Автореферат и диссертация по медицине (14.00.30) на тему:Оценка прививочных свойств и эффективности новых гриппозных вакцин для детей

^7,0 Л 31

'•ййяяс^ая акадежя медицинских наул

ИНСТИТУТ ВИРУСОЛОГИИ им. Д. ¡1ИВАНОВОЮГО РЛНН

еурцш елена Ивановна оценка пргашочкых (ЖОпсте и эикшшиости

НОВЫХ ГРИППОЗНЫХ ЗЩПЩН ДЛЯ ДЕТЕя 14. ОС. 33. - зпщекио.топм

автореферат диссипации на соискание ученой степ'зш: ха1!Д17'Пга не^кцзшасих ;гаук

На правах рукописи УДК 573. 832.1 АВ: 578. 74

¡Лоск"за - 1992 г.

Рг "tota наполнена в Мнотитуте вирусологии ksí. Д. И. Ивановского РАМН

Научный руководитель. доктор медицински?, наук",

профессор Л. К Слепуикин

Официальные оппоненты:

доктор-медицинских наук, профессор Годчзрнлева Р. Я, доктор недишнских наук Гагариноьа Ь. М.

Ведущее.учреждение: Государственный научяо-исследовательскиа институт стандартизации и контроля кедчциьскчх биологических препаратов им. Л. А. Тарзсеиича

Защита состоится iggg 1. в 14 часов на

заседании специализированного совета Д COI. 2G. 02 при Институте вирусолс,гни им. Д. И. iíaaiiGBCAoru РАМН '123098, г.Москва, ул. Гамалеи, 16)

С диссертацией молно ознакомиться в библиотеке Института.

Ai TopeiJepaT разсел&н 992 г

Учеиьй секретарь специсчдкзирозанксго совета, кандидат медицинских наук,

старший научный сотрудник . Л. №. Жуковский

ЧТЕШ I

Я. I

¡ритуальность нссследования. В настоящее время как у пас в ране, "-ак и за рубеяом накоплен значительный опыт в области раз-ботки и применения дивых (КГБ) и инактивированных (ИГВ) грип-зных вакцин для предупреждения заболевания гриппом у взрослых и гей. Однако, уровень заболеваемости гриппом и острым;! роспира-рнкми вирусными инфекциями (ОРЕЛ) остается высот«,м. Оли занимало численности и экономическому ущербу стране ведущее место в х руктуре инфекционной заболеваемости, которые ецз недавно е?*.-цно составляли 80-89% этой заболеваемости и 5,3-9,5 млрд. руб-й (К Л Шаханина и соавт. ,1939).

Особенности современного течения эпидемического процесса при иппо - частое возникновение эпидемий, вызванных вирусами гриппа Н1Н1), А(НЗН2) и В, характеризующийся значительными дрейфовым! менениямн и приводящими к большей вовлеченности в эпидпроцеся гей и молодых взрослых, определяют актуальность исследований по исканию средств и методов повышения эффективности вакцинопрофи-ктики среди этих возрастных групп (а 11 Ндшгов, 1986; г. К. Карпу-н, 1931; А. Л. Смородгащев, 1084; Мзыорандуи }Хв, 1987). .

В последние го^.и при подготовке новых г-акцинкых сга^мв для

сой гриппозной вакцины яироко используется метод генетичеахй

комбинации V. МаазаЬ еЬ а1. , 1972; Г. И. Александрова и соавт.,

77). Метод основал на скрещ-ванки вируса (^гнора аттенуацип),

эвредного для людей, с актуалъикч эпидемическим вирусом гриппа,

лучаемые при этом рг-кокЛинолти наследуют от обоих- родительских

аммов полезные свойства: ареактогенкссть, генетическую стаОиль-

:ть донора аттенуоцки и стру.сгуру повгпхноетт/х антигенов эпи-

* *<г

■глчзского вируса. В настоящее время отим кзтедом подготовлена г; пользуются для профилактики гршпа у летеП мгакз гриппозтк кцины типа А(Н1И1) я А(НЗ>!2) (Л. Г. Руде ига к сочвг. , 198С. ЗЯ).Прл этом, существенным недостаткам ;снзых до послед-

го времени являлось отсутствие вакщю прстла вируса' г;чппа В. 3 язи с этим, только теперь иачаш исследования по размотке итериев создания полив-глентксП жлас-Л гриппозной ра'сшшы, созерцай антигены всех трех циркулируя®« » настоящее зре-ая. вирусов

гриппа А и В.

Таким образом, на сегодняшний день в Еакцинопрофилактике еь существуют проблемы, которые требуют своего решения. К числу те ких задач можно отнести принципы стандартизации к?-'дидатов в ваг цинные штаммы, совершенствование методов получения вакцинных ште мов , создание новых' типов вакцин, совершенствование критериев у эффективности для решения вопросов о преимущественном использсвг нии разных вакцин и выборе стратегии и тактики их применения кг у во. .зслыу. так и у детей дошкольного и школьного возраста.

Диссертационная работа являлась частью научных исследований прс одившихся для выл- .шения заданий государственных научнь программ ПИТ "О развитии направлений биологии и биотехнологии медицине" и "Разработка рекомбинантных вакцин . .лтив гриппа В" темы N 01.87.0083888 плана НИР Института вирусологии им. Д. И. Ива новского АМН СССР за 1987-90 и*. Часть исследований была проведе на в рамках Советско-американского соглашения о сотрудничестве -¿ласти медицины по проблемам вирусных гепатитов и гриппа.

Целью диссертационного исследования было получение ноеы „данных для совершенствования активной иммунопрофилактики гриппа детей путем сравнительного изучения запдатных свойств живой инактивированной гриппозных вшсцин, а также выяснения возможное? 1прльзования на практике ЖГВ из новых рекомбинантных вакцинны штаммов вируса гриппа Б.

Б связи с этим были поставлены следующие задачи:

- провести сравнительное изучение реактогенности, иммуноген ной активности и защитной эффективности живой и инактивированно: гриппозных вакцин у детей 8-15 лет, приготовленных на основе одного и того ¡ш сероварианта вируса гриппа А(1Ш2);

- оценить грививочные свойства первых рекомбинантных холоде-адалти* данных штампов В/14/5/1 и В/14/28/Р и возможность и: практического применения для детской живой гриппозной вакцины типа Б ;

- при оценке иммуногенной активности изучэемых вакцин карявз с традиционные! методами серодиагностики покменить более современные и чувствительные тесты титрования антител к ГА и НА.

Каучная новизна работы. Впервые организовано и проведено одномоментно среди детей 8-15 лет сравнительное изучение реактоген-яых свойств, иммуногенной активности и эпидемиологической эффективности живой и инактивированной гриппозных вакцин, полученных <а основе вируса гриппа А/4нлиппины/2/82( H3N2). Результаты иесле-зования показали, что несмотря на наличие существенных отличий 'риппозных вакцин в стимулировании гуморального иммунитета, ин-;ексы их эффективности в эпидсезон, обусловленный циркуляцией но-¡сго дрейф-варианта вируса гоиппа А( H2N2) были практически одина-ювыми: заболеваемость гриппом была достоверно снижена у привитых [ГЗ в 1,8 раза, а у привитых STD в 2,2 раза.

Изучение динамита показателей гуморального иммунитета, возившего вследствии вариации ЖГВ и IITB, и результаты, полненные ри реиммунизапии этих детей через год ЖГВ из нового дрейф-вариан-а вируса гриппа A(H2M2i, выя. или определенные преимущества живой риппсгной вакцины по показателям длительности сохранения пост-акцинального иммунитета и защиты от нового дрейфь варианта вируса риппа.

В строго контролируемом наблюдении была проведена сценка ре-ктогенных и иммунсенных свойств первых рекоыбинаятннх холодоа-аг.тировакних пггамков В/14/5/1 и В/14/28/? у детей 3-15 лет. Поденные результаты подтвердили предположения о возможности ^пользования метода генетической рекомбинации, ранее приг'энаеыо-) для подготовь вакцин типа А, при разработке вакданних штаммов фуса гриппа В. Результаты исследования позволили Комиссии по медийным штаммам 1'лнздрава СССР рекомендовать эти штаю-щ дня юизводства детской гивой гриппозной вагадош т:саа Е Кд штамм Б/ У28/Р в Комитет по открытиям и згаобрзтонпям СССР направлена за-¡ка на изобретение "Щгамм -R/14/28/P вируса гриппа В, используе-!й для получения яивой интренззалькой вакцины для детой", нрио-тетный номер 4Э54182/ 13 от 27.06.91 г.

Вервие для оценки иимуногешюй активности НТВ и КГБ в плане рмировачия специфических антител к нейрамчнидазе в пирогам наб-деник был использован лектин-тест, который раннео был рекомен-вая для антигенной идентификации нейоаминидазы вирусов гриппа А

и В. Результаты параллельного исследования парных сывороток в лектин-тесте и РПНА показали высокую специфичность лектин-теста и возможность его практического использования в широких серологических исследованиях для титрования антител к нейраминидазе вирусов гриппа А и В.

Теоретическое и практическое значение работы. Анализ результатов сравнительного изучения • ащитной эффективности живой и инактивированкой грш. озных вакцин, проведенный в ограниченное наблу :ении среди детей 8-15 лет,, не выявил существенных различий между эпидемиологической эффективностью этих препаратов. Шлучен-ные результаты указывают на целесообразность проведения аналогичного исследования в широком эпидемиологическом наблюдении. Для окончательного заключения о преимуществах и разрг1отки оптимальной тактики использования кивых или инактивированных вакцин необходимо организовать такое наблюдение в течение нескольких лет (56 лет).

Представленные Комиссии по вакцинным штаммам Минздрава CCCI результаты изучения прививочных свойств гандидатов в вакцинные ^штаммы В/14/5/1 и B/14/28/F позволили рекомендовать эти штаммь для производства живой гриппозной вакцины типа В и включения этого компонента в детскую гриппозную тривакцину (решение Комиссш ПГ> вакцинным штаммам ШЗ СССР от 15.03.1989 г. и 02.02.1990 г. соответственно).

Положения, выносимые на защиту.

1. Анализ результатов, полученных при сравнительном изучен» реактогенности, иммуногенной активности и защитной эффективное^ живой и икакгивироданной гриппозных вакцин из штамма А/Филиппинн/ 2/82 (H3N2) у детей 3-15 лет, поаволяет характеризовать их кг слабореактогенные препараты. Несмотря на гна^ителькое различие ЖГВ и ИГВ по показателям напряженности гуморального иммунитета, индексы эпидемиологической эффективности этих яукцин были удов летворительнмми, практически равными v сосуавули 1,8-2,2.

2. На ограниченных группах детей школьного и ■ дошкольиогс возраста показана ареакуогелность и высетач имк.уногенизд актиз-кость первых рекомбинантных холодоадаптированных вакииллых д. ;'6ju

з вирусов гриппа Е/14/5/1 и В/14/28/Р, что позволило нам рекз-чдовать их для практического .применения и включения в состав лисальнтной гриппозной вакцины.

3. Использование современных методов серодиагностики таких, к иммунофермэнтный анализ, реакция микрснейтралигаши и лектин-ст расширяет возможности оценки иммукогенной активности новых кцин и изучении коллективного иммунитета.

Апробация диссертационного материала и публикации. Результа-работц были доложены иэ XI Национальной конференции молодых ециалистов гигиеноэлидсмиологических слу.тС в г. Варна (Болгария) 1989 г.;на конференции иолодш ученых Института вирусологии им. JL Ивановского АМН СССР в 1989 г. и на Юбилейной конференции мс~ днх ученых, поезященпой 9С-'етию со дня рождения академика A.A. ородинцева, Ленинград, 1991 г. 3 завершенном виде диссертацион-? работа была долоте на на Совете по апробациям Института внру-логии им. Д. И. Ивановского 28 ноября 1991 г. •

По материала}.-! диссертации опубдиксЕано 7 работ в журналах и эрииках. Подана 1 залэка ка изобретение.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из зведе-я, обзора литературы, 4 глав описания результатов собственных следований, обсуждения результатов, вводов и указателя литера-ры. Работа иллюстрирована 10 рисунка™, 10 таблицами и излонена 133 страницах машинописного текста. Список литературы включает

О работ, из них 75 отечественных и 75 зарубезкных авторов. •.

*

СОЛЕРЖАНИБ РАБОТЫ Материалы и методы.

Вакцины. В работе были использована .^ивые гриппозные холодо-елтиросапные рекомбинантные вакцины (ЖГВ) - А/47/Ф (H3N2) и 47/S (H3N2), а также кандидаты в вакцинные штамыы вируса гриппа - Е/14/5/1 к В/ 14/29/Р, приготовленные в Институте эксперемея-Лснсй медицины проф. Г. И. Александровой и сотр. Вакцины получены

... - 8 -

методом генетической рекомбинации между хилодоадгптированнкми нораки аттенуации А/Ленинград/134/47/57 (Н2Н2) и B/JfeHHH! рад/14/17/55 с эпидемическими вирусами гриппа А/Филишхини/2/i (H3N2). Л/Сичуань/2/87 (H3N2), В/Знн Арбор/2/8о и В/СССР/3/87 =< ответственно.

Вирус гриппа В/СССР/3/В7 был получен и изучен в лабсратор; этиологии и эпидемиологии грмнна Института вкрусолоп им. Д. И. Ивановского АМН ССОР д. ы. н. U. А. Яхно с сотр. и рекомендс ван для получений рехомбиаан?яых вакцинных штаммов в 1988 г.

йноло-ччаскаа активность вакцин соответственно была равна 7,0; 7,3; 7,0 л 7,5 lg ЭИД/ЕО в 0,2 МЛ.

Яивые гриппозные взкглны перед использованием разводили дис тилированной водой в соотношении 1:2 в вводили интраназальио объема 0,5 мл. при помощи ¡распылителя жидких лекарстзенчь средств РДЕ-К4.

Еакцины А/47/Ф (n3N2), R/14/5/1 И Е/14/28/Р вводили дзукра! но с интервалом 21-23 дней; A/47/S (НЗИ2) -одаократно.

йнактивироааниая хронографическая гриппозная вакцин ;ИГБ). проипводотва Отнинского химического завода была пригс торлена из штаммов вируса гриппа, подобных эталонным штамма Л/йтшгакы/г/®* (. K3N2) к А/Щш'1/83 (H1N1). Вакцина содержал по 3,5 MiO'/O.l мл гемагглшинина каждого штаима.

Вакцину вводили подкожно в верхнюю треть плеча пс р. 5 мл. и 17,5 мкг. гемап илт-нича каждого вируса в дозь.

В iti^eci-32 контрольных препаратов к ЖГВ испольесвали дистк дирэванчук ectiy, к ИГВ - алирогенный физиологический раствор.

Детей прививали в соответствии с наставлением по применеии дивой гриппозной вакцины (МРТУ-42 Н 373-70). Есршфование груп детей ¿иле согаякзованп олучайчо-выборочным методом по принципа двойного контролируемого исследования. Единицей выборки был 1 ре беиок. .....

Оценку реактогенньи свойств ЖГВ и ЙГЗ пшводили в течение ■ дней после взедвниа препаратор, по наличии средних к сильны-/ тем г.еануриьас ргэкцчй, местных реакций и учету .тггаб де^ей.

Поихиваеасгть СВ 'A/Alr/S (H3N2) а носоглотке детей сар-де-л

и реизоляцией вакцинного вируса на 2, 3 и 8 дни после вакцинации последующей идентификацией в РТГА с набором диагностических сы-ороток.. Реизоляты получали путем ааражния куриных эмбрионов от-еляемым из носа привитых детей.

Иммуногенную активность Еакцин оценивали по уровню антиге-агглюткников и антител к нейраммнидазе в сыворотках крови, соб-аг-ых у привитых детей до начала прививок и через 3-4 недели осле их завершения. Антитела к гемагглютинину и нейрашниде > з зучали в реакции торможеш..! геьагглютинации (РТГА), иммунофер-ентноч анализе (ИФА), реакции микронейтрализации (Iffi) и лек-ин-тесте (ЛГ) соответственно.

Эпидемиологическую эффективность вакцин оценивали путем рас-ета разницы по показателям заболеваемости гриппом и ОРЗ в спитой и контрольной группах, а ^акже учету лабораторно подтвержден- -ых случаев гриппа при ретроспективной серодиагностике в период одъема заболеваемости в коллективах.

Статистическую обработку результатов выполняли на ЭВМ с ис-ользованием программ Microstatistic и Symphonla по общепринятым ритериям .

За время выполнения диссертационной работы было обследовано 230 детей 3-15 лет и 134 взрослых-добровольца, привитых гриппоз-ыми вакцинами или получившие контрольный препарат, сыворотки ко-орых были исследованы в 3-4 серологических реакциях. Эпидемиоло-ическая эффективность ЖГВ и ИГВ была оценена в двух детских оллективах , общей численностью 357 человек.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЯ

»

Изучение призивочных.. рвойств и защитной эффективности живой инактивированной гриппозных вакцин з сравнительном плане прове-ено в 1987-88 гг. в двух школах-интерната):.

»

Для получения полноценных результатов мы попытались срг&кя-овать единые условия проведения испытаний. Как живая гакцина /47/Ф(НЗМ2), так и икактивированная гриппозная вакцина били получены на основе одного эпидемического штамма А/Филиппин&'г/вг

(H3N2). При формировании групп наблюдения единицей выборки был ребенок. Таким образом, в каждом классе были дети, привитые какс -либо из вакцин или получившие контрольный препарат. При этом,не обходимо отметить, что перед проведением прививок вакцины и кош рольные препараты были зашифрованы сотрудниками ГкСК им. JL А. Таре севича до завершения работы в коллективах.

Анализ полученных результатов сравнительного изучения реак тогеаных свойств КГБ ИГВ показал, что у подавлявшего большие ТЕа детей самочувствие, в основном, не нарушалось и вакцинация н отражалас. ка посещаемости школы.

Два случая повышения температуры тела ьше -37,6' С поел повторного введения живой вакцины незначительно превысили 2,0 допустимых реакций, регламентированных требованиями, предъявляв мими к КГБ. Кроме того, они вряд ли были связаны с реакцией н вакцину, т.к. в сыворотках крови ¿¿их детей через 28 дней поел второй прививки не было обнаружено увеличение титров антигемагг ^¡отининов к вирусам гриппа ACH3N2).

У детей, ответивших повышением температуры на взедение ЖГ или ИГВ, слабовыражэнная лихорадка появлялась преимущественно и; 2-3 дни и сохранялась, как правило, не более суток.

Среди детей контрольных групп также имели место слабые температурные реакции (4,ОХ), причем их частота, время появленш и продолжительность не отлича ись от таковых у привитых.

Определенный интерес представляла оценка и местных реакци; при введении ИГВ детям.11-15 лет, так как этот препарат до момента проведения исследований широко применялся в пршстическом здра-вохранении только для профилактики гриппа у взрослых (Р.И.Васильева V. сотр ,193?; Н. IL Розаева и сотр. ,19S!d).

Местные- реакции характеризовались развитие: гиперемии и инфильтрата ка месте введения вакл'ины только у 1 ребенка (1,6?.). У детей контрольной группы местные реэкции отсу^сгвов.-гги.

При сопоставлении частоты рааЕИгня катаралычле явленкЛ со стороны носоглотки ч симптомов интоксикации у приьитмх и детей, получ?впих контрольны« препараты, также не выявлено досговерпы:: • различий.

- и -

Динамику специфических антител к ге¡.«агглютинину (анти-ГА) и йраминидазе (анти-НА) вакцинного вируса в ответ на введение иппозных вакцин определяли з РТГА, ИФА,реакции мякронейтрализа-и я лектия-тесте соответственно. Анализ полученных результатов представленных в таблице 1 показал, что независимо от пршенен-го нами теста, »«»активированная вакцина более интенсивно стиму-риваяа вьфаботку'спецкфических антител к обоим поверхности™ тигенам и у ?3,0£ серонегативных детей вызывала диагтостичсок. Л прост титров анти-ГА к ант-й-НА. У привитых киеой гриппозной хцшюй эти показатели были значительно ккяэ и составили сост-■тственно 38,0 и 31,0%.

Оценка частоты иммунных ответов к гемагглютияину и нейрами-[дгзе вируса гриппа А/Фшиппины/2/82( НЗМ2) выязила относительную ¡тономность иммуногенеза к калздому из поверхностных антигенов, зичем, если у привитых КГБ 'число сероконзерскй только к ГА или \ были практически одина.'<х>вьш (18,0%), то у еачцкниг»вакаых ИГВ га разница была существенной (34,0 и 15,0%).- Совпадение резуль-атов титрсгания парных сывороток з РТГА и те кг,;н-тесте в большем роцеате случаев наблхздали у детей, привитых ливой ваяцино", чем завизированной (63,0 и -53,0 соотгетстве:шо). Зги далкые указы-ают ка то, что при введении НТВ «формируется более полноценный лецкфнческий иммунитет.

Несмотря на значительное число 4-х кратных нарастаний титов анти-НА у привитых НТВ (73,0%) кы не выявили достоверных раз-ичий медду показателями СГТ до и после вакцинации (Ы2,2), з от-—

у'

ичие от соответствующих псказателзй в группе детей, приви^х"'ЗГВ ЫЗ,0). Модно предположить, что на эти покезатели тоалияло кеко-срое возрастное различие групп наблюдения, т.к.' чкактшфованной акцкной прививалй детей с. Л лет, а ЖГВ •■ начиная с 7-летнзго ¡Оораста. Воамолсно, предшествующий кснта;гг вссприюгчивсго орга-1иама с геыаггяташиаом определяет я последутиШ .ответ специфи-[ески/. антител к нейрвминидазз.

Отличие гриппозных вакцин в стимулировании урогш гуморэдь-юго иммунитета определило и различна показатели формирования соллекливнсго иммунитета у детей в предзшадемичоский сезон: практически все дети (90,0"), привитые ияатиеироваиисй гриппозной ккииной, и;.'?ли тягры акти-ГА и аити-НА ка задатком уровне. Еес-

иммунсгекнаи активность ливои и икактивированной гриппозных вакцин ио штамма А/Флдшшйны/2/52( НЗМ2) в РТГА, ИФА и реакции микронеР.т-раливапии .

Препарат РТГА ' №А Ш Суммарное Лектин-тес.'

--------------------------------------------------•------------------------------число(x)

исход, число сыво- исход, число сыео- исход, число оыво- серокок- у;с:'сд. чх-то сиво

титры роток титры роток титры роток версий по титры роток

антител (% с серо- антител (% с серо- , антител (% с серо- результатам антител <?. с серо-

конверси"^) конверсией) конверсией) 3-х методов конверсией

Кивая <1:20 47 (36,0) <1:200 а 44 (40,0) <1: 50 46 (17.0) <1: 20 25 (31,0)

гриппозная 30(38.0)

вакцина >1:20 37 ( 3.0) >1:200 40 (18,0) >1:50 33 121.0) >л. 20 7 (18,0)

Икактивиро- <1:20 31 '"4.0) <1:200 32 (66,0) <1:50 24 (83.0) <1: 20 И (73,0)

ванная грип. 38(73,0)

вакцина >1:20 27 ( 37.0) >1:200 26 (50,0) >1: 50 25 (21.0) £0 3 (24,0)

Контрольная <1:20 50 ( 4,0) <1:200 45 <1:50 31 ( 3,0) <1: 20 25 -

группа £( 3,0)

>1:20 43 >1:200 48 ( 4.0) >1:50 41 >1: 20 20 -

только ниже (73,0 и 71,02) эти показатели были у детей, привитых кивсй гриппозной вакциной и, практически, не изменялись у детей тонтрол чой группы (70,0 и 64,0 соответственно).

Эпидемическая кривая заболеваемости гриппом и ОРЗ в сезон 1987 -88гг. имела дьухволновый характер. Подъем заболеваемости острыми респираторными вирусными инфекциями в декабре 1987г. был эбумовлен преимуществеиной циркуляцией вируса гриппа В, подобного В/Вкктория/2/87.

С начала янвапя 1688г. рег-стрировали вторую волну подъема заболеваний, связанную с появлением нового дрейф-варианта вируса гриппа А(НЗИ2), близкого по антигенной структуре вирусам А/Сичу ань/2 /87 (НЗМ2) и А/Шапхач/11/87 (НЗИ2).

Учитывая особенности эпидемического сезона и антигенную структуру живой и инактивированной гриппозных вакцин, защитную эффективность этих препаратов изучали в период циркуляции в детских коллективах вируса гриппа А(Н5М2).

Профилактическую эффективность живой и инактивированной гриппозных вакцин изучали в каждом из коллективов, используя разные методические подходы.

В коллективе 1 в течение всего эпидсезона осуществляли активный сбор и регистрация справок о причине отсутствия детей на занятиях. Для расшифровки этиологической структуры заболевания от части переболевших детей в период реконвалесценции были взяты пробы крови. Из разработки были исключены все случая лабораторно подтвержденного гриппа В.

В коллективе 2 у всех детей независимо от примененного препарата перед подъемом респираторных заболеваний и через 2 месяца

>

после его окончания были взяты парные сывог 'ТЮ! крови для ретроспективной диагностики гриппа В и гриппа А(НЗМ2). При подсчете коэффициента эпидемиологической эффективности учитыпзли только случаи лабораторно подтвержденного гриппа А( НЗМ2). Анализ полученных результатов приьел к следующему заключению. Несмотря на -¿о, что но своим способностям стимулировать выработку гуморального иммунитета у детей живал рекох^иначтная и инактивировакная гриппозная впкцкна существенно отличались, показатели эпидемиологической эф-

. - 14-

фектнвности изученных препаратов были практически одинаковыми: заболеваемость детей во время эпидемического подъема острых респираторных вирусных инфекций sa счет снижения гриппа у привитых инактивированной гриппозной вакциной была ниже. в < ,7 -1,8 раза, а у привитых КГВ в 1,6-2,2 раза по сравнению с ваболеваемостыо в _ кснтролыюй группе, результаты представлены в таблице 2.

Сравнительный анализ длительности сохранения гуморального иммунитета в ответ на вакцинацию живой или инактивированной грип-познь. м вакцинами показал, что в течение года (48 недель) уровни средних геометрических титров антител' (СГТ) к вирусу А/47/Ф (НЗ! 1), входившему в сос.ав вакцин в 1987г., сохранялись у привк- . тых ЖГВ на поствакцинальном уровне 4,3-4,7 log2, тогда как у привитых ИГВ выявлено достоверное снижение СГТ с 5,9 до 6,1 (t «2,9).

Длительность защитного действия живой и нкактизироЕанкой гриппозных вакцин в сравнительном плане определяли путем анализа результатов отдаленной реиммунизации детей живой рекомбинантной гриппозной вакциной A/47/S из нового дрейф-варианта вируса гриппа А( НЗМ2), эпидемическим родителем которого был штамм А/Сичу-ань/2/87.

. Бьио показано, что несмотря на введение детям в 1988г. инг-рэ"азально вируса A/47/S (ИЗМ2), отличного от вируса А/Зилиппины/ 2/82 (H3N2), входившего в состав МТБ и ИГВ в 1987г., от привитых ранее любой из вагдан рекэолировали вакцинный вирус в несколько меньшем числе случаев, чем от детей, впервые привитых айвой гриппозно'! зак:деной: 67,0-73,0£ и 83,0% соответственно.

Результаты реизоляции вакцинного Еируса от детей с различным прививочным анамнезом подтверждаются также данными, полненными при изучении ответа специфических антител: к васцинному вирусу A/V7/S или А/Сичуань/2/87 (H3N2) мы не наблюдали различий по показателям сероконверскй упзронегатквиых детей, имевших различный контакт с вирусом A(H3N2). В то же время к зиоусу А/Силиппикы /2/82 (H3N2) регистрировали различия в интенсивности кардстакия антител в зависимости от группы. Среди серонегативкых детей, привитых ранее йГВ, ешю выявлено такое число 4-х кратных нарастаний

Таблица 2

Эпидемиологическая' эффективность живой и инактивированной гриппозных вакцин из штамма А/Оилиппины/2/82 (1131)2) у детей 8-15 лет в эпидсезон 1987-88 гг.

оллектив Кол-во Суммарная Лаборатсрно /13-1* ИЭ-2*

етей Препарат детей заболевае- подтвержден (1) (Ц 1

в груп- мость с диагноз

пе диагнозом грипп А

грипп, ОРЗ (1Ш2)

абс. 7. абс. %

ЖГВ 79 15 19,0 и 6(1,7)

¡оллектив 1 НТВ 57 10 18,0 1, 7(1,8)

Плацебо 89 27 30,0

ЖГВ 46 12 26,0 2,2(3,4)

йллектиа 2 ИГВ 40 13 33,0 1,8(2,5)

Плацебо 50 29 58,0

113-1* (;:) - индекс "Активности по данным суммарной заболеваемости

(критерий достоверности разницы) ИЭ-2* (I) - индекс эффэктнвности по данным лабораторной диагностики

итров антител, как и в контрольной группе (67,'бх), тогда как у рквитых ранее ЯГВ этот показатель был значительно ниже (47,0%), го свидетельствует о сохранении более длительной защитной эффектности ЖГВ, таблица 3.

Большее число сероконверсий к вирусу Л/Фйлиппи1;ы/2/62 НЗN2) у детей всех наблюдаемых групп, по сравнению с вакцинном ярусом, возможно обусловлено предгествующим контактом детей во ремя своей жизни с этим вирусом, который в отличие от Л/Сичуань/

• - 16 -

2/87 (НЗМ2), уже циркулировал ¡1 человеческой популяции с 1682 года.

Таблиц- 3

Иммуногенная активность вакцинного шгшле А/47/Б у детей 8-15 ле с различным прививочный анамнезом

Число сероконворспй з РТГЛ к вирусам

. наб—ддения титры А/47/Б (11342) А/& диппины/2/82 (НЗМ2)

антител

число число

лиц 0 &Г1 г лиц в абс. г

> группе группе

. 2ц-В (1987) и <1:20 35 10 29.0 15 7 47,0

• НТВ (1388) *Л:20 9 - - 29 6 21.0

в целой 44 10 23,0 44 13 30,0

.ИГВ (1687) и <1:20 22 5 23,0 С 6 07,0

.ЕГ (1983) 13 2 15,0 ,26 5 19,0

в целом 35 7 20,0 35 11 31,0

. Плацебо (1087)и <1:20 ---«5----- 20 5 25,0 9 6 67,0

. ГЕГЗ (1988) 5-1:20 2 1 50,0 13 О 15,0

в целом 22 6 27,0 22 0 36,0

.Плацебо (1987)и <1:20 17 м X 6,0 11 - -

плацебо (1988) >,1:20 6 - - 12 -

в цчлом 23 1 4,0 23 - -

Контрольное изучение длител»ности сохранения поствакцинального иммунитета через 20 недель после вакцинации показало, что динамика уровней средних геометрических титров антител (СГТ) у привитых 2 года подряд пс схеме КГЗ+КГВ или ИГВ+ЖГВ (4,0-3,9 или

4,8-4,9 1о£2) имеет кеныауэ тенденция к сшганию, чем у детой» привитых дивой вакциной впервые (3,8-3,4 1ое2). Эти результаты подтверждают полученные ранее другим исследователями данные о целесообразности проведения прививок против гриппа в течение нескольких сезонов для достижение стойкого противогриппозного иммунитета.

Такм*' образом, на основании полученных нами результатов сравнительного изучения прививочных свойств и защтной Реактивности живой рекомбипантной холодоадаптированной гриппозной вглще-иы А/47/С- (1Ш2) и инактивированной хро^а-ографичоской цельноки-рмонной вакцины в одномоментном контролируемом испытанич па ограниченном контингенте детей 8-15 лет, можно сделмь .. зашшчение о преимуществах .1 недостатках обеих препаратов. Эа живую вакцину свидетельствуют следукгцие дальне: более п. остой и доступный всем способ введения - тггглл^ааш/й: избирательность приживаемости в носоглотке только у неп^'унных лиц; ареактоген-ность препарата у взрослых и детей 3-15 лет; полис-ценность ¿ср.у-рсвания иммунного ответа к обоим пизерхксугнкм антигенам вируса гриппа и более длите ль !юе сохраните поствгкцикалыюго комитета; более эфЗектпзнзг. залита о? новых лрейф-запиалтэп вирусов гриппа; несколько безео вырзпгнная ешюенкся'тпчзская зф^этив-ность по сравнению с ИГЕ, Я основны-' преимущества:.", ингу-тиги^овя.;-!«ой зэ,1сцнны необходимо отнести: однократное применив и ?нт-:и-т&ль.чо выраженную иьсчунсгеннук* активность. При этой необходима отметить, что цельновнрионнгл ивясявироззянс.''! гьчздккс р.ызн?.а.'а вначнтелиюе количество нежелательных, "¿стя ¿-' слгЗк:-: ?<еат:шх ж— акиий.

В последние годы в СССР ведутся работы по созданию »двоя гриппозной вшодпш типа В из егшдов, получзе.\мх путем регайикз-иии зпидемичес1сих вирусов с тем или иным декором агтечуацик- устареваю* ва^ликным етэммом, бегяреднкм для людей (Г. 'А. Алскгандро-вг и ссапт. 1984, Ы. А. Гордон. 19?5ь

Учитывал это обстоятельство при получении аттемуирозаншх рекомбинантсв вируса гриппа типа В мсяользсзалк з лчестг? донора

аттенуацки колодоадаптнрованный штамм В/Ленинград/14/17/55,- подготовленный ранее ¡сак ЕакциьныЛ стаым для специального варианта хпвой гриппозной вакцины для детей (Т. Е. Медведева и соавт., 1989).

На основе этого донора сотрудникам,, отдела вирусологии Инс-ти. /та экспериментальной медицины АМН СССР были ^подготовлены 2 рексмбикантных вакцинных штамма для детей 3-15 лет ВЛ 4/5/1 и Е/14/28/Р. При этом в качестве родительских эпидемических штаммов были использованы В/Энн Арбор/1/86 и В/СССР/3/87 соответственно.

В ходе астолиения диссертационной работы изучение реакто-reHHL : свойств v иммуногеш ж активности вакцинных штаммов В/14/5 /1 к Р/14/ /28/Р было проведено в контролируемое наблюдениях сна-U.X.K3 у взг -лш, затем в детских коллективах. П^ч отсутствии побочны/ реакций и калсб на введение препаратов, исследования про-' должали у детей школьного возраста и 3-7 лет.

Оба рекимбигчнтаых штамма вируса гриппа В характеризовались арсактогенчыыи свойствами у взрослых добровольцев к слабой реак-тогеннослью у детей 3-15 лет. Показатели веактогенности, т.е. повышение температуры, местные субъективные симптомы, а также субъективны? жалобы на недомогание, головную боль, насморк, кашель в группе привить:;-: детей не отличались от соответствующих показателей в контрольных группах и пе превышали допустимых 2% средних и сильных температурных .реакций, регламентированных в требованиях, прс-,Г' Т2Л:,е;.!ых к хивым гриппозны.1,, вакцинам. Низкая реактогенность, как показали ч&им результата г.вляется одним из важных преимуществ этого типа гршш^знь::-; вакцин.

Оценку ..имуногенной активности рекомбннантных Еачцинных штаммов Ь/14/5/l и B/14./28/F проводили в 2 возрастных группах- 815 лет и 3-7 лет. Число выявленных сероконверскй у серонегативных детей называет на выраженную иммуногенную активность этих вакцин. 5 01,0% детей, привитых штаммом В/М/5/1, и у 77,0%, привитых uia-vtrtj;- ¡>14/ 2d/P, были зыяв„\;;:ы 4-х кратные и более приросты специфических тпт:»сп аити-ГА и у Е'1.0% привитых Е/1-.'/28/Р -сср.-'Криверсиг. здтктед к нейрачинкдазе. Однако, имиуногышад ак-тиш;.гзть этих отжимов у детей назального возраста ыа'ште::ьно отличалась при наличии высоких показателей у д^тей П-7 лег. Процент

еерокоиверсий у всех.школьников, привитых штаммом В/14/5/1, составил только по результатам РТГА- 42,0, УЛЛ- 25,0, микронейграли-аащш- 42,0, а суммарно по результата),! 3-х реакций- 58,0. В то время как'штамм В/14/28/Р стимулировал выработку специфических анти-ГА у школьников в 80,02 случаев по результатам РТГА. Эти результат1" представлены в таблицах 4 и 5.

Так"ч образом, при сохранении арэактогенных свойств'вакцинный штамм В/14/28/Р обладал более выраженной кммукотндей активностью особенно у детей школьного возраста.

Анализируя причину этого различил ¡<ы предположили возможное влияние одного или .нескольких факторов на икмукогенную активность живой вакцины:

1. Не исключено, что эпидемический штамм В/Энн Арбор/1/85 слабо иммуногенен. Косвенно в пользу этого предположим свиде4ел>сх1зу-ет тот. Факт, что В/Эьн Лрбор/1/36 является темгерат; ючуче-твителькым в отличие, например,- от штамма В/Англия/£б08/7б. ксто-' ' рый был температурорезистентным и "• обеопач^гвач больший процент серсконверсий, индуцируемых полученным на его основе (при использования того же холодоадаит"поБанного донора) регсомбичантом (А1ехапс1гоуа 3. I. ,1906). ■ ' ■'

2. Не исключено, что низкие показатели серсконверсий у привит« рекомбинантом ВЛ4/5/1 лзляотсп следствием его низкой инфекцион-иости для ждей, что, вообще, сзойс.зенно соврем&пньм еггаммам вируса гриппа типа К

Сравнительное изучение генетического анализа вакцинных ата^агав В/14/5/1 и В/14/2&.Р выявило отлично в наследовании генов эт донора аттенуацчн: рекомбинант Е/14/5/1 унаследовал ст виру-иентногс родителя гены, кодирующие гекагглютанкн, нейраминндагу и 'елок N3; з то время как Б/14/28,? ~ только гены, кодирующю ге-лагглютиник и нейрашчидазу.

3. Наследование генов 5-6, кодирующих негл;»козилиро?лн1 к а от донора аттеиуаши, как этого требуют условия подготовки отмбинамньк.ьтамюв типа А, . зозмо.тко, не обеспечизает получения ¡остаточяо антигенного г.рельрах.?. пробив гр:-"пг;а гл;а 3.

Считаем, что першее г.рчдпололэнпэ было подтверждено нашими

Результаты изучения иммуногенной активности вакцинного штамма вируса гриппа ЕЛ4/5/1 в РТГА. реакции микренейтралигации и иммуноферментном анализе у детей 3-15 лет

Группы Исходны* После 1- ой вакцинации ■ После 2-ой вакцинации

. ПОиаЦЦЦСПУШ тел в МИ число сывороток процент с серокоиЕерсией в Реакции РТ'гА МН ЧФА Суммарно число сывороток процент с сероконЕерскей. в реакции РТГА Ш ИФЛ Суммарно.

. ПрИВИТЬЙ . двукратно » . ЖГВ В/14/5/1 3-7 нет <25 24 54,0 г.Г( о и 50,0 63, С 18 50,0 72,0 44,0 72,0 .

-<8-15 лет <25 45 27,0 » 31,0 "8,0 39,0 24 42,3 42,0 25,0 58.0 .

3-15 ¿ет <25 7о 35,0 40,0 22,0 47,0 42 45,0 55,0 .33,0 54,0 .

8-15 лет >25 18 11 0 17,0 22,0 22,0 14 21,0 29,0 23,0 о£,0 .

. Контрольная .группа вое деТ1' 75 3,0 4,0 1.0 5,0 ЬЗ 2.1) 2,0 8.0

Результаты изучения иммунсгеичсй активности вакцинного штампа вируса гриппа В/14/28.Р у взрослых, учащихся ПТУ и детей 3-15 лет

Группы Ксл-во Нарастание титров антител в 4 и более раза г реакции

наблюдения ЛКЦ Б РТГА Лектин-тесте

груш*'?

в целом с исхсдко- низкими В целом с исхолио- низкидо

титрами антител (-¿1:10) тиграш ант тел 1С).

число число

абс. % сывороток аЗс. 7. абс. 7. сывороток абс. 7.

Лзукре.тко привитые В/14/26 Р ■

1ЙрОСЛК2-ДОбрОВОДЬЦЬ! 19 13 63,0 19 13 68,0 4 21,0 4 1 25; 0 .

Учащиеся ПТУ и

добровольцы . 61 18 30,0 28 15 54,0 7 12,0 11 3 27,0 .

/¡ети 3-? лет 50 21 42,0 17 74,0 16 32.0 37 15 41,0 .

Дети 8-15 ,чет 70 34 49,0 £5 20 СО.О 27 зг.о 25 I7 65,0

Де'ги 3-15 лет 120 55 45.0 48 37 77,0 42 36,0 63 32 51,0 .

1СонтрйЛЬЧМ группа

Учоиуося1 ПТУ 32 ' - • 9 - - - - 13 - -

Дети 3-15' лет 118 4 3,0 46 о 7,0 с 4,0 ' 64 / ч 6.0 .

результатами изучения двух рекомЬикаигных шташов вируса гриппа В, при ьазрлбстке которых, были испэльговг&ы разиые эпидемические штаммы Е'Энн Арбор/1/86 И В/СССГ/3/85.

Несмотря на то, что рекомбинант Е/14/28/Р унаследовал от вирулентного родителя только гены, кодирующие гемагглхяинйн и не-иршинидазу, он оказался более имыукогенным. Эта подтверждает выводы о достаточности только этих двух генов от вирулентного вггам-1" ма для оЗесчзчзкия высокой имчучсгешюсти, полученных прг падгтоЕхе аггаммор типа А, С другой сторона, наличие более высокой яммумс]енмссти у этого штамма свидетельствует о том, что им-муноголно'ггь вакцинных ютакмов такого рода прежде всего зависит от иммучогочннх свойств поверхностных антигенов вирулентного родите лл.

Нэлучгнике результаты реактогенннх ч иммуногенных свойств^ вакцинных штаммов 1У14/5/1 и В/14/23,Р были представлены Комиссии но гакцинным штаммам Минздрава СССР.

Решениями этий Комиссии от 15 марта Я589г. и от 20 февраля 11'9Сг. ш.сак/ы рекомбпнанты 3/14/5/1 и В/14/28/Р, полученные на ос-чо"с- донора етеенуациа Е/Лепйнгг-ЗД/14/17/55 и эпидемических штаммов Ь/5нк АрСор/1/а5 и В/СССР/5/87, были рекомендованы б качестве вакцинных для яригсголкиш амвой рекомбинантной холодаадаптнрованчой гриппозной вакцины ' типа В для детей. При этом та.<м р-'^-'б/! баг, пореым рекомбккаатиым штаммом вируса гриппь типа Б, подложенным практическому здравоохоанению для производства инеой гриппозной аакиины для дот&й.

Та/.'дм образом, полученные' в данном исследовании результаты изучения прививочных свойств рекембинантных штам.,1ив вирусов гриппа Б подгвер^аот яовмоа-ность полония вксокоиммунних' рекомби-налтов на с^ногх; г:ы2ра?тенуирог;з;:ного донора аттекуации, при условии е<:ли геном реко:.:0ин?:па вкпечае! наряду с мутаиткыми •¿нухреняиыи генами полноценные гены гемагглетинина я чейракянида-зы от Г;ярулент!:ого злид'.'мчческсго вируса

, При ¿п.ч чении имьуногояноА акхкыгости ик&кшвиосваниой и гл-йих- гр1;ппо£чнх-вакц!М чаояду с традиционным методом 7ГГА, и работа были применены и со&ромзкны.; методы сбоодлагкостики: иммуко-

^.ферментный анализ, реакция иикронейтрализации и лзктин-тест. <

Е нашей работе было показано, что тест микронейтрализацни зируса з культуре ВДСК более чувствителен к выявлению антитэл к вирус/ гриппа В, чем ИГА. В то же- время, несмотря на орсю высокую специфичность, он оказачся менее чувствительным при выявлении антител к вирусам A (H3N2) .

IIpi. титровании сывороток от привитых ЖГВ к ИГВ типа А в РТГА, ИФА t. микронейтрализацни нами показана большая 'чувствительность иммунофермектяого анализа и более высокая специфичность реакции микронейтрализации: т.к. бс& случаи сероконверсий, выявленные этим методом подтверждались двумя другими, т.е. либо е РТГА, либо В ИФА.

Выбор лектин-теста для решения вопроса о нейраминкдазцой активности гриппозных вакцин сделан после того, как были получены результаты титрования парных сывороток от привитых детей разным*.! типами гриппозных вакцин в РПНА и лектин-тесте: положительные результаты (наличие сороконверскй) з лектин-тес-хе были педтверэдены г РГО1А на 63, ОХ в группе привитых ИГВ; на 59% и 48%- в группах привитых ЖГВ типа А или В соответственно, результаты представлены в таблице 6.

Результаты титрования сывороток, не имевших 4-х кратного прироста тмтров антител в лектин-тесте полностью подтверждались и в РПНА во всех наблюдаемы« гоуппах. В целом, процент совпадения результатов обеих реакций составил 72%, коэффициент корреляция 0.6.

Таким образом, проведенные исследования подтвердили принципиальную возможность использования лектин-теста для оценки имму-ногекности вакцин б с-ноиекии НА Этот тест рекомендуется нами как для определения и;.вдукогенности вакцин в отношении НА, так и для определения уровня коллектгЕного иммунитета.

Таблица 6

Сравнительное изучение нейраминидазной активности гриппозных вакцин у детей в FJTKA <j лектин-тесте

. Группы наблюдения Совпадение результатов ЛТ и РПНА у привитых типа А ' КГВ типа А НТВ типа В Плацебо

число чио ю сыво- абс. сыво- абс. роток (Z) роток (%) число СЫВО- абс. роток ( X) число сыво- абс. роток, (%)'

.Сньороткч с се р еконверсией и .декткн-тесго 16 10(63) 13 9(69) 23 11(48)

. CuBopoTi'vH отркца- >

. тельные по

резулм атаы

.лектин-теста 4 .4(100) У 7(100) 13 13(100) 12 12(100)

В целрм 20 14(70) 20 16(В0) 36 24(66) 12 12(100)

ВЫВОДЫ.

1. Гпервие организовано и ьроьедено одновременное сравнительное изучение ариьиЕзчных свойств и защитной эффективности татой ( :::r>ïj и ичактивированной (Ш'В) гриппозных вгжцин, приготовленных 'из urr&rffn А/<Гиj.иппини/г/ВЦ. (Н3'!2) у детей 8-15 лет.

Частота, иктеьсиэьссть и длительность проявления клинических реакций на лие?-,ииие вакцин как у двукратно привитых КГВ, так и у однократ ¡о приват /,:"В хг.ракг<рйзуиг вамики- кгс слаиоренкто^н-

.ике препараты, соответствующие медико-биологическим требованиям.«

2. ИГЕ более активно стимулировала • выработку специфически антител к обоим поверхностным белкам вакцинного вируса. У 73,ох привитых ИГВ обнаружены сероконверсии к гемагглютиг.кну и чейр?мн-нидазе, в то время как у прилитых НГЗ эти показатели Оыли равны соответственно 33,02 к 31,02.

3. Ь-смотря па различие сравниваемых вакцин по иммуногенной активности, . индексы кх япидемиологической эффективности быта, практически одинаковыми, равными 1,6-1,8 по клинической диагностике гриппа; и ОРЗ и 1,8-£,2 по данным ллборатсркой диагностики гоиппа. Незксокий уровень показателей эпидемиологической с-^й^ктив-уости связан со значительным антигенным отличием эпвдежческого вируса грилпа А(ИЗН2) и вак"чкяого штамма.

4. Анализ уровня поства:шкналыюго имукитета в динамита выявил определенные преимущества живой Гриппозной вакцины по показателям длительности его сохранения и заняты от новою дрейф-варианта вакцинного вируса гр.1ш:.а через год после привязки.

о. Высокие показатели рс-ичсляции вакцинного вируса А/47/:; (1-Ш2) - 67,0-88,0% при отдаленней ре'.ид/уяизадки детей, и^ршиг различный предшествующий контак. с ' вирусаш гриппа А( ИЗК2), а такта характерная для вирусов гриппа подверженность к чаемч дрейф-изменениям, свидетельствуют о целесообразности ревакцинации детей в течении нескольких лет д/я достижения стойкого углунитст-...

6. Изучена »реактогенние к иммучогеннне свойства первых век-щшных штаммов вируса гриппа Ь - 11/14/5/1 и В/1<*/28/Р, подготовленных с использованием метола генгтичеекгй рекомбинации. Полученные результаты хараетеризуют препараты как слаоореактоген-нке с достаточно вырпчошюй и:.»<уногбкной актиз:;сстыо у детей 3-15 'лет, что позволило рекомендовать их для внедрение в произведет:-'; детокой .тавий гриппозной вакпикк -г/ла В.

7. Сравнительна* оценка кммуногеикыу свойств рекомСинантов Ь /14/5/;, и Б/14/ЯЗ/?, лрч1 йтпьлеж-х чп сснове донора аттен>ацич 3 /Ленинград/!4/1"/о5 г. ачгньп: злидг^чееккх стазов - ЕЪ'ч Арбс^ /1/с;1 "-1 3/:?'В/о'. что имм~*погеьнэл акчиччооть гег.оу-би:гжго? р птСг-'-оК ^ази;:.-;г а? ' а^обзитогг^й псе ¡у г ..с

белков вирулентного родителе.

В. Анализ частоты выявления диагностических приростов титров антител ььивкл специфичность и большую чувствительность КФА при оцгчке ишуногенчьк свойств гриппозных вакцин типа А п сеакции никрсьейтр&ккйации при изучении гриппозных вакцин .уипа Е Использование этих »п-одой расширяет воаксгиости изучения приь«ьочаых еьойстъ и заадтной аффзктивкоотн ьгик Е&кцин и может быть рекэ-«еидэване длк г.ичктического прикои-мшя,

п. Бперв1>! дл» изучен.«! пнтикейракатида&ной активюети гриппозных лак.ц-,.к, к:».с->5ду с РПНА бил ам;>око зоиюенен лектин-теот. Результаты -ХЧТрСВсМИЯ ЭТИ« ЫЗТОДОУ сызороток ДуЮЙ, ЛрНЕИТЬГХ гриппозными рг^едиами игл пояучавЕИХ контрольный препарат, доказали специфичность и Со..:ее высокую чувствительность локтин-теста... Учитывая также простоту постановки, лекткн-тее? может быть рекомендован для проведения широких серологических исследований при игу- • чечии пммуногечкостп противогриппозных иммунопрепаратов и колл-э 1<: гизного иммук,.тсп а

*

Опясог работ, опубдмкоьагшых но теме диссертации:

1. Т. V,. Медзэдена, Л. ¡0. Егсров, Л. И. Клм.оз, С. С. Унанов, Н. В. Кланов*,, КБ. Еыродоь, - А. К Слеяушкик. й П. Сбросова-Серова, Е. И. Бурцева, Г. Я Александрова.-Атт»нукровенньй рзкомбикант вируса гриппа В, л*,лученный при скрещивании вируса В/Эин Ар5ор/2/8б с холодоадаптированныч ктаыком ВЛчешшград/л4/17/55//Вопр. вирусологи). -1 989. -К5. -С 564- ЕНО

2. Е. А. Говоркова, Н. П. Обросоиа-Серова, Е-И. Бурцева, А. М. Махов, А. Н. Слепуакчн. -Сцетпа иммукогенности вакцинного ита^-й В/14/5/1 для даой рекоубинзнтнэй гриппозной вакцины у детей дошкольного и школьного есвс-аспа/.'Сб. науч. трудоз Свердловского НИИ вирус ны;; инфекций. -С. ,1360. - С. 35-40

3. А. II Слепу'кин, . Н.П Обгосова-Серова, 2. И. Бурцева у. др. -Сравни, гльное изучение прививочных свойств г,ашой рекомоинант-ноЛ у инактиБировакнг.й грипг.Оонех Бакл.н Л(НУМ2) из опного того

I ■

«£■ штамма вирусе', у детей лет//Еощ>. вируссюгчи.-1931.-С.

372-374 . \

4. E. Ii Бурцева, Е П. Обрссозл-Серова, Е. А< Говоркова и др.-Сравнительное изучение защитных свойств ..живей рекомйшантной и ииактивированной гриппозных вакцин А( H3NP.) из одного и того m штамма вируса гриппа у детей 8-15 лит. //Там те. -С. 375-377 • '

5. Ч. И. Бурцева, А. Н. СлеПушкин, H. П. Обросова-Серова и др. -Прививочные свойства кандидатов в вакцинные штаммы живой гриппозной вакцины для детей. //Труды Vl-го БНО&МП. - Н. Новго-'. род,1991. -С. 165-166 • •

6. Б. Т. Иванова, А. Е Слепушкин, Е. И. Бурцева и др. - Выявление антинейрамикидазных антител в сыворотках вакцинированных о использованием лектин-теста//Бопр. вирусологии. -1391. -Кб. -С. 460-471

7. N. P. Obrosova-Serova, А, N. Slepushkm, А. P. Kendal, M. W. 'Harmon, E, I.BurtsevE. ¿t al.-Evaluation in children of cb"'i-adapteJ influenza В live attenuated intranasal yaccine prepared' by réassortirent between vi Id-type й/Ann Arbcr/1/86 and cold adapted-3/Leningrad/14/55 virusesZ/Vaccine. -1990. -Vol. 8. N2. - P. 57-60