Автореферат и диссертация по медицине (14.00.25) на тему:Поиск соединений, обладающих противогистаминной активностью, среди конденсированных производных бензимидазола и изучение их фармакологических свойств

На правах рукописи «Для служебного пользования» Экз. № 5

Черников Максим Валентинович

ЮИСК СОЕДИНЕНИЙ, ОБЛАДАЮЩИХ ПРОТИВОГИСТАМИННОЙ АКТИВНОСТЬЮ, СРЕДИ КОНДЕНСИРОВАННЫХ ПРОИЗВОДНЫХ БЕНЗИМИДАЗОЛА И ИЗУЧЕНИЕ ИХ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИХ

СВОЙСТВ

14.00.25 - Фармакология

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Волгоград 2000

Работа выполнена в Волгоградской медицинской академии Минздрава РФ

НАУЧНЫЙ РУКОВОДИТЕЛЬ:

Заслуженный деятель науки РФ, доктор медицинских наук, профессор A.A. Спасов

ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ:

1. Доктор медицинских наук, профессор И.Н. Тюренков

2. Доктор медицинских наук, профессор А. Д. Дурнев

ВЕДУЩАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ:

Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова

Защита состоится «2.^» июня 2000 года в часов на заседании

Специализированного Совета Д.084.54.01 при Волгоградской медицинской академии (400066, Волгоград, пл. Павших борцов 1). С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке академии. Автореферат разослан «2,1» 2000 года.

Ученый секретарь Специализированного Совета, кандидат медицинских наук, доцент

Ю.К. Филимонова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Учитывая широкую распространенность заболева-мй, в развитии которых принимает участие гистамин, поиск и изучение новых еществ, блокирующих различные подтипы гистаминовых рецепторов являют-я актуальными для современной медицины.

Например, для терапии аллергических состояний, несомненно, наиболее асто употребляемой группой лекарственных препаратов остаются блокаторы истаминовых Нгрецепторов (Буркхалтер А., 1998; Gazca A.A. et al., 1996). Не-мотря на то, что имеется большое количество препаратов с подобным меха-измом действия, включая препараты второй генерации, все они обладают зна-ительным количеством побочных эффектов, и прежде всего - психодеприми-ующим действием, антихолинергическими эффектами и развитием тахифи-аксии (Гущин И.С., 1998; La Force С. et al., 1996).

В лечении язвенной болезни желудка и 12-ти перстной кишки одной из азисных групп антисекреторных препаратов, наряду с ингибиторами водород-о-калиевой АТФ-азы, являются Н2-гистаминоблокаторы (Рысс Е.С., Звартау .Э., 1998). Однако и у этих препаратов в их фармакодинамическом спектре гмечаются нежелательные свойства - антиандрогенные эффекты, гепато- и иелотоксичность, аритмогенная активность (Буркхалтер А., 1998; Chremos .N., 1986; Lin J.H., 1991).

В последние годы активно ведутся разработки по созданию лекарствен-ах средств, проявляющих свойства лигандов гистаминовых Нз-рецепторов ,eurs R. et al., 1995; Ganeliin C.R. et al., 1995). В частности, блокаторы H3-щепторов могут найти применение в терапии эпилепсии (Yokoyama H. et al., >93; 1994), ожирения (в качестве анорексигенных средств) (Oohara A. et al., >94; Leurs R. et al., 1995), кинетозах и болезни Меньера (Fischer A.J.E.M., 1991; immermann H., 1994), деменции (Mochizuki T. et al., 1994; Bierer L.M. et al., >95).

Учитывая вышесказанное, представляется целесообразным поиск новых высокоэффективных веществ, блокирующих различные подтипы гистаминовых рецепторов среди синтетических соединений, химическое строение которых позволяет предположить у них наличие данных свойств. К таким соединениям могут быть отнесены производные бензимидазола, так как, во-первых, среди них имеются соединения, оказывающие блокирующее влияние на различные гистаминовые рецепторы (Зарудий Ф.С., 1995; Nawrocka W., 1996). Во-вторых, с теоретической точки зрения их взаимодействие с гистаминовыми рецептор-ными структурами обусловлено наличием у них имидазольного кольца, входящего в бензимидазольное ядро (производные имидазобензимидазола содержат два имидазольных кольца)(Сергеев ИВ., Шимановский Н.Л., Петров В.И., 1999; Leurs R. et al., 1995; Ganellin C.R. et al., 1995).

Тема является составной частью федеральной научно технической программы «Создание новых лекарственных средств методами химического и биологического синтеза» и включена в план НИР Волгоградской медицинской академии. Утверждена на заседании Ученого Совета академии (протокол №5 от 14 января 1998 года).

Цель и задачи исследования. Целью исследования является экспериментальный поиск новых веществ, обладающих Hi-, Н2- и Н3-гистаминоблокирующими свойствами, в ряду конденсированных производных бензимидазола, и изучение их фармакологических свойств на моделях экспериментальной патологии.

Для достижения указанной цели представляется необходимым решение следующих задач:

1. Произвести поиск веществ с Нг, Н2- и Нз-гистаминоблокирующими свойствами среди конденсированных производных бензимидазола.

2. Определить зависимость между химической структурой исследуемых соединений и их способностью взаимодействовать с различными подтипами гистаминовых рецепторов.

3. Сравнить антигистаминные свойства наиболее активных веществ с звестными гистаминоблокаторами на моделях экспериментальной патологии.

4. Изучить антисекреторный и противоязвенный эффекты соедине-ий, продемонстрировавших наибольшую активность на этапе скрининга Н2-астаминоблокирующих свойств.

5. Изучить общефармакологические свойства у наиболее активных эединений.

Научная новизна. Проведено исследование на изолированных органах ла-эраторных животных антагонистических свойств по отношению к гистамино-лм Нг, Н2- и Нз-рецепторам 35 новых конденсированных производных бен-шидазола, относящихся к И"9 и -замешенным имидазо[1,2-

бензимидазола, -замещенным 1,2,4-триазоло[1,5-а] и ГГ -замещенным 2,3-«тадроимидазо[1,2-а]бензимидазолов. При этом установлено, что для прояв-:ния специфической активности по отношению к различным подтипам гиста-яновых рецепторов в ряду изученных трициклических гетеросистем имеет ¡ачение строение азотсодержахцих заместателей у атомов азота, а также нали-1е фенильной группы у атома углерода в положении 2 трициклов, при этом жную роль играет тип заместителей в ней.

В ходе работы получены новые данные о влиянии соединения под лабо-торным шифром РУ-64 на базальную, гистамин- и пентагастринстимулиро-нную желудочную секрецию соляной кислоты и пепсина у крыс, развитие озивно-язвенных повреждений слизистой оболочки желудка лабораторных 1вотных на моделях гастаминовых, серотониновых, этанол-преднизолоновых в, а также при 14-ти часовом лигировании привратника.

Научно-практическая ценность.

1. Полученные данные свидетельствуют о целесообразности поиска едств, проявляющих свойства лигандов гастаминовых рецепторов различных дтипов, среди производных конденсированных бензимидазольных систем с щим атомом азота.

2. На основе выявленных закономерностей между химической структурой конденсированных производных [1,2-а] бензимидазола и их способностью взаимодействовать с различными подтипами гистаминовых рецепторов, разработаны рекомендации для целенаправленного синтеза веществ, проявляющих свойства гистаминовых лигандов.

3. Выраженные антисекреторные и противоязвенные эффекты соединения под лабораторным шифром РУ-64, превосходящие по силе таковые у ци-метидина и равные фамотидину, позволяют предположить перспективность создания на основе данного вещества нового противоязвенного средства с антисекреторным действием.

Реализация результатов исследования. Выявленные закономерности между химической структурой и способностью проявлять свойства лигандов гистаминовых рецепторов различных субтипов у конденсированных производных бензимидазола используются при синтезе новых соединений в НИИ физической и органической химии Ростовского Государственного университета. Результаты работы используются в лекционных курсах на кафедре фармакологии, фармакологии и биофармации ФУВ и клинической фармакологии и интенсивной терапии Волгоградской медицинской академии, на кафедрах фармакологии Кубанской медицинской академии, Саратовского медицинского университета, Ростовского медицинского университета.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Конденсированные производные бензимидазола, а именно: >Г9 и ЬГ'-замещенные имидазо[1,2-а]бензимидазола, ^-замещенные 1,2,4-триазоло[1,5-а] и Ы"9 -замещенные 2,3-дигидроимидазо[1,2-а]бензимидазолов -класс соединений, обладающих свойствами гистаминовых Нг, Н2- и Нз-лигандов.

2. Соединение под лабораторным шифром РУ-64 является перспективной основой для создания нового противоязвенного средства с антисекреторными свойствами.

Апробация работы. Основные материалы диссертации докладывались и бсуждались на: XIV - XVII итоговых научных конференциях студентов и мо-одых ученых Волгоградской медицинской академии, Волгоград 1997-2000 гг.; / Межвузовской конференции студентов и молодых ученых Волгограда и олгоградской области, 1998 г.; IX научно-практической конференции по соз-шию и апробации новых лекарственных средств «Лекарства - человеку», [инск, 1999 г.; Республиканской научной конференции студентов и молодых геных медицинских Вузов России, Самара, 1999 г.; Всероссийской научной шференции с международным участием «Актуальные проблемы эксперимен-шьной и клинической фармакологии», Санкт-Петербург, 1999 г.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на 169 страницах ма-инописного текста, иллюстрирована 18 рисунками, 19 таблицами и 10 фото->афиями. Состоит из введения, обзора литературы (глава I), эксперименталь->й часта (главы II - IV), обсуждения результатов (глава V), выводов, прило-гния и списка литературы, включающего 37 отечественных и 170 зарубежных точников.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВ АНИЯ

Эксперименты выполнены на интактвых животных: 236 нелинейных >рских свинках обоего пола, массой 450-650 г, 374 белых нелинейных крысах оего пола, массой 180-360 г, 18 кошках обоего пола, массой 3,2 - 4,7 кг.

В работе изучены конденсированные производные бензимидазола: И"9 за-щенные имидазо[1,2-а]бензимидазола (18 соединений), ^'-замещенные ими-зо[1,2-а]бензимидазола (10 соединений), ^-замещенные 1,2,4-триазоло[1,5-5ензимидазола (3 соединения) и ЬГ'-замещенные 2,3-дигидроимидазо[1,2->ензимидазола (4 соединения). Данные производные бензимидазола синтези-ваны в НИИ физической и органической химии Ростовского государственно-yнйвepcитeтa',,.

* Выражаем искреннюю признательность к.х.н., с.н.с. В.А. Анисимовой и Т.А. Кузь-жо за предоставленные соединения.

Скрининг Hi-гистаминоблокирующей активности проводился на модели гистамининдуцированного спазма изолированной подвздошной кишки морской свинки но методике Блатгнер Р. (Блаттнер Р. и др., 1983). Поиск Н2-гистаминоблокирующих свойств проводили на изолированном правом предсердии морской свинки (Black J. et al., 1972) при стимуляции селективным аго-нистом гистаминовых Н2-рецепторов - димапритом (Coruzzi G. et al., 1996). Определение антагонистических свойств соединений по отношению к гистами-новым Нз-рецепгорам оценивали на изолированной тощей кишке морской свинки по степени подавления спазмолитического эффекта, оказываемого аго-нистом гистаминовых рецепторов И-(-)-а-метилгистамином на электроиндуци-рованную сократительную реакцию (Vollinga R. et al., 1992).

Для исследования антигистаминных свойств наиболее активных веществ использовалась следующие экспериментальные модели: гистаминовой офталь-мореакции (Харкевич Д.А., 1957), гистаминового шока и гистаминовой гипо-тензии (Каминка М.Э., 1977); антисеротониновая активность изучалась на изолированных рогах матки крыс (Блаттнер Р. и др., 1983).

Влияние на желудочную секрецию оценивалось по степени подавления секреции соляной кислоты и пепсина в желудке крыс при базальной секреции, а также при стимуляции гкстамиком и пентагастрином по методике Black Е. и соавт. (1989). Противоязвенная активность исследовалась на следующих моделях эрозивно-язвенных повреждений слизистой оболочки желудка лабораторных животных: гистаминовых (Anderson W., Soman P.D., 1965), этанол-преднизолоновых (Оболенцева Г.В. и др., 1995), серотониновых (Скляров Я.П., 1954) и при 14-ти часовой перевязке пилорического отдела желудка (Shay Н. et al., 1945).

В качестве препаратов сравнения по данным видам биологической активности использовались: блокатор гистаминовых Hi-рецепторов - дифеигидра-мин (димедрол) (Машковский М.Д., 1993), блокаторы гистаминовых Нг-рецепторов - циметидин (Lb J.H., 1991) и фамотидин (Григорьев JI.A. и др.,

1991), неселективный блокатор серотониновых 5-НТ2-рецепторов - метисергид Kennett G. А., 1999).

Полученные результаты обработаны статистически с использованием t-:ритерия Стьюдента (Венчиков А.И., Венчиков В.А., 1974). Расчет величин >А2, рАю, ЕД50 производился при помощи метода наименьших квадратов в про-рамме Microsoft Excel 97.

РЕЗУЛЬТАТЫ ОПЫТОВ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

При скрининге конденсированных производных бензимидазола, а имен-о: N"9 и N"'-замещенных имидазо[1,2-а]бензимидазола, ^-замещенных 1,2,4-риазоло[1,5-а] и К"9-замещенных 2,3-дигидроимидазо[1,2-а]бензимидазола, на редмет выявления гистаминоблокирующей активности, установлено, что со-динения, относящиеся к представителям всех вышеперечисленных химиче-ких классов, проявляют антигистаминные свойства, различной степени выра-;енности по отношению к Нг и Н2-рецепторам, а также Нз-агонистические войства (табл.1).

Наибольшая Hj-гистаминоблокирующая активность выявлена у произ-одных имидазобензимидазола с диэтиламиноэтильным заместителем при 9 гоме азота - соединение под лабораторным шифром РУ-274, а также с пипе-вдиноэтилом у N1 - РУ-598, причем, у обоих веществ в положении С2 нахо-ится хлорсодержащие фенильные радикалы. Значения показателей ингибиро-шия рА2 для данных веществ составили 6,36 и 7,02, соответственно. Препа-ît сравнения дифенгидрамин имеет рА2 = 8,24. Таким образом, оба соедине-ая оказались слабее, чем препарат сравнения в 150 и 83 раза, соответственно, роме того, разность показателей pAÎO и рА2 для вышеуказанных веществ со-■авила 1,05 и 1,08, соответственно, (рис.1; табл.2) что может служить доказа-льством конкурентного характера антагонизма, так как известно, что при щкурентном антагонизме разница между величинами рА)0 и рА2 теоретиче-:и должна быть равна 0,95, а практически - стремиться к 1,0 (Комиссаров .В., 1969).

Таблица 1

ВЛИЯНИЕ ИЗУЧАЕМЫХ ВЕЩЕСТВ НА РАЗЛИЧНЫЕ ПОДТИПЫ ГИСТАМИНОВЫХ РЕЦЕПТОРОВ

Структура соединений Кол-во соединений Количество активных соединений в % от общего числа веществ данной структуры*

Н,- антагонисты Н2-антагонисты Н3-агонисты

Ы"9 имидазо(1,2-а)бензимидазолы 18 28 33 17

Ы"1 имидазо(1,2-а)бензимидазолы 10 60 50 10

ЬГ4 1,2,4-трназоло(1,5-а)бензимидазолы 3 0 33 67

2,3- дигидроимидазо( 1,2-а)бензимидазолы 4 25 50 0

Диэтиламияоэтил-замещенные производные 14 21 57 7

Пиперидиноэтил-замещенные производные 11 36 27 18

Морфолиноэтил-замещенные производаые 9 11 22 67

* - величина соответствующей активности соединений > 30%

А

160 140 120 100 80 60 40 20 0

. "434,4

и 68,г 1

1 * 50,2 •

рА2 ----г—- = 7,02 рА^ь« 5,94 » 1 • « 1 -,-Н-,---

-5

1-дС

Б

Рис.1. Графическое определение величин рАг и рАю для Нггисгаминоблокирующей способности соединения РУ-274 (А) и РУ-598 (Б) (по данным экспериментов на изолированной подвздошной кишке морской свинки) при 2-х минутной экспозиции.

Обозначения: по оси X - десятичные логарифмы молярных концентраций исследуемых соединений; по оси У -величина спазма подвздошной кишки под действием гистамина на фоне исследуемых веществ в различных концентрациях.

Таблица 2

ПОКАЗАТЕЛИ РА2 И РА1(Ь ОПРЕДЕЛЕННЫЕ ДЛЯ НАИБОЛЕЕ АКТИВНЫХ ИССЛЕДУЕМЫХ СОЕДИНЕНИЙ

Комбинация веществ рА2 рА,0 Разность рА2-рАю

Гистамин и РУ-274 1 6,36 5,31 1,05

Гистамин и РУ-598 1 7,02 5,94 1,08

Димаприт и РУС-79 2 7,38 6,43 1,05

Димаприт и РУ-642 7,75 6,51 1,24

Гистамин и димедрол ' 8,24 - -

Димаприт и циметидин1 7,30 - -

'-Нггистаминоблокирукнцая активность (данные получены на изолированной подвздошной кишке морской свинки);

2-Н2-гистаминоблокирующая активность (данные получены на изолированном предсердии морской свинки);

Среди веществ, с наиболее выраженными Нг-гистаминоблокирующими свойствами оказались соединения, относящиеся к Незамещенным имидазобен-зимидазола и замещенным 1,2,4-триазоло[1,5-а] бензимидазола, содержащие при атоме азота диэтиламиноэтил, а в положении 2 - фенильный заместитель. Эти соединения под лабораторными шифрами РУ-64 и РУС-79, имеют величины рА2 = 7,75 и 7,38, соответственно (рис.2; табл.2), а циметидин - 7,3. Таким образом, соединение РУ-64 в 2,5 раза сильнее препарата сравнения, а РУС-79 обладает приблизительно равной активностью с ним.

Разница показателей рА10 и рАг составляет 1,24 и 1,05, соответственно, что также можно расценивать как подтверждение конкурентного характера антагонизма по отношению к гистаминовым Н2-рецепторам.

Нз-гистаминоблокирующая активность не была выявлена пи у одного из исследованных соединений. Однако, у некоторых из них обнаружились агони-стические свойства по отношению к данному субтипу гистаминовых рецепторов, причем все вещества являлись N*9 и ГГ'-морфолиноэтилзамещенными производными имидазо- и триазолобензимидазола. (РУ-284, РУ-355, РУС-80 и РУ-294).

Исходя из цели исследования, дальнейшее изучение противогистаминной активности проводилось лишь у тех веществ, которые проявили наибольшие эффекты в соответствующих скршшнговых методиках.

Несмотря на то, что вещества под лабораторными шифрами РУ-274 и РУ->98 при скрининге Нггистаминоблокирующей активности на модели гистами-шндуцированного спазма подвздошной кишки морской свинки, продемонст-жровали меньший противогистаминный эффект, чем препарат сравнения ди-|>енгидрамин, представлялось необходимым более углубленное исследование IX антигистаминных свойств на экспериментальных моделях in vivo, для истечения возможного образования более активных метаболитов (Peck С.С. et .1., 1993; Quercia R.A. et al., 1993).

В результате дальнейших исследований соединений под лабораторными цифрами РУ-274 и РУ-598 установлено, что и на моделях экспериментальной

180 160 140 120 100 60 60 40 20 0

^410,5

рА2 = 7,38 рА1 78,3 ,= 6,43

200 180 160 140 120 а? 100 80 60 40 20 0

-8

-7

-6

СдС

А Б

Рис.2. Графическое определение величин рА2 и рАю для Нг-гистаминоблокирующей способности соединения РУС-79 (А) и РУ-64 (Б) (по данным экспериментов на изолированном предсердии морской свинки) при 2-х минутной экспозиции.

Обозначения: по оси X - десятичные логарифмы молярных концентраций исследуемых соединений; по оси У - выраженность положительного хронотропного эффекта агониста Н2-гистаминовых рецепторов дямаприта в концентрации 10~6М на фоне исследуемых веществ в различных концентрациях.

патологии оба вышеуказанных вещества также оказывают менее выраженное действие, чем препарат сравнения - дифенгидрамин.

Так, на модели гистаминовой офтальмореакции показано, что соединения РУ-598 и РУ-274 продемонстрировали в 5 и 8 раз менее выраженный противо-гистаминный эффект чем дифенгидрамин, введенный в той же дозе. При изучении влияния вышеуказанных веществ на выживаемость морских свинок при введении им 2-х смертельных доз гистамина, оказалось, что вышеуказанные зещества в 10 и 3 раза менее активны, чем препарат сравнения. В опытах по ис-;ледованик> действия соединений на выраженность гистаминовой гипотензии у гаркотизированных кошек, вещество под лабораторным шифром РУ-274 покато противогистаминную активность в 3 раза меньшую, чем дифенгидрамин. Изучение противогистаминных свойств соединения РУ-598 на данной модели ie представлялось возможным из-за его выраженной кардиотоксичности.

В экспериментах по изучению влияния исследуемых соединений на серо-онининдуцированный спазм изолированных рогов матки крысы обнаружено, :то у веществ РУ-274 и РУ-598 имеется антисеротониновые свойства, по всей идимости обусловленные блокадой 5-НТ2д- серотониновых рецепторов. Анти-еротониновая активность данных соединений уступает таковой у препарата равнения - неселективного блокатора серотониновых 5-НТ2-рецепторов - ме-исергида.

Исходя из вышесказанного, можно сделать вывод, что, несмотря на нали-ие у соединений под лабораторными шифрами РУ-274 и РУ-598 антигиста-инных свойств, степень их выраженности в несколько раз уступает таковым у репарата сравнения - дифенгидрамина, как в исследованиях in vitro, так и in vo, что свидетельствует о нецелесообразности дальнейшего изучение Нг 1стаминоблокирующей активности у данных веществ.

Учитывая данные скрининга Нг-гистаминоблокирующей активности, шьнейшей задачей явилось изучение влияния соединения под лабораторным ифром РУ-64 на базаиьную и стимулированную желудочную секрецию, а кже изучение противоязвенного действия данного вещества на различных спериментальных моделях язвообразования у лабораторных животных.

Ранее, в исследованиях проведенных на кафедре фармакологии Волгоградской медицинской академии, у конденсированных производных бензими-дазола была обнаружена антисекреторная и противоязвенная активность. В частности, соединение под лабораторным РУ-64 на ряде экспериментальных моделей продемонстрировало соответствующую активность, превышающую таковую у омепразола и циметидина (Бакумов П.А., 1991).

Исходя из предполагаемого механизма действия исследуемого соединения, в настоящей работе в качестве препаратов сравнения были выбраны известные блокаторы Нггистаминовых рецепторов - циметидин и фамотидин.

Так, соединение РУ-64 по влиянию на уровень базальной кислотопродук-ции у крыс продемонстрировало в 1,6 раз более сильное антисекреторное действие, чем циметидин, и в 1,2 раза меньше, чем фамотидин, в тех же дозах. По влиянию на гистамин- и пентагастринстимулированную секрецию кислоты в желудке крыс соединение РУ-64 превышало активность циметидина в 6-7 раз и практически не уступало фамотидину (рис.3).

На модели язвенных повреждений слизистой оболочки желудка морских свинок, вызванных гистамином, соединение РУ-64 продемонстрировало в 10 раз большую противоязвенную активность, чем препарат сравнения циметидин, и практически равную - с фамотидином (рис.4).

Ингибирующее влияние соединения РУ-64, на развитие эрозивно-язвенных повреждений слизистой оболочки желудка крыс, вызванных введением комбинации преднизолона и этанола, в 25 раз превышало противоязвенную активность циметидина, и почти в 2 раза - таковую у фамотидина (рис.4).

На модели серогониновых эрозивно-язвенных повреждений слизистой оболочки желудка крыс, соединение РУ-64 продемонстрировало почти в 5 раз большую противоязвенную активность, чем препарат сравнения циметидин, и практически равную с фамотидином (рис.4).

И, наконец, при 14-ти часовой перевязке привратника противоязвенная активность соединения РУ-64, была в 7 раз больше, чем у циметидина, и равная с фамотидином (рис.4).

Рис. 3. Действие соединения РУ-64 и препаратов сравнения в дозах 30 мг/кг (per os) на базальную, гистамин- и пентагаст-

ринстимулированную желудочную секрецию крыс.

ЕД50, мг/кг

Рис. 4. Величины ЕД50 противоязвенных эффектов соединения РУ-64, фамотидина и циметидина (мг/кг).

В общем, при изучении влияния соединения под лабораторным шифром 'У-64 на базальную и стимулированную желудочную секрецию, а также изуче-шя противоязвенного действия данного вещества на различных экспериментальных моделях язвообразования у лабораторных животных, установлено, [товышеуказанное вещество обладает выраженной антисекреторной и проти-оязвенной активностью, превосходящей таковую у препарата сравнения циме-идина, а в ряде случаев—у фамотидина.

Анализируя эффективность соединения РУ-64 при язвообразовании раз-ичного генеза, обращает на себя внимание тот факт, что на модели поврежде-ий слизистой оболочки желудка, вызванных введением комбинации этанола и реднизолона, данное вещество демонстрирует значительно большую актив-ость по сравнению с циметидином и фамотидином, чем при других экпери-ентальных моделях язв. Это может свидетельствовать в пользу того, что по-имо наличия у субстанции РУ-64 антагонизма по отношению к гистаминовым ^-рецепторам, имеется выраженная гастропротективная активность. Вышеука-[нное предположение согласуется с данными, полученными Бакумовым П.А. 991), в частности им обнаружено, что соединение РУ-64 повышает содержаще гастромукопротеидов и гликозаминогликанов в желудочном соке. На осно-йии морфологических исследований, проведенных тем же автором, можно (елать вывод о стимулирующем влиянии данного вещества на выделение му-1идных веществ бокаловидными клетками желудка (Бакумов П.А., 1991).

Учитывая факт наличия у субстанции под лабораторным шифром РУ-64 тисекреторной и противоязвенной активности превышающей таковую у ци-;тидина и не уступающей фамотидину, можно считать перспективным даль-йшее изучение фармакологических и токсикологических свойств данного со-инения с целью создания на его основе нового оригинального противоязвен-го средства с антисекреторным действием.

Таким образом, проведенные исследования подтвердили теоретические едпосылки о том, что все изученные типы производных бензимидазола, имея адные черты строения с гистамином, в частности, имидазольное кольцо, в со-

ставе конденсированного ядра, а также, полярную группу в одном из радикалов, будут обладать свойствами гистаминовых лигандов.

Анализ полученных данных показал, что для проявления специфической активности по отношению к различным подтипам гистаминовых рецепторов в ряду изученных трициклических гетеросистем имеет значение строение азотсодержащих заместителей у атомов азота гетероциклов. Также, важную роль играет, наличие фенильной группы у атома углерода в положении 2 трициклов и тип заместителей в ней. Кроме того, по всей видимости, для взаимодействия с гистаминовыми рецепторами соединений этого ряда, необходимым условием является наличие атома водорода в положении С3 циклической системы, в то время как наличие более сложных заместителей у 3 атома углерода, приводит к значительному снижению у них соответствующей активности.

ВЫВОДЫ

1. Конденсированные производные бензимидазола, а именно: К"9 и ЬГ1-замещенные имидазо[1,2-а]бензимидазола, N "'-замещенные 1,2,4-триазоло[1,5-а] и Ы"9-замещенные 2,3-дигидроимидазо[1,2-а]бензимидазола проявляют свойства гистаминовых Нг, Н2-, и Н3-лигандов. Влияние на тот или иной подтип гистаминовых рецепторов у соединений данного ряда зависит от их химического строения.

2. Наибольшая Нггистаминоблокирующая активность выявлена у производных имидазо[1,2-а]бензимидазола с диэтиламиноэтильным заместителем при 9 атоме азота, а также с пиперидиноэтилом у И1, при наличии хлорсодер-жащих фенильных радикалов у атома С2 конденсированного бензимидазольно-го ядра. Характер антагонизма данных соединений может расцениваться как конкурентный.

3. Наиболее выраженные Н2-гистаминоблокирующие свойства выявлены у >Г9- производных имидазо[1,2-а]бензимидазола и >Г4-проюводных 1,2,4-триазоло[1,5-а] бензимидазола, с диэтиламиноэтильным заместителем в 9 и 4 положении, соответственно, и фенильным заместителем у 2-го углеродного

атома конденсированного бегоимидазольного ядра. Характер антагонизма данных соединений также может расцениваться как конкурентный.

4. На модели электроиндуцированных сокращений изолированной тощей кишки морской свинки ни у одного из исследованных соединений, не выявлены антагонистические свойства по отношению к гистаминовым Н3-рецепторам. Напротив, некоторые из них проявляют Нз-агонистическую активность, которая максимальна у соединений, относящихся к морфолиноэтилза-мещенным имидазо[1,2-а]бензимидазола и 1,2,4-триазоло[1,2-а]бензимидазола.

5. Соединение под лабораторным шифром РУ-64 на изолированном предсердии морской свинки демонстрирует активность, превышающую тако-*ую у циметидина в 2,5 раза. Характер антагонизма данного соединения с Н2-•истаминовыми рецепторами может расцениваться как конкурентный.

6. Соединение под лабораторным шифром РУ-64 оказывает до-озависимый антисекреторный эффект превосходящий таковой у циметидина :о влиянию на уровень базальной, гистамин - и пентагастринстимулированной екреции кислоты в желудке крыс в 1,6 - 7 раз и равный - фамотидину.

7. Вещество под лабораторным шифром РУ-64 обладает про-явоязвенным действием, превосходя циметидия - на гистаминовой модели яз-эобразования в 10 раз, на этанол-преднизолоновой - в 25 раз, на серотонино-эй - в 5 раз, при 14-ти часовой перевязке привратника - в 7 раз, и равное - фа-отидину на гистаминовой, серотониновой моделях и при 14-ти часовой пере-оке привратника, превосходя его в 2 раза на этанол-преднизолоновой модели.

8. Наиболее активные, из исследованных на предмет выявления Нг стаминоблокирующих свойств, соединения под лабораторными шифрами 1-21А и РУ-598 демонстрируют меньшую активность, чем дифенгидрамин, к при гистамининдуцированном спазме подвздошной кишки морской свин-

(в 150 и 83 раза, соответственно), так и на моделях экспериментальной па-логии: при гистаминовом конъюнктивите в 5 и 8 раз, при гистаминовом шов 10 и 3 раза, соответственно. На модели гистаминовой гипотензии со-инение РУ-274 в 3 раза менее активно, чем дифенгидрамин.

9. Вещества РУ-274 и РУ-598 на модели серотонининдуцированного спазма изолированных рогов матки крысы демонстрируют спазмолитическую активность, подавляя величину сократительной реакции на 50% в концентрациях 2,8 х 10'7 М и 2,3 к Ю'7 М, соответственно.

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Конденсированные производные бензимидазола, а именно: ЬГ9 и ЬГ!-замещенные имидазо[1,2-а]бензимидазола, 1^Г4-замещенные 1,2,4-триазоло[1,5-а] и М'9-заме;ценные 2гЗ-дагидроимидазо[1,2-а]бензимидазола перспективная основа для поиска гистамнновых Нг, Нг-, и Н3-лигандов.

2. Выявленные закономерности между химической структурой конденсированных производных [1,2-а] бензимидазола и их способностью взаимодействовать с различными подтипами гистаминовых рецепторов, могут использоваться для целенаправленного синтеза веществ, проявляющих свойства гистаминовых лигандов, а так же для оптимизации поиска новых веществ с указанными фармакологическими свойствами.

3. Наиболее активное соединение под лабораторным шифром РУ-64 с выраженными антисекреторными и противоязвенными свойствами, превосходящими по силе таковые у циметидина и равные фамотидину, может явиться перспективной основой для создания нового противоязвенного средства

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Скрининг антигистаминной активности новых синтетических веществ // Актуальные проблемы медицины: тезисы докладов XIV итоговой научной конференции молодых ученых. -Волгоград, 1997. -С.32.

2. Поиск Н ггистаминоблокирующих соединений среди конденсированных производных бензимидазола // Тезисы докладов итоговой научной конференции студентов и молодых ученых Волгоградской медицинской академии; Сборник научных трудов. -Т.54, вып. 3, Волгоград, 1998.-С.ЗЗ.

3. Поиск и изучение Н1 и Нггистаминоблокирующих свойств у конденсированных производных бензимидазола // Актуальные проблемы экспериментальной и клинической фармакологии: материалы Всероссийской па-

учной конференции с международным участием. -Санкт-Петербург, 1999. -С. 195. (В соавт. со Стасовым A.A., Анисимовой В.А., Кузьменко Т.А.)

4. Поиск соединений, блокирующих Но-гистаминовые рецепторы, среди конденсированных производных бензимидазола // Лекарства - человеку: международный сборник научных трудов IX научно-практической конференции по созданию и апробации новых лекарственных средств. -Т. IX, Минск, 1999. -С.226-231. (В соавт. со Спасовым A.A., Анисимовой В.А., Кузьменко Т.А., Осиповой М.М.)

5. Поиск агонистов и антагонистов гистаминовых Hj-рецепторов среди конденсированных производных бензимидазола // Тезисы докладов республиканской научной конференции студентов и молодых ученых медицинских Вузов России. -Самара, 1999. -С. 233-234.

6. Изучение антигистаминной активности у производных имидазо(1,2-альфа)бензимидазола // Материалы итоговой научной конференции студентов и молодых ученых BMA. -Сборник научных трудов, Т.55, Вып.б, Волгоград, 1999. -С.43-44. (В соавт. с Гуровой H.A., Киабия С.Т.)

7. Поиск антигистаминных веществ, среди имидазо- и триазоло-бензимидазолов // Хим.- Фарм. журнал, Т.34, №2, 2000. -С.6-10. (В соавт. со Спасовым A.A., Анисимовой В.А., Кузьменко Т.А., Осиповой М.М.)