Автореферат и диссертация по медицине (14.00.29) на тему:Инфекции при гемобластозах и депрессиях кроветворения: клиника, диагностика и лечение

ДИССЕРТАЦИЯ
Инфекции при гемобластозах и депрессиях кроветворения: клиника, диагностика и лечение - диссертация, тема по медицине
АВТОРЕФЕРАТ
Инфекции при гемобластозах и депрессиях кроветворения: клиника, диагностика и лечение - тема автореферата по медицине
Клясова, Галина Александровна Москва 2009 г.
Ученая степень
доктора медицинских наук
ВАК РФ
14.00.29
 
 

Автореферат диссертации по медицине на тему Инфекции при гемобластозах и депрессиях кроветворения: клиника, диагностика и лечение

□ □34 (

На правах рукописи

Клясова Галина Александровна

ИНФЕКЦИИ ПРИ ГЕМОБЛАСТОЗАХ И ДЕПРЕССИЯХ КРОВЕТВОРЕНИЯ: КЛИНИКА, ДИАГНОСТИКА И ЛЕЧЕНИЕ

14.00.29 - гематология и переливание крови

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Москва 2009

003477170

Работа выполнена в Учреждении Российской академии медицинских наук Гематологический научный центр РАМН

Научный консультант:

доктор медицинских наук, профессор, академик РАН и РАМН А.И.Воробьев

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАМН Б.П.Богомолов доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАМН И.В.Подцубная доктор медицинских наук, профессор Л.Г.Ковалева

Ведущее научное учреждение:

Учреждение Российской академии медицинских наук

Российский онкологический научный центр им. Н.Н.Блохина РАМН

Защита состоится 2009г. в ^/^часов

На заседании диссертационного совета Д 001.042.01 при Учреждении Российской академии медицинских наук Гематологический научный центр РАМН по адресу: 125167 Москва, Новозыковский проезд, дом 4

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Учреждения Российской академии медицинских наук Гематологический научный центр РАМН

Автореферат разослан ¿¡¿^/Л^-^ 2009 г.

Ученый секретарь диссертационного совета кандидат медицинских наук

Е.Е.Зыбунова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы

Инфекционные осложнения являются ведущими у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения. Инфекции у них характеризуются рядом особенностей, которые включают скудность клинических проявлений, стремительность в развитии, полиэтиологичность. Они являются неотъемлемой частью такого полисиндромного заболевания как цитостатическая болезнь [Воробьев А.И., 1972]. Течение инфекций в период критической нейтропении может быть фатальным, если не начата своевременно терапия эффективными антибиотиками. Спектр микроорганизмов, ответственных за инфекционный процесс у больных, периодически претерпевает изменения. Так в 70-е годы преобладало выделение из крови грамотрицательных бактерий, в 90-е годы - грамположительных, а в настоящее время вновь появилась тенденция к увеличению роли грамотрицательных микроорганизмов в этиологии сепсиса [Schimpff S., 1971; Klastersky J. 1997; Velasco E., 2004; Norgaard M., 2005]. Что же касается инвазивных микозов, то в их структуре за истекшие годы существенно уменьшилась частота выделения грибов рода Candida и возросла доля Aspergillus. [Groll А., 2002; Barnes P., 2007].

В выборе противоинфекционных средств постоянно возникают ограничения не только из-за изменений в спектре патогенов, но и по причине формирования новых механизмов резистентности бактерий. Нередко лечение антибиотиками, эффективность которых была подтверждена исследованиями в 90-е годы, становится неуспешным в настоящее время. Резистентность микроорганизмов, выделяемых у больных с нейтропенией, как и их спектр, может различаться в отдельных странах и в отдельных клиниках. В этой связи крайне важным является изучение этиологической структуры возбудителей сепсиса и их чувствительности к антибиотикам в современных условиях. Полученные данные необходимы как для разработки тактики эмпирического назначения антибиотиков, так и направленной антимикробной терапии при программном лечении гемобластозов и депрессий кроветворения.

Наряду с регистрируемыми переменами в структуре возбудителей сепсиса и их чувствительности in vitro к антибиотикам, произошли изменения и в клинических проявлениях инфекционного процесса, в методах диагностики, в эффективности антимикробных препаратов. Проблемными стали другие инфекции, и такой инфекцией, наряду с грамотрицательным сепсисом, является инвазивный аспергиллез. Именно грамотрицательный сепсис и инвазивный аспергиллез легких являются ведущими и наиболее тяжелыми среди инфекционных осложнений у иммунокомпрометированных больных в настоящее время. Их значимость определяется тяжелым течением, удлинением периода госпитализации, высокой летальностью, немалыми финансовыми затратами на лечение. Сепсис - генерализованный инфекционный процесс и неотъемлемой частью его, наряду с инфекцией, является синдром диссеминированного внутрисосудистого свертывания, проявления которого были широко изучены в ранее выполненных научных работах [Воробьев А.И., 1985, 2006; Галстян Г.М., 2003], в то время как многие аспекты противомикробной терапии, диагностики в современных условиях этих наиболее тяжелых инфекций нуждаются в совершенствовании.

Также следует отметить, что в литературе, как правило, обсуждаются отдельные вопросы диагностики и антимикробной терапии инфекций у иммунокомпрометированных больных. В то же время, очевидно, что решению указанных задач может способствовать лишь углубленный совокупный анализ спектра возбудителей сепсиса, чувствительности их к антимикробным препаратам, современных подходов к диагностике, клинических особенностей тяжелых инфекций и прогностических факторов, влияющих на эффективность

лечения. При этом, несомненно, важным является выяснение механизмов и источников инфицирования грамотрицательными бактериями и аспергиллами в стационаре в эпоху возрастающей резистентности к антибиотикам.

Актуальность настоящей работы определяется решением большого круга научных и практических вопросов, направленных на борьбу с наиболее тяжелыми инфекциями у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения.

Цель исследования

Разработать современные подходы к диагностике и антимикробной терапии тяжелых инфекционных осложнений у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения.

Задачи исследования

1. Исследовать этиологическую структуру возбудителей сепсиса, их чувствительность к антибиотикам у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения, разработать тактику эмпирической и направленной терапии инфекций.

2. Определить пути инфицирования грамотрицательными бактериями в стационаре с помощью генотипирования госпитальных штаммов бактерий, выделенных из крови при сепсисе у иммунокомпрометированных больных.

3. Изучить особенности диагностики, клинического течения, прогностические факторы, оказывающие влияние на результаты терапии сепсиса, вызванного грамотрицательными бактериями, в современных условиях.

4. Установить особенности диагностики, клинического течения, прогностические факторы, оказывающие влияние на результаты лечения инвазивного аспергиллеза легких.

5. Определить источники инфицирования аспергиллами в стационаре.

6. Разработать алгоритм диагностики и антимикробной терапии инфекционных осложнений у больных опухолями системы крови и депрессиями кроветворения.

Научная новизна исследования

Проведено первое в России многоцентровое исследование по изучению этиологической структуры и чувствительности к антибиотикам возбудителей сепсиса у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения. Детально изучена этиология возбудителей сепсиса, показано, что среди них преобладают грамотрицательные бактерии (49,1%), далее следуют грамположительные бактерии (43,4%), реже выявляют грибы (7,3%) и анаэробные бактерии (0,2%). Определено, что основными микроорганизмами являются Escherichia coli (18,6%) и стафилококк коагулазонегативный (18,0%). Отмечена высокая частота выделения энтеробактерий с продукцией бета - лактамаз расширенного спектра (БЛРС), а среди грибов выявлена низкая встречаемость Candida albicans (21%), преобладавших в прошлые годы.

Проведен сравнительный анализ чувствительности антибиотиков in vitro в отношении бактерий - возбудителей сепсиса. Зарегистрирована высокая резистентность микроорганизмов к антибиотикам, максимальная активность в отношении грамотрицательных бактерий определена у карбапенемов, из цефалоспоринов - у цефоперазона/сульбактама и цефепима; в отношении грамположительных бактерий - у линезолида. Впервые в России из крови выделены штаммы Enterococcus faecium, устойчивые к ванкомицину.

Молекулярное исследование возбудителей сепсиса доказало наличие двух путей инфицирования грамотрицательными бактериями в стационаре - экзогенного и эндогенного, с преобладание эндогенного варианта. Установлено, что для штаммов Escherichia coli

наиболее характерным является эндогенный путь инфицирования, в то время как для других грамотрицательных бактерий, особенно для Pseudomonas aeruginosa, - смешанный вариант инфицирования. Генетическое изучение бактерий показало, что у штаммов с одинаковым генотипом могут быть разные параметры чувствительности, поэтому об экзогенном пути передачи инфекции нельзя судить только на основании результатов определения их чувствительности к антибиотикам.

Тяжелые инфекционные осложнения (грамотрицательный сепсис и инвазивный аспергиллез легких) развиваются преимущественно в период критической нейтропении (гранулоцитов < 0,5x109/л). Представлены особенности клинического течения сепсиса, обусловленного грамотрицательными бактериями в современных условиях. Выявлена высокая частота клинически доказанных инфекционных осложнений, из них основные -пневмония (53%), мукозит (40%), некротическая энтеропатия (30%). Наибольший риск развития пневмонии установлен при сепсисе, обусловленном неферментирующими бактериями, прежде всего P.aeruginosa (84%), в сравнении с энтеробактериями (41%).

Изучена антимикробная терапия при грамотрицательном сепсисе. Определена эффективность антибиотиков, назначаемых на 1-ом этапе лечения, которая составляет при сепсисе, вызванном энтеробактериями - 49%, неферментирующими бактериями - 29%; в половине случаев возникает необходимость в назначении карбапенемов. Более высокая частота излечения при добавлении карбапенемов отмечена при сепсисе, вызванном энтеробактериями в сравнении с неферментирующими бактериями. Выявлена полиэтиологичность инфекционных осложнений, более чем в половине случаев к цефалоспоринам или к карбапенемам дополнительно присоединены препараты других групп из-за развития сопутствующей инфекции иной этиологии. Определены прогностические факторы, оказывающие влияние на результаты терапии сепсиса, обусловленного грамотрицательными бактериями.

Зарегистрировано увеличение инвазивного аспергиллеза легких у иммунокомпрометированных больных. Выявлено преобладание этой инфекции при острых лейкозах, отмечена высокая частота в период индукции, продемонстрирована неспецифичность клинических признаков. Показано, что основу ранней диагностики инвазивного аспергиллеза легких составляют определение антигена Aspergillus (галактоманнан) и компьютерная томография легких. Доказано, что терапия вориконазолом инвазивного аспергиллеза приводит к достоверному увеличению частоты излечения в сравнении с амфотерицином В (77,3% против 44%). Определены факторы, отрицательно влияющие на успех терапии, - резистентность опухоли, сохранение нейтропении, выделение культуры Aspergillus, проведение лечения амфотерцином В.

Определена минимальная концентрация спор аспергилл в воздухе одноместных палатах с ламинарным потоком воздуха и оснащенных приточно-вытяжной системой вентиляции.

Научно-практическая ценность работы

Проведенное исследование позволило разработать оптимальную тактику антимикробной терапии у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения. На основании результатов изучения активности антибиотиков in vitro в отношении возбудителей сепсиса и анализа лечения грамотрицательного сепсиса внесены изменения в протокол эмпирической антимикробной терапии при лихорадке в период нейтропении, которые заключаются в назначении на 1-ом этапе цефоперазона/сульбактама или цефепима и замены их на карбапенем (имипенем или меропенем) в случае неэффективности.

Получены убедительные данные о механизмах инфицирования в стационаре. Всех пациентов с сепсисом, вызванном P.aeruginosa, следует изолировать, поскольку для этих

микроорганизмов определено значимое преобладание экзогенного механизма инфицирования. Размещать в отдельных палатах следует больных с прогрессией опухоли, так как у них наиболее часто выявляются полирезистентные микроорганизмы, которые могут быть источником инфицирования в стационаре.

Клинический анализ случаев сепсиса, обусловленного грамотрицательными бактериями, показал, что выделение из крови штаммов E.coli и K.pneumoniae без продукции бета - лактамаз расширенного спектра значимо чаще происходит у больных до лечения антибиотиками, а неферментирующих бактерий - при использовании антибиотиков. Установлено, что на фоне применения карбапенемов достоверно чаще возникает сепсис, обусловленный штаммами P.aeruginosa.

Детальное изучение клинических проявлений сепсиса показало, что его первые симптомы возникают в течение недели до выделения бактерий из крови в 35% случаев, причем, значимо чаще при сепсисе, обусловленном неферментирующими бактериями (56%) в сравнении с энтеробактериями (26%). Это свидетельствует о необходимости активного проведения комплекса диагностических исследований, повторения их, изменения тактики антимикробной терапии при отрицательных результатах у больных с персистирующей лихорадкой. Отмечена высокая частота инфекций другой этиологии при грамотрицательном сепсисе и инвазивном аспергиллезе, что диктует необходимость повторных исследований при персистирующей гипертермии и нейтропении. Установлено, что периодом наибольшего риска присоединения инфекции является нейтропения длительностью более 20 дней, на фоне которой развиваются достоверно чаще сопутствующие инфекции другой этиологии, а также пневмонии, парапроктиты.

Показано, что современная диагностика инвазивного аспергиллеза легких должна базироваться на данных исследования антигена Aspergillus (галактоманнан) и компьютерной томографии легких, а не на результатах рентгенографии легких, поскольку в 69% не удается выявить изменений на рентгенограммах или они оказываются малоинформативными. Проведенные исследования позволили создать современные программы диагностики и лечения этого тяжелого осложнения и существенно улучшить выживаемость больных гемобластозами.

Положения, выносимые на защиту

1. Результаты изучения этиологической структуры сепсиса у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения свидетельствуют об увеличении частоты выделения из гемокультур грамотрицательных и снижении грамположительных бактерий.

2. Микроорганизмы, выделенные из гемокультур, характеризуются высоким уровнем резистентности к антимикробным препаратам; максимальную активность в отношении грамотрицательных бактерий проявляют карбапенемы, из цефалоспоринов цефоперазон/сульбактам и цефепим, в отношении грамположительных бактерий- линезолид.

3. Генетическое исследование возбудителей сепсиса доказывает преобладание эндогенного пути инфицирования грамотрицательными бактериями в стационаре.

4. Для сепсиса, вызванного грамотрицательными бактериями, характерна высокая частота развития пневмонии, стоматита, некротической энтеропатии. На успех терапии сепсиса оказывают влияние вид возбудителя и его чувствительность к антибиотикам, фаза заболевания, характер и длительность инфекционных осложнений.

5. Инвазивный аспергиллез легких преобладает у больных острыми лейкозами в период курсов индукции, для ранней диагностики важно определение антигена аспергилл (галактоманнан) и проведение компьютерной томографии легких, препаратом выбора в

лечении является вориконазол. Концентрация аспергилл в воздухе одноместных палат с ламинарным потоком воздуха и оснащенных приточно-вытяжной вентиляцией минимальна.

Внедрение в практику

Разработанные протоколы антимикробной терапии и лечения инвазивного аспергиллеза у иммунокомпрометированных больных используют в клинической практике отделений гематологии ГНЦ РАМН и ряда гематологических отделений России.

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 114 печатных работ в отечественных и зарубежных изданиях. В общей сложности опубликовано 165 печатных работ.

Апробация

Основные положения диссертации обсуждались на ежегодных Международных школах гематологов "Лейкозы и лимфомы. Терапия и фундаментальные исследования" (1992-2008 гг.), использовались в лекциях для клинических ординаторов и практических врачей, проходящих стажировку в ГНЦ РАМН, а также для курсантов кафедры гематологии и интенсивной терапии Российской медицинской академии последипломного образования. Результаты работы доложены на ежегодных декадниках по гематологии, проходящих в ГНЦ РАМН (1995-2009 гг.), на I Всероссийском съезде гематологов и трансфузиологов (Москва, 2001 г.), на ежегодных конференциях "Современные проблемы антимикробной терапии" (Москва, 1999-2008 гг.), ежегодных конгрессах по медицинской микологии (2003-2007 гг.), конференции Межрегиональной ассоциации по клинической микробиологии и антимикробной химиотерапии (2001 г), Московском онкологическом обществе (2009 г.). Диссертация апробирована на заседании проблемной комиссии "Гемопоэз, молекулярная биология, биотехнология, иммуногематология; гемобластозы и депрессии кроветворения" 19 мая 2009 г.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 291 странице машинописного текста, состоит из введения, 8 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы, приложения. Работа иллюстрирована 74 таблицами, 93 рисунками. Библиографический указатель включает 23 отечественных и 247 зарубежных литературных источников.

Диссертация выполнена в Учреждении Российской академии медицинских наук Гематологический научный центр РАМН (директор академик А.И.Воробьев) при научном сотрудничестве с лабораториями и отделениями ГНЦ РАМН, гематологическими отделениями Федерального научно-клинического центра гематологии, онкологии и иммунологии Росздрава (директор д.м.н., профессор, член-корр. РАМН Румянцев А.Г.), Гематологического научного центра г. Новосибирска (рук. центра д.м.н., проф. Поспелова Т.И.), областных клинических больниц г. Новосибирска (зав. лаб. бактериологии Крайнова Л.Е.), г. Иркутска (зав. лаб. бактериологии к.м.н. Верещагина С.А.), г. Самары (бактериолог Юрицина Н.Я.).

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы Материалы исследования

В проспективном многоцентровом исследовании была изучена этиологическая структура 1290 возбудителей сепсиса, выделенных из крови у 946 больных, находившихся на стационарном лечении в гематологических отделениях 6 лечебных учреждений России (Москва - 2 центра, Новосибирск - 2 центра, Иркутск, Самара) с 2003 по 2007 гг., при этом 5 стационаров были для лечения взрослых пациентов, а один - для детей. Чувствительность к

антимикробным препаратам была исследована у 1099 штаммов бактерий, выделенных из гемокультур.

Было проведено генотипирование 152 штаммов грамотрицательных бактерий, выделенных из крови больных, находившихся на лечении в ГНЦ РАМН.

Были изучены клинические проявления, диагностика и лечение у 155 больных 187 случаев сепсиса, обусловленного грамотрицательными бактериями, и у 75 больных инвазивного аспергиллеза легких. Исследование было у больных, находившихся на лечении в ГНЦ РАМН.

Методы исследования Микробиологические исследования

Материалом проспективного многоцентрового исследования являлись микроорганизмы, выделенные из гемокультур от больных опухолями системы крови и симптомами сепсиса. Для исследования брали первый штамм, выделенный из крови, коагулазонегативные стафилококки и коринебактерии исследовали при повторном выделении из крови.

Все микроорганизмы были доставлены в лабораторию клинической бактериологии, микологии и антибиотической терапии ГНЦ РАМН, где проводили 100% реидентификацию. Чувствительность бактерий к антибиотикам оценивали методом серийных микроразведений в бульоне в соответствии с рекомендациями Института клинических и лабораторных стандартов (Clinical and Laboratory Standards Institute - CLSI) и с "Методическими указаниями по определению чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам" [NCCLS, 2004; МУК 4.2.1890-04., 2004].

При характеристике результатов чувствительности бактерий использовали следующие показатели - чувствительные (Ч), умеренно-резистентные (УР), резистентные (Р), минимальная подавляющая концентрация (МПК) - наименьшая концентрация антибиотика, способная подавить видимый рост микроорганизма in vitro, МПК50 (МПК антибиотика для 50% исследованных штаммов), МПК90 (МПК антибиотика для 90% исследованных штаммов). Термин "нечувствительные" или "резистентные" штаммы объединял умеренно-резистентные и резистентные микроорганизмы.

Значения МПК определяли для меропенема, имипенема, цефтазидима, цефотаксима, цефтриаксона, цефепима, цефоперазона/сульбактама, триметоприма/сульфаметоксазола, левофлоксацина, ампициллина, гентамицина, амикацина, ванкомицина, линезолида, хлорамфеникола, тетрациклина, оксациллина, пенициллина, эритромицина. Скрининг для выявления высокого уровня устойчивости энтерококков проводили к гентамицину на агаре (гентамицина 500 мкг/мл) Мюллера - Хинтон, к стрептомицину в бульоне (стрептомицина 1000 мкг/мл) и на агаре (стрептомицина 2000 мкг/мл) Мюллера - Хинтон (Becton-Dickinson, США). Продукцию БЛРС у энтеробактерий (Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis) определяли методом "двойных дисков" и дополнительно сравнением МПК цефалоспоринов III поколения (цефотаксима и цефтазидима) и их комбинаций с клавулановой кислотой.

Исследование хромосомной ДНК бактерий

Исследование хромосомной ДНК грамотрицательных бактерий проводили методом гель -электрофореза в пульсирующем поле с использованием коммерческих наборов Genepath Reagent Kits (BioRad, США). Для расщепления ДНК применяли следующие рестриктазы: Spel для штаммов P. aeruginosa и Enterobacter spp., Xbal - для К. pneumonia и NotI - для Е. coli. Электрофоретическое разделение полученных макрофрагментов ДНК проводили в аппарате GenePath (BioRad, США). В качестве маркеров использовали конкатемеры ДНК

фага лямбда и контрольные штаммы бактерий (Control Plug Е. coli 0157:Н7, Р. aeruginosa и Е. coli). По количеству и расположению полос на электрофореграмме оценивали рестрикционные фрагменты ДНК бактерий. Сравнение и интерпретацию результатов исследования проводили с использованием программы компьютерного анализа (BioNumerics, Applied Maths) согласно критериям F.C. Tenover и соав. [Tenover F., 1995] Изоляты, различающиеся на электрофореграмме по трем и менее рестрикционным фрагментам ДНК, считали клонально-родственными (идентичными) и относили к подтипам одного клона. Изоляты с большим числом различий в рестрикционных фрагментах ДНК считали независимыми. Анализ дендрограмм проводился в программе GelCompar методом UPGMA с коэффицентом Dice.

Диагностика инвазивного аспергиллеза легких

Диагностику инвазивного аспергиллеза легких проводили в соответствии с Международными критериями 2002 г. [Ascioglu S., 2002].

Культуру Aspergillus spp. получали из мокроты, смывов из трахеи и бронхов, жидкости бронхоальвеолярного лаважа, биоптата легкого. Определение антигена Aspergillus (галактоманнан) в сыворотке крови проводили методом иммуноферментного анализа с использованием тест-систем PLATELIA® Aspergillus (BioRad Laboratories, США). Антиген считали положительным при значениях индекса, равных 0,5 и выше.

Компьютерную томографию легких проводили при положительном антигене Aspergillus или при стойкой персистирующей лихорадке. Обнаружение изменений в легких на рентгенограмме также являлось основанием для проведения компьютерной томографии.

Исследование образцов воздуха и смывов с поверхностей на мицелиальные грибы

Проспективное исследование микологического мониторинга воздуха осуществляли в двух лечебных корпусах центра. Образцы воздуха были отобраны с помощью пробоотборного устройства ПУ - 1Б в режиме 250 л/мин. Внутри помещений центра пробы воздуха отбирались ежемесячно в палатах, расположенных в начале, середине и конце отделения, в душевых комнатах, прилегающих к этим палатам, в коридоре и на постах медицинских сестер. Один раз в сезон исследовали образцы воздуха на улице (вблизи лечебных корпусов на территории центра) на высоте 1,5 м от земли. Количество колоний грибов выражали в колониеобразующих единицах (КОЕ) в 1 м3. Концентрацию мицелиальных грибов в исследуемых образцах определяли по формуле: С=1000 P/Q, где С -концентрация, Р - наиболее вероятное число осажденных микроскопических грибов в зависимости от числа колоний (N), представленное в таблице, Q - объем отбираемой пробы воздуха.

Алгоритм обследования больных при нейтропении

При лихорадке до назначения антибиотиков забирали кровь из вены во флаконы с двухфазной средой с 2000 по 2003 гг., а с 2004 г. - только в коммерческие флаконы (Becton-Dickinson, США). Коммерческие флаконы для гемокультур находились в отделениях.

При наличии стоматита выполняли посев со слизистой оболочки ротоглотки, симптомов инфекции мочевыводящих путей - посев мочи, признаков некротической энтеропатии - определение токсина Clostridium difficile. При сохранении температуры выше 38 С комплекс микробиологических исследований повторяли, осуществляли мониторинг антигена Aspergillus (галактоманнан) в крови, компьютерную томографию легких. При пневмонии проводили бронхоскопию с исследованием бронхоальвеолярной жидкости на наличие бактерий, грибов (дрожжевых и мицелиальных), микобактерий (микроскопия), нокардий, пневмоцист, герпесвирусов.

Тактика антимикробной терапии при нейтропении.

При появлении лихорадки (температура более 38°С) назначали внутривенно антибиотики 1-го этапа - сочетание амикацина с цефалоспорином III-IV поколения (цефепим, цефтазидим, цефоперазон/сульбактам, цефоперазон) или один цефалоспорин III-IV поколения.

Модификацию антибактериальной терапии проводили согласно результатам микробиологических исследований. Если проводимые исследования оказывались неинформативными при сохраняющейся лихорадке, то поэтапно эмпирически добавляли ванкомицин или амфотерицин В, последующим этапом была отмена антибиотиков 1-го этапа и назначение карбапенема (имипенема или меропенема). Антибиотики назначали в следующих дозах (в сутки) - амикацин 15 мг/кг, цефепим по 2г х 2 раза, цефтазидим по 2 г х 3 раза, цефоперазон/сульбактам по 4г х 2 раза, цефоперазон - по 2 г х 2 раза, имипенем по 0,5 х 4 раза, меропенем по 1г х 3 раза, ванкомицин по 0,5 х 4 раза.

Лечение инвазивного аспергиллеза легких проводили амфотерицином В (в/в, 0,6-1,25 мг/кг в сутки), каспофунгином (в/в, в 1-й день 70 мг в сутки, далее по 50 мг), вориконазолом (в/в, в 1й день по 6 мг/кг 2 раза в сутки, далее по 4 мг/кг 2 раза в сутки; через неделю - в таблетках по 200 мг 2 раза в день).

Антибактериальную терапию считали эффективной при совокупности следующих критериев: стойкое снижение температуры тела ниже 37,5°С, регрессия клинических симптомов и очагов инфекции. Замену антибиотиков считали адекватной, если она была проведена согласно результатам чувствительности выделенных из крови микроорганизмов или при замене отмечалась положительная динамика в состоянии пациента. Лечение антибиотиками считали неэффективным, если сохранялись симптомы инфекции, несмотря на проводимую терапию, или был летальный исход.

Другие исследования

Морфологическое исследование крови проводилось сотрудниками клинико-диагностической лаборатории (зав. лаб. - Тихонова Л.Ю.). Радиологические исследования проводились сотрудниками отделения рентгенорадиологии (руководитель - д.м.н., профессор Готман Л.Н.). Гистологическое исследование осуществлялось сотрудниками патологоанатомической лаборатории (рук. лаборатории - д.м.н., проф., член-корр. РАМН Франк Г.А.), вирусологические исследования - в лаборатории клинико-вирусологической диагностики гепатитов и СПИД (рук. лаборатории - д.б.н. Филатов Ф.П.).

Статистическую обработку и анализ данных чувствительности микроорганизмов к антибиотикам проводили с помощью компьютерной программы "WHONET 5."

Статистический анализ инфекционных осложнений был проведен совместно с заведующим лабораторией биомедицинской статистики к.ф.м.н. Куликовым С.М. и сотрудником лаборатории Гемджяном Э.Г. (рук. лаб. - к.ф.м.н. Куликов С.М.). Эта процедура осуществлялась в статистической программе SAS и STATVIEW с использованием базы данных по инфекциям.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Этиологическая структура сепсиса у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения. Результаты проспективного многоцентрового исследования

Были изучены 1290 клинически значимых микроорганизмов, выделенных из крови при сепсисе у 946 больных. Сепсис чаще регистрировали у больных острыми лейкозами (47,5%), далее следовали больные лимфосаркомой/лимфомой (22%). В течение всех лет (2003-2007 гг.) наблюдалось некоторое преобладание грамотрицательных бактерий в общей структуре возбудителей сепсиса, и суммарно частота выделения их составила 49,1%,

грамположительных бактерий - 43,4%. Грибы из крови были выявлены у 7,3% больных, у двух больных - анаэробные бактерии (0,2%). У 67 (7%) из 946 пациентов этиология сепсиса была полимикробной.

У 221 (23%) больного наблюдалось повторное выделение бактерий из крови в период полихимиотерапии (ПХТ), однако, только у 50 (23%) из них повторный эпизод сепсиса был обусловлен бактериями того же вида, что и первый эпизод. Следовательно, в случаях регистрации новых эпизодов лихорадки необходимо проводить поиск иных патогенов, поскольку вероятность того, что инфекция вызвана тем же возбудителем, невелика.

Спектр возбудителей сепсиса у иммунокомпрометированных больных представлен в табл. 1.

Таблица 1. Спектр микроорганизмов, выделенных при сепсисе из гемокультур у больных

гемобластозами и депрессиями кроветворения

Микроорганизмы Абс. %

Грамотрицательные бактерии 634 49,1

Семейство Enterobacteriaceae 431 33,4

В том числе:

Escherichia coli 240 18,6

Klebsiella pneumoniae 94 7,3

Enterobacter spp. 51 4,0

Иные 46 3,5

Неферментирующие бактерии 203 15,7

В том числе:

Pseudomonas aeruginosa 90 7,0

Acinetobacter spp. 49 3,8

Stenotrophomonas maltophilia 29 2,2

Иные 35 2,7

Грамположительные бактерии 560 43,4

В том числе:

Staphylococcus coagulase-negative 232 18,0

Enterococcus spp. 128 9,9

Streptococcus группы "viridans " 78 6,0

Staphylococcus aureus 66 5,1

Corynebacterium spp. 25 2,0

Listeria monocytogenes 8 0,6

Иные 23 1,8

Анаэробные бактерии 2 0,2

В том числе:

Clostridium histolyticum 1 0,1

Clostridium perfringens 1 0,1

Грибы 94 7,3

В том числе:

мицелиальные 3 0,2

дрожжевые 91 7,1

В структуре микроорганизмов доминировали E.coli (18,6%) и стафилококк коагулазонегативный (18,0%), далее следовали Enterococcus spp. (9,9%), К. pneumoniae (7,3%), P. aeruginosa (7,0%), Streptococcus группы "viridans" (6,0%). Грибы среди всех возбудителей сепсиса заняли пятую позицию (7,3%). В число десяти наиболее часто

выделяемых микроорганизмов также вошли S. aureus (5,1%), Enterobacter spp. (4,0%), Acinetobacter spp. (3,8%).

Этиологическая структура возбудителей сепсиса у взрослых и у детей, а также у больных, находившихся на лечении в нашем центре и в других клиниках, была сопоставимой по основным группам и видам бактерий. Значимое отличие было определено лишь по грибам: частота выделения их была достоверно выше в других стационарах в сравнении с нашим центром (10,6% против 5,7%, р=0,001). Выявленное сходство большинства позиций косвенно свидетельствует о наличии единых подходов антимикробной и цитостатической терапии в современной онкогематологии.

Среди грамотрицательных бактерий чаще выделяли микроорганизмы, относящиеся к семейству Enterobacteriaceae (33,4%). Отмечена высокая частота детекции у них БЛРС (43%), особенно у штаммов K.pneumoniae (63%), табл. 2. Распространенность БЛРС среди энтеробактерий отличается в разных странах, но для России характерен высокий уровень их детекции. Проведенное нами исследование подтвердило высокую встречаемость их еще у одной категории больных - у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения.

В семействе Enterobacteriaceae третью позицию по частоте занимали штаммы Enterobacter spp. (п=51), которые были представлены в основном штаммами E.cloacae (п=47) и единичными штаммами Е. gergoviae (n=3), E.asburiae (п=1). В состав иных микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae (п=46) вошли Salmonella enteritidis (n=15), Serratia marcescens (n=9), Pantoea spp. (n=6), Proteus mirabilis (n=4), Citrobacterfreundii (n=3), Klebsiella oxytoca (n=3), Serratia liquefaciens (n=3), Providencia spp. (n=l), Escherichia fergasonii (n=l), Morganella morganii (n=l). Встречаемость этих штаммов была сопоставимой по годам.

Таблица 2. Частота энтеробактерий, продуцирующих БЛРС

Бактерии Частота выделения штаммов с продукцией БЛРС по годам (%) Всего (%)

2003 2004 2005 2006 2007

E.coli 11/35 (31) 14/46 (30) 18/37(49) 24/67 (36) 19/55 (35) 86/240 (36)

K.pneumoniae 6/12 (50) 17/26 (65) 8/12(67) 12/22(55) 16/22 (73) 59/94 (63)

P. mirabilis 0/1 1/1 0 0/1 1/1 2/4

Всего 17/48 (35) 32/73 (44) 26/49 (53) 36/90 (40) 36/78 (46) 147/338 (43)

Примечание. В столбцах - число штаммов, продуцирующих БЛРС к общему числу штаммов данного вида бактерий

Частота выделения грамотрицательных неферментирующих бактерий составила 15,7% (п=203). В этой группе микроорганизмов преобладали P.aeruginosa (п=90) и Acinetobacter spp. (п=49), основная доля которых была представлена A.baumannii (42 из 49 штаммов), реже выявляли A.lwoffli (п=3), A.haemolyticus (п=2), A.junii (п=2). В составе иных неферментирующих микроорганизмов (п=64) доминировали Stenotrophomonas maltophilia (n=29), Burkholderia cepacia (n=6), Pseudomonas putida (n=7), другие бактерии были представлены единичными штаммами разного вида (всего выявлено 22 вида). Отмечено достоверное увеличение встречаемости иных неферментирующих бактерий в составе грамотрицательных неферментирующих бактерий с 21% (13 из 61 штамма) до 36% (51 из 142 штаммов) при сравнении результатов 2003-2004 гг. и 2005-2007 гг. (р=0,04). Регистрируемое увеличение произошло как за счет большего выделения из гемокультур штаммов S. maltophilia (3-4 штамма в 2003-2004 гг. и 9-8 в 2005-2006 гг.), так и расширения спектра микроорганизмов этой группы.

Среди грамположительных бактерий доминировали стафилококк коагулазонегативный (18%), Enterococcus spp. (9,9%), Streptococcus группы "viridans" (6,0%),

S. aureus (5,1%). Основная доля энтерококков была представлена штаммами Е. faecium (74%), существенно реже выделяли Е. faecalis (23%), по одному штамму были выделены E.durans (1%), E.hirae (1%), E.gallinarum (1%). Преобладание штаммов Е. faecium зарегистрировано в течение всего анализируемого периода. Стрептококки, принадлежащие к другим группам, были представлены S.pneumoniae (n=6), S.pyogenes (n=l), S.agalactiae (п=1). Видовая идентификация Streptococcus группы "viridans " была проведена у 56 из 78 штаммов, отмечено преобладание S.mitis (63%). Всего бьио выделено 66 штаммов 5. aureus, частота их составляла в разные годы от 2% (2006 г.) до 7% (2003 г.), в 2007 г. - 5%. Число штаммов Corynebacterium spp. было 25, включая C.propinquum (n=10), C.jeikeium (n=8), C.striatum (n=3), C.auris (п=2), C.urealyticum (n=l), C.bovis (п=1). Частота выделения их была постоянной и не превышала 2%. За анализируемый период из крови было выделено 8 штаммов L. monocytogenes, причем, у двух больных L. monocytogenes были выделены одновременно из крови и из спинномозговой жидкости. Среди редко выявляемых грамположительных бактерий были Micrococcus spp. (n=7), Aureobacterium spp. (n=2), Kocuria varians (n=l), Arcanobacterium haemolyticum (n=l), Leuconostoc spp. (n=2), Rothia spp. (n=l). Единичное выделение этих штаммов наблюдалось в течение всего анализируемого периода.

У двух больных причиной сепсиса были анаэробные бактерии Clostridium spp. (0,2%), в одном случае - С. perfringens, в другом - C.histolyticum.

За анализируемый период было выделено 94 штамма грибов, из них 89 (95%) Candida spp., 3 (3%) штамма мицелиальных грибов, 1 (1%) Cryptococcus neoformans, 1 (1%) Ceotrichum capitatum. Среди Candida spp. частота обнаружения C.albicans составила всего 21% (п=19), в то время как C.non-albicans - 79% (п=70). Спектр C.non-albicans был разнообразным и включал штаммы C.parapsilosis 31% (n=22), C.kefyr 6% (п=4), С.tropicalis 6% (n=4), C.kritsei 10% (n=7), C.guilliermondii 28,5% (п=20), Cfamata 4% (n=3), C.glabrata 3% (n=2), C.lusitaniae 4% (n=3), C.pelliculosa 6% (п=4), в 1 (1,5%) случае идентификации до вида не проводилось. Из крови мицелиальные грибы были выделены в составе Paecilomyces lilacinus (п=2) и Fusarium spp. (n=l). Выделение из крови грибов P. lilacinus было проявлением катетер-ассоциированной инфекции, а обнаружение Fusarium spp. свидетельствовало о диссеминации инвазивного микоза. Мицелиальные грибы были выделены только в 2006 году, низкая частота встречаемости C.albicans была в течение всех лет исследования.

Заключение. Многоцентровое исследование продемонстрировало разнообразие микроорганизмов, вызывающих сепсис у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения. В структуре возбудителей зарегистрировано некоторое преобладание грамотрицательных бактерий, отмечена высокая частота детекции БЛРС у энтеробактерий, выявлено расширение в спектре за счет редких грамотрицательных неферментирующих бактерий. Частота грамположительных бактерий в этиологии сепсиса снизилась, но роль их остается значимой. Среди грамположительных бактерий ведущая позиция сохраняется за штаммами стафилококка коагулазонегативного, отмечена высокая частота и постоянство выделения штаммов Enterococcus spp., а также Streptococcus группы "viridans". Выявлено разнообразие грибов при фунгемии, отмечена низкая встречаемость C.albicans.

Результаты чувствительности возбудителей сепсиса к антимикробным препаратам

Была изучена чувствительность к антимикробным препаратам 1099 бактерий, выделенных из крови больных гемобластозами и депрессиями кроветворения. Среди тестированных штаммов было 612 грамотрицательных и 487 грамположительных бактерий.

Чувствительность гралютрицательных бактерий

В табл. 3 представлена сравнительная чувствительность к антибиотикам ведущих возбудителей сепсиса - энтеробактерий (п=431). По результатам исследования наиболее высокая активность определялась у имипенема и меропенема. Это были единственные антибиотики, к которым были чувствительными все штаммы энтеробактерий. Активность имипенема и меропенема была сопоставимой, отличия между препаратами определены лишь в значениях МПК, которые были ниже у меропенема. Из цефалоспоринов наибольшей активностью обладал цефоперазон/сульбактам (87% чувствительных штаммов), далее -цефепим (73%). Следует отметить, что основная доля нечувствительных к цефепиму энтеробактерий была представлена резистентными штаммами, а не штаммами с промежуточной чувствительностью, поэтому совершенно необоснованно назначать этот антибиотик при выделении нечувствительных к нему бактерий. К цефтазидиму -антибиотику, который был препаратом выбора в лечении фебрильной нейтропении 90х годов, чувствительность сохранили лишь 66% бактерий семейства Enterobacteriaceae. Активность других цефалоспоринов 111-го поколения (цефтриаксон, цефотаксим) была невысокой и составила 63%. Из аминогликозидов более высокий уровень чувствительности проявлял амикацин.

Низкие показатели чувствительности в отношении бактерий семейства Enterobacteriaceae были выявлены у ампициллина (17%) и триметоприма/сульфаметоксазола (31%), поэтому совершенно неоправданно назначать триметоприм/сульфаметоксазол для селективной деконтаминации кишечника, а ампициллин для лечения фебрильной нейтропении.

Распространение БЛРС у энтеробактерий представляет серьезную проблему. Особое значение БЛРС определяется, прежде всего, их способностью обуславливать устойчивость ко всем современным цефалоспоринам, которые широко используют для лечения госпитальных инфекций. Активность антибиотиков в отношении энтеробактерий с продукцией (п=147) и без продукции БЛРС (п=284) имеет большие отличия (рис.1). Стабильными к действию БЛРС являются карбапенемы, эти препараты проявили абсолютную чувствительность. Вторую позицию по активности занимал амикацин (резистентные 21% штаммов). Из цефалоспоринов активность в отношении продуцентов БЛРС была определена лишь у одного препарата - цефоперазона/сульбактама, резистентными были 27% штаммов. Причем, чувствительность цефоперазона/сульбактама в отношении штаммов E.coli была более высокой и составила 84%, чем в отношении штаммов К.pneumoniae (60%), табл. 4. Другие цефалоспорины были неактивны в отношении энтеробактерий - продуцентов БЛРС.

Уровень антибиотикорезистентности микроорганизмов, входящих в семейство Enterobacteriaceae, определяется долей детекции у них БЛРС. Поскольку детекция БЛРС преобладала у штаммов К.pneumoniae, то для этих микроорганизмов была выявлена более высокая резистентность к бета лактамам по сравнению с другими энтеробактериями, табл. 3. Штаммы Enterobacter spp. занимали по активности промежуточную позицию между штаммами E.coli и K.pneumoniae: чувствительными к карбапенемам были все штаммы, далее следовали амикацин (96%), левофлоксацин (92%), цефоперазон/сульбактам (74%), цефепим (73%).

Чувствительность бактерий семейства Enterobacteriaceae, входящих в состав "иные энтеробактерии", характеризовалась более высокой активностью антибиотиков, табл. 3. Наиболее высокие показатели чувствительности были определены к карбапенемам (100%), цефоперазону/сульбактаму (96%), амикацину (92%), цефепиму (89%).

Таблица 3. Активность антибиотиков в отношении бактерий семейства Enterobacteriaceae

Антибиотики Ч УР Р МПК50 МПКто Диапазон

п (%) п (%) п (%) мкг/мл мкг/мл МПК мкг/мл

Семейство Enterobacteriaceae,

п=431

Ампицилин 75(17) 12(3) 344 (80) >128 >128 0,12->128

Цефотаксим 273 (63) 22(5) 136(32) 0,5 >128 0,06->128

Цефтриаксон 270 (63) 20(4) 141 (33) 0,5 >128 0,12->128

Цефтазидим 286(66) 15(4) 130 (30) 1 >128 0,12->128

Цефоперазон/сульбактам 376(87) 29 (7) 26 (6) 1 32 0,12->128

Цефепим 315(73) 25 (6) 91 (21) 0,125 >128 0,03->128

Имипенем 431(100) 0 0 0,032 0,5 0,008-2

Меропенем 431 (100) 0 0 0,016 0,125 0,008-4

Гентамицин 271 (63) 10(2) 150 (35) 1 >128 0,12->128

Амикацин 389 (90) 19(5) 23 (5) 2 16 0,12->12

Левофлоксацин 317(73) 24 (6) 90 (21) 0,125 16 0,12-64

Триметоприм/сульфаметоксазол 133 (31) 0 298(69) >128 >128 0,12->128

E.coli, п=240

Ампициллин 46(19) 0 194 (81) >128 >128 0,12->128

Цефотаксим 173 (72) 10(4) 57 (24) 0,125 >128 0,06->128

Цефтриаксон 173(72) 8(3) 59 (25) 0,125 >128 0,12->128

Цефтазидим 182 (76) 10(4) 48 (20) 1 64 0,12->128

Цефоперазон/сульбактам 225 (94) 7(3) 8(3) 0,5 16 0,05-128

Цефепим 190 (79) 14(6) 36(15) 0,125 32 0,12->128

Имипенем 240(100) 0(0) 0(0) 0,032 0,125 0,008-2

Меропенем 240(100) 0(0) 0(0) 0,008 0,032 0,008-1

Гентамицин 158(66) 5(2) 77 (32) 1 >128 0Д2->128

Амикацин 219(91) 12(5) 9(4) 2 16 0,12->128

Левофлоксацин 158 (66) 14(6) 68(28) 0,125 16 0,12-32

Триметоприм/сульфаметоксазол 58 (24) 0 182 (76) >128 >128 0,12->128

К. pneumoniae, п=94

Ампициллин 6(7) 5(5) 83 (88) >128 >128 0,5->128

Цефотаксим 39 (42) 6(6) 49 (52) 64 >128 0,06->128

Цефтриаксон 37 (40) 4(4) 53 (56) 128 >128 0Д2->128

Цефтазидим 42 (45) 4(4) 48(51) 32 >128 0,12->128

Цефоперазон/сульбактам 69 (73) 12(13) 13(14) 8 128 0,12->128

Цефепим 47 (50) 9(10) 38 (40) 8 >128 0,03->128

Имипенем 94 (100) 0(0) 0 0,064 0,5 0,008-2

Меропенем 94 (100) 0(0) 0 0,032 0,5 0,008-4

Гентамицин 42 (45) 2(2) 50 (53) 32 >128 0,12->128

Амикацин 79 (84) 4(4) 11(12) 2 64 0,12->128

Левофлоксацин 71 (76) 8(8) 15(16) 0,25 16 0,12-64

Триметоприм/сульфаметоксазол 24 (26) 0(0) 70 (74) >128 >128 0,12->128

Enterobacter spp., n=51

Ампициллин 1(2) 1(2) 49 (96) >128 >128 8->128

Цефотаксим 22 (43) 5(10) 24 (47) 16 >128 0,12->128

Цефтриаксон 22 (43) 8(16) 21 (41) 16 >128 0,12->128

Цефтазидим 21 (41) 1(2) 29 (57) 64 >128 0Д2->128

Цефоперазон/сульбактам 38 (74) 8(16) 5 (10) 4 32 0,12->128

Цефепим 37(73) 1(2) 13 (25) 0,5 >128 0,12->128

Имипенем 51 (100) 0 0 0,125 1 0,016-1

Меропенем 51 (100) 0 0 0,016 0,25 0,008-2

Гентамицин 34 (67) 2(4) 15 (29) 1 >128 0,12->128

Амикацин 49 (96) 1(2) 1(2) 1 8 0,25->128

Левофлоксацин 47 (92) 1(2) 3(6) 0,125 1 0,12-16

Триметоприм/сульфаметоксазол 17(33) 0 34 (67) >128 >128 0,12->128

Иные энтеробактерии*, п=46

Ампициллин 22 (48) 6(13) 18 (39) 16 >128 0,12->128

Цефотаксим 39 (85) 1(2) 6(13) 0,125 128 0,12->128

Цефтриаксон 38 (83) 0 8(17) 0,125 >128 0,12->128

Цефтазидим 41 (89) 0 5(11) 0,5 128 0,12->128

Цефоперазон/сульбактам 44 (96) 2(4) 0 0,25 16 0,12-32

Цефепим 41 (89) 1(2) 4(9) 0,125 16 0,12->128

Имипенем 46(100) 0 0 0,064 1 0,016-2

Меропенем 32(100) 0 0 0,008 0,064 0,008-0,25

Гентамицин 37(81) 1(2) 8(17) 0,25 32 0,12->128

Амикацин 42 (92) 2(4) 2(4) 1 16 0,12->128

Левофлоксацин 41 (89) 1(2) 4(9) 0,125 4 0,12-32

Триметоприм/сульфаметоксазол 30 (65) 0 16(35) 1 >128 0,12->128

Примечание. Иные энтеробактерии - S. enteritidis (n=15), S. marcescens (n=9), S. liquefaciens (n=3), Paníoea spp. (n=6), P. mirabilis (n=4), C.freundii (n=3), K.oxytoca (n-3), Providencia spp. (n=l), E.fergusonii (n=l), M. morganii (n=l)

генгамицин цефтриаксон цефотаксим цефтазидим цефепим

цеф/сульбактам IH^I амикацин имипенем меропенем Ig

l.

■ 84

■ 83

□ б л pc (-) ■ б л fc (+)

%

Рисунок 1. Резистентность бактерий семейства Еп1егоЬас1епасеае, продуцирующих и непродуцирующих БЛРС.

Примечание. В категорию резистентных штаммов отнесены устойчивые и умеренно-устойчивые штаммы; цеф/сульбактам - цефоперазон/сульбактам.

Таблица 4. Активность антибиотиков в отношении E.coli и К. pneumoniae, продуцирующих

БЛРС

E.coli, БЛРС (п=86) К. pneumoniae, БЛРС (п=59)

Антибиотики ч УР Р мпк50 мпк» Ч УР Р мпк9„ МПКад

% % % мкг/мл мкг/мл % % % мкг/мл мкг/мл

Цефотаксим 23 12 65 128 >128 9 10 81 >128 >128

Цефтриаксон 23 8 69 128 >128 5 7 88 >128 >128

Цефтазидим 34 И 55 32 >128 13 7 80 >128 >128

Цефоперазон/ 84 7 9 8 64 60 20 20 16 128

сульбактам

Цефепим 42 16 42 16 >128 22 15 63 64 >128

Имипенем 100 0 0 0,032 0,25 100 0 0 0,064 0,5

Меропенем 100 0 0 0,016 0,064 100 0 0 0,032 1

Гентамицин 44 2 54 32 >128 17 3 80 128 >128

Амикацин 83 8 9 4 32 75 7 18 4 >128

Левофлоксацин 38 И 51 8 32 66 12 22 2 32

Тримет./сульф. 18 0 82 >128 >128 13 0 87 >128 >128

Примечание. Тримет./сульф. - триметоприм/сульфаметоксазол

В последнее время становится нередким выделение из крови таких энтеробактерий, как Salmonella enteritidis. В нашем исследовании они были выделены из крови у 15 больных, причем, у большинства пациентов диарея отсутствовала. В отношении S.enteritidis многие антибиотики (карбапенемы, исследуемые цефалоспорины III и IV поколения, левофлоксацин, амикацин) проявили абсолютную активность, высокие показатели чувствительности были определены также у триметоприма/сульфаметоксазола (91%), ампициллина (93%), гентамицина (93%).

В последнее время отмечено нарастание устойчивости у штаммов Р.aeruginosa к антимикробным препаратам, включая карбапенемы. Штаммы P.aeruginosa характеризовались высоким уровнем резистентности ко всем антибиотикам: в отношении этих бактерий не выявлено преимуществ карбапенемов над цефалоспоринами, полирезистентными были 21% штаммов, табл. 5. Наиболее высокие показатели чувствительности были определены для амикацина (76%), цефоперазона/сульбактама (66%), меропенема (66%), имипенема (62%), цефепима (64%). Диско-диффузионным методом была определена абсолютная активность только полимиксина в отношении P.aeruginosa.

Число антибиотиков, активных в отношении штаммов A.baumannii, было еще более ограниченным, табл. 5. Максимальная активность была определена у цефоперазона/сульбактама, чувствительными к нему были 86% штаммов. К имипенему были чувствительными 76% штаммов, а к меропенему - 57%. Столь выраженные отличия в чувствительности меропенема и имипенема могли быть обусловлены циркуляцией в стационаре клонально-родственных штаммов с идентичными параметрами устойчивости.

Активность антибиотиков в отношении других неферментирующих бактерий, частота которых увеличивается в последние годы, является неоднородной, активными могут быть один-два или, наоборот, несколько антимикробных препаратов. Так, в отношении штаммов S. maltophilia проявляют активность только 2 антибиотика: триметоприм/сульфаметоксазол и тикарциллин/клавуланат. Триметоприм/сульфаметоксазол сохранял чувствительность в отношении 90% штаммов S. maltophilia, активность тикарциллина/клавуланата нами не была изучена. В отношении Pseudomonas putida (п=7) были чувствительны амикацин, цефепим, цефтазидим, цефтриаксон, имипенем, меропенем, а в отношении Burkholderia cepacia (n=6) -только триметорим/сульфаметоксазол. Учитывая тот факт, что выделение

неферментирующих бактерий становится нередким у иммунокомпрометированных больных, крайне важным является как их идентификация, так и исследование чувствительности, поскольку активными могут быть разные антибиотики.

Таблица 5. Активность антибиотиков в отношении Р'.aeruginosa и A.baumannii

Антибиотики Ч УР Р МПК50 МПК90 Диапазон

п(%) п(%) п(%) мкг/мл мкг/мл МПКмкг/мл

P.aeruginosa, п=90

Цефотаксим 10(11) 26 (29) 54 (60) 64 >512 2->512

Цефтриаксон 5(6) 19(21) 66(73) 128 >512 4->512

Цефтазидим 42 (47) 7(8) 41 (45) 16 256 2->512

Цефоперазон 49 (54) 8(9) 33 (37) 16 512 1->512

Цефоперазон/сульбактам 59 (66) 11(12) 20 (22) 16 128 1->512

Цефеггим 58 (64) 8(9) 24 (27) 4 64 1-256

Имипенем 56 (62) 9(10) 25 (28) 1 64 0,12-256

Меропенем 59 (66) 5(6) 26 (28) 1 128 0,12-256

Гентамицин 53 (59) 4(4) 33 (37) 4 >512 0,5->512

Амикацин 68 (76) 2(2) 20 (22) 4 128 0,5->512

A.baumannii, п=42

Цефотаксим 11(26) 5(12) 26 (62) 128 >512 4->512

Цефтриаксон 13(31) 3(7) 26 (62) 256 >512 4->512

Цефтазидим 10(24) 5(12) 27 (64) 128 >512 0,5->512

Цефоперазон 6(14) 4(10) 32 (76) 512 >512 4->512

Цефоперазон/сульбактам 36 (86) 5(12) 1(2) 8 32 0,5-512

Цефепим 16(38) 13(31) 13(31) 16 256 1->512

Имипенем 32 (76) 5(12) 5(12) 0,5 16 0,12-16

Меропенем 24 (57) 6(14) 12 (29) 2 32 0,12-64

Гентамицин 13(31) 0(0) 29 (69) 64 >512 0,5->512

Амикацин 17 (40) 5(12) 20 (48) 32 256 0,5-512

Чувствительность гралтоложителъных бактерий

Из 232 штаммов Staphylococcus coagulase-negative (Staphylococcus CN) устойчивыми к оксациллину были 190 (82%) штаммов, чувствительными к оксациллину - 42 (18%). Результаты чувствительности к оксациллину 66 штаммов 5. aureus были диаметрально противоположными: устойчивыми были 18% (п=12) штаммов, чувствительными - 82% (п=54).

Результаты чувствительности оксациллиноустойчивых штаммов стафилококков представлены в табл. 6. Все оксациллиноустойчивые штаммы Staphylococcus CN и S. aureus были чувствительны к линезолиду и ванкомицину. Однако значения МПК90 ванкомицина в отношении штаммов S. aureus были высокие и составили 2 мкг/мл, что может быть причиной неудач в лечении этим препаратом. На втором месте по активности in vitro в отношении оксациллиноустойчивых Staphylococcus CN был тетрациклин (75% чувствительных штаммов), в отношении S. aureus - триметоприм/сульфаметоксазол (83% чувствительных штаммов). Активность остальных антибиотиков была невысокой.

Иными параметрами активности характеризовались оксациллиночувствительные штаммы Staphylococcus CN и S. aureus, табл. 7. Все штаммы были чувствительны не только к оксациллину, ванкомицину и линезолиду, но и к амикацину, карбапенемам, всем исследуемым цефалоспоринам, за исключением одного препарата - цефтазидима.

Таблица 6. Активность антибиотиков в отношении оксациллиноустойчивых штаммов Staphylococcus CN и S. aureus__

Антибиотики ч УР Р МПК5о МПК.» Диапазон

п(%) п(%) мкг/мл мкг/мл МПКмкг/мл

Staphylococcus CN, n=190

Амикацин 96(51) 21(11) 73 (38) 16 >64 0,06->64

Ванкомицин 190(100) 0(0) 0(0) 1 2 0,125-4

Гентамицин 18(9) 15(8) 157(83) 64 >64 0,06->64

Линезолид 190(100) 0(0) 0(0) 1 2 0,125-2

Тетрациклин 142 (75) 0(0) 48 (25) 1 64 0,06->64

Тримет./сульф. 21(11) 0(0) 169(89) 16 16 0,06->64

Хлорамфеникол 61 (32) 3(2) 126(66) 32 >64 1->64

Эритромицин 27(14) 5(3) 158 (83) >64 >64 0,06-256

S. aureus, п=12

Амикацин 8(67) 1(8) 3(25) 16 >64 4->64

Ванкомицин 12(100) 0(0) 0(0) 1 2 0,25-2

Гентамицин 4(33) 0(0) 8(67) >64 >64 4->64

Линезолид 12(100) 0(0) 0(0) 1 2 0,5-2

Тетрациклин 5(42) 0(0) 7(58) 16 32 0,25->64

Тримет./сульф. 10 (83) 0(0) 2(17) 0,064 8 0,06-64

Хлорамфеникол 5(42) 1(8) 6(50) 16 >64 4->64

Эритромицин 3(25) 0(0) 9(75) >64 >64 0,06-2

Таблица 7. Активность антибиотиков в отношении оксациллиночувствительных штаммов Staphylococcus CN и S. aureus__

Антибиотики Staphylococcus CN (и=42) S. aureus («=54)

Ч УР Р МПКад Ч УР Р МПК»

п(%) п (%) П(%) мкг/мл п(%) п(%) п(%) мкг/мл

Амикацин 42(100) 0 0 4 54 (100) 0 0 8

Ванкомицин 42(100) 0 0 2 54(100) 0 0 2

Гентамицин 36 (86) 1(2) 5(12) 16 53 (98) 0 1(2) 2

Имипенем 42(100) 0 0 0,25 54(100) 0 0 0,064

Линезолид 42(100) 0 0 2 54(100) 0 0 2

Меропенем 42(100) 0 0 1 54(100) 0 0 0,125

Оксациллин 42(100) 0 0 0,25 54(100) 0 0 1

Пенициллин 26 (62) 1(2) 15 (36) 8 28 (52) 1(2) 25 (46) 16

Тетрациклин 26 (62) 1(2) 15 (36) 64 51 (94) 0 3(6) 1

Тримет./сульф. 23 (54) 0 19 (46) 32 54(100) 0 0 0,125

Цефепим 42(100) 0 0 2 54 (100) 0 0 2

Цефоперазон 42(100) 0 0 4 54(100) 0 0 4

Цефопер./сульб. 42(100) 0 0 4 54 (100) 0 0 2

Цефотаксим 42(100) 0 0 4 54(100) 0 0 2

Цефтазидим 37 (88) 2(5) 3(7) 16 44 (81) 7(13) 3(6) 16

Цефтриаксон 42 (100) 0 0 8 54 (100) 0 0 4

Хлорамфеникол 35 (83) 0 7(17) 64 47 (87) 0 7(13) 32

Эритромицин 21 (50) 1(2) 20 (48) >64 49(91) 0 5(9) 0,5

Примечание. Тримет./сульф. - триметоприм/сульфаметоксазол, цефопер./сульб. -цефоперазон/сульбактам

Триметоприм/сульфаметоксазол, эритромицин, тетрациклин были более активны в отношении оксациллиночувствительных штаммов 51. aureus, чем в отношении оксациллиночувствительных штаммов Staphylococcus CN.

Таблица 8. Активность антибиотиков в отношении E.faecalis, E.faecium, Streptococcus группы "viridans"

Антибиотики Ч УР Р МПК50 МПК*, Диапазон

п(%) п(%) п (%) мкг/мл мкг/мл МПКмкг/мл

E.faecalis, п=30

Ампициллин 30(100) 0(0) 0(0) 1 2 0,25-4

Ванкомицин 30(100) 0(0) 0(0) 1 2 0,5-4

Гентамицин 500 мг 17(57) 0(0) 13 (43) - - -

Линезолид 30(100) 0(0) 0(0) 1 2 0,25-2

Пенициллин 30(100) 0(0) 0(0) 1 4 0,125-4

Стрептомицин 2000 мг 18 (60) 0(0) 12 (40) - - -

Тетрациклин 7(24) 1(3) 22 (73) 32 64 0,12-128

Хлорамфеникол 15 (50) 0(0) 15 (50) 8 64 4-128

Эритромицин 9(30) 1(3) 20 (67) >128 >128 0,125->128

E.faecium, п=95

Ампициллин 0(0) 0(0) 95(100) 128 >128 32->128

ВаНкомицин 89 (94) 0(0) 6(6) 0,5 1 0,12-1024

Гентамицин 500 мг 5(5) 0(0) 90 (95) - - -

Линезолид 95 (100) 0(0) 0(0) 1 2 0,25-2

Пенициллин 0(0) 0(0) 95 (100) >128 >128 128- >128

Стрептомицин 2000 мг 21 (22) 0(0) 74 (78) - - -

Тетрациклин 71 (75) 1(1) 23 (24) 0,125 64 0,12-128

Хлорамфеникол 68 (72) 17(18) 10(10) 8 32 1-64

Эритромицин 1(1) 6(6) 88(93) >128 >128 0,125->128

Streptococcus группы

"viridans", п=78

Ампициллин 57 (73) 10(13) 11(14) 0,064 4 0,015->16

Ванкомицин 78 (100) 0(0) 0(0) 0,25 1 0,06-1

Линезолид 78 (100) 0(0) 0(0) 0,5 1 0,06-2

Меропенем 74 (95) 0(0) 4(5) 0,016 0,5 0,015->16

Пенициллин 62 (80) 8(10) 8(10) 0,016 1 0,015-16

Тетрациклин 40 (51) 3(4) 35 (45) 2 >16 0,03->16

Цефепим 72 (93) 1(1) 5(6) 0,016 0,5 0,015->16

Цефотаксим 70 (90) KD 7(9) 0,016 4 0,015-16

Цефтриаксон 71 (91) KD 6(8) 0,016 2 0,015->16

Хлорамфеникол 67 (86) 9(11) 2(3) 2 8 0,03-16

Эритромицин 42 (54) 9(11) 27 (35) 0,25 4 0,015->16

Среди энтерококков преобладали Е/аесшт, для которых характерным является более высокий уровень природной устойчивости в сравнении с Е./аесаШ, табл. 8. Так, все штаммы Е./аесаШ были чувствительны к ампициллину, пенициллину, ванкомицину, линезолиду. Активность в отношении всех штаммов Е./аестт проявлял только один препарат -линезолид. Впервые в России в 2005 г. был выделен из крови ванкомициноустойчивый штамм Е./аесшт, и за 5 лет исследования число их достигло 6 штаммов. Все ванкомициноустойчивые штаммы Е./аесшт имели высокие значения МПК ванкомицина (у

одного штамма - 128 мкг/мл, у пяти - более 128 мкг/мл). Активность аминогликозидов была невысокой.

Активность большинства исследуемых антибиотиков в отношении штаммов Streptococcus группы "viridans" была высокой, однако, к пенициллину были нечувствительны 20% штаммов, табл. 8. Все штаммы были чувствительны к линезолиду и ванкомицину. Чувствительность цефепима (93%), цефтриаксона (91%) и цефотаксима (90%) была сопоставимой. Значения МПК90 пенициллина, цефтриаксона, цефепима, цефотаксима, меропенема в отношении штаммов Streptococcus группы "viridans " были минимальны.

Стрептококки, принадлежащие к другим группам, были представлены единичными штаммами. Все исследованные штаммы S.pneumoniae (п=6) были чувствительны к цефепиму, цефотаксиму, линезолиду, меропенему, ванкомицину. К пенициллину чувствительность сохранили 5 из 6 штаммов.

Среди редких грамположительных бактерий были L. monocytogenes (п=8), все штаммы были чувствительны к ампициллину.

Заключение. Для возбудителей сепсиса была зарегистрирована высокая резистентность к антимикробным препаратам. Из цефалоспоринов наиболее активными были цефоперазон/сульбактам и цефепим, причем, цефоперазон/сульбактам в отличие от цефепима проявлял активность в отношении Acinetobacter spp. и энтеробактерий, продуцирующих БЛРС. Карбапенемы (имипенем и меропенем) демонстрировали наиболее высокую активность в отношении энтеробактерий, включая продуцентов БЛРС, и штаммов Acinetobacter spp. Из аминогликозидов выявлены преимущества у амикацина. Впервые в России из крови были выделены энтерококки, устойчивые к ванкомицину, и абсолютную активность в отношении грамположительных бактерий проявлял один антибиотик -линезолид.

Генотипирование госпитальных штаммов грамотрицательных бактерий, выделенных из гемокультур при сепсисе у больных опухолями системы крови

Следующей задачей стало изучение путей инфицирования грамотрицательными бактериями в стационаре, поскольку эти микроорганизмы преобладали в структуре возбудителей сепсиса, и для них была характерна высокая устойчивость к антибиотикам.

Была исследована хромосомная ДНК 152 штаммов грамотрицательных бактерий, выделенных из крови при сепсисе у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения. Все пациенты находились на лечении в ГНЦ РАМН с января 2003 г по октябрь 2006 г. Исследуемыми микроорганизмами были Е. coli (n=80), Enterobacter spp. (п=15), К. pneumoniae (п=31) и P. aeruginosa (n=26). Результаты, полученные при генотипировании, представлены в табл. 9. При генотипировании штаммов P. aeruginosa был выявлен 21 независимый рестрикционный профиль ДНК бактерий. Идентичные рестрикционные профили были у 9 штаммов P. aeruginosa, принадлежащих к 4 клонам. Один клон включал 3 клонально-родственных штамма, которые имели полную идентичность, а другие 6 штаммов, относящиеся к трем клонам, были попарно схожими между собой и отличались на три позиции рестрикционных фрагментов.

При изучении 15 штаммов Enterobacter spp. было выявлено 12 независимых рестрикционных профилей ДНК бактерий. Идентичные рестрикционные профили были определены у 5 штаммов Enterobacter spp., которые принадлежали к двум клонам, один из них включал 3 идентичных штамма (100% сходство), а другой клон - два штамма (идентичность 87%).

Таблица 9. Результаты генотипирования грамотрицательиых бактерий, выделенных из

гемокультур при сепсисе у больных опухолями системы крови

Число рестрикционных Число различий в ре- Число

Бактерии профилей ДНК бактерий, п стрикционных профи- идентичных

лях ДНК бактерий, п штаммов, п

Вид n независимых идентичных 0 1-3 >3

P.aeruginosa 26 21 4(19%) 3 6 17 9 (35%)*

Enterobacter spp. 15 12 2(17%) 3 2 10 5 (33%)

K.pneumoniae 31 27 3 (11%) 6 1 24 7 (23%)

E.coli 80 79 1 (1%) 2 0 78 2 (3%)*

Примечание. * - отмечены отличия р<0.0001

Генотипирование 31 штамма К. pneumoniae выявило принадлежность их к 27 различным пульс-электрофорезным типам ДНК. Было обнаружено 3 идентичных клона, включающих 7 штаммов, все они имели продукцию БИРС.

У 80 изученных штаммов Е. coli было выделено 79 независимых рестрикционных профилей ДНК бактерий. Только 2 (3%) из 80 штаммов Е. coli были идентичными (100%), происходили от одного клона и являлись продуцентами БЛРС. Время между выделением идентичных штаммов Е. coli составило 24 дня.

Таким образом, наибольшее число клонов, имеющих 2 и больше генетически идентичных штамма, определялось у Р. aeruginosa (19%), далее у Enterobacter spp. (17%) и К. pneumoniae (11 %), минимальное - у Е. coli (1 %), р<0.0001.

Медиана пребывания больных в стационаре на момент выделения идентичных штаммов P.aeruginosa составила 47 дней (от 1 до 130 дней), энтеробактерий - 54 дня (от 4 до 141 дней).

Оценивая чувствительность бактерий к антибиотикам, следует отметить, что все идентичные штаммы энтеробактерий имели детерминанты устойчивости (БЛРС), а 4 из 9 штаммов P.aeruginosa были резистентны к карбапенемам. Интересные данные были получены при сопоставлении параметров антибиотикочувствительности. Оказалось, что идентичные по генотипу штаммы бактерий имели отличия в чувствительности к антибиотикам. Так, в процессе циркуляции генетически идентичные штаммы энтеробактерий приобретали детерминанты устойчивости (БЛРС), а у штаммов P.aeruginosa, наоборот, повышалась чувствительность к антибиотикам. Следовательно, делать заключение об идентичности микроорганизмов можно только на основании генетических, а не фенотипических (по данным чувствительности) методов исследования.

Кпонально-родственные штаммы бактерий были выделены у 11 (48%) пациентов с резистентным гемобластозом, у 8 (35%) - впервые диагностированным гемобластозом (курсы индукции), у 4 (17%) - в период ремиссии. Следовательно, пациентов с резистентным течением гемобластоза следует помещать в отдельные палаты, поскольку они могут быть "резервуаром" наиболее устойчивых микроорганизмов и являться источником инфекции для других больных в стационаре.

Заключение. Генотипирование грамотрицательиых бактерий продемонстрировало наличие двух путей инфицирования микроорганизмами в стационаре - эндогенного и экзогенного, с преобладанием эндогенного. Для штаммов E.coli наиболее характерным было эндогенное инфицирование, а экзогенный путь передачи инфекции чаше определялся у штаммов Р. aeruginosa. Генетически идентичные штаммы бактерий имели отличия в чувствительности к антибиотикам.

Результаты терапии сепсиса, обусловленного грамотрицательными бактериями, у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения

Общая характеристика больных

Были изучены клинические проявления и лечение сепсиса, обусловленного грамотрицательными бактериями, по причине преобладания этих микроорганизмов в этиологической структуре тяжелых инфекций. В задачи исследования также входило определение факторов, влияющих на результаты лечения. Было проведено изучение 187 случаев сепсиса, обусловленного грамотрицательными бактериями у 155 больных (женщин -92, мужчин - 63). Все больные находились на лечении в ГНЦ РАМН с 2000г по 2006 гг. Медиана возраста больных составила 37 лет, колебания от 15 до 88 лет. Основную долю составили больные острым лейкозом (52%), далее следовали пациенты лимфосаркомой/лимфомой Беркитта (23%). Из 187 грамотрицательных возбудителей сепсиса к семейству Enterobacteriaceae принадлежало 132 (71%) штамма, к неферментирующим бактериям - 55 (29%). Для проведения анализа все бактерии были объединены в 5 групп: 1-я группа - штаммы E.coli и К. pneumoniae без продукции БЛРС (п=68), 2-я группа - E.coli и К. pneumoniae с продукцией БЛРС (п=49), 3-я группа - другие энтеробактерии (13 Enterobacter spp., 2 Pantoea spp.) в количестве 15 штаммов, 4-я группа - Р. aeruginosa (п=45), 5-я группа -другие неферментирующие бактерии (8 Acinetobacter spp., 1 S. maltophilia I Alcaligenes xylosoidaus) - всего 10 штаммов.

В табл. 10 представлено распределение анализируемых групп бактерий в зависимости от исследуемых показателей. Сепсис, вызванный бактериями семейства Enterobacteriaceae и неферментирующими бактериями, развивался преимущественно в период нейтропении (89% и 87%); практически с одинаковой частотой возникал как при резистентном течении опухоли системы крови, так и в ремиссии (31% против 28%). Высокую частоту регистрации сепсиса у больных в ремиссии можно объяснить как выраженным иммунодефицитом, который сохраняется еще длительное время после достижения ремиссии, так и преобладанием эндогенного пути инфицирования бактериями.

При курсах индукции сепсис был зарегистрирован в 21% (в 40 из 187) случаев, в этот период отмечено значимое преобладание неферментирующих грамотрицательных бактерий над энтеробактериями (36% против 15%, р=0,002) из-за большей частоты выделения из крови P.aeruginosa (38%). При резистентном течении опухоли достоверно чаще выделяли из крови штаммы E.coli и К. pneumoniae с продукцией БЛРС (45%), в ремиссии значимо чаще преобладали менее резистентные штаммы-£. coli и К. pneumoniae без продукции БЛРС (40%).

Распределение микроорганизмов при сепсисе в зависимости от диагноза было сопоставимым за исключением больных острым лимфобластным лейкозом и апластической анемией. Так, при остром лимфобластном лейкозе было выявлено значимое превосходство энтеробактерии над неферментирующими бактериями (22% против 9%, р=0,005) по причине преобладания штаммов E.coli и К. pneumoniae без продукции БЛРС (28%), а при апластической анемии, наоборот, преобладали более резистентные бактерии - E.coli и К. pneumoniae с продукцией БЛРС (22%) и P.aeruginosa (14%).

При высокодозной полихимиотерапии (ПХТ) достоверно чаще выделяли энтеробактерии в сравнении с неферментирующими грамотрицательными бактериями (45% против 16%, р=0,0009) по причине значимого преобладания штаммов E.coli и К. pneumoniae с продукцией БЛРС (49%) и без продукции БЛРС (49%) над штаммами P.aeruginosa (13%, р=0,001). При проведении терапии вне протокола или паллиативной (другая ПХТ), наоборот, неферментирующие бактерии доминировали над энтеробактериями (30% против 15%, р=0,03) и статистически чаще определяли штаммы P.aeruginosa (29%) в этиологии сепсиса.

Таблица 10. Распределение групп бактерий в зависимости от исследуемых показателей

Грамотрицательные бактерии п (%)

Показатели Семейство Еп1егоЬас1епасеае Неферментирующие бактерии

Всего ЕК ЕК, БЛРС ДрЭн Всего РА ДрНФ

п=132 п=68 п=49 п=15 п=55 п=45 п=10

Гранулоцитов 117 (89) 63 (93) 42 (86) 12(80) 48 (87) 41(91) 7(70)

< 0,5x10%

Диагноз ОМЛ 43 (33) 24 (36) 13(27) 6(40) 21 (38) 19(42) 2(20)

ОЛЛ 29 (22)* 19(28)** 7(14) 3(20) 5(9)* 5(11)** 0

ЛСА 30 (23) 13(19) 13 (27) 4(27) 13 (24) 9(20) 4(40)

ЛГМ 6(4) 5(7) 1(2) 0 4(7) 2(4) 2(20)

АА 13 (10) 2(3)* 11 (22)* 0 7(13) 6(14)* 1(10)

Другие 11(8) 5(7) 4(8) 2(13) 5(9) 4(9) 1 (Ю)

Фаза заболевания

Впервые

выявленное 20(15)* 10(15) 8(16) 2(13) 20 (36)* 17(38) 3(30)

Резистентность 41(31) 14 (20)* 22 (45)* 5 (33,5) 16(29) 15(33) 1(10)

Рецидив 15(11) 10(15) 4(8) 1(7) 2(4) 1(2) 1(10)

Ремиссия 39 (30) 27 (40)* 7(15)* 5 (33,5) 13 (24) 10 (22) 3(30)

Част, ремиссия 17(13) 7(10) 8(16) 2(13) 4(7) 2(5) 2(20)

ПХТ 113 63 35 15 44 38 6

Стандартная 45 (40) 26(41) 12 (34) 7(47) 24 (54) 22 (58) 2 (33,3)

Высокодозная 51 (45)* 31 (49)** 17(49) 3(20) 7(16)* 5(13)** 2 (33,3)

Другая 17(15)* 6(10) 6(17) 5(33) 13 (30)* 11 (29) 2(33,3)

Связь с ПХТ

До ПХТ 1(1) 0 1(3) 0 1(2) 1(3) 0

В период ПХТ 27 (24) 14 (22) 7(20) 6(40) 11(25) 10 (26) 1(17)

После ПХТ 85(75) 49 (78) 27 (77) 9(60) 32(73) 27 (71) 5(83)

Глюкокортикоиды 73(55) 41 (60) 25(51) 7(47) 29(53) 23 (51) 6(60)

Селективная 106(80) 55 (81) 41 (84) 10 (67) 39(71) 32(71) 7(70)

деконтаминация

Противогрибковая

профилактика 41 (31) 26 (38) 12(24) 3(20) 17(31) 13(29) 4(40)

Перевод в ОРИТ 30(23)* 12(18)** 15(31) 3(20) 29(53)* 21 (47)** 8(80)

Примечание. * - отмечены отличия, р<0.05. О МЛ — острый миелоидный лейкоз, ОЛЛ -острый лимфобластный лейкоз, ЛСА - лимфосаркома/лимфома Беркитта, ЛГМ -лимфогранулематоз, АА- апластическая анемия

Ни глюкокортикоиды в схемах цитостатической терапии, ни селективная деконтаминация кишечника, ни противогрибковая профилактика не оказали влияние на состав микрофлоры при сепсисе. Не было выявлено зависимости в спектре возбудителей от этапа ПХТ (до ПХТ, в период ПХТ, после ПХТ)

В 59 (32%) случаях сепсиса возникла необходимость перевода больных в отделение реанимации. Причинами перевода были в 20 (34%) случаях септический шок, в 25 (42%) -дыхательная недостаточность, в 8 (14%) - нарушение сознания, в 4 (7%) - нарушение сердечного ритма, в 2 (3%) - другие причины.

Перевод в отделение реанимации был достоверно чаще при сепсисе, обусловленном грамотрицательными неферментирующими бактериями, чем энтеробактериями (53% против

23%, р=0.0001), по причине значимого преобладания случаев перевода при выделении из гемокультур Р.aeruginosa над E.coli и K.pneumoniae без продукции БЛРС (47% против 18%). Септический шок, как причина перевода больных в отделение интенсивной терапии, преобладал при сепсисе, обусловленном энтеробактериями (60%), а дыхательная недостаточность в сочетании с гипотензией - при сепсисе, обусловленном неферментирующими бактериями (60%).

Этиологическая структура сепсиса, обусловленного грамотрицательными бактериями, оказалась статистически значимой от такого показателя как антибиотики: было их применение или нет на момент выделения бактерий из крови, табл. 11. Так, бактерии из крови были выделены в 59 (32%) из 187 случаев на фоне проводимого уже лечения антибиотиками, а в 128 (68%) - до назначения антибиотиков, т.е. антибиотики были назначены сразу после взятия крови. Микроорганизмы высокого уровня резистентности, такие как P.aeruginosa, другие неферментирующие бактерии, в составе которых преобладали Acinetobacter spp, достоверно чаще выделяли из гемокультур уже на фоне проводимого лечения антибиотиками (52,5% против 19%), когда в процессе антимикробной терапии создавались условия для селекции полирезистентных бактерий ("индуцированный" сепсис). Штаммы низкого уровня резистентности, E.coli и K.pneumoniae без продукции БЛРС, значимо чаще выделяли из крови при впервые возникшей лихорадке, и лечение антибиотиками не предшествовало выделению бактерий из крови ("самостоятельный" сепсис).

Таблица 11. Спектр микроорганизмов, выделенных на фоне и без применения антибиотиков

Грамотрицательные бактерии Выделение бактерий из крови, п (%) Р

на фоне применения антибиотиков п=59 до назначения антибиотиков п=128

ЕК 4(7) 64 (50) <0,0001

ЕК, БЛРС 18(30,5) 31 (24) >0,05.

ДрЭн 6(10) 9(7) >0,05

РА 23 (39) 22(17) 0,001

ДрНф 8(13,5) 2(2) 0,001

Таблица 12. Антибиотики, на фоне применения которых выделены бактерии из крови

Грамотрицательные бактерии, п (%)

Антибиотики Семейство Enterobacteriaceae, п=28 Неферментирующие бактерии, п=31

Всего ЕК ЕК, БЛРС ДрЭн Всего РА ДрНф

п=28 п=4 п=18 п=6 п=31 п=23 п=8

Цефалоспорины III поколения 9(32) 1 7(39) 1 9(29) 7(30) 2

+ амикацин

Цефалоспорины III поколения 11 (39) 2 6(33) 3 10(32) 5(22) 5

Карбапенемы 1 (4)* 0 1(6) 0 10(32)* 9(39) 1

Другие антибиотики 7(25) 1 4(22) 2 2(7) 2(9) 0

Примечание. * - отмечены отличия р=0.02

На фоне применения цефалоспоринов были выделены из гемокультур как энтеробактерии (32%), в основном с продукцией БЛРС, так и неферментирующие бактерии

(29%), а на фоне применения карбапенемов достоверно чаще выделяли неферментирующие бактерии (32% против 4%, р=0,008) за счет преобладания Р.аеги§то$а (32%), табл. 12.

Клинические проявления сепсиса

При сепсисе, обусловленном грамотрицательными бактериями, были изучены клинические симптомы и характер инфекционных осложнений в течение семи дней до выделения бактерий из крови, в день выделения бактерий из крови, на второй и последующие дни после выделения бактерий из крови (в процессе терапии сепсиса).

В течение семи дней до выделения бактерий из крови симптомы инфекции отсутствовали в 65% случаев, значимо чаще при сепсисе, обусловленном энтеробактериями в сравнении с неферментирующими бактериями (74% против 44%, р<0.0001). Регистрация симптомов инфекции в этот период была в 35% случаев, причем, температура в сочетании с другими признаками, такими как озноб, одышка, "отсевы" на коже, определялась достоверно чаще при сепсисе, обусловленном энтеробактериями с продукцией БЛРС (23%) и Р.ае^това (18%), чем энтеробактериями без продукции БЛРС (1,5%, р=0.0002).

В день выделения бактерий из крови симптомы инфекции присутствовали во всех случаях.

На второй и последующие дни после выделения бактерий из крови симптомы инфекции сохранялись у большинства больных (76%). В этот период, как и в период до выделения бактерий из крови, симптомы инфекции были представлены значимо чаще только температурой при сепсисе, обусловленном энтеробактериями (40% против 18%, р<0.0001), а температурой в сочетании с иными признаками инфекции - неферментирующими бактериями (64% против 31%, р=0.0002).

Клинически диагностируемые инфекционные осложнения были определены в течение семи дней до выделения бактерий из крови в 64% (п=119) случаев, в день выделения бактерий из крови - во всех случаях, на второй и последующие дни после обнаружения бактерий из крови - в 85% (п=159) случаев. Основными инфекционными осложнениями были пневмония (53%), мукозит/стоматит (40%), некротическая энтеропатия (30%), парапроктит (12%), табл. 13.

Таблица 13. Основные инфекционные осложнения при сепсисе, обусловленном грамотрицательными бактериями_

Грамотрицательные бактерии Пневмония Мукозит/ Некротическая Парапроктит

Род, вид бактерий п стоматит энтеропатия

п(%) п(%) п(%) п (%)

Семейство

Еп1егоЬас1епасеае 132 54 (41)* 62 (47)*** 41(31) 16(12)

ЕК 68 22 (32)** 36 (53)# 20 (29) 10(15)

ЕК, БЛРС 49 27 (55) 19 (39) 17 (35) 6(12)

ДрЭн 15 5(33) 7(47) 4(27) 0

Неферментирующие

бактерии 55 46 (84)* 13 (24)*** 15 (27) 7(13)

РА 45 38 (84)** 13 (29 )# 13 (29) 6(13)

ДрНф 10 8(80) 0 2(20) 1(10)

Всего 187 100 (53) 75 (40) 56 (30) 23 (12)

Примечание. (*), (#) - отмечены отличия *р<0.0001, **р=0,004, ***р=0.004, #р=0.01

Таблица 14. Сопутствующие инфекции при сепсисе, обусловленном грамотрицательными бактериями__

Грамотрицательные Простой ЦМВ ИА Кандиде Пневмоци Бактерии,

бактерии герпес, мия, сты, кровь,

Род,вид бактерий п п (%) п(%) п(%) П (%) п(%) п (%)

Семейство

Enterobacteriaceae 132 28 (21) 6(5) 13(10) 5(4) 7(5) 25(19)

ЕК 68 16(24) 3(4) 4(6) 3(4) 4(6) 12(18)

ЕК, БЛРС 49 9(18) 3(6) 8(16) 2(4) 3(6) 11 (23)

ДрЭн 15 3(20) 0 1(7) 0 0 2(13)

Неферментирую-

щие бактерии 55 7(13) 3(5) 2(4) 3(5) 5(9) 7(13)

РА 45 6(13) 1(2) 2(4) 3(7) 5(11) 5(11)

ДрНФ 10 1(10) 2(20) 0 0 0 2(20)

Примечание. ЦМВ - цитомегаловирус, ИА- инвазивный аспергиллез

Таблица 15. Характеристика сепсиса, обусловленного грамотрицательными бактериями, в зависимости от длительности нейтропении_

Показатели Изучаемый показатель в зависимости от длительности нейтропении, (%)

менее 10 дней 11-20 дней более 20 дней

Сопутствующие инфекции 14/54 (26)* 21/48(44) 37/63 (59)*

Инфекционные осложнения Мукозит/стоматит Некротическая энтеропатия Парапроктит Пневмония 23/54 (43) 16/54 (30) 4/54(7)* 18/54 (33)* 19/48(40) 18/48 (38) 4/48 (8) 21/48(44) 29/63 (46) 20/63 (32) 15/63 (24)* 46/63 (73)*

Семейство Enterobacteriaceae ЕК ЕК, БЛРС ДрЭн 37/116(32) 24/62 (39) 10/42(24) 3/12(25) 33/116(28) 16/62 (26) 13/42 (31) 4/12(33) 46/116(40) 22/62 (35) 19/42 (45) 5/12 (42)

Неферментирующие бактерии РА ДрНф 17/49 (35) 14/42 (33) 3/7 (43) 15/49 (30) 13/42 (31) 2/7 (28,5) 17/49 (35) 15/42 (36) 2/7 (28,5)

Симптомы инфекции за неделю до выделения бактерий из крови 16/54 (30) 14/48 (29) 21/63 (33)

Симптомы инфекции после выделения бактерий из крови 30/54 (56)* 40/48 (83) 56/63 (89)*

Инфекционные осложнения за неделю до выделения бактерий из крови 34/54 (63) 31/48 (65) 37/63 (59)

Инфекционные осложнения после выделения бактерий из крови 40/54 (74)* 43/48 (90) 57/63 (90)*

Примечание. В столбцах - изучаемый показатель к общему числу случаев (п/из); * отмечены отличия р<0.05, нейтропения - гранулоцитов <0,5 х 10®/л.

Пневмонии регистрировали достоверно чаще при сепсисе, обусловленном неферментирующими бактериями в сравнении с бактериями семейства Enterobacteriaceae (84% против 41%, р<0.0001) по причине значимого преобладания их при сепсисе, вызванном

Р.ае^тояа (84%). Развитие пневмонии предшествовало выделению из крови "проблемных" бактерий, таких как Р.аепфпояа, иных неферментирующих бактерий, Е.соИ и К.рпеитотае с продукцией БЛРС. Мукозит (стоматит) возникал значимо чаще при сепсисе, обусловленном грамотрицательными бактериями семейства ЕмегоЬас1епасеае в сравнении с неферментирующими бактериями (47% против 24%, р=0,004) по причине достоверного преобладания этих осложнений при выделении из крови Е.соИ и К.рпеитотае без продукции БЛРС (53%) в сравнении со штаммами Р.ае^тоза (29%, р=0.01). Развитие некротической энтеропатии, парапроктита было сопоставимым при разных бактериях.

В процессе терапии грамотрицательного сепсиса была отмечена высокая частота разнообразных сопутствующих инфекций другой этиологии, табл. 14. Вероятность развития инфекций другой этиологии находилась в корреляции с длительностью нейтропении, не было выявлено зависимости их частоты от видовой принадлежности бактерий, табл. 15. Так, диагностика инфекций другой этиологии была достоверно выше при длительности нейтропении более 20 дней, чем при нейтропении менее 10 дней (59% против 26%, р=0,0005). При нейтропении дительностью более 20 дней достоверно чаще диагностировали инфекционные осложнения, такие как пневмония (73% против 33%, р<0,0001), парапроктит (24% против 7%, р=0,01), табл. 15. У больных грамотрицательным сепсисом и пневмонией значимо чаще определяли другие микроорганизмы в этиологии инфекционного процесса, чем у больных без пневмонии (24% против 9%, р=0.007). Инвазию легких аспергиллами, пневмоцистами и цитомегаловирусом выявляли при грамотрицательном сепсисе только у больных с пневмонией. Длительность нейтропении не оказала влияние на видовую принадлежность грамотрицательных бактерий из гемокультур.

Антимикробная терапия

Антибиотики были применены в лечении 186 случаев сепсиса, обусловленного грамотрицательными бактериями. Назначение антибиотиков 1-го этапа было успешным в 43% случаев, значимо чаще при выделении из крови бактерий семейства Еп(егоЬас1епасеае в сравнении с неферментирующими бактериями (49% против 29%, р=0.01), табл. 16.

Таблица 16. Анализ антимикробной терапии сепсиса, обусловленного грамотрицательными бактериями_

Грамотрицательные бактерии, п (%)

Показатели Всего Семейство Неферментирующие

ЕйегоЬасСепасеае бактерии

п=187 п=132 п=55

Антибиотики назначены 186(99) 131(99) 55 (100)

Эффективность 80 (43) 64 (49)* 16(29)* р=0.01

антибиотиков 1-го этапа

Добавление к антибиотикам 87 (47) 57 (44) 30 (55)

1-го этапа других препаратов

Добавление ванкомицина 82 (44) 51 (39)* 31(56)* р=0.03

Эффективно 21 (26) 16(31) 5(16)

Добавление амфотерицина В 86 (46) 56 (43) 30(55)

Эффективно 26 (30) 22 (39)* 4(13)* р=0.01

Назначение карбапенема 94 (51) 59 (45)* 35 (64*) р=0,02

Имипенем 53 (56) 33 (56) 20 (57)

Меропенем 41 (44) 26 (44) 15(43)

Карбапенем эффективен 46 (49) 36(61)* 10(29)* р=0,003

Минимальная эффективность антибиотиков 1-го эапа была определена для P.aeruginosa (31 %) и штаммов E.coli и K.pneumoniae с продукцией БЛРС (33%), максимальная - для E.coli и K.pneumoniae без продукции БЛРС (59%). На первый взгляд эффективность антибиотиков 1-го этапа может показаться невысокой. Однако в многоцентровых исследованиях эффективность антибиотиков 1-го этапа составляет 40 - 45% при эмпирическом применении, а нами были получены те же результаты по эффективности при терапии наиболее тяжелой микробиологически доказанной инфекции - грамотрицательного сепсиса.

Добавление других антимикробных препаратов к антибиотикам 1-го этапа было в 47% случаях: ванкомицина в 44% случаях, амфотерицин В - в 46%. Несмотря на то, что дополнительные назначения чаше проводили при сепсисе, обусловленном грамотрицательными неферментирукмцими бактериями (в 56% - ванкомицин, в 55%-амфотерицин В), была отмечена низкая эффективность амфотерицина В и ванкомицина при этих возбудителях, которая составила 13% и 16%, соответственно. В большинстве случаев сохраняющаяся лихорадка была обусловлена неэффективностью назначенных антибиотиков по причине резистентности микроорганизмов, вызвавших сепсис, а не из-за присоединения дополнительной инфекции. В целом присоединение ванкомицина привело к положительному результату в 26% случаев, амфотерицина В - в 30%. Назначение карбапенема (имипенема или меропенема) было в 51% случаев. Значимо чаще карбапенем назначали при выделении из крови грамотрицательных неферментирующих бактерий в сравнении с бактериями семейства Enterobacteriaceae (64% против 45%, р=0,02), однако, эффект от назначения карбапенема был достоверно выше при сепсисе, обусловленном бактериями семейства Enterobacteriaceae (61% против 29%, р=0,003). Столь невысокий процент успешной терапии кабапенемом сепсиса, вызванного грамотрицательными неферментирующими бактериями, также был обусловлен высоким уровнем резистентности выделенных из гемокультур микроорганизмов.

На 1-ом этапе антимикробной терапии были назначены следующие антибиотики: сочетание цефалоспорина III-IV поколения с амикацином в 119 (64%) случаях, монотерапия цефалоспорином III-IV поколения в 23 (12%) случаях, карбапенем (имипенем или меропенем) в 28 (15%) случаях (в 22 - монотерапия, в 6 - в сочетании с амикацином), другие антибиотики - в 16 (9%) случаях. Из цефалоспоринов назначали преимущественно цефепим (60%), в остальных случаях цефоперазон, цефоперазон/сульбактам, цефтазидим и крайне редко цефтриаксон (2-3%). Общая эффективность стартовой терапии грамотрицательного сепсиса сочетанием цефалоспорина III-IV поколения с амикацином была значимо выше и составила 51% (61 из 119 случаев) в сравнении с монотерапией цефалоспорином III-IV поколения - 22% (5 из 23, р=0,01). Эффективность сочетания цефалоспорина IJI-ro поколения с амикацином на 1-ом этапе лечения была значимо выше при сепсисе, обусловленном штаммами E.coli и K.pneumoniae без продукции БЛРС, чем штаммами P.aeruginosa (62% против 30%, р=0,01). Сочетание цефепима с амикацином было значимо ниже при выделении из крови штаммов E.coli и K.pneumoniae с продукцией БЛРС в сравнении со штаммами E.coli и K.pneumoniae без продукции БЛРС (25% против 60%, р=0,02).

В 69 (37%) случаях была проведена замена антибиотиков 1-го этапа на другие препараты, из них в 59 (86%) случаях были назначены карбапенемы. Проводя анализ препаратов, назначение которых привело к излечению при грамотрицательном сепсисе, следует отметить 1) эффективность цефалоспоринов была выше при сепсисе, обусловленном энтеробактериями в сравнении с неферментирующими бактериями (62% против 45%); 2) высокую частоту сопутствующих инфекций другой этиологии. Излечение было достигнуто при добавлении препаратов другого спектра активности к сочетанию цефалоспоринов III-IV

поколения с аминогликозидом в 47,9% (в 35 из 73) случаев, к карбапенемам - в 58,6% (в 27 из 46) случаев, табл. 17.

Таблица 17. Перечень антимикробных препаратов, при назначении которых достигнуто излечение от грамотрицательного сепсиса_

Грамотрицательные бактерии, п (%)

Антибиотики Семейство Еп1егоЬас1епасеае Неферментирующие бактерии

Всего ЕК ЕК, БЛРС ДрЭн Всего РА ДрНФ

Всего, п 101 59 29 13 22 17 5

Цефалоспорин ПЫУ 63 (62) 40 (68) 13(45) 10(77) 10(45) 7(41) 3(60)

поколения ±

амикацин ±другие

Цефалоспорин ± амикацин 34 (33) 19(32) 10(35) 5 (38,5) 4(18) 2(12) 2(40)

Цефалоспорин + амикацин + другие 29 (29) 21 (36) 3(10) 5(38,5) 6(27) 5(29) 1(20)

Карбапенем± другие 36 (36) 17(29) 16(55) 3(23) 10(45) 8(47) 2(40)

Карбапенем 13(13) 6(10) 6(21) 1(8) 6(27) 4(23,5) 2(40)

Карбапенем +

другие 23 (23) 11(19) 10(34) 2(15) 4(18) 4 (23,5) 0

Другие антибиотики 2(2) 2(3) 0 0 2(10) 2(12) 0

Результаты терапии сепсиса. Факторы, оказывающие влияние на частоту излечений

Выживаемость в течение 60 дней от момента выделения бактерий из крови была значимо выше при сепсисе, обусловленном энтеробактериями в сравнении с грамотрицательными неферментирующими бактериями (87% против 71%, р=0,015), рис.2.

Р 1

0,8

0 6 0.4

0.2 О

0 10 20 30 40 50 „„,. 60

энтеробакгерии

87%

неферментирующие 71% бактерии

Рисунок 2. Выживаемость при сепсисе, обусловленном энтеробактериями и неферментирующими бактериями, в течение 60 дней от момента выделения бактерий из крови.

[.=0.0261

2004-2006 гг.

87%

-П-

2000-2003 гг.

76%

50 дни

Рисунок 3. Выживаемость при сепсисе, обусловленном грамотрицательными бактериями в разные периоды исследования - 2000-2003 гг. и 2004-2006 гг.

Достоверное повышение выживаемости при сепсисе, вызванном грамотрицательными бактериями, отмечено в 2004 -2006 гг. в сравнении с 2000-2003 гг. - 87% против 76% (р=0,026), рис. 3. За анализируемые периоды (2000-2003 гг. и 2004-2006 гг.) выживаемость при сепсисе, вызванном энтеробактериями и неферментирующими бактериями, повысилась соответственно с 83% до 90% и с 66% до 78%, рис. 4 (А), (Б).

-^ь»=ь_^+_2,00^2006 гг. 90%

. 1! - ^ о.«'

2000-2003 гг. 83%

01-

(.!•

в-

дни

-2004-2006 гг. 78%

2000-2003 г. 66%

(Б)

5С №

Дни

(А)

Рисунок 4. Выживаемость при сепсисе, обусловленном энтеробактериями (А) и неферментирующими бактериями (Б), в разные периоды исследования - 2000-2003 гг. и 2004-2006 гг.

Определены факторы, оказывающие влияние на результаты терапии грамотрицательного сепсиса, табл. 18. Излечение было статистически ниже при развитии септического шока и перевода больного в реанимацию (25%), при выделении из гемокультур синегнойной палочки (38%), при выделении бактерий из крови на фоне симптомов инфекции

в течение недели (38%), при развитии пневмонии (42%), при сохранении симптомов инфекции после выделения бактерий из крови и назначения антимикробных препаратов (58%), при развитии сепсиса у больных апластической анемией (40%). Лечение грамотрицательного сепсиса было более успешным при высокодозной ПХТ (90%), у больных полной или частичной ремиссии гемобластоза (84%), при выделении из гемокультур энтеробактерий (77%), при выделении из крови бактерий с благоприятным профилем антибиотикочувствительности (74-76%).

Таблица 18. Излечение при сепсисе, обусловленном грамотрицательными бактериями, в зависимости от анализируемых факторов_

Анализируемые факторы Излечение в зависимости от анализируемого фактора (%) Р

Есть Нет

Септический шок и перевод в реанимацию 15/59(25) 108/128(84) <0.0001

Симптомы инфекции в течение недели до выделения бактерий из крови 25/65 (38) 98/122 (80) <0.0001

Выделение из крови Р.аеги%то$а 17/45 (38) 106/142(75) <0.0001

Пневмония 42/100(42) 81/87 (93) <0.0001

Симптомы инфекции после выделения бактерий из крови 83/143 (58) 40/44(91) <0.0001

Высокодозная ПХТ 52/58 (90) 58/99 (59) 0,0001

Полная/ частичная ремиссия гемобластоза 61/73 (84) 62/114 (54) <0.0001

Выделение из крови энтеробактерий 101/132 (77) 22/55 (40) <0.0001

Чувствительность бактерий к цефалоспоринам 105/139(76) 15/43 (35) <0.0001

Чувствительность бактерий к аминогликозидам 106/139 (76) 14/43 (32) <0.0001

Чувствительность бактерий к карбапенемам 115/155 (74) 5/27(19) <0.0001

Апластическая анемия 8/20 (40) 115/167 (69) 0,01

Сопутствующие инфекции 52/84 (62) 71/103 (69) 0.3

Мукозит/стоматит 55/75 (73) 68/112(61) 0,09

Некротическая энтеропатия 36/56 (64) 87/131 (66) 0,7

Парапроктит 12/23 (52) 111/164 (68) 0,1

Примечание. В столбцах - число случаев излечения к общему числу случаев (п/из).

Сопутствующие инфекции, парапроктит, некротическая энтеропатия, мукозит (стоматит) не оказали значимого влияния на результаты лечения грамотрицательного сепсиса.

Летальные исходы от сепсиса, обусловленного грамотрицательными бактериями, были у 53 (34%) из 155 больных, причем, у 43 (81%) - в период нейтропении (гранулоцитов < 0,5x109/л). Основная доля смертей была у больных резистентной опухолью системы крови (45%), но в то же время немало летальных исходов было зарегистрировано в период ремиссии (19%) и при впервые выявленном заболевании (36%). В ремиссии гемобластоза летальные исходы были достоверно чаще при выделении из крови неферментирующих бактерий, прежде всего полирезистентных штаммов P.aeruginosa, чем энтеробактерий (32% против 7%, р=0,02). Энтеробактерии были значимо чаще причиной летального исхода у больных при резистентности опухоли (64% против 24%, р=0,005). Септический шок или сочетание его с дыхательной недостаточностью являлись основной причиной летальных исходов.

Заключение. Сепсис, обусловленный грамотрицательными бактериями, возникал преимущественно в период нейтропении, с одинаковой частотой у больных в ремиссии и при резистентном течении гемобластоза. На фоне лечения антибиотиками значимо чаще развивался сепсис, вызванный неферментирующими бактериями, прежде всего синегнойной палочкой. Выделение синегнойной палочки из гемокультур достоверно чаще было на фоне применения карбапенема. Симптомы инфекции в течение недели до выделения бактерий из крови значимо чаще определяли при сепсисе, обусловленном неферментирующими бактериями, а после выделения бактерий они сохранялись у большинства больных. Была зарегистрирована высокая частота вовлечения органов и систем в инфекционный процесс, ведущими осложнениями были пневмония, особенно при синегнойном сепсисе, мукозит (стоматит), парапроктит, некротическая энтеропатия. Определена высокая частота инфекций другой этиологии. Длительная нейтропения являлась основным фактором, приводящим к достоверному увеличению частоты сопутствующих инфекций, а также пневмонии, парапроктита. Практически в половине случаев излечение при грамотрицательном сепсисе было достигнуто при добавлении антимикробных препаратов других групп к карбапенемам или к цефалоспоринам Ш-1У поколения по причине сопутствующих инфекций другой этиологии. На успех терапии сепсиса оказывали влияние вид возбудителя и их чувствительность к антибиотикам, фаза заболевания, характер и длительность инфекционных осложнений.

Результаты терапии иивазивного аспергиллеза легких

Другое крайне тяжелое инфекционное осложнение, частота которого возрастает в последнее время, - это инвазивный аспергиллез легких (ИАЛ). Было проведено изучение впервые возникшего ИАЛ у 75 больных (мужчин 43, женщин 32) с 2000 по 2006 гг., у 44 (59%) пациентов заболевание было диагностировано в течение трех последних анализируемых лет.

В табл. 19 представлена характеристика больных, медиана возраста - 39 лет, колебания от 15 до 78 лет. В структуре ИАЛ основную долю составили больные острыми лейкозами (54%), далее следовали больные лимфосаркомой (13%), апластической анемией (12%). Необходимо отметить высокую частоту ИАЛ у пациентов гемобластозами на этапе индукции, особенно у больных острым миелоидным лейкозом, которая составила 54% (у 12 из 22). В 60% случаев ИАЛ развился при нейтропении (гранулоцитов < 0,5x10%), медиана длительности которой составила 32,5 дней (от 3 до 144 дней). У 35,5% (у 16 из 45) больных период нейтропении был продолжительным - более 40 дней. Развитие ИАЛ в период нейтропении достоверно увеличилось с 42% (у 13 из 31 больного) до 73% (у 32 из 44) в 2004 -2006 тт. по сравнению с 2000-2003 гг. (р=0.009).

Применение глюкокортикоидов, другой фактор возникновения ИАЛ, было у 55% больных. Профилактическое назначение антимикотиков (29%), эмпирическое назначение амфотерицина В (36%) не предупредили развитие ИАЛ.

Сопутствующие инфекции при ИАЛ были зафиксированы у 44% пациентов, причем, у 12% (у 9 из 75) больных они были обусловлены двумя возбудителями, табл. 20. Достоверно чаще сопутствующие инфекции регистрировали с 2004 г. по 2006 г. (57% против 26%, р=0,01). В этот период значимо чаще выявляли вирусные инфекции (36% против 10%, р=0,01), бактериемию (32% против 3%, р=0,003), грамотрицательные бактерии из крови (25% против 3%, р=0,01). Частота обнаружения пневмоцист была одинаковой в анализируемые периоды, а у двух больных наблюдалось выделение кандид из крови. Регистрируемое увеличение частоты сопутствующих инфекций было обусловлено как улучшением диагностики, так и интенсификацией программ иммуносупрессивной терапии.

Таблица 19. Характеристика больных ИАЛ

Показатели Число больных

абс. %

Диагноз: ОМЛ 22 29

ОЛЛ 19 25

ЛСА 10 13

АА 9 12

Другие 15 20

Фаза заболевания: впервые выявленное 28 37

резистентность к ПХТ 26 35

рецидив 8 11

ремиссия 13 17

Гранулоцитов < 0,5x10% при включении в исследование 45 60

Длительность нейтропении (гранулоцитов< 0,5х109/л) 6-20 дней 13 29

21-30 дней 9 20

31-40 дней 7 15,5

>40 дней 16 35,5

Терапия глюкокортикоидами 41 55

Профилактика антимикотиками 22 29

флуконазол 13 17

итраконазол 5 7

нистатин 3 4

кетоконазол I I

Эмпирическое назначение антимикотиков 27 36

Примечание. В ОМЛ включены - острый миело/монобластный лейкоз (п= 18), острый промиелоцитарный лейкоз (п=3), острый эритробластный лейкоз - (п=1); ЛСА -лимфосаркома, включены 2 больных с лимфомой Беркитга; АА - апластическая анемия; другие - хронический лимфолейкоз (п=5), хронический миелолейкоз - (п=2), реципиенты аллогенного костного мозга (п=2), лимфогранулематоз (п=2), по одному случаю сублейкемический миелоз, волосатоклеточный лейкоз, острая печеночная порфирия, множественная миелома

Таблица 20. Сопутствующие инфекции при ИАЛ

Число больных ИАЛ, п (%)

Сопутствующие инфекции Всего 2000-2003гг 2004-2006гг Р

п=75 п=31 п=44

Всего 33 (44) 8 (26)* 25 (57)* 0,01

В том числе два возбудителя 9(12) 0 9(21)

Вирусы 19 (25) 3(10)* 16(36)* 0,01

Бактериемия (всего) 15 (20) 1(3)* 14 (32)* 0,003

Грамотрицательные бактерии 12(16) 1(3)* И (25)* 0,01

Грамположительные бактерии 3(4) 0 3(7)

Кандиды (кровь) 2(3) 1(3) 1(2) >0.05

Пневмоцисты 6(8) 3(10) 3(7) >0.05

За анализируемые периоды произошли изменения в диагностике ИАЛ: в 2004-2006 гг. отмечено достоверное снижение частоты выделения культуры Aspergillus spp. (9% против 42%, р=0,001) и увеличение доли определения положительного антигена Aspergillus (59%

против 26%, р=0,006), табл. 21. Культура Aspergillus spp. была выделена у 28 (37%) больных, из них у 24 был определен один вид Aspergillus spp. , у 4 - ассоциация двух видов Aspergillus spp., табл. 22. Видовое разнообразие было представлено, прежде всего, A.fumigatus (68%), далее A.ßavus (18%), A.niger (5%), A.versicolor (3,5%), в 1 (3,5%) случае идентификацию до вида не проводили. Видовая принадлежность грибов в анализируемые периоды была идентичной. У 8 больных Aspergillus spp. были выделены из мокроты, у 16 - из бронхоальвеолярной жидкости, у 3 - из содержимого бронхов (смыв), у 1 - из биоптата легкого.

Таблица 21. Диагностика ИАЛ

Показатели Число больных ИАЛ, п (%) Р

Всего п=75 2000-2003 гг. п=31 2004-2006гг. п=44

Культура Aspergillus (только) 17 (23) 13 (42)* 4(9)* 0,001

Культура Aspergillus + антиген Aspergillus 11(15) 4(13) 7(16) >0.05

Антиген Aspergillus (только) 34 (45) 8 (26)* 26 (59)* 0,006

KT легких (только) 13(17) 6(19) 7(16) >0.05

Положительный антиген Aspergillus (галактоманнан) был выявлен у 45 (60%) больных ИАЛ. Диагноз ИАЛ был поставлен только на основании изменений компьютерной томографии легких у 13 (17%) больных, но у троих из них Aspergillus spp. были выявлены позже, в процессе лечения, из исследуемых образцов нижних дыхательных путей. Таким образом, в соответствии с Международными критериями частота доказанного инвазивного аспергиллеза легких составила 1% (1 больной, биопсия легкого), вероятного - 82% (61 больной), возможного - 17% (13 больных).

Таблица 22. Спектр Aspergillus spp. при ИАЛ

Число больных ИАЛ, п (%)

Спектр Aspergillus spp. Всего 2000-2003 гг. 2004-2006гг.

п=28 п=17 п=11

A. fumigatus 19(68) 12 (70) 7(64)

A.fumigatus (монокультура) 15 (54) 10 (58) 5(46)

А. fumigatus + A. niger 2(7) 1(6) 1(9)

А. fumigatus + A. flavus 2(7) 1 (6) 1(9)

A.ßavus 5(18) 2(12) 3(27)

A. niger 2(7) 1 (6) 1(9)

A.versicolor 1 (3,5) 1 (6) 0

Идентификацию не проводили 1 (3,5) 1 (6) 0

У всех больных отмечалось поражение легких, выявленное у 68 пациентов при рентгенологическом исследовании и компьютерной томографии, у 3 - только при рентгенографии, у 4 - только при компьютерной томографии. Диагностическая информативность рентгенологических исследований при ИАЛ была невысокой: совпадение изменений в легких на рентгенограммах и компьютерных томограммах было лишь у 31% больных (у 21 из 68). Проявления при ИАЛ на рентгенограммах легких оказались малоинформативными у 29% пациентов (у 20 из 68), а у 40% больных (у 27 из 68) они вообще отсутствовали. В табл. 23 представлена характеристика поражений легких при ИАЛ. Необходимо отметить, что изменения в диагностике ИАЛ, которые заключались в определении антигена Aspergillus, привели к более раннему выявлению инвазии

аспергиллами легких по данным компьютерной томографии, поскольку было отмечено снижение поздних томографических признаков ИАЛ (симптом "серпа") с 26% до 9% (р=0,05), табл. 23.

Таблица 23. Характеристика поражений легких при ИАЛ

Число больных ИАЛ, п (%)

Поражение легких Всего 2000-2003гг. 2004-2006гг.

п=75 п=31 п=44

Очаг (до 3 см) 30 (40) 9(29) 21 (48)

Фокус/инфильтрат (более 3 см) 45 (60) 22(71) 23 (52)

Симптом "серпа" 12(16) 8 (26)* 4(9)*

Симптом "ореола" 5(7) 0 5(11)

Примечание. * - отмечены отличия р=0,05. Симптомы "ореола" и "серпа" выявлены в очагах и фокусах поражения при ИАЛ.

Клинические проявления ИАЛ были неспецифичными у большинства больных, Температура более 38°С была зарегистрирована у 64 (85%) больных, менее 38°С - у 9 (12%), нормальная температура - у 2 (3%). Нормальная температура была у больного ХЛЛ и у реципиента аллогенного костного мозга. Другими проявлениями инфекции были кашель (49%), боль при дыхании (9%), одышка (9%). Кашель с выделением мокроты "ржавого" характера или с примесью крови относится к специфичным симптомам ИАЛ, однако, такой симптом был лишь у 9 пациентов (12%). У 17 (23%) больных выделялась мокрота без примеси крови, у 11 (15%) - был сухой частый надсадный кашель. Аускультативная симптоматика при ИАЛ также была неспецифичной, чаще дыхание было везикулярное и такое проявление наблюдалось у 47 (63%) больных.

С января 2000 г. по сентябрь 2004 г. для лечения ИАЛ использовали в основном амфотерицин В. С сентября 2004 г лечение ИАЛ стали проводить по новой программе, основные принципы этой программы были следующие: стартовая терапия ИАЛ вориконазолом (внутривенное введение), активное проведение компьютерной томографии легких на 7-9й день лечения вориконазолом и модификация лечения с учетом результатов исследования, назначение сочетания антимикотиков при рефрактерном ИАЛ. В случае положительной динамики, которая определялась сочетанием клинических (снижение или нормализация температуры) и радиологических (очаги в легких без динамики, нет дополнительных или уменьшение размеров старых очагов) признаков, назначали вориконазол в таблетках. Следующую компьютерную томографию легких проводили на ЗОЙ день от начала терапии вориконазолом.

Стартовое лечение ИАЛ было проведено амфотерицином В 50 больным, вориконазолом - 21, каспофунгином - 3, липосомальным амфотерицином В - 1. Излечение было достигнуто у 55% (у 41 из 75) больных. Процент излечений (монотерапия) при терапии вориконазолом был значимо выше, чем при лечении амфотерицином В: 77% (у 17 из 22, дополнительно в одном случае назначали при неэффективности амфотерицина В) против 34% (у 17 из 50, р=0,001). Выживаемость в течение 90 дней от момента диагностики ИАЛ составила 54,7% и была достоверно выше при лечении вориконазолом, чем амфотерицином В - 77,3% против 44% (р=0,012), рис. 5 (А), (Б).

Летальные исходы при ИАЛ были у 34 (45%) пациентов, у 21 (62%) из них при резистентной опухоли. Смерть в ремиссии зарегистрирована у 2 (6%) больных, у 11 (32%) пациентов - в период курсов индукции. Причиной смерти у 3 больных было легочное кровотечение, у 1 - кома (диссеминация аспергилл в головной мозг), у 6 - септический шок (присоединение бактериальной инфекции), у остальных - дыхательная недостаточность.

Рисунок 5. Выживаемость при ИАЛ в течение 90 дней (А), выживаемость при ИАЛ в зависимости от варианта лечения (Б)

Определены факторы, оказывающие влияние на результаты терапии ИАЛ, табл. 24. Процент излечений был значимо ниже при резистентности опухоли (15%), при сохранении нейтроиении (11%), при выделении культуры Aspergillus (32%), при проведении стартовой терапии ИАЛ амфотерцином В (34%). Частота излечений была достоверно выше при остром лейкозе (66%) в сравнении с другими нозологическими формами, при нейтропении длительностью менее 40 дней (66%).

Таблица 24. Излечение при ИАЛ в зависимости от анализируемых факторов

Анализируемые факторы Излечение в зависимости от анализируемого фактора (%) Р

Есть Нет

Резистентность опухоли 4/26(15) 37/49 (76) <0.0001

Сохранение нейтропении 2/18(11) 39/57 (68) 0,0001

Выделение культуры Aspergillus 9/28 (32) 32/47 (68) 0,0008

Стартовая терапия ИАЛ амфотерицином В 17/50(34) 18/25 (72) 0,003

Острый лейкоз 27/41 (66) 14/34(41) 0,03

Длительность нейтропении менее 40 дней 19/29 (66) 5/16(31) 0,03

Сопутствующая инфекция 16/33 (48) 25/42 (60) >0,05

Профилактика антимикотиком 12/22 (55) 29/53 (55) >0,05

Эмпирическая терапия 17/27(63) 24/48 (50) >0,05

Глюкокортикоиды 25/41 (61) 16/34 (47) >0,05

Нейтропения 24/45 (53) 21/45 (47) >0,05

Примечание. В столбцах - число случаев излечения к общему числу случаев (п/из).

Заключение. ИАЛ развивался преимущественно в период нейтропении, выявлена высокая частота у больных ОМЛ на этапе индукции. Основу ранней диагностики ИАЛ составляли определение антигена Aspergillus и проведение компьютерной томографии легких. У больных ИАЛ была выявлена высокая частота инфекций другой этиологии. Было доказано, что лечение вориконазолом увеличивает выживаемость при ИАЛ. Прогностическими неблагоприятными факторами были резистентность опухоли, сохранение нейтропении,

диагностика ИАЛ на основании выделения культуры Aspergillus, назначение амфотерицина В на 1-ом этапе лечения ИАЛ.

Источники инфицирования аспергиллами в гематологическом стационаре

Следующей задачей исследования стало изучение источников инфицирования аспергиллами в гематологическом стационаре. Для решения этой задачи был проведен микологический мониторинг образцов воздуха во всех отделениях ГНЦ РАМН с сентября 2000 по декабрь 2004 года. Внутри помещений центра было отобрано и проанализировано 1345 проб воздуха, выделено 151248 КОЕ мицелиальных грибов. Частота выявления микромицетов составила 93% (1250 из 1345 образцов). Концентрация спор микроскопических грибов в 1 пробе воздуха варьировала от 0 до 1300 КОЕ в м3.

Грибное многообразие воздуха включало 43 вида микромицетов, относящихся к 27 родам. Аспергиллы входили в число доминирующих родов комплекса и занимали третье место. Частота выявления спор Aspergillus spp. в пробах воздуха составила 45% (605 из 1345), удельный вес численности - 5,6% (8455 из 151248 КОЕ). Видовой спектр Aspergillus spp. в воздухе отделений был представлен 17 видами, табл. 25. Наиболее распространенными среди них являлись A.versicolor (42%), A.niger (13%), A.sydowii (12%), A.fumigatus (10%). На протяжении всего периода исследования отмечено постоянство обильного выявления A.versicolor (40-47%), снижение численности A.niger с 17 до 9% и A.fumigatus с 20 до 10%, увеличение уровня A.sydowii с 13 до 20%. Количественное содержание A.jlavus сохранялось на уровне 3-4%. Встречаемость доминирующих видов в образцах воздуха составляла 3066%. Частота обнаружения и численность остальных видов Aspergillus spp. не превышала соответственно 5% и 2%.

Таблица 25. Видовой спектр Aspergillus spp. в воздухе гематологических отделений ГНЦ РАМН (число КОЕ = 8455)_

Название вида Частота встречаемости в образцах воздуха (%), п=605 Численность

КОЕ % КОЕ/м3 (диапазон)

Всего проидентифицировано 8068

A.versicolor 400(66) 3360 42 2-96

A.niger 181 (30) 1006 13 2-6

A.sydowii 115(19) 982 12 2-32

A.fumigatus 163(27) 818 10 2-18

A.ochraceus 132(21) 708 9 2-6

A.alliaceus 111(18) 406 5 2-6

A.flavus 66(11) 348 4 2-6

A.flavipes 30(5) 160 2 2-8

A. ruber 42 (7) 92 1,0 2-6

A.Candidus 18(3) 52 0,6 2-4

A.restrictus 20 (3) 40 0,4 2

A.lerreus 20 (3) 20 0,2 2

A.amsteloidamii 10(1,6) 20 0,2 2

A.nidulans 8(1) 16 0,2 2

A.clavatus 6(1) 16 0,2 2-4

A.glaucus 4(0,6) 12 0,1 2-4

A.sclerotiorum 6(1) 12 0,1 2

Исследование 24 образцов воздуха на улице выявило более скудный видовой состав Aspergillus spp., ограниченный 10 видами. Частота выявления аспергилл составила 54% (13

из 24 образцов). В структуре грибного комплекса внешней среды преобладали следующие виды: Л.аШасеиБ - 27%, А.$ит'щаЬл$ - 16%, А.п/§ег - 14%.

Рисунок 6. Концентрация спор Aspergillus spp. в воздухе различных отделений ГНЦ РАМН

Концентрация спор аспергилл в воздухе палат, душевых комнат и коридора представлена на рис.6. Минимальное содержание установлено в палатах, оснащенных системой вентиляции с ламинарным потоком воздуха (1,8 КОЕ/м3) и современных одноместных палатах, оборудованных приточно-вытяжной системой вентиляции (2,1 КОЕ/м3). Наиболее заспоренным был воздух в четырехместных палатах с общей обменной вентиляцией (12,2 КОЕ/м3). Максимальное содержание аспергилл в воздухе отмечено в коридоре. Выявлено существенное увеличение содержания спор Aspergillus spp.B воздухе отделений центра во время ремонтных работ. При замене напольного покрытия и дверной коробки в палате численность спор возросла с 3,0 КОЕ/м3 (до ремонта) до 19,5 КОЕ/м3 (в период ремонта). После окончания ремонтных работ содержание спор Aspergillus spp. снизилось до 1,5 КОЕ/м3. Включение вентиляции в новом отделении привело к снижению концентрации Aspergillus spp. в палатах с 4,8 КОЕ/м3 до 0,5 КОЕ/м3, в душевых комнатах - с 5,3 КОЕ/м3 до 0,8 КОЕ/м3, в коридоре - с 6,8 КОЕ/м3 до 2,4 КОЕ/м3.

Заключение. Было доказано, что аспергиллы являются типичными представителями комплекса микромицетов, сформированного в воздухе гематологического стационара. Минимальная концентрация спор аспергилл была выявлена в одноместных палатах с ламинарным потоком воздуха и оснащенных приточно-вытяжной системой вентиляции.

ВЫВОДЫ

1. Тяжелые инфекционные осложнения у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения развиваются преимущественно в период критической нейтропении.

2. Этиологическая структура возбудителей сепсиса у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения характеризуется широким разнообразием микроорганизмов; частота выделения из гемокультур грамотрицательных аэробных бактерий составляет 49,1%, грамположительных аэробных бактерий - 43,4%, анаэробных бактерий - 0,2%, грибов -7,3%; у 7% больных этиология сепсиса полимикробная.

3. Ведущими возбудителями сепсиса являются Escherichia coli (18,6%), стафилококк коагулазонегативный (18,0%), Enterococcus spp. (9,9%), Klebsiella pneumoniae (7,3%), Pseudomonas aeruginosa (7,0%), Streptococcus группы "viridans" (6,0%); грибы в общей

структуре микроорганизмов занимают пятую позицию, определена низкая встречаемость C.albicans (21%).

4. Микроорганизмы, выделенные из гемокультур, проявляют высокий уровень резистентности к антимикробным препаратам, отмечена высокая частота выделения энтеробактерий с продукцией бета - лактамаз расширенного спектра, максимальная активность в отношении грамотрицательных бактерий определена у карбапенемов, из цефалоспоринов - у цефоперазона/сульбактама и цефепима, из аминогликозидов - у амикацина, в отношении грамположительных бактерий - у линезолида; выделены энтерококки, устойчивые к ванкомицину.

5. Молекулярное исследование грамотрицательных бактерий, выделенных из крови, доказывает наличие в стационаре двух путей инфицирования бактериями - экзогенного и эндогенного, с преобладанием эндогенного варианта; установлено, что для Escherichia coli наиболее характерным является эндогенный, а для других грамотрицательных бактерий, особенно для Pseudomonas aeruginosa, - смешанный вариант инфицирования.

6. Симптомы инфекции в течение недели до выделения бактерий из крови достоверно чаще присутствуют при сепсисе, обусловленном неферментирующими бактериями в сравнении с энтеробактериями (74% против 44%); выделение из гемокультур Escherichia coli и Klebsiella pneumoniae без продукции бета - лактамаз расширенного спектра значимо чаще происходит у больных вне лечения антибиотиками (50% против 7%), а неферментирующих бактерий - на фоне терапии антибиотиками (52,5% против 19%); на фоне применения карбапенемов достоверно чаще возникает сепсис, обусловленный Pseudomonas aeruginosa.

7. Для грамотрицательного сепсиса характерна высокая частота осложнений, основные из них - пневмония (53%), мукозит/стоматит (40%), некротическая энтеропатия (30%); пневмонии преобладают при сепсисе, обусловленном неферментирующими бактериями, прежде всего Pseudomonas aeruginosa, в сравнении с энтеробактериями (84% против 41%).

8. При грамотрицательном сепсисе и инвазивном аспергиллезе отмечена высокая частота инфекций другой этиологии, определяющим в их развитии является длительность нейтропении более 20 дней по сравнению с 10 днями (59% против 26%).

9. Неблагоприятными факторами, оказывающими влияние на частоту излечений при грамотрицательном сепсисе, являются развитие септического шока и перевод больного в реанимацию (25%), выделение из гемокультур синегнойной палочки (38%), выделение бактерий из крови на фоне симптомов инфекции в течение недели (38%), развитие пневмонии (42%), сохранение симптомов инфекции после выделения бактерий из крови и назначения антимикробных препаратов (58%), развитие сепсиса у больных апластической анемией (40%).

10. Лечение вориконазолом инвазивного аспергиллеза легких приводит к достоверному увеличению частоты излечений; выживаемость в течение 90 дней при лечении вориконазолом составляет 77,3% против 44% при терапии амфотерицином В; факторами неблагоприятного прогноза являются резистентность опухоли (15%), сохранение нейтропении (11%), выделение культуры Aspergillus (32%), проведение лечения амфотерцином В (34%).

11. Аспергиллы являются типичными представителями комплекса микромицетов воздуха гематологического стационара, минимальная концентрация их определена в одноместных палатах с ламинарным потоком воздуха и оснащенных приточно-вытяжной системой вентиляции.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Инфекционные осложнения у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения характеризуются 1) широким спектром возможных возбудителей; 2) высоким уровнем резистентности грамотрицательных бактерий к антимикробным препаратам, 3) высокой частотой сопутствующих инфекций другой этиологии (грибы, вирусы и др.).

2. Основными диагностическими исследованиями при лихорадке в период нейтропении являются 1) проведение посевов крови до назначения антибиотиков во флаконы для автоматического анализатора гемокультур, 2) мониторинг определения антигена Aspergillus у больных высокого риска развития инвазивного аспергиллеза (больные острым лейкозом и реципиенты аллогенного костного мозга), 3) проведение компьютерной томографии легких при персистирующей лихорадке и нейтропении, 4) микробиологическое исследование образцов, связанных с инфекцией.

3. Препаратами выбора (1й этап эмпирической терапии) при лихорадке в период нейтропении являются цефоперазон/сульбактам или цефепим, их назначают в режиме монотерапии или в сочетании с амикацином. При стойкой персистирующей фебрильной температуре и при отсутствии очага инфекции замену антибиотиков 1-го этапа проводят на карбапенем, имипенем или меропенем, (2й этап эмпирической терапии) ввиду высокой частоты выделения штаммов энтеробактерий с продукцией БЛРС; при наличии очага инфекции модификацию антимикробной терапии проводят согласно результатам микробиологического исследования.

4. При персистирующей лихорадке и сохраняющейся нейтропении повторяют комплекс диагностических исследований, включая компьютерную томографию легких, поскольку частота развития инфекций другой этиологии находится в корреляции с длительностью нейтропении и значимо чаще в этот период диагностируют пневмонию.

5. Препаратом выбора в лечении инвазивного аспергиллеза является вориконазол. При обнаружении дрожжевых грибов в гемокультуре начинают лечение антимикотиком широкого спектра активности: каспофунгином, или амфотерицином В, или вориконазолом; флуконазол назначают только после идентификации грибов и определения чувствительности. Подобная тактика лечения обусловлена низкой долей выделения Candida albicans при фунгемии.

6. Препаратами выбора в лечении инфекций, обусловленных грамположительными бактериями, являются линезолид и ванкомицин. Не обосновано эмпирическое назначение ванкомицина, когда единственным симптомом является лихорадка.

7. Крайне важным в контроле над госпитальными инфекциями является соблюдение эпидемиологических мероприятий - это изоляция больных с полирезистентной микрофлорой, проведение курсов ПХТ в палатах, оснащенных адекватной приточно-вытяжной вентиляцией.

Сокращения, используемые в тексте

ЕК - E.coli и К. pneumoniae

ЕК, БЛРС - E.coli и К. pneumoniae с продукцией бета - лактамаз расширенного спектра ДрЭн - другие энтеробактерии РА - P. aeruginosa

ДрНФ - другие неферментирующие бактерии

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. Алехина J1.K., Клясова Г.А., Сперанская Л.Л. и др. Грамотрицательные бактериемии при нейтропении. Проблемы гематологии и переливания крови. 2002, N1, с.З

2. Байдильдина Д.Д., Солопова Г.Г., Масчан М.А., Шнейдер М.М., Хачатрян Л.А., Новичкова Г.А., Клясова Г.А., Масчан A.A. Катетерассоциированная фунгемия с поражением легких, вызванная Paecilomyces lilacinus, у 2 больных острым лейкозом. Гематология и трансфузиология. 2007, N4, с.42-46

3. Беденков A.B., Решедько Г.К., Кречикова О.И., Клясова Г.А. и др. Чувствительность нозокомиальных штаммов Pseudomonas aeruginosa, выделенных из крови. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2001, Том 3, приложение, с .9 Материалы IV Международной конференции МАКМАХ "Антимикробная терапия"

4. Веселов A.B., Страчунский Л.С., Мултых И.Г., Клясова Г.А. и др. Эпидемиология возбудителей кандидозов и их чувствительность к азолам: результаты исследования ARTEMIS Disk в России. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2005, N1, с.25-33

5. Веселов A.B., Климко H.H., Кречикова О.И., Клясова Г.А. и др. In vitro активность флуконазола и вориконазола в отношении более 10000 штаммов дрожжевых грибов: результаты 5-летнего проспективного исследования ARTEMIS Disk в России. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2008, N10(4) с. 345-354

6. Виноградова М.А., Клясова Г.А., Михайлова Е.А., Устинова E.H., Савченко В.Г. Инвазивный аспергиллез легких у больных апластической анемией. Успехи медицинской микологии. 2006, том VIII, с. 118-119

7. Виноградова М.А., Клясова Г.А., Трушина Е.Е., Устинова E.H., Михайлова Е.А. Инфекционные осложнения в дебюте апластической анемии. Гематология и трансфузиология. 2007, N4, с. 16-21

8. Гапстян Г.М., Городецкий В.М., Готман Л.Н., Гржималовский A.B., Клясова Г.А., Сперанская Л.Л., Тихонова Л.Ю., Каражас Н.В. Алгоритм диагностики поражений легких при депрессиях кроветворения. Пособие для врачей. М, 2001, МЗ РФ-ГНЦ РАМН, с. 1-47

9. Готман Л.Н., Яцык Г.А., Клясова Г.А. Ранние компьютерно-томографические признаки в диагностике некоторых микозов легких при миелотоксическом агранулоцитозе. Терапевтический архив. 2008, N7, с.30-33

10. Егорова Е.К., Соркина О.М., Сперанская Л.Л., Кравченко С.К., Кременецкая A.M., Клясова Г.А. Нокардиоз легких у иммунокомпрометированных больных. Гематология и трансфузиология. 2007, N4, с.39-42

11. Клясова Г., Савченко В., Паровичникова Е., Исаев В., Любимова Л., Менделеева Л. Эффективность итраконазола у больных гемобластозами. Материалы III Международного микологического симпозиума, Санкт-Петербург, 1995, с.63

12. Клясова Г.А., Савченко В.Г., Паровичникова E.H. и др. Эмпирическая антибиотикотерапия в гематологической клинике. Материалы III Всероссийского съезда гематологов и трансфузиологов, Санкт-Петербург, 1996, с.21

13. Клясова Г.А., Савченко В.Г. Микотические инфекции у онкогематологических больных. Проблемы гематологии и переливания крови. 1997, N1, с.20-26

14. Клясова Г.А., Савченко В.Г. Тактика антибиотической терапии инфекционных осложнений у больных с критической нейтропенией. Проблемы гематологии и переливания крови. 1998, N4, с.54-64

15. Клясова Г.А., Савченко В.Г., Паровичникова E.H., Толкачева Т.В., Шулутко Е.М., Хорошко Н.Д. Применение меропенема у больных с нейтропенией. Антибиотики и химиотерапия. 1998, N1, с.28-31

16. Клясова Г.А., Савченко В.Г., Паровичникова E.H. и др. Эмпирическая антибиотическая терапия у больных острыми лейкозами: итоги многоцентрового исследования. Терапевтический архив. 1998, N7, с.15-21

17. Клясова Г.А. Рациональная антибактериальняа терапия при критической нейтропении. Инфекции и антимикробная терапия. 2000, N1, с. 16-24

18. Клясова Г.А., Савченко В.Г., Паровичникова E.H. и др. Сравнительная эффективность цефтриаксона в сочетании с коротким, в течение трех дней, и длительным применением амикацина у больных с нейтропенией. Результаты сравнительного многоцентрового исследования. Материалы научно-практической конференции, г.Санкт-Петербург, 2000, с. 109-110

19. Кпясова Г.А. Микотические инфекции: клиника, диагностика, лечение. Инфекции и антимикробная терапия. 2000, N6, с. 184-189

20. Клясова Г.А., Савченко В.Г., Любимова Л.С. и др. Сравнительная эффективность монотерапии меропенемом и комбинации цефтазидима с амикацином в режиме эмпирической терапии при трансплантации костного мозга. Инфекции и антимикробная терапия. 2000, N6, с. 172-178

21. Клясова Г.А. Инфекционные осложнения у больных с нейтропенией: особенности эпидемиологии и лечения. Кремлевская медицина. 2001, N 1, с. 12-20

22. Клясова Г.А. Инвазивные микозы в онкогематологии: современное состояние проблемы. Современная онкология. 2001, N2, том 3, с.61-66

23. Клясова Г.А., Толкачева Т.В., Петрова Н.А. Эволюция микроорганизмов при миелотоксическом агранулоцитозе. Гематология и трансфузиология. 2001, N3, с.38-42

24. Клясова Г.А. Септицемия при нейтропении: алгоритмы диагностики и антибактериальной терапии. Consilium medicum, экстра-выпуск, 2001, с.14-18

25. Клясова Г.А., Савченко В.Г., Любимова Л.С. и др. Профилактика дифлюканом грибковых инфекций при трансплантации костного мозга. Гематология и трансфузиология. 2001, N6, с.29-33

26. Клясова Г.А., Петрова Н.А., Алехина Л.К. Особенности комплексов микроскопических грибов воздуха в отделениях ГНЦ РАМН. Современная микология в России. Материалы первого съезда микологов, 2002, с.59

27. Клясова Г.А., Петрова Н.А., Толкачева Т.В. и др. Фунгемии при гемобластозах. Современная микология в России. Материалы первого съезда микологов, 2002, с.360

28. Клясова Г.А., Петрова Н.А., Алехина Л.К. и др. Фунгемия при гемобластозах и ее исходы. Проблемы гематологии и переливания крови. 2002, N1, с.39

29. Клясова Г.А., Сперанская Л.Л., Алехина Л.К. Антимикробная активность нового антибактериального препарата сульперазона. Проблемы гематологии и переливания крови. 2002, Nl,c.39

30. Клясова Г.А., Алехина Л.К, Сперанская Л.Л. и др. Применение сульперазона у иммунокомпрометированных больных. Гематология и трансфузиология. 2002, N6, с.13-17

31. Клясова Г.А. Протокол антибиотической терапии у больных гемобластозами. В кн. Программное лечение лейкозов. М., Фолиант, 2002, с.224-238

32. Клясова Г.А., Петрова Н.А., Сперанская Л.Л. и др. Фунгемия у иммуноскомпрометированных больных. Результаты восьмилетнего исследования. Успехи медицинской микологии. 2003, Том 2, с.241-242

33. Клясова Г.А., Петрова Н.А., Шарикова О.А. и др. Инвазивный аспергиллез в гематологической практике. Успехи медицинской микологии. 2003, Том 2, с.242-243

34. Клясова Г.А., Петрова Н.А., Галстян Г.М. и др. Инвазивный аспергиллез у иммуноскомпрометированных больных. Терапевтический архив. 2003, N7, с.63-68

35. Клясова Г.А. Глава "Лечение и профилактика инфекционных осложнений при нейтропении." Руководство по клинической гематологии, под ред. акад. А.И.Воробьев, М„ "Ньюдиамед"; 2003, т.2, с.210-231

36. Клясова Г.А. Глава "Инфекции в онкогематологии." Руководство по антимикробной химиотерапии, под ред. В.П.Яковлева, С.В.Яковлева, М., "Литтерра", 2003, с.483-495

37. Клясова Г.А., Петрова Н.А., Савченко В.Г. и др. Инвазивный аспергиллез у иммунокомпрометированных больных. Проблемы медицинской микологии. 2003, том 5, N2, с.38-39

38. Клясова Г.А., Петрова Н.А., Толкачева Т.В. и др. Эффективность итраконазола в суспензии при лечении орофарингеального кандидоза у иммунокомпрометированных больных. Проблемы медицинской микологии. 2003, том 5, N2, с.45-46

39. Клясова Г.А. Эмпирическая монотерапия цефепимом при фебрильной нейтропении. Антибиотики и химиотерапия. 2003, N7, с.33-38

40. Клясова Г.А., Петрова Н.А., Толкачева Т.В. и др. Лечение итраконазолом в суспензии орофарингеального кандидоза у иммунокомпрометированных больных. Гематология и трансфузиология. 2004, N1, с. 19-24

41. Клясова Г.А., Петрова Н.А., Устинова Е.Н. и др. Итраконазол в суспензии: эффективное применение при орофарингеальном кандидозе у больных гемобластозами. Успехи медицинской микологии. Том IV, 2004, с.221-223

42. Клясова Г.А. Место Кансидаса в лечении инвазивных микозов. Русский медицинский журнал. 2004, N5, с.3-6

43. Кпясова Г.А., Петрова H.A., Сперанская J1.J1. и др. Фунгемия у иммунокомпрометнрованных больных: проблема в лечении. Проблемы медицинской микологии. 2004, Том 6, N2, с.83-84

44. Клясова Г.А. Кандидозные инфекции в хирургической практике. Русский медицинский журнал. 2004, N8, с.548-561

45. Клясова Г.А., Петрова H.A., Готман Л.Н. и др. Инвазивный аспергиллез легких в гематологической практике. Успехи медицинской микологии. 2005, том VI, с.96-97

46. Клясова Г.А., Петрова H.A., Паровичникова E.H. и др. Инвазивный аспергиллез легких. Терапевтический архив. 2005, N7, с.65-71

47. Клясова Г.А., Фролова И.Н., Яцык Г.А. и др. Вориконазол - препарат выбора в лечении инвазивного аспергиллеза. Успехи медицинской микологии. 2006, том VIII, с.121-123

48. Клясова Г.А., Сперанская Л.Л., Миронова A.B. и др. Возбудители сепсиса у иммунокомпрометированных больных: структура и проблемы антибиотикорезистентности (результаты многоцентрового исследования). Гематология и трансфузиология. 2007, N1, с.11-19

49. Клясова Г.А., Паровичникова E.H., Галстян Г.М. и др. Алгоритмы лечения и профилактики кандидоза и аспергиллеза у взрослых больных лейкозами, лимфомами и депрессиями кроветворения. Гематология и трансфузиология. 2007, N4, с.3-8

50. Клясова Г.А., Бриллиантова А.Н., Миронова A.B. Генотипирование грамотрицательных бактерий, выделенных из крови при сепсисе у больных с гематологическими заболеваниями. Терапевтический архив. 2007, N7, с.74-80

51. Клясова Г.А. Глава "Микозы при гемобластозах". Клиническая онкогематология. под ред. проф. Волковой М.А., М, Медицина, 2007, с.1044-1066

52. Клясова Г.А., Трушина Е.Е., Миронова A.B. и др. Сравнительная активность аминогликозидов in vitro в отношении микроорганизмов, выделенных из крови у иммунокомпрометированных больных (результаты многоцентрового исследования). Гематология и трансфузиология. 2008, N6, с.12-17

53. Клясова Г.А. Глава "Антимикробная терапия." Программное лечение лейкозов, под ред. член-корр. Савченко В.Г., М, ООО "Русская книга", 2008, с.400-425

54. Клясова Г.А. Глава "Противогрибковая терапия." Программное лечение лейкозов, под ред. член-корр. Савченко В.Г., М, ООО "Русская книга", 2008, с.425-436

55. Клясова Г.А. Глава "Современные системные антимикотики. Вориконазол." Грибковые инфекции под ред. Сергеева А.Ю., Сергеева Ю.В.. М, БИНОМ, 2008, с.132-138

56. Клясова Г.А. Глава "Пневмоцистоз". Грибковые инфекции под ред. Сергеева А.Ю., Сергеева Ю.В., М, БИНОМ, 2008, с.420-429

57. Лапин В.А., Ротанова М.Н., Птицин С.А., Паровичникова E.H., Клясова Г.А. Диссеминированный фузариоз у больной острым миелобластным лейкозом. Гематология и трансфузиология. 2007, N4, с.37-39

58. Менделеева Л.П., Митиш Н.Е., Клясова Г.А. и др. Инфекционные осложнения после трансплантации аутологичных гемопоэтических клеток крови при гемобластозах. Терапевтический архив. 2005, N7, с.33-39

59. Митиш Н.Е., Менделеева Л.П., Клясова Г.А. и др. Стоматиты у реципиентов стволовых гемопоэтических клеток. Проблемы гематологии и переливания крови. 2004, N2, с.48-49

60. Митиш Н.Е., Менделеева Л.П., Клясова Г.А. и др. Инфекционные осложнения у больных гемобластозами в раннем посттрансплантационном периоде. Проблемы гематологии и переливания крови. 2004, N2, с.49

61. Митюшкина Т.А., Масчан A.A., Новичкова Г.А., Катермазова М.К., Толкачева Т.В, Клясова Г.А. Определение эффективности флуконазола у детей с острым лимфобластным лейкозом, колонизированных грибами. Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2001, Том 3, приложение с.28

62. Михайлова Е.А., Клясова Г.А., Устинова E.H., Савченко В.Г. Программная терапия апластической анемии. Клинические рекомендации, издательство ООО "Компания Боргес", Москва, 2008, с.1- 26

63. Петрова H.A., Толкачева Т.В., Голосова Т.В., Клясова Г.А. Чувствительность дрожжевых грибов рода кандида к противогрибковым препаратам. Материалы II Российской конференции по внутрибольничным инфекциям, 1999, с. 183-184

64. Петрова H.A., Кляеова Г.А., Толкачева T.B. Этиологическая структура кандидоза у иммуноскомпрометированных больных. Современная микология в России. Материалы первого съезда микологов, 2002, с.371

65. Петрова H.A., Толкачева Т.В., Кляеова Г.А. Изменение микрофлоры толстого кишечника у больных гемобластозами в зависимости от курсов полихимиотерапии. Проблемы гематологии и переливания крови. 2002, N1, с.69

66. Петрова H.A., Кляеова Г.А., Фуныгина Л.П. Особенности распространения мицелиальных грибов в воздухе гематологических отделений ГНЦ РАМН. Успехи медицинской микологии. 2003, Том 1, с.26-28

67. Петрова H.A., Кляеова Г.А., Шарикова O.A. Колонизация слизистой зева дрожжевыми грибами у больных гемобластозами. Успехи медицинской микологии. 2003, Том 1, с.28-29

68. Петрова H.A., Кляеова Г.А., Толкачева Т.В., Сперанская Л.Л., Шарикова O.A. Чувствительность дрожжевых грибов, выделенных от больных гемобластозами, к современным противогрибковым препаратам. Успехи медицинской микологии. 2003, Том 1, с.29-30

69. Петрова H.A., Кляеова Г.А., Фуныгина Л.П. Распространение мицелиальных грибов в гематологическом стационаре. Терапевтический архив. 2003, N7, с.58-63

70. Петрова H.A., Кляеова Г.А. Особенности микромицетов в воздухе отделений гематологического научного центра. Проблемы медицинской микологии. 2003, N2, с.77

71. Петрова H.A., Кляеова Г.А. Чувствительность нозокомиальных штаммов дрожжевых грибов к противогрибковым препаратам. Иммунопатология Аллергология Инфектология. 2004, N1, с.66-72

72. Петрова H.A., Кляеова Г.А., Шарикова O.A., Толкачева Т.В. Результаты микологического мониторинга у больных гемобластозами. Успехи медицинской микологии. 2004, том IV, с.66-67

73. Петрова H.A., Кляеова Г.А., Шарикова O.A., Сперанская Л.Л. Результаты in vitro чувствительности внутрибольничных штаммов дрожжевых грибов в гематологической клинике. Успехи медицинской микологии. Том III, 2004, с.68-70

74. Петрова H.A., Кляеова Г.А. Возможные источники инфицирования грибами рода Aspergillus в гематологическом стационаре. Проблемы медицинской микологии. 2004, N2, с.105-106

75. Петрова H.A., Кляеова Г.А. Особенности формирования комплекса мицелиальных грибов в воздухе отделений Гематологического научного центра. Сопроводительная терапия в онкологии. 2004, N1, 17-18

76. Петрова H.A., Кляеова Г.А. Возможные источники инфицирования аспергиллами в гематологическом стационаре. Терапевтический архив. 2005, N7, с.71-77

77. Покровская О.С., Менделеева Л.П., Грибанова Е.О., Устинова E.H., Кляеова Г.А., Шарикова O.A., Гапстян Г.М., Яцков К.В., Варламова Е.Ю., Капланская И.Б., Федорова С.Ю., Дроздова А.Г., Савченко В.Г. Менингит, вызванный Listeria monocytogenes, у больного с множественной миеломой. Терапевтический архив. 2003, N7, с.76-78

78. Птицин С.А., Кляеова Г.А., Масчан A.A. Определение in vitro чувствительности к флуконазолу и вориконазолу госпитальных штаммов Candida spp. в двух гематологических стационарах Москвы. Успехи медицинской микологии. 2006, том VII, с. 170-171

79. Птицин С.А., Кляеова Г.А. Сопоставление двух методов исследования чувствительности Candida spp. к флуконазолу: диско-диффузионного и тест-систем "FUNGITEST". Успехи медицинской микологии. 2006, том VII, с. 172

80. Птицин С.А., Кляеова Г.А. Активность вориконазола в отношении госпитальных штаммов Candida spp. резистентных к флуконазолу. Данные диско-диффузионного метода. Успехи медицинской микологии. 2007, том X, с.26-27

81. Птицин С.А., Кляеова Г.А., Масчан A.A. Активность флуконазола в отношении госпитальных штаммов Candida spp.. Успехи медицинской микологии. 2007, том X, с.27-28

82. Савченко В.Г., Кляеова Г.А., Паровичникова E.H., Исаев В.Г. и др. //Эмпирическая антибиотическая терапия при лихорадке у больных лейкозами в период агранулоцитоза. Материалы III Российского национального конгресса "Человек и лекарство". Москва, 1996, с.198

83. Толкачева Т.В., Петрова Н.А., Клясова Г.А. Частота выделения и видовой спектр дрожжевых грибов в кишечнике у больных гемобластозами. Успехи медицинской микологии. 2003, Том 1, с.30-32

84. Трушина Е.Е., Клясова Г.А., Сперанская Л.Л., Птицин С.А. Значение грибов в этиологии эзофагитов у больных опухолями системы крови. Успехи медицинской микологии. 2007, том X, с.72-73

85. Файнберг М.Р., Кравченко С.В., Клясова Г.А. и др. Пневмоцистные пневмонии у больных гемобластозами. Проблемы гематологии и переливания крови. 2002, N1, с.89

86. Харазова Л.В., Клясова Г.А., Бронин Т.О. и др. Изучение колонизации слизистых оболочек у больных с гемобластозами. Успехи медицинской микологии. 2004, с.59-61

87. Харазова Л.В., Бронин Г.О., Клясова Г.А. и др. Колонизация слизистых оболочек грибковой флорой у детей, больных острым лейкозом. Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. 2006, N1, с. 15-20

88. Яцык Г.А., Клясова Г.А., Готман Л.Н. Радиологические проявления при инвазивном аспергиллезе легких у иммунокомпрометированных больных. Успехи медицинской микологии. 2006, том VIII, с. 135-136

89. Яцык Г.А., Клясова Г.А., Готман Л.Н. Особенности радиологических проявлений в легких на момент диагностики инвазивного аспергиллеза у больных с опухолями системы крови в зависимости от уровня лейкоцитов. Успехи медицинской микологии. 2007, том X, с.225-226

90. Brilliantova A., Kliasova G., Mironova A., Sidorenko S. Clonal dissemination of Gramnegative bacteria causing bloodstream infections in patients with haematological malignancies. Clinical Microbiology and Infection, 2007, Vol.13, Supp.l, p.S176

91. Brilliantova A., Kliasova G., Mironova A., Novichkova, Bobrynina V. Spread of epidemic vancomycin-resistant Enterococcus faecium clonal complex 17 in haematological patients in Russia. Clinical Microbiology and Infection, 2009, Vol. 15 , Supp. 4 , abst. 112141

92. Brilliantova A., Kliasova G., Sidorenko S., Mironova A. Evaluation of virulence and resistance genes structure in vancomycin-resistant E.faecium. Clinical Microbiology and Infection, 2008, Vol. 14, Supp.7, p.S624

93. Brilliantova A., Kliasova G., Mironova A., Sidorenko S., Tishkov V. Molecular characteristic and virulence evaluation of vancomycin-resistant enterococci in hematological patients. 481'1 Interscience Conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy (ICCAC), Washington, DC, 2008, p. 189, C2-1999

94. Kliasova G., Savchenko V., Parovichnikova E., Isaev V. et al. Empirical antimicrobial therapy in febrile neutropenic patients. Proceedings of the 2"d International symposium on Febrile Neutropenia, Brussels, 1995, abstr.60

95. Kliasova G., Savchenko V., Tolkacheva Т., Shulutko E., Khoroshko N. Meropenem in the treatment of serious infections in granulocytopenic patients. 5lh" scientific meeting of European Society of Chemotherapy Infectious Diseases, 1997, abstr.BOH

96. Kliasova G., Savchenko V., Parovitchnikova E., Isaev V. Ampicillin/Sulbactam and Fluconazole for the treatment of febrile neutropenia. Clinical Microbiology and Infection. 1997, V.3, Supp.2, abstr. 1345

97. Kliasova G., Savchenko V., Parovichnikova E., Isaev V., Tolkacheva Т., Turina N., Mendeleeva L., Lubimova L. Meropenem monotherapy of severe infections in neutropenic patients. Supportive Care in Cancer. 1998, V.6, No3, p.316

98. Kliasova G., Savchenko V., Parovichnikova E. et al. Ceftriaxone with a short or long course of amikacin for the empiric treatment of fever in neutropenic patients. Clinical Microbiology and Infection. 2000, Vol.6, Supp. 1, abstr. WeP320

99. Kliasova G, Savchenko V., Lubimova L. et al. Monotherapy with meropenem vs. combination therapy with ceftazidime plus amikacin as empiric therapy for febrile neutropenic bone marrow transplant patients. Clinical Microbiology and Infection. 2001, Vol.7, p.224

100. Kliasova G., Sidorenko S., Speranskaja L. et al. Detection of vanB2 in Enterococcus gallinarum in Moscow, Russia. International Journal of Antimicrobial Agents. 2004, Vol.24/S2, abstr 366/79P

101. Kliasova G., Ptitcin S., Maschan A. In vitro activity of fluconazole against Candida species isolated from patients in two hematological centers of Russia. Mycosis. 2005, Vol.48, Suppl.2, abstr P015

102. Kliasova G., Mironova A., Speranskaya L. et al. The antimicrobial susceptibility of bacteraemia isolates of Gram-negative pathogens in seven haematological centers in Russia. Clinical microbiology and infection. 2006, Vol.12, Supp.4, abst. P1299

103. Kliasova G., Speranskaya L., Trushina E. et al. Bacteraemia and fungaemia in haematologic patients. Clinical Microbiology and Infection. 2007, Vol.13, Supp.l, p.S169

104. Mironova A., Cherkashin E., Kliasova G. et al. First detection of vancomycin-resistant enterococci in Russia: genetic background. Clinical microbiology and infection. 2006, Vol.12, Supp.4, abst. P1819

105. Mironova A., Kliasova G., Brilliantova A. Comparison of antibiotics susceptibility of different vancomycin-resistant Enterococcus faecium clones. Clinical Microbiology and Infection. 2007, Vol.13, Supp.l, p.S169, abst. P700

106. Mironova A., Kliasova G., Brilliantova A., Sidorenko S. Clonal dissemination of vancomycin-resistant Enterococcus faecium isolates in two Russian centers over a 3-year period. Clinical Microbiology and Infection. 2007, Vol.13, Supp.l, abst. R2149

107. Petrova N.A., Tolkachova T.V., Kliasova G.A. In vitro susceptibility of antifungal agents against Candida species by the fungitest. Clinical Microbiology and Infection. Vol.6, Supp. 1,2000, abstr.TuP31

108. Petrova N., Kliasova G., Tolkachova T. Microflora of throat and faeces in bone marrow transplant patients. Clinical Microbiology and Infection. 2001, Vol.7, p.221

109. Veselov A., Sukhorukova M., Kliasova G. et al. The susceptibility of clinically significant Candida isolates to fluconazole in the European part of Russia. Clinical Microbiology and Infection. 2004, Vol. 10, p.631, abst R2196

110. Veselov A., Stratchounski L., Multih I., Kliasova G. et al. Susceptibility of Candida to Fluconazole (FLU) and Voriconazole (VOR) in Russia. 44th ICAAC 2004, Washington, USA, p.435/M-1795

111. Veselov A., Stratchounski L., Kliasova G. et al. Susceptibility of Candida glabrata and Candida krusei isolates to fluconazole and voriconazole (VOR) in Russia. International Journal of Antimicrobial Agents. 2004, Vol.24/S2, abstr 539/90P

112. Veselov A., Kliasova G., Agapova E. et al. Susceptibility of Candida Blood Isolates to Fluconazole (FLU) and Voriconazole (VOR) in Russia. 46,h ICAAC, 2006, San Francisco, USA, M-1593

113. Veselov A., Kliasova G., Kretchikova O. et al. Comparative activity of Fluconazole and Voriconazole against Candida isolates in Russia in 2004 and 2006. 47 ICAAC, 2007, Chicago, USA, M-1640

114. Veselov A., Klimko N., Kretchikova O., Kliasova G. et al. A Susceptibility of Candida isolates to fluconazole and voriconazole in Russia: the results of a 5-year prospective study. 48"' ICAAC, Washington, DC, 2008, p.641, M-1532

Заказ № 42-а/08/09 Подписано в печать 24.08.2009 Тираж 150 экз. Усл. п.л. 2,75

ООО "Цифровичок", тел. (495) 649-83-30; (495) 778-22-20 {(>,; www.cfr.ru; e-mail:info@efr.ru

 
 

Оглавление диссертации Клясова, Галина Александровна :: 2009 :: Москва

Список используемых сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Этиологическая структура инфекционных осложнений у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения

1.2. Резистентность микроорганизмов к антимикробным препаратам

1.3. Антибактериальная терапия инфекций при нейтропении

1.4. Источники инфицирования бактериями в стационаре

1.5. Инвазивный аспергиллез у иммунокомпрометированных больных

1.6. Источники инфицирования аспергиллами и мероприятия по предупреждению развития инвазивного аспергиллеза

 
 

Введение диссертации по теме "Гематология и переливание крови", Клясова, Галина Александровна, автореферат

Актуальность проблемы.

Инфекционные осложнения являются ведущими у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения. Инфекции у них характеризуются рядом особенностей, которые включают скудность клинических проявлений, стремительность в развитии, полиэтиологичность. Они являются неотъемлемой частью такого полисиндромного заболевания как цитостатическая болезнь [1]. Течение инфекций в период критической нейтропении может быть фатальным, если не начата своевременно терапия эффективными антибиотиками. Спектр микроорганизмов, ответственных за инфекционный процесс у больных, периодически претерпевает изменения. Так в 70-е годы преобладало выделение из крови грамотрицательных бактерий, в 90-е годы - грамположительных, а в настоящее время вновь появилась тенденция к увеличению роли грамотрицательных микроорганизмов в этиологии сепсиса [11, 141, 181, 218, 243]. Что же касается инвазивных микозов, то в их структуре за истекшие годы существенно уменьшилась частота выделения грибов рода Candida и возросла доля Aspergillus [34,123].

В выборе противоинфекционных средств постоянно возникают ограничения не только из-за изменений в спектре патогенов, но и по причине формирования новых механизмов резистентности бактерий. Нередко лечение антибиотиками, эффективность которых была подтверждена исследованиями в 90-е годы, становится неуспешным в настоящее время. Резистентность микроорганизмов, выделяемых у больных с нейтропенией, как и их спектр, может различаться в отдельных странах и в отдельных клиниках. В этой связи крайне важным является изучение этиологической структуры возбудителей сепсиса и их чувствительности к антибиотикам в современных условиях. Полученные данные необходимы как для разработки тактики эмпирического назначения антибиотиков, так и направленной антимикробной терапии при программном лечении гемобластозов и депрессий кроветворения.

Наряду с регистрируемыми переменами в структуре возбудителей сепсиса и их чувствительности in vitro к антибиотикам, произошли изменения и в клинических проявлениях инфекционного процесса, в методах диагностики, в эффективности антимикробных препаратов. Проблемными стали другие инфекции, и такой инфекцией, наряду с грамотрицательным сепсисом, является инвазивный аспергиллез. Именно грамотрицательный сепсис и инвазивный аспергиллез легких являются ведущими и наиболее тяжелыми среди инфекционных осложнений у иммунокомпрометированных больных в настоящее время. Их значимость определяется тяжелым течением, удлинением периода госпитализации, высокой летальностью, немалыми финансовыми затратами на лечение. Сепсис - генерализованный инфекционный процесс и неотъемлемой частью его, наряду с инфекцией, является синдром диссеминированного внутрисосудистого свертывания, проявления которого были широко изучены в ранее выполненных научных работах [2, 4, 5], в то время как многие аспекты противомикробной терапии, диагностики в современных условиях этих наиболее тяжелых инфекций нуждаются в совершенствовании.

Также следует отметить, что в литературе, как правило, обсуждаются отдельные вопросы диагностики и антимикробной терапии инфекций у иммунокомпрометированных больных. В то же время, очевидно, что решению указанных задач может способствовать лишь углубленный совокупный анализ спектра возбудителей сепсиса, чувствительности их к антимикробным препаратам, современных подходов к диагностике, клинических особенностей тяжелых инфекций и прогностических факторов, влияющих на эффективность лечения. При этом, несомненно, важным является выяснение механизмов и источников инфицирования грамотрицательными бактериями и аспергиллами в стационаре в эпоху возрастающей резистентности к антибиотикам.

Актуальность настоящей работы определяется решением большого круга научных и практических вопросов, направленных на борьбу с наиболее тяжелыми инфекциями у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения.

Цель исследования

Разработать современные подходы к диагностике и антимикробной терапии тяжелых инфекционных осложнений у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения.

Задачи исследования

1. Исследовать этиологическую структуру возбудителей сепсиса, их чувствительность к антибиотикам у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения, разработать тактику эмпирической и направленной терапии инфекций.

2. Определить пути инфицирования грамотрицательными бактериями в стационаре с помощью генотипирования госпитальных штаммов бактерий, выделенных из крови при сепсисе у иммунокомпрометированных больных.

3. Изучить особенности диагностики, клинического течения, прогностические факторы, оказывающие влияние на результаты терапии сепсиса, вызванного грамотрицательными бактериями, в современных условиях.

4. Установить особенности диагностики, клинического течения, прогностические факторы, оказывающие влияние на результаты лечения инвазивного аспергиллеза легких.

5. Определить источники инфицирования аспергиллами в стационаре.

6. Разработать алгоритм диагностики и антимикробной терапии инфекционных осложнений у больных опухолями системы крови и депрессиями кроветворения.

Научная новизна исследования

Проведено первое в России многоцентровое исследование по изучению этиологической структуры и чувствительности к антибиотикам возбудителей сепсиса у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения. Детально изучена этиология возбудителей сепсиса, показано, что среди них преобладают грамотрицательные бактерии (49,1%), далее следуют грамположительные бактерии (43,4%), реже выявляют грибы (7,3%) и анаэробные бактерии (0,2%). Определено, что основными микроорганизмами являются Escherichia coli (18,6%) и стафилококк коагулазонегативный (18,0%). Отмечена высокая частота выделения энтеробактерий с продукцией бета - лактамаз расширенного спектра (БЛРС), а среди грибов выявлена низкая встречаемость Candida albicans (21%), преобладавших в прошлые годы.

Проведен сравнительный анализ чувствительности антибиотиков in vitro в отношении бактерий - возбудителей сепсиса. Зарегистрирована высокая резистентность микроорганизмов к антибиотикам, максимальная активность в отношении грамотрицательных бактерий определена у карбапенемов, из цефалоспоринов - у цефоперазона/сульбактама и цефепима; в отношении грамположительных бактерий - у линезолида. Впервые в России из крови выделены штаммы Enterococcus faecium, устойчивые к ванкомицину.

Молекулярное исследование возбудителей сепсиса доказало наличие двух путей инфицирования грамотрицательными бактериями в стационаре -экзогенного и эндогенного, с преобладание эндогенного варианта. Установлено, что для штаммов Escherichia coli наиболее характерным является эндогенный путь инфицирования, в то время как для других грамотрицательных бактерий, особенно для Pseudomonas aeruginosa, - смешанный вариант инфицирования. Генетическое изучение бактерий показало, что у штаммов с одинаковым генотипом могут быть разные параметры чувствительности, поэтому об экзогенном пути передачи инфекции нельзя судить только на основании результатов определения их чувствительности к антибиотикам.

Тяжелые инфекционные осложнения (грамотрицательный сепсис и инвазивный аспергиллез легких) развиваются преимущественно в период критической нейтропении (гранулоцитов < 0,5x109/л). Представлены особенности клинического течения сепсиса, обусловленного грамотрицательными бактериями в современных условиях. Выявлена высокая частота клинически доказанных инфекционных осложнений, из них основные - пневмония (53%), мукозит (40%), некротическая энтеропатия (30%). Наибольший риск развития пневмонии установлен при сепсисе, обусловленном неферментирующими бактериями, прежде всего P.aeruginosa (84%), в сравнении с энтеробактериями (41%).

Изучена антимикробная терапия при грамотрицательном сепсисе. Определена эффективность антибиотиков, назначаемых на 1-ом этапе лечения, которая составляет при сепсисе, вызванном энтеробактериями - 49%, неферментирующими бактериями - 29%; в половине случаев возникает необходимость в назначении карбапенемов. Более высокая частота излечения при добавлении карбапенемов отмечена при сепсисе, вызванном энтеробактериями в сравнении с неферментирующими бактериями. Выявлена полиэтиологичность инфекционных осложнений, более чем в половине случаев к цефалоспоринам или к карбапенемам дополнительно присоединены препараты других групп из-за развития сопутствующей инфекции иной этиологии. Определены прогностические факторы, оказывающие влияние на результаты терапии сепсиса, обусловленного грамотрицательными бактериями.

Зарегистрировано увеличение инвазивного аспергиллеза легких у иммунокомпрометированных больных. Выявлено преобладание этой инфекции при острых лейкозах, отмечена высокая частота в период индукции, продемонстрирована неспецифичность клинических признаков. Показано, что основу ранней диагностики инвазивного аспергиллеза легких составляют определение антигена Aspergillus (галактоманнан) и компьютерная томография легких. Доказано, что терапия вориконазолом инвазивного аспергиллеза приводит к достоверному увеличению частоты излечения в сравнении с амфотерицином В (77,3% против 44%). Определены факторы, отрицательно влияющие на успех терапии, - резистентность опухоли, сохранение нейтропении, выделение культуры Aspergillus, проведение лечения амфотерцином В.

Определена минимальная концентрация спор аспергилл в воздухе одноместных палатах с ламинарным потоком воздуха и оснащенных приточно-вытяжной системой вентиляции.

Научно-практическая ценность работы

Проведенное исследование позволило разработать оптимальную тактику антимикробной терапии у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения. На основании результатов изучения активности антибиотиков in vitro в отношении возбудителей сепсиса и анализа лечения грамотрицательного сепсиса внесены изменения в протокол эмпирической антимикробной терапии при лихорадке в период нейтропении, которые заключаются в назначении на 1-ом этапе цефоперазона/сульбактама или цефепима и замены их на карбапенем (имипенем или меропенем) в случае неэффективности.

Получены убедительные данные о механизмах инфицирования в стационаре. Всех пациентов с сепсисом, вызванном P.aeruginosa, следует изолировать, поскольку для этих микроорганизмов определено значимое преобладание экзогенного механизма инфицирования. Размещать в отдельных палатах следует больных с прогрессией опухоли, так как у них наиболее часто выявляются полирезистентные микроорганизмы, которые могут быть источником инфицирования в стационаре.

Клинический анализ случаев сепсиса, обусловленного грамотрицательными бактериями, показал, что выделение из крови штаммов E.coli и K.pneumoniae без продукции бета - лактамаз расширенного спектра значимо чаще происходит у больных до лечения антибиотиками, а неферментирующих бактерий - при использовании антибиотиков. Установлено, что на фоне применения карбапенемов достоверно чаще возникает сепсис, обусловленный штаммами P.aeruginosa.

Детальное изучение клинических проявлений сепсиса показало, что его первые симптомы возникают в течение недели до выделения бактерий из крови в 35% случаев, причем, значимо чаще при сепсисе, обусловленном неферментирующими бактериями (56%) в сравнении с энтеробактериями (26%). Это свидетельствует о необходимости активного проведения комплекса диагностических исследований, повторения их, изменения тактики антимикробной терапии при отрицательных результатах у больных с персистирующей лихорадкой. Отмечена высокая частота инфекций другой этиологии при грамотрицательном сепсисе и инвазивном аспергиллезе, что диктует необходимость повторных исследований при персистирующей гипертермии и нейтропении. Установлено, что периодом наибольшего риска присоединения инфекции является нейтропения длительностью более 20 дней, на фоне которой развиваются достоверно чаще сопутствующие инфекции другой этиологии, а также пневмонии, парапроктиты.

Показано, что современная диагностика инвазивного аспергиллеза легких должна базироваться на данных исследования антигена Aspergillus (галактоманнан) и компьютерной томографии легких, а не на результатах рентгенографии легких, поскольку в 69% не удается выявить изменений на рентгенограммах или они оказываются малоинформативными. Проведенные исследования позволили создать современные программы диагностики и лечения этого тяжелого осложнения и существенно улучшить выживаемость больных гемобластозами.

Положения, выносимые на защиту

1. Результаты изучения этиологической структуры сепсиса у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения свидетельствуют об увеличении частоты выделения из гемокультур грамотрицательных и снижении грамположительных бактерий.

2. Микроорганизмы, выделенные из гемокультур, характеризуются высоким уровнем резистентности к антимикробным препаратам; максимальную активность в отношении грамотрицательных бактерий проявляют карбапенемы, из цефалоспоринов - цефоперазон/сульбактам и цефепим, в отношении грамположительных бактерий- линезолид.

3. Генетическое исследование возбудителей сепсиса доказывает преобладание эндогенного пути инфицирования грамотрицательными бактериями в стационаре.

4. Для сепсиса, вызванного грамотрицательными бактериями, характерна высокая частота развития пневмонии, стоматита, некротической энтеропатии. На успех терапии сепсиса оказывают влияние вид возбудителя и его чувствительность к антибиотикам, фаза заболевания, характер и длительность инфекционных осложнений.

5. Инвазивный аспергиллез легких преобладает у больных острыми лейкозами в период курсов индукции, для ранней диагностики важно определение антигена аспергилл (галактоманнан) и проведение компьютерной томографии легких, препаратом выбора в лечении является вориконазол. Концентрация аспергилл в воздухе одноместных палат с ламинарным потоком воздуха и оснащенных приточно-вытяжной вентиляцией минимальна.

 
 

Заключение диссертационного исследования на тему "Инфекции при гемобластозах и депрессиях кроветворения: клиника, диагностика и лечение"

262 ВЫВОДЫ

1. Тяжелые инфекционные осложнения у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения развиваются преимущественно в период критической нейтропении.

2. Этиологическая структура возбудителей сепсиса у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения характеризуется широким разнообразием микроорганизмов; частота выделения из гемокультур грамотрицательных аэробных бактерий составляет 49,1%, грамположительных аэробных бактерий -43,4%, анаэробных бактерий - 0,2%, грибов - 7,3%; у 7% больных этиология сепсиса полимикробная.

3. Ведущими возбудителями сепсиса являются Escherichia coli (18,6%), стафилококк коагулазонегативный (18,0%), Enterococcus spp. (9,9%), Klebsiella pneumoniae (7,3%), Pseudomonas aeruginosa (7,0%), Streptococcus группы "viridans"

6,0%); грибы в общей структуре микроорганизмов занимают пятую позицию, определена низкая встречаемость C.albicans (21%).

4. Микроорганизмы, выделенные из гемокультур, проявляют высокий уровень резистентности к антимикробным препаратам, отмечена высокая частота выделения энтеробактерий с продукцией бета - лактамаз расширенного спектра, максимальная активность в отношении грамотрицательных бактерий определена у карбапенемов, из цефалоспоринов - у цефоперазона/сульбактама и цефепима, из аминогликозидов - у амикацина, в отношении грамположительных бактерий - у линезолида, выделены энтерококки, устойчивые к ванкомицину.

5. Молекулярное исследование грамотрицательных бактерий, выделенных из крови, доказывает наличие в стационаре двух путей инфицирования бактериями -экзогенного и эндогенного, с преобладанием эндогенного варианта; установлено, что для Escherichia coli наиболее характерным является эндогенный, а для других грамотрицательных бактерий, особенно для Pseudomonas aeruginosa, -смешанный вариант инфицирования.

6. Симптомы инфекции в течение недели до выделения бактерий из крови достоверно чаще присутствуют при сепсисе, обусловленном неферментирующими бактериями в сравнении с энтеробактериями (74% против 44%); выделение из гемокультур Escherichia coli и Klebsiella pneumoniae без продукции бета - лактамаз расширенного спектра значимо чаще происходит у больных вне лечения антибиотиками (50% против 7%), а неферментирующих бактерии - на фоне терапии антибиотиками (52,5% против 19%); на фоне применения карбапенемов. достоверно чаще возникает сепсис, обусловленный Pseudomonas,aeruginosa.

7. Для грамотрицательного сепсиса характерна высокая частота осложнений, основные из них - пневмония (53%), мукозит/стоматит (40%), некротическая энтеропатия;' (30%); пневмонии^ преобладают при: сепсисе, обусловленном неферментирующими;; бактериями; прежде всего Pseudomonas aeruginosa' , в сравнении.с энтеробактериями (84% против 41%).

8. При грамотрицательном5сепсисе;и^инвазивном аспергиллезе отмечена- высокая частота? инфекций? другой - этиологии/ определяющим, в. их развитии является длительность нейтропении более 20 дней по сравнению с 10 днями (59% против 26%). ■ . ■■'. ,.v ;. ■ . ■';';• ■.,;■■■/.

9: Неблагоприятными«факторами; оказывающими влияние'на частоту, излечений при грамотрицательном^сёпсисе; являются развитие;.септического шока и;перевод больного; в! реанимацию- (25%), выделение из гемокультур: синегнойной палочки (38%), выделение;;бактерий; из крови; на фоне симптомов; инфекции? в течение неделиз(38%), развитиепневмонии}(42%), сохранение:симптомов;инфекции после выделения бактерий, из крови и; назначения? антимикробных* препаратов: (58%), развитие сепсиса;у брльных'апластической1анемией«(40%).

10. Лечение—вориконазолом инвазивного: аспергиллеза легких* приводит к . достоверному* увеличению^ частоты излечений; выживаемость в течение 90 дней при;; лечении; вориконазолом- составляет 77,3% против 44% при терапии амфотерицином5 В; факторами1 неблагоприятного прогноза являются резистентность опухоли (15%), сохранение нейтропении (11%), выделение культуры Aspergillus.(32%), проведение лечения амфотерцином;В (34%).

11. Аспергиллы являются типичными; представителями комплекса микромицетов. воздуха: гематологического стационара; минимальная концентрация их определена. в одноместных палатах; с ламинарным потоком воздуха и оснащенных приточно-вытяжной системой вентиляции.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Инфекционные осложнения у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения характеризуются 1) широким спектром возможных возбудителей; 2) высоким уровнем резистентности грамотрицательных бактерий к антимикробным препаратам, 3) высокой частотой сопутствующих инфекций другой этиологии (грибы, вирусы и др.).

2. Основными диагностическими исследованиями при лихорадке в период нейтропении являются 1) проведение посевов крови до назначения антибиотиков во флаконы для автоматического анализатора гемокультур, 2) мониторинг определения антигена Aspergillus у больных высокого риска развития инвазивного аспергиллеза (больные острым лейкозом и реципиенты аллогенного костного мозга), 3) проведение компьютерной томографии легких при персистирующей лихорадке и нейтропении, 4) микробиологическое исследование образцов, связанных с инфекцией.

3. Препаратами выбора (1й этап эмпирической терапии) при лихорадке в период нейтропении являются цефоперазон/сульбактам или цефепим, их назначают в режиме монотерапии или в сочетании с амикацином. При стойкой персистирующей фебрильной температуре и при отсутствии очага инфекции замену антибиотиков 1-го этапа проводят на карбапенем, имипенем или меропенем, (2й этап эмпирической терапии) ввиду высокой частоты выделения штаммов энтеробактерий с продукцией БЛРС, при наличии очага инфекции модификацию антимикробной терапии проводят согласно результатам микробиологического исследования.

4. При персистирующей лихорадке и сохраняющейся нейтропении повторяют комплекс диагностических исследований, включая компьютерную томографию легких, поскольку частота развития инфекций другой этиологии строго коррелирует с длительностью нейтропении и значимо чаще в этот период диагностируют пневмонию.

5. Препаратом выбора в лечении инвазивного аспергиллеза является вориконазол. При обнаружении дрожжевых грибов в гемокультуре начинают лечение антимикотиком широкого спектра активности: каспофунгином, или амфотерицином В, или вориконазолом; флуконазол назначают только после идентификации грибов и определения чувствительности Подобная тактика лечения обусловлена низкой долей выделения Candida albicans при фунгемии.

6. Препаратами выбора в лечении инфекций, обусловленных грамположительными бактериями, являются линезолид и ванкомицин. Не обосновано эмпирическое назначение ванкомицина, когда единственным симптомом является лихорадка.

7. Крайне важным в контроле над госпитальными инфекциями является соблюдение эпидемиологических мероприятий - это изоляция больных с полирезистентной микрофлорой, проведение курсов ПХТ в палатах, оснащенных адекватной приточно-вытяжной вентиляцией.

 
 

Список использованной литературы по медицине, диссертация 2009 года, Клясова, Галина Александровна

1. Воробьев А.И. Инструкция по диагностике, сортировке и лечению радиационных поражений. Москва, 1972

2. Воробьев А.И. Профилактика и лечение инфекционных осложнений. В кн. Руководство по гематологии. М, Медицина, 1985, с.396-398

3. Воробьев А.И., Бриллиант М.Д. Гипертермия во внутренней клинике. Терапевтический архив. 1981, N10, с.4-14

4. Воробьев А.И., Суханова Г.А., Васильев С.А. Диссеминированное внутрисосудистое свертывание крови (ДВС-синдром). Очерки по производственной и клинической трансфузиологии. М, Ньюдиамед, 2006, с.353-363

5. Галстян Г.М. Септический шок и острая дыхательная недостаточность в гематологической клинике. Автореф. дисс докт. наук, М, 2003

6. Дмитриева Н.В., Петухова И.Н. Рациональные подходы к лечению фебрильной нейтропении у онкологических больных. М, Боргес, 2003, 76 с.

7. Климко Н.Н. Микозы: диагностика и лечение. М, Премьер-МТ, 2007, с. 146176

8. Клясова Г.А., Петрова Н.А., Галстян Г.М. и др. Инвазивный аспергиллез у иммунокомпрометированных больных. Терапевтический архив. 2003; N7, с.63-68

9. Клясова Г.А., Савченко В.Г., Паровичникова Е.Н. и др. Эмпирическая антибиотическая терапия у больных острыми лейкозами: итоги многоцентрового исследования. Терапевтический архив. 1998, N7, с.15-21

10. Клясова Г.А., Сперанская Л.П., Миронова А.В. и соавт. Возбудители сепсиса у иммунокомпрометированных больных: структура и проблемы антибиотикорезистентности (результаты многоцентрового исследования). Гематология и транфузиология. 2007, N1, с.11-19

11. Марфенина О.Е., Кулько Ф.Б., Иванова А.Е., Согонов М.В. Микроскопические грибы во внешней среде города. Микология и фитопатология. 2002, 4:22-32

12. Масчан А.А. Клиника, диагностика и лечение инвазивного аспергиллеза у детей с онкологическими заболеваниями Пособие для врачей. М., Боргес, 2005

13. Методические указания МУК 4.2.1890-04. 2004. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам.

14. Иоников В.Е. Дифференциальная диагностика и антибактериальная терапия пневмоний. CONSlLIUM.medicum. 2001; 12:569-574

15. Паровичникова Е.Н. Новые программы лечения острых лейкозов Автореф. дисс докт наук, М; 2003

16. Поддубная И.В., Ларионова В.Б., Бабичева Л.Г. Инфекции у больных гемобластозами. В кн. Инфекции, в онкологии. М, Практическая медицина, 2009, с.379-401

17. Сергеев А.Ю., Сергеев Ю.В. Грибковые инфекции: М; БИНОМ, 2008

18. Сидоренко С.В., Резван-С.П., Грудинина С.А., Кротова Л.А., Стерхова Г.В. Результаты многоцентрового исследования чувствительности стафилоккоков к антибиотикам в Москве и Санкт-Петербурге. Антибиотики и химиотерапия. 1998; 7:15-25

19. Страчунский Л.С. р-лактамазы расширенного спектра быстро растущая и плохо осознаваемая угроза: Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2005; 1:92-96

20. Яковлев С.В., Яковлев В.П. Цефалоспориновые антибиотики 4-го поколения. Цефепим. М, ГЕО-ТЭК, 2005

21. Aliff Т., Maslak P., Jurcic J. et al. Refractory Aspergillosis Pneumonia in Patients with Acute Leukemia. Cancer 2003; 15:1026-1032

22. Aloush. V., Navon-Venezia S., Seigman-lgra Y., et. al. 2006. Multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa: risk factors and clinical impact. Antimicrob Agents Chemother 43:1379-1382.

23. Anaissie E.J , McGinnis M.R., Pfaller M.A (eds) Clinical mycology. Churchill Livingstone, 2003

24. Anaissie E., Kontoyiannis D P., O'Brien S. et al. Infections in patients with chronic lymphocytic leukemia treated with fludaradine Ann Intern Med 1998 129:559-566

25. Anaissie E.J., Stratton S.L., Dignani C. et al. Cleaning Patient Shower Facilities: A Novel Approach to Reducing Patient Exposure to Aerosolized Aspergillus Species and Other Opportunistic Molds Clin Inf Dis 2002;35 86-8

26. Anaissie E, Stratton S., Dignani Mi et al. Pathogenic Aspergillus species recovered from a hospital water system- a 3-year prospective study. Clin Infect Dis 2001, 34.780-789

27. Ascher DP, Zbick C., White C., Fischer GW Infections due to Stomatococcus mucilaginosus: 10 cases and review. Reviews of Infectious Diseases 1991; 13.1048-1052

28. Ascioglu S., Rex J., de Pauw B. et al Defining opportunistic invasive fungal infections in immunocompromised patients with cancer and hematopoietic stem cell transplants: an international consensus. Clin Infec Dis 2002; 34.7-14V

29. Axelrod P I., Lorber В., Vonderheid E.C. Infections complicating mycosis fungoides and Sezary syndrome. Journal of the American Medical Association, 1992, 267, 1354-1458

30. Bandpay A M'., Hedayati M.T., Moradi S. A survey on pathogenic fungi in potted plants from a hospital environment Sari, Iran. 13th ECCMID Glasgow/United Kingdom, May 10-13, 2003; p1356, abs.P695

31. Barnes P., Marr K. Risks, diagnosis and outcomes of invasive fungal infections in haematopoietic stem cell transplant recipients. BJH 2007; 139:519-531

32. Bates DW, Su L, Yu DT, et al. Mortality and costs of acute renal failure associated with amphotericin В therapy Clin Infect Dis 2001; 32: 686-93

33. Bender J.W, Hughes W.T. Fatal Staphylococcus epidermidis sepsis following bone marrow transplantation. Johns Hopkins Medical Journal 1980; 146, 12-15

34. Benjamin В, Kan M, Schwartz D, Siegman-lgra Y. The possible significance of Clostridium spp. In blood cultures Clinical Microbiology and Infection 2006; 12:1006-1012

35. Bergogne-Berezin E.,'Towner KJ1. Acinetobacter spp. as nosocomial pathogens: microbiological, clinical, and epidemiological features. Clin Microbiol Rev 1996; 9:148-165

36. Biedenbach DJ, Moet GJ, Jones RN Occurance and antimicrobial resistance pattern comparisons, among bloodstream infection isolates from the SENTRY Antimicrobial Surveillance program (1997-2002). Diagn Microbiol Infect Dis 2004; 50(1):59-69

37. Bille J. Microbiologic Diagnostic Procedures. In book Management of Infections in Immunocompromised Patients Ed.by M'.GIauser, P.Pizzo W.B.Saunders company Ltd,2000, p. 17-24

38. Biron P., FuhrmannC., Cure H. et al. Cefepime versus imipenem as empirical monotherapy, in 400 febrile patients with'short duration neutropenia. J Antimicrob Chemother 1998;42:511-518

39. Bochud P.Y., Eggiman P., Calandra T. et al. Bacteremia due to viridans streptococci in neutropenic patients with cancer. Clinical spectrum and risk factors. Clin Infect Dis 1994; 18:25-31

40. Bodey GP Infectious complications in' the cancer patient. Curr Probl Cancer 1977; 1:1-63

41. Bodey G., Abi-Said.D., Rolston K. et al. Imipenem or Cefoperazone-Sulbactam combined with" Vancomycin for therapy of presumed or proven infection in neutropenic cancer patients Eur J Clin Microbiol Dis, 1996, 15:625-634

42. Bodey»G.P., Bueltmann В., Duguid W. Et al An international autopsy survey. Eur. J. Microbiol. Infect Dis 1992 15:99-109

43. Bouakline A., Lacroix C., Roux N., et al. Fungal Contamination of Food in Hematology Units. J Clin Microb 2000;138:4272-3

44. Boutboul F, Alberti C, Leblanc T, et al. Invasive aspergillosis in allogeneic stem cell transplant recipients: Increasing antigenemia is associated with progressive disease. Clin Infect Dis 2002; 34:939-43

45. Bow E.J., Loewen R., Cheang M.S., Schacken B. Invasive fungal disease in adults undergoing remission-induction therapy for acute myeloid leukemia: the pathogenetic role of the antileukemic regimen. Clinical Infectious Diseases 1995 21:361-369

46. Bowden R.A Infections in Blood, and Bone Marrow Transplant Patients: Allogeneic and Autologous Transplantation. In book Management of Infections in Immunocompromised Patients Ed.by MrGlauser, P.Pizzo W.B.Saunders company Ltd'2000, p. 189-219

47. Breen J., Ramphal R., Cometta A., Conetta В., Nicaise C. Cefepime versus Ceftazidime as empiric therapy of febrile-episodes, in neutropenic patients. In: Febrile neutropenia,Ed: KlasterskyJ. 1997 p.63-74

48. Bucaneve G., Castagnola E., Viscoli C., Leibovici L., Menichetti F. Quinolone prophylaxis for bacterial-infections in afebrile high risk neutropenic patients. EJC 2007;5:5-13

49. Caillot D., Mannone L., Cuisenier B'., Couaillier J. Role of early diagnosis and aggressive surgery in the management of invasive pulmonary aspergillosis in neutropenic patients. Clin MicrobioMnfec 2001:54-61

50. Caillot D, Couaillier JF, Bernard A, et alt Increasing, volume and changing characteristics, of. invasive pulmonary aspergillosis on sequential thoracic computed tomography scans in* patients with neutropenia. J Clin Oncol 2001; 19:253-9

51. Candoni A., Mestroni R., Damiani D. et al. Caspofungin as first line therapy of pulmonary invasive fungal infections* in 32- immunocompromised patients with hematologic malignancies. Eur J Haematol 2005; 75:227-233

52. Cappelano P., Viscoli" C., Bruzzi P. et al. Epidemiology and risk factors for bloodstream infections after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. New Microbiol 2007; 30(2): 89-99

53. Carratala J., Alcaide F., Fernandez Sevilla A. et al. Bacteremia due to viridans streptococci that are highly resistant to penicillin: increase among neutropenic patients with cancer. Clin Infect Dis 1995; 20:1169-73

54. Carratala J, Fernandez-Sevilla A, Tubau F, Callis M, Gudiol F. Emergence of fluoroquinolone-resistant Escherichia coli in fecal flora of cancer patients receiving norfloxacin prophylaxis. Antimicrob Agents Chemother 1996; 40:503505

55. Carratala J., Gudiol F. Changing epidemiology of bacterial infection in neutropenic patients with cancer. In book Supportive Care in Cancer Patients Ed. M.Karthaus, A.Ganser Karger, 2000, pp.1-10t

56. CDC. Staphylococcus aureus resistant to vancomycin. United States, 2002, MMWR 2002; 51:565-567

57. CDC. Staphylococcus aureus resistant to vancomycin. United States, 2002, MMWR 2002; 51:902-903

58. Centers for Disease Control and Prevention. Vancomycin-resistant Staphylococcus aureus Pennsylvania, 2002. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 2002; 51:902

59. Centers for Disease Control and Prevention Nosocomial enterococci resistant to vancomycin. United States, 1989-1993 MMWR 1993 42:597-599

60. Chandrasekar P.H. Safety and efficacy of Cefoperazone plus Sulbactam versus Ceftazidime in the empiric treatment of febrile neutropenia. Journal of Pharmacy Technology 1998 Vol.14 p.63-69

61. Chatzinikolaou I, Abi-Said D, Bodey GP et al. Recent experience with Pseudomonas aeruginosa bacteremia in patients with cancer: retrospective analysis of 245 episodes. Archives of Internal Medicine 2000; 160:501-509

62. Chazalet V., Debeaupuis J-P., Sarfati,J. et al. Molecular Epidemiology of Environmental and Patient Isolates of Aspergillus fumigatus from Various

63. Hospital Settings. J of Clin. Microb. 1998;36:1494-1500

64. Cometta A, Kern W.V., de Bock et al. Vancomycin versus placebo for persistent fever in neutropaenic cancer patients given piperacillin/tazobactam: an EOTRC-IATG multicenter, double-blind, placebo-controlled trial. Clin Infect Dis 2003; 37:382-9

65. Cometta A, Marchetti O., Calandra T. Empirical use of anti-Gram-positive antibiotics in febrile neutropaenic cancer patients with acute leukemia. Eur J Cancer 2007; 2:23-31

66. Cordonnier C, Buzyn A, Leverger G et al. Epidemiology and risk factors for gram-positive coccal infections in neutropenia: toward a more targeted antibiotic strategy. Clin Infect Dis 2003: 36:149-158

67. Cordonnier C, Herbrecht R, Pico Jli et al. Cefepime/amikacin versus ceftazidime/ amikacin as empirical therapy for febrile episodes in neutropenic patients: a comparative study. The French Cefepime Study Group. Clin Infec Dis 1997; 24:41-51'

68. Comely OA, Maertens J, Bresnik M, et al. Liposomal amphotericin В as initial therapy, for invasive mold infection: a randomized trial comparing a high-loading dose regimen with standards dosing (AmBiLoad trial). Clin Infect Dis 2007; 44:1289-97

69. Comely OA, Maertens-J, Winston DJ, et al. Posaconazole vs. fluconazole or itraconazole prophylaxis in patients with neutropenia. N Engl J Med 2007; 356:348-59.

70. Cornet M., Levy, V. Efficacy of prevention by high-efficiency particulate air filtration or laminar airflow against Aspergillus airborne contamination during hospital renovation. J Hosp. Infect. 1999;20:508-13

71. Crespo M. P., Woodford N., Sinclair-A. et. al. 2004. Outbreak of carbapenem-resistant pseudomonas aeruginosa;producing vim-8, a novel metallo-betalactamase, in a tertiary care center in Cali, Colombia. J. Clin. Microbiol. 42: 5094-5101.

72. Cruciani M., Rampazzo R., Malena M. et al. Prophylaxis with fluoroquinolones for bacterial infections in neutropenic patients: a meta-analysis. Clin Infect Dis 1996; 23:795-805

73. Dannaoui E., Borel E., Monier M. et al. Acquired itraconazole resistance in Aspergillus fumigatus. J Antimicrob Chemother 2001; 47:333-340

74. Del Favero A, Menichetti F, Martino P. et al. A multicenter, double-blind, placebo-controlled trial comparing, piperacillin-tazobactam with and without amikacin as empiric therapy for febrile neutropenia. Clin Infect Dis 2001; 33:1295-1301

75. Denning DW. Echinocandin antifungal drugs. Lancet 2003; 362: 1142-51Echinocandin antifungal drugs. Lancet 2003; 362: 1142-51

76. Denning.D. Invasive aspergillosis Clinical Infectious Diseases 1998 26:781-805'

77. Denning D., Kibber C., Barnes R. British Society,for Medical Mycology proposed standards of care for patients with invasive fungal infections. The Lancet Infectious Diseases 2003;4:230-240

78. De Bock, Cometta A, Kern W. et al. Incidence of single agent Gram-negative bacteremias in neutropenic cancer patients in EORTC-IATG trials of empirical therapy for febrile neutropenia. 41st ICAAC, 2001', Chicago, abstr. L-773

79. De Pauw В., Deresinski S., Feld R. et al. Ceftazidime compared with piperacillin and tobramycin for the empiric treatment of fever in neutropenic patients with cancer Ann Intern Med 1994'120:834-844

80. Deresinski S., Stevens D. Caspofungin Clin Infec Dis 2003; 36:1445-57

81. DiazGranados C.A., Zimmer S.M., KleinM, Jernigan J. Comparison of mortality associated, with'vancomycin-resistant and vancomycin-susceptible enterococcal bloodstream infections:a meta-analysis. Clin Infect Dis 2005, 41:327-333

82. Dignani MC, Anaissie-EJ, Hester JP, et al. Treatment of neutropenia related fungal infections with granulocyte colony-stimulating1 factor-elicited white blood cell transfusions: a pilot study. Leukemia 1997; 11:1621-30

83. Drgona L„ Paul M., Bucaneve G., Calandra Т., Menichetti F. The need for aminoglycosides in combination with p-lactams for high-risk, febrile neutropaenic patients with leukemia. EJC 2007; 5:13-23

84. Durand-Gasselin В, Leclercq R, Girard-Pipau F et al. Evolution of bacterial susceptibility to antibiotics during a six-year period in a haematology unit. J Hosp Infec 1995; 29:19-33

85. Edmond MB, Ober JF., Weinbaum DL. et al. Vancomycin-resistant Enterococcus faecium bacteremia: risk factors for infection. Clin Infect Dis 1995; 20-1126-33

86. Eggimann P., Starobinski M., Majno P. et al. Primary digestive invasive aspergillosis: a new clinical entity? ICAAC, Chicago, USA, 2001, abstr. J-1637 •

87. Elting LS, Rubenstein EB, Rolston KV, Bodey GP Outcomes of bacteremia in patients with cancer and neutropenia: observations from two decades of epidemiological and clinical trials. Clin Infect Dis 1997; 25:247-259

88. Engelhart S., Hanfand J., Glasmacher A. et al. Impact of portable air filtrationunits on exposure of haematology-oncology patients to airborne Aspergillus fumigatus spores under field conditions J of Hosp. Inf. 2003;54:300-4

89. Engels EA, Lau J., Barza M. Efficacy of quinolone prophylaxis in neutropenic cancer patients: a meta-analysis. J Clin Oncol 1998; 16: 1179-87

90. EORTC International Antimicrobial Therapy Cooperative Group- Ceftazidime combined with a short or long course of amikacin for empirical therapy of gram-negative bacteremia-in cancer patients with granulocytopenia. New Engl J Med 1987; 317:1692-1698

91. EORTC and National Cancer Institute of Canada Vancomycin added to empirical combination antibiotic therapy for fever in granulocytopenic cancer patients. J Infec Dis 1991 163.951-958

92. Erjavec Z., de Vries-Hospers HG, Lauseur M. et al. A prospective, randomized, double-blinded, placebo-controlled trial of empirical teicoplanin in febrile neutropenia with persistant fever after imipenem therapy. J Antimicrob Chemother 2000; 45:843-9

93. Escande MC, Herbrecht R Prospective study of bacteraemia in cancer patients. Results of a French multicentre study. Supportive Care in Cancer 1998; 6:273-280

94. Feld R, DePauw B, Berman S. et al. Meropenem versus ceftazidime in the treatment of cancer patients with febrile neutropenia: a randomized, double-blind trial. J Clin Oncol 2000, 18: 3690-3698

95. Fergie JE, Shema SJ, Lott L., Crawford R., Patrick CC Pseudomonas aeruginosa bacteremia in immunocompromised children: analysis of factors associated with poor outcome. Clin Infect Dis 1994; 18:390-394

96. Femandez-Baca V., Ballesteros F.f Hervas J.A. et al. 2001. Molecular epidemiological typing of Enterobacter cloacae isolates from a neonatal intensive care unit: three-year prospective study. J. Hosp. Infect. 49: 172-182.

97. Frankard J., De Mendoca R , Rodriguez-Villalobos H. et al. Outbreaks of SHV and CTX-M'co-producing Enterobacter cloacae in the intensive care unit of Belgian hospital. ECCMID 2004. P1867.

98. Freifeld A, Marchigiani D, Walsh T et al. a double-blind comparison of empirical oral and intravenous antibiotic therapy for low-risk febrile patients with neutropenia during cancer chemotherapy. New Eng J Med 1999; 341:305-311

99. Freifeld A., Walsh Т., Marahall D. et al. Monotherapy for fever and neutropenia in cancer patients: a randomized comparison of ceftazidime versus imipenem. J Clin Oncol 1995 13: 165-176

100. Fridkin S., Jarvis W. Epidemiology of Nosocomial Fungal Infections. Clin. Inf. Dis. 1996;9:499-511

101. Fukuda T, Boeckh M, Carter RA, et al. Risks and outcomes of invasive fungal* infections in recipients of allogeneic hematopoietic stem cell transplants after nonmyeloablative conditioning. Blood 2003; 102: 827-33

102. Galdbart J., Lemann F., Ainouz D., et. al. TEM-24 extended-spectrum li-lactamase-producing Enterobacter aerogenes: long-term clonal dissemination in French hospitals. Clin. Microbiol. Infect., 2000; 6: 316-323

103. Ganeswire R., Thongy K. L., Puthuchearyz S. D. Nosocomial outbreak of Enterobacter gergoviae bacteraemia in a neonatal intensive care unit. J. Hosp. Infect. 2003, 53: 292-296.

104. Gerson S., Talbot G., LuskvE. et al. Invasive pulmonary aspergillosis in adult acute leukemia:clinical clues to the diagnosis. J Clin Oncol 1985; 3:1109111

105. Goodley J.M:, Clayton Y.M^, Hay R'.J. Environmental sampling for aspergilli during building construction on a hospital, site. J, Hosp. Infect. 1994;26:27-35

106. Greene R., Schlamm H., Oestmann J. et ah Imaging,findings in acute invasive pulmonary-aspergillosis: clinical-significance of the halo sign. Clin Infect Dis 2007; 44:373-379

107. Grow WB, Moreb. JS, Roque D, et al. Late onset-of invasive aspergillus infection, in, bone marrow transplant patients at a> university hospital. Bone MarrowfTransplant 2002; 29:15-9

108. Groll A., Shah P:, Menzel C. et al. Trends in the postmortem epidemiology of invasive fungal,infections,at a university hospital: J.Infect 1996; 33: 23-32

109. Groll AH, Wood" L, Roden. M; et al. Safety, pharmacokinetics, and pharmacodynamics of cyclodextrim itraconazole in pediatric patients with oropharyngeal candidiasis. Antimicrob Agents Chemother 2002; 46:2554-63

110. Guyot A., Barrett S.P., Threlfal! E. J. 1999. Molecular epidemiology of multi-resistant Escherichia coli. J. Hosp. Infect. 43: 39-48.

111. Haertl R., Bandlow G. Molecular typing of Enterobacter cloacae by pulsed-field gel electrophoresis of genomic restriction fragments. J. Hosp. Infect. 1993, 25: 109-116

112. Hajjeh R.A., Warnock D.W. Counterpoint: Invasive Aspergillosis and the Environment Rethinking Our Approach to Prevention. Clin. Inf. Dis. 2001;33:1549-52

113. Herbrecht R, Denning D, Patterson T. et al. Voriconazole versus amphotericin В for primary therapy of invasive aspergillosis. N Engl J Med 2002; 347:408-415

114. Herbrecht R, Maertens J., Baila L. et al. Caspofungin as first-line of invasive aspergillosis in allogeneic hematopoietic stem sell transplant recipients: a study of the EORTC infectious diseases group. 48th ICCAC/IDSA 46th , 2008, Washington

115. Hidalgo M., Hornedo J, Lumbreras C. et al. Outpatients therapy with oral ofloxacin for patients with low-risk neutropenia and fever: a prospective, randomized clinical trial. Cancer. 1999; 85:213-219

116. Hoecker J.L., Pickering L.K, Groschel D'., Kohl S. Streptococcus salivaris sepsis in children with malignancies. Journal of Pediatrics 1978; 92:337-8

117. Houang E.T., Marples R.R., Weir I., Mourant A.J., de Saxe M.J., Singleton B. Problems in the investigation of an apparent outbreak of coagulase-negative staphylococcal septicaemia following cardiac surgery. Journal of Hospital Infection 1986; 8:224-32

118. Huang WT, Chen TY, Su CJ, Yen CJ, Tsao CJ Implantable venous port-related infections in cancer patients. Support Care Cancer 2004; 12:197-201

119. Hughes W.T., Armstrong D„ Bodey G.P. et al 2002 Guidelines for the Use of Antimicrobial Agents in Neutropenic Patients with Cancer. Clin Infect Dis 2002;• 34:730-51

120. Hugh R, Ryschenkow E Pseudomonas maltophilia, an alcaligenes-like species. J Gen Microbiol 1961; 26:123-132

121. Jantunen E., Ruutu P., Niskanen L. et al. Incidence and risk factor for invasive fungal infections in allogeneic BMT recipients. Bone Marrow Transplantation 1997; 19:801-808

122. Johnson L., Kauffman C. Voriconazole: a new triazole antifungal agent. Clin Infec Dis 2003; 36:630-7

123. Kanamaru A., Tatsumi Y. Microbiological data for patients with febrile neutropenia. Clin Infect Dis 2004, 39:S7-10

124. Kao A., Brandt M., Pruitt W. et al. The Epidemiology of candidemia in two United States cities: results of a population-based active surveillance. Clin Infec Dis 1999; 29:1164-1170

125. Karim M, Khan W, Faroogi B, Malik I. Bacterial isolates in neutropenic febrile patients. Journal of the Pakistan Medical Association 1991; 41:35-37

126. Klastersky J. Treatment of neutropenic infection: trends towards monotherapy? Supportive Care in Cancer 1997 5:365-370

127. Klastersky J., Cappel R., Daneau D. Clinical significance of in vitro synergism between antibiotics in gram-negative infections. Antimicrob Chemother 1972 2:470-475

128. Klastersky J., Zinner S.H. Synergistic combination of antibiiotics in gram-negative bacillary infections. Reviews of Infectious Disease 1982, 4:294-301

129. Kolho E., Nyberg S., Lauhio A., et. al. Epidemiology of extended-spectrum beta-lactamase (ESBL) producing Escherichia coli in Helsinki city in 2000-2004. J. Hosp. infect. 2006; 64:S17

130. Kontoyiannis D., Mantadakis E., Samonis G. Systemic mycosis in the immunocompromised host: an update in antifungal therapy. J Hosp Infec 2003, 53:243-258

131. Krcmery V, Trup J, Kunova A et al. Imipenem-resistant P.aeruginosa bacteraemia in cancer patients: risk factors, clinical features and outcome. International Journal of Clinical Pharmacology Research 1996; 16:43-49

132. Kuehnert MJ, Jernigan JA, Pullen AL , Rimland D, Jarvis WR Association between mucositis severity and vancomycin-resistant enterococcal bloodstream infection in hospitalized cancer patients. Infect Control Hosp Epidemiol 1999; 20:660-663

133. Lai C.-H., Wong W.-W., Chin С et al. Central venous catheter-related Stenotrophomonas maltophilia bacteraemia and associated relapsing bacteraemia in haematology and oncology. Clin Microbiol Infect 2006; 12:986991

134. Lark R, McNeil S, VanderHyde К et al. Risk factors for anaerobic bloodstream infections in bone marrow transplant recipients. Clin Infect Dis 2001; 33:338-343

135. Lass-Florl C., Kofler G., Kropshofer G. et al. In-vitro of susceptibility to amphotericin В is a reliable predictor of clinical outcome in invasive aspergillosis. J Antimicrob Chemother 1998:42, 497-502

136. Leenders A., Belkum A., Janssen S. Et al. Molecular Epidemiology of Apparent Outbreak of Invasive Aspergillosis in a Haematology Ward. J Clin. Microb. 1996;34:345-51

137. Lin S., Schranz J., Teutsch S. Aspergillosis case-fatality rate: systematic review of the literature. Clin Infec Dis-2001; 32:358-366

138. Link H, Maschmeyer G, Meyer P et al. Interventional antimicrobal therapy in febrile neutropenic patients. Study Group of the Paul Ehrlich Society for Chemotherapy. Annals of Hematology. 1994;69:231-243

139. Livermore D.M. Multiple mechanisms of antimicrobial resistance in Pseudomonas aeruginosa: our worst nightmare? Clin Infect Dis 2002; 34:634640

140. Love L.J., Schimpff S.C., Schiffer C.A. et al. Improved prognosis for granulocytopenic patients with gram-negative bacteremia. American Journal of Medicine 1980, 68:643-648

141. Lutz В., Jin J., Rinaldi G. Outbreak of Invasive Aspergillus Infection in Surgical Patients, Associated with a Contaminated Air-Handling System. Clin. Inf. Dis. 2003;37:786-93

142. Luzzaro F., Vigano EF, Fossati D et al. Prevalence and drug susceptibility of pathogens causing bloodstream infections in northern Italy: a two-year study in 16 hospitals. Eur J Clin Microbiol'Infect Dis 2002; 849-855

143. MacGowan A. Pharmacokinetic and pharmacodynamic profile of linezolid in healthy volunteers and patients with gram-positive infections. J Antimicrob Chemother 2003; 51, Suppl. S2, ii 17-25

144. Maertens J., Van Eldere J., Verhaegen J. et al. Advances in the serological* diagnosis of invasive Aspergillus infections in patients with haematological disorders. Mycosis 2007; 50:2-17

145. Maertens J., Raad I., Petrikkos G. et al. Efficacy and safety of caspofungin for treatment of invasive aspergillosis in patients refractory to or intolerant of conventional antifungal therapy. Clin Infec Dis 2004; 39:1563-1571

146. Maertens J, Theunissen K, Verhoef G, et al. Galactomannan and computed tomography-based preemptive antifungal therapy in neutropenic patients at high risk for invasive fungal infection: a prospective feasibility study. Clin Infect Dis 2005; 41:1242-50

147. Marr K., Balajee S., McLaughlin L. et al. Detection of galactomannan antigenemia by enzyme immunoassay for the diagnosis of invasive aspergillosis: variables that affect performans. J Clin Dis 2004; 190:641-649

148. Mennink-Kersten:MA, Klont RR.Warris.A , Op den Camp HJ, Verweij PE.

149. BiWobacienum\lipotefchpic\ac\&and№ itfAspergilliis'antigen \detection: Lancet 2004; 363:325-7

150. Meropenem Study Group of Leuven, London and Nijmegen et al. Equivalent efficacies of meropenem and ceftazidime as empirical monotherapy.of febrile neutropenic patients. J Antimicrob:Chemother 1995 .36:185-200

151. Mitsutake K, Kohno S-Miyazaki T, et al. Detection of (1-3)-beta-Dglucan in a rat model of aspergillosis. J Clin Lab Anal 1995; 9:119-22

152. Moustaouia N., Soukrib A., Elmdaghri N. et: aL Molecular biology of extendedr-spectrum brlactamase-producing; Enterobacteriaceae responsible for digestive tract colonization; J. Hosp: Infect. 2004; 57: 202-208.e i '

153. Munoz P., Burillo A., Bouza E. Environmental surveillance and other control measures in the prevention of nosocomial fungal infections. Clin. Microb. Inf. Dis. 2001;7:38-45

154. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing: 14th informational supplement. NCCLS document M100-S14. 2004 NCCLS, Wayne, PA

155. Neely A., Orloff M.M. Survival- of Some Medically- Important Fungi on Hospital.Fabrics and Plastics. J Clin. Microb. 2001;39:3360-1

156. Nivoix Y., Velten M,f Letscher-Bru V. et al. Factors associated with overall andattributable mortality in invasive aspergillosis. CID 2008; 47.1176-84

157. Ng< TT, Robson GD, Denning. DW Hydrocortisone-enhanced growth of Aspergillus spp. Implications for pathogenesis. Microbiology 1994; 140:2475-9

158. Noble WC, Virani Z, Cree RGl Co-transfer of vancomycin and other resistance genes from Enterococcus-faecalis. NCTC 12201 to Staphylococcus aureus. Ferns Microbiol Lett 1992; 72:195-8

159. Norgaard M., Larsson H., Pedersen G. et al. Risk of bacteraemia and mortality in patients with haematological malignancies. Clinical Microbiology and Infectious Diseases, 2005, 12:217-223

160. Oppenheim B.A. The changing pattern of infection in neutropenic patients. 1998; 41, Suppl. D: 7-11

161. Ortega M., Rovira Ml, Almela M. et al. Bacterial and fungal bloodstream isolates from 796 hematopoietic stem cell transplant'recipients between 1991 and,2000. Ann Hematol 2005; 84(1):40-46

162. Panagopoulou P., Filioti I., Farmaki E. et al. Environmental surveillance for filamentous in a.tertiary care hospital. Clin. Microb. And Infection. 2001;7(1):394

163. Pascual A, Nieth V, Calandra T, et al. Variability of voriconazole plasma levels measured by new high-performance liquid chromatography and bioassay methods. Antimicrob Agents Chemother 2007; 51:137-43

164. Patel R. Clinical-impact of vancomycin-resistant enterococci. J Antimicrob Chemother 2003; 51, Suppl. S3, ii 13-21

165. Pegues D.A., Lasker'B.A., McNeil M.M! et-al. Cluster of Case of Invasive Aspergillosis in a Transplant Intensive Care Unit: Evidence of. Person-to-Person Airborne Transmission. Clin. Inf. Dis. 2002;34:412-6

166. Perfect J.R., Cox G.M., Lee C.A., et al. The Impact of Isolation of Aspergillus> Species: A Hospital-Based Survey of Aspergillosis. Clin. Inf. Dis. 2002;33:1824-33

167. Pfeiffer C., Fine J., Safdar N.- Diagnosis of invasive aspergillosis using a galactomannan assay:a meta-analysis. Clin Infect Dis 2006, 42:1417-1427

168. Pierard D., Meyer De, Lauwers S. Susceptibility of Streptococci isolated from blood of neutropenic patients to 11 antibiotics. In: Febrile neutropenia Ed: Klastersky J. 1997 p. 57-58

169. Pimay J., De Vos D., Cochez C., et. al. 2002. Pseudomonas aeruginosa displays an epidemic population structure. Environ. Microbiol. 4" (12): 898-911.

170. Pizzo P. Current issues in the antibiotic primary management of the febrile neutropenic cancer patient: a perspective from the National Cancer Institute. J Hosp Infec 1990 15:41-48

171. Pizzo P, Hathorn J., Himenz J. et al. A randomized trial comparing ceftazidim alone with combination antibiotic therapy in cancer patients with fever and neutropenia. N Engl Med 1986 315:552-558

172. Potgieter E, Carmichael M, Koomhof H, Chalkley L In vitro antimicrobial1j susceptibility of viridans streptococci isolated from blood cultures. Eur J Clin

173. Microbiol Infect Dis 1992; 11:543-546

174. Prentice H.G., Kibbler C.C., Prentice A.G. Towards a targeted, risk based

175. J antifungal strategi in neutropenic patients. Br J Haematol 2000, 110:273-284i ч

176. Price E.H., Jones R., Groombridge S., Hoffman P N.' Risk to immune suppressed from Aspergillus spp. growing in fridge condensate trays. J of Hosp. Infect. 2002;52:72

177. Raad I, Abi-Said D., Rolston K., Karl C., Bodey G. How should Imipenem-Cilastatin be used in the treatment of fever and infection in neutropenic cancer patients? Cancer 1998 Vol.82 N12 p.2449-2458

178. Raje NS, Rao SR, Iyer RS et al. Infection analysis in acute lymphoblastic leukemia: a report of 499 consecutive episodes in India. Pediatric Hematology and Oncology. 1994; 11:271-280

179. Ramphal R., Gucalp R., Rotstein C. et al. Clinical experience with single agent and combination regimens in the management of infection in the febrile neutropenic patient. Am J Med 1996 100(6a):83S-89S

180. Rechner P, Agger W, Mruz K, Cogbill T Clinical features of clostridial bacteremia: a review from a rural area. Clin Infect Dis 2001; 33:349-353

181. Richardson M., Warnock D. Antifungal drugs, p.20-34, 40-44 In book Fungal infection: diagnosis and management. 2nd ed., Blackwell Science Ltd, 1997

182. Regazzoni C, Irrazabal C, Luna C, Poderoso J Cancer patients with septic shock: mortality predictors and neutropenia. Support Care Cancer 2004; 12:833839

183. Ribaud P., Chastang C., Latge J. et al. Survival and prognostic factors of invasive aspergillosis after allogeneic bone marrow transplantation. Clin Infect Dis 1999; 28:322-30

184. Richard P., Amador Del Valle G , Moreau P. et al. Viridans streptococcal bacteraemia in patients with neutropenia. Lancet 1995; 345: 1607-9

185. Richarson M.D., Rennie S., Marshall I. et al. Fungal surveillance of an open haematology ward. J Hosp. Infect. 2002;45:288-92

186. Rolston KV, Tarrand JJ. Pseudomonas aeruginosa^ still a frequent pathogen in patients with cancer: 11-year experience at a comprehensive cancer center. Clin Infect Dis 1999; 29:463-4

187. Rossini F Prognosis of infections in elderly, patients with haematological diseases. Supportive Care in Cancer 1996; 4:46:50

188. Royle J., Halasz S., Eagles G. Outbreakof extended spectrum beta- Arch. Dis. Child Fetal Neonatal 1999; 80: 64^68

189. Rubin M., Hathorn J., MarshalhD. et al. Gram-positive infections and the use of vancomycin in 550 episodes of fever and neutropenia. Ann Intern Med 1988 108:30-35

190. Ruescher T, Sodeifi< A, Scrivani' S, Kaban L, Sonis S. The impact of mucositis on a-hemolytic streptococcal infection in patients undergoing autologous' bone marrow transplantation for hematologic malignancies. Cancer 1998;82:2275-2281

191. Schimpff S.C., Satterlee W., Young V.M. et al. Empiric therapy with carbenicillin and gentamicin for febrile patients with cancer and granulocytopenia. New England Journal of Medicine 1971, 284:1061-1065

192. Schwartz S, Ruhnke M, Ribaud P. et al. Improved'outcome in central nervous system aspergillosis, using voriconazole treatment. Blood 2005; 106:2641-2645

193. Shah P.M., Heller A., Furh H.G. et al. Empirical monotherapy with Meropenem versus Imipenem/Cilastatin for febrile episodes in neutropenic patients. Infection 1996 24:480-484

194. Shah M", Sebti A, Kiehn T, Massarella S, Sepkowitz К Mycobacterium haemophilum in immunocompromised patients. Clin Infect Dis 2001; 33:330-337

195. Smith J, Safdar N, Knasinski V, et al. Voriconazole therapeutic drug, monitoring. Antimicrob Agents Chemother 2006; 50:1570-2

196. Speijer H., Savelkoul P., Bonten M., et. al. Application of different methods for Pseudomonas aeruginosa in a setting of endemicity in an intensive care unit. J. Clin. Microbiol. 1996; 37: 3654-3661

197. Stevens D., Kan V., Judson M. et al: Practice Guidelines for Diseases Caused by Aspergillus. Clin Infec Dis 2000;30:696-709

198. Suarez C., Pena-C., Domingues M. et al. Carbopenem susceptible versus carbopenem resistant Pseudomonas aeruginosa, bloodstream infections: clinical implication of antimicrobiabresistance onoutcome. ICAAC 2005. K-522

199. Sulahian? A', Touratier S, Ribaud; P. False positive test for aspergillus antigenemia related to concomitant administration of piperacillin and tazobactam. IShEngl J Med 2003; 349:2366-7

200. Symoens F., BurnodJ., Lebeau В., Viviani M.A. et al.' Hospital-acquired Aspergillus fumigatus infection: can* molecular typing methods identify an environmental source? J of Hosp. Inf. 2002;52:60-7

201. Talona D., Mengetb P., Thouvereza M. Emergence of Enterobacter cloacae as a common pathogen in neonatal units: pulsed-field gel electrophoresis analysis. J. Hosp. Infect. 2004, 57: 119-125.

202. Tenover F., Arbeit.RD, Goering RV et al. Interpreting chromosomal DNA restriction patterns produced by pulsed-field.electrophoresis: criteria for bacterial strain typing. J Clin Microbiol 1995; 33:2233-2238

203. Timmers Gl, Van der Zwet WC, Simoons-Smit IM et al. Outbreak of Vancomycin-resistant Enterococcus faecium in a haemetology unit: risk- factor assessment and successful control of the epidemic. Br J Haematol 2002; 116:826-833

204. Todeschini G, Franchini M, Tecchio С et al. Improved prognosis of Pseudomonas aeruginosa bacteremia in 127 consecutive neutropenic patients with hematologic malignancies. International Journal of Infectious Diseases 1999; 3:99-104

205. Toleman M., Mendez R., Castanheira M. et. al. Tn501-like transposons carrying novel blaVIM-4 metallo-beta-lactamase (MBL) gene cassettes in Poland and GIM-1 in Germany: report from the SENTRY antimicrobial surveillance programme. ECCMID 2004. P1724.

206. Trevino M., Garcia-Zabarte A., Quintas A. et al. Stomatococcus mucilaginosus septicemia in a patient with acute lymphoblastic leukemia Eur J Clin Microbiol Infect Dis 1998; 17:505-507

207. Tsambiras P.E., Patel S., Greene J.N., Sandin R.L. Vincent A.L. Infectious complications of cutaneus T-cell lymphoma. Cancer control 2001; 8: 185-188

208. Turner P.J., Greenhalgh J.M., MYSTIC Study Group (Europe). The activity of meropenem and comparators against Acinetobacter strains isolated from European hospitals, 1997-2000. Clin Microbiol Infect 2003; 9:563-567

209. Unal S., Garcia-Rodriguez J.A. Activity of meropenem and comparators against Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter spp. isolated in the MYSTIC Program, 2002-2004. Diagn Microbiol Infect Dis 2005; 53:256-271

210. Upton A, Kirby K., Carpenter P, Boeckh M, Marr К Invasive aspergillosis following hematopoietic cell transplantation: outcomes and prognostic factors associated with mortality. Clin Infect Dis 2007; 44:531-540

211. Van Looveren M., Goossens H. ARPAC Steering Group. Antimicrobial resistance of Acinetobacter spp. in Europe. Clin Microbiol Infect 2004; 10:684704

212. Velasco E., Byington R., Martins C. et al. Bloodstream infection surveillance in a cancer centre: a prospective look at clinical microbiology aspects. Clinical Microbiology and Infectious Diseases, 2004, 10:542-549

213. Velasco E„ Byington R., Martins C. et al. Comparative study of clinical characteristics of neutropenic and non-neutropenic adult cancer patients with bloodstream infections. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2006; 25:1-7

214. Verweij PE, Mennink-Kersten MASH. Issues with galactomannan testing. Med Mycol 2006; 44(Suppl 1):S179-83

215. Viscoli C., Herbrecht R., Akan H et al. Caspofungin as first-line therapy of invasive aspergillosis in haematological patients: a study of the EORTC Infectious Diseases Group. 3rd Trends in Medical Mycology, Turin, Italy, J Chemother 2007, absrt. 012

216. Wade J.C., Schimpff S.C., Newman K.A., Wiernik P.H Staphylococcus epidermidis: an increasing cause of infection in patients with granulocytopenia. Annals of Internal Medicine 1982, 97.503-508

217. Walsh TJ, Raad I, Patterson TF, et al. Treatment of invasive aspergillosis with posaconazole in patients who are refractory to or intolerant of conventional therapy, an externally controlled trial. Clin Infect Dis 2007; 44:2-12

218. Walsh T.R., Toleman M:A., Poirel L., Nordmann P. Metallo-f3-lactamases. the quiet before the storm? Clin Microbiol Rev 2005; 18.306-325

219. Walsh T , Anaissie E., Denning D. et al. Treatment of aspergillosis: clinical practice guidelines of the infectious diseases society of America. Clin Infect Dis 2008; 46:327-60

220. Warns A , Klaassen C.H., Jacques F.G. et al Molecular epidemiology of Aspergillus fumigatus isolates recovered from water, air and patients shows two clusters of genetically distinct strains. J Clin. Microb. 2003;41: 4101-6

221. Watanabe M, lyobe S., Inoue M., Mitsuhashi S. Transferable imipenem resistance in Pseudomonas aeruginosa. Antimicrob Agents Chemother 1991; 35:147-151

222. Weldhagen G.F., Poirel L., Nordmarin P. Ambler class A extended -spectrum beta-lactamases in Pseudomonas aeruginosa: novel developments and clinical impact. Antimicrob Agents Chemother 2003; 47:2385-2392

223. Wexler H., Finegold S. In vitro activity of Cefoperazone plus Sulbactam compared with that of other antimicrobial agents against anaerobic bacteria. Antimicrob Agents Chemother 1988, 32:403-406

224. Wheat L., Goldman M., Sarosi G. Fungal infectionsin the immunocompromised patients In book Clinical- Approach to infection in the compromised patients Ed. by R.Rubin, L.Young Kluwer Academic/Plenum publishers, New York, Fourth Edition, 2002 p.215-247

225. Whimbey E, Kiehn ТЕ, Brannon P, Blevins A, Armstrong D Bacteremia and fungemia in patients with neoplastic disease. American Journal of Medicine 1987; 82:723-730

226. Wilcox M. Efficacy of linezolid versus comparator therapies in gram-positive infections. J Antimicrob Chemother 2003; 51, Suppl. S2, p. 27-35

227. Willems L, van der Geest R, de Beule K. Itraconazole oral solution and intravenous formulations: a review of pharmacokinetics and pharmacodynamics. J Clin PharnrTher 2001; 26:159-69

228. Williams J. p-Lactamase inhibition and in vitro activity of Sulbactam and Sulbactam/Cefoperazone. Clin Infec Dis 1997; 24:494-497

229. Williamson E., Milliar M., Steward C. et. al. Infections in adults undergoing unrelated bone marrow transplantation. Br J Haematol 1999, 104:560-568

230. Winston D.J., Bartoni R., Bruckner D.A. et al. Randomized comparison of Sulbactam/Cefoperazone with Imipenem as empirical monotherapy for febrile granulocytopenic patients. Clinical infectious diseases 1998, 26:576-83

231. Winston DJ, Lazarus HM, Beveridge RA et al. Randomized, double-blind, multicenter trial comparing clinafloxacin with imipenem as empirical monotherapy for febrile granulocytopenic patients. Clin Infect Dis 2001; 32:381-390

232. Worth L., Thursky ., Seymour J., Slavin M. Vancomycin-resistant Enterococcus faecium infection in patients with hematologic malignancy: patients with acute myeloid leukemia are at high-risk. Eur J Haematol 2007; 79:226-233

233. Yamazaki Т., Kume H., Murase S., Yamashita E., Arisawa M. Epidemiology of visceral mycosis: analysis of data in annual of the pathological autopsy cases in Japan. J Clin Microbiol 1999; 37:1732-1738

234. Zinner S.H. Changing emidemiology of infections in patients with neutropenia and cancer, emphasis on gram-positive and resistant bacteria. Clinical Infectious Diseases 1999 29:495-502