Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему:Антигенная иммуногенная активность ассоциированной вакцины против рота- коронавирусных энтеритов и колибактериоза телят

ргв и«

На правах рукописи

МАХМУДОВ КАМОЛДЖОН БУРХОНОВИЧ

АНТИГЕННАЯ И ИММУНОГЕННАЯ АКТИВНОСТЬ АССОЦИИРОВАННОЙ ВАКЦИНЬ! ПРОТИВ РОТА — , КОРОНАВИРУСНЫХ ЭНТЕРИТОВ И КОЛИБАКТЕРИОЗА ТЕЛЯТ

16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Душанбе -2000

Работа выполнена в лаборатории вирусологи:; научно-исследовательского ветеринарного института Таджикской академии сельскохозяйственных наук

Научные руководители: доктор ветеринарных наук, член-корреспондент ТАС2Н И.Т.Сатторов ( Тад£ НйВ'л ), кандидат ветеринарных наук М.Ы.Гоголев ( БИЭВ )

Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук Д.М.Мирзоев ( ТАУ ) кандидат ветеринарных наук А.Ы.Муыиноз ( РВЛ ) Ведущая организация: Ящурный институт Таджикской АСХН

Защита состоится 2000г в Ю00 часов на

заседании диссертационного совета Д 220.02.01 при Таджикском научно-исследовательское ветеринарном институте по адресу: 754005,г.Душанбе,ул.Кахорова,43.

диссертацией коено ознакомится в библиотеке Таджикского- научно-исследовательского ветеринарного института

Автореферат разослан "о^ " Ц К> Н Я, 2000г

Ученый секретарь диссертационного созета, кандидат ветеринарных наук

И.А.Турдиев

/7 № ЩО

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА. РАБОТЫ

Актуальность темы. Одним из резервоз обеспечения населения Республики Таджикистан продуктами питания животного происхождения является своевременное и качественное проведение ветеринарных мероприятий, направленных на борьбу с инфекционными болезнями молодняка сельскохозяйственных животных. Среди патогенных микроорганизмов, вызывающих диарею телят раннего возраста, важная роль принадлежит рота-,коронавиру-сам и эиерихии коли.

В борьбе с диареями телят, обусловленными рота-,корона-вирусами и эшерихией коли, в последние годы достигнуты определенные успехи. Изучены эпизоотология, диагностика и дифференциальная диагностика, некоторые вопросы терапии и профилактики этих болезней в отдельности (С.Мёбус и др,1975; Г.Ф.Коромыслов, 1980; М.Ц.Гоголев,1982; Н.Л.Соколова и др., 1992; З.П.Онуфриев,1989; Л.А.Ынккоза и да, 1994; З.А.Шегидезпч и др»1994', И.Т.Сатто?оз,1995 и др.).

Для специфической профилактики рота-,короназирусных энтеритов и колибактериоза разработаны моновакцины '¡.'.А.Сидоров, Т.К.Куранз1ШИ,1977; -"Ü.M.Гоголев,1984; Н.Л.Соколоза,1984 и др).

3 борьбе же со смешанными инфекциями телят, вызываемыми ро?а-,корэнавкрусами и эшерихией коли, наиболее эффективными могут быть ассоциированные вакцины.

Однако в атом направлении исследования малочисленны. 3 этой связи весьма актуальным станозится изучение антигенных и иммукогенных свойств ассоциированной закцины протиз рота-, коронавирусных энтеритов и колибактериоза.

Цель и задачи исследований. Целью работы явилось изучение антигенных и ишуногенных свойств ассоциированной вакцины против рота-,коронавирусных энтеритоз и колибактериоза телят.

В соответствии с целью поставлены следующие задачи:

определить антигенную активность ассоцинревзино;': вакцины

• *

против рота-,коронавирусных энтеритов и колкбактеркоза телят на лабораторных животных при различных схемах и методах иммуни-зашгл;

изучить антигенную активность ассоциированной вакцина на стельных коровах;

определить эффективность препарата тимоцина на антигенную активность ассоциированной вакцины на стельных корова::;

Выявить влияние иммунизации стельных коров ассоциированной вакциной на уровень пассивного иммунитета у новорожденных телят.

Научная новизна. Определена антигенная активность ассоциированной вакцины против рота-,коронавнрусных энтеритоз и колп-бактериоза на лабораторных еизотлых при различных схемах иммунизации.

Изучена динамика содержания постзакцинальных антител з крови и молозиве короз, привитых на различных стадиях отельное-ти.

На основе соединения низкомолекулярного пммуноактпвного пептида с цинком разработан новый иммуностимулирующий препарат гимоцин. Показано, что иммунизация стельных короз ассоциировано; закциной в комплексе с иммуностимулятором тимоцкном повышает ее антигенную активность. ■.• -

Определено оптимальное содержание антител з молозиве вакпинкрозанных короз для профилактики новорожденных геля? от диареи, обусловленной рота-,короназирусаш и эперихиеЛ коли.

Установлено, что уровень антител з крози и фекалиях но-зоро.т.деннь'х телят зависит от титра и количества их б выпаиваемом молозиве. В профилактике диарей важную роль играпт антитела, локализованное з содержимом желудочно-кишечного тракта телят.

Практическая данность работы. Полученные экспериментальные данные да::т оскозанпе для использования в скотоводстве ассоциированное вакцины против рота-,коронавирусных энтеритов и кзлибактериоза для профилактики этих болезней. Они вопли в Систему мероприятий по профилактике смесанной инфекции г.елу-дочно-кпсечного тракта молодняка крупного рогатого скота ( утв. Г73 !."СХ Временное наставление по применен ню

ассоциированной заклинь- против рэта-,корэказирускых энтеритов и колибвктерпоза телят (утз.ГУВ МСХ РГ,1999) и нормэтивно-^ехппчсскуц документации! на препарат тимоци:: ( инструкция по изготовлений и контролю, технические условия и наставление по применения (утз,Г73 ?Т,19?8).

Основные положения диссертационно.": работы, выносимые на

антигенная активность ассоциированной закиины против роте-, короназпрусны:: энтернтоз и кзлибактеризза телят для лабораторных ."квотных;

антигенная активность ассоциированной вакцины прг. иммунизации стельных коров;

воздействие иммуностимулятора тиюцина на антигенную активность закцины;

влияние иммунизации стельных коров ассоциированной вакциной на уровень пассивного иммунитета у новорожденных телят.

Апробация работы.Оснозные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на заседаниях ученого совета Таджикского НИВЙ в 1994- - 1999 гг.; на республиканских и областных семинарах и совещаниях (1996-1999); на заседаниях научного совета по кизотноводсгзу и ветеринарии Таджикской академии сельскохозяйственных наук (1996-1997); конференции Узбекского НИВИ (Самарканд,1999); конференции АСХН РТ з честь 1100-летия государства Сомонидов (Душанбе,1959).

Публикация. По теые диссертации опубликовано 6 научных работ.

Объем и структура диссертации.Диссертация изложена на 112 страницах машинописного текста и вклзчает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов, вызоды, практические предложения, список использованной литературы и приложение. Работа иллюстрирована э табдшаш и 6 рисунками. Список литературы включает 210 источников. В приложении предстазлекы документы, подтверждающие практическую ценность работы.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы исследований

Работа выполнена в период с 1994 по 2000г., з лаборатории вирусологии Таджикского научно-исследовательсксгго зет еринао-ного института Академии сельскохозяйственных наук и в животноводческих хозяйствах Республики Таджикистан.

В опытах использовали ассоциированную ГОАЛ формолвакцину протиз рота-,коронавирусных энтеритоз и колибактериоза телят, изготозленную во Всероссийском научно-исследовательском институте экспериментальной ветеринарии им. Я.Р.Коваленко.

Антигенную активность ассоциированной вакцины определили на лабораторных животных и стельных коровах з зависимости от схемы иммунизации»

Иммуногенность вакцины устанавливали по заболеваемости новорожденных телят, полученных от иммунизированных и контрольных (нешллунизирозанны^коров. При этом учитывали количество специфических антител, получаемых животными с молозивом матерей, частоту, продолжительность, тяжесть заболевания и гибель телят.

В качестве иммуностимулятора использовали препарат тимо-цин, разработанный нами совместно с МП "Занд". Безвредноегь_ препарата изучали на 80 белых мышах, и 32 кроликах, по общепринятой методике.

Влияние тимоцина на'усиление антителообразозания. у яизэг-ных при иммунизации ассоциированной вакциной против рота-,ко-роназирусных энтеритоз и колибактериоза изучено на 40 стельных коровах.

- б -

Для обнаругения и количественного определения рота-,ко-ронавирусыых антеритоз и эшерихии_коли в патологическом материале больных телят, а такге специфических антител в сызо-ротке крови опытных и контрольных животных, молозиве и молоке коров применяли РГА, РТГА,_ИФА,РА и бактериологические исследования согласно методическим рекомендациям по диагностике и дифференциальной диагностике рота-,коронавирусных энтеритов, разработанным М.М.Гоголевым и_Л.А.Мнкковой (1984), Н.Л.Соколовой и др. (1984), И.Г.Короыыслозым (1985), И.Т.Сатторовыы и др.(1991),и колибактериоза по общепринятой методике.

Экономический эффект рассчитывали согласно методическим указаниям по определению эффективности ветеринарных мероприятий, утвержденным ГУВ МСХ СССР в 1982г.

Статистическая обработка полученных данных проводилась с применением общепринятых в биологии методов (В.С.Асатиани, 1965).

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.2.1. Антигенная активность ассоциированной вакцины в зависимости от дозы, способа и кратности применения лабораторным животным.

Общеизвестно, что антигенная активность вакцины зависит от уровня реактивности организма, лозы, способа и кратности применения препарата.

Антигенную активность вакцины устанавливали з 3 сериях опытов на 52 кроликах.

Для определения оптимальной дозы антигенов, влияющей на содержание специфических антител з сызоротке крози кроликов, аесоциированнуи вакцину взодили км з дозах 1;3;5 и 5 ил'подкожно, реикмукизирозали спустя 14 дней в дозах 1,3,5 и 10 мл соответственно. Каждой лозой типизировали 4 животных. Контролем служили 4 невакцинированных кролика.

Перед иммунизацией, реиммунизацией и через 14 дней после нее брали кровь у опытных и контрольных гизотных, исследовали ее на наличие специфических антител к рота-,корона-вирусам и эшерихии коли.

Результаты исследования показали, что у кролг.коз, имыу-низированнкх ассоциированной закциной в дозе I мл, антитела к ротазирусу накапливались з титре 2,5+0,28,в дозе 3 мл-3,3+0,21, з дозе 5 мл - 3,5+0,28 Со^ . .Спустя 14 дней после реиммунизации кроликов титры антител у них составили 3,3+0,21; 4,0+0,7; 4,5+0,28 и 5,8+0,25 соответственно

дозам зведенной закцины.

Поссзакцинальныб антитела к корокавирусу при игялуниза-ции з дозе I мл накапливались в титре 2,2+0,25, з лозе 3 мл -3,5+0,56 и з дозе 5 мл - 4,0+0,7 . Спустя 14 дней

после рзшгункзацкк кроликов титры антител у них составили 3,3+0,21; 4,0+0,6; 5,0+0,4', 6,0+0,57 -2о§а соответственно дозам зведенной закцины.

Антитела к зшеркхки коли у кроликов, заглкпг.розанных в лозе I мл, накапливались в тигре 1:87,5+12,3, в лозе 3 кл-1:25 .0+64,5 и в дозе 5 ь:л - 1:375+25. Спустя 14 дней после рз1Ел.;ун1:зацкк титры антител у них составили 1:200+0,0",

1:500+18,2; 1:550+50,0; 1:800+0,0 соответственно.

Известно, что в зависимости от способа иммунизации гизот-ных па разному проявляется антигенная активность вакцины. В этой связи в опытах на кроликах были апробированы подковный и внутримышечный методы иммунизации. Вакцину вводили в дозе 5 и 10 мл двукратно с интервалом 14 дней; животным первой группы (4 гол) - подкожно, 'второй (4 гол.) - внутримышечно. Третья груша кроликов (4 гол) служила контролем.

Установлено, что при подкожном способе введения вакцины уровень специфических антител к рота-_,коронавпрусам и эшерихии коли в сыворотке крови кроликов после реишунизации был выше, чем при внутримышечном введении вакцины.

Банную роль в повышении антигенной активности вакцины играет своевременная реиммунизация гивотных. Она стимулирует образование большого количества специфических антител, в результате чего формируется стойкий иммунитет. В опытах на пяти. _ группах кроликов ( по 4 гол.в каждой) установлено, что максимальное повышение титров специфических антител к рота-,(до 6,0+0,4 ), коронавирусу ( до 6,2+0,3 )

и эшерихии коли ( до 1:650+64) происходило у иммунизированных через 2-3 недели после первичного введения вакцины. У еизотных, реиммунизированных через I и 4 недели, титры антител к рота-вирусу составили 4,5+0,3 и 5,0+0,4;к коронавирусу - 5,0+0,4 и 5,3+0,25 йоа^ . и к эшерихии коли - 1:550+50 и 1:600+85,6 соответственно.

Таким образом, подученные данные свидетельствуют о различиях в накоплении специфических антител в сыворотке крови

кроликов з зависимости он применяемой дозы, способа введения и срока реиммунизации животных.

2.2.2. Антигенная активность ассоциированной вакцины против рота-,коронавирусных энтеритов и колибактериоза у стельных коров

2.2.2.1. Уровень специфических антител в сыворотке крови иммунизированных животных _ •

Для проведения опыта были сформированы 2 группы стельных коров. Животных перзой группы (42 гол) за 40 дней до отела иммунизировали ассоциированной вакциной подкожно в дозе 5 мл. Реиммунизации проводили за 20 дней до отела таким же способом в дозе 10 мл. Животных второй группы (44 гол.) не иммунизировали.

Проведенные исследования сыворотки крозк подопытных животных до иммунизации показали, что в пробах содержались специфические антитела к рота-,коронавирусам и эщерихи;: коли. Средний титр их был незначительный : к ротавирусу -1,2+0,13 Соа: , к короназнрусу - 1,6+0,16 Сод. , к к зые-Ш1ХИИ коли - 1:90+6,6 .

Иммунизация коров ассоциированной вакциной приводила к увеличении количества специфических антител в крозн животных и не оказкзала терратогенного и других отрицательных воздействий на физиологические показатели организма.

У контрольных животных после отела отмечали уменьшение содержания специфических антител в крови - з 2,8 раза (среднее ).

Исследования показали, что специфические антитела у животных опытной группы через 14 дней после иммунизации накапливались в тиграх 4,8+0,08 ( к ротазирусу), 5,4+0,22(к коронавирусу) и 1:400+51 ( к зшерихии коли). Спустя 14 дней после реиммунизации данные показатели составили 6,8+0,01, 7,0+0,10 и 1:1600+238 соответственно.

Таким образом,установлено, что иммунизация стельных коров за 40 и реиммунизация их за 20 дней до отела ассоциированной вакциной против рота-,коронавирусных энтеритов и коли-бактериоза не оказывают отрицательного воздействия на физиологические показатели организма и существенно влияет на накопление специфических антител в кшви животных.

2.2.2.2. Уровень специфических антител в молозиве и молоке коров, иммунизированных в период стельности

Влияние ассоциированной вакцины против рота-,коронавирус-ных витеритов и колибактериоза на образование колострзльных антител изучали на 60 стельных коровах. С этой целью животным (30 гол.) двукратно за 40 и 20 дней до отела подкожно вводили закцину в дозах 5 и 10 мл. Контрольными были стельные корозы (30 гол.) которых не иммунизирозали.

Результаты исследования сыворотки молозива коров контрольной (неиммунизированной) группы показали, что антитела к рота-, коронавирусам и зшерихии коли з день отела содержались у всех подопытных животных. Средние их титры достигали 1,8+0,-13; 2,0+0,15 и 1:100+13 соответственно. На второй лень

уровень антител снизился в 2-3 раза,и в молозиве третьего дня

лактации обнаруживалось лишь незначительное г.х количество у 15-20/3 ЕИЗОТНЫХ.

У животных первой группы . ' , титры антител к рота-, короназирусам и эшерихии коли в день отела составили 7,8+0,2, 8,0+0,15 ¿оо^ и 1:3200+714, во 2,3,4-йдни лакта-щш-б,0+0,21, 4,6+0,26 и 1,6+0,16; 6,2+0,2, 4,6+0,26 и 1,8+0,3 , 1:2080+244, 1:800+0,0 и 1:200+29 соответственно.

К 5-7»днэ антитела к указанным антигенам обнаруживали з титрах 1,0+0,21; 0,8+0,13 и 1:50+0,0 соответственно.

Б молоке 8-го дня лактации . антитела не были обнаружены.

Таким образом, результаты проведенных исследований показывают, что иммунизация стельных коров ассоциированной вакциной обеспечивает накопление в молозиве специфичен антител. Самое высокое их содержание наблюдается в первые. Ъ л:я :ла::т.?-ции.

2.2.3. Изыскание нового имлуностшлулиругащего препарата и изучение его свойстз

Направленная модификация существующих препаратов посредством коыдлексообразозания с ионами различных металлов приводит не только к расширению их ассортимента, но и к снижению токсичности, повышению терапевтической эффективности и иммунологической реакткзности организма.

В связи с этим поиск путей повышения профилактической эффективности вакцин язляется достаточно актуальным. Одно из решений этой проблемы - применение вакцины созместно с традиционными иилуномодулирующиыи препаратами. Таким препаратом является тимоген - лидептид, обладающий активностью тимусного

гормона пыозг.на dL •

На основз пептидных аналогоз тимогена разработан нозмй иьгуномодулпруэшкГ: препарат тимоипн, преде тазля;зди1; собой 0,04?-нып водный раствор координационного соединения низкомолекулярного пептида, обладающего активностью тимозина о(, с пинкогл.

2.2.3.1.Определение токсических сзойстз тимоиина

Острая токсичность тимопина изучалась на 40 белых мышах и 16 кроликах. Тпмопин применяли з виде 0,04?-ного раствора.

Гизотные каждого вида были разделены по принципу аналогов на 4 группы: белые шеи - по 10, кролики - по 4 в кагдо". Белы:,; мышам 1>П и G опытных групп препарат вводили .подкожно

.' з дозах 15,50 и 100 мл/кг массы тела соответственно. Кроликам 1,11 и Е групп знутримышечно в дозах 5,10 и 20 мл/кг соответственно. Еизотным контрольных групп вводили физиологически'; раствор: белы:.! мышам - 50, кроликам - 20 мл/кг.

У подопытных :::::ззтных учигьгзали внешний вид и поведение ( состояние шерстного покрова и видимых слизистых оболочек, отношение к корму, подзпг.:ность, ритм и частоту дыхания, время зознкккновения и характер интенсивности, ее тя.~есть, обратимость, срок гибели "пзотних иди их выздоровления). Учет зелп в течение 10 дне.':.

Результаты исследования доказали, что тимоцин при внутримышечном введении в дозах 5-1" j мл/кг не вызывал признаков отравления у лабораторных г.нвотны:-:.

Хроническую токсичность пшоцина изучали на 40 белых шиах и 1п кроликах.

'¿ийотнпе каждого вндэ были разделены на 4 аналогичные группы: белые мыпи - по 10, кролики - по 4 в каждой. Белым ыишпи 1,П п Ш групп ( опытных) тимоцин вводили в дозах 5,15 и 25 мл/кг еоотпетст.ченно, 1У (контрольной) - физиологический ра'отл?)' в доо13 5 мл/га1 ".ивой кассы " подкожно'.". I раз в сутки в Т1ЧОШЮ 10 дней.

Кроликам 1/П и Ы групп препарат вводили внутримышечно в дозах 5,7 и 10 мл/кг соответственно, П - физиологический раствор в дозе 5 мл/кг внутримышечно I раз в сутки в точение 10 дней. Учитывались те же показатели, что п при определении острой токсичности. Наблюдение за животными вели в течение 25 дней.

Результаты исследований показали, что тпгощш у белых пыпе-л в дозах ^-25 мл/кг и у кроликов в дозах 5-10 мл/кг при длительном введении не вызывал признаков отравления.

С целью проведения патомореологических исследований убивали из каждой группы по 5 белых шпой и по 2 кролика и изучали характер повреждаюцоро действии ткмоципа. При вскрытии подопытных животных изменений в паренхиматозных органах и других система:; организма обнаружено не было.'

Показатели функционального состояния организма у кроликов (ритм сокращения сердца - в среднем 128 ударов в минуту, дыхательные движения - 3?, температура тела - 39,2-39,5°С) соответствовали физиологической норме.

Таким образом, результаты проведенных исследований показали, что еимоцин при однократном и длительном введении ке_ оказывает отрицательного воздействия на организм лабораторных животных и, следовательно, является для них нетоксичным препаратом.

2.2.3.2. Влияние тнмоцина на антигенную активность ассоциированной вакцины против рота-,коронавирусных энтеритов и колибактериоза телят

Опыты поводили на 40 стельных коровах, разделенных на 4 группы, по 10 голов в каждой. Животным первой группы ассоциированную вакцину вводили подкожно, двукратно в дозах 5 и 10 мл за 40 и 20 дней до отела. В комплексе с вакциной трехкратно в дозе 0,01 мл/кг массы тела один раз в лень вводили гжэцин.

Коровам 2 и 3-й групп вакцину вводили по такой же схеме, а тимоцин - в дозах 0,02 и 0,03 мл/кг соответственно.Контрольным животным вводили только вакцину.

Проведенные исследования показали, что комплексное применение ассощшрозанной^закцины с тимоцином стимулирозало образование специфических антител в крови животных. Наибольший эффект был получен при применении тимоцина в дозах 0,02 и 0,03 мл/кг массы тела животного. При этом титр антител к рота.-внрусу по сравнению с такозым в контрольной группе увеличился на 1551, к короназнрусу - на 15 и к зшерихии коли - на 2551. Лизоцимная и бактерицидная активность сыворотки крови опытных животных составила з срелнеы .4,9 и80,й$, в контрольной, группе 3,5 ибЗ?! соответственно.

Таким образом, применение тимоцина з комплексе с вакциной способствует значительному повышению уровня гуморального иммуя

кого отзета и нзспецифической резистентности организма хизот-ных.

2.2.4-. Влияние иммунизации стельных короз ассоциированной вакциной на уровень пассивного иммунитета у новорожденных телят 2.2.4.1. Заболеваемость телят, полученных от вакцинированных и незакцкнированных короз

Устойчивость к смешанным рота-,коронавирусным яктеритзм и колибактериозу изучали на 64 новорожденных телятах, 34 из которых были получены от иммунизированных коров. С ятол целью за телятами вели наблюдение в течение 3 недель после рождения. Критериями оценки иммунологической эффективности вакцины являлись заболеваемость телят, продолжительность_у них лиареи_ и сохранность животных, полученных от иммунизированных и контрольных (неиммунизирозанных) коров.

Телят кормили молозивом и молоком матери из соскозой поилки до 14-дневного возраста. Затем ira выпаивали сборное молоко.

Наблюдения показали, что из 34_телят, которым выпаивали иммунное молозиво, у 5 (14,7£) обнаружились симптомы диареи. Болезнь протекала з легкой Форме, и при небольшом медикаментозном лечении по схеме, принятой в хозяйстве,все больные зыздоровели з течение 3 дней. Случаев падежа среди подопытных телят не отмечали.

Из 30 телят, полученных от незакцинированных (контрольных) коров,. клиника...диареи проявилась у 23 (76УЬ%). В перзые сутки болезни отмечали угнетение, понижение аппетита, ослабление

реакции на внешние раздражители. Телята мало двигались и больше лежали. Температура тела была выше физиологической нормы (40,2 - 40,9°С). Частота пульса достигала 140-170 ударов в минуту. С развитием болезни он становился нитевидным, дыхание - поверхностным ( до 60-70 в минуту). Спустя 24-36 ч от начала болезни у телят появился понос. Наблюдалось обезвоживание тканей организма. Продолжительность болезни в среднем составила 9,9 дня. При лечении больных телят по схеме, принятой в хозяйстве, выздоровело 14 , пало 9 телят.

При вскрытии павших от диареи телят основные патологические изменения обнаруживали в органах пищеварительного тракта.

Бактериологическое и вирусологическое исследование фекалий больных животных опытной группы позволило выявить рота-, коронавирусные антигены и эшерихии коли в ассоциации у одного, только эшерихии коли - у двух телят.

При исследовании патматериала телят контрольной группы ротавирусный антиген был выявлен у 13 (56/5), коронавирусный -у 14 (60,8£) и эшерихии коли - у 19 (82,6/5) телят. Указанные антигены в ассоциации были идентифицированы у 56% животных.

Результаты проведенных исследований показывают, что

новорожденные телята, полученные от иммунизированных коров,

более устойчизы к смешанны.? болезням, желудочно-кишечного

тракта, обусловленным рота-,короназирусамии эшерихией коли,

н».

по сравнению с телятами, полученными от иммукизирозакных короз.

2.2.4.2. Роль колостральных антител, локализованных в содержимом кишечника телят, з профилактике рота-,короназирусных энтеритов и ко-либактериоза

Для определения динамики накопления специфических антител к рота-,коронавирусам и эшерихии коли в крови и содержимом кишечника новорожденных телят и изучения из роли з профилактике смешанной инфекции исследовали сыворотку крови и фекалии телят, полученных от иммунизированных (8 гол.) и контрольных (8 гол) коров.

исследования сыворотки крови телят опытной группы показали, что средний титр антител в первые 4- суток к рота-и коронавирусам составил 6,0+0,13 и 6,2+0,20 Со^ , соответственно, к эшерихии коли - 1:600+75.

В дальнейшем он снижался и к 10-му дни составчл'Ц,8+0,12 и 5,0+0,26, 1:400+65 соответственно, В фекалиях телят титр антител к рота-и коронавирусам и к эшерихии коли в первые 4 суток достигал 7,0+0,12, 7,6+0,18 и 1:1200+145 затем он снижался и к 10-му дню составлял 3,4+0,18, 3,2+0,16 и 1:600+75 соответственно.

Данные свидетельствуют, что у телят титр антител в сыворотке крови и фекалиях достигал мксимума ко 2-му дню и сохранялся на одном уровне на протяжении суток, далее он постепенно снижался. Ротат,коронавирусы и эшерихии коли из 2 исследованных проб не были обнаружены ни в одном случае.

При исследовании сыворотки крози и фекалий телят, полученных от.кеиммунизированных коров, было_установлено, что сред-

ний ти?р антител к рота- л коронавирусам в сыворотке крози з первые 4 дня составил 2,4+0,16 и 2,6+0,18 Со^ соответственно и к 10-м суткам снизился до 1,2 к обоим антигена«:. Средний титр антител к эшерихии коли в перЗые 4 суток составлял 1:200+12,5 и до 10-го дня оставался на уровне 1:50+5,7. В фекалиях антитела к рота- и коронавирусам выявляли в титре 4,0+0,31 и 3,8+0,23 соответственно, затем эти показатели резко снизились и через 7 дней данные антитела не обнаруживали. По мере снижения тигра специфических антител в фекалиях контрольных телят повышался титр рота- и коронави-русных антигенов, и у 6 телят отмечалось расстройство функций желудочно-кишечного тракта с сиыпгомами диареи.

Тигр рога- и коронавирусных антигенов у больных телят составлял 7,2+0,16 и 8,0+0,12 соответственно.

При исследовании молозива, выпиваемого опытным телятам установлено, что средний титр антител к рота- и коронавирусам в первые 3 дня колебался от 8,8+0,12 до 4,6+0,18 , к

эшерихии коли - ог 1:3200+200 до 1:800+47.

.В молозиве выпаиваемом контрольным телятам средний титр антител к рота-,коронавирусам и эшерихии коли в первые 2 суток составлял 1,8+0,15, 2,0+0,17^и 1:100+5,5. На 3-4-й дни антитела не обнарунизали.

Таким образом, результаты проведенных исследований показали, что содержание антител в крови и фекалиях телят зависит от их титра в зыпаизаемом молозиве. Поступившие в желудочно-кишечный тракт теленка антитела не все всасываются в кровь, большая часть их выделяется с фекалиями. В профилактике, сме-

санной инфекции телят важную роль играют антитела, локализованные з содержимом их желудочно-кишечного тракта.

Экономический эффект от применения ассоциированной вахцкны против рота-,коронавирусных энтерптоз и колт*5актериоза на рубг. затрат составил ь руб 40 коп.

ВЫВОДЫ

1. Сравнительное изучение антигенной активности ассоциированной вакцины -против рота-,коронавирусных энтеритов и коли-

бактериоза на кроликах показало, что наиболее выраженный антигенный ответ отмечен при введении препарата подкожно, двукратно, с интервалом 2-3 недели.

2. Иммунизация стельных коров ассоциированной закциной за 40 и 20 дней до отела в дозе 5 и 10 мл подкожно позволяет обеспечить накопление в молозиве специфических антител к рэ-тазирусу з титре 7,8+0,2, к коронавирусу - 8,0+0,15 и к зперяхии коли - 1:3200+714.

3. Синтезированный на основе низкомолекулярного соединения, обладающего активностью тимозина ^ с цинком, препарат тимоцин язляется нетоксичным для яизотных.

4. Применение ассоциированной закцкны против рота-,коро-назирусных энтеритов и колкбактериоза созместно с тимоцином повышает эффективность иммунизации- и способствует увеличению специфических антител у животных на 15-25%.

5. Преимущественную роль в профилактике смешанной инфекции желудочно-кипечного тракта телят играют антитела, локализованные в содержимом желудочно-кишечного тракта животных.

6. Выпаивание новорожденным телятам молозива коров-матерей, содержащего специфические антитела к рота-,коронази-русаы в титре 7,0 Со^ и зыие, к эшерихии коли - 1:3200, снижает заболеваемость телят диареей, вызываемой рота-,коро-назирусаш и эшериллй коли, и предотвращает падеж животных от данных инфекций.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЙ

1. Система мероприятий по профилактике смешанной инфекции желудочно-кишечного тракта молодняка крупного рогатого скота: Утв. ГУВ МСХ Республики Таджикистан, 18.12.1994г.

2. Инструкция по изготовлению и контролю препарата гимоцин:Утв ГУВ ЫСХ Республики Таджикистан, 23.07.1998г. .

3. Технические условия на препарат тимоцин: Утв. ГУВ :,;СХ Республики Таджикистан, 23.07.1998г.

4. Наставление по применению препарата тимоцин: Утв ГУВ мСХ Республики Таджикистан, 23.07.1998г.

5. Временное наставление по применению ассоциированной вакцины против рота-,коронавирусных энтеритов и колибактериоза телят: Утв. ГУВ 1.1СХ Республики Таджикистан, 04.02.1999г.

... работы, опубликованных по теме

-" • диссертации

1„ Сатторов И.Т., Хамдамов А.,Бобиев Г..Махмудов К. Пути повышения сохранности молодняка сельскохозяйственных

животных.- Душанбе, 1937.-2с.-(И.ЛДаджикНШНТЙ); to 124-97.

2. Сатторов И.Т.,Бобиев Г. .Махмудов К., Токсические свойства нового иммуностимулирующего препарата тимоцина.- Душанбе, // 1?98.-4с.-(И.Л./ НШ Центр); й 67-98.

3. Бобиев Г.,Сатторов И.Т.,Гиесоз А.Ш.,Махмудов К., Исупов С.Д. Влияние нозого имьуномйдулятора тимоцина на эффективность закцкнопрофилактики вирусных энтеритов и колкбактери-оза.- Душанбе,1998.-4с.-(И.Л/ПШ Центр): й 70-98.

4. Сатторов И.Т.»Махмудов К. Хамдамоз А. .Гоголев М.М., Соколова й.Л. .Шегидезич Э.А. Уровень гуморальных антител у коров, ионизированных ассоциированной ГОАЛ фосмолвакциной против рота-.коронавирусных энтеритов и колибакгериоза // Диагностика, лечение и профилактика заболеваний с/х животных:

С5.науч.тр.Тадг,НКЗИ / I997-I998 гг.-Душанбе,1998.-С.8-9.

5. Бобиев Г..Сатторов И.Т.,Гиесов А.й.,Ксупов С.Д., Махмудов К. Биологические свойства нового иммуностимулирующего грепарата тимоцина // Проблемы изыкания, синтеза и производства препаратов для зетеринарии / Тез.докл.нгучпой конференции /

Уз Н1;з:;,-Си.:ар:;анд, 1999,- С.42-^4.

£. !.*з:а.'удоз К. Уровень специфических антител в молозиве I: молоке ::о;о2, ш.:;.:ун::зк?0Банних ассоциированной закциной -;.'отпв рота-,коронгвкрусных энтеритов и колибакгериэса теллт /7 Тез.дэкл.Рссп.науч.- практ.конф. молодых ученых 7АСХК, :осзяг.екнэМ ЦС0-лг?вэ государства Сопонидов.- Душанбе, 1999.-