Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.02) на тему:Разработка унифицированных методик контроля качества и технологии изготовления препаратов из сырья, содержащего кислоту аскорбиновую

ртб оа

, 3 дап да

На правах рукописи

ПРИСТУПА ЕЛЕНА АНАТОЛЬЕВНА

РАЗРАБОТКА УНИФИЦИРОВАННЫХ МЕТОДИК КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА И ТЕШОЛОГИИ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ ИЗ СЫРЬЯ, СОДЕРЖАЩЕГО КИСЛОТУ АСКОРБИНОВУЮ

Специальное ч 15.00.02 - фармвцевтическая химия и

фармакогнозия

15.00.01 - технология лекарств и организация фармацевтического дола

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук

Москва - 1995

Работа выполнена з Научно-исследовательском институте Фармации Министерства здравоохранения и медицинской промышленности Российской Федерации

НАУЧНЫЙ РУКОВОДИТЕЛЬ: Доктор фармацевтических наук, член-корреспондент МАИ Д.М. Попов

ОФИЦИАЛЬНЫЕ ОППОНЕНТЫ: доктор фармацевтических наук, профессор

Л.П. Истранов кандидат фармацевтических наук, старший научный сотрудник Ю.В. Цуканов

ВЕДУЩАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ: Ленинградский химико-фармацевтический институт

Защита состоится " 10" 1995 г.

у 1/00 /

в часов на заседании Диссертационного Совета Д 074.28.01 при научно-исследовательском институте фармации по адресу: 117418, Москва, ул. Красикова, 34

Автореферат разослан " ^ " 1995 г.

Ученый секретарь Дисертаци-онного Совета Д 074.28.01, кандидат фармацевтических наук,

старший научный сотрудник Л.М. Боброва

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Каждый третий препарат, используемый в медицинской практике, изготавливается из растительного сырья. Так, среди средств, применяеьых для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, препараты из растений составляют 77%, желудочно-кишечного тракта - 74%, гило-и авитаминозов - 40%.

Однако, до настоящего времени растительные ресурсы России используются недостаточно и нерационально: целый ряд лекарственных растений, которые в прошлом были весьма популярны, сейчас вышли из употребления, многие ценные лекарственные растения не используются в современной медицинской практике совсем, из сырья некоторых растений готовят только настои и отвары в домашних условиях. Технология многих лекарственных препаратов требует усовершенствования.

Причиной этому является отсутствие чувствительных селективных методик анализа действующих веществ в сырье и препаратах из него. Расширение арсенала лекарственных средств из растительного сырья, повышение требований к качеству используемых в настоящее время препаратов, требует нового подхода к их анализу и стандартизации. Это можно достичь путем выбора оптимального метода анализа того или иного растительного сырья и разработки методик качественного и количественного определения основных действующих веществ с использованием выбранного метода.

В качестве объектов исследования были выбраны рябина обыкновенная,крапива двудомная и шиповник, широко применяемые в современной медицинской практике. Это - поливитаминные

- г -

средства, обладающие сходным биологическим действием, одним из основных действующих веществ которых, является кислота аскорбиновая. В последние годы разработаны фотометрические методы количественного определения кислоты аскорбиновой после проведения окрашенных реакций. Согласно нормативно-технической документации количественное определение кислоты аскорбиновой в плодах шиповника проводится методом титрования 2,6-дихлорфенолиндофенолятом натрия. Количественное определение действующих веществ сырья крапивы двудомной и рябины обыкновенной не предусмотрено. Вследствие чего, выбор оптимального метода и разработка методик количественного определения кислоты аскорбиновой в указанных объектах является актуальной проблемой.

Цельисследования. Выбор оптимального метода количественного определения кислоты аскорбиновой, подбор условий и разработка методик количественного определения кислоты аскорбиновой в сырье и препаратах рябины, крапивы и шиповника; усовершенствование технологии экстрактов и водных извлечений из этих растений.

Задачи исследования:

1. Изучить литературу по следующим направлениям: сведения о химическом составе, биологической активности рябины, крапивы и шиповника, методах анализа кислоты аскорбиновой, технологии приготовления лекарственных препаратов из растительного сырья.

2. Провести сравнительную оценку доступных методов анализа кислоты аскорбиновой с целью выбора оптимального.

3. Подобрать условия и разработать унифицированную мето-

дику количественного определения кислоты аскорбиновой з сырье, ■экстракте и водном извлечение рябины обыкновенной.

4. Изучить условия экстракции кислоты аскорбиновой, разработать методику количественного определения ее з сырье, экстракте и водном извлечении крапивы.

5. Разработать методику количественного определения кислоты аскорбиновой в плода:'; и сухом экстракте шиповника,

5. Использовать разработанные методики е процессе приготовления препаратов рябины, крапивы к аиповника.

7. Разработать одноразовую упаковку для сырья, ссдердэщегс витамины.

8. Разработать нормативно-техническую документацию о включением разработанных методик.

Н а у ч н з я н о е и з н а. В процессе исследований в сравнительном аспекте фотоколориметрического, спектрофото-метрического, хроматоспэктрофотометрическсго, титрометрических и ВЭЖХ методов установлено, что наиболее достоверным и воспроизводимым является фотоколориметрический метод, позволяют™ определять малые количества кислоты аскорбиновой.

С использованием реакции кислоты аскорбиновой с желтым фосфсрномолибденовым гетерокомплексом и условий ее проведения (время реакции - 10 мин. на кипящей водяной бане, количество реактива - 5 мл., определяемые пределы концентрации от 0.0005 до 0,0030*0 выявлены основные факторы, влияющие на максимальную экстракцию кислоты аскорбиновой из сырья (величина частиц 2-3 мм. зкстрагент - вода, подкисленная раствором кислоты хлористоводородной, соотношение сырья к зкстрагента для рябины к шиповника 1:20, для крапивы 1:50) и разработаны унифицированные ме-

тодики количественного определения кислоты аскорбиновой на стадиях производства препаратов, т.е. в сырье, готовом препарате и шроте рябины, крапивы и шиповника.

На основании проведенных исследований разработаны пути усовершенствования технологии настоев, отваров и экстрактов рябины, крапивы и шиповника, заключающиеся в уменьшении размера частиц до 2-3 мм; увеличении концентрации экстрагента (этанола) при получении экстракта жидкого из плодов рябины; увеличении времени нагревания до 30 мин. при изготовлении водных извлече-чений из плодов рябины и шиповника, имеющих плотную структуру кожуры.

Практическая значимость работы. На основании проведенных исследований разработаны и внедрены:

- методики качественного и количественного анализа кислоты аскорбиновой в плодах рябины обыкновенной (проект ведомости изменения N 1 направлен в фармакопейный комитет. Писмь-мо N 155 от 23.01.95 г.).

- методики качественного и количественного анализа кислоты аскорбиновой в водных извлечениях (проект "Методические указания по приготовлению, контролю качества настоев и отваров, содержащих флавоноиды и кислоту аскорбиновую" рассмотрен на стандартной комиссии НИИ фармации. Протокол N 6 от 20.11.94 г.).

- методика количественного определения кислоты аскорбиновой в плодах шиповника направлена на Красногорский завод по переработке лекарственного растительного сырья (письмо N 122 от 05.10.94 г.).

- методики определения кислоты аскорбиновой в сырье и препаратах рябины, крапивы и шиповника (внедрены в учебный

процесс, акт ММА им.И.М.Сеченова от 20.03.95; акт Рязанского государственного медицинского университета от 25.03.95 г.).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 печатных работ.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на Республиканской научной конференции по фармации и фармакологии (Пятигорск, 1993), на конференции молодых ученых посвященной 50-летию НИИФ, 1994).

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтической науки. Диссертационная работа выполнена в соответствии тематикой и планом научно-исследовательского института фармации (номер государственной регистрации 0192.017260) и Межведомственным советом по фармации N 47 АМН РФ.

На защиту выносятся:

- результаты исследования по выбору оптимального метода количественного определения кислоты аскорбиновой;

- унифицированная методика количественного определения кислоты аскорбиновой в сырье, препаратах и шроте рябины обыкновенной;

- унифицированная методика количественного определения кислоты аскорбиновой в сырье, препаратах и шроте крапивы двудомной;

- унифицированная методика количественного определения кислоты аскорбиновой в сырье, препаратах и шроте шиповника;

- результаты по усовершенствованию технологии настоев и экстрактов рябины, крапивы и шиповника.

Объём и структура диссертации. Работа

изложена на 145 страницах машинописного текста, содержит 32 таблицы, 7 рисунков.

Работа состоит из введения, обзора литературы, экспериментальных глав, списка литературы из 171 наименования, из них 58 на иностранных языках.

Во введении раскрыта актуальность темы, определены цели и задачи исследования, сформулированы научная новизна и практическая значимость работы.

В первой главе рассмотрены сведения о химическом составе исследуемых объектов, биологическом действии, выделении, идентификации и количественном определении кислоты аскорбиновой, а также технология производства лекарственных препаратов из растительного сырья.

Во второй главе проводится сравнительное изучение методов анализа кислоты аскорбиновой с целью выбора оптимального и разработка унифицированной методики количественного определения кислоты аскорбиновой в сырье, препаратах и шроте рябины обыкновенной; использование разработанной методики в процессе приготовления препаратов из плодов рябины.

Третья глава посвящена разработке унифицированной методики количественного определения кислоты аскорбиновой в сырье, препаратах и шроте крапивы двудомной и использованию ее в процессе изготовления препаратов крапивы.

В четвертой главе представлены исследования по разработке унифицированной методики количественного определения кислоты аскорбиновой в сырье, препаратах и шроте шиповника; использование разработанной методики в процессе изготовления препаратов шиповника.

- 7 -

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

РАЗРАБОТКА УНИФИЦИРОВАННЫХ МЕТОДИК ОПРЕДЕЛЕНИЯ КИСЛОТЫ АСКОРБИНОВОЙ В СЫРЬЕ И ПРЕПАРАТАХ РЯБИНЫ ОБЫКНОВЕННОЙ, КРАПИВЫ ДВУДОМНОЙ И ШИПОВНИКА

Не смотря на то, что для идентификации и количественного определения кислоты аскорбиновой разработаны разнообразные химические, физико-химические и биологические методы: цветные реакции, хроматография в тонком слое сорбента, фотоколориметрия, спектрофотометрия, ГЖХ, ВЭЖХ и др. однако, в методиках, вышеуказанных методов,в литературе можно найти лишь сведения по воспроизводимости и точности их, сравнительных данн&ч по результатам их в работах не описано, а также не проведено исследований по выбору оптимального метода количественного определения кислоты аскорбиновой.

Проведено сравнительное изучение методов анализа кислоты аскорбиновой. При помощи выбранных методов был проведен анализ 0,5% водного раствора кислоты аскорбиновой в процессе хранения. Образцы растворов, после проведения анализа, были поставлены на хранение при комнатной температуре в защищенном от света месте и проверялись различными методами после 5, 10, 15 суток хранения. Анализ проводили следующими методами: титро-метрический (титранты: КЮ3, КВг03, 2,6-дихлорфенолшдофено-лят натрия); фотоколориметрический; УФ-спектрофотометрический; хроматоспектрофотометрический.

В качестве контрольного нами был выбран метод высокоэффективной жидкостной хроматографии. Хроматографические исследо-

ванкя проводили на жидкостном хроматографе "1»/е1ег5" с УФ-де-тектором при переменной длине волны. Использовали колонку длиной 25 см с внутренним диаметром 4,6 мм, заполненную сорбентом "Силосорб С" с диаметром частиц 7,5 мкм. В качестве подвижной фазы применяли 0,1 М фосфатно-аммиачный буфер с рНгЗ,0. Детектирование вели при длине волны 254 нм. Скорость потока элюента 1,7 мл/мин. Площадь пиков на хроматограммах измеряли с помощь» интегратора.

На рис. 1 представлены хроматограммы растворов кислоты аскорбиновой свежеприготовленного и после хранения в течение 5 и 15 суток.

Хроматограммы растворов

{

2

--

О 2 Ч В 8 0 2

Б 8 О £ 4 £ 8 МИН.

1. 0,5X раствор кислоты аскорбиновой свежеприготовленный

2. 0,5Х раствор кислоты аскорбиновой после 5 суток хранения

3. 0,5% раствор кислоты аскорбиновой после 15 суток хранения

Рис. 1

Проведенные исследования показали, что результаты сопоставимые с контрольным методом ВЭЖХ дают: фотоколориметрический, УФ-спектрофотометрический, титрометрический с КВгО^.

После 5, 10, 15 суток хранения метод ВЭЖХ показывает снижение содержания кислоты аскорбиновой соответственно на: 24,00%, 48,00%, 56,80%; фотоколориметрический на: 24,20%, 49,10%, 52,60%; УФ-спектрофотометрическкй на: 23,11%, 36.44%, 59,59%; хроматоспектрофотометрический на: 28,79%, 36,00%, 58,39; титрометрический с КВгО^ на: 32,00%, 50.10%, 58,00%.

При этом титрометрические методы с 2,6-дихлофенолиндофе-нолятом натрия и КШ^ показали значительное расхождение с контрольным методом.

После 5, 10, 15 суток хранения раствора результаты снижения содержания кислоты аскорбиновой следующие: титрометричес-кого с КЮэ : 1,30%, 11,90%, 41,20%; титрометрического с 2,6-дихлорфенолиндофенолятом натрия: 9,20%, 24,30%, 44,70%.

Объяснить возможную причину такого несоответствия можно, если учесть то, что кислота аскорбиновая при хранении ее, как водного раствора, окисляется и при титровании продукты окисле-кислоты аскорбиновой вступают в реакцию с титрантачи. давая при этом не сопоставимый результат.

УФ-спектрофотометрический мы не могли использовать в своей работе, т.к. кислоте аскорбиновой в растительном сырье сопутствуют другие органические вещества, поглощающие в той же области спектра, а также из-за окрашенности испытуемых растворов. Хроматоспектрофотометрический и броматометрический методы трудоемки. В связи с этим в качестве оптимального нами выбран

фотоколориметрический метод, основанный на реакции взаимодействия кислоты аскорбиновой с желтым фосфорномолибденовым гете-рокомплексом, позволяющий определять малые количества кислоты аскорбиновой с достаточной точностью и воспроизводимостью.

В дальнейшем этот метод был наш использован при разработке унифицированных методик количественного определения кислоты аскорбиновой в сырье, препаратах и шроте исследуемых объектов .

В качестве стандарта нами был взят раствор кислоты аскорбиновой. При снятии спектра поглощения продуктов реакции кислоты аскорбиновой с желтым фосфорномолибденовым гетероком-плексом на регистрирующем спектрофотометре Ш-7 "ВЕШАЙ" (США) было установлено, что максиум поглощения наблюдается при длине волны 720 нм (рис. 2).

Спектр поглощения продуктов реакции:

' Сиоггр ПОГЛЛГУШМ 1 продуктов реакции:

•Л,0Л53 раствора киолоти аскорбинкой с желтим ^юсТюрио-ионвбдстяи» готс-рокоишгсксх]

ЕЕ;, о ЕсЕ.С ТМ.В ?ЕО • тет ■

... > ¿,с;Е; Г!Г.

0.005Х раствора кислоты аскорбиновой с желтым фосфорномолибденовым гетерокомплексом Рис.2

- Ii -

При построении калибровочного графика нами было установлено.. что подчинение закону Бугера-Лэмберта-Бера соблюдается в пределах концентраций от O.OOG5 до 0,0030%. Наименьшее определяемое количество кислоты аскорбиновой 0,005 мг/'мл (рис.3).

Калибровочный график продуктов реакции

л. растворов кислоты асколрбиновой с реактивом

роо

о,т

0,100

OfäD

ojioo

0 0,0005 0,00/0 О,DD/S o,OD2D OQ0ZS С, /,

А ~ оптическая плотность

С . - концентрация, %

Рис. 3

Экспериментально установлено, что оптимальные условия экстракции кислоты аскорбиновой из сырья рябины, крапивы, шиповника и её очистки от экстрактивных веществ следующие: величина частиц 2-3 мм, зкстрагент - вода, подкисленная раствором кислоты хлористоводородной, соотношение сырья и экстрагента для рябины и шиповника 1:20, для крапивы 1:50, время экстракции для рябины и крапивы - 60 мин., для шиповника - 30 мин. при комнатной температуре; очистка извлечения крапивы проводится методом пропускания его через колонку о оксидом алюминия, шиповника - осаждения 96% этанолом.

- 12 -

Разработанная унифицированная методика была апробирована на 5 образцах сырья и препаратов рябины. Полученные результаты представлены в табл.1.

Таблица 1

Результаты количественного определения кислоты аскорбиновой в сырье и препаратах рябины обыкновенной с использованием метода добавок

N IНайдено IВведено iНайдено!Метрологические характеристики

обр. Iкислоты (кислоты 1в суммеI_:_;_

lacKopö. 1аскорб., Iкислоты!Найдена I Sic I Дх I ± А, Z 1в сырье,I мг lackpö.,Iкислоты I I I Imt/100 rl I мг 1аскорб.,1 I I

I I I I мг I I I

112 13 1415 16 17 I 8

Плоды рябины

1 175,10 44,СЮ 219,08 43,98 0,68 1,75 3,98

2 189,00 95,00 283,57 94,56 1,78 4,57 4,83

3 198,40 149,00 346,43 148,00 2,50 6,42 4,34

4 200,10 100,00 297,27 97,20 1,50 3,86 3,97

5 199,20 100,00 297,87 98,70 1,55 3,99 4,04

Экстракт рябины жидкий I 77,80 20,00 97,80 20,00 3,63 9,35 4,67

112 I 314 I 5 I 6 I 7 I 8

2 80,40 40,00 121,40 41,00 0,65 1,67 4,07

3 74,40 60,00 135,40 61,00 0,78 2,00 3,26

4 77,80 40,00 119,80 42,00 0,78 2,00 4,76

5 74,40 40,00 115,40 41,00 0,66 1,70 4,14

Настой рябины

1 120,00 30, QQ 151,00 31,00 0,57 1,47 4,77

2 121,00 60,00 181,00 61,00 0,81 2,09 3,42

3 120,00 90,00 211,00 91,00 1,19 3,07 3,37

4 124,50 62,00 186,00 62,00 0,95 2,44 3,93

5 123,00 60,00 184,00 61,00 0,87 2,24 3,68

Из табл.1 видно, что относительная ошибка определения при доверительной вероятности 0,95 не превышаете, 77%.

Аналогичные результаты были получены при анализе сырья и препаратов крапивы и шиповника. Относительная ошибка определения при доверительной вероятности 0,95 для крапивы не превышает ± 4,89%, для шиповника - ±4,66%.

С помощью разработанных нами методик было определено содержание кислоты аскорбиновой в сырье и препаратах рябины: в сырье найдено от 0,175 до 0,200%, в экстракте жидком - от 0,074 до 0,080%, в настое - от 0,120 до 0,130%. Содержание

кислоты аскорбиновой в крапиве: в сырье найдено от 0,220 до 0,241%, в экстракте жидком - от 0,144 до 0,147%. Содержание кислоты аскорбиновой в шиповнике: в плодах найдено от 4,310 до 4,600% (по ГФ XI д.б. не менее 0.2%), экстракте сухом - от 6,000 до 6,720%, в настое - от 3,000 до 3,620%.

ПРИМЕНЕНИЕ РАЗРАБОТАННЫХ МЕТОДИК В ПРОЦЕССЕ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ РЯБИНЫ..

КРАПИВЫ И ШИПОВНИКА

Разработанные нами унифицированные методики количественного определения позволяют определять содержание кислоты аскорбиновой не только в сырье и препаратах, но и в отходах производства (т.е. шроте) этих лекарственных растений. С их помощью нами определено, что в препараты, приготовленные по существующей технологии, из сырья переходит в среднем от 35 до 40% действующих, т.е. в шроте остается 60-65% ценных биологически активных соединений, в связи с чем ставится вопрос о совершенствовании технологии получения лекарственных препаратов. Для решения этого вопроса необходимо было изучить действие основных факторов, влияющих на процесс экстракции, и предложить пути усовершенствования технологии получения препаратов рябины, крапивы и шиповника.

Известно, что полнота экстракции зависит от степени измельчения. Для выяснения этой зависимости нами были приготовлены и проанализированы экстракты рябины и крапивы жидкие с использованием различной величины частиц сырья. Полученные результаты представлены в табл.2.

Таблица 2

Результаты анализа экстрактов рябины и крапивы в зависимости от степени измельчения

ИзмельчениеIСодержание кис-(Содержание в экстракте (Полнота

сырья, мм 1лоты аскорбино-1_ 1извлече-

1вой в сырье, % Iкислоты аскор-1Сухой 1ния кис-I 1биновой, % Iостаток, %1лоты ас-

I I I Iкорб., I;

II 2 I 3 14 15

Эксхракт_оябины. лилкий.

0,5-1,0 0,2003 0,0560 15,5 27,90

2,0-3,0 0,1920 0,1430 34,7 74,50

5,0-7,0 0,1690 0,0993 15,4 58,80

Неизм. 0,1920 0,0727 9,2 37,90

Экстоакт „квалзвы жидкий

0,5-1,0 0,2380 0,1244 7,1 52,3

2,0-3,0 0,2320 0,1746 7,5 75,2

5,0-7,0 0,2180 0,1336 7,2 61,3

Из табл.2 видно, что наибольшее извлечение кислоты аскор-

биновой в экстракт происходит при измельчении сырья до размера частиц 2-3 мм (для рябины - 74,5%; для крапивы - 75,27.). При измельчении сырья до размера частиц 0,5-1,0 мм экстрагирование затруднено, вследствие неравномерного прохождения экстрагента, наличия сухих участков, которые долго не смачиваются. При этом выход кислоты аскорбиновой для рябины составляет 27,9%, для крапивы - 52,3%.

Полнота экстракции зависит от типа эктрагента. В качестве экстрагента наш использовались вода и этанол различной концентрации (табл.3).

Таблица 3

Результаты анализа экстрактов рябины и крапивы в зависимости от типа экстрагента

Вид экстра-1Содержание IСодержание в ¡Полнота экс-!Содержа-

гента I кислоты ас-1 экстракте I трэкции, 1ние кис-

1корбиновой I_I % ¡лоты ас-

I в сырье, !кислоты ¡Сухой! ¡корб. в

I % Iаскорб.,Iоста-1 I шроте,

I I % 1 ток, 'I I %

I I I % I

! 3

I 4 I

Вода

.Экатр&кигзбдаы. жидкий. 0,2004 0,0762 18,0 38,0

62,0

1 I 2 13 14 1 5 I 5

25% этанол 0,2004 0,0838 17,6 41,8 58,2

40% этанол 0,2004 0,1165 22,4 55,4 44,6

50% этанол 0,2004 0,1376 24,6 68,7 31,3

70% этанол 0,2004 0,1450 34,7 72,4 27,6

96% этанол 0,2004 0,0825 16,2 41,2 58,8

Экстракт коаливы жидкий

Вода 0,2320 0,0552 6,2 23,8 76,2

25% этанол 0,2320 0,0893 6,0 38,5 61,5

40% этанол 0,2320 0,1467 7,3 63,2 36,8

50% этанол 0,2320 0,1730 7,5 74,6 25,4

70% этанол 0,2320 0,1009 5,6 43,5 56,5

Из табл.3 видно, что наиболее полное извлечение кислоты аскорбиновой з экстракт рябины происходит при использовании в качестве экстрагента 70% этанола (74,2%), для крапивы - 50% этанола (74,5%).

Следовательно, при изготовлении экстракта рябины жидкого необходимо использовать предварительно измельченное сырье до размера частиц 2-3 мм и экстрагент - 70% этанол.При изготовлении экстракта крапивы жидкого измельчение частиц сырья до размера 2-3 мм позволяет вместо четырех перколяторов использовать только три и увеличить полноту экстракции с 61 до 75%.

Технология производства экстракта шиповника сухого усо-

вершенствования не требует, поскольку полнота извлечения кислоты аскорбиновой Еысокая и составляет 94-98%.

В последние годы все чаще применяют такие лекарственные формы из исследуемых объектов, которые можно готовить в аптеках extempore, в фитобарах и в домашних условиях - это настои и отвары. Однако методы контроля их качества и технологии разработаны недостаточно.

Существующая нормативно-техническая документация рекомендует готовить из исследуемых объектов настои, при этом предусматривается измельчение лишь сырья крапивы до размера частиц сырья 7 мм. Результаты исследований показали, что в случае изготовления настоев в водные извлечения переходит из сырья рябины не более 2%, из сырья шиповника - не более 25% кислоты аскорбиновой, а основное её количество остзется в шроте и не используется. Поэтому важное значение имеет изучение действия некоторых факторов, влияющих на процесс экстракции, с целью повышения качества водных извлечений.

В результате изучения влияния времени нагревания и настаивания на процесс экстрзкции было устзновлено, что из плодов рябины и шиповника нужно готовить отвар, а не настой.

В связи с тем, что даже при изготовлении отваров 40% кислоты аскорбиновой остается в шроте, нами изучалась возможность повышения качества водных извлечений при измельчении сырья. Полученные результаты представлены в табл.4.

Таблица 4

Влияние степени измельчения сырья на выход кислоты аскорбиновой в отвар рябины обыкновенной

Степень из- IСодержание кислоты IПолнота (Остаточное коли-

мельчения, I аскорбиновой, % 1извлече- 1чество в шроте,

мм I_I ния, 1 %

I В сырье I В отваре I % I

! I (10:200) I I

1 12 13 14 1 5

0,5 0,2012 0,0131 65,20 34,80

1,0 0,1945 0,0123 63,30 36,70

2,0 0,1889 0,0118 62,50 37,50

3,0 0,1814 0,0108 59,90 40,10

5,0 0,1238 0,0056 45,20 32,10

7,0 0,0510 0,0016 32,10 67,90

Неизм. 0.0080 0,0002 3,00 97,00

Из табл.4 видно, что измельчение сырья рябины до размера частиц 0,5 мм позволяет увеличить выход кислоты аскорбиновой с 3 до 66%. Аналогичные результаты получены при изучении влияния измельчения для крапивы и шиповника: для крапивы - с 60 до 71%, для шиповника - с 23 до 71%.

В связи с чем в целях более рационального использования

сырья нами было изучено Елияние соотношения сырья и экстрагента на выход кислоты аскорбиновой. Мы провели исследование о возможности получения отвара из сырья, проходящего сквозь сито с диаметром отверстий 0,5 мм, который был бы равноценен отвару, получаемому из неизмельченного сырья, рекомендуемого ГФ XI издания. Результаты представлены в табл.5.

Таблица 5

Влияние соотношения сырья и экстрагента на полноту извлечения кислоты аскорбиновой из плодов рябины в отвар

Степень измельче- I Соотношение I Содержание кис- I Полнота ния сырья, мм Iсырья и экстра-Iлоты аскорбино- 1извле-

I гента I вой, % ¡чения, %

1 12 1 3 14

Сырье, проходящее 1,0:200 0,0016 63,50

сквозь сито с диа- 1,5:200 0,0023 66,70

метром отверстий 2,0:200 0,0030 65,20

0,5 мм 2,5:200 0,0037 64,30

Сырье, проходящее

сквозь сито с диа- 10,0:200 0,0026 30,90

метром отверстий 10,0:200 0,0027 34,60

7 ММ 10,0:200 0,0024 33,80

- 21 -

Из табл.5 видно, что при использовании сырья, проходящего сквозь сито с диаметром отверстий 0,5 мм, количество его может быть уменьшено в 5 раз, поскольку соотношение 2,0:200 дает такой же выход кислоты аскорбиновой, что и соотношение 10,0:200, прходящего сквозь сито с диаметром отверстий 7 мм.

Аналогичные исследования были проведены для сырья крапивы и шиповника. Нами было установлено, что при использования сырья, проходящего сквозь сито с диаметром отверстий 0,5 мм, количество его может быть уменьшено для крапивы в 1,5 раза, для шиповника - в 4 раза.

В целях дополнительного удобства приготовления качественного водного извлечения и рационального использования сырья нами предложено соотношение сырья и экстрагента 0,5:50 для рябины и крапивы, 0,7:50 - для шиповника (одноразовая упаковка).

Нами были отработаны условия приготовления водных извлечений из одноразовой упаковки: кипячение на открытом огне в течение 5 мин. с последующим 10 мин. охлаждением.

Одноразовая доза помещается в бумагу со вторичной полиэтиленовой упаковкой. Срок хранения 1 год.

Ü Б 12 У. Е £ Ы Б О Л Ы

1. 3 связи с тем, что в доступной литературе мы не встретили дачных пс выбору оптимального метода, давшего точные и достоверные результаты, а в сырье крапивы и рябины не проводится определения кислоты аскорбиновой, исследования по выбору оптимального метода и разработке унифицированной методики ее количественного определения в сырье, препарата:-; и шроте рябины, крапивы и шиповника является актуальной проблемой.

2. Б качестве рабочего метода нами выбран спектрофотоко-лориметрический, основанный на реакции взаимодействия кислоты аскорбиновой с фосфорномолибденовым гетероксмплексом, который дает достоверные результаты и позволяет определять кислоту аскорбиновую в растительном сырье и препаратах из него.

8. Определено, что спектр поглощения пполуктов реакции кислоты аскорбиновой с фосфорномолибленоЕым гетерокомплекоом наблюдается при длине волны 720 нм, подчкняемость закону 5у-гера-Ламберта-Еера соблюдается в пределах коцентрзцин от 0,ОСОБ до 0,003ü.i.. Наименьшее определяемое количество кислоты аскорбиновой 0,005 мг/мл.

4. Подобраны оптимальные условия экстракции кислоты аскорбиновой из сырья рябины, крапивы, шиповника и ее очистки от экстрактивных веществ: величина частиц 2-3 мм; экстрагент - вода, подкисленная раствором кислоты хлористоводородной; соотношения сырья и зкстрагенга для рябины и шиповника 1:20, для крапиЕЫ 1:50; время экстракции для рябины и крэливы - 50 мин., для шиповника - 30 мин. при комнатной температуре;

очистка извлечения крапивы ведется методом пропускания через колонку с оксидом алюминия, шиповника - осаждения 96% этанолом.

5. Разработана унифицированная методика количественного определения кислоты аскорбиновой в сырье и препаратах рябины, крапивы и шиповника, с помощью которой можно определять малые количества ее с достаточной точностью. Относительная ошибка определения при доверительной вероятности 0,95 не превышает ±5%.

6. С помощью разработанной методики показано, что полнота извлечения кислоты аскорбиновой в экстракт рябины жидкий увеличивается о 48 до 65% при измельчении сырья до размера частиц 2-3 мм и изменении концентрации этанола на 50%; с 61 до 75% в экстракт крапивы жидкий при использовании трех пер-колятор вместо четырех и измельченного сырья до размера частиц 2-3 мм; сухой экстракт шиповника усовершенствования технологии не требует.

7. Предложена одноразовая упаковка для растительного сырья - по 0,5 г для рябины и крапивы, по ,0,7 г - для шиповника в бумагу со вторичной полиэтиленовой упаковкой; водное извлечение из одноразовой упаковки готовят путем 5 мин. кипячения его на открытом огне с последующим настаиванием в течение 10 мин.

- 24 -

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Контроль качества настоев и отваров, содержащих флаво-ноиды и кислоту аскорбиновую /Аносова О.Г., Кол^акова М.Б., Мухамеджанова Д.М., Попов Д.М., Приступа Е.А., Хакимова Д-Р.// Проблемы фармации, подготовки и использования провизорских кадров. Материалы республиканской научной конференции по фармации и фармакологии, Пятигорск, 1993.- С.134-135.

2. Совершенствование анализа и технологии изготовльения настоев шиповника, крапивы и рябины обыкновенной / Приступа Е.А., Попов Д.М., Мухамеджанова Д. М., Минникова Н.И.//Фармация." 1994, N 2.- С.31-34.

3. Совершенствование анализа и технологии настоев и отваров, содержащих флавоноиды /Аносова О.Г., Колпакова М.В., Минникова Н.И., Мухамеджанова Д.М., Попов Д.М., Приступа Е.А., Хакимова Д.Р.//Фармация.- 1994, N 1.- С.30-34.

4. Совершенствование методик анализа, технологических режимов и аппаратурного процесса изготовления настоев к отваров/ Журко В.В., Мееркоп Г.Е., Попов Д.М., Приступа Е.А.// Фармация.- 1993, N 6.- С.72-73.

5. Приступа Е.А., Попов Д.М. Совершенствование технологии приготовления и контроля качества витаминных чаев // Науч.тр. НИИФ: "Актуальные проблемы фарм.технологии", М.- 1994.-С.151-159.

6. Приступа Е.А., Попов Д.М. Изучение влияния некоторых факторов на полноту экстракции кислоты аскорбиновой родные извлечения из плодов рябины обыкновенной // В сб.докл.:"Пробл.

разв. и соверш: технологии лек.средств".-Деп. ГЦНМБ, N Д-24384

-

ш мпо з.т.100 - 95 г.

107078 Москва,Ново-Басманная,6