Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.01) на тему:Аккумуляция ДАФС-25 и его лечебное действие при гипоселеновых элементозах животных

ДИССЕРТАЦИЯ
Аккумуляция ДАФС-25 и его лечебное действие при гипоселеновых элементозах животных - диссертация, тема по ветеринарии
АВТОРЕФЕРАТ
Аккумуляция ДАФС-25 и его лечебное действие при гипоселеновых элементозах животных - тема автореферата по ветеринарии
Кутепов, Алексей Юрьевич Саратов 2003 г.
Ученая степень
кандидата ветеринарных наук
ВАК РФ
16.00.01
 
 

Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Аккумуляция ДАФС-25 и его лечебное действие при гипоселеновых элементозах животных

На правах рукописи

Кутепов Алексей Юрьевич

АККУМУЛЯЦИЯ ДАФС-25 И ЕГО ЛЕЧЕБНОЕ ДЕЙСТВИЕ ПРИ ГИПОСЕЛЕНОВЫХ ЭЛЕМЕНТОЗАХ ЖИВОТНЫХ

Специальность 16.00.01. - Диагностика болезней и терапия

животных

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук

Саратов-2003

Работа выполнена на кафедре физиологии, экологии животных и фармакологии и кафедре внутренних незаразных болезней и клинической диагностики животных ФГОУ ВПО "Саратовский государственный аграрный университет имени Н.И. Вавилова".

Научный руководитель:

доктор медицинских наук, профессор Смирнов Михаил Иванович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Садчиков Дмитрий Владимирович

кандидат ветеринарных наук, Волков Алексей Анатольевич

Ведущая организация: Государственное научное учреждение Саратовская научно-исследовательская ветеринарная станция РАСХН.

Защита состоится 2003г. в " ^ " часов на за-

седании диссертационного совета^ 2.2.0. <Х в институте ветеринарной медицины и биотехнологии СГАУ имени Н.И. Вавилова по адресу: 410005 Саратов, Соколовая, 335.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке института ветеринарной медицины и биотехнологии СГАУ имени Н.И. Вавилова.

Автореферат разослан » 2003 г.

Ученый секретарь диссертационного совета доктор медицинских наук, профессор £

V В.А. Блинов

\\j4t

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Минеральные вещества входят в состав всех органов и тканей организма и играют важную роль в процессах обмена. Для нормального роста и развития организм должен получать с кормом достаточное количество минеральных веществ, в том числе микроэлементов. Последние влияют на рост и развитие животных, повышение их продуктивности, плодовитости и устойчивости к различным заболеваниям (Беренпггейн ФЛ., 1961; Бабин Я.А., 1965, 1967; Георгиевский В.И., Анненков П.Т., Самохин В.Т., 1979).

Микроэлементы неравномерно распределены во внешней среде. Обширная нечерноземная зона (от Балтики до Тихого океана) по данным литературы характеризуется недостатком в почвах, растениях и животных организмах микроэлементов, в том числе селена. Установлено, что поступление в организм с кормом микроэлементов, даже в условиях Центрально-Черноземных областей обеспечивает лишь на 30-70 % потребность в них (Самохин В.Т., 1992; Самохин В.Т., Шулебин ВИ,1999).

К числу обусловленных дефицитом заболеваний, в которых может играть определенную роль селен, относятся алиментарная мышечная дистрофия у овец и коров, экссудативный диатез у цыплят и некроз печени у свиней и крыс. (Специальная исследовательская группа МОТ и ВОЗ по селену. Женева. 1989).

В Поволжье применение препаратов селена в различных сельхозпредприятиях Саратовской области, приобретает системный характер и с каждым годом расширяется. Это объясняется дефицитом селена в окружающей среде и как следствие недостаточной биологической обеспеченностью организма животных данным микроэлементом (Смирнов М.И., 1998).

Полезность применения селенистых препаратов в рационах сельскохозяйственных животных и птицы обусловлена их высокой биологической активностью. Поэтому, возникает необходимость более тщательного контроля и научного обоснования применения препаратов селена в животноводстве и птицеводстве в каждом конкретном хозяйстве с учетом природного распространения селена в окружающей среде (почве, воде, растениях, кормах).

Цель и задачи работы. Целью исследований явилось изучение поступления, динамики накопления и распределения селена в органах и тканях лабораторных, сельскохозяйственных животных и птицы при различных путях введения ДАФС-25 в организм животных и оценка его лечебного действия при гипоселеновых элементозах.

| ,-иС. 1.АЦИ^,!Л ПЬНДЧ | БИБЛИОТЕКА

В связи с этим были поставлены следующие задачи.

1. Изучить динамику накопления селена в органах и тканях лабораторных животных при подкожном введении селенорганического препарата ДАФС-25.

2. Определить содержание селена в органах и тканях лабораторных животных при введении различных доз ДАФС-25 в рацион.

3. Провести фармакокинетическое исследование ДАФС-25, определить некоторые фармакокинегические показатели данного препарата методом статистических моментов и оценить дозы ДАФС-25 для лечения и профилактики селенового гипоэлементоза у животных.

4. Изучить биологическую обеспеченность организма животных селеном с целью диагностики гипоселеновых элементозов и оценить лечебно-профилакшческое действие ДАФС-25.

5. Оценить патоморфологические изменения наблюдаемые у телят больных беломышечной болезнью.

6. Определить концентрацию селена в органах и тканях цыплят-бройлеров при скармливании рационов, содержащих ДАФС-25 и комплекса ДАФС-25 с флавомицином.

7. Оценить физиологическую целесообразность и экономическую эффективность использования препарата ДАФС-25 в кормлении цыплят-бройлеров.

Научная новизна. Научная новизна и теоретическое значение работы состоит в том, что она является первым интегрирующим исследованием в проблеме физиологического и экологического нормирования селена в производстве продукции животноводства в условиях широкого применения селенорганического препарата ДАФС-25. Впервые изучено распределение и динамика накопления селена в органах и тканях лабораторных, сельскохозяйственных животных и птицы при различных путях поступления препарата в организм. В производственных экспериментах на цыплятах-бройлерах изучено влияние ДАФС-25 и комплекса препаратов ДАФС-25 и флавомицина на уровень концентрации селена в органах и тканях и их влияние на обменные процессы, прирост, продуктивность, сохранность поголовья и кормовые затраты. Впервые проведено фармакокинетическое исследование ДАФС-25 методом статистических моментов и проведена теоретическая интерпретация полученных результатов, применительно к обоснованию нормирования доз ДАФС-25 для животных и птицы.

Впервые изучена биологическая обеспеченность организма животных и сельскохозяйственной птицы в Саратовском регионе По-

волжья, проведена диагностика и выявлены скрытые формы селеновой недостаточности у лабораторных животных, овец цигайской породы и их потомства. Оценено лечебно-профилактическое действие селенорганического препарата ДАФС-25 при гилоселеновых эле-ментозах.

Основные положения выносимые на защиту:

- динамика накопления селена в органах и тканях лабораторных животных при подкожном введении ДАФС-25;

- показатели количественного накопления селена в органах и тканях лабораторных животных в зависимости от доз в рационе ДАФС-25;

- фармакокинетические характеристики селенорганического препарата ДАФС-25 и его дозы для лечения и профилактики селеновой недостаточности у животных;

- материалы по оценке эффективности лечебного и профилактического действия ДАФС-25 при скрытых формах селеновой недостаточности у лабораторных и сельскохозяйственных животных;

- материалы по уровню концентраций селена в органах и тканях цыплят-бройлеров при скармливании рациона с ДАФС-25 и комплекса ДАФС-25 с флавомицином, а также о физиологической целесообразности и экономической эффективности использования этих препаратов.

Практическая значимость работы. Полученные в работе экспериментальные данные использованы в качестве базовых показателей при обосновании применения в практическом животноводстве и птицеводстве оригинального селенорганического препарата ДАФС-25, при разработке нормативной документации по его применению и контролю, схемы использования и дозы, которые регламентированы наставлением по применению, утвержденным Департаментом ветеринарии Министерства сельского хозяйства РФ. Проведенные фармакокинетические исследования и данные полученные на лабораторных и сельскохозяйственных животных по количественному содержанию селена в тканях организма обосновывают возможность широкого и безопасного использования ДАФС-25 в животноводстве и птицеводстве в интересах получения экологически безопасных продуктов питания для населения и профилактики селендефицитных состояний у сельскохозяйственных животных и птицы.

Апробация работы. Основные материалы исследований были доложены на научно-практической конференции молодых ученых и аспирантов в апреле 1998 года СГАВМиБ; на XVII съезде физиоло-

гов России в октябре 1998 года; научной конференции профессорско-преподавательского состава в феврале 1999 года СГАУ имени Н.И. Вавилова; на научной конференции профессорско-преподавательского состава и аспирантов СГАУ имени Н.И. Вавилова по итогам года в феврале 2000,2002 и 2003 гг.

Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 13 печатных работ, в которых отражены основные результаты научных исследований по теме диссертации.

Структура и объем диссертации. Диссертация включает следующие разделы: введение, обзор литературы, собственные исследования, их обсуждение, рекомендации для практики и список литературы. Она изложена на 159 страницах компьютерного текста, содержит 22 таблицы и 24 рисунка. Список литературы включает 175 источников, в том числе 78 иностранных.

2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ

Опьггы выполнялись в 1997-1999 гг. на кафедре физиологии, экологии животных и фармакологии и кафедре внутренних незаразных болезней и клинической диагностики животных, в клинике ИВМиБ Саратовского государственного аграрного университета имени Н.И. Вавилова, в Саратовской региональной межобластной лаборатории болезней птиц.

Экспериментальные исследования проведены на белых мышах, белых крысах, овцах и сельскохозяйственной птице. В опытах использовано 40 белых мышей, 32 белых крыс, 200 овец и 3000 цыплят-бройлеров.

Опыты на мышах. В опытах на мышах изучалось распределение и накопление в органах и тканях селена при введении в рацион ДАФС-25 в разных дозах.

Опыт проведен на 40 белых мышах, самцах с живой массой тела 19-22 г. Для этого по принципу аналогов с учетом возраста и физиологического состояния животных были сформированы четыре группы мышей, первая - контрольная, другие три - опытные, по 10 животных в каждой группе.

Кормление животных производилось трехкратно, селеноргани-ческий препарат ДАФС-25 вводился в рацион в дозах 0,1; 0,2; 0,4; 1,0 мг/кг корма, в виде масляного раствора каждый день в течение трех недель.

Опыты на крысах. На белых крысах изучалось распределение и накопление селена в тканях внутренних органов при подкожном введении селенорганического препарата ДАФС-25.

ДАФС-25 вводили подкожно в подсолнечном масле в дозе 0,2 мг/кг через день. Доза ДАФС-25 0,2 мг/кг выбрана как оптимальная физиологическая для данного вида животных. Она положительно влияет на рост и развитие животных, стимулирует антиоксидантную систему, иммунитет и не влияет на гематологические показатели периферической крови (Смирнов М.И.; Шумарева Т.Ю. 1999). Умерщвление животных проводили на 7-е, 14-е и 21-е сутки после введения препарата. Эфтаназия достигалась путем одномоментной декапитации согласно рекомендациям по деонтологии медико-биологического эксперимента (1987).

Содержание селена определяли в крови, мышце сердца, головном мозге, скелетных мышцах, стенке тонкого кишечника, ткани легкого, почек и печени.

Опыты на овцах. Фармакокинетические исследования селенор-ганического препарата ДАФС-25 проведены на 10 овцах цигайской породы в клинике ИВМиБ СГАУ имени Н.И. Вавилова. Для этого использовали методику статистических моментов, разработанную в лаборатории фармакокинетических исследований Российского научно-исследовательского центра профилактической медицины МЗ России.

Животных в подопытные группы подбирали по принципу аналогов — с учетом возраста, породы и массы тела. До проведения эксперимента двукратно проводили клиническое исследование животных с целью получения фоновых показателей для того, чтобы сформировать группы овец с наименьшими физиологическими различиями. Селе-норганический препарат ДАФС-25 (бис(бензоилметилселенид)) вводился подкожно в подсолнечном масле в дозах 0,1 и 1,0 мг/кг массы тела животного. Кровь для анализа забиралась из яремной вены. Наблюдение проводилось до 10 суток, с момента введения препарата.

Исследования по изучению лечебного действия ДАФС-25 при селеновой недостаточности у овец проводились в племколхозе "Ка-мышковский" Александрово-Гайского района Саратовской области. Под наблюдением находились овцематки (40 голов) и баранчики (150 голов) цигайской породы.

Патоморфологические исследования. Патоморфологические изменения были изучены на одном павшем теленке. Вскрытие павшего теленка производилось в первые 24 часа после наступления смерти. Для гистологического и гистохимического исследования брали кусочки скелетных мышц, сердца, легких, печени, почек, мочевого пузыря, головного мозга, тонкого и толстого отделов кишечника.

Для фиксации патологического материала использовали 10 % раствор нейтрального формалина, жидкость Карнуа, 96°-ный и абсолютный этиловый спирт.

Срезы толщиной 10-15 мкм готовились на замораживающем микротоме.

При окраске срезов применяли гематоксилин и эозин.

Патоморфологические исследования сопровождались фотографированием участков скелетной мускулатуры с отклонением от нормы, для чего использовался микроскоп МБИ-15 с фотонасадкой МФН-12 и фотокамера "Зенит-Е".

Опыты на цыплятах-бройлерах. Изучение влияния ДАФС-25 и комплекса препаратов ДАФС-25 с флавомицином на рост, развитие и физиолого-биохимический статус цыплят-бройлеров проводилось в производственном эксперименте в условиях крупных птицеводческих предприятий на птицефабрике ЗАО АГ "Николаевская" Саратовского района, Саратовской области.

Схема проведения опыта на "Николаевской" птицефабрике представлена в таблице 1.

Режим кормления и условия содержания цыплят-бройлеров всех групп были одинаковы.

Учетный период производственного опыта проходил с 1 по 45 день. В период исследований учитывали следующие показатели:

— сохранность поголовья, путем ежедневного учета павшей птицы;

- среднюю живую массу цыплят-бройлеров, путем взвешивания на 15,30 и 45 день;

Таблица 1

Схема проведения опыта на птицефабрике АГ "Николаевская"

Подопытные группы Количество Условия

цыплят-бройлеров голов кормления

¡-контрольная 1 ООО ОР с естественным содержанием селена 0,03-0,05 мг на кг корма

2-опытная 3-опытная 1000 1000 ОР + ДАФС-25, в дозе 1,6 мг на кг корма ОР + ДАФС-25 в дозе 1,6 мг на кг корма + флаво-мицин в дозе 37,5 мг на кг корма

Ткани и органы для исследований брали от 10 контрольных и 10 подопытных бройлеров каждой группы. Динамика накопления селена изучалась в сыворотке и цельной крови, большом и малом головном мозге, мышце сердца, стенке тонкого кишечника, стенках железистого и мышечного желудков, легком, грудной мышце, селезенке, почках и печени.

Содержание селена определяли на электронном флуорометре ЭФ-ЗМ по методике И.И. Назаренко и В.В. Ермакова в модификации Т.М. Гусейнова (1975).

Полученные экспериментальные данные подвергнуты статистической обработке по общепринятым в биологии методам с использованием современных программ на компьютере Р 150/16/14. Достоверность различий оценивали при Р < 0,05. Всего проанализировано 1196 проб.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Динамика накопления селена в органах и тканях лабораторных животных при подкожном введении ДАФС-25

Распределение и накопление селена при подкожном введении белым крысам ДАФС-25 изучено в тканях внутренних органов (печень, почки, легкое, тонкий кишечник, сердце), а также в тканях головного мозга и скелетных мышц. Полученные результаты приведены в таблице 2.

Таблица 2

Содержание селена в органах и тканях белых крыс, мкг/г

№ п/п Исследуемые органы Контроль Время опыта, сутки Средняя концентрация селена

7 14 21 за период 7-21 сутки

1 Печень 0,06810,01 0,12310,03" 0,15710,02"" 0,11110,02" 0,13010,01

2 Почки 0,02610,001 0,09810,02"" 0,11310,01"" 0,08710,02"" 0,09910,01

3 Легкое 0,027±0,01 0,05410,01" 0,12810,01"" 0,05910,02" 0,080Ю,02

4 Стенка 0,03510,001 0,08610,01" 0,131Ю,03"' 0,044Ю,01* 0,08710,03

тонкого

кишечника

5 Скелетные 0,025+0,001 0,074Ю,01~" 0,09110,03'" 0,05210,02"* 0,07210,01

мышцы

6 Головной 0,03610,001 0,06710,01" 0,09710,01"" 0,04310,003" 0,06910,02

мозг

7 Мышца 0,01710,001 0,07710,01"" 0,07410,01"' 0,068Ю,02" 0,073+0,02

сердца

Примечание. Р > 0,05; **- Р < 0,5; '**- Р < 0,01.

Анализируя данные, представленные в таблице 2 можно констатировать следующее. У контрольных животных наибольшее количество селена определяется в печени (0,068 мкг/г), а наименьшее в мышце сердца (0,017 мкг/г). В тканях почек, легкого, тонкого кишечника, скелетных мышцах и в головном мозге содержание селена находится в интертале 0,025-0,036 мкг/г. Эти данные согласуются с результатами

исследований других авторов (Burk R.F. et al., 1972; Thomson J.N. et al., 1975., Rochold et al., 1977). Низкое, в сравнении с другими тканями, содержание селена выявлено в сердечной мышце. Представляется возможным полагать, что это, скорее всего, связано с высокими обменными процессами, происходящими в тканях данного органа.

После подкожного введения селенорганического препарата ДАФС-25 во все сроки наблюдения в тканях исследованных органов отмечается повышение концентрации селена.

В период с 7-х по 14-е сутки накопление селена в тканях организма продолжается. Об этом свидетельствует повышение концентраций селена во всех исследованных органах и тканях организма к 14-м суткам.

К исходу 21-х суток количество селена в изученных тканях уменьшается, однако, оно превосходит исходный уровень в 1,2-4,0 раза.

По скорости накопления селена в тканях от исходного уровня изученные органы и ткани можно распределить в следующей последовательности: сердце> почки> скелетная мускулатура> тонкий кишечник легкое> печень> головной мозг.

По средней величине концентраций селена за период опьгга органы и ткани распределяются следующим образом: печень> почки> тонкий кишечник> легкое> сердце> скелетные мышцы> головной мозг.

С наибольшей скоростью относительно исходной концентрации, происходит накопление селена в сердечной мышце, высокий уровень элемента в ней сохраняется до 21-х суток. Это, вероятно, можно объяснить степенью кровоснабжения и интенсивностью обменных процессов, происходящих в тканях сердечной мышцы.

Высокая скорость накопления и высокая концентрация селена вплоть до 21-х суток характерны для тканей почек. Этот феномен, вероятно, можно объяснить ролью почек в фармакокинетике селена и конкретного препарата ДАФС-25.

Следует особое внимание обратить на высокие концентрации селена в тканях печени, почек, тонкого кишечника и легких. Этот процесс является логичным и, вероятно, закономерным явлением, объяснимым с позиции барьерной и белковосинтетической функции печени, а также выделительной функции почек, тонкого кишечника и легких.

Такое объяснение согласуется с данными литературы (Burk R.F. et al., 1972; Thomson J.N., 1975., Stewart R.D.H., 1973; Behne D., Hofer-Bosse Т., 1984).

Таким образом, в опытах на белых крысах при изучении распределения и накопления в тканях внутренних органов животных при подкожном введении селенорганического препарата ДАФС-25, уста-

новлено, что накопление селена в организме животных подчиняется общим закономерностям фармакокинетики ксенобиотиков. Выявлены периоды резорбции (накопления) селена в тканях (1-7 сутки), максимальной концентрации (7-14 сутки) и период элиминации (1421 сутки).

3.2. Накопление селена в органах и тканях лабораторных животных при введении ДАФС-25 в рацион

Влияние селенорганического препарата ДАФС-25 на накопление селена в органах и тканях животных изучалось на белых мышах. Препарат вводился в рацион белых мышей в дозах 0,1; 0,2; 0,4 и 1,0 мг/кг корма.

Выбор доз ДАФС-25 обоснован данными литературы (Мохоп А.Ь. & Шпал М., 1943, На1уег<юп А Ж е1 а1., 1966, Плетникова И.П., 1970, СэаПапу А.8. е! а1., 1984) о влиянии препаратов селена на физиологические системы организма лабораторных животных и результатами собственных исследований по определению токсичности ДАФС-25 для белых мышей (Смирнов М.И., Шумарева Т.Ю., 1996). Установлено, что 1Х>5о ДАФС-25 для белых мышей при подкожном введении в форме масляных растворов составляет 152,18 мг/кг массы тела. Дозы 0,1; ОД; 0,4 и 1,0 мг/кг корма в пересчете на 1 кг массы тела мышей соответствуют дозам 0,06; 0,12; 0,24 и 0,6 мг/кг соответственно, которые составляют десятитысячные и тысячные доли от и могут рассматриваться как физиологически безопасные.

Обобщая результаты исследований по изучению влияния различных доз селенорганического препарата ДАФС-25 в рационе на накопление селена в крови и тканях различных органов белых мышей представляется возможным отметить следующее.

Содержание селена в крови и тканях изученных органов у контрольных животных находится в пределах физиологического уровня. При введении в рацион белых мышей ДАФС-25 концентрация селена в крови и ткани внутренних органов повышается. Наиболее высокие концентрации элемента в тканях определялись при внесении в рацион дозы 1,0 мг/кг корма, а наиболее низкие при дозе 0,1 мг/кг, что свидетельствует о влиянии дозы препарата в рационе на динамику накопления селена в тканях организма. Максимальные концентрации селена в тканях наблюдаются на 14-е сутки после введения в рацион препарата. Эти данные согласуются с результатами исследования на белых кры-

сах при подкожном введении ДАФС-25. Представляется возможным высказать мысль о том, что динамика накопления селена зависит от величины вводимой в организм дозы препарата. Так, при внесении в рацион ДАФС-25 в дозе 0,1 мг/кг корма более высокие концентрации селена в тканях определялись только на 21-е сутки наблюдения, тогда как при дозе 1,0 мг/кг корма достоверное повышение элемента в тканях внутренних органов наблюдается уже на 7-е сутки опыта.

На основании полученных данных представляется возможным высказать мысль о том, что дозы ОД и 0,4 мг/кг корма, по сравнению с дозами 0,1 и 1,0 мг/кг рациона, являются более оптимальными. Насыщение тканей селеном происходит плавно в течение 14 суток. В последующем активно функционируют процессы биотрансформации и выведения элемента из организма. Так, к 21 суткам в тканях печени, почек, тонкого кишечника, легких содержание селена возвращается к исходному уровню. Из этого можно сделать вывод о том, что продолжительность введения в рацион ДАФС-25 должна составлять две недели.

Таким образом, полученные результаты позволяют сделать заключение о том, что количество и динамика накопления селена в крови и тканях внутренних органов белых мышей зависят от вводимой в рацион дозы препарата. Наиболее оптимальными дозами являются дозы 0,2 и 0,4 мг/кг рациона при двухнедельном скармливании.

3.3. Фармакокинетика селенорганического препарата ДАФС-25

Фармакокинетика представляет собой процесс поведения лекарственного вещества (ЛВ) в живом организме.

На рисунке 1 изображены кривые изменения концентрации селена (С), метаболита ДАФС-25, в сыворотке крови овец после однократного подкожного введения селенорганического препарата ДАФС-25 в дозах 0,1 и 1,0 мг/кг массы тела.

Установлено, что максимальная концентрация селена в крови и сроки ее достижения зависят от величины вводимой дозы ДАФС-25. Наиболее интенсивное накопление селена в сыворотке крови происходит в течение первых 3-6 часов при введении дозы 1,0 мг/кг, а при введении дозы 0,1 мг/кг в более поздние сроки. К 24 часам концентрация селена в крови начинает понижаться, что свидетельствует об усилении процессов элиминации. Следует отметить, что снижение концентрации селена в сыворотке крови овец после инъекции ДАФС-25 до исходного уровня происходит относительно медленно и плавно.

О 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240

Время, ч

♦ Доза 0,1 мг/кг -в - - Доза 1,0 мг/кг

Рис. ]. Динамика накопления селена и сыворотке криви овец при подкожном введении ДАФС-25

Процесс элиминации в количественном и качественном отношении зависит от исходной введенной в организм дозы препарата. При введении дозы ОД мг/кг концентрация селена в крови приближается к исходному уровню к 6-10 суткам после начала опыта, а при дозе 1,0 мг/кг в более отдаленные сроки. Фармакокинетические параметры рассчитывались при однократном подкожном введении ДАФС-25 в дозе 1,0 мг/кг массы тела овец применительно к однокамерной модели.

Использован математический аппарат расчета кинетических параметров, основанный на вычислении статистических моментов кинетических кривых.

Теоретическая основа определения кинетических параметров поведения ЛВ в организме животных методом статистических моментов описана в работах Пиотровского В.К. (1984, 1986); Уатаока К. (1978) и др. авторов. Основным условием правомерности применения метода статистических моментов является то, что система должна быть линейной. В наших опытах данное положение соблюдалось в Р-фазе процесса элиминации.

Нами определены следующие временные параметры фармакоки-нетики ДАФС-25 (табл. 3).

Таблица 3

Фармакокинетические параметры ДАФС-25 при его подкожном введении овцам в дозе 1,0 мг/кг

№ п/п Название Символ Размерность Величина ФК показателей

1. Начальный объем распределения V„ л 50,64±3,21

2. Полная площадь под кривой концентрация-время (C(t)) AUC (мкг-ч)/мл 40,65±2,60

3. Отношение площади под кривой "произведение квадрата времени на концентрацию ЛВ в крови - время" к AUC AUMC (мкг-ч2)/мл 6191,59±бЗ,48

4 Общий клиренс CL л/ч 0,4592±0,0285

5. Среднее время удержания MRT ч 152,3±17,7

6. Среднее время распределения MDT ч 50,0±3,4

7 Среднее время элиминации MET ч 102,3±8,3

В результате проведенных фармакокинетических исследований установлено, что накопление селена в сыворотке крови овец зависит от введенной дозы ДАФС-25. Логично просматриваются три периода накопления селена в сыворотке крови: период всасывания, максимальной концентрации и элиминации. Все это согласуется с теорией классической фармакокинетики, описанных в работах К. Ya-maoka, Т. Nakagawa, Т. Uno (1978); S.Riegelman, P. Collier (1980).

3.4. Селеновая недостаточность у животных и лечебное действие ДАФС-25

Недостаточность селена у различных видов сельскохозяйственных животных и птицы проявляется заболеванием, сопровождающимся дистрофией скелетных и сердечной мышц, печени, поджелудочной железы и других органов и тканей организма. Отсюда, в зависимости от выраженности и преимущества поражений тех или иных органов и систем, это заболевание называется как беломышечная болезнь, мышечная дистрофия, миопатия, алиментарный некроз печени и др.

3.4.1. Влияние ДАФС-25 на селеновую недостаточность у белых мышей

Диагностика гипоселенового элементоза у белых мышей проводилась по показателям содержания селена в цельной крови, тканях печени, почек, тонкого кишечника, легких, головного мозга, скелетной и сердечной мышц. Критерием биологической обеспеченности организма белых мышей селеном принята концентрация элемента в тканях равная 0,15 мкг/г, как величина, находящаяся в интервале концентраций 0,16-0,07 мкг/г, рекомендованных ВОЗ.

У обследованной группы белых мышей (контроль) содержание селена в цельной крови, тканях внутренних органов, головного мозга, скелетной и сердечной мышц находится в интервале 0,050-0,090 мкг/г. Средняя концентрация микроэлемента в организме по этим данным составляет 0,072 мкг/г, что более чем в 2 раза ниже биологического оптимума. Эти данные позволяют поставить диагноз о наличие у белых мышей скрытой формы гипоселенового элементоза.

При введении селенорганического препарата ДАФС-25 в организм белых мышей с кормом в дозах 0,1; 0,2; 0,4; 1,0 мг/кг рациона в течение трех недель, восстанавливается биологическая обеспеченность организма селеном до физиологического уровня.

Сроки нормализации биологической обеспеченности селеном зависят от дозы ДАФС-25. Так, при скармливании ДАФС-25 в дозе 0,1 мг/кг корма лечебное действие достигается к исходу третьей недели. К этому времени средняя концентрация элемента в организме белых мышей достигает 0,16 мкг/г. По изученным органам, кроме печени, она находится в интервале 0,14-0,23 мкг/г. Дозы 0,2 и 0,4 мг/кг рациона лечебное действие оказывают в течение двух недель, а доза 1,0 мг/кг в течение одной недели.

Таким образом, селенорганический препарат ДАФС-25 в опытах на белых мышах, имеющих скрытую форму гипоселенового элементоза, при введении его в организм через желудочно-кишечный тракт с кормом, оказывает лечебное действие при данной форме селеновой недостаточности. Оптимальной дозой следует считать дозу 0,2 мг/кг корма.

3.4.2. Влияние ДАФС-25 на селеновую недостаточность белых крыс

В наших исследованиях диагностика селеновой недостаточности у белых крыс проводилась посмертно по содержанию селена в тканях внутренних органов, головного мозга, скелетных и сердечной мышц, состоянию белкового обмена и антиоксидантной системы зашиты организма.

В таблице 4 приведены исходные данные, характеризующие физиологический статус организма контрольных животных.

Таблица 4

Биохимические показатели крови белых крыс до опыта (ао применения ДАФС-25)

к» п/п Показатели Количественные характеристики

1. Концентрация селена, мкг/г

- печень 0,068±0,01

- легкое 0,02710,01

- тонкий кишечник 0,03510,001

- ночка 0,02510,001

- скелетная мышца 0,025±0,001

- мышца сердца 0,017+0,001

- головной мозг 0,03610,001

2 Обший белок сыворотки крови, г% 7,5510,86

3 Альбумин, г% 2,08±0,61

4 Глобулин, г%

а-глобулины 1,6210,25

(З-глобулины 1,91 ±0,24

у-глобулнны 0,8510,07

5 Диеновые коньюгагы, мкМоль/мл 8,8113,31

Примечание: - Р < 0,05

Обращают на себя внимание низкие концентрации селена в тканях изученных органов. Они существенно ниже концентраций, характеризующих физиологический оптимум по селену (0,15 мкг/г). Концентрация общего белка и его фракций находятся на уровне нижних границ физио-

логической нормы, что является характерным для селеновых гипоалемен-тозов. Концентрация диеновых коньюгатов в сыворопсе крови 8,81+3,31 мкМоль/мл свидетельствует о повышенном уровне перекисного окисления липидов в организме белых крыс. Это характерно для патологических процессов, обусловленных селеновой недостаточностью.

Таким образом, по результатам исследований, приведенным в таблице 5 представляется возможным поставить диагноз о наличии у животных (белых крыс) скрытой формы гипоселенового элементоза.

На втором этапе исследований изучалось лечебное действие селе-норганического препарата ДАФС-25 на течение гипоселенового элементоза у белых крыс. Полученные результаты приведены в таблице 5.

Таблица 5

Содержание в органах и тканях белых крыс селена, общего белка, альбуминов, глобулинов н диеновых коньюгатов после подкожного введения ДАФС-25 в дозе 0,2 мг/кг массы тела

№ п/п Группы животных

Показатели Контрольная Опытная, по срокам наблюдения, сутки

7 14 21

1. Концентрация селена, мкг/г:

- печень 0,068Ю,01 0,12310,03 0,15710,02 0,11110,02

-легкое 0,027±0,01 0,054Ю,01 0,12810,01 0,05910,02

- тонкий кишечник 0,03510,001 0,086Ю,01 0,131Ю,03 0,04410,01

- почка 0,02610,001 0,098Ю,02 0,11310,01 0,08710,02

- скелетная мышца 0,02510,001 0,07410,01 0,09110,03 0,05210,02

• мышца сердца 0,00710,001 0,07710,01 0,07410,01 0,06810,02

- головной мозг 0,036Ю,001 0,067+0,01 0,09710,01 0,043+0,003

2. Общий белок сыво- 7,5510,86 9,44Ю,37 10,4210,84 9,10Ю,88

ротки крови, г%

3. Альбумины, г% 2,08+0,61 2,6810,19 3,77+0,36 4,0910,32

4. Глобулины, г%:

а-глобулины 1,6210,25 2,3510,43 2,30+0,12 1,8710,18

(3-глобулины 1,9110,24 3,03210,18 2,93Ю,42 1,9810,45

у-глобулииы 0,8510,07 1,3910,11 1,4210,10 0,8010,11

5. Диеновые коньюгаты

сыворотки крови, 8,8113,31 5,1310,83 7,7011,57 3,73И,81

мкМоль/мл

Примечание: - Р < 0,05

ДАФС-25 вводился подкожно в растворе подсолнечного масла в дозе 0,2 мг/кг массы тела через день в течение трех недель.

Анализ данных, приведенных в таблице 5, показывает, что подкожное введение ДАФС-25 приводит к повышению в органах и тка-

нях селена в несколько раз по сравнению с животными, которым ДАФС-25 не вводился.

Так, уже через неделю концентрация селена в изученных органах и тканях повысилась в 1,8...4,5 раза. К 14 суткам насыщение тканей селеном продолжается и его уровень превосходит исходный в 2,3...4,7 раза. Спустя три недели средняя концентрация селена в организме превосходит аналогичный показатель контрольных животных в 2 раза.

При гипоселеновом элементозе ДАФС-25 оказывает положительное влияние на белковый обмен. Концентрация общего белка в сыворотке крови контрольных животных составляет 7,55+0,86 г%. Это нижняя граница физиологической нормы для данного вида животных и является характерным при скрытой форме селеновой недостаточности. После введения ДАФС-25 концентрация общего белка в сыворотке крови белых крыс к 7, 14 и 21 суткам наблюдений повысилась на 25, 38 и 20 % соответственно. Повышение концентрации в сыворотке крови общего белка сопровождается повышением концентрации альбуминов и глобулинов. Это свидетельствует о том, что ДАФС-25 оказывает положительное влияние на белковый обмен.

О селективном влиянии ДАФС-25 на белково-синтетическую функцию печени свидетельствует наличие корреляционной взаимосвязи между концентрацией селена в печени и концентрацией общего белка в сыворотке крови.

ДАФС-25 нормализует антиоксидантную систему защиты организма. Это выражается в ингибировании перекисного окисления липидов. Об этом свидетельствует снижение в сыворотке крови белых крыс диеновых коньюгатов после введения ДАФС-25 к 21 суткам в 2,36 раза.

Таким образом, в опытах на белых «рысах, имеющих скрытую форму селеновой недостаточности, установлено, что селенорганиче-ский препарат ДАФС-25 при подкожном введении в дозе 0,2 мг/кг массы тела в течение трех недель устраняет скрытую форму гипосе-ленового элементоза.

3.4.3. Влияние ДАФС-25 на биологическую обеспеченность организма овец селеном при гипоселеновом элементозе

Нами проведены комплексные исследования почвы и растений, используемых на корм животным.

Анализ полученных данных показывает, что почва и растения характеризуются низким содержанием селена. В исследованных образцах почвы концентрация селена составляет 0,016-0,027 мкг/г, что су-

щественно ниже крайних значений оптимального уровня 0,08-0,20 мг/кг. И, как следствие, растения, растущие на этих почвах характеризуются низким содержанием в них микроэлемента (0,048-0,067 мкг/г).

У животных, выпасаемых на пастбищах с низким содержанием селена в почве и растениях, выявлена недостаточная биологическая обеспеченность организма овец селеном. Так, концентрация микроэлемента в сыворотке крови овцематок составляет 0,025 мкг/г, в шерсти — 0,062 мкг/г, а в сыворотке крови баранчиков 0,036 мкг/г. Эти показатели свидетельствуют о наличии у овцематок и их потомства скрытой формы селеновой недостаточности, т.е. гипоселенового эле-ментоза. По данным литературы содержание селена в почве менее 0,05 мг/кг, в корме менее 0,06 мг/кг, а в сыворотке крови жвачных животных менее 0,05 мг/кг следует рассматривать недостаточным.

Эти данные явились основанием для назначения животным се-ленорганического препарата ДАФС-25 с целью устранения выявленной селеновой недостаточности у овцематок и их потомства, баранчиков в период откорма. ДАФС-25 вводился подкожно овцематкам однократно, а баранчикам троекратно с интервалом в 25 дней в дозах 0,1 и 0,2 мг/кг массы тела. Контрольным животным ДАФС-25 не вводился.

В результате проведенных исследований установлено, что после однократной подкожной инъекции овцематкам селенорганического препарата ДАФС-25 в дозах 0,1 и 0,2 мг/кг живой массы концентрация селена в сыворотке крови и шерсти через 25 суток повысилась до 0,058±0,001 мг/л и 0,070±0,002 мг/кг соответственно, что является физиологической нормой для этого вида животных.

В опытах на баранчиках получены следующие результаты. У животных перовой опытной группы, которым ДАФС-25 вводился в дозе 0,1 мг/кг массы тела, концентрация селена в сыворотке крови составила 0,066±0,002 мг/л. У животных второй опытной группы -0,073±0,001 мг/л (доза ДАФС-25 0,2 мг/кг). У животных контрольной группы на данный период наблюдения концентрация селена в сыворотке крови составляла 0,037±0,002 мг/л, т.е. она находилась ниже уровня физиологической нормы. Баранчики первой и второй опытных групп опережали животных контрольной группы по привесу живой массы на 12,4 % и 3,2 % соответственно.

Таким образом, результаты, полученные на овцематках и их потомстве, свидетельствуют о том, что селенорганический препарат ДАФС-25 оказывает лечебное действие на скрытую форму гипоселенового элементоза у овец.

3.5.4. Случай беломышечной болезни у телят

Анализ картины вскрытия и результатов гистоисследования позволяет сделать заключение, что наблюдаемые при беломышечной болезни изменения носят токсический характер.

Таким образом, в основе патологии беломышечной болезни лежат дистрофические и некротические процессы в сердечной и скелетной мускулатуре, сопровождающиеся распадом мышечных пучков с последующим фиброзом их. Специфическая регенерация выражена слабо или полностью отсутствует.

Развитие дистрофических и некротических процессов в сердце идет со стороны субэндо- и эпикардиальных зон миокарда и распространяется в дальнейшем на его глубокие слои. Прослеживается связь этих процессов с дистрофическими изменениями проводящих путей и интракардиальных ганглиев.

Изменения скелетной мускулатуры носят избирательный характер. В первую очередь поражаются мышечные группы, несущие повышенную физиологическую нагрузку.

Тяжелые поражения сердца при беломышечной болезни приводят к нарушению гемодинамики и развитию застойных и дистрофических процессов в органах грудной и брюшной полостей.

Поражение желудочно-кишечного тракта у телят 3-х месячного возраста носит обычно вторичный характер и выражается в развитии катарального воспаления.

Катаральная или катарально-гнойная пневмония, наблюдаемая нередко у телят, больных беломышечной болезнью, связана с секун-дарной микрофлорой и развитием иммунного дефицита у телят.

В центральной нервной системе, также как и в других органах, наблюдали застойные и дистрофические изменения.

Характер поражения органов при беломышечной болезни указывает на развивающуюся в организме телят токсемию, что подтверждается клинико-физиопогическими и биохимическими исследованиями, проведенными на других видах животных (белые мыши, белые крысы, овцы).

3.5. Концентрация селена в органах и тканях цыплят-бройлеров при скармливании рациона с ДАФС-25 и комплекса ДАФС-25 с флавомицином

Полученные результаты по изучению содержания и накопления селена в организме цыплят-бройлеров кросса "Смена" (АГ "Николаевская") приведены в таблице 6.

Таблица 6

Концентрация селена в органах и тканях бройлеров кросса "Смена" на 60 сутки, мкг/г

Группы птицы

Исследуемые органы 1 контрольная ОР 2 опытная ОР +ДАФС-25 3 опытная ОР +ДАФС-25 + флавомицин

Печень 0,2910,07 0,5±0,10*" 0,4410,13"

Почка 0,37+0,06 0,5710,05" 0,5910,07*

Селезенка 0,22+0,05 0,26+0,08* 0,3110,09*

Грудная мышца 0,09Ю,07 0,1110,04* 0,1310,04'

Легкое 0,08+0,04 0,14±0,04* 0,1410,02'

Стенка мышечного желудка 0,16±0,05 ОД 1 ±0,03' 0,2310,06'

Стенка железистого желудка 0,1210,05 0,1810,03* 0,1910,03'

Стенка тонкого кишечника 0,14+0,02 0,1410,03* 0,1910,04*

Мышца сердца 0,06+0,01 0,1710,05** 0,2210,04"*

Большой головной мозг 0,12+0,04 0,19±0,05* 0,1810,03*

Малый головной мозг 0,12±0,04 0,1410,03* 0,15Ю,02*

Цельная кровь 0,095+0,041 0,11 ±0,04" 0,1210,02"

Сыворотка 0,081±0,04 0,092±0,01* 0,0610,01"

Средняя концентрация 0,15±0,03 0,2810,04 0,2310,05

1 _

1 Примечание:- при Р < 0,01;при Р < 0,5; - при Р < 0,05

! Анализ полученных данных по содержанию селена в организме

I цыплят-бройлеров контрольной группы, исследованные ткани и ор-

ганы по степени убывания элемента располагаются в последовательности: почка> печень> селезенка> мышечный желудок> тонкий кишечник железистый желудок> головной мозг> цельная кровь>

I грудная мышца> сыворотка крови> легкое> мышца сердца.

, Наибольшее количество селена определяется в почках, печени и

селезенке (0,37; 0,29 и 0,22 мкг/г ткани соответственно). Наименьшее - в мышце сердца, грудной мышце, легких, в цельной крови и сыворотке (соответственно 0,06; 0,09; 0,08; 0,095; 0,081 мкг/г ткани).

При введении в рацион цыплят-бройлеров кросса "Смена" ДАФС-25 в дозе 1,6 мг/кг корма (вторая опытная группа) с флавомицином наблюдалось повышение концентрации селена в органах и тканях бройлеров.

Эти данные свидетельствуют о том, что накопление селена в большей степени происходит в тканях почек, печени, селезенки и желудочно-кишечного тракта.

Приведенные выше данные свидетельствуют о накоплении селена в органах и тканях у цыплят-бройлеров опытных групп при введении в рацион ДАФС-25 или в сочетании его с флавомицином.

19

I

:

I

Наибольшее количество микроэлемента отмечено в почке, печени, селезенке, а наименьшее в сыворотке крови.

3.6. Экономическая эффективность использования селенорганического препарата ДАФС-25 и комплекса препаратов ДАФС-25 с флавомицином при выращивании бройлеров кросса "Смена"

Экономическая эффективность использования селенорганического препарата ДАФС-25 и комплекса препаратов ДАФС-25 и флавомицина при выращивании бройлеров приведены в таблице 8, анализ которых позволяет отметить, что самая низкая себестоимость 1 кг прироста живой массы в 3-ей опытной группе. Затраты на получение 1 кг прироста были ниже по сравнению с контрольной на 4,05 руб. или на 11,9 %; со второй опытной группой соответственно на 1,32 руб. или на 4,2 %.

Таблица 8

Экономическая эффективность выращивания бройлеров кросса "Смена"

Показатели 1 контрольная 2 опытная ДАФС-25 3-я опытная ДАФС-25 + флавомицин

Поголовье цыплят бройлеров, гол. 1000 1000 1000

Выращено цыплят бройлеров, гол. 900 965 970

Падеж, % 10,0 3,5 3,0

Срок выращивания, дней 60 60 60

Живая масса, г 1988 2152 2246

Среднесуточный прирост 1 гол., г 33,14 35,86 37,43

Себестоимость 1 кг, руб 34,17 31,44 30,12

Реализационная цена 1 кг, руб. 42,0 42,0 42,0

Прибыль (+), Убыток (-) от реализации +7,83 +10,56 +11,88

1 кг, руб.

Рентабельность, % 22,9 33,6 39,4

Сумма прибыли в расчете на 1 кг реализованного мяса была максимальной в третьей опытной группе, превысив показатели контрольной на 52,3 %, второй опытной группы на 12,5 %. Уровень рентабельности производства мяса бройлеров составил в третьей опытной группе 39,4 %; во второй опытной -33,6 % и в первой контрольной он был равен 22,9 %.

Приведенные данные показывают, что более низкой экономическая эффективность была в первой контрольной группе бройлеров. Значительно выше она была во второй опытной группе, где использовался в рационе кормления препарат ДАФС-25 и самой высокой в

третьей опытной группе при применении в рационе кормления комплекса препаратов ДАФС-25 и флавомицина.

Таким образом, введение в рацион цыплят-бройлеров селенорга-нического препарата ДАФС-25 отдельно или в комплексе с флавоми-цином приводит к снижению себестоимости мясной продукции, повышению прибыли и рентабельности производства, что свидетельствует об экономической целесообразности использования данных препаратов в технологии выращивания цыплят-бройлеров.

4. ВЫВОДЫ

1. Изучены процессы поступления, динамика накопления и распределения селена в органах и тканях лабораторных, сельскохозяйственных животных и птицы при различных путях введения нового селенорганического препарата ДАФС-25 в организм животных. Установлено, что накопление селена в организме животных подчиняется общим закономерностям фармакокинетики ксенобиотиков. Выявлены периоды резорбции (накопления) селена в тканях, максимальной концентрации и элиминации. Временные характеристики этих показателей зависят от дозы, кратности и путей поступления ее в организм. Количество селена, определяемые в органах и тканях животных и птицы не превышают МДУ (1 мг/кг).

2. При подкожном введении белым крысам ДАФС-25 в физиологической дозе ОД мг/кг в течение трех недель с интервалом в одни сутки наблюдается повышение концентрации селена в изученных органах и тканях в 2,3-4,7 раза по сравнению с исходным уровнем. Наиболее высокие концентрации селена выявлены в тканях печени и почек, а низкие — в тканях головного мозга, сердечной и скелетной мышцах. Интенсивность накопления элемента в тканях в целом обратно пропорциональна исходной концентрации селена в данном органе. Период максимальной концентрации приходится на 7-14 сутки, а элиминации -14-21 сутки.

3. Внесение в рацион белых мышей различных доз ДАФС-25 (0,1; 0,2; 0,4 и 1,0 мг/кг корма) приводит к достоверному повышению концентрации селена в крови и тканях внутренних органов по сравнению с контролем. Установлено, что концентрация селена в тканях и динамика его накопления зависят от вводимой в рацион дозы ДАФС-25. Наиболее высокие концентрации селена в тканях обнаружены при внесении в рацион дозы 1,0 мг/кг корма, а наиболее низкие при внесении дозы 0,1 мг/кг корма. Наиболее высокие концентрации селена в тканях по сравнению с контролем (доза 0,1 мг/кг рациона) определялись только на 21 сутки опыта, тогда как при внесении в

рацион дозы 1,0 мг/кг корма достоверное повышение элемента в тканях внутренних органов наблюдается уже на 7-е сутки опыта.

4. Установлено, что при однократном подкожном введении овцам се-ленорганическош препарата ДАФС-25 максимальная концентрация селена в крови и сроки ее достижения зависят от величины вводимой дозы препарата. Наиболее интенсивное накопление селена в сыворотке крови происходит в течение первых 3-6 часов при введении дозы 1,0 мг/кг, а при введении доты 0,1 мг/кг мэссы тела в более поздние сроки. Максимальная концентрация селена в крови наблюдается в период 3-24 часов после введения ДАФС-25. Снижение концентрации селена в сыворотке крови овец после инъекции ДАФС-25 до. исходного уровня происходит относительно медленно и плавно. Процесс элиминации в количественном и качественном отношении зависит от введенной в организм дозы препарата. При введении дозы 0,1 мг/кг массы тела концентрация селена в крови приближается к исходному уровню к 6-10 (уткам после начала опыта, а при дозе 1,0 мг/кг массы тела в более отдаленные сроки.

5. Рассчитаны некоторые фармакокинетические параметры ДАФС-25 при его однократном подкожном введении овцам. Начальный объем распределения (Vo, л) составил 50,64±3,21; полная площадь под кривой (AUC, (мкг-ч)/мл) — 40,65+2,60; полная площадь под кривой зависимости произведения концешрации ДАФС-25 в крови на время от времени (AUMC, (мкг-ч^мл) - 6191,59163,48; клиренс (CL, л/час) -0,459210,0285; среднее время удержания препарата в организме (MRT, час) - 152,3117,7; среднее время распределения (MDT, час) - 50,0±3,4; среднее время элиминации (МЕТ, час) - 102,318,3.

6. Изучена биологическая обеспеченность организма животных селеном, выявлены скрытые формы гипоселеновых элементозов белых мышей, белых крыс, овцематок цигайской породы и их потомства, проведены патоморфологические исследования тканей внутренних органов, сердечной и скелетной мышц при беломышечной болезни теленка.

7. Изучено лечебное действие селенорганического препарата ДАФС-25 на скрытые формы гипоселеновых элементозов у белых мышей, белых крыс и овец цигайской породы. Показано, что нормализация наблюдаемых изменений в организме животных происходит в течение 2-3 недель.

8. Дозы ДАФС-25 0,2 мг/кг массы тела при подкожном введении и 0,2 мг/кг корма при добавлении препарата в рацион могут быть использованы для лечения и профилактики селеновой недостаточности у животных.

9. Включение в рацион цыплят-бройлеров селенорганического препарата ДАФС-25 и комплекса ДАФС-25 с флавомицином приводит к повышению концентрации селена во всех органах и тканях птицы. Наибольшее количество селена определяется в почках, печени и селезенке (0,37; 0,29 и 0,22 мкг/г ткани соответственно). Наименьшее - в мышце сердца, грудной мышце, легких, в цельной крови и сыворотке (соответственно 0,06; 0,09; 0,08; 0,095 и 0,081 мкг/г ткани). Ткани желудка, кишечника и мозга по содержанию селена занимают среднее положение (0,16-0,12 мкг/г ткани).

10. Установлено, что скармливание цыплятам-бройлерам кросса "Смена" селенорганического препарата ДАФС-25 отдельно и в комплексе с флавомицином приводит к снижению себестоимости мясной продукции, повышению прибыли и рентабельности производства, что свидетельствует об экономической целесообразности использования данных препаратов в технологии выращивания птицы.

5. РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ПРАКТИКИ

1. На основании анализа и обобщения экспериментальных данных, апробации их в производственных условиях для нормализации обменных процессов и повышения продуктивности цыплят-бройлеров предлагаем использовать селенорганический препарат ДАФС-25 в дозе 1,6 мг/кг корма и комплекс препаратов ДАФС-25 (1,6 мг/кг корма) и флавомицин в дозе 37,5 мг/кг корма.

2. Полученные экспериментальные данные о характере поведения ДАФС-25 в организме животных и птицы могут быть использованы в качестве справочного материала в научных исследованиях при обосновании доз и технологии применения препарата в ветеринарии и животноводстве, а так же в учебном процессе при подготовке ветеринарных врачей и зооинженеров.

3. Для лечения и профилактики селеновой недостаточности у животных предлагается доза ДАФС-25 0,2 мг/кг корма при добавлении препарата в рацион ежедневно в течение двух недель и 0,2 мг/кг массы тела при подкожном введении его через день.

РАБОТЫ ОПУБЛИКОВАННЫЕ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Кутепов А.Ю., Смирнов М.И. Содержание селена в печени белых крыс при подкожном введении селенорганического препарата ДАФС-25 // "Актуальные проблемы зооинженерии и биотехнологии", тез. докл. конф. студентов, молодых ученых и аспирантов биотехнологического факультета. Саратов: СГАВМиБ, 1997. С. 49-51.

2. Смирнов МЛ, Родионова Т.Н., Васильев В.Ю., Шумарева Т.Ю., Куте-пов А.Ю. и др. Влияние селенорганического препарата ДАФС-25 на антиоксидантную обеспеченность организма и развитие сельскохозяйственной птицы // "Экология, здоровье и природопользование", тезисы докладов российской научно-практической конференции, посвященной 200-летию Саратовской губернии. Саратов: Иад-во СГСХА им. RH. Вавилова, 1997. С. 132-133.

3. Кутепов AJO., Смирнов МЛ Содержание селена в органах белых крыс при подкожном введении ДАФС-25 // "Актуальные проблемы зооипженерии и биотехнологии", тезисы докладов науч. конф. студентов, молодых ученых и аспиранте® биотехнологического факультета. Саратов: СГАВМиБ, 1998. С. 27-28.

4. Смирне» МЛ, Воробьев В Л, Кутепов А.Ю., Шумарева Т.Ю. Биогеохимия селена в наземных экосистемах // Актуальные проблемы среды и организма животных: Сб. науч. трудов. Саратов, 1998. С. 57-63.

5. Загреков A.A., Кутепов AJO. Биохимия селена и продуктивность овец // Аюуальные проблемы зооинженерии и биотехнологии", тезисы докладе® науч. конф. студентов, молодых ученых и аспирантов биотехнологического факультета. Саратов: СГАВМиБ, 1998. С. 20-22.

6. Смирнов МЛ, Кутепов А.Ю., Шумарева Т.Ю., Загреков АА. Механизмы биологических эффектов селенорганичского препарата ДАФС-25 // Сборник научных трудов. Изд-во СГУ им. Н.Г. Чернышевского, 1998. С. 177-178.

7. Некоторые вопросы механизма физиологического действия селена / Смирнов МЛ, Воробьев В.И., Кутепов А.Ю., Шумарева Т.Ю. //XIII съезд физиологов России: Тезисы докладов. Ростов-на-Дону, 1998. С. 503.

8. Биология селена в наземных экосистемах и коррекция селеновой недостаточности у жь^отных / Смирнов М.И., Воробьев В.И., Загреков A.A., Кутепов, А.Ю., Шумарева Т.Ю. / "Международная научно-производственная конференция. Экологические аспекты эпизоотологии и патологии животных" // Тезисы докладов. Воронеж, 1999. С. 393-394.

9. Влияние ДАФС-25 на антиоксидантную систему и продуктивность сельскохозяйственных животных / Смирнов МЛ, Воробьев В.И., Кутепов, А.Ю., Шумарева Т.Ю. // "Актуальные проблемы ветеринарной науки". Тезисы докладов. М.: МГАВМиБ им. К.И. Скрябина, 1999. С. 234-235.

10. Кутепов А.Ю., Смирнов МЛ Оценка фармакокинетики ДАФС-25 методом статистических моментов. /Материалы научно-практической конференции института ветеринарной медицины и биотехнологии, I вып., Саратов, 2000, С. 56-58.

11. Смирнов МЛ, Воробьев ВЛ, Кутепов А.Ю., Шумарева Т.Ю., Шарапов A.A. Влияние ДАФС-25 на антиоксидантную систему и продуктивность овец // Третья международная конференция. "Актуальные проблемы биологии в животноводстве", Тезисы докладов, Боровск, 2000. С. 342-343.

12. Кутепов А.Ю., Смирнов М.И. Фармакокинетика ДАФС-25 // Материалы научно-практической конференции института ветеринарной медицины и биотехнологии, П выпуск, Саратов, 2001, С. 10-11.

13. Кутепов А.Ю., Смирнов МЛ Видовые особенности фармакокинетики ДАФС-25 // Материалы научно-практической конференции института ветеринарной медицины и биотехнологии, Ш выпуск, Саратов, 2002, С. 109-111.

Подписано в печать 29.05.2003. Формат 60x84'/и Печ. л. 1,0. Тираж 100. Заказ 296/327

Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Саратовский государственный аграрный университет им. Н.И. Вавилова» 410600, Саратов, Театральная пл., 1.

и

«81154 1

 
 

Оглавление диссертации Кутепов, Алексей Юрьевич :: 2003 :: Саратов

1. Введение.

2. Обзор литературы.

2.1. Природные и антропогенные источники содержания селена. Селен в кормовой и пищевой цепи.

2.2. Содержание селена в растениях и кормах.

2.3. Распределение и превращения селена в организме животных.

2.4. Использование добавок селена с целью стимуляции роста и повышения продуктивности животных и птицы.

2.5. Болезни селеновой недостаточности, лечение и профилактика.

3. Собственные исследования.

3.1. Материал и методика исследований.

3.2. Динамика накопления селена в органах и тканях лабораторных животных при подкожном введении ДАФС-25.

3.3. Содержание селена в органах и тканях лабораторных животных при введении ДАФС-25 в рацион.

3.4. Фармакокинетика селеноорганического препарата ДАФС-25. ф 3.5. Селеновая недостаточность у животных и лечебное действие ДАФС-25.

4. Результаты научно-хозяйственного опыта по применению ДАФС-25 и комплекса препаратов ДАФС-25 и флавомицина на птицеводческих предприятиях Саратовской области.

4.1. Концентрация селена в органах и тканях бройлеров при скармливании рациона с ДАФС-25 и комплекса ДАФСс флавомицином.

4.2. Экономическая эффективность использования ДАФСи комплекса ДАФС-25 с флавомицином при выращивании бройлеров.

 
 

Введение диссертации по теме "Диагностика болезней и терапия животных", Кутепов, Алексей Юрьевич, автореферат

Актуальность проблемы. Для нормальной жизнедеятельности организма, кроме органических веществ - белков, жиров и углеводов, большое значение имеют неорганические вещества - вода и минеральные соли. Хотя они не служат энергетическим материалом, но имеют большое физиологическое значение, так как принимают активное участие во всех биохимических процессах, происходящих в организме животного.

Минеральные вещества входят в состав всех органов и тканей организма и играют важную роль в процессах обмена. Для нормального роста и развития организм должен получать с кормом достаточное количество минеральных веществ, в том числе микроэлементов. Последние влияют на рост и развитие животных, повышение их продуктивности, плодовитости и устойчивости к различным заболеваниям (Беренштейн Ф.Я., 1961; Бабин Я.А., 1965, 1967; Ковальский В.В., 1967; Георгиевский В.И., Анненков П.Т., Самохин В.Т., 1979).

Микроэлементы неравномерно распределены во внешней среде. Обширная нечерноземная зона (от Балтики до Тихого океана) по данным литературы характеризуется недостатком в почвах, растениях и животных организмах микроэлементов, в том числе селена. Установлено, что поступление в организм с кормом микроэлементов, даже в условиях Центрально-Черноземных областей обеспечивает лишь на 30-70 % потребность в них (Самохин В.Т., 1992; Самохин В.Т., Шулебин В.И.,1999).

Одним из наиболее дефицитных микроэлементов, играющим в организме весьма важную биологическую роль, является селен, обеспечивающий активность многих окислительно-восстановительных ферментов, витаминов, антиоксидантной системы организма (Рецкий М.И., 1996).

Потребность различных сельскохозяйственных животных в селене составляет 0,06 -0,1 мг/кг сухого вещества корма (Кудрявцев А.П., 1979).

К числу обусловленных дефицитом заболеваний, в которых может играть определенную роль селен, относятся алиментарная мышечная дистрофия у овец и коров, экссудативный диатез у цыплят и некроз печени у свиней и крыс. Признаки специфичные для дефицита селена в отсутствие витамина Е, включают дегенерацию поджелудочной железы у цыплят, а также плохой рост, репродуктивную недостаточность, сосудистые изменения и катаракты у крыс (Специальная исследовательская группа МОТ и ВОЗ по селену. Женева. 1989).

В Поволжье применение препаратов селена в различных сельхозпредприятиях Саратовской области, приобретает системный характер и с каждым годом расширяется. Это объясняется дефицитом селена в окружающей среде и как следствие недостаточной биологической обеспеченностью организма данным микроэлементом (Воробьев В.И., Смирнов М.И., 1997, 1998).

Полезность применения селенистых препаратов в рационах сельскохозяйственных животных и птицы обусловлена их высокой биологической активностью. Поэтому, возникает необходимость более тщательного контроля и научного обоснования применения препаратов селена в животноводстве и птицеводстве в каждом конкретном хозяйстве с учетом природного распространения селена в окружающей среде (почве, воде, растениях, кормах).

Однако, до сих пор не в полной мере дано научное обоснование использования тех или иных доз селена в зависимости от возраста, пола, уровня продуктивности сельскохозяйственных животных. Недостаточно изучены биохимические механизмы адаптации их организма к экзогенному селену и степень накопления его в тканях животных (Смирнов М.И., 1997).

У цыплят-бройлеров в определенный период развития, обычно в возрасте 4-6 недель, наблюдаются массовые случаи функциональных нарушений, замедляется рост, увеличивается падеж (Силаев М.П.; Волощик С.В. и др., 1985). В этот критический момент происходит перестройка обмена веществ в организме птицы. Применение биологически активных селенсодержащих препаратов в этот период в качестве стабилизирующего фактора может оказаться весьма эффективным, лечебным и профилактическим мероприятием.

Селен присутствует в активном центре фермента глутатион пероксидазы, участвующего в разрушении токсических липоперекисных соединений и способствующего стабилизации мембран и внутриклеточных структур. Антиоксидантная активность селена в 500-1000 раз превышает активность а- токоферола (Hamilton J. et al., 1963; Гробовский A.M., 1970).

Известно, что биодоступность многих микроэлементов выше, если они £ находятся в составе органических соединений (Кальницкий Б.Д., 1980).

Поэтому обоснованным является создание для животноводства новых селенорганических препаратов, обладающих высокой и полезной физиологической активностью. В НИИ химии СГУ им. Н.Г.Чернышевского, доктором химических наук Б.И.Древко синтезирован и внедряется в производство селенорганический препарат ДАФС-25, содержащий 25% органически связанного селена (Патент РФ 2051681). Производство • препарата налажено в ЗАО "Сульфат" г. Саратова.

В тоже время многие вопросы биологического действия ДАФС-25 на организм животных изучены недостаточно. В частности, для широкого применения ДАФС-25 в животноводстве крайне необходимы сведения о количественном распределении и накоплении селена в органах и тканях сельскохозяйственных животных для оценки экологически безопасных продуктов животноводства, используемых в питании человека.

Цель и задачи работы. Целью исследований явилось изучение поступления, динамики накопления и распределения селена в органах и тканях лабораторных, сельскохозяйственных животных и птицы при различных путях введения ДАФС-25 в организм животных и оценка его лечебного действия при гипоселеновых элементозах.

В связи с этим были поставлены следующие задачи.

1. Изучить динамику накопления селена в органах и тканях лабораторных животных при подкожном введении селенорганического препарата ДАФС - 25.

2. Определить содержание селена в органах и тканях лабораторных животных при введении различных доз ДАФС - 25 в рацион.

3. Провести фармакокинетическое исследование ДАФС-25, определить некоторые фармакокинетические показатели данного препарата методом статистических моментов и оценить дозы ДАФС-25 для лечения и профилактики селенового гипоэлементоза у животных.

4. Изучить биологическую обеспеченность организма животных селеном с целью диагностики гипоселеновых элементозов и оценить лечебно-профилактическое действие ДАФС-25.

5. Оценить патоморфологические изменения, наблюдаемые у телят больных беломышечной болезнью.

6. Определить концентрацию селена в органах и тканях цыплят-бройлеров при скармливании рационов, содержащих ДАФС-25 и комплекса ДАФС-25 с флавомицином.

7. Оценить физиологическую целесообразность и экономическую эффективность использования препарата ДАФС-25 в кормлении цыплят-бройлеров.

Научная новизна. Научная новизна и теоретическое значение работы состоит в том, что она является первым интегрирующим исследованием в проблеме физиологического и экологического нормирования селена в производстве продукции животноводства в условиях широкого применения селенорганического препарата ДАФС-25. Впервые изучено распределение и динамика накопления селена в органах и тканях лабораторных, сельскохозяйственных животных и птицы при различных путях поступления препарата в организм. В производственных экспериментах на цыплятах-бройлерах изучено влияние ДАФС-25 и комплекса препаратов ДАФС-25 и флавомицина на уровень концентрации селена в органах и тканях и их влияние на обменные процессы, прирост, продуктивность, сохранность поголовья и кормовые затраты. Впервые проведено фармакокинетическое исследование ДАФС-25 методом статистических моментов и проведена теоретическая интерпретация полученных результатов, применительно к обоснованию нормирования доз ДАФС-25 для животных и птицы.

Впервые изучена биологическая обеспеченность организма животных и сельскохозяйственной птицы в Саратовском регионе Поволжья, проведена диагностика и выявлены скрытые формы селеновой недостаточности у лабораторных животных, овец цигайской породы и их потомства. Оценено лечебно-профилактическое действие селенорганического препарата ДАФС-25 при гипоселеновых элементозах.

Практическая значимость работы. Полученные в работе экспериментальные данные использованы в качестве базовых показателей при обосновании применения в практическом животноводстве и птицеводстве оригинального селенорганического препарата ДАФС-25, при разработке нормативной документации по его применению и контролю, схемы использования и дозы, которые регламентированы наставлением по применению, утвержденным Департаментом ветеринарии Министерства сельского хозяйства РФ. Проведенные фармакокинетические исследования и данные полученные на лабораторных и сельскохозяйственных животных по количественному содержанию селена в тканях организма обосновывают возможность широкого и безопасного использования ДАФС-25 в животноводстве и птицеводстве в интересах получения экологически безопасных продуктов питания для населения и профилактики селендефицитных состояний у сельскохозяйственных животных и птицы.

Апробация работы. Основные материалы исследований были доложены на научно-практической конференции молодых ученых и аспирантов в апреле 1998 года СГАВМиБ; на XVII съезде физиологов России в октябре 1998 года; научной конференции профессорско-преподавательского состава в феврале 1999 года СГАУ им. Н.И. Вавилова; на научной конференции профессорско-преподавательского состава и аспирантов СГАУ им. Н.И. Вавилова по итогам года в феврале 2000, 2002 и 2003 гг.

Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 13 печатных работ, в которых отражены основные результаты научных исследований по теме диссертации.

Основные положения выносимые на защиту: динамика накопления селена в органах и тканях лабораторных животных при подкожном введении ДАФС - 25; показатели количественного накопления селена в органах и тканях лабораторных животных в зависимости от доз в рационе ДАФС-25; фармакокинетические характеристики селенорганического препарата ДАФС-25 и его дозы для лечения и профилактики селеновой недостаточности у животных; материалы по оценке эффективности лечебного и профилактического действия ДАФС-25 при скрытых формах селеновой недостаточности у лабораторных и сельскохозяйственных животных; материалы по уровню концентраций селена в органах и тканях цыплят-бройлеров при скармливании рациона с ДАФС-25 и комплекса ДАФС-25 с флавомицином, а также о физиологической целесообразности и экономической эффективности использования этих препаратов.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

 
 

Заключение диссертационного исследования на тему "Аккумуляция ДАФС-25 и его лечебное действие при гипоселеновых элементозах животных"

6. Выводы

1. Изучены процессы поступления, динамика накопления и распределения селена в органах и тканях лабораторных, сельскохозяйственных животных и птицы при различных путях введения нового селенорганического препарата ДАФС-25 в организм животных. Установлено, что накопление селена в организме животных подчиняется общим закономерностям фармакокинетики ксенобиотиков. Выявлены периоды резорбции (накопления) селена в тканях, максимальной концентрации и элиминации. Временные характеристики этих показателей зависят от дозы, кратности и путей поступления ее в организм. Количество селена, определяемые в органах и тканях животных и птицы не превышают МДУ (1 мг/кг).

2. При подкожном введении белым крысам ДАФС-25 в физиологической дозе 0,2 мг/кг в течение трех недель с интервалом в одни сутки наблюдается повышение концентрации селена в изученных органах и тканях в 2,3-4,7 раза по сравнению с исходным уровнем. Наиболее высокие концентрации селена выявлены в тканях печени и почек, а низкие - в тканях головного мозга, сердечной и скелетной мышцах. Интенсивность накопления элемента в тканях в целом обратно пропорциональна исходной концентрации селена в данном органе. Период максимальной концентрации приходится на 7-14 сутки, а элиминации - 14-21 сутки.

3. Внесение в рацион белых мышей различных доз ДАФС-25 (0,1; 0,2; 0,4 и 1,0 мг/кг корма) приводит к достоверному повышению концентрации селена в крови и тканях внутренних органов по сравнению с контролем. Установлено, что концентрация селена в тканях и динамика его накопления зависят от вводимой в рацион дозы ДАФС-25. Наиболее высокие концентрации селена в тканях обнаружены при внесении в рацион дозы 1,0 мг/кг корма, а наиболее низкие при внесении дозы 0,1 мг/кг корма. Наиболее высокие концентрации селена в тканях по сравнению с контролем (доза 0,1 мг/кг рациона) определялись только на 21 сутки опыта, тогда как при внесении в рацион дозы 1,0 мг/кг корма достоверное повышение элемента в тканях внутренних органов наблюдается уже на 7-е сутки опыта.

4. Установлено, что при однократном подкожном введении овцам селенорганического препарата ДАФС-25 максимальная концентрация селена в крови и сроки ее достижения зависят от величины вводимой дозы препарата. Наиболее интенсивное накопление селена в сыворотке крови происходит в течение первых 3-6 часов при введении дозы 1,0 мг/кг, а при введении дозы 0,1 мг/кг массы тела в более поздние сроки. Максимальная концентрация селена в крови наблюдается в период 3-24 часов после введения ДАФС-25. Снижение концентрации селена в сыворотке крови овец после инъекции ДАФС-25 до исходного уровня происходит относительно медленно и плавно. Процесс элиминации в количественном и качественном отношении зависит от введенной в организм дозы препарата. При введении дозы 0,1 мг/кг массы тела концентрация селена в крови приближается к исходному уровню к 6-10 суткам после начала опыта, а при дозе 1,0 мг/кг массы тела в более отдаленные сроки.

5. Рассчитаны некоторые фармакокинетические параметры ДАФС-25 при его однократном подкожном введении овцам. Начальный объем распределения (V0, л) составил 50,64±3,21; полная площадь под кривой (AUC, (мкг-ч)/мл) - 40,65±2,60; полная площадь под кривой зависимости произведения концентрации ДАФС-25 в крови на время от времени (AUMC, (мкг-ч2)/мл) - 6191,59±63,48; клиренс (CL, л/час) - 0,4592±0,0285; среднее время удержания препарата в организме (MRT, час) - 152,3+17,7; среднее время распределения (MDT, час) - 50,0±3,4; среднее время элиминации (МЕТ, час) - 102,3±8,3.

6. Изучена биологическая обеспеченность организма животных селеном, выявлены скрытые формы гипоселеновых элементозов белых мышей, белых крыс, овцематок цигайской породы и их потомства, проведены патоморфологические исследования тканей внутренних органов, сердечной и скелетной мышц при беломышечной болезни теленка.

7. Изучено лечебное действие селенорганического препарата ДАФС-25 на скрытые формы гипоселеновых элементозов у белых мышей, белых крыс и овец цигайской породы. Показано, что нормализация наблюдаемых изменений в организме животных происходит в течение 2-3 недель.

8. Дозы ДАФС-25 0,2 мг/кг массы тела при подкожном введении и 0,2 мг/кг корма при добавлении препарата в рацион могут быть использованы для лечения и профилактики селеновой недостаточности у животных.

9. Включение в рацион цыплят-бройлеров селенорганического препарата ДАФС-25 и комплекса ДАФС-25 с флавомицином приводит к повышению концентрации селена во всех органах и тканях птицы. Наибольшее количество селена определяется в почках, печени и селезенке (0,37; 0,29 и 0,22 мкг/г ткани соответственно). Наименьшее - в мышце сердца, грудной мышце, легких, в цельной крови и сыворотке (соответственно 0,06; 0,09; 0,08; 0,095 и 0,081 мкг/г ткани). Ткани желудка, кишечника и мозга по содержанию селена занимают среднее положение (0,16-0,12 мкг/г ткани).

10. Установлено, что скармливание цыплятам-бройлерам кросса "Смена" и "Изаведетта" селенорганического препарата ДАФС-25 отдельно и в комплексе с флавомицином приводит к снижению себестоимости мясной продукции, повышению прибыли и рентабельности производства, что свидетельствует об экономической целесообразности использования данных препаратов в технологии выращивания птицы.

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ПРАКТИКИ

1. На основании анализа и обобщения экспериментальных данных, апробации их в производственных условиях для нормализации обменных процессов и повышения продуктивности цыплят-бройлеров предлагаем использовать селенорганический препарат ДАФС-25 в дозе 1,6 мг/кг корма и комплекс препаратов ДАФС-25 (1,6 мг/кг корма) и флавомицин в дозе 37,5 мг/кг корма.

2. Полученные экспериментальные данные о характере поведения ДАФС-25 в организме животных и птицы могут быть использованы в качестве справочного материала в научных исследованиях при обосновании доз и технологии применения препарата в ветеринарии и животноводстве, а так же в учебном процессе при подготовке ветеринарных врачей и зооинженеров.

3. Для лечения и профилактики селеновой недостаточности у животных предлагается доза ДАФС-25 0,2 мг/кг корма при добавлении препарата в рацион ежедневно в течение двух недель и 0,2 мг/кг массы тела при подкожном введении его через день.

 
 

Список использованной литературы по ветеринарии, диссертация 2003 года, Кутепов, Алексей Юрьевич

1. Абдуллаев Г.Б. Роль селена в защитно приспособительных реакциях организма // Материалы по биохимии витамина Е и селена и их применение в медицине и животноводстве. - Киев: Наукова думка, 1973. -С. 4-5.

2. Абдуллаев Г.Б., Эфендиев З.И., Сафаров Ю.И. и др. Изучение обмена селена при различных гематологических заболеваниях // Селен в биологии.-Баку, 1974г. -т.1. С. 119-121.

3. Абдуллаев Г.Б., Гаджиева Н.А., Гасанов Г.Г. и др. Селен и зрение. Баку: Элм, 1972. -С. 51.

4. Абдуллаев Г.Б., Мамедов Ш.В., Джафаров А.И. и др. О возможной регуляции свободнорадикального состояния сетчатки глаза соединениями селена // Селен в биологии. Баку, 1974 б. - т. 1. - С. 54-57.

5. Абрамов В.Ф. Химия в сельском хозяйстве. № 5. 1967. С. 46.

6. Алешко С.Ф. Применение селена для повышения привесов и сохранности телят в условиях Белоруссии // Химия в сельском хозяйстве.- 1971.- т. 9 .-№ 12 .- С.54-55.

7. Андреев М.Н., Минина Л.А., Бронникова К.А. Оптимальные, токсические и летальные дозы селенита натрия для кур и цыплят

8. Труды Читинской опытной и научно-исследовательской станции. Чита, 1969.-т. П.-С. 318.

9. Антонов Б.И., Федотова В.И., Сухая Н.А. Лабораторные исследования в ветеринарии : химико-токсикологические методы. М.: Агропромиздат, 1989. - с. 274-277.

10. Ю.Атлавина А.Б., Апсите М.Р., Свилане А.Б., Мосулишвили Л.М. Усвоение пищевых веществ в организме животных // Эффективность действия селена на метаболизм микроэлементов и активность некоторых ферментов у растущих цыплят.—Рига : Зинатне, 1977.—С. 25-33.

11. Ахмедов Н.М., Керимов Т.А. Влияние селена на продуктивность, воспроизводительную способность и эмбриональное развитие кур в уловиях Ап-шерона // Селен в биологии : Материалы П-й научной конференции. Баку: Элм, 1976. - С. 80-81, 82-84.

12. Бабин Я.А. Микроэлементы. //Материалы II конференции по обмену опытом работы с микроэлементами. Саратов. 1967. 156 с.

13. Бакиров М.Я., Халилов З.М., Ализаде З.М. Влияние селена на изменение гематологических показателей и ферментативную активность крови и продуктивность кур // Селен в биологии: Материалы П-й научн. конф. -Баку : Элм, 1978. С. 80-81.

14. Беренштейн Ф.Я. Микроэлементы мощный фактор регуляции обмена веществ в организме животных. //Материалы Всесоюзной конференции по биохимии с.-х. животных. -М., 1961.-Вып. 1.-С. 17-18.

15. Блинохватов А.Ф., Крюков A.M., Брендин Н.В., Влияние селенопирана на биохимические показатели крови кур в условиях стресса // Тез. докл. молодых ученых.— Пенза 1998.—С. 31-32.

16. Борисова JI.M. Биологическое действие селена на организм кур //Бюллетень Всесоюзного института экспериментальной ветеринарии. -М., 1970. Вып.VII. - с. 90.

17. П.Борисова J1.M. Влияние селена и витамина Е на морфологические и биохимические показатели крови у кур и их связь с дистрофией печени.: Ав-торф. дис. канд. биол. наук. М., 1969. -с. 19.

18. Бронникова К.А., Минина JI.A., Попрыгаева Д.Н. и др. Приготовление премиксов с добавками селенита натрия и введение их в комбикорма для кур// Биологическая роль и практическое применение микроэлементов. -Рига.: Зинатне, 1975.- с. 2.

19. Бурьянова Е.З. Селеноностность осадочных пород Тувы. Геохимия, 7. 1961.

20. Вальдман А.Р. Витамины в животноводстве. Рига : Занатне, 1977.

21. Васильева Е.А. Клиническая биохимия сельскохозяйственных животных. М.: Россельхозиздат, 1982.- С. 236-237.

22. Войнар А.И. Биологическая роль микроэлементов в организме животных и человека. М.: Высшая Школа, 1960.—С. 426-434.

23. Георгиевский В.И. Значение ультрамикроэлементов (мышьяка, ванадия, селена) в питании сельскохозяйственной птицы : Итоги науки: Сер. Биология (Животноводство и ветеринария). М.: ВИНИТИ, 1972.- С. 5-34.

24. Георгиевский В.И., Аюпов Ф.Г. Распределение радиоактивного селена в органах и тканях цыплят-бройлеров //Материалы III научн. конф.: Использование радиоизотопов и ионизированных излучений в ветеринарии и животноводстве.-М., 1973.-ч. 1.-С. 104,105.

25. Георгиевский В.И., Метревели Т.В. Периодизация внесения селенитовых добавок в рацион бройлеров и их влияние на метаболизм // Актуальные вопросы обмена веществ: Сб. : Вильнюс, 1987. т. 3 .-С. 74.

26. Геогиевский В.И.,Анненков В.Н., Самохин В.П. Минеральное питание животных. М.: Колос, 1979. с. 224, 226, 227, 228.

27. Гидранович В.И. Влияние селена на углеводно-фосфорный обмен у животных и некоторые данные о его роли при беломышечной болезни. Авто-реф. канд. дисс. Витебск, 1966.

28. Головина И.В. Новый селенорганический препарат ДАФС-25 в ветеринарии. Автореф. канд. дис, Воронеж, 1999.

29. Гусейнов Т.М., Джафаров А.И., Перелыгин В.В., Караев М.О. О локализации эндогенного селена в структурных элементах глаза быка // Селен в биологии Баку, 1974.- т.1.- С.47-49.

30. Гюльахмедов А.Н., Дильбази Г.И., Халилова Х.А. Содержание селена в кормах и почвах хозяйств неблагополучных и благополучных по беломышечной болезни буйволят :- В сб.: Селен в биологии ( материалы научн. конф.). Баку : Элм, 1974.- С.148-151.

31. Девеча И.А., Клименюк М.А., Влияние на антиоксидантные свойства тканей бройлеров и их продуктивность // Научн. тр. УСХА.- Киев, 1982.-С.22.

32. Девеча И.А. Влияние добавок селена на обмен веществ и продуктивность ^ мясных цыплят.: Автореф. дисс. канд. биол. наук.- Боровск, 1984.- С.8-10.

33. Ермаков В.В. Труды Всесоюзного института экспериментальной ветеринарии, 1964.-С.30,220.

34. Ермаков В.В. Флуориметрическое и газохроматографическое определение селена в биологических материалах / Витамины. Вып. VIII. Биохимия витамина Е и селена.- Киев, 1975.- С. 142-146.

35. ЕрмаковВ.В., Бронников И.С., Записки Забайкальского отдела Всесоюз-^ ного географического общества СССР. Чита, 1962.- Вып. 18.- С.86.

36. Ермаков В.В., Ковальский В.В. Биологическое значение селена. -М.: Наука, 1974.- С.-23-26.

37. Ермаков В.В., Ковальский В.В. Геохимическая экология организмов при высоких уровнях селена в окружающей среде. //Тр. Биогеохимической лаборатории АН СССР.- М.- Л., 1968.- Т.12.- С.204-237.

38. Итоги науки и техники. Фармакология. Химиотерапевтические средства // Проблемы фармакокинетики.—М.—1981. Т. 14, 464 с.

39. Карелина Л.В., Салмане Р.Э. Физиологически активные компоненты питания животных. Рига, 1969.-С. 141.

40. Каркищенко Н.Н., Хоронько В.В. //Основы клинической фармакологии. Фармакокинетика. — Ростов-на-Дону., 1981.

41. Ковальский В.В. Геохимическая экология. Очерки М.: Наука, 1974.-299с.

42. Ковальский В.В, Ермаков В.В. Вопросы экстремальной геохимической экологии животных в условиях селеновых провинций и некоторые подходы к изучению биологической роли селена // Витамины. Вып. VIII. Биохимия витамина Е и селена // Киев, 1975.- С. 80-87.

43. Кудрявцев А.П. Профилактика селеновой недостаточности у животных и птицы. М.: Россельхозиздат, 1979.- С.5-10.

44. Кудрявцев А.А., Кудрявцев А.П. Токсическая дистрофия печени у поросят и методы ее профилактики. Иркутск : Восточно-Сибирское издательство, 1971.

45. Кудрявцева Л.А. Селен в кормлении животных и предупреждение его недостаточности // Сельское хозяйство за рубежом.- 1974.- № 1.- С. 14-17.

46. Лакин К.М., Крылов Ю.Ф. Биотрансформация лекарственных веществ. М.: Медицина, 1981.—344 с.

47. Лебедев В.Н. Тезисы докладов первой республ. конф. ученых Белоруссии по вопросам эффективности земледелия.- Жодино, 1970.- С.117.

48. Лебедев В.В. В сб.: Биологическая роль микроэлементов и их применение в сельском хозяйстве и медицине. Л., 1975. -С.159.

49. Лебедев В.Н. Содержание селена в почвах БССР. Автореф. канд. дисс.-Жодино, 1973.

50. Меркурьева Е.К. Биометрия в селекции и генетике сельскохозяйственных животных. М.: Колос, 1970.- С.303.

51. Минина JI.A. Биологическая роль селена при токсической дистрофии печени и беломышечной болезни у кур.: Автореф. дисс. канд. вет. наук.- М., 1970.- С.9-11.

52. Мурузов Г.А., Глебов А. А. Профилактические достоинства селенита натрия при беломышечной болезни бройлеров.: Новые научные достижения е.- х. производству. Орел, 1979.- С. 123-124.

53. Мусаев М.А., Ахмедов Н.М., Кахраманов С.Г. Некоторые данные о влиянии микроэлемента селена на продуктивность овец в условиях Нахиче-ваньской АССР.- В сб. : Селен в биологии. Материалы научн.конф. Баку, Элм. 1974.- С. 178-182.

54. Назаренко И.И., Ермаков В.В. Аналитическая химия селена и теллура. -М.: Наука, 1971.-251 с.

55. Назаренко И.И., Кислова И.В. Высокочувствительный метод для анализа мигрирующих форм селена в природных водах // Лабораторная технология исследований и обогащения минерального сырья. М., 1977.- Вып. 6.-С.1-8.

56. Пиотровский В.К. //Хим.-фарм. журн,—1984—№ 7.—С. 845—849.

57. Пиотровский В.К. // Хим.-фарм. журн.—1984.—№ 12.—С. 1425—1432.

58. Пиотровский В.К. // Хим.-фарм. журн.—1985.—№ 7.—С. 782—790.

59. Пиотровский В.К., Ромина Н.Н., Меркулова И.Н. и др. // Хим.-фарм. журн.—1983.—№ 8.—С. 912—916.

60. Пейве Я.В., Ноллендорф А.Ф. Краткий обзор результатов исследований по проблеме "Микроэлементы в растениеводстве и животноводстве" за 1974 г. // Микроэлементы в СССР.- Рига.: Зинатне, 1975,- Вып. 17.- С. 3031.

61. Плетникова И.П. Биологическое действие и уровень безопасности селена селена при поступлении в организм с питьевой водой // Гиг. и сан.— 1970.—№2.—С. 14-19.

62. Родионова Т.Н. Влияние добавок селена на продуктивность и показели обмена веществ у кур-несушек.: Автореф. дисс. канд. биол. наук.- Боровск, 1989,- 144 с.

63. Родионова Т.Н. Рекомендации для птицеводства. Саратов, 2000. -С. 2-4.

64. Салмане Р.Э. Труды Латвийского НИИЖв, 1969, 22.-С.141-146.

65. Саттаров Д., Маггерамова К. Содержание селена в некоторых кормах Апшеронской природно-экономической зоны // Сб. трудов Азербайджанского НРШ кормов, лугов, пастбищ. 1980.-Т.З.-С.57-62.

66. Селен. Совм. изд. Программы ООН по окружающей среде, Международной организации труда и Всемирной организации здравоохранения.- Женева, 1989.-270с.

67. Сердюк А.И., Малявкина Л.А. Влияние добавок селенита на продуктивность цыплят бройлеров. Челябинский межотраслевой территориальный центр науч.-техн. информации и пропаганды, 1986.

68. Сидельникова В.Д. Некоторые вопросы вводной миграции селена в пустынях. //Очерки геохимии эндогенных и гипергенных процессов. -М., 1966.

69. Синдеева Н.Д. Минералогия, типы месторождений и основные черты геохимии селена и теллура. -М.: Изд-во АН СССР, 1959.-257 с.

70. Смердова М.Д. Влияние селенита натрия на рост и развитие кур // Биологические и хозяйственные качества линейной и гибридной птицы.- Иркутск, 1974.- С.45-47.

71. Смердова М.Д., Тарарина Л.И., Лукашек Г.В. Профилактическое применение селенита натрия бройлерам // Физиология и биохимия с.-х. животных и птиц. Омск, 1983.-С.48.

72. Соловьев В.Н., Фирсов А.А., Филов В.А. // Фармакокинетика.—М., 1980.

73. Сучков Б.П., Шевчук И.А., Мардарь А.И. Гистопатофизиологические изменения в органах и тканях лабораторных животных, получавших искусственный рацион с низким содержанием селена и витамина Е // Вопросы питания,- 1977.- № 2.-С.ЗЗ-41.

74. Сучков Б.П., Штутман Ц.М., Халмурадов А.Г., Биохимическая роль селена в организме животных // Укр. биохим. журнал.- 1978.- № 5.- С.659-671.

75. Титов Г.И. Труды Бурятской научно-производственной вет. лаборатории.-Улан-Уде, 1968.- Вып. 2.- С.30, 42, 50.

76. Титов Г.И. Ферментативная активность аминотрансфераз в сыворотке крови животных при селеновой недостаточности // Труды MB А, 1975, т. 79,ч. 3, С. 166-170.

77. Томских Ю.И. Распределение селена-75 в организме кур в онтогенезе и при селеновом токсикозе: Автореф. дисс. канд. биол. наук. Казань, 1987.-С.8-21.

78. Томмэ М.Ф., Дуксин Ю.П. Потребность крупного рогатого скота в микроэлементах // Животноводство.- 1975.- № 1.- С.39-42.

79. Фирсов А.А., Пиотровский В.К. //Фармакокинетические методы в биофармации: оценка биодоступности и пресистемная элиминация лекарственных средств.—М.,1984.—С. 113

80. Франтенко Г.С. Влияние селена на продуктивность птиц //Профилактика и ликвидация заразных заболеваний с.-х. животных и птиц.- 1975.- С.44-46.

81. Фролова J1.A. Содержание селена в кормах с.-х. животных и птиц // Сб. науч. тр. МВА . -М., 1981.-т. 123.- С. 66-72.

82. Халилов З.М. Влияние селена на обменные процессы и продуктивность цыплят и кур // Вестник с.-х. науки .- Баку.- 1978.-№ 4.- С.41-44.

83. Хенниг А. Минеральные вещества, биостимуляторы в кормлении сельскохозяйственных животных. М.: Колос, 1976 .- С. 167-175.

84. Холодов J1.E., Яковлев В.П. Клиническая фармакокинетика (руководство).—М.: Медицина, 1985.—464 с.

85. Цалс И.И. Влияние селенита натрия на бройлеров // Ветеринария.- 1971.-№9.- С.84-85.

86. Цалс И.И., Пелекис Э.Э. Возрастная динамика концентрации селена у яйценоских кур // Вестник с.-х. науки .- 1971.-№ 10.- С.28.

87. Цалс И.И., Пелекис Э.Э. Определение селена в тканях и органах кур.- Ветеринария.- 1973.- № 8 .- С.109-111.

88. Штутман М.О. О метаболитических связях витамина Е и селена.- Материалы по биохимии витамина Е и селена и их применению в медицине и животноводстве. Киев, Наукова думка, 1973. -С. 82-83.

89. Штутман Ц.М., Чаговец Р.В. Биологическая функция витамина Е и селена в организме животных : Обзор // Сельскохозяйственная биология.-1976.-т. X.- С. 166.

90. Ailaway W. H. Perspectives on trace elements in soil and human health. In: Hemphill, D. D., ed. Trace substances in environmental health. XII, Columbia. Missouri. University of Missouri Press, 1978, P. 3-10.

91. Alcino J. F. & Kowald. J. A. Analytical methods. In: Klayman, D. L. & Gun-ther. W. H. H. ed. Organic selenium compounds, theirchemistry and biology. New York. John Wiley and Sons, 1973, P. 1049—1081.

92. Allaway W. H. An overview of distribution patterns of trace elements in soils and plants. Ann. NY Acad. Sci., 1972, P. 17—25.

93. Allaway W. H. Selenium in the food chain. The Cornell Veterinarian, 1973, Vol. 63, P. 151—170.

94. Allaway W. H., Moore D. P., Oldfield J. E., & Muth О. H. Movement of physiological levels of selenium from soils through plants to animals. J. Nutr., 1966.Vol. 88: P. 411—418.

95. Anderews E.D., Hodan K.G., SheP. ard A.D. Sebnium in soils, pastures and animal tissues in relation to the growth of goung sheep on a marginally selenium-deficient area // № Z. Vet. J. 1976. - Vol.24. № 6. - P. 110-116.

96. Ю5.АОАС Official methods of analysis, 12th ed., Washington DC, Association of Official Analytical Chemists. 1975.

97. Behne D. & Hofer-Bosse T. Effects of low selenium status on the distribution and retention of selenium in the rat. J. Nutr. 1984. Vol.114. P. 1289-1296.

98. Behne D. & Wolters.W. Selenium content and glutathione peroxidase activity in the plasma and erythrocytes of non-pregnant and pregnant women. J.clin. Chen. clin. Biochem. 1979. Vol.17. P.133-135.

99. Brown D. G. & Burk R. F., Seely, R. J., & Kiker K. W Effect of dietary sele1. J гnium on the gastrointestinal absorption of Se03 in the rat. Int. J. Vit. nutr. Res. 1972. Vol.42. P.588—591.

100. Brown M. W. & Watkinson J. H. An automated fluorimetric method for the determination of nanogram quantities of selenium. Anal. Chim. Acta. 1977 Vol.89. P.29—35.1 lO.Buchan R. F. Industrial selenosis. Occup. Med. 1947. Vol.3: P.439-^156.

101. Burk R.F. & Correia M.A. Accelerated hepatic haem catabolism in the selenium-deficient rat. Biochem. J. 1977. Vol.168. P. 105-111.

102. Burk R.F. & Lame J.M. Ethane production and liver necrosis in rats after administration of drugs and other chemicals. Toxicol. aP. i. Pharmacol. 1979. Vol.50. P.467-478.

103. Burk R.F. & Masters B.S. Some effects of selenium deficiency on the hepatic microsomal cytochrome P-450 system in the rat. Arch. Biochem. Biophys. 1979. Vol.170. P.124-131.

104. Burk R.F., Brown D.G., Selly R.J. & Scaief С.С.ДИ Influence of dietary and injected selenium on whole-body retention, route of excretion and tissue retention of Se03 in the rat/ J. Nutr. 1972. Vol.102. P. 1049-105 5.

105. Burk R.F., Mackinnon A.M., & Simon F.R. Selenium and hepatic microsomal hemoproteins. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1974. Vol.56. P.431-436.

106. Butler G.M. & Peterson P.J. Aspects of the faecal excretion of selenium by sheep. N.Z.J. agric. Res . 1961. Vol.4. P.484-491.

107. Cantor A.H. & Scott M.L. Influence of dietary selenium on tissue selenium levels in turkeys. Poultry Sci. 1975. Vol.54. P.262-265.

108. Cantor A.H. & Scott M.L. The effect of selenium in the hen's diet on egg production, hatchability, performance of progeny and selenium concentration in eggs. Poultry Sci. 1974. Vol.53. P.1870-1880.

109. Cantor A.H. & Scott M.L., & Nogugchi T. Biological availability of selenium in feedstuffs and selenium compounds for prevention of exudative diathesis in chicks. J.Nutr. 1977. Vol.105. P.96-105.

110. Cantor A.H., Langevin M.L., Nogugchi T.& Scott M.L. Efficacy of selenium in selenium compounds and feedstuffs for prevention of pancreatic fibrosis in chicks. J.Nutr. 1975. Vol. 105 (1). P. 106-111.

111. Cantor A.H., Moorhead P.D. & Brown K.I. Influence of dietary selenium upon reproductive performance of male and female breeder turkeys. Poultry Sci. 1978. Vol.57. P.1337-1345.

112. Combs G. F., Jr & Scott M. L. Polychlorinated biphenyl-stimulated selenium deficiency in the chick. Poultry. Sci. 1976. Vol.54. P.l 152-1158.

113. Combs G. F., Jr, Cantor A. H., & Scott, M. L. Effects of dietary polychlorinated biphenyls on vitamin E and selenium nutrition in the chick. Poultry Sci. 1975. Vol.54. P.l 143-1152.

114. Cooper W. C. Analyticall chemistry of selenium. In: Zingaro, R. A. & Cooper W. C., ed. Selenium, New York, Van Nostrand Reinhold Co. 1974. P. 615-653.

115. Cooper W. C. & Glover J. R. The toxicology of selenium and its compounds. III. In: Zingaro, R. A. & Cooper, W. C., ed. Selenium, New York, Van Nostrand Reinhold Co. 1974. P. 654-674.

116. Cooper W. C., Bennett K. G., & Croxton F. C. The history, occurrence, and properties ot selenium. In: Zingaro, R. A. & CoP. er, W. C., ed. Selenium. New York, Van Nostrand Reinhold Co. 1974. P. 1-31.

117. Davis. G. Effect of selenium and an anthelmintic on the growth of weaned calves in the south Island high country // N.Z.J. Exper. Agr. 1974. - Vol.2. № 4.-P. 393-395.

118. De Witt W. B. & Schwarz K. Multiple dietary necrotic degeneration in the mouse. Experientia. 1958. Vol.14. P.28-34.

119. Ewan R. C., Baumann C. A., & Pope A. L. Retention of selenium by growing lambs. J. agric. food Chem.1968. Vol.16. P.216-219.

120. Ewan R. С., Pope A. L., & Baumann C. A. Elimination of fixed selenium by the rat. J. Nutr. 1967. Vol.91. P.547-554.

121. Frost D. V. & Ingvoldstad D. Ecological aspects of selenium and tellurium in numan and animal health, Cnemica Scripta. 1975. V0I.8A. P.96-107.

122. Godwin K.O., Kuchel R.E., Burkley R.A. The effect of selenium on infertility in ewes grazing improved pastures // Austral. J. Exp. Agr. and Anim. Husb. -1970. Vol.10. № 47. - P.672-678.

123. Godwin К. O. & Fuss C. N. The entry of selenium into rabbit protein following the administration ofNa2Se03. Aust. J. biol. Sci. 1972. Vol.25. P.865-71.

124. Goodwin W. J., Lane H. W., Bradford K., Marshall M. V., Griffin A. C., Geopfert H., & Jesse, R. H. Selenium and glutathione peroxidase levels in patients with epidermoid carcinoma of the oral cavity and orophasynx. Cancer, 1983. Vol.51. P.110-115.

125. Grant К. E., Conner M. W., & Newberne P. M. Effect of dietary sodium se-lenite upon lesions induced by repeated small doses of aflatoxin Bi. Toxicol. aP. 1. Pharmacol. 1977. Vol.41. P. 166.

126. Haddad P. R. & Smythe L. E. A critical evaluation of fluorometric methods for determination of selenium in plant materials with 2,3-diamino-aphthalene. Talanta. 1974. Vol.21. P.859-865.

127. Hartley W. J. Selenium and ewe fertility. Proc. N. Z. Soc. Anim. Prod. 1963. Vol.23. P.20-27.

128. Hartley W. J. & Grant A. B. A review of selenium responsive diseases of New Zealand livestock. Fed. Proc. 1961. Vol.20. P.679-688.

129. Lakin H.W. Selenium accumulation in soils and its absorption by plants and animals // Bull. Ged. Soc. Amer. 1972. - Vol.83. №1. - p. 181-189.

130. Latshaw J.D. Natural and selemite selenium in the hen and egg // S. Nutr. -1975.-Vol.105. № i.p. 32-33.

131. Latshaw J.D., Ort J.F., Diesem C.D. The selenium requirement of the hen and effects of a deficiency// Poultry Sci. 1977. - Vol.56. № 6. - P. 1876-1881.

132. Mc Leod C.C., Wolff J.E., Schwarz G. Effect on liveweight gain and wool weights of anthelmintic and selenium drenching of mountain country Merino and halfbred ewe hoggets // N.S J.Exp.Agr. 1976. - Vol.4. № 2. - P. 219-225.

133. McConnell K. P., Jager R.M., Bland K.L., Bloctcky AJ. The relatinship of dietary selenium and breast cancer. J. surg. Oncol. 1980. Vol.15. P.67-70.

134. Millar K.R., SheP. ard A.D. a-Tocopherol and selenium levels in human and cows milk // N.Z.J.Sci. 1972. - Vol.15. № 1. - P. 3-15.

135. Miltimore J.E.e.a. Response from coP. er and selenium with vitamin E injections to cattle pastured on mineral and organic groundwater soils // Can. J. Amin. Sci. 1973. - Vol.53, № 2. - P. 237-244.

136. Miltimore J.E.e.a. Selenium concentration in British Columbia forages grains and processed//Can. J. Amin. Sci. 1975. - Vol.55, № l.-P. 101-111.

137. Olson О. E. Methods of analysis for selenium. A review. In: Proceedings b. of the Symposium on Selenium-Tellurium in the Environment, Fitlshiirgh, Pennsylvania, Industrial Health Foundation. 1976. P. 67-84.

138. Olson, 0. E„ Сагу, E. E„ & Allaway, W. H. Fixation and volatilization by soils of selenium from trimethylselenonium. Agron. J. 1976. Vol.68. P.839-843.

139. Ramisz A.e.a. Badania nad przydatnoscia preparatu "Vitamina С + selen" w produkcji kurczat pzeznych // Nowosci Weter. 1978. - r.8. № 4. - S. 449-454.

140. Scales G.H. Reproductive performance of Merino ewes dosed with selenium prior ta mating // Proc. N. Z. Soc. Amin. Prod. 1974. - 34. - P. 103-113.

141. Schwarz K., Foltz C.M. Selenium as an integral part of Factor 3 against dietary necrotic liver degeneration. J. Am. Chem. Soc. 1957. Vol.79. P.3292-3293.

142. Smith M. I. & Westfall, В. B. Further field studies on the selenium problem in relation to public health. US Public Health Rep. 1937. Vol.52. P.375-384.

143. Thompson JN & Scott. M. L. Role of selenium in the nutrition of the-chick. J. Nutr. 1969. Vol.97. P.335-342.

144. Thomson C. D. & Stewart R. D. H. Metabolic studies of 75Se selenomethionine and 75Se selenite in the rat. Br. J. Nutr. 1973. Vol.30. P.139-147.

145. Thomson C. D., Stewart R. D. H. & Robinson M. F. Metabolic studies in rats7C <n сof Se selenomethionine and of Se incorporated in vivo into rabbit. Br. , J. Nutr. 1975. Vol.33. P.15-54.

146. Ulrey D. E., Brady P. S., Whetter P. A., Ku P. K., c& Magee W. T. Selenium suP. lementation of diets for sheep and beef cattle. J. anal. Sci. 1977. Vol.45. P.559-565.

147. US DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES, FOOD AND DRUG ADMINISTRATION 21 CFR Pt. 573.920 Selenium. Fed. Reg. 1984. Vol.49. P.627-628.

148. US NAS/NRC Selenium in nutrition, Washington DC, National Academy of Science, National Research Council, Agricultural Board, Committee on Animal Nutrition, Subcommittee on Selenium. 1971. Vol.79.

149. Whlteacre M. E., Combs G. F. & Parker R. S. Peroxidative damage in nutritional pancreatic atrophy due to selenium-deficiency in the chick. Fed. Proc. Fed. Am. Soc. Exp. Biol. 1983. Vol.42. P.928.

150. Wu A. S. Н., Oldfield J. E., Shull L. R. & Cheeke P. R. Specific effect of selenium deficiency on rat sperm. Biol. Reprod. 1979. Vol.20. P.793.

151. Zhu L. & Lu Z. et al. Effects in pigs fed the crops gown in Keshan disease affected province of China. In: Howelll, J. M., Gawthone, J. M., & White, C. L., ed. Trace Element Metabolism in Man and Animals. 1981.