Автореферат и диссертация по медицине (14.00.17) на тему:Функциональная организация и клеточные механизмы вегетативной регуляции гладкой мышцы артерий сердца

.Министерство здравоохранения РСФСР

Казанский ордена Трудового Красного Знамени государственный медицинский институт им. С.В.Курашова

п 2 //1

На правах рукописи. Васильев Анатолий Глебович

УДК 612-083;087;133; 134; 146.2

Функциональная организация и клеточные механизмы вегетативной регуляции гладкой шяцы артерий сердца

14.00.17 - нормальная физиология

А в.т ореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук

Казань, 1969 г.

Работа выполнена в Свердловском государственном ордена Трудового Красного Знамени медицинском институте и Ленинградском.! санитарно-гигиеническом медицинском институте.

Научные консультанту:

дог.тор! медащкнеких ь'аук, профессор А.Л.Азин, доктор»медицинекот наук, профессор Р.С.Орлов

Официальные оппоненты:

1. Доктор медицинских наук, профессор И.Н.Волкова

2. Доктор медицинских наук,, профессор М.И.ТУревич

3. Доктор медицинских неук- В.И.фркин

Ведущее учреждение - институт эволюционной физиологии и биохимии им. И.М.Сеченова АН СССР.

Защита диссертации состоится - 19 г,

в ___часов на заседании специализированного совета Д.084.29.03 Казанского государственного ордена Трудового Красного Знамени медицинского института им. С.В.Нураиова (420012, г.Каэань, ул.Бутлерова, дом 49).

С диссертацией можно ознакомиться в научней библиотеке Казанскрго государственного медицинского института (ул.Бутлерова,, 49В).

Автореферат разослан _______________ 19 г.

Ученый секретарь специализированного совета, канд.кед.наук Р.Х.Ахмедздаов

. ОЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Ак1у^ьн£сть_п£0^ле:лы. Актуальность проблемы регуляции коронарного кровообращения общеизвестна в связи с особенностями патологии сосудов этой области. Согласно данным 303, в 1964 году в 22-х странах основной причиной летальных исходов были сердечно-сосудистые заболевания, среди которых 4&;. случаев смерти падало на ишемичесну» болезнь сердца (Б.А.Королей, 1974), "В настоящее время... неблагополучно обстоит дело с лечением хронической ишемической болезни сердца" №.И.Чазов, 1980). Не решены полностью также вопросы профилактики этого заболевания (Г.И.Косицкий.ЮЗО),

Актуальность направления находит место в основных долгосрочных исследовательских программах физиологии. Так, -в рамках программы "Гемостаз" выделяется направление по изучению механизмов регуляции тонуса сосудов (П,Г.Костюк,19й7),

К настоящему времени не подвергнута детальному анализу функциональная роль отдельных мышечных слоев в поддержании тонуса, Исследование различно ориентированных мышечных слоев стенки коронарных сосудов является необходимым с теоретической точки зрения, поскольку в физиологии на современном этапе содержатся данные лишь по сократительной деятельности сосудистой иышцы, как функционально гомогенной структуры (М.Г.Удельнов и соавт.,1966; В.И.Овсянников,1972; Е.Б.Новикове., 1979 и др.). Эти исследования являются актуальными и с практической точки зрения - с позиций выяснения механизмов патологических процессов в миокарде, связанных с нарушением , веночного кровообращения. Просматривается несомченнаи роль архитектоники сосудистой мышцы в неадекватных реакциях артерий сердца при атеросклеротическом процесса (С.В.Андрээв, . Ю.С.Чечулин,1965; И.Е.£^еЬЪег.з,1975). Проблема, ш всей в е- ,

роятности, находит отражение и в вопросах хирургического лечения коронарной недостаточности (Б.А.Королев,1974), Наконец, изучение функциональной роли различно расположенных глацкомышечных сосудистых элементов необходимо в связи с важностью понимания механизмов мышечной сократительной активности при развитии коронароспазма. Коронароспазм, являясь основной формой функционального нарушения кровообращения сердца (Г.Н.Аронова,1970), в ряде случаев определяется как единственная причина скоропостижной смерти (С.В.Андреев, Ю.С.Чечулин, 1965; Н.А.Днсавахишвили, М.Э.Комахидзе,1967).

Одним из узловых моментов в познании физиологических механизмов кровоснабжения сердца является изучение фундаментальных закономерностей формирования базального тонуса сосудов этого органа. К числу таких закономерностей следует отнести механизмы нейрогуморальной регуляции гладкой мышцы сосудов сердца на уровне участия циклических нуклертидов в реализации нейрогуморальных сигналов. Вместе с тем, разнооб-. разная информация по вопросам регуляции тонуса сосудов на клеточном уровне еще не дает полного и окончательного объяснения реакций сосудов сердца как в нормальных условиях, так и при патологии.

Цель_и_эап1ачи исследования^ Целью работы явилось раскрытие'функциональных особенностей гладкомышечных элементов, различно расположенных по отношению к продольной оси сосуда, а также выяснение их клеточных механизмов регуляции процессов сокращения и расслабления.

В соответствии с целью исследования были поставлены конкретные задачи:

I..Методами морфологического анализа выявить особенности расположения гладкомышечных элементов в стенке венечной арте>

рии.

2;Установить особенности сократительной деятельности различно расположенных в стенке артерии мышечных элементов.

3.Изучить особенности действия ацетилхолина и норадреналина на сократительную активность различно расположенных гладкомышечных клеток.

4.Раскрыть роль ионов натрия и кальция в механизмах действия нейромедиаторов на гладкомышечные клетки сосудов сердца.

5.Изучить возможную роль циклических нуклеотидов в реализации процессов сокращения и. расслабления различно расположенных слоев гладкой мышцы артерий сердца.

6.Изучить некоторые периферические механизмы развития коро-нароспастических реакций.

Нагнал новизна. В исследованиях применен разработанный нами способ определения сократительной активности различно расположенных слоев гладкомышечных клеток артериальной стенки. Изучены функциональные характеристики отдельных слоев, выявлены различия их сократительных реакций. Определена роль ионов натрия и кальция в механизмах действия норадреналина и ацетилхолина на гладкомышечные клетки артерий сердца, а также установлена ранее неизвестная зависимость сократительной функции гладкомышечных элементов от уровня активности внутриклеточных циклических нуклеотидов. Уточнена роль циклических нуклеотидов в реакциях расслабления гладких мышц. Представлены новые данные, позволяющие объяснить возможные периферические механизмы развития коронароспазма.

Положедия,_вш£симые_на защиту^ Х,Мышечная ткань коронарных артерий характеризуется функциональной неоднородностью гладкомышечных элементов, различно расположенных в сосудистой стенке. Циркулярно расположенным

клеткам свойственно развитие сократительных реакций фазно го типа. Деятельность спирально расположенных клеток глад ких мышц характеризуется развитием сокращений тонического типа.

2.Влияние ацетилхолина-и норадреналина на сократительную способность артериальной мышцы происходит в результате во влечения в процесс различных звеньев внутриклеточной рег.у ляции. Ацетилхолин реализует свое действие преимуществе™ через систему фармаксмеханического сопряжения. Аля норадреналина характерно действие за счет выраженного, блокирую 1дэго влияния аденилатциклазной системы на электромеханический путь активация сокращения.

3.Мембранносьязанная фракция гуанилатциклазы стимулирует сс кращенк'е иссле,дуемых гладких мшц, растворимая фракция а» тиЕирует процесс расслабления.

4.В механизме развития коронароспз.зма существенным факторов является формирование недостаточности регуляторной фуккцк аденклатциклазной системы. К усилению спазма может приводить одновременное воздействие на мышцу регуляторных факторов, вовлекающих е процесс различные механизмы активы*? сокращения.

На^_но-п£акт11Ч£ская 2начим£С£ь_^работы. Полученные данные могут быть использованы в экспериментальной медицине щ дальнейшем изучении механизмов иормаль.чых' и патологических реакций сосудов сердца. Работа раскрывает один из фундаментальных Еопросов проблемы взаимосвязи структуры и функции г призере стенки кровеносного сосуца. Представлены углублекк; данные о механизмам действия биологически активных зещссте развитии вазолилатации и Еазоконстрикции, что внос:«1 вклад, ребенке проблемы ангиоспазма.

Теоретические положения диссертации внедрены в учебный роцесс на кафедрах нормальной физиологии и фармакологии в юдицинских вузах. Предложенный в работе методический подход .ифференцированяого анализа функций различных слоев гладкой [ышцы может Сыть применен .для дальнейших исследований фундаментальных закономерностей работы органов висцеральных сис-■ем.

Практическая значимость работы заключается в том, что ю положения могут быть использованы п экспериментальной и ¡линической фармакологии, кардиологии, кардиохирургии. Ре~ |ультаты работы могут быть применены для оценки функциональнее свойств изолированных артерий сердца при аутотрансплан-?ации у больных с коронарной недостаточностью.

Апдобадия даботы^ Основные положения диссертации доло-кены и обсуждены на ПП Уральской конференции физиолегор ¡Уфа,1977), на межвузозсксй конференции "Актуальные вопросы лорфогенеза я регенерации сосудистой системы и некоторых внутренних ррганов" (Свердловск, 1977), на П Всесоюзно:« симпозиуме'по острой ишемии и ранним постишемическим расстрсй-;твам (Москва,1978), на Ш Всесоюзной конференции по биохимии мышц (Ленинград,1976), на Пленуме проблемной комиссии "Трансплантация органов и тканей" (Новосибирск,1978), на заседании городского патофизиологического общества (Свердловск,1978), на региональной конференции патофизиологов'Урала (СвердловскД979), на мзжлабораторной конференции Всесоюзного кардиологического научного центра 0<1осква,13б0), на совместном заседании кафедры нормальной физиологии и физиологического отделения ЦКИ1 2-го М01ГМИ (Москва,1980), на заседании Свердловского отделения Всесоюзного (физиологического оСчьестза (Свердловск, , на И съезде Всесоюзного физио-

логического общества (Баку,1983), на У Всесоюзном симпозиуме "Центральная регуляция кровообращения" (Ростов-на Дону,1984), на I съезде физиологов .Урала (Уфа,1986), на II Всесоюзном симпозиуме "Физиология и патофизиология сердца и коронарного кровообращения" . (Киев,1987), на X/ съезде Всесоюзного физиологического общества (Кишинев,1987), на XIУ Пленуме проблемной комиссия "Физиология кровообращения и лимфообращения" научного совета АН СССР по физиологии висцеральных систем (Свердловск,1988).

Реадазадая_рет2Л1>та,1,ов_и^следйвани>я.. По материалам диссертации оцубликовано 22 работы, в том числе - в журналах "Физиологический журнал СССР им.И.М.Сеченова", "Кардиология" и "Кровообращение". Результаты исследования реализованы в ряде внедрений. Основные положения диссертации используются в учебной работе Свердловского медицинского института (кафедра нормальной физиолс гии), Ижевского медицинского института (кафедра фармакологии)! Теоретические положения работы-и методические подходы применены в научных исследованиях кафедр нормальной физиологии Свердловск« го, Челябинского медицинских институтов, Ленинградского санитарно-гигиенического медицинского института, Пермского фармацевтического института, кафедры фармакологии Ижевского медицинского института. Разработанный методический комплекс представлен в Го: сударственный^ комитет Совета Министров СССР по делам изобретени и открытий и подтвержден приоритетной справкой на ¡авторское сви детельство. Имеется удостоверение на рац.предложение.

и объем работы. Диссертация состоит из введения, главы по методике исследования, четьгрех экспериментальных глав, включающих литературные обзоры по темам данных разделов, общего заключения, выводов, материалов по внедрению результатов исследования и указателя литературы. Материал изложен на 281 странице машинописного текста, шсаачая 81 рисунок, 4 схемы, 2

[•аблицы и 2 графика. Указатель литературы сорержит 604 источника, в том числе 180 отечественных и 424 иностранных.

.ОБЪЕКТЫ И МЕТОДУ ИССЛЕДОВАНИЯ

Исследование осуществлено на.изолированных спиральных и диркулярньк полосках, на продольных полосках и сегментах, приготовленных из праксимальных участков правой коронарной и аередией нисходящей ветви левой коронарной артерий сшпгьи и человека, а также на спиральных полосках и на сегментах большой вены сердца свиньи. Сосуду, спиньи выделялись через 3,5 часа после забоя. Сразу вслед за этим препараты помечались с раствор Кребса для транспортировки в лабораторию. Сосуды человека отпрепарошлвалнсь из сердца чорсз 5-17 часов с :,50:,;ента наступления смерти в результате острой травмы.

Непосредственно перед экспернкентш готовились сосудистые полоски (сиринов 2 мл, длиной Ю г.гт-i). Сегменты тшезе го-геашшсь длиной 10 ил. Опит начинался через 1,5 часа после помещения сосудистого объекта я рабочуя камеру с целью пол-

I

«ой .стабилизации функциональных свг.йств препарата и исклэт--ния возможного влияния ондо?ел.то;г:!то;г r:i гладкуа иуснуяптугу* В экспериментах использовались, как правило, свежеприготовленные полоски и-сегменты через 2~3 часа поело изъятия сосудов у животных. В ряде случаев, как, например, при исследовании препаратов в течение нескольких суток посмертной перо-живаемости, сосуды хранились в холодильнике в растворе Кребса при температуре 2-4°С.

Аля порфузии препаратов применялся раствор Кребса, на базе которого готовились растворы с различными концентрациями KCI, NaCI и CaCIg, а также тестирующие растворы с добавлением биологически активных веществ, блокаторов и мимети-

коп. В опытах с варьированием ионного состава учитывался фактор осмотичности. С целью замены частично или полностью удаляемого химического элемента применялся принцип компенсирующего увеличения в растворе концентрации сахарозы, как наиболее нейтрального вещества по отношению к сосудистой гладкой мышце. Ьа основу поддержания изоосмотичности был принят объединенный закон Ьант-Гоффа для давления в растворах.

Лцотилхолин, гистамин, ионы калия применялись в концентрациях, являющихся оптимальными при инициации максимальное сократительного ответа, и определяемых в сериях эксперимента по построении кривых "доза-эффект" для соответствующих активаторов. При подборе концентраций имидазола, пропранолола, хелатона, иитропруссида натрия, а также катехоламинов выбирались дозы, наиболее часто употребляемые в других исследованиях. Коли, по данным литературы, постоянство дозы не был характерном, нами проводились эксперименты с изучением эффектов действия возрастающих концентраций препаратов (вера-памил, тео(|иллин, ионы лантана).

Непосредственно перед опытом производилось определение рН растворов на рН-милливольтметре типа "рН-121". Для иссле дованнй на коронарных артериях человека использовался лерфу зат со -значением рН 7,35-7,4, для сосудов свиней - 7,85-7,9 (соответствует величине рН крови этого животного), Коррекци рН осуществлялась, в зависимости от его исходного значения, применением трис.-буфера или концентрированной НС1. В процес се работы проводилась аэрация растворов. При этом величина рО? не приникала значений ниже уровня 100 мм рт.ст, Аля наг резания и поддержания температуры растворов в эксперименте было использобзно разработанное качи термостатирупцее устройство, что позволило осуществлять поадертме температур!

>астворов на постоянном уровне (3010±012°С) при нахождении гх в любом из отделений экспериментальной установки.

Б работе применен методический подход, позволяющий изу-шть реакция гладкомытечных клеток, различно ориентированных I стенке артерий сердца. Он включает: -.морфологический анализ поперечных сосудистых срезов, ¡.регистрацию сократительной активности гладкой мышцы изолированных сосудов сердца в изометрическом режиме, метод фармокологических воздействий на гладкую мышцу сосудов, позволяющий избирательно активировать, либо подавлять отдельные звенья в регуляции сократительной функции клеток.

Для морфологического исследования в работе применены (бщепринятые методики гистологического (микроскопирование фепаратов, окрашенных по методу ¿¡айера) и олектронномикро-¡копического (просмотр и фотографирование срезов в ялектрон-юм микроскопе ЭЬа1~100ЛП) анализа препаратов. Изучение пог.е-)ечных сосудистых срезов по таким методикам удовлетворяло 1адачам выяснения принципов сравнительной организации состав-[яющих гладкую мышцу слоев артериальной стенки.

Регистрация сократительной активности сосудистой мышцы фоизводилась в условиях, наибольшим образом соответствующих [эометрическому режиму опыта. В качестве датчика испэльзо-1ался малогабаритный сдвоенный диодный механотрон типа >МХ1С, обладающий свойством минимального смещения при дейгл-«ш на него значительных нагрузок. Сигнал с моханотрона поступал на усилитель постоянного тока, затем - на самопишущий фибор типа Н-3020-! для документальной записи.

В ряде экспериментов производилась алектростимуляция ¡осудистых препаратов раздражающими прямоугольным» импульса-си .длительностью Ю мсех с лабораторного стимулятора ЭСЛ-1.

Соотношение площадей раздражающих электродов (1:15) дало возможность получить истинное униполярное раздражение (p.p.crainfield и соавт.,1957).

С целью дифференцированного'изучения функциональных па. раготров циркуллрио и скаралыю расположенных кишечных слое] стсшси веночных артерий на:,;;; разработан метод геометрически различных сосудистых отрезков. Ü данном случае регистрация сократительной активности сосудистой мышцы осуществляется ш двух геометрически разнородных препаратах, приготовленных и; одного сосуда. ПервыЗ препарат - спиральная полоска. Сократительная активность циркулярного и спирального мышечных слоек выражается б однонаправленном эффекте - укорочении препарата. Второй препарат - сегмент (или продольная полоска) . - сократительная активность циркуЛярно ориентированных элементов выражается в удлинении препарата, а спирально расположенных мышечных структур - в его укорочении, -¿^сли для изучаемой ткани характерно неодновременное вовлечение в реакцию мышечных слоев (при воздействии возмущающих факторов), или имеет место существование.различий в скоростных параметрах, свойственных этим слоя;»;, предложенный метод представляет возможность дифференцированного исследования указанных мышечных структур.

У связи с разработанной методикой важным моментом явилось определение степени растяжения препаратов. Показано, что избирательная регистрация активных свойств артерии может иметь место при растяжении изолированного сосуда на 20-70$ от его исходной .длины (Ю.И,Ухов,1976). Ь этом случае мышечная активность реализуется в изменении напряжения препарата при изометрическом ре.т-ике опыта (I0.M,J'xoB,i976; С.L.Seidel, R.A.iiurpty,1976), Однако, в связи с применением различных

препаратов, нагрузка при одинаковой величине растяжения ока-, 'жется большей на продольных полосках и сегментах в связи с преобладающим продольным расположением коллагеновых волокон. Поэтому в работе использована адекватная указанной выше степени растления препарата нагрузка в единицах силы., Ее величина определена по принципу Ламэ,. разработанному в классической теории упругости для решения задачи о напряженном состоянии трубки, подвергаемой равномерным внешнему и внутреннему давлениям. Исходная нагрузка составила 21 >10-% на 100 ыг сырого веса исследуемой ткани.

• Статистическая обработка результатов произведена с помощью компьютерной техники методами вариационной статистики. Работа проведена на сосудах 338 свиней и II трупов человека. Выполнено 77 серий экспериментов с общим количеством опытов IQI7, Произведено более -девяти тысяч измерений веса препаратов, амплитуды, времени и скорости развития мышечного напряжения и' мышечной релаксации сосудистой ткани.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУВДШЕ

• , ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ ГЛАДК0Щ1Ш110Й ТКАНИ КОРОНАРНЫХ АРШРИй Мо^ад^гач^ское исследовшгап_стр£едия £ла.щгой мышцы £Т£нга_вен£Чшх ¿ртедий. На поперечных срезах коронарной артерии свиньи преобладающая часть хорошо выраженной медиальной оболочки сформирована из клеток, имеющих циркулярную ориентацию по отношению к продольной оси сосуг;а. Значительная часть адвентиции, а также небольшие участки медии, граничащие с интимой, содержат мышечные клетки, имеющие-, в основном, продольно-спиральное направление. В наружном слов гораздо шире, чем в медиальном, выглядят межклеточные про-*-

странства. Ьо в!?утреннем слое медии между отдельными гладко-мшечшш клетками наблюдаются межклеточные контакты с расстоянием между поверхностными мембранами 10-20 им. Таких контактов мспду гладкомниечными ¡слетками в наружном слое найдено не било.

Ёк£пер^ентн_по £пЛеЛе£.е21и]2 ¿^^"¿^"„ЩРЛУ.йЯЕ.нЛ 2 £пир£ЛЬно £асп£Л£ж£ннъгх мьгае^п^с^р^ктуд сосудистой^стенки» С целью выявления функциональной активности всех мышечных элементов сосудистой стенки использовался стимулирующий фактор, способный вовлекать в процесс весь клеточный пул гладкой мьпацы. В качестве такого фактора применены ионы калия.

Гиперкалиевый активирующий эффект на спиральной полоске свиньи проявился в развитии сокращения контрактурного типа с наличием начальной быстрой и последующей медленной компонент. Обе составляющие имели однонаправленный характер, реализующийся в укорочения сосудистых полосок. Средняя'амплитуда сократительного ответа на действие КС1 (1«10~ моль/л) по ■ данным 19 опытов составила (33,9+2,6).10~%.

Эксперименты (75 опытов),, проведенные на сегментах (и на продольных полосках), позволили получить принципиально другие результаты по характеристике калиевой реакции. В.отличие от предыдущих опытов, в сегментах быстрая начальная

компонента проявлялась в виде удлинения препарата с амплиту-3

дой (3,8+0,2)'10~ Н. «Задленная компонента (амплитуда -(4,2±0)4).10~^И) также, как и в спиральных полосках, проявлялась в укорочении препарата.

Аналогичные опыты, проведенные на коронарных артериях человека, позволили получить сходные результаты (п=И).

Получзкнь'е данные свидетельствуют о наличии в сосудистой стенке функционально гетерогенных слоев. Можно полагать,

что циркулярно расположенные мышечные структуры обеспечивают быстрое начальное укорочение спиральной полоски и быстрое начальное удлинение сегмента или продольной полоски, а мышечные слои со спирально-продольной ориентацией - медленную компоненту при укорочении спиральной полоски и фазу медленного укорочения сегмента или продольной полоски.

Сравнительный анализ_ак™вно_сти ди£^лящо_и_спи£ально £ас,пол£женных мйшечнгос_клбток в_ не^одона^них^^с.^д^к^ Аналогично описанным в предыдущем разделе экспериментам осущест- -влены исследования с привлечением так называемых "предметных моделей" - сосудистых объектов из других областей, имеющих те или иные вариации в структурном расположении гладкомышеч-ных элементов,

а) Левая гастральная артерия свиньи, в стенке которой имеет место, практически, лишь циркулярная ориентация мышечных клеток по отношению к продольной оси сосуда. Было установлено, что сократительные ответы при действии КС1 моль/л) характеризовались укорочением спиральных полосок и удлинением сегментов,' однако в обоих типах препаратов реакции развивались, как монофазный процесс.

б) Большая вена сердца свиньи, характеризующаяся, практически, лишь спиральным расположением мышечных волокон. Па-ми было установлено, что, как на спиральных полосках, так и. на сегментах, применение ионов калия вызывало развитие монофазных реакций, выражающихся в укорочении обоих видов препаратов.

Из^1^ше_зав^с1им£ста_сдк£а^нтельной_ дедтелыюсти гладких мыш^венечшх артедШ Дт_пДо^икндв£ния_в^кле2ки £Н_акле_-гочн_ого тльция.

а) Эксперименты п использованием бескальциеного рютас-

ра (а^йО), . ' '

Через 20 минут после помещения сосудистого сегмента в

среду, лишенную кальция (с добавлением 1*10" моль/л хелато-

на), гиперкалиёвое воздействие (КС1 1»10~^МОль/л) вызывало

лишь укорочение препарата. Величина укорочения равнялась 3

(2,2±0,1)»Ю~ Н. Фаза удлинения в этих условиях полностью отсутствовала. Укорочение сегмента при гиперкалиевом воздействии наблюдалось также в случае длительного инкубирования • препарата в бескальциевой среде (более одного часа).

б) Эксперименты с воздействием на сосудистую мышцу ионов лантана (ц=?).

Опыты проводились в той же последовательности, как ив-, предыдущей серии. Было установлено,'что эффекты подавления .

гиперкалиевой реакции на фоне различных.концентраций лантана

3 1

(2-4•I0~°моль/л)

были аналогичны эффектам применения бескальциевого раствора.

в) Эксперименты с использованием верапамила (а=7). Применение верапамила также вызывало аналогичные' эффекты, которые наблюдались при использовании бескальциевого

раствора и 'лантана. Было установлено, что концентрация ве-

А * ■ '

щества - 2«10" моль/л - оказалась пороговой'в блокировании

калиевой реакции. Затем было показано,] что на фоне верапамя-

ла в концентрации 2-5»10 моль/л постоянно угнеталась фаза.

удлинения гиперкалиевой реакции сегментов. Фаза последующего

укорочения при этом сохранялась. Ее среднее значение было

равным (1,7±0,2)»10~ Н и не отличалось от величины, регист-

, • рируемой без блокатора кальциевой проницаемости.

Ис^л^дование^е^шсмв ¿ействик^в£3£а£тадаих кош^нтра~

ких мьиц_кор£яаржк артетай. .

Таблица I Влияние ионов калия и ацетилхолина на сократительную жтивность гладких мышц коронарных артерий

Сонцентрация Амплитуда ответной реакции (в ньютонах) шщества спиральная по- . сегмент (п=30)

!в моль/л) лоска (п=18) фаза удлинения фаза укорочения М ± m Mim. М ± m

EI:

:.ю-

!Л0~

uior E.IO" ».io-

>.I0'

i-2

(п.гй.амо-3

(20,9±4,5).I0-3

не измерялась

не измерялась

(24,9i4,5).I0-3

не измерялась -3

.3

--(0,7±0,2).Ш

(О.ЗЮ.г^КГ3 (1,7+0,4). м-°

(1,6+0,б).Ю-3 (4,6+1,99). Ю-3

O^iO.^.IO"3 (6,Iii,7).Ю-3 (5,2+0,2). Ю-3 не измерялась

(33,0±3,6)*1СГ> (5,5i0,3).I0-

,-3

[.5.I0-1 . ! (30,6±2,2)'I0-3 (ö.IiO^i'IO-3

не измерялась (7,2±3,87)Л0-3 (II ,0+2,2). Ю-3 не измерялась

щетилхолин: ,-9

(1,3±0,3).Ю'

,-3

5,5-Ю' ---

^Йя7 (7,8+3,3).Ю-3

3> 'i.I.IO-6 (I0,6±2,6).I0-3 (1,6+0,8).Ю-3 (2,5+0,9).Ю-3

S.5.I0-6- г ' о 1 ч

V I.I.IO-0 (2I,5i4,6).I0 (4,2±I,0).I0 (3,4+0,5)ЛОГ*

j.öUO-5 (I5,Bi2,4)«I0~3 (3,510,7).Ю-3 (3,9iI,0).I0-3

),5.I0-^ (6,5i2,3).I0-3 не измерялась не измерялась

2

а) Определение Зависимости "доза-ответ" при действии ионов калия.

Выполнены две сравнительные серии экспериментов на спиральных полосках и на сегментах с последовательным применением возрастающих концентраций HCl (таблица -И. спиральных полосках, зарегистрированы монофазные по направленности сократительные ответы, И а сегментах получены двухфазные по направленности реакции, $аза удлинения препаратов начала проявляться только при концентрации КМ 2.10- Моль/л (в трех опытах из восьми). Для возникновения фазы укорочения сегментов пороговая концентрация KCl равнялась моль/л.

б) Определение чувствительности сосудистой мьшщы к действию ацетилхолина.

. проведенные две сравнительные серии экспериментов на спиральных полосках и на сегментах с целью получения кривых для ацетилхолина не выявили принципиальных отличий от данных, полученных в аналогичные исследованиях с применением KCl« Статистически обработанные результаты представлены в таблице J.

ß исследованиях дан; юг с раздела выявлено, что экспериментальные кривые "доза-эффект" для спирально ориентированного мышечного слоя выражает градуальную зависимость эффект; от концентрации стимулятора, кривая тя циркулярной мышцы охватывает мечыцу» область концентрация агонистов, имеет моньший наклон, точка перегиба кривой смещена в сторону низких доз активаторов. Это указывает на существование собственного порога реакции для циркулярного мышечного слоя.

Исследование динамики развития быстрой и медленной фаз калиевой контрактуры на сплре.яып,гс полосках и сегментах, а такхе анализ этих кинетических параметров в условиях приме-

нения ацетилхолина показали, что гиперкалиевая и ацетилхолн-Новая реакфга отличаются между собой по скорости формирования медленной фазы процессов. Сделан вывод, что укорочение сегмента, возникающее на основе сократительной деятельности спирально ориентированных мышечных слоев, определенным образом зависит и от процесса десенситизации, развивающегося в

Клетках циркулярной мышцы во время ее сократительного акта.

}

Дс£Л£д£ва™е_способн£Сти_мшечной ткани к £а£витию_рит~ мте£К£й_с£к£агатсльно_й акташюсти^ В процессе инкубации коронарных артерий в перфузируемом растворе Кребса сосуды не обладали спонтанной ритмической активностью. Для вызова ритмической сократительной деятельности были применены повторные бескальциевые воздействия - препарат помещался в нормальный раствор кребса, затем на 20 минут - в раствор Креб-ра, лишенный ионов кальция, потом - вновь в нормальный раствор Кребса и т.д., до трех повторений (п=15). В этих условиях, при действии невысоких концентраций KCl (о—1*10"^ моль/л) возникала преходящая ритмическая сократительная деятельность препаратов. На спиральных полосках она реализовалась в их ритмичном укорочении на фоне развивающегося тонического напряжения. На сегментах активность проявлялась в ритмичном удлинении препаратов с частотой 15,2*1,2 сокращений за Ю минут.I

В специальных сериях экспериментов (п=25) зарегистрирована ритмическая сократительная активность без предварительного использования бескальциевого раствора, но в ответ на действие гистамина, безнатриевого раствора, совместного применения гисталдана и норадреналина, применения ¡{С1, в ответ на растяжение препаратов, В аналогичных условиях нами была выявлена ритмическая сократительная активность и на короиар-

v 19 .

ных артериях человека. • ■

Так как вызванная ритмическая деятельность в спиральных полосках и на сегментах имела разнонаправленный характер, то сделан вывод, что' она связана с функционированием клеток циркулярного мышечного слоя.

Определение ,й^к!р1ональной_устойчивости сосудистых мьшечнъгх__стр2К£у£.

а) Влияние на сократительную активность повторных гиперкалиевьгх воздействий.

\

В опытах на сегментах после фонового применения KCl (1*10~*моль/л) осуществлялись два последующих повторных гиперкалиевых воздействия с 5-минутными интервалами. Величина удлинения препаратов в период сосудистой реакции равнялась. (4,7±0,48)»Ю~3Н и (2,3i0,26).I0_3H для. первого и второго воздействий соответственно. Уменьшение степени удлинения при повторном воздействии KCl явилось достоверным (р <0,001). В процессе третьего по порядку воздействия эффект удлинения сегмента практически исчезал. Значения величины укорочения препаратов на первое, второе и третье воздействия KCl состав 9или соответственно (Q,4±I.V)-IC^H, (П,0±4,2).10^Н и-(7,5+3,5)'10*"%. Различия оказались недостоверными. Выявленная закономерность прослежена и на сегментах из правой коронарной артерии человека.

б) Сократительная способность гладких мышц в динамике посмертных изменений.

В серии из 10 опытов, проведенных на вторые-четвертые сутки после'ввделения коронарных артерий из организма животного, было установлено, что фаза удлинения ответной реакции на применение KCl (1»10"*моль/л) отсутствовала, в то время как эффект укорочения препаратов сохранялся,' достигая величины (7,9±2,4)"10~%, При этом отметим, что в течение первых

20

суток фоновое значение реакции начального удлинения и последующего укорочения при развитии гиперкалиевого ответа сосудистых сегментов составило (4,4±0,37)<>10""^Н и (П,3+2,5)«1СГ% соответственно.

Материалы этого раздела исследований позволяют констатировать, что меньшая функциональная устойчивость в вышеописанных ситуациях оказалась характерной для циркулярного мышечного слоя.

Результаты исследований всей главы диссертации позволяют придти к заключению, что гладкомыэечные клетки, по разному ориентированные в стенке артерии сердца, можно рассматривать как функционально неоднородные. Сопоставляя полученные данные с материалом литературы по физиологическим характеристикам скелетных мышц целесообразно провести определенную аналогию с имеющимися отличиями в функциональных параметрах ' фазных и тонических волокон скелетной мускулатуры (Т.Н.Ониа-ни и соавт. ,1967; Е.К.Дуков,19б9; а.В.№е1з8,1973; ы.1)огз^-всЬе!<1-Ь-Ка£ег, Н.С.Ьи^Ёаи,1974 и др.). Такое сопоставление дает основание предполагать, что клетки циркулярно ориентированного мышечного слоя стенки коронарных артерий характеризуются способностью к развитию сокращений быстрого (фазного) типа, а деятельность клеток, составляющих слои со спирально-продольной ориентацией характеризуются преимущественным функционированием тонической системы.

МЕХАНИЗМЫ АКТИВАЦИИ ГЛАДКОЙ 11ШЩЫ КОРОНАРНЫХ АРТЕРИЙ В РЕАЛИЗАЦИИ НЕЙГОМЩЩАТОРНЫХ ЭФЗЙСГОВ

Влитие ацетилхолина_на £о^ратителы^ю_активност£ ди£-куля£но и спирально £риентированных £ладкошмечнт_эламен[т_ов ст£нки_к£ронартк артерий. Для выявления особенностей реак-

ций различно ориентированных гладкомышечных волокон на аце-тилхолин проведены две серии экспериментов, в которых были получены кривые "доза-эффект". Данные приведцр в таблице I. На спиральных полосках выявились монофазные ш направленности сократительные ответы, амплитуда которых зависела от концентрации ацетилхолина, На сегментах в 18 из 24 опытов получены двухфазные по направленности реакции, В 6 опытах фаза удлинения в реакции на ацетилхолин не регистрировалась, хотя на этих же препаратах наблюдалось ее полноценное развитие при воздействии на ткань КС1. ■

Аналогичные опыты, проведенные на коронарных артериях человека (п=10), выявили те же особенности ответов в качественном отношении.

Особенности де£с£вия—ацетил*оотна 'на^гладгае^мышцы большой. ¿еды_сердца. 6 серии из 9 экспериментов проведено сравнительное изучение реакций на ацетилхолин спиральных полосок правой коронарной артерии и большой вены сердца. На артериальных препаратах зарегистрирован отчетливый сократительный эффект при воздействии, ацетилхолина. На препаратах вены реакция либо не проявлялась (а=5), либо выражалась в

виде незначительного ослабления тонуса при действии холинер-

—я

гического медиатора в .диапазоне концентраций от 5,5*10 до 5,5«10~^моль/л.

Э^йееты ацеталхолина_на йоHe_ng.no.ляризац™_п£в.ерхност-ных мембран гладкомшечных_.клеток ионами^алия^, В данной серии, экспериментов, проведенной на 7 сегментах коронарной артерии свиньи, в качестве контроля регистрировалась исходная реакция на ацетилхолин'(1,1-2,2«10~®моль/л). Она проявлялась в виде двухфазной кривой, что отражало последовательность активации спирально и циркулярно ориентированных мышечных

структур. Затем на фоне развивающейся калиевой контрактуры (КС1 б-Ю.1СГ^моль/л) проводились повторные ацетилхолиновые воздействия. Было установлено, что в этих условиях холинер-гический медиатор вызывал лишь дополнительное укорочение препаратов. Значение этой составляющей реакции равнялось (1,6±0,2)»10~%. В проведенных опытах эффекта удлинения сегментов при добавлении в перфузат ацетилхолина не наблюдалось.

Особенности действия_ацетилх2лина в ^с ловиях__п£им е н е ни я бескмьщевого_и_безнатриевого_растворовх Две серии опытов проведены в условиях предварительного изменения кальциевых механизмов регуляции гладких мышц, В связи с этим применены безнатриевая среда (в которой ионы натрия были заменены на еахарозу) и бескальциевый раствор. При использовании безнатриевого перфузата зарегистрировано недостоверное (р>0,05) угнетение амплитуды сократительной реакции спиральных полосок на применение ацетилхолина в концентрации ХД-Ю^моль/л. В бескальциевой среде (с добавлением хелатона) наблюдалось подавление (р<0,01) амплитуды сокращения сосудистых полосок на 30,15?. Аналогичные результаты получены и в дополнительной серии опытов (п=б) при блокаде кальциевой проницаемости поверхностной клеточной мембраны верапамилом (1-2«10~®моль/л), В четвертой серии экспериментов (а=7) проводилось одновременное удаление из раствора ионов натрия и кальция. Было установлено, что в этих условиях сократительный эффект ацетилхолина на спиральных полосках все-таки сохранялся, хотя был подавлен в большей степени, чем в отсутствие ионов натрия и кальция раздельно. В таких опытах величина ацетилхолинового сокращения была уменьшена на 57,9% (Р<0,01).

Особенности Де^ствия_ацетилхолена в ^ ся*ФР аб от к н

сосуди£т£й_ткани_нит£опр^ссил1ом натриял С целью получения' материала о роли цГМФ в механизме действия ацетилхолина проведены четыре серии экспериментов. В качестве стимулятора цГМФ использован нитропруссид натрия (J.Diamond и соавт., 1977; M.J.Mirro и соавт*,1979 и др.). Наши эксперименты показали, что на спиральных полосках не наблюдается достоверного (р>0,05) изменения амплитуды ацетилхолинового сократительного ответа под влиянием нитропруссида натрия. В опытах, проведенных на сегментах (п=7) обнаружена тенденция к увеличению фазы удлинения (р> 0,05). Кроме того, хорошо выраженным феноменом явилось ускорение процесса десенситизации в действии ацетилхолина (скорость процесса десенситизации в условиях фонового ответа - (1,9±0,5)»10~%1/мин; при обработке препаратов нит^опруссидом натрия - (4,37+0,9)-10~%/мин; р<0,05). Эффект самого нитропруссида натрия в концентрации 1«Ю-^-3'Ю~^моль/л выражался в снижении мышечного тонуса.

Для сравнения была проведена серия опытов по выявлению ■ влияния нитропруссида натрия на развитие гиперкалиевых реакций. Результаты показали, что .при развитии калиевой контрактуры (KCI 1*10~^моль/л) на сосудистых сегментах влияния нитропруссида натрия на скорость развития фазы удлинения не было. Что касается последующей фазы укорочения, то здесь наблюдается увеличение скорости под влиянием нитропруссида (скорость развития этой фазы в контрольной Катаевой реакции (0,4±0,0.8)• 10~^Н/мкн; в опыте - <0,7±0,1)• Т0-3Н/1лш; р<0,05; n=II).

В связи с тем, что в литературе имеются данные об однонаправленности эффектов нитропруссида натрия и ацетилхолина (оба вещества увеличивают внутриклеточную концентрация цПй) на гла;:,комыазчные клетки, кями была проведена серия экспери-

ментов по изучению влияния предварительной обработки ткани ацетилхолином (1,1«10~^моль/л) на скорости развития обеих составляющих реакции сегмента к гиперкалиевому воздействию. Было установлено, что скорость удлинения препаратов в начальной фазе гиперкалиевой реакции под влиянием ацетилхолина не изменялась. При регистрации скорости второй фазы ответа (укорочения) во всех экспериментах наблюдалось ее увеличение, однако незначительное (скорость развития этой фазы фонового гиперкалиевого ответа - (0,7±0,1)»Ю~^Н/мин,- а в опытах при действии ацетилхолина - (0,9±0,1Ы0~%/мин).

Поскольку известно, что нитропруссид натрия активирует лишь растворимую фракцию гуанилатциклазы (Е.Н.ОЫ^е1п и со-авт.,1979), на основании полученных экспериментальных данных представляется возможным сделать вывод, что эта фракция участвует в регуляции процесса расслабления гладких мыпц коронарных артерий.

Влияите но£ап,реналина на_сок£атительнута ^сп0С_0бн0£ть изолир£ванных к0£0на£нж_а]этер1ийь В этом разделе проведены . две серии экспериментов на спиральных полосках и сегментах. Изучалось влияние возрастающих концентраций медиатора (3*10-7-3'10"^моль/л). На спиральных полосках при концентрации биогенного амина 3«10 моль/л получен незначительный прирост тонического напряжения. В концентрации 3'10~эмоль/л норадреналин, как правило, приводил к реакции расслабления величиной (2,611,2)-10_3Н (п=7). В концентрации 3-б«Ю"5 моль/л'адренергический медиатор на 15 препаратах вызывал релаксацию, з 6 случаях сказался неэффективен, и лишь в 3-х наблюдалось незначительное увеличение тонического напряжения. '

В серии экспериментов на сегментах • (п=20) было обнару-

жене, что норадреналин (3-6*10~®моль/л) в 12 опытах вызывал укорочение препаратов, в 6 случаях оказался неэффективен, и лишь 2 препарата отреагировали на действие биоамина удлинением.

Дополняющей явилась, серия экспериментов по определению эффектов норадреналина на спиральных полосках в условиях высокого исходного тонуса сосудов. Увеличение напряжения достигалось использованием KCl (3«10""^-1,5»1(Г*моль/л). Во всех проведенных экспериментах (а=10) применение катехоламина вызывало незначительное расслабление гладких мышц.

Действие_н£рад2еналина_в_условиет блокацы бета-а_^рено-£едептор_овд В данном разделе проведены четыре серии экспериментов. Одна - для установления факта функционирования аль-фа-адренергического механизма, и три серии опытов - для сравнительной оценки выраженности альфа- и бета-эффектов в механизмах действия норадреналина и адреналина.

В условиях обработки спиральных полосок пропранололом (3,6'10~®моль/л) в 16 из 18 экспериментов расслабляющий эффект норадреналина, регистрируемый до блокады бета-адренер-гической системы, превращался в сократительный (среднее значение амплитуды - (II,6i4,I)«I0~%). Сократительный эффект сохранялся и в условиях высокого исходного тонуса, создаваемого применением KCl (3-5*10~^моль/л). При этом однотипность результатов наблюдалась в следующих двух сериях экспериментов, проведенных в разных методических условиях. Так, в первой из них производилось сравнение амплитуды фоновой калиевой контрактуры и амплитуда сокращения, развивающегося при совместном применении KCl и норадреналина в условиях блокада Сета-адренергического механизма пропранололом. Во всех опытах происходило увеличение амплитуды сократительного ответа

при добавлении норадреналина (знамение амплитуды фоновой реакции - (19,0±4,9)«10~?Н; величина тестирующего сокращения -(31,2±2,9)«10~%; р<0,05; п=9). Во второй серии норадреналин добавлялся во время уже развившейся калиевой контрактуры, что также сочеталось с предварительной обработкой сосудистых препаратов пропранололом. В этом случае эффект не отличался устойчивостью. В 4-х опытах наблюдался прирост амплитуды сокращения, в 4-х экспериментах добавление норадреналина не оказывало влияния.

Сравнительный анализ активации альфа-механизма норадре-налином и адреналином показал, что более выраженным альфа-эффектом обладает адреналин в соответствующей серии с применением пропранолола (3,6•I0~®моль/л). Постоянно возникающий на этом фоне сократительный эффект адреналина (амплитуда - ' (28,0±б,9)«Ю~%) был более выражен, чем в серии экспериментов с использованием норадреналина (амплитуда -(II,6±4,1)-10"%)..Различия явились достоверными (Р<0,05; п=7)»

Эта закономерность подтвердилась и в исследованиях на сосудистых препаратах с высоким исходным тонусом, создаваемым гистамином (7>10~®моль/л). Преобладание эффекта действия адреналина в данной серии опытов также явилось достоверным (р<0,05).

В серии экспериментов по активации адреналином и норад-реналином бета-адренергического механизма (n=II) определено обратное соотношение.' Примерно в 60% случаев адреналин не оказывал эффекта на тонус артерий, активированных KCl (5«10~й моль/л), в то время как норадреналин почти во всех опытах вызывал расслабление сосудистой'мышцы. ■-

Ис£Л£дование_дей£твия норадреналина в_ £аство£еА литаен-

ном ионов на£рия_и_кальция{. В каждом опыте этой серии перед воздействием норадреналина или адреналина сосудистый препарат помещался в раствор, не содержащий ионы натрия и кальция. Методические условия экспериментов отличались от ранее описанных опытов с ацетилхолином только тем, что для блокады бета-механизма одновременно применялся пропранолол. Как нор-адреналин, так и адреналин в данных условиях оказались неэффективными по отношению к сосудистым препаратам.

Сравнительны^ анализ_реакций_на но£адренадин_а£териаль-ных и вено^нюс_с£с^дов_сераца. Эксперименты проведены на

спиральных полосках правой коронарной артерии и большой вены

£

сердца. В этих опытах при воздействии норадреналина (3*10 -ЗЛСГ^моль/л) выявлена следующая закономерность: ацренерги-ческий медиатор в условиях применения нормального раствора Кребса вызывал на артериях незначительное расслабление величиной (2,6±1,2)«10~% (п=7). На венах зарегистрирован постоянный сократительный ответ - (3,1*1,6).10"% (п=7).

КЛЕТОЧНЫЕ МЕХАНИЗМЫ РАССЛАБЛЕНИЯ ГЛАДКИХ МЫЩ КОРОНАРНЫХ АРТЕРИЙ ПРИ ДЕЙСТВИИ ВЕЩЕСТВ МЕДИАТОРНОГО ТИПА

Со£м£с;гное_ц£Й£твие н о^адр ш I ал и на, _КС I х ацетилхолина_и ги£та^на, на_С£К2а21гтельнута ^ункдию гладких мышц^ При проведении этих исследований было принято за основу то, что нор-адреналин является активатором1 аденилатциклазной системы

клеток (А;А.Болдырев, О.Д.ЛопиНа,1977 и др.). Представляло

I

интерес оценить проявление данрого механизма в условиях при-

I

менения других биологически активных веществ.

В опытах с воздействием норадреналина на развитие калиевой контрактуры отмечено, что адрвнергический медиатор оказывает незначительное подавляющее действие на параметры это-

го вида сокращения. В серии экспериментов на спиральных полосках величина амплитуды тестирующего ответа была недостоверно уменьшена (р> 0,05) по сравнению с фоновым значением. Исследование, проведенное на сегментах, показало; что сравнительное влияние катехоламина на фазы удлинения и последующего укорочения при развитии калиевой контрактуры характеризуется -существенными различиями..Если угнетающее действие норадреналина на процесс укорочения препаратов не тлело существенного проявления (р>0,05). .то блокирующий эффект медиатора на фазу удлинения выявился весьма наглядно (фоновая амплитуда - (8,6+0,7).10"%; в опыте - (4,2+0,5)«10-3Н; р<0,001; п=16).

В серии экспериментов на спиральных полосках по -изучению влияния норадреналина на ацетилхолиновые сократительные . реакции определено, что амплитуда ацетилхолинового ответа в условиях предварительного воздействия норадреналина была уменьшена на 36,1% (р<0,05; п=1б).

Эффекты действия гистамина, исследуемые в серии экспериментов на спиральных полосках, также подавлялись предварительной обработкой сосудистых препаратов норадреналином, но в наибольшей степени. Амплитуда гистаминового (7-10~®моль/л) ответа в опытах с применением норадреналина 'была уменьшен^ на 73,7% (фоновое значение амплитуды'сокращения составило (27,0±2,5).10~%; амплитуда ответа на гистамин'в присутствии' норадреналина- (7,1+1,6).10_3Н; р<0,001; п=26).

Вышеизложенные факты дают основание полагать, что вызванная норадреналином активность аденилатциклазной системы неоднозначно проявляется в процессе воздействия на мышечную ткань различных по своей природе стимулирующих Ееществ.

Роль_ионов_нат£ия и кальция а_ механи51лах_П£й£тшя гис-

^ашша_и_ада_тилхолина. Проведено шесть серий экспериментов с целью определения различий в активирующих механизмах ацетил-холина и гистамина.

а) Влияние ионов натрия на эффекты действия гистамина.

В условиях удаления ионов натрия из перфузата не наблюдалось достоверных (р>0,05; а=15) изменений сократительных реакций артериальных полосок в ответ на применение гистамина (7.10~5моль/л).

б) Влияние ионов кальция на эффекты действия гистамина.

Отсутствие в перфузате ионов кальция сказывается на сократительной активности сосудистой мышцы в значительной сте-. пени. По сравнению с фоновым значением - (13,6+1,4)' 10"% -амплитуда ответов на гистамин в бескальциевом растворе с хе-латонсм была уменьшена (Р<0,001; а=19) на 63,2$ и составила (5,0+0,9).10_3Н.

в) Эффекты действия гистамина в условиях одновременного удаления ив перфузата ионов натрия и кальция.

При.удалении из среды натрия и кальция угнетение сократительной реакции на гистамин (а=9) проявляется наиболее значительно. При этом амплитуда сокращения уменьшилась на 87,1% (значения фонового сокращения и в опыте равны соответственно 20,9±2,8)'10~3Н и (2,7+0,89).10-%).

Сравнительные данные но эффектам действия ацетилхолина приведены на стр.23. Результаты' показали, что активирующие

' с

пути в механизме действия холинергического медиатора (1,1>Ю моль/л) по сравнению с гистамином более устойчивы в условиях удаления из раствора вышеуказанных ионов. При отсутствии в перфузате ионов натрия имеет место недостоверное (хотя и болов выраженное, чей в случае применения гистамина) уменьшение ацетилхолиновых сократительных ответов, а в условиях

применения раствора, лишенного иенов кальция," реакция подавляется лишь .на 30,1$. В среде, не содержащей ионы натрия и кальция одновременно, ацетилхолиновый ответ уменьшается только на 57,9%.

Полученный в данном разделе материал подчеркивает лишь частичную зависимость механизма холинергической активации от состояния мембранно-ионных процессов. Эффект гистамина в большей степени зависит от участия ионных механизмов, обеспечивающих электромеханическое сопряжение в гладкой мускулатуре.

Эффекты гастамина и шщтолхолина_.в_условиях действия имидазола или теофиллидаА В этом разделе исследований имида-зол использован как стимулятор внутриклеточного фермента -фосфодиэстеразы (Д.Д.Хардман, Д.Н.Вельс,1977), а теофиллин -как ингибитор фермента (W.H.Kukovetz и соавт.,1976).

а) Шшяние имидазола на сократительные эффекты гистамина.

Серия экспериментов на изолированных спиральных полос- . ках определила тенденцию к усилению гистамннового эффекта после преинкубации сосудистой ткани в растворе с имидазолом (2»10~^моль/л). Однако величина прироста сокращений не была . достоверной (р>0,05). В серии-экспериментов на сегментах получена более выраженная с количественно;! точки зрения картина влияния имидазола на гисташнергическиз реакции. Было установлено, что величина фазы укорочения при развитии реакции на гистамин недостоверно возрастала. Что касается начальной фазы удлинения, то здесь выявлено достоверное увеличение амплитуды отой составляющей гиетаминовой реакции (фоновое значение - (2,0+0,65)-10 -Я; величина ответа в услови-

«5

ях применения имидазола - (4,2±0,Г/Ы0~'^1; р<0,05; а=Ю)«-"

б) Влияние имидазола на активирующие эффекты KCl и аце-тилхолина.

В серии экспериментов на сосудистых: сегментах не было установлено достоверных различий между амплитудой ответной реакции на KCl (4'10"^моль/л) в нормальном растворе Кребса и величиной ответа после обработки ткани имидазолом как для фазы удлинения (n=II), так и для фазы последующего укорочения (n=II). Аналогичные результаты были получены в серии эк- j спериментов, где в качестве активирующего вещества использо-¡вался ацетилхолин (п=10).

в) Особенности действия имидазола в условиях активации бета-адренорецепторов норадреналином.

С целью косвенной проверки специфичности влияния имида- : $ола на гидролиз цАМ5 проведены три серии экспериментов с одновременным использованием стимулятора бета-адренергичес-кого механизма (и аденилатциклазной системы) - норадренали-н^., Сначала изучался фоновый эффект катехоламина в. условиях обработки сосудистой ткани-имидазолом, то есть в условиях

активированного гидролиза внутриклеточного цА.М5, без предва- j

' 1 i рительной коррекции бета-адренергического механизма соотват- ,

ствующим адреноблокатором. Затем проводилось воздействие

биологически, активным веществом на фоне одновременного при- ;

менения имидазола и бета-адренергического блокатора - про-

ггранолола (З.б.Ю^моль/л).

Было установлено, что на спиральных полосках при активации сосудистой ткани ацетилхолином амплитуда сократительной реакции в условиях обработки препаратов имидазолом и . норадреналином составила (25,7±2,9Ы0~% (п=6). Амплитуда j сократительного ответа на действие холинергического медиато- ; . ра при участии нор^дреналина на фоне имидазола и пропраноло-

ла несколько возрасла, однако это различие оказалось недостоверны!.? (р> 0,05; п=б). В серии аналогичных экспериментов, выполненных на сосудистых сегментах, показано, что имидазол в сочетании с норадреналином и бета-блокатором существенно не влиял на фазу удлинения ацетилхолиновой реакции и последующую фазу укорочения сосудистых препаратов.

В следующей серии экспериментов, выполненных на спиральных полосках с применением в качестве инициатора сократительной активности гистамина было показано, что фоновое значение амплитуды сократительной реакции при обработке ткани норадреналином в услобиях преинкубации препаратов имида-эолом был о равным (30,5±1,8) .10*"%. Амплитуда ответа при дополнительной обработке препаратов гтрогтранололом составила (38,8±2,4)'10-%. В этих опытах различия явились достоверными (Р<0,02; п=б).

На основании последней группы экспериментальных фактов можно полагать, что стимулирующее фосфодиэстеразу действие имицазола (в диапазоне примененных концентраций) явилось недостаточным для абсолютной инактивации цАМФ. При этом сохраняется способность цА® даже в небольшой концентрации (в условиях: обработки мышцы имидазолом)- угнетать гистаминовую реакцию. ' '

' г) Влияние теофиллина на активирующие эффекты ацетилхо-лина и гистамина.

С целью выявления особенностей влияния биологически активных веществ в условиях подавления активности внутриклеточной фосфодиэстеразы проведено две серии экспериментов на спиральных полосках. Опыты показали, что если начальная концентрация теофиллина (2*10-^моль/л) оказалась неэффективной по отношению к ацетилхолиновому и гистаминовому воздействи-

ям, то последующие концентрации этого вещества (4»10~^-1.10~^моль/л) оказали угнетающее влияние на сократительную

деятельность гладкой мышцы, вызванную биологически активными веществами.

Применение ацетилхолина в нормальном растворе Кребса приводило к развитию сократительного процесса с амплитудой

о

(25,0±5,1)«10 Н (п=9). Правда, следует отметть, что в условиях обработки ткани теофиллинои величина ацетилхолинового сокращения значительно колебалась. Вследствие такой неоднозначности влияний не удалось получить достоверных различий между фоновым и тестирующим вариантами ответов (р>С,05).

В опытах с гиетачином теофиллиновая обработка сосудистых полосок приводила к отчетливому угнетению сократительных эффектов. Если фоновое значение амплитуды гистаминового со- ■ крещения составляло (28,912,2)»10~%, то тестирующая величина равнялась (II,1+3,98)»10~3П (р<0,001; п=П).

0с£б£нно£тн влияния но£адреналина н&_ацетилх£Линов£е_и £иста^ганов£е_с£К£а^ения £ зависимости £т_к£н£ент£адии вне-клеточних ионо£ натрия_и_калы^1я^ По данному разделу осуществлено четыре серии экспериментов. Целью этого этапа работы также явилось изучение роли аденилатциклазной системы в' активации■расслабления гладкой мышцы коронарных артерий, но в условиях варьирование концентраций внеклеточных ионов натрия и кальция.

Напомним, что в стандартной среде Кребса норяцреналин частично подавлял ацетилхолиновые сокращения. В экспериментах на спиральных полосках было установлено, что ацетилхолин' в условиях предварительной обработки ткани норадреналином вызывал ответную сократительную реакцияю с амплитудой

(п=6). Последующее удаление из перфузата

ионов натрия не изменяло действия норадреналина на ацетилхо-линовые сокращения. В этих условиях значение амплитуп.н сокращений на ацетилхолин соответствовало (14,8+5,0)-10"% (р>0,05). Аналоги«™е результаты получены в экспериментах с применением бескзльциевого раствора. В данной серии опытов также не найдено достоверных различий меяду реакцчлт/и на ацетилхолин сосудистой ткани, обработанной корадрёноггсном, п нормальном перфузате и реакциями препаратов, также обработанных натехоламином, но в бескалытревом раствора. В этих

опытах фоновое значение амплитуды сократительного ответа на

о

ацетилхолин составило (19,0±6,2)*10 г1. В бескальциевом растворе величина реакции равна (14,4+4,3)'10"% (р>0,05; п=6)»

В следующей серии опытов было показано, что расслабляющее влияние норадреналина на сосудистые полоски при их активации гистамином явилось более отчетливым, чем в эксперимен- • тах с ацетилхолином. Правда, удаление из раствора иоков натрия, как и в случае применения холияергического медиатора, не оказывало сколько-нибудь значимого влияния на ингкбирую-щий эффект норадреналина в отношении гистаминовой контрактуры. Так, в стандартной среде Кребса величина сокращения полосок в ответ на гистаминовое воздействие в присутствии норадреналина достигала (П,5+2,0)-10_%, а в безнатриезой среде значение реакции равнялось (10,5+2,6)«10"% (р>0,05). В бескальциевом растворе гисгаминовые ответы на фоне норадре-налиновой обработки препаратов были почти полностью подавлены - (0,4+0,28)'10_%. Амплитуда ответной реакции была уменьшена на 95,5% (п=6).

Опыты данного раздела работы предоставляет возможность полагать, что цАМ$-зависи;.5Ый механизм регуляции-тонуса, про-являяцийся в ингибируяцем действии норадреналина не "ф>эктн

ацетилхолина и гистамина, находится в значительной зависимости от концентрации ионов кальция во внеклеточной среде.

ВОЗМОЖНЫЕ КЛЕТОЧНЫЕ МЕХАНИЗМЫ, ЛЕЖАЩИЕ В ОСНОВЕ ' ФОРМИРОВАНИЯ КОРОНАРОСПАЗМД

Елияние изменений. внеклеточное ионного состава на_сок-£атительную активность_коронарных артедий.

а) Опыты с применением безнатриевого раствора.

Воздействие ионов натрия на уровень тонического напря-' жения рассматривалось в серии экспериментов, на спиральных 'полосках лрвой и правой коронарных артерий, В результате 'смены порфузата (нормальный раствор Кребса заменялся раствором, из которого были удалены ионы натрия) наблюдался переходный процесс, характеризуемый тем, что в начальный период ' ■ 1

регистрировалось значительное увеличение сосудистого тонуса. Затем величина тонического напряжения уменьшалась, однако ее значение в итоге всегда оказывалось выше фонового. В прове-

I ■

денных опытах увеличение сосудистого тонуса по сравнению с исходным уровнем составило (2,2±0,1).10-% (а=»29), ' б) Опыты с применением бескальциевого раствора.

Проведены две серии экспериментов на спиральных' полосках и сегментах. В обоих случаях при перфузии раствором, лишенным ионов кальция, не наблюдалось четкого эффекта, как это имело место при выяснении влияния на сосудистые объекты

. 'о

ионов натрия. Так, на спиральных полосках в 69% случаев отмечено уменьшение тонического напряжения препаратов (при п-2б), в 19% опытов тонус артериальной мышцы увеличивался, в 12% - изменений величины тонуса не отмочено. Видно, что превалирующий эффект удаления из перфузата кальция выразился в некотором снижении тонического напряжения. Значение этого

снижения составило (1,3+0,19) •10""%. Опыты, проведенные? на сегментах, позволили получить аналогичные результаты (п=19).

На основании вышеизложенных данных можно сделать вывод, что одним ко механизмов спастической роаотртп гллдких мшц артерий середа явллотся нарушение соотпоягеття гнг^л^точнпх концентрация , позволяющее уголтг'иг'зть содорготте

кальция в цитоплазмати^оской среде.

Влпшид на_с£Е£а£И£ельну2 £ОВ?л£стк£Г£ при;,1£н£11ия_а£е£илхаги?та £

а) Изменения тснуса гладких итец при сорместиом применении ацетилхоляна и гистамкна.

Опыта проведены на артериалыягс сонантах. При воздействии на препараты ацетялхолина набатч&яось формирование ответной реакция, характеризующейся утуятетт* и укорочения, как это имело место и в ряде рэнее прояедеин?гс экспериментов. Величина фззы удлинения при развитии ацетюЬсолино-вой рез.кгрм равнялась (3,4+0,

3 результате обработки ткани гиствмином эффект при формирован:™ фазы удлинения развивался более медленно, часто носил затяхиой характер. Величина удлинения препаратов равнялась (2,3+0,8)-Ю~% (п=12).

При совместном применении ацетилхоляна и гистамина отмечен феномен потенциации, заключающийся в том, что фаза начального удлинения сегментов значительно увеличивалась по амплитуде - (6,1±1,2)-10~% (а=12). Кроме того, по кинетическим характеристикам процесс удлинения как бы слагался из начальной части, свойственной ацетйлхолииевог.у ответу (быстрое развитие реакции), и из последующей, свойственней для ■гистаминоэого ответа (длительное поддержание процесса).

б) Влияние норадреналина на совместное действие ацетил-

холина и гистамина. В условиях предварительной обработки препаратов норад-реналином (3*10~^моль/л) наблюдалось существенное подавление сократительной реакции гладкой мышцы в ответ на совместное • применение ацетилхолина и гистамина. Величина удлинения сегментов на действие ацетилхолина с гистаыином в контроле, то

* о

есть до обработки норацренанином составила (7,0+1,6)»10 Л. При использовании катехоламина значение степени удлинения препаратов уменьшалось до (2,7+0,7).Ю~%1 (р<0,05). Влияние норэдреиалина на последующую фазу укорочения сегментов оказалось слабознраженным и не подкреплялось достоверными статистическими данными.

в) Влияние на сократительную деятельность гладких мьщц ацетилхолина и гистамина при их многократном последовательном применении. В этой серии экспериментов (п=6),-проведенной на сегментах,'изучены эффекты биологически активных веществ в зависимости от вариантов последовательности их действия на сосудистую стенку. Определено, что после двух- трехкратной обг работки гладкой мышцы ацетилхолином (5,5«10""^моль/л) с 20-минутными интервалами фаза удлинения препаратов полностью исчезала,.Несмотря на это, препараты сохраняли чувствительность к гистамину (7.10~\лпь/л), который инициировал в данных условиях полноценный сократительный ответ.

Аналогичные результаты были получены и в опытах с двух-трехкратными повторными применениям!! гистамина при последующем воздействии на сосудистую ткань ацетилхолина, В этих экспериментах на фоне гистаминовой тахифилаксии хслинергичес-кий медиатор вызывал развитие обычной двухфазной реакции. Полученный материал свидетельствует о гетерохроннссти

сосудистых: реакций, возникающих-при действии'биологически активных веществ - возможных инициаторов коронароопчзмя.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Выявленные в настоящей работе различия сократительной деятельности циркулярно расположенных по отношению к продольной оси сосуда мышечных элементов (с ггревал:фугп;ей фазной сократительной системой) и спирально ориентировапнэт клеток (с-преобладающими тоническими характеристиками) по нашему мнению определяют особенности функций коронарных сосудов и механизмов кровоснабжения сердца. Это положение подчеркивает необходимость дальнейшего фармакологического и биохимического анализа закономерностей оргашгьгс вазомоторных реакций, развитие которых следует объяснять с позиций взаимодействия различно ориентированных и функционально неоднородных слоев гладких мышц. Можно полагать, что деятельность циркулярно ориентированных гладкомъчиечных клеток способна приводить к выраженному (за счет быстрых по скорости реакций и соответствующей ориентации) изменен:™ сосудистого сопротивления. В отлитие от них, спирально и, возможно, продольно ориентированные элементы могут обеспечивать поддержание механической жесткости сосудистой стенки и частично влиять на Ееличину сопротивления кровотоку. Эта функция спиральных 'слоев, по нашему мнению, имеет большое значение для поддержания кровоснабжения сердечной мышцы, которая при своей деятельности способна подвергать значительным механическим нагрузкам сосуды сердца.'

Рассмотренные в работе механизмы активах;-.::: гладкой гды коронарных артерий при воздействии на сосудистую ткань ацзтилхолича и норздрелалина позволил расширить представле-

ния о клеточных механизмах вегетативной регуляции коронарного кровотока. К известным ранее данным о закономерностях влияния нейромеди'¡торов на процессы электрогенеза в гладко-, мышечных клетках и их связывания со специфическими циторе-

цепторьми ь работе представлен материал о роли цГМ2- и цАМЗ-зависншлх механизмов регуляции. Он позволяет высказать положение о неоднозначной функциональной роли различные фракций худоадагщклазн. Актиыюсоч. мембранносвязанно" фракции связывается с инициированием сократительного процесса, а активность растворимой фракции приводит к рассл&блешгз артериальной юывяда. 3 работе показано важное значение еденил&Фцакпаз-ной системы ь ^о^лкррвании стойких сократктельшгс реакций гладких шаяд, всдувр« к разлитию спазма. Ш полагаем, что в _ осмосе короякрсспазыа можат лежать иамонелнал ршздея клеток гладких ышц иь нейромеднаторные воздействия. Одним из конечных ее шгемоотош может быть нарушение функциональной активности 4A!,!5-oaDÄcmioro механизма расслабленна. Недостаточность функции ьдешотг-.тцяютг.зиоВ системы в ртом случае может усугублять затруднения в развитии иазодилатмрш при возник-, новении дисбаланса между потреблением кислорода и ого дос- , тавкой.

Проведенное исследование создаст теоретические пподпо-■ * i силки для перспективные исследований в разделах физиологии,

патофизиологии и фармакологии коронарного кровообращения. So-nepatcr, на основе предложенного методического комплекса ■ становится возможным исследоваше механизмов функциональней гетерогенности артерий на различных: участках системы кровоснабжения сердца с последующим подбором наиболее эффективных фармакологических средств для целенаправленной коррекции нарушений коронарного кровотока. Во-вторых, полученный матери-

ал о роли циклических нуклеотидов в реализации нейромадиатор-ных воздействий может служить основой для проведения биохимических исследований, уточняющих специфику цАЬЭ- и цГЩ-зависи-мых процессов в сосудистых миоцитах.

ВЫВОДЫ

1.В стенке коронарных артерий имеются циркулярно и спирально ориентированные мышечные волокна, клетки которых отличаются,.' по функциональным свойствам: а) клетки циркулярного -мышечного слоя обладают более выраженной скоростью развития напряжения по сравнению со спирально ориентированными мышечными структурами; б.) клетки циркулярного слоя проявляют более высокую чувствительность к блокаторам фазной активности, способны к развитию ритмической сократительной деятельности, их функция значительно зависит- от концентрации внеклеточных ионов каль-. ция; в) клетки циркулярной мышцы обладают низкой чувствительностью по сравнении с клетками спиральных слоев к действию ионов калия и ацетилхолина; г) для клеток циркулярной мышцы свойственен более выраженный процесс десенситизации при действии активаторов; д) активность циркулярно расположенных клеток более эффективно подавляется при стимуляции аденилат-циклазной системы и более значительно увеличивается при ее ингибировании по сравнению с клетками спиральных слоев; обличительные параметры клеток циркулярной мышцы нивелируются в результате повторных воздействий на сосуды гиперкалиевым рас-тзором, а также в процессе посмертны:: изменений сосудов. ,2.Спирально расположенные мышечные клетки обладает большей чувствительностью к действию ацетилхолина, чем циркулярно ориентированные элементы. Сократительные ответы артериальной мнпцы . на действие ацетилхолина в значительной степени сохраняются при отсутствии в перфузате ионов кальция и натрия. Ке г-атра-

гиьая аденилатциклазнута систему, ацетилхслин вовлекаем в процесс гуачилатцвдлазный механизм активации клеток сосудистой . мышцы. При атом- стимуляция растворимой фракции гуанилатциклазы привода* к ускорению мышечной десенситизации без влияния на амплитуду сокращения э начальном периоде ответа.

3.Клеточный механизм действия норадреналина характеризуется рядом особенностей. Во-первых, он отличается преобладанием расслабляющего бета-оффекта над альфа-активирукхцим сократительный ¡троцесс, что в большей степени проявляется в ццриулярно расположенных мышечные волокнах. Данная особенность может быть свя-. ' эана с тем, что функция альфа-адренергического механизма пол-'ностьи подавляется в растворе, лишенного ионов кальция и натрия. Во-вторых, норацреналин, по сравнении с адреналином, в большей степени стимулирует бета-адренергический механизм й в меньшой степени - альфа-механизм.

4.В гладкой мышце коронарных артерий имеют место механизмы подав-

4

ления норадреналином гистаминопнх и яцетйлхолиновых сократительных реакций. Из них первый по степени выраженности преобладает ' над вторым. Эти различия связаны с неодинаковой ¡зависимостью сократительных эффектов гистамина и ацетилхолина от

концентрации внеклеточных конов кальция и натрия. Для сокраще-

1

ний, вызываемых,ацетилхолином, эта зависимость менео значительна, Гистаминокые воздействие ¡в большой степени связаны с вовлечением в процесс указанных внеклеточных катионов. Различия в механизмах действия ацетилу о.гана и гистамина подтверждав % 1

итея и тем, что ацетилхолин вызывает полноценную мышечную реакцию на фоне тахифилаксии к гистаиину, Гистамин, в слой очередь, также эффйктиБвл на фоне ацетилхолинокой тахифилаксии, Г).сЛ|)ектормый ыохашзм регуляции кровоснабжения миокарда характеризуется сопряженный функционированием крупны-* артерий и вен

сердца, гладкие мышцы которых .отличаются по реактивности на модиаторные воздействия. Так, ацетилхолин, активируя миоциты стенки коронарных артерий, вызывает расслабление мышечных элементов крупных вен сердца. При воздействии но'радренапина на гладкомышечную ткань артерий и вен развиваются эффекты сокращения в венах и эффекты расслабления - в артериях.

6.Коронароспазм может формироваться в результате ослабле'тин функции релаксационных систем с клетке (например, при подавлении активности аденилатциклазной скстоыы), а также в результате усиления активности сократительных механизмов (при одновременной, взаимопотенциярующей активации систем электромеханического и фармакомеханического сопряжения). Содействующим моменте;.!

в формировании спастической реакции является нарушение соотношения внеклеточных концентраций,ионоп кальция и натрия, позволяющее увеличивать содержание кальция в миоплазме.

7. Эффект оршде механизмы регуляции тонуса коронарных артерий формируются путем взаимодействия разнородных по функциональным свойствам и архитектонике гладкемыпечных слоев артериальной стенки, в каждом из которых срабатывает специфический комплекс процессов активации сокращения и расслабления под слиятием биологически активные веществ. И^ркулярно расположенные мышечные

. элементы при своем сокращении вызывает вазоконстрикторные эффекты. Исследованные в работе функциональные параметры спирально ориентированные волокон указывают на их участие в изменении жесткости сосудистой стенки, а также - в регуляии сосудистого сопротивления.

сгксок работ, спувшисвйшс гю таз дассягащя

Т.Васильев Л.Г. К механизмамсистемного уровня вегетативной регуляции коронарного кровообращения // Регуляцкл гегета-

тивных и соматических функций в организме человека и животных: Тез. конф. - Уфа,1977. - 4.1. - С.82-83.

2.Плеханов И.П., Азин А.Л., Васильев А.Г., Корохов В.П., Молчанов С,В. К механизмам адренергической регуляции сократительной деятельности гладких мышц сосудов // Регуляция вегетативных и соматических функций в-организме человека и животных: Тез. конф. - Уфа,1977. - 4.1. - С.106-106.

3.Васильев А.Г. О фазных и тонических клетках мышечной ткани коронарных сосудов половозрелых животных // Актуальные вопросы морфогенеза и регенерации сосудистой системы и некоторых внутренних органов: Сб.науч.тр. - Свердловск, 1977. С.12-14. Деп. в ВИНИТИ, 1977,ВД-1650.

4.Васильев А.Г., Шатохина Т.А., Плеханов И.П. Дифференциация регуляторных механизмов в фазных и тонических структурах гладких мышц коронарных сосудов на ранних этапах танатоге-неза // Актуальные вопросы морфогенеза и регенерации сосудистой системы и некоторых внутренних органов: Сб.науч.тр. - Свердловск,1977. - С.15-17, Деп. в ЫПЫТЛ,1977,^-1650.

^.Вишневский Г.А., Азин А.Л., Васильев А.Г., Зорин В.М., | Плеханов И.П. Применение злектрофизиологического метода | регистрации сократительной активности мышечной ткани для < изучения посмертного состояния мышечного слоя сосудистой стенки Ц Актуальные вопросы морфогенеза и регенерации сосудистой системы и некоторых внутренних органов: Сб.науч. тр. - Свердловск,1977. - С.22-24. Деп. в ВИНИТИ,1977, ВД-1650.

6.Васильев А.Г., Плеханов И.П., Шатохина Т.А. К спазмогещгьп механизмам в сократительной деятельности коронарных артерий // Острая ишемия органов и ранние постишемические рас стройства: Тез,докл.II Всесоюз. симпозиума. •■ Москва,1978

- С.66.

7.Коро'хов В„П., Плеханов И.П., Азии A.JI., Васильев А.Г., Молчанов C.B., Шатохина Т.А. Мембранный механизм регуляции сокращения в гладкомышечньтх клетках сосудов '// III Всссо-юз.конф. по биохимии мышц: Тез.докл. - JI. .-Наука, 1978. -

С.90-91.

8.Васильев А.Г. К оценке объекта трансплантации при создании аортокоронарного анастомоза // Актуальные вопросы пересадки органов и тканей: Сб.науч.тр. 2-го Московского мед. ин-та. - Москва,1978. - Т.113,вып,23. '- С.35-36.

9.Васильев А.Г. О роли норадреналина в адаптационных реакциях гладкой мышцы коронарных артерий // Механизмы' повреждения и адаптации функциональных систем организма:' Сб.няуч,

. тр. - Свердловск,1978. - С.65-68. '

[О.Васильев А.Г., Горбунов Н.П.' Влияниетуммы алкалоидов ды--мянки аптечной на сократительную способность гладкой мускулатуры коронарных артерий // Изыскание фармакологических и химиотерапевтических средств из продуктов синтеза и природных веществ: Сб.науч.тр. - Пермь,1980. - Вып.14. -С.45-47. .

[I.Васильев А.Г. Механизмы активации гладкой мышцы коронарных артерий в реализации нейромедиаторнък эффектов // Кровообращение. - 1982. - Т.15,'М. - С.43-45.

[2.Васильев А.Г. Факторы формирования коронароспастической . реакции // Патофизиология экстремальных состояний: Тез. докл. XI конф. патофизиологов. - Уфа,1982. - С.23-25.

[З.Васильев А.Г. Бета-адренергический механизм релаксации мышцы коронарных артерий // Кардиология. - 1982. - T.XXII, №10. - C.II8-II9.

14.Васильев А.Г., Молчанов C.B., Шатохина Т.А. «Зункцисналькыа

различия ¡гладяомышечного аппарата артерий и вен // Акту-ольиие .ijQqpQw.физиологии системы' кровообращения: Сб.науч. тр. - JïeHtiHrpftr,-Qpr;Hfiypr,;I982. -.C.J6-I9.

15.Васильев А.Г. .Способ ¡р^гясирации .совратительной деятельности отдельных .слоев артериальной гладкой мышцы // Внедрение результатов научна .исследований в практику здравоохранения, в научен? -.исследования и в некоторые отрасли промышленности: -¡Еез^дрял. - Свердловск,1983. - С,.230-231,

16.Васильев А.Г. Функциональные характеристики гладкой мынщы коронарных сосудов // Х1У Съезд Всесоюзного физиологического общества им.И.П.Павлова: Тез.дохл. - Баку; Л. :Науха,

. 1983. - Т.2. - C.I54.

17.Васильев А,Г.'Возможная роль циклических дуотеотидов в мэ ханизмах действия нейромвдиаторов на процессы сокращения расслабления гладкой мышцы коронарных артерий // Централь

ная регуляция кровообращения: Тез»докл, У Всееопэн, симпс *

зиума. - Ростов-на-Дону,1984, - С,28.

18.Васильев А.Г. Роль циклических нуклеотидов в процессе релаксации гладкой мышцы коронарных артерий // Механизмы аварийного регулирования и адаптации при действии на оргг низм экстремальных факторов: Сб.науч.тр. - Свердловск,

1984. - С.103-108. |

!

19.Молчанов C.B., Шатохина Т.А,J Васильев А.Г. Действие не-

I ' • -

достатка кислорода на сократительную, активность сосудист!

мышцы // Механизмы физиологических функций: Тоз.докл. X

съезда физиологов Уральского^региона, - Уфа,I98ê. -

.;, С,40-42.

20.Васильев А.Г,, Шатохина Т.А,, Азин А.Л., Сарапульцев П,А Саралульцева Я.А,, Соляноеа Л,А, Участие внутриклеточных .регулирующее механизмов сосудистой стенки в формировании

коронарослазма // Физиология .и патофизиология сердца ii'коронарного кровообращения: Тез. II Всееовд.симпозиума;- lüiöB,

1987.- С. 30-31.

!.Азин А.Л., Васильев А.Г., Климин З.Г., Корохов В.П.-,* ifirib-ков А.Д., Харитонова М.П., ДОипулин Е.А. Вопрос!' овех-'фн гф-фекторкъгс механизмов стенки кровеносны; сосудов позвоночных // ХУ съезд Всесоюзного'физиологического общества им.И.П.Павлова: Тез.докл.- Кишинев; Л.:Наука,1987.- Т.2.-С. 520-521.

(.Азии А. Л., Васильев А, Г., Жат о хина Т. А. Парадоксальный феномен повышения тонуса гладких мышц артерий сердца при комбинированном действии вазоконстрикторов // Физиол.ж.СССР,-

1988.- 32,- С. 187-192^

Подписано-« ни.- ЪО Н19Я9? _

НС зО И9_ОЙЬИТйр./ОО 3»к. Jft 9СО

Свердловск, К^83, пр. Левина, 5t.' Тилолаборатория УрГУ.