Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.02) на тему:Синтез, свойства и биологическая активность 1-аминоалкил- и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-ионов

ДИССЕРТАЦИЯ
Синтез, свойства и биологическая активность 1-аминоалкил- и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-ионов - диссертация, тема по фармакологии
АВТОРЕФЕРАТ
Синтез, свойства и биологическая активность 1-аминоалкил- и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-ионов - тема автореферата по фармакологии
Семиколенных, Марина Александровна 0 г.
Ученая степень
кандидата фармацевтических наук
ВАК РФ
15.00.02
 
 

Автореферат диссертации по фармакологии на тему Синтез, свойства и биологическая активность 1-аминоалкил- и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-ионов

На правах рукописи

Семиколенных Марина Александровна ""^иьзэзг

Синтез, свойства и биологическая активность 1-аминоалкил- и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-

2-онов

15.00.02 - Фармацевтическая химия, фармакогнозия

Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

Пермь 2007

003053932

Работа выполнена на кафедре физической и коллоидной химии государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Пермской государственной фармацевтической академии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Научный руководитель - доктор химических наук, профессор Гейн В. Л.

Официальные оппоненты: доктор фармацевтических наук,

профессор Панцуркин В.И.

доктор химических наук, профессор Масливец А.Н.

Ведущая организация - ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».

Защита состоится а_27» гХСОу/С- 2007 г. в 11 часов на заседании диссертационного совета Д 208.068.01 при Пермской государственной фармацевтической академии ГСП 277 по адресу: 614990, г. Пермь, ул. Ленина, 48; телефакс: 212-94-76.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Пермской государственной фармацевтической академии.

Автореферат разослан « /а qM(y1(2-l-C-2007r.

Ученый секретарь диссертационного совета

кандидат фармацевтических

наук, доцент /У- Метелёва Е.В.

Общая характеристика работы

Актуальность проблемы. В ряду проблем, стоящих перед современной фармацевтической химией, одной из наиболее важных является поиск соединений, обладающих высокой биологической активностью и малой токсичностью. Одним из перспективных классов химических соединений для синтеза биологически активных веществ являются замещенные З-гидрокси-З-пирролин-2-оны, их производные и полученные на их основе конденсированные системы гетероциклов. Среди соединений этого класса обнаружены вещества с противомикробной, противовоспалительной, анальгетической, противовирусной, ноотропной и антиагрегантной активностью. Установлено,что на химические свойства и биологическую активность соединений оказывает влияние природа заместителя в положении 1 гетероцикла. С целью поиска биологически активных соединений среди 1-замещенных З-гидрокси-З-пирролин-2-онов представляло интерес ввести в положение 1 гетероцикла диалкиламиноалкильный и аминоалкильный остаток и оценить, каким образом подобные структурные изменения оказывают влияние на химические свойства и биологическую активность 1-аминоалкил- и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов.

Цель работы. Целью данного исследования является разработка метода синтеза новых соединений ряда 1-аминоалкил- и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов,изучение их химических свойств, определение биологической активности и выявление взаимосвязи строения полученных веществ с их биологической активностью.

Задачи исследования. Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:

1) Разработать простые препаративные методы синтеза 1-аминоалкил-и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов.

2) Получить водорастворимые гидрохлориды 1-аминоалкил-4-ацил-5-арил-З-гидрокси-З-пирролин-2-онов.

3) Изучить взаимодействие синтезированных 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов с моно и бинуклеофильными реагентами.

4) Выявить наиболее перспективные соединения для углубленного изучения среди 1-аминоалкил- и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-З-пирролин-2-онов и их производных.

Научная новизна. Разработаны методы синтеза 1-замещенных 3-гидрокси-З-пирролин-2-онов.

Установлено, что структура продукта реакции метиловых эфиров ацилпировиноградных кислот со смесью ароматического альдегида и 1,3-диаминопропана зависит от соотношения количеств исходных реагентов. Впервые получены 1,3-ди(4-ацил-5-арил-3-гидрокси-2-оксо-3-пирролин-1 -ил)пропаны.

Обнаружено,что при взаимодействии метиловых эфиров ацилпировиноградных кислот со смесью ароматического альдегида и диэтилентриамина в молярном соотношении 2:1:1 образуются 1-(5-арил-4-ацил-3-гидрокси-2-оксо-3-пирролин-1-ил)-2-(3-ароилметилен-2-оксопиперазин-1-ил) этапы.

Реакцией метиловых эфиров ацилпировиноградных кислот с транс-1,2-диаминоциклогексаном синтезированы 3-ароилметилен-1 Н,4Н-гексагидро-2-хиноксалоны.

Получено 125 новых соединений. На основании ИК, ЯМР 'Н и масс-спектров установлена их структура. Фармакологическому скринингу подвергнуто 41 соединение. Среди них обнаружены вещества с антимикробной, противовоспалительной, миорелаксиругощей,

гемостатической и диуретической активностью. Выявлены некоторые закономерности между строением и биологической активностью синтезированных соединений.

Практическая ценность. Разработаны препаративные методы синтеза 1 -(3-аминопропил)-, 1 -(3-диметиламинопропил)-, 1 -(Ы-ацетиламиноэтил)-, 1 -(2-диизопропиламиноэтил)-, 1-(3-дибутиламинопропил)-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-З-пирролин-2-онов, и 1,3-ди(4-ацетил-5-фенил-3-гидрокси-2-оксо-З-пирролин-1 -ил)пропанов, 1 -(5-арил-4-ацил-3-гидрокси-2-оксо-3-пирролин-

1-ил)-2-(3-арошшетилен-2-оксопиперазин-1-ил)этанов, 3-ароилметилен-1Н,4Н-гексагидрохиноксалонов, гидрохлоридов 1-(3-аминопропил)-4-ацил-5-арил-3-шдрокси-3-пирролин-2-онов, 1-(3-дибутиламинопропил)-4-(4-метоксибензоил)-3-(4-метоксифениламино)-5(3-гидроксифенил)-3-пирролин-

2-она, 5-(1-дибутиламинопропил)пирролло[3,4-с]пиразола. Среди полученных соединений обнаружены вещества, обладающие гемостатической, антимикробной, диуретической и противовоспалительной активностью. Выявлены ряды соединений, перспективные с точки зрения дальнейшего поиска биологически активных веществ.

Наиболее активным является соединение: 3-(4-нитробензоилметилен)-1 Н,4Н-гексагидро-2-хиноксалон, оказывающее противовоспалительное действие, на основании чего был получен патент.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы обсуждались на 68-й итоговой научной сессии КГМУ и отделения медико-биологических наук Центрально-Черноземного центра РАМН (Курск,2002), на 68-й Республиканской итоговой научно-практической конференции студентов и молодых ученых Республики Башкортостан с международным участием «Вопросы теоретической и практической медицины, посвященной Году Спорта и Здорового Образа Жизни» (Уфа,2003), на 68-й межвузовской научной конференции студентов и молодых ученых (Курск,2003), на межвузовской научно-практической конференции профессорско-преподавательского состава «Вузы и регион» (Пермь,2003), на X и XI национальных конгрессах «Человек и лекарство» (Москва,2003,2004 гг.), на российской научно-практической конференции «Рациональное использование лекарств» (Пермь,2004).

Публикации. По материалам диссертации опубликована 1 статья в центральной печати, получен патент и 11 тезисов докладов на конференциях различного уровня.

Объем и структура диссертации. Содержание работы изложено на 142 страницах машинописного текста и состоит из введения, 4 глав, выводов, приложения, списка литературы, включающего 127 работ отечественных и зарубежных авторов. Диссертация содержит 30 таблиц.

На защиту выносятся:

1. Синтез 1-аминоалкил и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-З-пирролин-2-онов, 1,3-пирролинилпропанов, 3-ароилметилен-1Н,4Н-гексагидро-2-хиноксалонов, взаимодействие гидроксипирролинонов с нуклеофильными реагентами.

2. Установление структуры полученных соединений на основе спектральных исследований.

3. Результаты фармакологических испытаний синтезированных соединений на антимикробную, ноотропную, диуретическую, гемостатическую, противовоспалительную, двигательную, миорелаксирующую активность и острую токсичность, выявление связи между структурой и активностью.

Основное содержание работы 1. Синтез 1-аминоалкил- и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-ш1рролин-2-онов

Нами было установлено, что при взаимодействии метиловых эфиров ароилпировиноградных кислот со смесью ароматического альдегида и 1,3-диаминопропана в эквимолярных количествах в диоксане образуются 1-(3-аминопропил)-5-арил-4-ацил-3-гидрокси-3-пирролин-2-оны (1а-м).

О

О О

АА^0- + К

о

1а-м

Я1 = 4-СНзОС6Н4 (а,б,в,г,д,е,ж,з,и,к); 4-С1С6Н4 (л,м) Я2 = Н (а); 2-С1 (е); 3-ОСН3,4-ОН (б); К2С6Н4 = 2-тиенил (в); 2,4-(ОСН3)2 (г); 3- ОСН3 (ж); 4-Р (з,л); К2С6Н4 =2-пиридил (д), 4-tBi.it (и), ^СбНЦ =3-пиридил (к), 4- ОСН3 (м).

+ н2Ы

Согласно данным Ш, ЯМР 'Н , а также качественной реакции со спиртовым раствором хлорида железа (III) соединения Ia-м существуют в енольной форме.

Образование в данной реакции исключительно соединений I объясняется, по-видимому, протонированием аминогруппы 3-аминопропильного остатка за счет енольного гидроксила, что препятствует ее взаимодействию с электрофильными реагентами.

Так как 1,3-диаминопропан содержит две реакционноспособные аминогруппы, представляло интерес изучить возможность одновременного протекания реакции по двум центрам.

Проведенные исследования показали, что при взаимодействии метилового эфира ацилпировиноградной кислоты со смесью альдегида и 1,3-диаминопропана в молярном соотношении 2:2:1 образуются 1,3-ди(4-ацил-5-арил-3-гидрокси-2-оксо-3-пирролин-1-ил) пропаны (Па-б).

Па-б

R1 = СНз(а); С6Н5(б).

R2 = Н(а,б).

Структура соединений IIa-б установлена на основании данных ИК, ЯМР 'Н и масс-спектров. Существование соединений IIa-б в енольной форме подтверждается качественной реакцией с хлоридом железа (III).

С целью синтеза защищенных по аминогруппе 1-аминоалкил-4-ацил-5-арил-З-гидрокси-З-пирролин-2-онов нами были изучены реакции эфиров ацилпировиноградных кислот со смесью ароматического альдегида и ацилированного алкиламина. В качестве последнего использовался N-ацетилэтилендиамин.

Проведенные исследования показали, что при смешении эквимолярных количеств указанных реагентов в этаноле образуются 1-(2-ацетиламиноэтил)-4-ароил-5-арил-3 -гидрокси-3 -пирролин-2-оны (Ша-з).

О

О ОН

IIIa-з

R1 = Н (а,г,д,е), 4-С1 (б,в,ж,з);

R2 = 4-С1 (а,б), 3-N02(b), 2,4-(СН30)2(г,ж), 3,4-(СН30)2(д,з), 4-F(e)

Существование соединений Ша-з в енольной форме доказано на основании данных ИК, ЯМР !Н, а также качественной реакцией с хлоридом железа (III).

С целью дальнейшего синтеза 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-З-пирролин-2-онов нами были изучены реакции эфиров ацилпировиноградных кислот со смесью ароматического альдегида и замещенного алкиламина. В качестве последнего использовались 3-диметиламинопропиламин, 2-диизопропиламиноэтиламин,3-

дибутиламинопропиламин.

При взаимодействии эквимолярных количеств указанных реагентов в этаноле или диоксане получены 1-(3-диметиламинопропил)-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3 -пирролин-2-оны (IVa-з), 1 -(2-диизопропиламиноэтил)-4-ацил-5 -арил-З-гидрокси-З-пирролин-2-оны (Va-к), 1 -(3-дибутиламинопропил)-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-оны (Vla-x).

О

он

r'

"сн3 +

R'-

Н+ H,N'

N

I

ck

,сн,

IVa-з

4-СН3ОС6Н4(а-е),4-С1С6Н4(ж,з) Я2 = 4-С1 (а), 4-ОН (б), 4-(СНз)зС (в), 4-К(СН3)2 (г), 3-ОН(д), И2С6Н4=2-пиридил(е,з), 3-ОСНз ,4-0Н(ж),

Уа-к

Я1 = С6Н5 ( а,д,е,ж,з,и ); СН3 ( б,в,г,к )

Я2= 3-ОСН3, 4-0Н(а); 4-ОН (б); 112С6Н4=2-тиенил (в,з); 112С6Н4=3-пиридил (г); 3-ОС2Н5, 4-ОН (д); Н (е); 3,4-(ОСН3)2 (ж); 3-ОН (и); 4-ОСН3 (к).

VI а-х

К, = 4-СН3ОС6Н4 (а,б,в,к-х); 4-С1С6Н4 (г,д,е); С6Н5 (ж,з,и);

Я2= Н (а,г,ж); 4-ОСН3 (б,д,з); 4-Вг (в,е,и); 2-ОСН3 (к); 2-С1 (л); 3-¥ (м); 4-(СН3)2СН (н); 3,4-(ОСН3)2 (о); 3-ОСН3, 4-ОН (п); 3-ОС2Н5, 4-ОН (р,); 4-ОС2Н5 (с); 3-ОН (т);4-ОН (у); К2С6Н4=3-пиридил (ф); К2С6Н4=2-пиридил (х).

Данные ИК, ЯМР 'Н свидетельствуют о существовании соединений Л/а-з, Уа-к, VI а-х в енольной форме.

С целью изучения влияния структурных особенностей аминоалкильного остатка и количественного соотношения реагентов на результат данной реакции нами было изучено взаимодействие метилового эфира бензоилпировиноградной кислоты со смесью ароматического альдегида и диэтилентриамина в молярном соотношении 1:1:1 и 2:1:1.

Проведенные исследования показали, что при взаимодействии исходных реагентов в любом соотношении образуются 1-(5-арил-4-бензоил-3-гидрокси-2-оксо-З-пирролин-1 -ил)-2-(3-бензоилметилен-2-оксопиперазин-1 -ил) этаны VII а-к, и оптимальным является соотношение реагентов 2:1:1.

но

VII а-к

Я=Н(а); 4-ОН-З-ОСНз (б); 4-Р(в); 4-С1(г); 4-Ш,(д); 4-ОСН3(е); 3,4-(ОСНз)г(ж); 4-СН3(з); 4-СН(СН3)2(и); 4-С(СН3)3(к).

Структура соединений VII а-к установлена на основании данных ИК, ЯМР 'н и масс-спектров.

2. Синтез 3-аронлметилеи-1Н,4Н-гексагидро-2-хиноксалонов

Ранее было показано, что при взаимодействии метиловых эфиров ацилпировиноградных кислот с о-фенилендиамином образуются 3-ароилметилен-1,2,3,4-тетрагидро-2-хиноксалоны. В то же время в реакции тех же эфиров со смесыо ароматического альдегида и этилендиамина образуются замещенные 1 -(2-аминоэтил)-3-гидрокси-3-пирролин-2-оны.

Принимая во внимание литературные данные, представляло интерес изучить взаимодействие эфиров ацилпировиноградных кислот со смесью ароматического альдегида и (±) транс- 1,2-диаминоциклогексана. Проведенные исследования показали, что альдегид не участвует в данной реакции.Во всех случаях при проведении реакции в диоксане при нагревании

с хорошим выходом образуются 3-ароилметилен-1Н,4Н-гексагидро-2-хиноксалоны:

н +

го

1Ха-е

R=H (а), 4-С1 (б), 4-СНз (в), 4-ОСНэ (г), 4-N02 (д), 4-Вг (е).

Данные спектров свидетельствуют о том, что соединения (IX а-е), как и известные хиноксалоны существуют в форме с экзоэтиленовой двойной связью, что, по-видимому, объясняется стабилизацией последней за счет возникновения внутримолекулярных водородных связей.

Н

^ /О

З.Синтез гидрохлоридов 1 -аминоалкил-4-ацил-5-арил-3-Г11дрокси-3-пнрролин-2-онов

Так как не все замещенные 1-(3-аминопропил)-3-гидрокси-3-пирролин-2-оны удалось выделить в кристаллическом состоянии, а также с целью улучшения растворимости данных соединений в воде, они были переведены в гидрохлориды Ха-д. Проведенные исследования показали, что при упаривании на водяной бане раствора исходных гидроксипирролинонов в концентрированной хлороводородной кислоте с хорошими выходами образуются соответствующие гидрохлориды(Ха-д).

Ха-д

Я1 = 4-С1С6Н4 (а,г); С6Н5(б,в); 4-СН3С6Н4 (д) Я2 = Н (б,г,д); 4-СНзО (а,в);

В ИК спектрах полученных гидрохлоридов полоса поглощения протонированной первичной аминогруппы находится в области 3321-3528 см В спектрах ЯМР 'Н соединений Ха-д присутствует дополнительно к сигналам протонов соответствующих оснований два уширенных сигнала протонов аминогруппы при 8,11-8,33 м.д. Соединения Ха-д дают реакцию на хлорид-ион с раствором нитрата серебра.

4. Реакции 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-

пирролин-2-онов с нуклсофильными реагентами

В случае 1-(3-дибутиламинопропил)-5-(3-гидроксифенил)-4-(4-метоксибензоил)-3-гидрокси-3-пирролин-2-она (У1т) при кипячении с п-анизидином в уксусной кислоте был выделен 1-(3-дибутиламинопропил)-4-(4-метоксибензоил)-3-(4-метоксифениламино)-5-(3-гидроксифенил)-3-пирролин-2-он (Х1а).

В его ИК спектре присутствуют полосы поглощения, обусловленные валентными колебаниями лактамной карбонильной группы при 1695 см'1, кетонной карбонильной группы при 1596 см"1 и полоса поглощения вторичной аминогруппы при 3273 см"1. Данные ИК спектра свидетельствуют о существовании соединения Х1а в енаминной форме.

В ЯМР 'Н спектре соединения Х1а присутствуют сигналы протонов метиленовых групп аминопропильного остатка: два мультиплета протонов метиленовой группы в положении 2 при 1,64 м.д. (С^НдЫв) и 1,68 м.д. (С(2)НаНв); два мультиплета протонов метиленовой группы в положении 1 при 2,75 м.д. (С(1)НдНв) и 3,43 м.д. (CqjHaHb); сигналы остальных протонов метиленовых групп дибутиламинопропильного остатка в области 2,67м.д. и 0,84 м.д.; синглет протона в положении 5 гетероцикла при 5,20 м.д., два

дублета четырех ароматических протонов остатка и-анизидина при 6,78 и 7,21 м.д., сигналы ароматических протонов бензольного кольца в положении 5 гетероцикла при 7,19 (2Н, т, С(М>Н) и 7,46 м.д. (2Н, д, С(0>Н) и два дублета четырех ароматических протонов ияра-метоксифенилыюго остатка при 7,74 и 7,98 м.д., синглет протона вторичной аминогруппы при 9,20 м.д., а также сигнал 3-х протонов метоксигруппы при 3,76 м.д.

Структура соединения Х1а доказана также на отсутствия качественной реакции с хлоридом железа (III) на енольную гидроксильную группу.

При взаимодействии тетрагидропиррол-2,3-дионов с

бинуклеофильными реагентами образуются конденсированные системы гетероциклов, а именно пирроло[3,4-с]пиразолы, обладающие различными видами биологической активности.

Нами было изучено взаимодействие 1-(3-дибутиламинопропил)-4-(4-метоксибензоил)-5-(2-хлорфенил)-3-гидрокси-3-пирролин-2-она(У1л) с гидразингидратом. Проведенные исследования позволили установить, что при кипячении указанного исходного вещества с гидразингидратом в ледяной уксусной кислоте образуется замещенный 5-(1-дибутиламинопропил)пирролло[3,4-с]пиразол (ХНа).

В ИК спектре соединения ХПа наблюдаются полосы поглощения, обусловленные валентными колебаниями лактамной карбонильной группы при 1695 см"1, протонированной вторичной аминогруппы при 3125 см"1.

В ЯМР 'Н спектре соединения ХПа присутствуют сигналы протонов метиленовой группы аминопропильного остатка: два мультиплета протонов метиленовой группы в положении 2 при 1,64 м.д. (C(2)H/lHn) и 1,69 м.д. (С(2)НаНв); два мультиплета протонов метиленовой группы в положении 1 при 3,42 м.д. (С(пНаНв) и 3,68 м.д. (QijHaHb); сигналы остальных протонов метиленовых групп дибутиламинопропильного остатка в области 2,67 м.д. и 0,84-1,62 м.д.; синглет метанового протона в положении 4 гетероцикла при 5,99 м.д., группа линий ароматических протонов в области 6,76-7,52 м.д., сигнал протонированной аминогруппы при 7,90 м.д. и синглет протона вторичной аминогруппы в положении 1 при 13,65 м.д., а также сигнал протонов метильной метоксигруппы при 3,69 м.д.

Синтезированное соединение ХИа не дает вишневого окрашивания со спиртовым раствором хлорида железа (III), что, наряду с данными спектров, подтверждает указанную структуру.

ХПа

5.Биологическая активность синтезированных соединений

Представители большинства рядов полученных нами соединений были исследованы на наличие ноотропной, гемостатической, антимикробной, анальгетической, противовоспалительной, двигательной, ориентировочной, миорелаксирующей, антидепрессивной, мочегонной активности.

Исследование ноотропной, противовоспалительной, анальгетической активности, двигательной, ориентировочной, миорелаксирующей, антидепрессивной, мочегонной и острой токсичности проведено на кафедре фармакологии Пермской государственной фармацевтической академии под руководством профессора Юшкова В.В.

Испытания на антимикробную активность осуществлялись на кафедре микробиологии ПГФА доцентом Ворониной Э.В., зав. кафедрой доцент Одегова Т.Ф.

Гемостатическая активность изучалась на кафедре физиологии и патологии ПГФА под руководством профессора Сыропятова Б.Я.

Противомикробную активность определяли методом последовательных разведений в мясопептонном бульоне (МПБ) и изучали активность по отношению к золотистому стафилококку и кишечной палочке.

Рабочий раствор готовили разведением бактериальной культуры с концентрацией 5 млн. микробных тел в 1 мл, который в количестве 0,1 мл вносили в 2 мл МБП. Таким образом, бактериальная нагрузка на 1 мл жидкости составляла 250000 микробных тел.

Результаты опытов учитывали после 18-20 часов выдержки контрольных и опытных образцов в термостате при 36-37°С. Регистрировали наличие или отсутствие роста бактериальных культур за счет бактериостатического действия соединения. За действующую дозу принимали минимальную ингибируюгцую концентрацию соединения (МИК, мкг/мл), которая задерживает рост бактериальных культур.

Противомикробная активность была определена у 34 соединений. Исследования показали, что на величину антимикробной активности испытанных соединений влияет структура заместителя в положении 1 гетероцикла. Таким образом, с увеличением углеродной цепи аминоалкильного остатка антимикробная активность стабильно снижается.

Исходя из имеющихся данных не представляется возможным выявить четкую зависимость между антимикробной активностью и структурой заместителей в положении 4 и 5 гетероцикла. Однако следует отметить относительно высокую активность соединений УНж, VIIh, VIIk и У1з , содержащих в положении 4 гетероцикла 3,4-диметокси-, 4-изопропил-, 4-трет-бутил- и 4-метоксифенильный заместители.

Учитывая структурное сходство 1-аминоалкильных производных 3-гидрокси-З-пирролин-2-она с пирацетамом, проведено изучение выраженности антиамнестического действия у 2 веществ. Для оценки антиамнестического действия использовали метод психогенной амнезии, предложенный JI.B. Лоскутовой и Р.Ю. Ильюченком , на беспородных белых крысах массой 150-200 г.

Соединения вводили внутрибрюшинно в дозе 50 мг/кг в виде взвеси в 2%-ной крахмальной слизи. Препарат сравнения - ноотропил, 400 мг/кг внутрибрюшинно.

Повторное тестирование проводили через 24 часа. Регистрировали процент крыс, зашедших на второй день в темный отсек, и разницу во времени пребывания крыс в темном отсеке между первым и вторым днем опыта. Обработку результатов проводили по методу Р.Л. Фишера с вычислением критерия достоверности при р < 0,05.

Опыты показали, что соединение УНв не проявляет антиамнестического действия в дозе 50 мг/кг. Соединение У1е обладает слабым антиамнестическим эффектом . (см. табл. 1).

Таблица 1

Антиамнестическое действие соединений

№ соединения п 1-й день опыта 2-й день опыта

время в темном отсеке, сек % крыс, зашедших в темный отсек время в темном отсеке, сек % крыс, зашедших в темный отсек At, сек

У1е 10 157,7 100 48,0 33* 109,7+27,6*

УПв 10 152,0 100 172,0 100 20,0+2,1

Контроль 2% крахмальная слизь 10 149,7 100 150,2 100 1,5+4,5

Пирацетам 10 161,7 100 31,5 40* 130,2+10,4*

* - достоверно отличается от контроля при р < 0,05. Проведенные испытания позволяют сделать вывод о перспективности поиска новых соединений с ноотропной активностью среди 1-(5-арил-4-бензоил-3-гидрокси-2-оксо-3-пирролин-1-ил)-2-(3-бензоилметилен-2-оксопиперазин-1 -ил) этанов.

Противовоспалительная активность синтезированных соединений изучалась на белых крысах массой 180-220 г на модели воспалительного отека, вызванного субплантарным введением в заднюю лапу крысы 0,1 мл 1% водного раствора каррагенина. Величину воспалительной реакции оценивали онкометрически но изменению объема воспаленной конечности в % к исходному через 1, 3 и 5 часов после введения испытуемых веществ. Испытуемые соединения (в дозе 50 мг/кг) и препарат сравнения - ортофен (в дозе 10 мг/кг) вводили перорально в виде взвеси в 2%-ной крахмальной слизи. Контрольным животным вводили эквиобъемные количества крахмальной слизи.

Таблица 2

Противовоспалительная активность синтезированных соединений

№ соединения п Доза, мг/кг (перорально) % торможения воспаления

1 час 3 часа 5 часов

la 6 50 16,0+5,4 0 3,8+2,4

1в 6 50 16,0+6,0 7,0±2,0 8,0±3,0

1д 6 50 6,0±2,0 2,0+1,0 11,0±2,0

1ж 6 50 28,1+3,9** 30,8+1,9** 32,0+1,6**

1з 6 50 0 0 0

1и 6 50 52,6±0,4*** 30,7±6,1** 37,0+5,0**

1к 6 50 33,7±1,5** 24,3±7,1* 43,3±4,4**

V6 6 50 37,0+6,0* 44,0+6,8*** 49,0±7,8**

Vr 6 50 33,0±4,9* 30,0±5,4* 32,0±4,5***

VI6 6 50 13,3+8,4 0 5,5±2,1

VIk 6 50 21,0±7,3 23,3+3,5 30,0+16,0

VIt 6 50 39,0±15,0 36,0±13,0 44,0±11,0**

Vllr 6 50 26,0+4,5 26,0±4,5 16,0±1,0

УПд 6 50 26,0+4,4 26,0±4,4 18,0±5,7

IXr 6 50 38,0+11,9 47,0+1,3*** 44,0+4,1**

1Хд 6 50 24,2±10,0 26,4±5,5* 34,6±5,5**

Хв 6 50 25,2+3,3* 57,8+5,6*** 37,7±3,7**

ортофен 6 10 22,3±3,7 29,0±2,8 38,7+4,3

*** достоверно отличается от контроля при р< 0,001 ** достоверно отличается от контроля при р< 0,01 * достоверно отличается от контроля при р< 0,05 В результате проведенных исследований установлено, что соединения 1ж,1и,1к,Уб,Уг,1Хг,Хв обладают выраженной противовоспалительной активностью. Об этом свидетельствует торможение каррагенинового отека через 1,3 и 5 часов после моделирования воспалительной реакции. Соединение 1Хд проявило выраженный противовоспалительный эффект на 3 и 5 часе наблюдения.

На основании полученных данных можно сделать вывод о целесообразности дальнейшего поиска веществ с противовоспалительным действием среди 1-(2-диизопропиламиноэтил)- и 1-(3-аминопропил)-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов, а также 3-ароилметилен-1Н,4Н-гексагидро-2-хиноксалонов. Замечено, что наличие электронодонорных заместителей в и- и м- положении в арильном фрагменте в положении 5 гетероцикла способствует более сильному противовоспалительному действию.

Диуретическая активность изучалась на белых беспородных крысах обоего нола массой 220 - 280 г. Крысы в течение суток перед опытом лишались воды и пищи. Водную нагрузку осуществляли per os

непосредственно перед опытом из расчета 25 мл/кг. Сбор мочи производили через 5 и 24 часа после водной нагрузки. Исследуемые соединения вводили per os в дозе 50 мг/кг.

Проведенные исследования показали, что соединения 1и и 1к обладают мочегонным действием, о чем свидетельствует прирост мочи (табл.3). Наибольшую диуретическую активность проявило соединение 1и, так как оно увеличивало диурез во все сроки наблюдения. Следует отметить, что по диуретической активности это соединение превосходило препарат-эталон (гипотиазид). Что же касается соединения 1к, то оно также проявило мочегонное действие, но лишь на 5 часе опыта и по диуретической активности уступало как соединению 1и, так и препарату-эталону.

Исходя, из имеющихся данных не представляется возможным выявить четкую зависимость между диуретической активностью и структурой заместителей в положениии 4 и 5 гетероцикла. Однако следует отметить целесообразность дальнейшего поиска веществ, обладающих диуретическим действием среди 1 -(3-аминопропил)-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов.

Таблица 3

Влияние соединений 1и и 1к на диурез

Серии опытов Доза, мг/кг п Количество мочи, мл через Прирост количества мочи в % через

5 час 24 час

контроль опыт кошроль опыт 5 час 24 час

1и 50 6 2,3+0,25 4,87+ 0,08*", "2 3,1±0,38 6,37+0,44", **2 Ш,7***| **2 105,5**, * *2

1к 50 6 3,9+0,6', 4,23+0,6 69,7*, 36,4

Гипоти азид 50 6 5,13±0,3 1 8,87+0,56'", 7,1 ±0,3 5 10,7710,84", 72,9***, 51,7**i

** "-достоверно при р< 0,001 **-достоверно при р< 0,01 "•-достоверно при р< 0,05 1 -по сравнению с контролем 2-по сравнению с гипотиазидом

Исследование влияния соединений на свертывающую систему крови проводили на кафедре ПГФА in vitro с помощью коагулометра «Минилаб 701».

Для исследования использовали цитратнуго (3,8%) кровь (9:1) собаки. Влияние соединений на свертывание крови изучали в одинаковой концентрации 1 мг/мл. В качестве эталона сравнения антикоагулянтной активности использовали раствор гепарина в концентрации 1 ЕД/мл крови. Эталон сравнения гемостатической активности - этамзилат в концентрации 1 мг/мл.

Таблица 4

Влияние соединений на свертывающую систему крови_

Соединение Время свертывания, сек. % изменения свертываемости

контроль опыт

У1а 31,9±1,03 37,1±1,92 -16,3'

УПж 35,1±1,85 26,3±2,28 +25,1"

1X6 33,7±1,75 25,7±1,28 +23,7"

гепарин 29,9±0,48 36,6±1,82 -22,4*

этамзилат 28,9± 1,11 24,5±0,94 +15,2"

**-достоверно при р< 0,01 *-достоверно при р< 0,05

Как видно из таблицы 4, соединения УНж, 1хб проявляют гемостатическое действие, т.к. укорачивают время свертывания цитратной крови на 25,1% и 23,7%.

Для оценки двигательной активности была использована методика «открытое поле». Этот тест максимально физиологичен и позволяет одновременно регистрировать двигательную активность и ориентировочное исследовательское поведение.

Установка представляет собой площадку размером 60 х 60 см, рассеченную на 16 одинаковых квадратных полей. В центре каждого поля находится отверстие диаметром 3 см. Площадка вмонтирована в коробку и равномерно освещена сверху лампой. Исследуемые соединения вводили беспородным белым мышам обоего пола массой 16-22 г внутрибрюшинно в виде взвеси в 2% крахмальной слизи в дозе 50 мг/кг. Контрольным животным вводили эквиобъемные количества крахмальной слизи.

Тестирование начинали через 0.5 часа после введения испытуемых соединений. Мышей помещали в центре площадки. О наличии двигательной активности судили по количеству пересеченных полей, а об ориентировочной реакции - по количеству осмотренных животными отверстий в течение двух минут. Опыты проводили строго в дневное время (12-14 часов) при температуре 17-20°С.

Проведенные исследования показали, что 1-(2-

диизопропиламиноэтил)-4-бензоил-5-л1-метокси-п-гидрокифенил-3-гидрокси-З-пирролин-2-он оказывает психотормозящее действие, а 1-(3-

дибутиламинопропил)-4-метоксибензоил-5-(3-пиридил)-3-гидрокси-3-пирролин-2-он обладает психостимулирующим действием. Целесообразно их дальнейшее изучение как веществ, влияющих на ЦНС.

Миорелаксирутощее действие исследовали в опытах на белых мышах обоего пола массой 16-22 г на модели «вращающийся стержень» и по изменению рефлекса подтягивания на проволоке. Предварительно оценивалась способность мышей держаться на вращающемся стержне и подтягиваться на проволоке, мышей без этих способностей из опыта отбраковывали. Исследуемые вещества вводили внутрибрюшинно, в виде взвеси в 2% крахмальной слизи, в дозе 50 мг/кг. Контрольным животным вводили эквиобъемные количества крахмальной слизи.

Обнаружено, что соединение 1ж 1-(3-аминопропил)-4-(4-метоксибензоил)-5-(4-фторфенил)-3-гидрокси-3-пирролин-2-он обладает достоверным миорелаксирующим эффектом и нарушает у мышей координацию движений, а соединения 1и, 1к таким действием не обладают.

Влияние соединений на мышечную релаксацию и координацию движений

Таблица 5

Соел. п Исходный рефлекс, % ...... Кол-во мышей удерживающихся на стержне, % Количество мышей с сохранившимся рефлексом подтягивания на проволоке, % Количество мышей удерживающихся на стержне, % Количество мышей с сохранившимся рефлексом подтягивания на проволоке, % Количество мышей удерживающихся на стержне, % Количество мышей с сохранившимся рефлексом подтягивания на проволоке, %

0,5 часа 1 час 2 часа

1ж 6 100 0' 20' 40" 30' 60' 70*

[и 6 100 100 100 100 100 100 100

1к 6 100 100 100 100 100 100 100

Контр. 6 100 100 100 100 100 100 100

Определение острой токсичности синтезированных соединений показало, что они практически нетоксичны или малотоксичны по классификации Сидорова и мало опасны или умеренно опасны по классификации ГОСТ 12.01.007-76.

Выводы

1. Установлено, что при взаимодействии метиловых эфиров ацилпировиноградных кислот со смесью ароматического альдегида и 1,3-диаминопропана образуются 1 -(3-аминопропил)-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-оны.

2. Показано, что при использовании вдвое меньшего количества 1,3-диаминопропана образуются 1,3-ди(4-ацил-5-арил-3-гидрокси-2-оксо-3-пирролин-1-ил) пропаны.

3. Реакция эфиров ароилпировиноградных кислот со смесью ароматического альдегида и К'-ацетилэтилендиамина приводит к 1-(2-ацетиламиноэтил)-4-ароил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онам.

4. Установлено, что при взаимодействии метиловых эфиров со смесью ароматического альдегида и диалкиламиноалкиламина (2-диизопропиламиноэтиламина,3 -диметиламинопропиламина.З -дибутиламинопропиламина) в эквимолярном соотношении образуются соответствующие 1 -диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-оны.

5. Обнаружено, что при взаимодействии метилового эфира бензоилпировиноградной кислоты со смесью ароматического альдегида и диэтилентриамина в молярном соотношении 2:1:1 образуются 1-(5-арил-4-бензоил-3-гадрокси-2-оксо-3-пирролин-1-ил)-2-(3-бензоилметилен-2-оксопиперазин-1-ил) этаны.

6. Предложен способ синтеза 3-ароилметилен-1Н,4Н-гексагидро-2-хиноксалонов на основе реакции метиловых эфиров ацилпировиноградных кислот и (±) транс-1,2-диаминоциклогексана. Показано, что присутствие ароматического альдегида в реакционной смеси не влияет на протекание реакции.

7. Получены гидрохлориды 1-(3-аминопропил)-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-З-пирролин-2-онов, которые обладают значительно лучшей растворимостью в воде по сравнению с исходными основаниями.

8. Показано, что взаимодействие 1-(3-дибутиламинопропил)-5-(3-гидроксифенил)-4-(4-метоксибензоил)-3-гидрокси-3-пирролин-2-она при кипячении с п-анизидином в уксусной кислоте приводит к 1-(3-дибутиламинопропил)-4-(4-метоксибензоил)-3-(4-метоксифениламино)-5-(3-гидроксифенил)-3-пирролин-2-ону, а взаимодействие 1-(3-дибутиламинопропил)-4-(4-метоксибензоил)-5-(2-хлорфенил)-3-гидрокси-3-пирролин-2-она с гадразингидратом приводит к замещенному 5-(1-дибутиламинопропил)пирролло[3,4-с]пиразолу.

9. Изучена противомикробная, ноотропная, диуретическая, двигательная, миорелаксирующая, противовоспалительная активность более

40 соединений. Обнаружено наличие связи между структурой и биологической активностью исследованных соединений.

Основное содержание диссертации опубликовано в работах:

1. Касимова, H.H. Синтез и биологическая активность 1-(3-аминопропил)-5-арил-4-ацил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов / H.H. Касимова, Я.В. Балахнина, М.А. Панина, B.JI. Гейн, Э.В. Воронина, М.Ю. Васильева, В.В. Юшков // Сборник работ 68-й итог. науч. сессии КГМУ и отделения медико-биологических наук Центр.-Чернозем. центра РАМН. Часть II — Курск,2002. - С. 227.

2. Касимова, H.H. Синтез потенциально биологически активных замещенных 1 -(3-дибутиламинопропил)-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов / H.H. Касимова, М.А. Панина, B.JI. Гейн // Вопросы теоретической и практической медицины, посвященной Году Спорта и Здорового Образа Жизни. Материалы 68-й Республиканской итог, науч.-практ. конф. студентов и молодых ученых Республики Башкортостан с международным участием. — Уфа, 2003.-С.151.

3.Касимова, H.H. Синтез замещенных 1-(3-пирролин-1-ил)-2-(пиперазин-4-ил) этапов / H.H. Касимова, М.А. Панина, B.JI. Гейн // Мат 68-й межвуз. Науч. конф. студентов и мол. Ученых. Часть III - Курск,2003. - С. 38-39.

4. Гейн, B.JI. Синтез и противомикробная активность 1-(5-арил-4-бензоил-3 -гидрокси-2-оксо-З -пирролин-1 -ил)-2-(3 -бензоилметилен-2-оксопиперазин-1-ил)этанов / B.JI. Гейн, H.H. Касимова, М.А. Панина, Э.В. Воронина // Хим.-фарм. журнал - 2006. - № 8. - С. 5 - 6.

5. Панина, М.А. Синтез 1-(2-диизопропиламиноэтил)-5-арил-4-ацил-3-гидрокси-З-пирролин-2-онов / М.А. Панина, H.H. Касимова, B.JI. Гейн // Актуальные проблемы фармацевтической науки и образования: итоги и перспективы. Материалы межвуз. науч.-практ. конф. профессорско-преподавательского состава « Вузы и регион». - Пермь, 2003. - С. 59.

6. Касимова, H.H. Синтез 3-ароилметилен -1Н,4Н-гексагидрохиноксалонов с потенциальной биологической активностью / H.H. Касимова, М.А. Панина, B.JI. Гейн, В.В. Юшков // Молодежь и медицинская наука в XXI веке. Мат. VII-ой итоговой открытой науч.-практ. конф. мол. Ученых и студентов с международным участием. - Киров,2003. - С. 67 - 68.

7. Патент РФ №2271352. 3-(4-нитробензоилметилен)-1Н,4Н-гексагидро-2-хиноксалон, проявляющий противовоспалительную активность / Гейн B.JI., Юшков В.В., Панина М.А., Шуклина U.C., Губанова М.В.. -10.03.2006 .

8. Гейн, В.Л. Синтез и биологическая активность замещенных 1-аминоалкил и 1-диалкиламиноалкил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов / Н.С. Шуклина, М.Ю. Васильева, Э.В. Воронина, М.А. Панина // X Российский

национальный конгресс «Человек и лекарство»: [тез. докл.]. - Москва, 2003. -С. 596.

9. Гейн, В.Л. Биологическая активность соединений, полученных реакцией эфиров ацилпировиноградных кислот со смесью ароматического альдегида и замещенного этилендиамина / B.J1. Гейн, В.В. Юшков, H.H. Касимова, Н.С. Шуклина, A.A. Полякова, М.А. Панина, М.В. Губанова // XI Российский национальный конгресс «Человек и лекарство»: [тез. докл.]. -Москва, 2004. - С. 865.

10. Губанова, М.В. Биологическая активность 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов / М.В. Губанова, Н.С. Шуклина, В.В. Юшков, М.А. Панина, Н.Н, Касимова, B.JI. Гейн // Рациональное использование лекарств. Мат. Российской науч.-практ. конф. -Пермь, 2004.-С.31 -32.

11. Панина, М.А. 1-Аминоалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-оны, проявляющие диуретическую активность / М.А. Панина, H.H. Касимова, В.Л. Гейн, JI.B. Стрелкова, В.В. Юшков // Университетская наука: взгляд в будущее. Сборник труд, юбилейной науч. конф. КГМУ и сессии Центр.-Чернозем. Науч. центра РАМН, поев. 70-летию КГМУ. Том II. -Курск,2005. -С.258 -259.

12. Панина, М.А. Взаимодействие эфиров ацилпировиноградных кислот со смесью ароматического альдегида и дибутиламинопропиламина и биологическая активность полученных соединений / М.А. Панина, H.H. Касимова, М.В. Губанова, B.JI. Гейн, В.В. Юшков // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции. Сборник науч. трудов. - Пятигорск,2005. - С.402 - 404.

Лицензия ЛР № 020370

Подписано в печать 12.02.07. Формат 60X90/16. Набор компьютерный. Тираж 100 экз. Объём 1,0 уч.изд. п.л. Заказ № 200/2007.

Издательство

Пермского государственного технического университета 614600, г. Пермь, Комсомольский пр., 29, к.113 тел. (342)219-80-33

 
 

Оглавление диссертации Семиколенных, Марина Александровна :: 0 ::

Введение

Глава 1. Синтез, химические свойства и биологическая активность тетрагидропиррол-2,3-дионов (обзор литературы)

1.1. Методы синтеза тетрагидропиррол-2,3-дионов

1.1.1. Взаимодействие 2,4-диоксобутановых кислот и их эфиров с основаниями Шиффа

1.1.2. Взаимодействие оснований Шиффа с а-кетоглутаровой кислотой и диэтоксалилацетоном

1.1.3. Конденсация эфиров N-замещенных 3-аминопропановых кислот с диалкилоксалатами

1.1.4. Превращения 3-замещенных З-пирролин-2-онов

1.1.4.1. Гидролиз 3-ариламино-2,5-дигидропиррол-2-онов

1.1.4.2. Кислотный гидролиз кеталей тетрагидропиррол-2,3-дионов

1.1.4.3. Окисление тетрагидро-2-гидроксипиррол-2-онов

1.1.4.4. 1,3- и 1,5-Сигматропные перегруппировки 2,5-дигидро-З-алкоксипиррол-2-онов

1.1.5. Превращения 2,3-дигидро-2,3-пирролдионов

1.1.5.1. Восстановление 2,3-дигидро-2,3-пирролдионов

1.1.5.2. Присоединение мононуклеофилов к 2,3-Дигидро-2,3-пирролдионам

1.1.6. Другие методы

1.2. Химические свойства тетрагидропиррол-2,3-дионов

1.2.1. Реакции с мононуклеофилами

1.2.2. Реакции с бинуклеофилами

1.2.3. Реакции алкилирования и ацилирования

1.2.4. Реакции 4-метиленовой группы

1.2.5. Реакции окисления и восстановления

1.2.6. Реакции термолиза и циклизации

1.3. Биологическая активность тетрагидропиррол-2,3-дионов

Глава 2. Синтез и свойства 4,5-дизамещенных 1-аминоалкил и

1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин

2-онов

2.1. Постановка задачи

2.2. Синтез 1-аминоалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2

2.2.1. Синтез 1-(3-аминопропил)-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов

2.2.2. Синтез 1-(М-ацетиламиноэтил)-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов

2.2.3. Синтез 1-(3-диметиламинопропил)-4-ацил-5-арил-3-гидрокси

3-пирролин-2-онов

2.2.4. Синтез 1-(2-диизопропиламиноэтил)-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-З-пирролин-2-онов

2.2.5. Синтез 1-(3-дибутиламинопропил)-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-З-пирролин-2-онов

2.2.6. Синтез 1-(5-арил-4-бензоил-3-гидрокси-2-оксо-3-пирролин-1-ил)-2-(3-бензоилметилен-2-оксопиперазин-1-ил)этанов

2.3. Синтез 3-ароил мети лен-Ш,4Н-гексагидро-2-хиноксалонов

2.4. Свойства 1-аминоалкил и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-З-гидрокси-З-пирролин-2-онов

2.4.1. Получение гидрохлоридов 4,5-дизамещенных

1-аминоалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов

2.4.2. Взаимодействие 4,5-дизамещенных 1-диалкиламиноалкил-З-гидрокси-З-пирролин-2-онов с нуклеофильными реагентами

2.4.2.1. Взаимодействие с мононуклеофильными реагентами

2.4.2.2. Взаимодействие с гидразином

Глава 3. Экспериментальная часть

Глава 4. Биологическая активность полученных соединений

4.1. Антимикробная активность

4.2. Ноотропная активность

4.3. Противовоспалительная активность

4.4. Диуретическая активность

4.5. Гемостатическая активность

4.6. Двигательная активность и ориентировочная реакция

4.7. Миорелаксирующее действие

4.8. Острая токсичность 110 Выводы 112 Список литературы 114 Приложение

 
 

Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия и фармакогнозия", Семиколенных, Марина Александровна, автореферат

Актуальность проблемы. В ряду проблем, стоящих перед современной фармацевтической химией, одной из наиболее важных является поиск соединений, обладающих высокой биологической активностью и малой токсичностью. Одним из перспективных классов химических соединений для синтеза биологически активных веществ являются замещенные З-гидрокси-З-пирролин-2-оны, их производные и полученные на их основе конденсированные системы гетероциклов. Среди соединений этого класса обнаружены вещества с противомикробной, противовоспалительной, анальгетической, противовирусной, ноотропной и антиагрегантной активностью. Установлено,что на химические свойства и биологическую активность соединений оказывает влияние природа заместителя в положении 1 гетероцикла. G целью поиска биологически активных соединений среди 1-замещенных З-гидрокси-З-пирролин-2-онов представляло интерес ввести в положение 1 гетероцикла диалкиламиноалкильный и аминоалкильный остаток и оценить, каким образом подобные структурные изменения оказывают влияние на химические свойства и биологическую активность 1-аминоалкил- и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов.

Цель работы. Целью данного исследования является разработка метода синтеза новых соединений ряда 1-аминоалкил- и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов,изучение их химических свойств, определение биологической активности и выявление взаимосвязи строения полученных веществ с их биологической активностью.

Задачи исследования. Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:

1) Разработать простые препаративные методы синтеза 1-аминоалкил- и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов.

2) Получить водорастворимые гидрохлориды 1-аминоалкил-4-ацил-5-арил-З-гидрокси-З-пирролин-2-онов.

3) Изучить взаимодействие синтезированных 1 -диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-З-гидрокси-З-пирролин-2-онов с моно и бинуклеофильными реагентами.

4) Выявить наиболее перспективные соединения для углубленного изучения среди 1-аминоалкил- и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-З-пирролин-2-онов и их производных.

Научная новизна. Разработаны методы синтеза 1-замещенных 3-гидрокси-З-пирролин-2-онов.

Установлено, что структура продукта реакции метиловых эфиров ацилпировиноградных кислот со смесью ароматического альдегида и 1,3-диаминопропана зависит от соотношения количеств исходных реагентов. Впервые получены 1,3-ди(4-ацил-5-арил-3-гидрокси-2-оксо-3-пирролин-1 -ил)пропаны.

Обнаружено,что при взаимодействии метиловых эфиров ацилпировиноградных кислот со смесью ароматического альдегида и диэтилентриамина в молярном соотношении 2:1:1 образуются 1-(5-арил-4-ацил-3 -гидрокси-2-оксо-З -пиррол ин-1 -ил )-2-(3 -ароил метилен-2-оксопиперазин-1-ил) этаны.

Реакцией метиловых эфиров ацилпировиноградных кислот с транс-1,2-диаминоциклогексаном синтезированы 3-ароилметилен-1 Н,4Н-гексагидро-2-хиноксалоны.

Получено 125 новых соединений. На основании ИК, ЯМР !Н и масс-спектров установлена их структура. Фармакологическому скринингу подвергнуто 41 соединение. Среди них обнаружены вещества с антимикробной, противовоспалительной, миорелаксирующей, гемостатической и диуретической активностью. Выявлены некоторые закономерности между строением и биологической активностью синтезированных соединений.

Практическая ценность. Разработаны препаративные методы синтеза 1 -(3-аминопропил)-, 1 -(3-диметиламинопропил)-, 1 -(N-ацетиламиноэтил)-, 1 -(2-диизопропил аминоэтил)-, 1 -(3 -дибути ламинопропил)-4-ацил-5-арил-3 -гидрокси-З-пирролин-2-онов, и 1,3-ди(4-ацетил-5-фенил-3-гидрокси-2-оксо-3-пирролин-1-ил)пропанов, 1-(5-арил-4-ацил-3-гидрокси-2-оксо-3-пирролин

1-ил)-2-(3-ароилметилен-2-оксопиперазин-1-ил)этанов, 3-ароилметилен-1Н,4Н-гексагидрохиноксалонов, гидрохлоридов 1-(3-аминопропил )-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов, 1-(3-дибутиламинопропил)-4-(4-метоксибензоил)-3-(4-метоксифениламино)-5(3-гидроксифенил)-3-пирролин

2-она, 5-(1-дибутиламинопропил)пирролло[3,4-с]пиразола. 4 Среди полученных соединений обнаружены вещества, обладающие гемостатической, антимикробной, диуретической и противовоспалительной активностью. Выявлены ряды соединений, перспективные с точки зрения дальнейшего поиска биологически активных веществ.

Наиболее активным является соединение: 3-(4-нитробензоилметилен)-1Н,4Н-гексагидро-2-хиноксалон, оказывающее противовоспалительное действие, на основании чего был получен патент.

Апробация работы. Материалы диссертационной работы обсуждались на 68-й итоговой научной сессии КГМУ и отделения медико-биологических наук Центрально-Черноземного центра РАМН (Курск,2002), на 68-й Республиканской итоговой научно-практической конференции студентов и молодых ученых Республики Башкортостан с международным участием «Вопросы теоретической и практической медицины, посвященной Году Спорта и Здорового Образа Жизни» (Уфа,2003), на 68-й межвузовской научной конференции студентов и молодых ученых (Курск,2003), на межвузовской научно-практической конференции профессорско-преподавательского состава «Вузы и регион» (Пермь,2003), на X и XI национальных конгрессах «Человек и лекарство» (Москва,2003,2004 гг.), на российской научно-практической конференции «Рациональное использование лекарств» (Пермь,2004).

Публикации. По материалам диссертации опубликована 1 статья в центральной печати, получен патент и 11 тезисов докладов на конференциях различного уровня.

Объем и структура диссертации. Содержание работы изложено на 142 страницах машинописного текста и состоит из введения, 4 глав, выводов, приложения, списка литературы, включающего 127 работ отечественных и зарубежных авторов. Диссертация содержит 30 таблиц.

 
 

Заключение диссертационного исследования на тему "Синтез, свойства и биологическая активность 1-аминоалкил- и 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-ионов"

Выводы

1. Установлено, что при взаимодействии метиловых эфиров ацилпировиноградных кислот со смесью ароматического альдегида и 1,3-диаминопропана образуются 1-(3-аминопропил)-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-оны.

2. Показано, что при использовании вдвое меньшего количества 1,3-диаминопропана образуются 1,3-ди(4-ацил-5-арил-3-гидрокси-2-оксо-З-пирролин-1-ил) пропаны.

3. Реакция эфиров ароилпировиноградных кислот со смесью ароматического альдегида и N-ацетилэтилендиамина приводит к 1-(2-ацетиламиноэтил)-4-ароил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онам.

4. Установлено, что при взаимодействии метиловых эфиров со смесью ароматического альдегида и диалкиламиноалкиламина (2-диизопропил аминоэтиламина,3 -диметил аминопропиламина,3 -дибутиламинопропиламина) в эквимолярном соотношении образуются соответствующие 1-диалкиламиноалкил-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-оны.

5. Обнаружено, что при взаимодействии метилового эфира бензоилпировиноградной кислоты со смесью ароматического альдегида и диэтилентриамина в молярном соотношении 2:1:1 образуются 1 -(5-арил-4-бензоил-3 -гидрокси-2-оксо-З-пирролин-1 -ил)-2-(3-бензоилметилен-2-оксопиперазин-1-ил) этаны.

6. Предложен способ синтеза 3-ароилметилен-1Н,4Н-гексагидро-2-хиноксалонов на основе реакции метиловых эфиров ацилпировиноградных кислот и (±) транс-1,2-диаминоциклогексана. Показано, что присутствие ароматического альдегида в реакционной смеси не влияет на протекание реакции.

7. Получены гидрохлориды 1-(3-аминопропил)-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пиррол ин-2-онов, которые обладают значительно лучшей растворимостью в воде по сравнению с исходными основаниями.

8. Показано, что взаимодействие 1-(3-дибутиламинопропил)-5-(3-гидроксифенил)-4-(4-метоксибензоил)-3-гидрокси-3-пирролин-2-она при кипячении с п-анизидином в уксусной кислоте приводит к 1-(3-дибутиламинопропил)-4-(4-метоксибензоил)-3-(4метоксифениламино)-5-(3-гидроксифенил)-3-пирролин-2-ону, а взаимодействие 1-(3-дибутиламинопропил)-4-(4-метоксибензоил)-5-(2-хлорфенил)-3-гидрокси-3-пирролин-2-она с гидразингидратом приводит к замещенному 5-(1-дибутиламинопропил)пирролло[3,4-с] пиразолу.

9. Изучена противомикробная, ноотропная, диуретическая, двигательная, миорелаксирующая, противовоспалительная активность более 40 соединений. Обнаружено наличие связи между структурой и биологической активностью исследованных соединений.

 
 

Список использованной литературы по фармакологии, диссертация 0 года, Семиколенных, Марина Александровна

1. Borshe, W. Newe cinconinsfure synthesen // Ber. 1909. - Bd. 42. - S. 4072 -4073.

2. Shan, R.J. Studies in the reactions of ketoacids / R.J. Shan, J.R. Merchant // Current science. 1958. - Vol. 27, № 11. - P. 441-442.3. . Misani, F. Further experiments in the quinoline group / F. Misani, M.T.

3. Bogert//J. Org. Chem. 1945. - Vol. 10. - P. 458 - 463.

4. Minchilli, M. Derivatives of 8-chlorquinoline // Atti link. 1948. - Vol. 6. -P. 511 - 526.

5. Schiff, R. Synthese substitutrter bihidrobiketopirrolocarbonsauere-ester mitteles oxalessigester und aldehudoaminbasen / R. Schiff, C. Bertini // Ber. 1897.-Bd. 30.-S.601 -604.

6. Merchant J.R. Synthesis and reactions of some 2,3-pyrrolidinediones / J.R. Merchant, R.J. Shan, R.M. Bhandarkar // Rec. Trav. Chim. 1962. - Vol. 81, №2.-P. 131-143.

7. Андрейчиков, Ю.С. Химия оксалильных производных метилкетонов. Синтез 4-ароил-1,5-дифенилтетрагидропир-рол-2,3-дионов и их взаимодействие с аминами и гидразингидратом / Ю.С. Андрейчиков,

8. B.JI. Гейн, И.Н. Аникина// Журн. орг. химии. 1986. - Т. 22, вып. 8.1. C. 1749- 1756.

9. Андрейчиков, Ю.С. Пятичленные 2,3-диоксогетероциклы. XVI. Синтез 1,4-дизамещенных 5-арилтетра-гидропиррол-2,3-дионов на основе взаимодействия диэтоксалилацетона с азометинами / Ю.С.

10. Андрейчиков, B.JI. Гейн, JI.O. Коныпина, Н.Н. Шапетько // Журн. орг. химии. 1989. - Т. 25, вып. 12.-С. 2494 - 2500.

11. Merchant, J.R. Synthesis and reactions of some pyrrolidine-2,3-diones and pyrrolidine-2,3,5-triones / J.R. Merchant, R.M; Bhandarkar // J. Indian. Chem. Soc. 1963. - Vol. 40,№ 5. - P. 353 - 358.

12. Катаева, A.B. Новый способ введения метилсульфонильной группы в гетероциклическую систему З-гидрокси-З-пирролин-2-она / А.В. Катаева, Л.Ф. Гейн, В.Л. Гейн, 3;Г. Алиев // Журн. общ. химии. 1999. - Т. 69, вып. 4. - С. 697.

13. Merchant, J.R. Synthesis and reactions of 2,3-pyrrolidinedione derivatives / J.R. Merchant, V. Srinivasan // Rec. Trav. Chim. 1962. - Vol. 81, № 2. -P. 144- 155.

14. Гейн, B.JI. Синтез и фармакологическая активность 1-замещенных 5-арил-4-ацил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов / B.JI. Гейн, Л.Ф. Гейн, Н.Ю. Порсева и др. // Хим.-фарм. журн. 1998. -№ 9. - С. 23 - 25.

15. Гейн, В.Л. Новый способ связывания и идентификации аминокислот в биологических жидкостях / В.Л. Гейн, Л.Ф. Гейн, Н.Ю. Порсева // Тезисы докладов научной сессии ПГМА.-Пермь, 19,96. С. 60.

16. Гейн, В.Л. Синтез, геометрическое и электронное строение 5-арил-4-аро-ил-3-гидрокси-1Н-3-пирролин-2-онов и их взаимодействие с ариламинами / В.Л. Гейн, Л.Ф. Гейн, Э.Н. Безматерных, С.Н. Шуров // Журн. общ. химии. 2000. - Т. 70, вып. 10.-С. 1737 - 1742.

17. Гейн, В.Л. Простой трехкомпонентный синтез 1-(2-аминоэтил)-4-ацил-5-арил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов / В.Л. Гейн, Н.Н. Касимова, К.Д. Потемкин // Журн. общ. химии. 2002. - Т. 72, вып. 7. - С. 1115.

18. Гейн, В.Л. Взаимодействие а-кетоглутаровой кислоты с основаниями Шиффа / В.Л. Гейн, А.В. Попов, Ю.С. Андрейчиков // Журн. общ. химии. 1992. - Т. 62, вып. 12. - С. 2774 - 2779.

19. Гейн, В.Л. Образование 1,5-диарил-3-ариламино-4-карбоксиметил-2,5-дигидропиррол-2-онов в реакции 2-кетоглутаровой кислоты с основаниями Шиффа / В.Л. Гейн, А.В. Попов, Ю.С. Андрейчиков // Журн. общ. химии. 1992. - Т. 62, вып. 7. - С. 1675 - 1677.

20. Southwick, P.L. A study of some 2,3-di-oxopyrrolidines and derived pyrrolidines / P.L. Southwick, E.P. Previc, I. Casanova, E.H. Carlson // J. Org. Chem.- 1956.-Vol. 21, №9.-P. 1087- 1095.

21. Madhav, R. 2-Amino-4-aryl-6-(N-carboxyalkyl)-5H-pyrrolo3,4-b.pyrimidine-7(6H)-ones / R. Madhav, C.A. Snyder, P.L. Southwick // J. Heterocycl. Chem. 1980. -Vol. 17, №6.-P. 1231 - 1235.

22. Becket, A.H. Some pyrroline derivatives as potential antiinflammatory agents / A.H. Becket, C.M. Lee, J.K. Syghen // J. Pharmacy and Pharmacol. 1965. - Vol. 17, № 8. - P. 498 - 503.

23. Southwick, P.L. The condensation of oxalic esters with esters of alanine and N-substituted aminopropionic acides / P.L. Southwick, R.T. Crouch // J. Amer. Chem. Soc. 1958. - Vol. 75, № 14.-P. 3413 - 3417.

24. Андрейчиков Ю.С. Пятичленные 2,3-диоксогетероциклы. Синтез и строение 1,5-диарилтетрагидро-2,3-пирролдионов / Ю.С. Андрейчиков, В.Л. Гейн, О.И. Иваненко, А.Н. Масливец // Журн. орг. химии. 1986. -Т. 22, вып. 10. - С. 2208 - 2213.

25. Гейн, В.Л. Синтез и взаимодействие с оксалилхлоридом 1-арил-5-этокси-карбонилтетрагидропиррол-2,3-дионов и их 3-ариламинопроизводных / В.Л. Гейн, Е.В. Шумиловских, Э.В. Воронина и др.//Журн. общ. химии. 1998. - Т. 68, вып. 8.-С. 1328 - 1331.

26. Kosugi, Y. Synthesis of 3,5,5-trimethoxy-2-pyrrolidinone and its derivatives / Y. Kosugi etal.//Heterocycles.~ 1982.-Vol. 19, № 6.-P. 1013 1017.

27. Gein, V.L. Sigmatropic rearrangements in synthesis of substituted fife-. membered 2,3-dioxoheterocycles and esters of oxoacids / V.L. Gein, J.N, Anikina, E.V. Shumilovskich // VI International Conference on Organic Sinthesis. Moscow, 1986. P.l37.

28. Андрейчиков Ю.С. Пятичленные 2,3-диоксогетероциклы. Синтез и 1,5-сигматропные перегруппировки 4-ацил-3-дифенил-2,5-дигидропир-рол-2-онов / Ю.С. Андрейчиков, В.Л. Гейн, И.Н. Аникина // Химия гетероцикл. соединений 1987. - № 5. - С. 625 - 628.

29. Wasserman, Н.Н. Studies of l,5-diphenyl-3-pyrrolidines and related compounds / H.H. Wasserman, R.C. Koch // J. Org. Chem. 1962. - Vol. 27, № 1. - P. 35 - 39.

30. Baldwin, G.E. Lactam analogs of penicillanic and carbopenicillanic acids / G.E. Baldwin, M.F. Chan, G. Gallacher et al. // Tetrahedron. 1984. - Vol. 10,№21.-P. 4513 -4523.

31. Sano, T. A novel erythinan and homoerythinan synthesis by tetra-n-butilammo-nium fluoride induced oxyvinil-l,3-s / T. Sano, J. Toda, Y. Tsuda, T. Oshima // Tetracycles. 1984. - Vol. 22, № 1. - P. 49 - 52.

32. Ruhemann, S. Diketodiphenylpyrroline and its analogs // J. Chem. Soc. — 1909. -Vol. 95. -P. 984-992. .

33. Ruhemann, S. Studies an 1,4,5-triphenyl-2,3-dihydro-2,3-dioxopyrrolidine // J. Chem. Soc. 1909.-Vol. 95.-P. 1603 - 1609.

34. Tsuda, Y. Synthesis and cycloaddition 3-phenylpyrroline-4,5-dione, a new dienophile / Y. Tsuda, K. Isobe, A. Ukai // Chem. Communs. 1971. - № 23.-P. 1554- 1555.

35. Tsuda, Y. Stereoselective total synthesis of alkaloid haemothamine / Y. Tsuda, K. Isobe//J. Chem. Soc. 1971. -№ 23. -P. 1555 - 1559.

36. Sano, T. Dioxopyrrolidines. XXIX. Solvolytic behavior of 3-ethoxycarbonyl-2-phenylpyrroline-4,5-diones in protic solvents / T. Sano, Y. Voriguchi, Y. Tsuda // Chem. Pharm. Bull. 1985. - Vol. 33, № 1. - P. 110 - 120.

37. Winans, C.F. Synthesis and reactions of certain nitrogen ring compounds over nickel / C.F. Winans, H. Adkins // J. Amer. Chem. Soc. 1933. - Vol. 55.-P. 4167-4176.

38. Taylor, W.C. The reactions of aromatic Schiff bases with dimethylacetylenedicarboxylate. I. Reactions in the presence of water / W.C. Taylor, A. Vadacz // Aust. J. Chem. 1982. - Vol. 35, №. 6. - P. 1227 -1230.

39. Bodforss, S. Ketocarbonsauren und ethylendiamine // Ann. 1965. - Bd. 681. -S. 89-99.

40. Kurihara, T. Reaction of 2-aminobenzamide analogs and 2-aminothiophenol with ethyl 3-ethoxymethylene-2,4-dioxovalerate / T. Kurihara et al. // J. Heterocycl. Chem. 1980. - Vol. 17, № 5. - P. 945 - 951.

41. Horwitz, L. Synthesis and properties of some 4,5,6,7-tetrahydroisatins // J. Amer. Chem. Soc. 1953. - Vol. 75, № 16.- P. 4060 - 4063.

42. Simon, L.-J. Action de Tether oxalacetique sur les aldehydes en presense de l'ammonique et des amines primaries nouvelle reaction generale du aldehydes / L.-J. Simon, A. Conduche // Ann. Chim. 1907. - Bd. 12, № 8. -P. 5-27.

43. Merchant, J.R. Heterocyclic compounds: Part V. Hydrolysis of some 2,3-pyrro-lidinediones / J.R. Merchant, V. Srinivasan, R.M. Bhandarkar // Indian J. Chem.- 1963.-Vol. 1,№4.-P. 165- 167. .

44. Madhav, R. The preparation of derivatives of 9-oxo-2,3,4,9-tetrahydro-lH-pyr-rolo3,4-b.quinoline / R. Madhav, R.F. Dufresne, P.L. Southwick // J. Heterocycl. Chem. 1973. - Vol. 10, № 2. - P. 225 - 228.

45. Yevich, J.P. Compounds in the pyrrolo3',4':4,5.pyrrolo[3,4-b]indol series (I) / J.P. Yevich, J.P. Murphy, R.F. Dufresne, P.L. Southwick // J. Heterocycl. Chem. 1978. - Vol. 15, № 12. - P. 1463 - 1470.

46. Madhav, R. Preparation of l,2-dihydro-3-oxo-3H-pyrrolo3,4-b.quinoline: derivatives from 2,3-dioxopyrrolidines / R. Madhav, P.L. Southwick // J. Heterocycl. Chem. 1972. - Vol. 9, № 2. - P. 443 - 444.

47. Westphal, G. Heterocyclen aus lavulinsaure. VI. Uber die bildung von pyrrolo3,4-c.pyrazolen // J. Fur Practische chemie. 1969. - Bd. 311. - S. 379-382.

48. Gerson, K. 2,3-Dioxopyrrolidine, 3-thiosemicarbazones and thioamides / K. Gerson, R. Krumkalns //J. Chem. Soc. 1961. - P. 957 - 960.

49. Sadler, P.W. Hydrogen bonding in some thiosemicarbazones and thioamides // J. Chem. Soc. 1961. - P. 957 - 960.

50. Bender, D.R. Rearrangement of pyruvates to malonates. Synthesis of P-lactams / D.R. Bender, L.F. Bjeldanes, D.R. Knapp et al. // J. Org. Chem. -1975. Vol. 40, № 9. - P. 1264 - 1269.

51. Wasserman, H.H. Preparation of l,5-diphenyl-2,3-diketopyrrolidine: the structure of Schiff and Giglicompounds / H.H. Wasserman, R.C. Koch // Chem. Ind. 1957. - № 14. - P. 428 - 429.

52. Southwick, P.L. Ring contraction of a 3-hydroxy-1-pyrazoline derivative to a cyclopropanol derivative / P.L. Southwick, N. Latif, J.E. Klijanovicz, J.G. O'Connor //Tetrahedron Lett. 1970. -№21. -P. 1767 - 1770.

53. Southwick, P.L. The synthesis of l,2,3,3a,4,8b-hexahydropyrrolo3,4-b.indoles with angular substitution / P.L. Southwick, B. Mc Grew, R.R. Engel et al. //J. Amer. Chem. Soc. 1963. - Vol. 28. - P. 3058 - 3065.

54. Vaughan, W.R. l,5-Diaryl-2,3-pyrrolidinediones. XII. Enamines and the pseudopyrrolidinediones / W.R. Vaughan, R.C. Tripp // J. Amer. Chem. Soc. 1960. - Vol. 82, № 16. - P. 4370 - 4376.

55. Гейн, В.Л. Синтез 2,3-диарил-4-метилсульфонилпирроло2,3-Ь.хинокса-лин-2-онов / В.Л. Гейн, Л.Ф. Гейн, А.В. Катаева // Химия гетер, соед. -1999. -№ 12. -С. 1692- 1693.

56. Shedarsky, Т. Intermediates in the rearrangement of O-aryloxymes to benzofuranes / T. Shedarsky, A. Elgavi // Israel J. Chem. 1968. - Vol. 6. -P. 895 - 900.

57. Southwick, P.L. Compounds in the pyrrolo3,4-d.pyrimidine series. Synthesis based on 2,3-dioxopyrrolidines / P.L. Southwick, G.H. Hofmann // J. Org. Chem. 1963. - Vol. 28, № 5. - P.l 332 - 1336.

58. Southwick, P.L. The nitro enol ether 4-nitro-l-cyc-lohexyl-3-ethoxy-2-oxo-3-pyrroline. Synthesis and use as a reagent for aminogroup protection / P.L Southwick, R.F. Dufresne, J.J. Lindseu // J. Org. Chem. 1974. - Vol. 39, №23.-P. 3351 -3354.

59. Joannic, M. Acides diaryl-l,5-oxo-2-pyrrolidyl-4-carboxyliques / M. Joannic, D. Humbert, M. Pesson // C.r. Acad. Sc. Paris. 1972. - T. 275. -P. 45-48.

60. Vaughan, W.R. l,5-Diaryl-2,3-pyrrolidinediones / W.R. Vaughan, I.S. Covey//J. Amer. Chem. Soc. 1958. - Vol. 80, № 9.-P. 2197 - 2201.

61. Eistert, В. Umsetzungen von Polymethylen-l-phenylpyrrolin-2,3-dionen mit Diazoalkanen / B: Eistert, Muller, T.J. Arackal // Ann. 1976. - Bd. 8. - S. 1031 - 1039.

62. Southwick, P.L. 4-Benzylidene-2,3-dioxopyrrolidines and 4-benzyl-2,3-dioxo-pyrrolidines. Synthesis and experiments on reduction and alkylation / P.L. Southwick, E.F. Barnas // J. Org. Chem. 1962. - Vol. 27, № 1. - P. 98 - 106.

63. Southwick, P.L. A new synthesis of DL-vasicine and a methoxy analog / P.L. Southwick, J. Casanova // J. Amer. Chem. Soc. 1958. - Vol. 80, № 5. -P. 1168- 1173.

64. Southwick, P.L. Synthesis of a chloro derivative of DL-vasicine / P.L. Southwick, S.E. Cremer // J. Org. Chem. 1959. - Vol. 24, № 6. - P. 753 -755.

65. A.c. № 1373708 (СССР). Способ получения 5,6-диарил-2-карбокси-4,7-ди-оксо-5Н-пирроло3,4-Ь.пиранов / Ю.С. Андрейчиков, В.Л. Гейн, Л.О. Коньшина//Бюл. изобрет. 1987.-№ 6. - 15.02.88.

66. Tsuda, Y. A practical route to spiro-type heterocycles related to erythrinan / Y. Tsuda, Y. Sakai, M. Kaneko et al. // Heterocycles. 1981. - Vol. 15, № 1.-P.431 -436.

67. Гейн, В.Л. Пятичленные 2,3-диоксогетероциклы. Синтез и свойства 1,5-диарил-4-бром-3-гидрокси-2,5-дигидропиррол-2-онов / В.Л. Гейн, О.И. Иваненко, А.Н. Масливец, Ю.С. Андрейчиков // Журн. орг. химии. 1990. - Т. 26, вып. 12. - С. 2628 - 2634.

68. Гейн, В.Л. Синтез и противомикробная активность 1,5-диарил-З-гидрокси-2-оксо-3-пирролин-4-карбоновых кислот и их производных /

69. B.Л. Гейн, Э.В. Воронина, Т.Е. Рюмина и др. // Хим.-фарм. журн. -1996,-№2.-С. 25-26.

70. Гейн, В.Л. Синтез и антибактериальная активность 1-замещенных 5-арил-4-ароил-3-гидрокси-3-пирролин-2-онов / В.Л. Гейн, С.Г. Питиримова, Э.В. Воронина и др. // Хим.-фарм. журн. 1997. - № 11.—1. C. 35 36.

71. Гейн, В.Л. Синтез 4-замещенных 1-метил-5-арил- и 1,5-диарилтетрагидро-пиррол-2,3-дионов и их противовирусное действие / В.Л. Гейн, Е.В. Шумиловских, Ю.С. Андрейчиков и др. // Хим.тфарм. журн.-1991.-№12.-С. 37-40.

72. Гейн, B.JI. Синтез и биологическая 1,4,5-триарил-2,6-диоксо-3-арилметилен-2,3,4,6-тетрагидропирроло3,4-Ь.пирролов / B.JI. Гейн, А.В. Попов, В.Э. Колла и др. // Хим.-фарм. журн. 1995. -№ 9. - С. 35 -36.

73. А.с. 1115428 (СССР). 1,5-Дифенил-4-фенил(дифенилметокси)метилиден-тетрагидропиррол-2,3-дион, проявляющий противовоспалительную активность / Ю.С. Андрейчиков, В.Л. Гейн, И.Н. Аникина, А.С. Закс, Е.А. Усачев. -Публикация в открытой печати запрещена.

74. А.с. 1115429 (СССР). 4-(п-Бромбензол)-3-дифенилметокси-1,5-дифенил-2,5-дигидропиррол-2-он, проявляющий противовоспалительную активность / Ю.С. Андрейчиков, В.Л. Гейн, И.Н. Аникина, А.С. Закс, Е.А. Усачев. Публикация в открытой печати запрещена.

75. А.с. 1210372 (СССР). 1,5-Дифенил-3-гидразино-4-(п-толилсульфонил)-2,5-дигидропиррол-2-он, проявляющий противовоспалительную активность / Ю.С. Андрейчиков, B.JI. Гейн, И.Н. Аникина, А.С. Закс, Е.А. Усачев. — Публикация в открытой печати запрещена.

76. Гейн, B.JI. Синтез и фармакологическая активность 5-арил-4-ацетил-1-карбоксиалкилтетрагидропиррол-2,3-дионов Г B.JI. Гейн, Л.Ф. Гейн,

77. H.Ю. Порсева и др. // Хим.-фармац. журн. 1997. - № 5. - С. 33 - 36. .

78. Патент № 2067575. 4-Ацетил-5-п-йодфенил-1-карбоксиметил-3-гидрокси-2,5-дигидропиррол-2-он, проявляющий анальгетическую активность / В.Л. Гейн, Л.Ф. Гейн, Л.Г. Марданова, Н.Ю. Порсева. -27.07.94, заявка № 94028194; 10.10.96.

79. А.с. 1197418 (СССР). 6-Оксо-3-п-толил-4,5-дифенил-4-пирроло3,4-с.пи-разол, проявляющий противовоспалительную и анальгетическую активность / Ю.С. Андрейчиков, В.Л. Гейн, И.Н. Аникина, А.С. Закс, Е.М. Чукичев. Публикация в открытой печати запрещена.

80. Singh, М. Developments in indicators / М. Singh, J.K. Sugden // Chem. Ind. 1968. -№25. -P. 845 - 846.

81. Sugden, J.K. A new rang pH-indicators // Chem. Ind. 1967. - № 3. - P. 115-116.

82. Singh, M. New multi purpose indicators / M. Singh, J.K. Sugden // Chem. Ind. 1967.-№31.-P. 1322- 1333.

83. Simon R. // C.r. Acad. Sc. Paris. Vol. 134.-P. 1063 - 1072.

84. Машковский, М.Д. Лекарственные средства. Харьков: Торсинг,1997. -Т.1.-С. 90- 101

85. Касимова, Н.Н. Синтез замещенных 1-(3-пирролин-1-ил)-2-(пиперазин-4-ил) этанов / Н.Н. Касимова, М.А. Панина, B.JI. Гейн // Мат 68-й межвуз. Науч. конф. студентов и мол. Ученых. Часть III Курск,2003. -С. 38-39.

86. Патент РФ №2271352. 3-(4-нитробензоилметилен)-1Н,4Н-гексагидро-2-хиноксалон, проявляющий противовоспалительную активность / Гейн В.Л., Юшков В.В., Панина М.А., Шуклина Н.С., Губанова М.В. -10.03.2006 .

87. Лоскутова, Л.В. Активация мидантаином воспроизведения следа памяти у крыс / Л.В. Лоскутова, Р.Ю. Ильюченок // Фармакол. и токсикол. 1985. - № 4. - С. 34 - 38.

88. Фишер, Р.Л. Статистические методы для исследователей. М.: Госиздат, 1958.-С. 286.

89. Методические рекомендации по экспериментальному (доклиническому) изучению нестероидных противовоспалительных фармакологических веществ / Тринус Ф.П., Клебанов Б.М. Фармакол. комитет МЗ СССР. - 1982. - С. 1-5.

90. Boissier, J.R., Simon P., Zwolf J.M. L'utulisation d'une reaction purticuilere de la souris (methode de la planche a trous) pour 1'etude des medicaments psichotropes. // Therapie. 1964. - Vol. 19, №3. - P. 571 - 583.

91. Гацура, В.В. Методы первичного фармакологического исследования биологически активных веществ. М.: Медицина, 1974. - С. 147.

92. Лапин, И.П., Хаунина Р.А., Мирзаев А.В. Вертикальная двигательная активность мышей тормозится меньшими дозами психотропных препаратов, чем горизонтальная. // Бюлл. Экспертизы биологии и медицины. 1995. - №10. - С. 385 - 387.

93. Прозоровский, В.Б. Экспресс-метод определения средней эффективной дозы и ее ошибки / В.Б. Прозоровский, М.П. Прозоровская, В.М. Демченко // Фармакол. и токсикол. 1978. - № 4. - С. 497 - 502.

94. Экспрессные методы определения токсичности и опасности химических веществ / С.Д. Заугольников, М.М. Кочанов, А.О. Лойт и др. Л.: Медицина, 1978.- 184 с.

95. Янборисов, Т.Н. Взаимодействие 3-ароилметилен-1,2,3,4-тетрагидрохиноксалин-2-онов с реагентом Лавессона и биологическая активность продуктов реакций / Т.Н. Янборисов, Н.Н. Касимова, О.А. Янборисова и др. // Хим.-фарм. журн. 1996. - № 2. - С. 31 - 32.