридизация нуклеиновых кислот // В кн. Молекулярная клиническая диагност, методы, М., 1998, изд. «Мир», с. 374-394.

62. Черняева М.Н. Анализ видовой принадлежности мяса и мясопродуктов. // Ветеринария, 2001, №6, с.47-50.

63. Чумак P.M. Иммуноферментный анализ и рекомбинантные антигены // Лаб. Диагностика, 1999, № 3, с. 3-6.

64. Чуркина И.В., Сазонова А.А., Черепанов С.В., Смирнов А.Ф. Геномная дактилоскопия кур с использованием в качестве зонда ТГ-обогащеннойминисателлитной ДНК // Сельскохозяйственная биология, 1995, №2, 5355.

65. Шибата Д.К. Полимеразная цепная реакция и молекулярно-генетический анализ биотопов // В кн. Молекулярная клиническая диагностика. Методы. М., изд. «Мир», 1999, с. 395-425.

66. Шумилов К.В., Вылегжанина Е.С., Кузьмина В.Ф., Астахова Т.С., Богоутдинов З.Ф., Ниязов У.Э. ИФА для дифференциальной диагностики иерсиниоза и бруцеллеза у крупного рогатого скота // Ветеринария, 2000, № 9, с. 18-22.

67. Экологическая биотехнология (Под ред. Форстера К.Ф., Вейза Д.А.) // JL, изд. «Химия», 1990, с. 21-39.

68. Экология и генетика микроорганизмов (Под ред. Иванова А.И.) // Свердловск, 1991, с. 5-41.

69. Abraham J., Rajulu P.V. Species identification in unprocessed meats through agarose isoelectric focusing of urea-extracted proteins and myoglobin // Indian J.anim.Sc., 1992, v. 62, № 1, p. 69-74.

70. Adessi C., Matton G., Turcatti G., Mermod J., Mayer P., Kawashima E. Solid phase DNA amplification: characterisation of primer attachment and amplification mechanisms // Nucleic Acids Research, 2000, 28, 20, p. 87.

71. Akerlund T. Growth and division of E. coli cells // Sci. and Technol, 1995, № 170, p. 1-47.

72. Andrew V., Sayler G. The use of gene probes in the rapid analysis of natural microbial communities// J. Ind. Microbiol., 1988, 3, №5, p. 281-292.

73. Araki H. Et al. Histochemical properties of muscle fiber in breiler chickens // Jap. Soc of Sci Fish. 1993, v.34, № 2, p. 137-144.

74. Arrand J. Preparation of nucleic acid probes: Nucleic acid hybridization: a practical approach // ED. By BD Hames, IRL Rpess, 1986, p. 40.

75. Asai Т., Zaporojets D., Squires C., Squires C.L. // An Escherichia coli strain with all chromosomal rRNA operons inactivated: Complete exchange of rRNA genes between bacteria // PNAS, 1996, v.96, p. 1971-1976.

76. Ashall F., Miless M. Diagnosis of parasitic diseases using DNA to DNA hybridization // Trans Roy Soc trop. Med. Hyg,11988, № 2, p. 235-236.

77. Baker R.F. Binding of DNA to cellulose nitrate filters under denaturing conditions // Anal. Biochem, 1977, v.78, p. 569-571.

78. Beneke В., Hagen M. Eignung der PCR (Polymerase-Ketten-Reaktion): Tierartennachweis in erhitzten Fleischerzeugnissen.// Fleischwirtschaft, 1998, Jg.78,N 9.-S.1016-1019.

79. Berger C., Melchers F. In situ hybridization ofmRNA molecule in single cells // Annu rep, 1985, Basel Inst. Immunol, Basel, p. 1-10.

80. Bevan I.S, Daw R.A., Day P.J.R., Ala F.A., Walker M.R. Polymerase chain reaction for detection of human cytomegalovirus infection in a blood donor population // Brit. J. Haematol., 1991, v.78, № 1, p. 94-99.

81. Bohm H., Karch H. DNA fingerprinting of Escherichia coli 0157:H7 strains by pilsed-fild gel electroforesis//J. Clin. Microbiol., 1992, v.30, p.2169-2172.

82. Bolton F., Surman S., Martin K., Wareing D., Humphrey T. Precence of campilobacter and salmonella in sand from bathing beaches // Epidemiol, and Infec., 1999, №1, p. 7-13.

83. Brenner D. Gene Probes in Detection and identification of Pathogenic Bacteria // Clinical Microbiol, 1986, № 7, p. 106-109.

84. Buntjer J.B.,Lamine A.,Haagsma N.,Lenstra J.A. Species identification by oligonucleotide hybridisation: the influence of processing of meat products // J.Sc.Food Agr., 1999, v. 79, № 1, p. 53-57.

85. Calvo J.H.,Zaragoza P.,Osta R. Random amplified polymorphic DNA fingerprints for identification of species in poultry pate // Poultry Sc., 2001, v. 80, № 4, p. 522-524.

86. Chapman P.A., Siddons C.A., Malo A.T., Harkin M.A. A one year study of Escherichia coli 0157 in ran beef and lamb products // Epidemiol, and Infec, 2000, 124, №2, p. 207-213.

87. Chen Shy, Xu Renlin, Yee Arlene et. al. An automated fluorescenn PCR metod for detection of shiga toxin-producing Escherichya coli in foods // Appl. And Environ Microbiol., 1998, 64. № 1, p. 4210-4216.

88. Chen Y, Wang Y, Ge Y, Xu B. Degradation of endogenous and exogenous genes of roundup-ready soybean during food processing. // J Agric Food Chem., 2005, Dec, v53, p 10239-10243.

89. Chikuni K, Matsunaga T, Tanabe R. Determination of mitochondrial cytochrome В gene sequence for red deer and the differentiation of closely related deer meat // Meat Sci, 1990, v. 49, № 4, p. 379-385.

90. Codex Alimentarius // Vol. 10, FAO, WHO, 1991,223 p. .

91. Conner C.P., Heithoff D.M., Julio S.M., Sinseheimer R.L., Mahan M.J. Differential papperns of acquired virulence genes distinguish Salmonella ctrains // PNAS, 1998, v.95, p.4641-4645.

92. Corbisier P, Trapmann S, Gancberg D, Hannes L, Van Iwaarden P, Berben G, Schimmel H, Emons H. Quantitative determination of Roundup Ready soybean (Glycine max) extracted from highly processed flour. // Anal Bioanal Chem. 2005, Sep; v383, N2, p 282-90

93. Chowdhuiy EH, MikamiO, NakajimaY, HinoA, Kuribara H,Suga K, Hanazumi M, Yomemochi С Detection of genetically modified maize DNA fragments in the intestinal contents of pigs fed StarLink CBH351. // Vet Hum Toxicol., 2003, vol.45, N2, p.95-96.

94. ИЗ. Сох K.H., DeLeon D.V., Angerer L.M. Detection of mRNAs in sea unchin embiyos by in situ hibridization using asymmetric RNA probes // Developmental Biology, 1987, v. 101, p.485-502.

95. Day P.J.R., Bevan I.S., Gurney S.J., Young L. S.? Walker M.R. Synthesis in vitro and application of biotinylated DNA probes for human papiloma virus type 16 by utilizing the polimerase chain reaction // Biochm.I. 1990. v.261, №l,p.l 19-123.

96. De Ley I., Cattoir H., Reynaerts A. The quantitative measurement of DNA hybridization from renaturatiun rates // Europ. J. Biochem., 1970, v. 12, p. 133142.

97. Denhardt D.T. A membrane filter technique for the detection of complementery DNA // "Biochem. Biophys. Res. Commun.", 1966, v.23, p. 641-646.

98. Ding H.,Xu R.-J.,Chan D.K.O. Identification of broiler chicken meat using a visible/near-infrared spectroscopic technique // J.Sc.Food Agr., 1999, v. 79, № 11, p. 1382-1388.

99. Erlich H.A. PCR technology.// Stockton Press, New York, 1989.

100. Evans M., Salmon R., Nehaul L., Mably S., Wafford L. An outbreak of Salmonella typhimurium DTI70 associated with kebab meat and yoghurt relisn // Epidemiol. And Infec., 1999, №3, p. 377-383.

101. Falkow S., Moseley S. Application oftechique of DNA-DNA hybridization in diagnostic microbiology // Патент CUIA№ 4187351, 03.04.1980, 435/5.

102. Falkow S., Moseley S. Specific DNA probes in diagnostic microbiology // Патент США №4358535,10.11.1982,435/15.

103. Fei S.,Okayama T.,Yamanoue M.,Nishikawa I.,Mannen H.,Tsuji S. Species identification of meats and meat products by PCR // Anim.Sc.Technol., 1996, v.67, № 10. p. 900-905.

104. Flint S.H., Hartley NJ. Evaluation of the TECRA Escherichia coli 0157 visual immunoassay for tests on dairy products // Lett Appl Microbiol, 1995, v. 21(2), p.79-82.

105. Gannon V. P., King R.K., Kim J.Y., Thomas E.J. Rapid and sensitive metod for detection of Shiga-like toxin-produsing Escherichia coli in ground beef using the polimerase chain reaction // Appl. Environ Microbiol, 1992; v.58, p.3809-3815.

106. Gillespie D., Spiegelman S. A quantive assay for DNA-RNA hybrids with DNA-RNA immobilized on a membrane // J. Molecul. Biol., 1965, v. 12, p.829-842.

107. Guschin D.Y., Mobarry B.K., Proudnikov D., Stahl D. Oligonucleotide microchips as genosensors for determinative and environmental studies in microbiology // Applied and environmental microbiology, vol. 63, N 6, 1997, p. 547-552.

108. Harris S., Jonet D. Optimisation of the PCRI I Brit. J. Biomid. Sci., 1997, v. 54, №3, p. 166-173.

109. Hashimoto Y., Itho Y., Fujinada Y., Khan A.Q., Sultana F., Miyake M., Hirose K., Yamamoto H., Ezaaki T. // Development of nested PCR based on the ViaB sequence to detect Salmonella thyphimurium // J. Clin. Microbiol., 1995, v.33, p.775-777.

110. Hayashi K. Manipulation of DNA by PCR. In. PCR the Polimerase chain reaction, Eds // Mullis K.B., Ferre F. & Gibbs R.A., Birkhauser, 1994, p. 3-14.

111. Helle N. Et al. Methods of allocation DNA from chicken. // Arch. Fur Lebensmittelhygiene, 1996, v. 3, № 2, p. 48-51.

112. Hill W., Madden J. Foodbome enterotoxigenis Escherichia coli: detection and enumeration by DNA hybridization.// «Appl. and Enviro. Microbiol», 1983, №4, p.1324-1330.

113. Hill W., Payne A. Detection and enumeration of virulent Yersinia enterocalitica in food by DNA colony hybridization // Appl. F Environmental Microbiology, 1984, №4, p. 801-807.

114. Hoffmann K. Identification and determination of meat and foreign proteins by means of dodecylsulfat poliacrylamid gel electrophoresis // Ann. Nutr. Alim., v. 31, № 2, 197, p. 207-215.

115. Hopwood A.J., Fairbrother K.S., Lockley A.K., Bardsley R.G. An actin gene-related polymerase chain reaction (PCR) test for identification of chicken in meat mixtures // Meat Sc., 1999, v. 53, № 4, p. 227-231.

116. Huck L.G., Dorn C.R., Angrick E.J. DNA probe for detection of serogroup 0157 enterohemorrhagic Escherichia coli.// Int. J. Food Microbiol; 1995, v.25, №3, p.277-287.

117. Innis M.A., Gelfand D.H., Sninsky J.J., White T.J. Optimization of PCRs. In: PCR protocols, a guide to methods and applications // Academic Press, San Diego, California, 1990, p. 16-21.

118. Jannsen E. Method adapted to PhastSystem // Z. Lebensm. Unterrs. Forsh.,-1986.-v.l82,-p.479-483.

119. Jeffrey S.R., Matsumura P/M., Maresch M.J. Sensor device for detecting microorganisms and method therefore // Пат. 5976827 США, МПК6 C12Q1/046 1999.

120. Karh H., Meyer Т. Evalution of oligonucleotide probes for identification of shiga-like-toxin-producing Esherichia coli // J. Clin Microbiol, 1998, v.27, p.1180-1186.

121. Karhukorpi E., Karhukorpi J. Rabid laboratory diagnosis of ulcerograndular tularemia wish PCR// Scand. J. Infec. Diseases, 2001, № 5, p. 383-385.

122. Kim J., Nietfeldt J., Benson A.K. Octamer-based genome scanning distinguishes a unigue subpopulation of Escherichia coli 0157:H7 strains in cattle // Proc. Nail. Acad. Sci., USA, 1999, v. 96, Issue 23, p. 13288-13293.

123. Kohne D. Novel approach for rapid and sensitive detection of microorganisms // Clinicae Microbiol, 1987, № 6, p. 110-112.

124. Krishnamurthy Т., Rajamani U., Ross P., Nair H., End J. Mass spectral investigations on microorganisms // J. Toxicol. Toxin Rev., 2000, № 1, p. 95117.

125. Kwiatek K.,Wojton B.,Rola J.,Rozanska H. The incidence of Listeria monocytogenes and other Listeria spp. In meat, poultry and raw milk // Bull.Veter.Inst.in Pulawy, 1992, v. 35, p. 7-11.

126. Lanata C. Sensitivity and specifity of DNA probes with the stool blot technique for detection of Eschenchia coli enterotoxins.// "J. Infec. Diseases", 1985, №5, p. 1087-1090.

127. LeProust E., Pellois J., Yu P., Zhang H., Gao X. Digital light-detected synthesis. A microarray platform that permits rapid reaction optimization on a combinatorial basis // Journal of Combinatorial Chemistry, 2000, 2, p. 349-354.

128. Lindqvist R., Antonsson A., Norling В., Persson L., Fager U. The prevalence of verocytotxin-producing Escherichia coli (VTEC) and an immuno-magnetic separation (IMS) method // Food Microbiol., 1998, №6, p. 591-601.

129. Louie M., de Azavedo J, Clarke R., Borczyk A., Lior H., Richter M., Brunton J. Sequence heterogeneity of the eae gene and detection of verotoxin-produsing Escherichia coli using serotype-specific primers // Epidemiol Infect; 1994, №112, p. 449-461.

130. Luk J.M., Kongmuang U., Trans R.S., Lindberg A.A. An enzyme-linked immunosorbent assay to detect PCR products of the rfbS gene from serogroup D salmonellae: a rapid screening prototype // J. Clin. Microbiol., 1997, v.35, p.714-718.

131. Macedo-Silva A.,Barbosa S.F.C.,Alkmin M.G.A.,Vaz A.J.,Shimokomaki M., Tenuta-Filho A. Hamburger meat identification by dot-ELISA // Meat Sc., 2000, v. 56, №2, p. 189-192.

132. MacKenzie Debora No hiding place. Aquick DNA test seeks out dangerous bacteria that lure in food // New Sci., 1999, № 2175, p.28.

133. March S.B., Ratnam S. Latex agglutination test for detection of Escherichia coli serotype 0157//J. Clin Microbiol, 1989, v. 27, p.1675-1677.

134. Marmur J., Doty P. Heterogeneity in deoxyribonucleic acids. I. Dependens on composition of the configurational stbility of deoxyribonucleic acid // Nature, 1959, v.183,p.1427-1431.

135. Marmur J., Doty P. Thermal renaturation of deoxyribonucleic acid. // J. Molecul. Biol., 1961, v.3, p.585-594.

136. Martin R., Haza A.I., Horales P. Detection and quantification of goats chees in ewes chees using a monoclonal antibody and two ELISA formats // J. Sc. FoodAgr. 1997, v.79, № 7, p. 35-41.

137. Meyer R. F., Brown C.C., House C., House J. A., Monitor T. W. Rapid and sensitive detection of foot-and-mouth disease virus in tissues by enzymatic RNAamplification of the polymerase gene // J. Virol. Meth., 1991. v.34, № 2, p. 161-172.

138. Moalic P., Le Roux M., Le Guennec J., Chevallier B. Muse au pount et evaluation d'une methods par PCR pour la muse en evidence et lidentification des differentes especes de Brachyspira dans les feces de ports // Rev. med. Vet., 2001, № 3, p. 247-252.

139. Moio L., Sasso M.L., Chianese L., Addeo F. Rapid detection of bovin milk in ovine, caprine and water buffalo milk or cheese by gel isoelectric focusing on PhastSystem. // Ital. J. Food Sci., 1990, v.3, p. 71-176.

140. Moseley S.L., Hyg J. Detection of enterotoxigen Esherichia coli by DNA colong hybridization // J. Infect, 1989, №6, p. 892-898.

141. Nawrotek P., Karakulska J., Furowicz A. Metody genetyczne i serologiczne w diagnozowaniu entero i verotoksycznych szczepow Escherichia coli // Folia Univ. Agr. Stetin. Zootechn., 2000, № 39, p. 105-112.

142. New analytical system to improve food quality management // Int. Labmate, 2001, 25, №7, p. 36.

143. Ouchterlony O. Progress in Allergy // 1958, v. 6, p. 30.

144. Partis L.,Croan D.,Guo Z.,Clark R.,Coldham T.,Murby J. Evaluation of a DNA fingerprinting method for determining the species origin of meats // Meat Sc., 2000, v. 54, № 4, p. 369-376.

145. Paul P.S. Application of nucleic acid probes in veterinary infectious diseases // Voter. Microbiol., 1990, v. 24, № 3/4, p. 409-417.

146. Peirce C. DNA technology provides new tools for identifycirung genetic causes of disease // Res. Resour. Report., 1988, №8, p. 1-4.

147. Radu S., Mutalid S., Rusul G., Asai N. Detection of Escherichia coli 0157:H7 in the beef marketed in Malaysia // Appl. And Environ. Microbiol., 1999, №3, p. 377-383.

148. Rehben H. Electrophoretic techniques for species identification of ficheiy products. Z, Lebensm. Unters Forsch., 1990, v. 191, p. 1-38.

149. Rusvai M., Belak S. Detection of bovine adenovirus nuclric acid sequences in nasal specimens by biotinylated DNA probes. 1992, №4, p.311-316.

150. Sakurai M., Hikono H., Ohta M. Production and characterization of monoclonal antibodyes that zecognize bovine kit zeceptor //Veter. Immunol. Immunopathol. 1997, v. 68, № 2/4, p. 101-112.

151. Scheu P., Gasch A., Zschaler R., Berghof K., Wilborn F. Evaluation of a PCR-ELISA for food testing: Detection of selected Salmonella serovars in confectionery products//Food Biotehnol., 1998, 12, №1-2, p. 1-12.

152. Seymour C. Electrophoresis technology: food and reverage analysis // Food Tech. Europe, 1993, Sept/Nov., p. 127-152.

153. Skarpeid H.-J.,Moe R.E.,Indahl U.G. Detection of mechanically recovered meat and head meat from cattle in ground beef mixtures by multivariate analysis of isoelectric focusing protein profiles // Meat Sc., 2001, v. 57, № 3, p. 227-234.

154. Stickney J., Morgan R. Detection of bovine-specific and human- specific fecal bacteria by the polimerase chain reaction // Mich.Acad.,1999, № 2, p. 273

155. Tani H, Noda N, Yamada K, Kurata S, Tsuneda S, Hirata A, Kanagawa T. Quantification of genetically modified soybean by quenching probe polymerase chain reaction. // J Agric Food Chem. 2005 Apr №6; V 53 p. 253540.

156. Tartaglia M., Saulle E., Pestaloza S. Detection of bovine mitochondrial DNA in ruminant feeds: a molecular approach to test for the presence of bovine-derived material // Journal of food protection, vol. 61, № 5, 1998, p. 513-518.

157. Vaneechoutte M., Van Eidere J. The possibilities and limitations of nucleus acid amplification technology in diagnostic microbiology // J. Med. Microbiol., 1997, v. 46, № 3, p. 188-194.

158. Westin L., Xu X., Miller C., Wang L., Edman C., Nerenberg M. Anchored multiplex amplification on a microelectronic chip array // Nature Biotechnology, 2000, 18, 2, p. 199-204.

159. Wolf C., Burgener M.,Hubner P.,Luthy J. PCR-RFLP analysis of mitochondrial DNA: differentiation of fish species // Food Sc.Technol., 2000, v .33, №2, p. 144-150.

160. Yman I. M. Meat and fish species identification by isoelectric focusing // Food laboratory news, v.6, N2, 1990, p. 28-45.

161. Zimmermann S.,Zehner R.,Mebs D. Tierartenidentifizierung aus Fleischproben mittels DNA-Analyse // Fleischwirtschaft, 1998, Jg.78, № 5.-p.530-533.