Автореферат и диссертация по фармакологии (15.00.02) на тему:Биофармацевтический анализ генетически детерминированной ферментативной активности метаболических систем организма человека

ДИССЕРТАЦИЯ
Биофармацевтический анализ генетически детерминированной ферментативной активности метаболических систем организма человека - диссертация, тема по фармакологии
АВТОРЕФЕРАТ
Биофармацевтический анализ генетически детерминированной ферментативной активности метаболических систем организма человека - тема автореферата по фармакологии
Шитова, Наталья Сергеевна Казань 2005 г.
Ученая степень
кандидата химических наук
ВАК РФ
15.00.02
 
 

Автореферат диссертации по фармакологии на тему Биофармацевтический анализ генетически детерминированной ферментативной активности метаболических систем организма человека

На правах рукописи

ШИТОВА Наталья Сергеевна

БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ГЕНЕТИЧЕСКИ ДЕТЕРМИНИРОВАННОЙ ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ СИСТЕМ ОРГАНИЗМА ЧЕЛОВЕКА

15.00.02 - Фармацевтическая химия, фармакогнозия

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук

Казань - 2005

Работа выполнена в Казанском государственном технологическом университете

Научный руководитель: доктор химических наук,

профессор Евгеньев Михаил Иванович

Официальные оппоненты: доктор фармацевтических наук,

профессор Егорова Светлана Николаевна

доктор химических наук,

профессор Будников Герман Константинович

Ведущая организация: Всероссийский научный центр молекулярной

диагностики и лечения (г. Москва)

Защита состоится 23 декабря 2005 года в КЗ часов на заседании диссертационного совета Д 212.080.07 в Казанском государственном технологическом университете по адресу: 420029, Казань, ул. Сибирский тракт, 12, аудитория Д-414.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Казанского государственного технологического университета.

Автореферат разослан " 24 " НО^Л 2005 г.

Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат химических наук, доцент -- Захаров В.М.

же-Г 2 16'357 б

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. Для осуществления эффективного и безопасного применения лекарственных средств (ЛС) необходимо всестороннее изучение механизма качественных и количественных изменений лекарственных веществ (JIB) в биологических жидкостях организма человека, а также оценка влияния различных факторов на фармакокинетику JTIB при использовании современных методов биофармацевтического анализа.

Генетически детерминированные особенности организма могут существенно влиять на все этапы фармакокинетики и метаболизма лекарственного препарата. В связи с этим совершенствование применения лекарственных препаратов включает индивидуальную оптимизацию режимов их дозирования на основе комплексной оценки фармакокинетических параметров и особенностей биотрансформации, а также проведение терапевтического мониторинга лекарств. При этом для решения комплекса проблем^ связанных с разработкой новых методов биофармацевтического анализа JIB, весьма перспективным является использование фармакокинетических подходов для оценки генетически детерминированных процессов метаболизма лекарственных препаратов в организме человека.

Большинство J1C подвергается биотрансформации путем протекания окислительных процессов с участием генетически детерминированной ферментативной системы цитохромов Р450, а процессы метаболизма амино-содержащих ЛВ в организме катализируются ферментом N-ацетилтранс-феразой (NAT). В связи с этим особую значимость для биофармацевтических исследований приобретает изучение фармакокинетики ЛВ, являющихся тест-препаратами этих генетически детерминированных процессов. В тоже время биосуостраты являются сложными по составу матрицами, представляющими собой совокупность соединений различной природы.

Ряд факторов приводит к вариабельности фармакокинетических параметров ЛС. К ним можно отнести индукцию и репрессию ферментов биотрансформации, а также формирование определенных фенотипов под действием ряда патологических факторов. Эти факторы позволяют прогнозировать пути регулирования фенотипов ацетилирования и окисления для оптимизации дозирования ЛС на основе оценки индивидуальных фармакокинетических профилей, что существенно повысит эффективность и безопасность фармакотерапии различных заболеваний.

Цель работы состояла в разработке комплекса методов биофармацевтического анализа тест-препаратов генетически детерминированных ферментативных процессов ацетилирования и окисления в организме человека, а также оценке влияния различных факторов на фармакокинетику этих лекарственных веществ.

Диссертационная работа выполнялась при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (проект № 03-03-96241) и Академии наук Республики Татарстан (проекты 09-9.2-112/2003, -2004, 09-9.2-275/2005).

*В руководстве диссертационной работой принимал участие доктор химических наук, профессор Гармонов Сергей Юрьевич

РОС. НАЦИОНАЛ! 7я

библиотека

C.Qerepj

Научная новизна:

- на основании систематического исследования аналитических реакций тест-препаратов ацетилирования и окисления выявлены факторы повышения избирательности и чувствительности биофармацевтического анализа этих лекарственных веществ в биологических жидкостях организма человека;

- обоснованы и установлены условия аналитических определений в биофармацевтическом анализе гидразида изоникотиновой кислоты и антипирина, выработаны критерии выбора аналитических реагентов при дериватизации этих соединений;

- разработаны методы косвенного определения активности N-ацетилтран-сферазы и цитохромов Р450 путем изучения фармакокинетики гидразида изоникотиновой кислоты и антипирина в слюне и моче при использовании спек-трофотометрического детектирования их производных с аналитическими реагентами различных классов, также обосновано их использование для оптимизации фармакотерапии и в предиктивной медицине;

- впервые изучена фармакокинетика гидразида изоникотиновой кислоты при совместном приеме с иммуномодулятором ксимедоном, при этом выявлено индукционное влияние ксимедона на активность фермента N-ацетилтрансферазы;

- впервые установлены доза-зависимые и временные схемы введения ксимедона человеку с целью получения максимального эффекта индукции процессов ацетилирования;

- изучена фармакокинетика тест-препаратов ацетилирования и окисления при сахарном диабете 2 типа, у больных с хирургической инфекцией и ангинами, при этом установлены пути целенаправленного регулирования активности ферментов при этих патологических состояниях для оптимизации терапии;

- изучены закономерности соотношения фенотипов ацетилирования и окисления у здоровых людей, а также установлено достоверное повышение активности сывороточной холинэстеразы у сверхмедленных ацетиляторов по сравнению с другими типами ацетилирования.

Практическая значимость. Разработан комплекс методик установления фенотипов ацетилирования и окисления. Методы рекомендованы и апробированы в клинических условиях при оптимизации безопасной дозировки JIB, оценки риска интоксикации, побочных явлений при фармакотерапии.

Предложен новый индуктор NAT - отечественный иммуномодулятор ксимедон. Доза-зависимые и временные схемы введения ксимедона использованы в лечении сахарного диабета 2 типа (СД 2 типа), у больных с хирургической инфекцией и ангинами с целью получения оптимального лечебного эффекта.

Результаты работы используются для обеспечения медицинской защиты личного состава (Министерство обороны РФ) и внедрены в лечебную практику Республиканской клинической больницы Татарстана (Казань), Казанской городской инфекционной клинической больницы, поликлиники Казанского Научного Центра РАН. Экспериментальные результаты использованы в учебном процессе КГТУ в дисциплине "Контроль качества лекарственных препаратов".

На защиту выносится:

• Результаты исследования и подбор оптимальных условий спектрофото-метрического определения тест-маркеров ацетилирования и окисления с аналитическими реагентами различных классов.

• Методики биофармацевтического анализа гидразида изоникотиновой кислоты и антипирина в биологических жидкостях организма человека.

• Данные по фармакокинетике гидразида изоникотиновой кислоты и антипирина при их экскреции слюной и мочой в организме человека.

• Способы определения фенотипа ацетилирования и окисления при изучении фармакокинетики тест-препаратов гидразида изоникотиновой кислоты и антипирина в слюне и моче пациентов и результаты их применения в клинических условиях.

• Данные по фармакокинетике гидразида изоникотиновой кислоты при совместном приеме с иммуномодулятором ксимедоном и доза-зависимые и временные параметры индуцирующего эффекта ксимедона на активность Ы-ацетилтрансферазы.

• Данные по фармакокинетике тест-препаратов ацетилирования и окисления при сахарном диабете 2 типа, у больных с хирургической инфекцией и ангинами.

• Закономерности соотношения фенотипов ацетилирования и окисления у здоровых людей, а также активности сывороточной холинэстеразы у быстрых и медленных ацетиляторов.

Апробация работы. Основные результаты работы доложены на I Международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность» (Москва, 2004), IV Международной конференции «Клинические исследования лекарственных средств» (Москва, 2004), II Всероссийском симпозиуме «Тест-методы химического анализа» (Саратов, 2004), II Международной научно-практической конференции «Экология: образование, наука, промышленность и здоровье» (Белгород, 2004), XII Национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2005), IV Терапевтическом форуме «Актуальные вопросы диагностики, лечения и профилактики наиболее распространенных заболеваний внутренних органов» (Тюмень, 2005), XIII Международной научной конференции «Ферменты микроорганизмов: структура, функции, применение» (Казань, 2005), VI Республиканской научной конференции «Актуальные экологические проблемы Республики Татарстан» (Казань, 2005).

Публикации: по материалам диссертации опубликовано 6 статей, 8 тезисов докладов и подана заявка на патент РФ.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения; литературного обзора; четырех глав экспериментальной части; выводов; заключения; списка используемой литературы. В приложении представлены акты использования результатов диссертационной работы.

Диссертация изложена на 154 страницах, содержит 27 рисунков, 35 таблиц, 6 схем, список использованной литературы включает 276 источников.

Выражаю благодарность к.м.н., доценту Погорельцеву В.И. за консультации по клинико-фармакологическим вопросам.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

1. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ ,

Спектрофотометрические измерения проведены на спектрофотометре СФ-26. Кислотность растворов контролировали рН-милливольтметром MV-87S. В работе использована центрифуга К-23 (Janetszki).

В работе применялись субстанции и лекарственные формы фармакопейной чистоты.

Биологические жидкости получены у пациентов, клинических баз Казанского государственного медицинского университета и медсанчасти Казанского высшего артиллерийского командного училища. Фармакоки-нетические исследования проведены в группах контроля (120 вариабельно отобранных здоровых добровольцев при оценке активности NAT и 100 чел. в случае цитохромов Р450) и опытных группах (30 чел. с применением индукторов и репрессоров, 62 чел. с хирургической инфекцией гнойно-септического профиля, а также больные сахарным диабетом 2 типа в количестве 61 чел. и 85 больных с инфекционными ангинами).

Статистическая обработка проводилась с помощью компьютерных программ Origin 4.0 и Excel. Фармакокинетические параметры рассчитывались с помощью программ M-IND и Mathcad 11. Расчеты мольных долей и констант устойчивости проведены посредством программ EQ-V(V) и Stinger.

2. РАЗРАБОТКА МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТЕСТ-ПРЕПАРАТОВ ПРОЦЕССОВ АЦЕТИЛИРОВАНИЯ И ОКИСЛЕНИЯ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ

Для биофармацевтического анализа тест-препарата процессов ацетили-рования - ГИНК в моче была использована селективная хромогенная реакция получения производного этого ЛВ с метаванадатом аммония в качестве аналитического реагента.

При взаимодействии ГИНК с метаванадатом аммония в кислой среде образуется комплексное соединение красно-коричневого цвета. В зависимости от рН среды ванадаты в водных растворах могут существовать в виде различных ионов. В связи с этим изменение рН существенно влияет на устойчивость образованного комплекса. На рисунке 1 показаны спектры поглощения комплекса ГИНК с метаванадатом аммония при различных рН. Были установлены условия образования комплекса путем проведения реакции комплексообразования в различных интервалах рН. При смещении условий проведения реакции в более кислую область интенсивность поглощения увеличивается. При создании более щелочных значений рН среды, начиная от рН 6,86 максимум поглощения смещается в коротковолновую область. В связи с этим можно предположить, что состав комплекса в слабокислой, нейтральной и щелочной среде имеет различный состав. Методом изомолярных серий было установлено, что комплекс образуется в соотношении 1:1. По рассчитанным мольным долям присутствующих ионов в растворе можно заключить,

что при рН среды 2,2, создающейся в условиях проведения аналитической реакции, в растворе преимущественно существуют ионы У02+.

Возможность определения в ГИНК моче была оценена методом «введено - найдено» (табл. I) Полученные данные показывают, что при выбранных условиях детектирования комплекса ГИНК с метаванадатом аммония компоненты мочи не оказывают мешающего влияния на спектрофотометрические определения ЛВ.

Хорошо воспроизводимые зависимости оптической плотности от концентрации ГИНК в моче линейны для области концентраций 2-10"6 - 2-Ю"3 М:

А = 0,0533СХ (мкг/мл)+0,0007 (И2 = 0,9999) (1)

Предел обнаружения ГИНК при указанных условиях спектрофотометрического определения достигает 0,28 мкг/мл, что значительно ниже интервала фармакокинетических концентраций ЛВ.

Рис. 1 Устойчивость комплекса гидразида изоникотиновой кислоты с метаванадатом аммония при различных рН: 1 - 2,2; 2 - 4,5; 3 -6,86; 4-7,5

300

400

500

Л,нм 600

Таблица 1 Результаты спектрофотометрического определения изониазида в моче (п=4, р=0,95) __

Введено ГИНК, мкг/мл Найдено ГИНК, мкг/мл sr

1,37 1,3б±0,02 0,01

2,74 2,75±0,20 0,07

5,48 5,41±0,27 0,05

8,22 8,02±0,25 0,03

10,96 10,83±0,26 0,02

Реакция взаимодействия антипирина, применяемого в качестве тест-маркера процессов микросомального окисления ЛВ, с нитритом натрия в кислой среде широко используется при проведении антипиринового теста. Нами была оценена возможность определения антипирина и модернизирован ранее применяемый метод оценки активности окислительных ферментов.

Изучено, что максимум поглощения 4-нитрозоантипирина наблюдается при длине волны 350 нм, также была уменьшена доза тест-препарата до 0,6 г и сокращено время сбора образцов слюны до 12 часов.

А

'СН,

антипирин

ЫаЫ02

н2во,

о—

>-Сн,

I

С.н,

4-нитрозоантипирин

При выбранных условиях детектирования нитрозоантипирина компоненты слюны не оказывают мешающего влияния на спектрофотометрическое определение ЛВ. Возможность избирательного определения антипирина в слюне оценивали методом «введено - найдено» (табл. 2).

Таблица 2 Результаты спектрофотометрического определения

Введено, мкг/мл Найдено, мкг/мл

0,82 0,80±0,15 0,19

1,37 1,34±0,21 0,16

2,74 2,72±0,23 0,08

5,48 5,43±0,31 0,06

8,22 8,1510,25 0,03

10,96 10,87±0,40 0,04

Зависимости оптической плотности от концентрации антипирина в слюне линейны для области концентраций 5-10'5 -10'3 М:

А = 0,0187СХ (мкг/мл)+0,0052 (Я2 = 0,9991) (2)

Предел обнаружения антипирина при указанных условиях спектрофотометрического определения достигает 1,88 мкг/мл.

3. МЕТОДЫ БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО АНАЛИЗА В ОЦЕНКЕ ГЕНЕТИЧЕСКИ ДЕТЕРМИНИРОВАННОЙ ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ

Процесс ацетилирования заключается в присоединении ацетильной группы к молекуле субстрата и катализируется ферментом ЫАТ при участии ко-фермента А. У разных категорий обследуемых наблюдались различные значения фармакокинетиических параметров экскреции тест-препаратов. Следовательно, оценка фармакокинетических параметров тест-препаратов может лежать в основе фенотипирования индивидов на группы «быстрых» и «медленных» метаболизаторов.

+ СНг-С— Б -КоА >Ы. /У-С-ЫН—ЫН + КоАвН

II ^сн3

^ 3 и

О о

При определении фенотипа ацетилирования изониазид однократно перо-рально принимался пациентом в дозе 0,45 г. Мочу собирали каждые два часа в течение 6 часов после приема тест-маркера. В почасовых пробах мочи определяли содержание ГИНК фотоколориметрическим или спектрофотометри-ческим методами. По полученным данным рассчитывали фармакокинети-ческие параметры (табл. 3), строли кинетические кривые (рис. 2), определяли фракцию дозы ГИНК и оценивали фенотип ацетилирования пациента. Как видно, фенотипировать обследуемых людей можно, пользуясь любым из представленных фармакокинетических параметров. Для быстрых ацетиля-торов характерны более низкие значения площади под фармакокинетической кривой, времени полувыведения ЛВ и более высокие значения константы элиминации, объема распределения, чем для медленных ацетиляторов. Кумулятивное количество экскретируемого с мочой ГИНК (фракция дозы), характерное для быстрых и медленных ацетиляторов, с учетом вероятности распределения представлено в таблице 4. Фармакокинетическая модель распределения ЛВ у пациентов после его перорального введения приведена на рисунке 3.

т, мг200

150 100 50

Рис. 2 Кривые кумулятивной экскреции ГИНК с мочой: 1 -быстрые ацетиляторы; 2 - медленные ацетиляторы

| I I I I 1 I I

0 1 2 3 4 5 6 7Т, час

Для системы ферментов цитохрома Р450 также характерен полиморфизм процессов метаболизма:

ПН (субстрат)+02 НАДФН+Н+->ЯОН(продукт)+Н20+НАДФ+

Распределение добровольцев контрольной группы по активности цитохромов Р450 при определении фенотипа окисления с помощью антипиринового теста показало наличие трех групп: быстрого (20%), среднего (44%) и медленного типа (36%) (табл. 5). Рассчитаны фар-макокинетические параметры экскреции антипирина со слюной (табл. 6).

Рис. 3 Фармакокинетическая модель распределения ЛВ у пациентов после его перорального введения. Камера «О» - область введения JIB в ЖКТ; камера «1» - тест-ткань; Dp0- доза препарата; к,- константа скорости накопления препарата в тест-ткани; к<.| - константа элиминации препарата; т - задержка по времени

Таблица 3 Кинетические параметры выведения изониазида с мочой при пероральном приеме 0,45 г лекарственного вещества (достоверность различия между показателями быстрого и медленного ацетилирования Р < 0,001)_

Фенотип ацетилирования Площадь под фармакокине-тической кривой (AUC), мкг ч/мл Константа элиминации (К.0.Ч1 Время полувыведения (Т1в),ч Объем распределения (Vd), мл

Быстрый 21630±2300 0,554610,0580 1,35±0,18 41,7±4,5

Медленный 77590±14220 0,2298±0,Ю00 3,97±0,25 32,2±3,4

Таблица 4 Критерии для определения индивидуальной активности N-ацетилтрансферазы (п=120)__

Тип ацетилирования Активность N-ацетил-трансферазы (фракция дозы ГИНК, %) Вероятность распределения

Быстрый 3,1210,25 Р<0,001

Медленный 9,4011,37

Таблица 5 Критерии для определения индивидуальной активности ферментов системы цитохрома Р450 (п=39)

Фенотип окисления Количество антипирина, выведенного со слюной за 12 часов, мкг Вероятность распределения

Быстрый 2,8411,80 PcO.OOl

Средний 10,6910,83

Медленный 24,2513,19 Р<0,001

Область введения

Таблица 6 Фармакокинетические параметры антипирина по результатам измерения его концентрации в слюне при введении per os в дозе 0,6 г_

Параметр, размерность Фармакокинетические параметры

Здоровые (п = 39) Больные с СД 2 типа (п=27)

Быстрые Средние Медленные Средние Медленные

Константа скорости элиминации препарата, к^, час'1 0,3460 0,1140 0,1610 0,3280 0,1050

Константа скорости накопления препарата в крови, ка, час"1 0,6220 1,4220 0,9510 0,5340 0,5540

Объем распределения, Ул. л 179,9 101,1 44,9 58,4 45,1

Максимальная концентрации антипирина в слюне, Си„, мкг/мл 1,60 4,77 9,31 4,73 9,03

Время достижения максимума концентрации антипирина в слюне, Ти„„ час 4,72 4,18 4,75 3,72 4,76

Период полуэлиминации препарата, Т\п, час 2,00 6,11 4,32 2,12 6,62

Клиренс, СЬ, мл/час мл/мин 62294 1038 11468 191 7208 120 19129 319 4723 79

Среднее время пребывания, МЯТ, час 7,10 11,77 9,78 6,27 12,40

Среднее время накопления препарата, МАТ, час 4,20 2,96 3,55 3,22 2,85

Среднее время прохождения препарата, МТТ, час 2,90 8,81 6,23 3,05 9,55

Площадь под кривой «кон-центрация-время»,А11С, мкг-час/мл 9,63 52,32 83,24 31,37 127,05

4. БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ В ЦЕЛЕНАПРАВЛЕННОЙ

РЕГУЛЯЦИИ ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ И ЕЕ ОЦЕНКА ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ПАТОЛОГИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЯХ

Было обнаружено, что иммуномодулятор ксимедон, проявляющий иммуностимулирующий или иммунодепрессантный эффект в зависимости от дозы препарата, является активатором NAT. Экспериментальные данные свидетельствуют, что в отношении эффекта индукции возможны два механизма действия: субстратзависимый и субстратнезависимый (тригтерный). Так, например, у быстрых ацетиляторов значения индукции при дозировании препарата по 1 и 2 г в сутки практически одинаковы. Это связано с тем, что регистрация индукции при суточной дозе 2 г осуществлялась через 1 сутки после приема препарата. По всей видимости, суточная доза ксимедона, равная 1 г, является «пороговой» для проявления ксимедоном субстратзависимого

механизма действия (чем больше доза, тем выше эффект). Однако при дальнейшем уменьшении дозы наблюдается увеличение показателей индукционного процесса, которое невозможно объяснить с позиций субст-ратзависимого механизма, что позволяет предположить пусковой (субстрат-независимый) механизм действия. Ведь известно, что высокие концентрации субстрата начинают тормозить вызываемую этим же субстратом биохимическую реакцию. Подобные изменения интервала доз были зафиксированы и в случае медленных ацетиляторов с той лишь разницей, что «порог» пусковой дозы сдвинут в сторону уменьшения ее значений. Это связано с тем, что в случае медленной активности NAT дольше сохраняется высокая концентрация препарата (табл. 7). Фармакокинетические параметры для быстрых и медленных ацетиляторов были рассчитаны по концентрации ГИНК, экскретируемого с мочой как при приеме индуктора в различных дозах, так и без него (табл. 8). Найден максимальный интервал сохранения индукции ксимедоном и по полученным результатам рассчитаны фармакокинетические параметры ГИНК при индукции ацетилирования (табл. 9,10). Кроме того, в рамках данной работы было установлена возможность возникновения индукции при приеме иммуномодулятора ксимедона одновременно с тест-маркером ГИНК и через 30 мин после введения последнего. Данное наблюдение подтверждает предположение о триггерном характере воздействия ксимедона на ферментный комплекс и дает возможность использовать это свойство не только для профилактики различных интоксикаций (в том числе и эндогенного происхождения), но и для лечения отравлений, когда с момента принятия токсиканта прошло значительное время.

Для сравнения активаторов N-ацетилирования проверялось влияние на фармакокинетику ГИНК известных индукторов пантотената кальция и пири-доксина гидрохлорида (табл. 11). Индуцирующий эффект этих активаторов сопоставим с индукцией ксимедоном на процессы ацетилирования. Следует отметить, что при приеме пантетената кальция и пиридоксина гидрохлорида величина индукции пропорциональна дозе индуктора.

Таблица 7 Индукция N-ацетилтрансферазы в зависимости от дозы и частоты приему ксимедона_

Фенотип ацетилирования Индукция N-ацетилтрансферазы в зависимости от дозы и частоты приема ксимедона, %

0,5г 4 раза вдень 0,5г 4 раза в день, 3 дня 0,5г 4 раза в день, исследование через сутки 0,25г 4 раза в день 0,25г 2 раза в день 0,125г 2 раза в день 0,0625г 2 раза в день

Быстрый 33±8 39±12 13±5 12±3 32±9 30±10 23±8

Медленный 13±2 15±6 48±15 25±4 53±10 51±16 83 ±9

Таблица 8 Фармакокинетические параметры изониазида при индукции

процесса ацетилирования ксимедоном

Доза ксимедона Фенотип ацетилирования Площадь под фармако-кинетической кривой (AUC), мкг-ч/мл Константа элиминации Время полувыве-цения (Т|/2), ч Объем распределения (Vd), мл

Без приема ксимедона Быстрый 2163012300 0,554610,0580 1,3510,18 41,714,5

Медленный 77590±14220 0,229810,0740 3,9710,25 32,213,4

0,5г четыре раза в день Быстрый 21960±4470 0,338010,1350 2,5010,98 78,8136,9

Медленный 122220±16940 0,307810,0803 5,0411,20 29,219,0

0,5г 4 раза в день, Здня Быстрый 18090±3250 0,569810,0702 2,5210,25 404,0142,0

Медленный 62290±9670 0,255910,0190 4,0910,95 53,8111,2

0,5г 4 раза в день, исследование через сутки Быстрый 11770±2130 0,221710,0150 2,2210,47 102,0126,0

Медленный 32480±2450 0,343410,0580 16,1012,30 214,0128,0

0,25г 2 раза вдень Быстрый 18100±1360 0,502110,0260 1,5210,68 117,0132,0

Медленный 44670±5360 0,159410,0304 4,3511,23 63,3120,3

0,125г 2 раза в день Быстрый 29960±2150 0,150510,0580 1,6410,94 149,0136,0

Медленный 59720±6230 0,288010,0250 3,8711,07 38,419,6

0,0625г 2 раза в день Быстрый 32410±1150 0,329710,0501 3,1211,46 93,5115,3

Медленный 36600±1250 0,646110,0240 1,0711,32 19,018,2

Таблица 9 Динамика индукции в зависимости от времени приема разовой дозы ксимедона 1 г и типа ацетилирования_

Тип ацетилирования Индукция ^ацетилтрансферазы в зависимости от интервала времени от принятия индуктора до начала регистрации индукции, %

20 ч 16ч 12 ч 8ч 4ч

Быстрый Нет индукции 1513 19±1 20±2 33+5

Медленный Нет индукции 2312 30±5 34±7 49±6

Обнаружена также способность лекарственного препарата димефосфона увеличивать активность NAT (индукция при суточной дозе 4,5 - 6 г составила 34±10 % - для быстрых ацетиляторов, 32±9 % - для медленных). Ранитидин является известным репрессором фермента NAT. Была рассмотрена его способность снижать активность данного фермента, а также анализировалась активность ХЭ на фоне приема ранитидина. По полученным

экспериментальным данным лицам с низкой активностью NAT характерна повышенная активность ХЭ (табл. 12, 13, рис. 4).

Целенаправленно уменьшая активность NAT с помощью приема рани-тидина, была установлена обратная связь между процессом ацетилирования и холинэстеразной активностью. Активность ХЭ определялась до и после приема ранитидина. Достоверных результатов не наблюдалось, но ясно видна тенденция к увеличению активности ХЭ в группе обследуемых, принимающих ранитидин.

Рассчитаны данные по фармакокинетике тест-препаратов ацетилирования и окисления при СД 2 типа (табл. 3), у больных с хирургической инфекцией и ангинами. По полученным экспериментальным данным быстрый тип ацетилирования является преобладающим при СД 2 типа (рис. 5,6). При определении активности цитохромов Р450 в этой группе больных наблюдалось распределение лишь на две статистически значимо различающиеся группы: средний и медленный фенотип окисления (рис. 7,8).

Таблица Ю Фармакокинетические параметры изониазида при приеме 1г ксимедона per os за промежуток времени от 20 до 4 часов до введения тест-маркера_____

Промежуток времени от принятия индуктора до начала анализа Фенотип ацетилирования Площадь под фарма-кокинетичес-кой кривой (AUC), мкгч/мл Константа элиминации (М. ч"' Время полувыведения (Т1/2),ч Объем распределения (Vd), мл

Без ксимедона Быстрый 19380±3060 0,664910,2505 0,9610,81 28,4119,9

Медленный 61190±9740 0,424810,0853 1,71Ю,35 19,416,7

20 ч Быстрый 24700±470 0,239510,0490 1,3210,47 80,3116,9

Медленный 83950±9420 0,391610,250 3,3312,12 24,1112,7

16 ч Быстрый 174501700 0,547310,100 1,3210,05 50,1112,8

Медленный 67890+5710 0,241010,0740 3,7811,73 38,1119,5

12 ч Быстрый 1720011970 0,4132Ю,0055 1,6810,01 64,216,4

Медленный 119830120100 0,096710,0015 7,1710,07 47,513,8

8ч Быстрый 1846014450 0,289110,0133 2,4010,07 91,6124,4

Медленный 4593017670 0,253110,2105 17,6911,50 38,0118,4

4ч Быстрый 114501350 0,475910,0041 1,4610,01 82,713,2

Медленный 2603016620 0,261910,005 2,6510,07 5,112,7

Таблица 11 Индукция М-ацетилтрансферазы в зависимости от дозы

индукторов ацетилирования

Фенотип ацетилирования Индукция М-ацетилтрансферазы в зависимости от дозы активатора, %

Пантотенат кальция Пиридоксина гидрохлорид

Доза 0,75 г Доза 0,5 г Доза 0,04 г Доза 0,02 Доза 0,01 г

Быстрый 44±9 21±6 20±6 13+3 Нет индукцш

Медленный 16±2 Нет индукции 43±6 37±3 34±2

Активность ХЭ, Мкмоль АХТБ' ^^ин. мл. сыворотки

2000

1000

О I

о

в>

СО (М

быстрый медленный сверхмедленный

Рис. 4 Зависимость активности холинэс-теразы от фенотипа ацетилирования * АХТБ - ацетип-холинтиобромид

тип ацетилирования

Рис. 5 Полиморфизм ацетилирования у здоровых добровольцев (п= 110): 1 -быстрые 50%, 2 - медленные 50%

Рис. 6 Полиморфизм ацетилирования при сахарном диабете 2 типа (п = о1): 1 - быстрые 63%, 2 - медленные 38%

Рис. 7 Полиморфизм окисления у Рис. 8 Полиморфизм окисления у

здоровых лиц (п = 39): 1 - быстрые больных при сахарном диабете 2

21 %, 2 - средние 44%, 3 - типа (п = 27): 1 - средние 22%, 2 -

медленные 36% медленные 78%

Таблица 12 Активность холинэстеразы в группах быстрых, медленных и сверхмедленных ацетиляторов (п=120)_

Тип ацетилирования Активность фермента

N-ацетилт-рансфераза (фракция дозы ГИНК, %) Вероятность распределения, Р Холинэстераза, мкмоль АТХБ*/мл. мин. сыворотки Вероятность распределения, Р

Быстрый 3,12±0,25 Р<0,001 Р<0,01 > 1618±68 Р<0,05 Р<0,05

Медленный 9,40±1,37 1701±114

Сверхмедленный 15,95±1,34 2043±69

*АХТБ - ацетилхолинтиобромид

У хирургических больных гнойно-септического профиля представляет интерес применение ксимедона, который вызывает сокращение сроков заживления ран и ожогов, при этом выявлено его эффективное модулирующее действие на иммунную систему и индуцирующий эффект на систему ацетилирования. После первичного приема ксимедона исследовалась индукция, которая проявилась у медленных ацетиляторов и фактически отсутствовала у быстрых ацетиляторов. Отсутствие индукции сохранялось у всех быстрых ацетиляторов к концу лечения (табл. 14). У медленных ацетиляторов индукция к концу лечения сохранялась, что привело к типизации многих медленных ацетиляторов в быстрые. Рассчитаны фар-макокинетические параметры экскреции изониазида с мочой для медленных и быстрых ацетиляторов до приема ксимедона при однодневном приеме ксимедона в дозе 125 мг 2 раза в день и при курсовом приеме ксимедона в аналогичной дозе (табл. 15,16). Это позволяет достигать оптимального эффекта при проведения фармакотерапии.

Таблица 13 Фармакокинетические параметры ГИНК и активность холинэстеразы при курсовом приеме ранитидина (суточная доза 510 мг) в течение 5 дней (п = 13)_* __

№ Фармакокинетический параметр До приема ранитидина После приема ранитидина

1 Фракция дозы ГИНК, % 3,52±1,88 11,41±7,92

2 Площадь под фармакокинетической кривой (AUC), мкгч/мл 17570±10940 29180±13430

3 Константа элиминации (Kei), ч"1 0,4290±0,3780 0,5580±0,2520

4 Время полувыведения (Тщ), ч 2,047±0,570 2,209±0,240

5 Среднее время пребывания (MRT), ч 4,37±1,27 4,19±0,72

6 Активность ХЭ 1756±539 1993±595

Таблица 14 Индукция N-ацетилтрансферазы при применении ксимедона

Тип ацетили-рования Фракция дозы ГИНК до приема ксимедона, % Прием ксимедона по 125мг 2раза в день в течение 1 дня Курс лечения ксимедоном

Фракция дозы ГИНК, % Индукция, % Фракция дозы ГИНК, % Индукция, %

Быстрый 4,8±0,8 5,5±0,7 нет 5,3±0,1 нет

Медленный 13,5±1,5 8,6±1,3 37,7±6,1 9,2±0,9 27,4±9,8

Таблица 15 Фармакокинетические параметры для медленных ацетиляторов____

Прием ксимедона Площадь под фармакокинетической кривой (AUC), мкг-ч/мл Константа элиминации (Ке,)^ Время полувыве-цения (Т,/2), ч Объем распределения (Vd), мл

Отсутствует 98500±14200 0,2161 ±0,0160 3,88+0,95 38,913,4

1 день 4647015380 0,446410,0260 2,0610,78 32,212,4

Курс лечения 63210±9670 0,183110,0580 4,9810,98 90,5111,2

Таблица 16 Фармакокинетические параметры для быстрых ацетиляторов

Прием ксимедона Площадь под фармакокинетической кривой (AUC), мкгч/м Константа элиминации (Ке,)^ Время полувыведения (Т1/2),ч Объем распределения (Vd), мл

Отсутствует 1849012300 0,663810,0140 1,1810,68 121,7126,2

1 день 1984013240 0,541110,0700 1,4610,56 79,619,5

Курс лечения 2272012450 0,854210,0560 0,8210,09 23,112,5

Обнаружены закономерности соотношения фенотипов ацетилирования и окисления (табл. 17) у здоровых людей. Весьма интересна с химико-фармацевтической точки зрения выявленная взаимосвязь между способностью быстрых ацетиляторов медленно окислять лекарственные препараты и, наоборот - медленных ацетиляторов быстро окислять лекарства.

Таблица 17 Активность Ы-ацетилтрансферазы в группах медленных, средних и быстрых фенотипов окисления (здоровые добровольцы, п = 39)

Фенотип окисления Количество антипирина, выведенного за 12 часов, мкг Вероятность распределения Активность N- ацетил-трансферазы (фракция дозы ГИНК, %) Вероятность распределения

Быстрый 3,59±1,49 Р<0,001 Р<0,01 8,60±1,23 Не достоверно Р<0,05

Средний 10,62±3,09 6,20±2,34

Медленный 25,47±9,75 3,50±1,21

Как видно из экспериментальных данных медленному типу окисления соответствует быстрый тип ацетилирования, а быстрому типу окисления -медленный тип ацетилирования, причем среднему типу окисления характерно распределение как в сторону высоких активностей NAT, так и в сторону низких.

ВЫВОДЫ

1. Выявлены факторы повышения избирательности и чувствительности биофармацевтического анализа тест-препаратов генетически детерминированных процессов ацетилирования и окисления в биологических жидкостях организма человека. Обоснованы и установлены условия аналитических определений в биофармацевтическом анализе гидразида изоникотиновой кислоты и антипирина, выработаны критерии выбора аналитических реагентов при дериватизации этих лекарственных веществ в биологических жидкостях и использовании спектрофотометрического детектирования.

2. Разработаны методы косвенного определения активности N-ацетил-трансферазы и цитохромов Р450 путем изучения фармакокинетики гидразида изоникотиновой кислоты и антипирина в слюне и моче при использовании спектрофотометрического детектирования их производных с аналитическими реагентами различных классов. Обосновано использование методов биофармацевтического анализа для оптимизации фармакотерапии и в предик-тивной медицине.

3. Впервые изучена фармакокинетика гидразида изоникотиновой кислоты при совместном приеме с иммуномодулятором ксимедоном, при этом выявлено индукционное влияние ксимедона на активность фермента N-ацетил-трансферазы. Установлены дозазависимые и временные схемы введения

ксимедона человеку с целью получения максимального эффекта индукции процессов ацетилирования.

4. Установлены фармакокинетические параметры тест-препаратов ацетилирования и окисления при сахарном диабете 2 типа, у больных с хирургической инфекцией и ангинами. Выявлены пути целенаправленного регулирования активности ферментов при этих патологических состояниях для оптимизации применения лекарственных средств.

5. Проведена оценка соотношения фенотипов ацетилирования и окисления у здоровых людей, а также установлено достоверное повышение активности сывороточной холинэстеразы у сверхмедленных ацетиляторов по сравнению с другими типами ацетилирования.

Основное содержание диссертации изложено в публикациях:

1. Евгеньев М.И. Неинвазивные методы определения фенотипа ацетилирования / М.И. Евгеньев, С.Ю. Гармонов, Р.Г. Гисмятов, Н.С. Шитова, И.Е. Зыкова // Вопросы биол., мед. и фармацевт, химии. - 2003. - №3. - С. 34 - 39.

2. Евгеньев М.И. Биофармацевтический анализ ферментативной активности метаболических систем организма / М.И. Евгеньев, С.Ю. Гармонов, Н.С. Шитова, В.И. Погорельцев // Вестник Казанского технологического университета. - 2004. - № 1-2. - С. 74 - 81.

3. Погорельцев В.И. Влияние полиморфизма ацетилирования на течение хирургической инфекции и ее фармакологическая коррекция / В.И. Погорельцев, В.Ю. Терещенко, С.Ю. Гармонов, Т.А. Кисилева, Н.С. Шитова, М.И. Евгеньев // Практическая медицина. - 2004. - № 4 (9). - С. 28 - 30.

4. Евгеньев М.И. Оценка активности ферментных систем для обеспечения экологической безопасности при работе с токсикантами // М.И. Евгеньев, С.Ю. Гармонов, Н.С. Шитова, В.И. Погорельцев // Вестник Белгородского ГТУ им. В.Г. Шухова. - 2004. - № 8. - 4.2. - С. 53 - 55.

5. Гармонов С.Ю. Оценка активости холинэстеразы у быстрых и медленных ацетиляторов / С.Ю. Гармонов, В.И. Погорельцев, Н.С. Шитова, И.Е. Зыкова, М.И. Евгеньев // Вопросы биол., мед. и фармацевт, химии. - 2005. - № 3. - С. 27-30.

6. Гармонов С.Ю. Оценка фенотипов ацетилирования и окисления у больных сахарным диабетом 2 типа // С.Ю. Гармонов, Т.А. Киселева, И.Г. Салихов, М.И. Евгеньев, Н.С. Шитова, О.В. Полехина, В.И. Погорельцев // Нижегородский медицинский журнал. - 2005. - № 3. - С. 29 - 35.

7. Гармонов С.Ю. Аналитические методы исследования генетически детерминированных процессов биотрансформации / С.Ю. Гармонов, В.И. Погорельцев, Н.С. Шитова, И.Е. Зыкова, М.И. Евгеньев // Тез. докл. I Международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность». -М„ 2004.-С. 51-52.

8. Евгеньев М.И. Аналитические технологии для исследования биохимических процессов организма человека на основе фармакогенетических тестов / М.И. Евгеньев, С.Ю. Гармонов, Н.С. Шитова, В.И. Погорельцев // Тез. докл. II Всерос. симп. «Тест-методы хим. анализа». -Саратов: Научная книга, 2004. - 86с.

»25 4 93

9. Погорельцев В.И. Применение кс генетического полиморфизма и индр Погорельцев, С.Ю. Гармонов, Н.С. 1Ш Тез. докл. IV Международной конфе] лекарственных средств». - М., 2004. - С.

10. Киселева Т.А. Генетически детермин изониазида у больных сахарным диаб< Гармонов, Н.С. Шитова, И.Г. Сапихо Международной конференции «Клини1 средств». - М., 2004. - С. 84 - 85.

11. Киселева Т.А. Факторы, влияющие на цгсншииы ацечилиривания и окисления у больных сахарным диабетом 2 типа / Т.А. Киселева, С.Ю. Гармонов, В.И. Погорельцев, Н.С. Шитова, М.И. Евгеньев, И.Г. Салихов // Материалы IV Терапевтического форума «Актуальные вопросы диагностики, лечения и профилактики наиболее распространенных заболеваний внутренних органов». - Тюмень, 2005. - С. 33.

12. Гармонов С.Ю. Аналитические методы исследования генетически детерминированной ферментативной активности / С.Ю. Гармонов, В.И. Погорельцев, Т.А. Киселева, Н.С. Шитова, А.Р. Ахметова, М.И. Евгеньев // Материалы XIII международной научной конференции «Ферменты микроорганизмов: структура, функции, применение». - Казань, 2005. - С. 21 -22.

13. Киселева Т.А. Индивидуализация терапии сахарного диабета 2 типа на основе фенотипов ацетилирования и окисления / Т.А. Киселева, С.Ю. Гармонов, В.И. Погорельцев, Н.С. Шитова, М.И. Евгеньев, И.Г. Салихов // Тез. докл. XII Российского национального конгресса «Человек и лекарство». -М„ 2005. - С. 408.

14. Гармонов С.Ю. Оценка генетически детерминированных систем метаболизма организма человека для обеспечения экологической безопасности / С.Ю. Гармонов, Н.С. Шитова, JI.A. Зайнутдинов, В.И. Погорельцев, М.И. Евгеньев // Тез. докл. VI Респ. научной конф. «Актуальные экологические проблемы РТ». Казань, 2004. С. 56-57.

15. Заявка 2005124656 РФ, МПК7 С 12 N 9/10 Способ увеличения активности фермента N-ацетилтрансферазы у человека / B.C. Резник, В.И. Погорельцев, С.Ю. Гармонов, Н.С. Шитова, Т.А. Киселева - приоритет 02.08.2005. - 11 с.

Соискатель Н.С. Шитова

Заказ _Тираж 100 экз.

Офсетная лаборатория Казанского государственного технологического университета 420015, г. Казань, ул. К. Маркса, 68

РНБ Русский фонд

2006-4 29863

 
 

Оглавление диссертации Шитова, Наталья Сергеевна :: 2005 :: Казань

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

Глава 1 БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ВЕЩЕСТВ: ФАРМАКОКИНЕТИКА И БИОТРАНСФОРМАЦИЯ (Литературный обзор).

1.1 Фармакокинетические подходы к изучению генетически детерминированных биохимических процессов метаболизма лекарственных веществ.

1.2 Методы биофармацевтичекого анализа в оценке активности ферментов метаболизма лекарственных веществ.

1.3 Целенаправленная регуляция ферментативной активности ферментов.

Глава 2 ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1 Постановка задач исследования.

2.2 Аппаратура, объекты и техника эксперимента.

Глава 3 РАЗРАБОТКА МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТЕСТ-ПРЕПАРАТОВ ПРОЦЕССОВ АЦЕТИЛИРОВАНИЯ И ОКИСЛЕНИЯ В

БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ.

3.1 Спектрофотометрическое определение гидразида изоникотиновой кислоты в виде производного с метаванадатом аммония . 51 ^ 3.2 Спектрофотометрическое определение антипирина в слюне в г виде нитрозопроизводного.

Глава 4 МЕТОДЫ БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО АНАЛИЗА В ОЦЕНКЕ ГЕНЕТИЧЕСКИ ДЕТЕРМИНИРОВАННОЙ

ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ.

4.1 Разработка неинвазивных методов оценки активности N-ацетилтрансферазы. ф 4.2 Разработка неинвазивных методов определения активности микросомальных оксидаз печени человека на основе оценки содержания антипирина в слюне.

4.3 Оценка активности холинэстеразы крови человека при использо-^ вании спектрофотометрического детектирования аналитических реакций.

Глава 5 БИОФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ В ЦЕЛЕНАПРАВЛЕН-^ НОЙ РЕГУЛЯЦИИ ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ И ЕЕ

ОЦЕНКА ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ПАТОЛОГИЧЕСКИХ

СОСТОЯНИЯХ.

5.1 Влияние различных лекарственных средств на фармакокинетику тест-препаратов процесса ацетилирования.

5.2 Оценка активности генетически детерминированных ферментативных систем организма человека и их сопоставительный анализ.

5.3 Фармакокинетика тест-препаратов ацетилирования и окисления при различных патологических состояниях.

5.3.1 Генетически детерминированные процессы ацетилирования у больных с хирургическими инфекциями.

5.3.2 Фармакокинетика ацетилирования и окисления у больных сахарным диабетом 2 типа.

5.3.3 Оценка фенотипа ацетилирования у больных ангиной на фоне базисной терапии и приеме ксимедона.

 
 

Введение диссертации по теме "Фармацевтическая химия и фармакогнозия", Шитова, Наталья Сергеевна, автореферат

Актуальность темы. Для осуществления эффективного и безопасного применения лекарственных средств (JIC) необходимо всестороннее изучение механизма качественных и количественных изменений лекарственных веществ (JIB) в биологических жидкостях организма человека, а также оценка влияния различных факторов на фармакокинетику JIB при использовании современных методов биофармацевтического анализа.*

Генетически детерминированные особенности организма могут существенно влиять на все этапы фармакокинетики и метаболизма лекарственного препарата. В связи с этим совершенствование применения лекарственных препаратов включает индивидуальную оптимизацию режимов их дозирования на основе комплексной оценки фармакокинетических параметров и особенностей биотрансформации, а также проведение терапевтического мониторинга лекарств. При этом для решения комплекса проблем, связанных с разработкой новых методов биофармацевтического анализа ЛВ, весьма перспективным является использование фармакокинетических подходов для оценки генетически детерминированных процессов метаболизма лекарственных препаратов в организме человека.

Большинство JIC подвергается биотрансформации путем протекания окислительных процессов с участием генетически детерминированной ферментативной системы цитохромов Р450, а процессы метаболизма аминосо-держащих ЛВ в организме катализируются ферментом N-ацетилтрансфе-разой (NAT). В связи с этим особую значимость для биофармацевтических исследований приобретает изучение фармакокинетики ЛВ, являющихся тест-препаратами этих генетически детерминированных процессов. В тоже время биосубстраты являются сложными по составу матрицами, представляющими В руководстве диссертационной работой принимал участие доктор химических наук, член-корреспондент РАЕН, профессор Гармонов Сергей Юрьевич собой совокупность соединений различной природы.

Ряд факторов приводит к вариабельности фармакокинетических параметров JIC. К ним можно отнести индукцию и репрессию ферментов биотрансформации, а также формирование определенных фенотипов под действием ряда патологических факторов. Эти факторы позволяют прогнозировать пути регулирования фенотипов ацетилирования и окисления для оптимизации дозирования JIC на основе оценки индивидуальных фармакокинетических профилей, что существенно повысит эффективность и безопасность фармакотерапии различных заболеваний.

Цель работы состояла в разработке комплекса методов биофармацевтического анализа тест-препаратов генетически детерминированных ферментативных процессов ацетилирования и окисления в организме человека, а также оценке влияния различных факторов на фармакокинетику этих лекарственных веществ.

Диссертационная работа выполнялась при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (проект № 03-03-96241) и Академии наук Республики Татарстан (проекты 09-9.2-112/2003, 09-9.2-112/2004, 099.2-275/2005).

Научная новизна:

- на основании систематического исследования аналитических реакций тест-препаратов ацетилирования и окисления выявлены факторы повышения избирательности и чувствительности биофармацевтического анализа этих лекарственных веществ в биологических жидкостях организма человека;

- обоснованы и установлены условия аналитических определений в биофармацевтическом анализе гидразида изоникотиновой кислоты и антипирина, выработаны критерии выбора аналитических реагентов при дериватизации этих соединений;

- разработаны методы косвенного определения активности N-ацетилтрансферазы и цитохромов Р450 путем изучения фармакокинетики гидразида изоникотиновой кислоты и антипирина в слюне и моче при использовании спектрофотометрического детектирования их производных с аналитическими реагентами, также обосновано их использование для оптимизации фармакотерапии и в предиктивной медицине;

- впервые изучена фармакокинетика гидразида изоникотиновой кислоты при совместном приеме с иммуномодулятором ксимедоном, при этом выявлено индукционное влияние ксимедона на активность фермента N-ацетилтрансферазы;

- впервые установлены доза-зависимые и временные схемы введения ксимедона человеку с целью получения максимального эффекта индукции процессов ацетилирования;

- изучена фармакокинетика тест-препаратов ацетилирования и окисления при сахарном диабете 2 типа, у больных с хирургической инфекцией и ангинами, при этом установлены пути целенаправленного регулирования активности ферментов при этих патологических состояниях для оптимизации терапии;

- изучены закономерности соотношения фенотипов ацетилирования и окисления у здоровых людей, а также установлено достоверное повышение активности сывороточной холинэстеразы у сверхмедленных ацетиляторов по сравнению с другими типами ацетилирования.

Практическая значимость. Разработан комплекс методик установления фенотипа ацетилирования на основе спектрофотометрического определения содержания свободного гидразида изоникотиновой кислоты при экскреции с мочой из организма человека. Разработаны методики чувствительного и избирательного спектрофотометрического определения антипирина в слюне человека. Методы рекомендованы и апробированы в клинических условиях при оптимизации безопасной дозировки JIB, оценки риска интоксикации, побочных явлений при фармакотерапии.

Предложен новый индуктор NAT - отечественный иммуномодулятор ксимедон. Доза-зависимые и временные схемы введения ксимедона использованы в лечении сахарного диабета 2 типа, у больных с хирургической инфекцией и ангинами с целью получения оптимального лечебного эффекта.

Результаты работы используются в фармакокинетических исследованиях (Казанский государственный медицинский университет), для обеспечения медицинской защиты личного состава (Министерство обороны РФ) и внедрены в лечебную практику Республиканской клинической больницы Татарстана (Казань), Казанской городской инфекционной клинической больницы, поликлиники Казанского Научного Центра Российской академии наук.

Экспериментальные результаты и выводы на их основе использованы в учебном процессе Казанского государственного технологического университета в дисциплине "Контроль качества лекарственных препаратов".

На защиту выносится:

• Результаты исследования и подбор оптимальных условий спектрофото-метрического определения тест-маркеров ацетилирования и окисления с аналитическими реагентами.

• Методики биофармацевтического анализа гидразида изоникотиновой кислоты и антипирина в биологических жидкостях организма человека.

• Данные по фармакокинетике гидразида изоникотиновой кислоты и антипирина при их экскреции слюной и мочой в организме человека.

• Способы определения фенотипа ацетилирования и окисления при изучении фармакокинетики тест-препаратов гидразида изоникотиновой кислоты и антипирина в слюне и моче пациентов и результаты их применения в клинических условиях.

• Данные по фармакокинетике гидразида изоникотиновой кислоты при совместном приеме с иммуномодулятором ксимедоном и доза-зависимые и временные параметры индуцирующего эффекта ксимедона на активность N-ацетилтрансферазы.

• Данные по фармакокинетике тест-препаратов ацетилирования и окисления при сахарном диабете 2 типа, у больных с хирургической инфекцией и ангинами.

• Закономерности соотношения фенотипов ацетилирования и окисления у здоровых людей, а также активности сывороточной холинэстеразы у быстрых и медленных ацетиляторов.

Апробация работы. Основные результаты работы доложены на I Международной конференции «Молекулярная медицина и биобезопасность» (Москва, 2004), IV Международной конференции «Клинические исследования лекарственных средств» (Москва, 2004), II Всероссийском симпозиуме «Тест-методы химического анализа» (Саратов, 2004), II Международной научно-практической конференции «Экология: образование, наука, промышленность и здоровье» (Белгород, 2004), XII Национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2005), IV Терапевтическом форуме «Актуальные вопросы диагностики, лечения и профилактики наиболее распространенных заболеваний внутренних органов» (Тюмень, 2005), XIII Международной научной конференции «Ферменты микроорганизмов: структура, функции, применение» (Казань, 2005), VI Республиканской научной конференции «Актуальные экологические проблемы Республики Татарстан» (Казань, 2005).

Публикации: по материалам диссертации опубликовано 6 статей, 8 тезисов докладов и подана заявка на патент РФ.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения; литературного обзора; четырех глав экспериментальной части, в которых описана аппаратура, объекты, техника эксперимента и изложены результаты с их обсуждением; выводов; заключения; списка используемой литературы. В приложении представлены акты использования результатов диссертационной работы.

 
 

Заключение диссертационного исследования на тему "Биофармацевтический анализ генетически детерминированной ферментативной активности метаболических систем организма человека"

ВЫВОДЫ

1. Выявлены факторы повышения избирательности и чувствительности биофармацевтического анализа тест-препаратов генетически детерминированных процессов ацетилирования и окисления в биологических жидкостях организма человека. Обоснованы и установлены условия аналитических определений в биофармацевтическом анализе гидразида изоникотиновой кислоты и антипирина, выработаны критерии выбора аналитических реагентов при дериватизации этих лекарственных веществ в биологических жидкостях и использовании спектрофотометрического детектирования.

2. Разработаны методы косвенного определения активности N-ацетил-трансферазы и цитохромов Р450 путем изучения фармакокинетики гидразида изоникотиновой кислоты и антипирина в слюне и моче при использовании спектрофотометрического детектирования их производных с аналитическими реагентами различных классов. Обосновано использование методов биофармацевтического анализа для оптимизации фармакотерапии и в предиктивной медицине.

3. Впервые изучена фармакокинетика гидразида изоникотиновой кислоты при совместном приеме с иммуномодулятором ксимедоном, при этом выявлено индукционное влияние ксимедона на активность N-ацетилтрансферазы. Установлены доза-зависимые и временные схемы введения ксимедона человеку с целью получения максимального эффекта индукции процессов ацетилирования.

4. Устанвлены фармакокинетические параметры тест-препаратов ацетилирования и окисления при сахарном диабете 2 типа, у больных с хирургической инфекцией и ангинами. Выявлены пути целенаправленного регулирования активности ферментов при этих патологических состояниях для оптимизации применения лекарственных средств.

5. Проведена оценка соотношения фенотипов ацетилирования и окисления у здоровых людей, а также установлено достоверное повышение активности сывороточной холинэстеразы у сверхмедленных ацетиляторов по сравнению с другими типами ацетилирования.

124

ЗАКЛЮЧЕНИЕ Приведенные результаты, таким образом, показывают высокую эффективность использования косвенных методов определения ферментативной активности генетически детерминированных метаболических систем в биофармацевтических исследованиях лекарственных веществ. Важную роль играют с точки зрения чувствительности и селективности биофармацевтического анализа лекарственных веществ в биологических жидкостях организма человека реакции получения производных определяемых компонентов. Они расширяют возможности использования различных реакций дериватизации в биофармацевтическом анализе за счет усиления хромофорных и других свойств аналита.

Вариации методов оценки тест-препаратов ацетилирования и окисления, а также сывороточной холинэстеразы позволяют регулировать соотношение информативности и экономичности при биофармацевтическом анализе лекарственных веществ в матрице сложного состава.

Разработанный комплекс неинвазивных, доступных для практики методов оценки фенотипа ацетилирования и окисления может быть легко адаптирован к клиническим условиям и использован для разработки индивидуальных схем дозирования лекарств, ранней досимптоматической диагностики заболеваний, оценки риска побочных эффектов. При этом предложенные методы оценки биохимического фенотипа существенно дополняют молекулярно-генетические и цитогенетические аналитические технологии, а в ряде случаев служат им реальной альтернативой, поскольку проявление токсических и патологических эффектов является следствием фенотипи-ческих особенностей организма.

Полученные результаты указывают на перспективность дальнейшего развития работы в рамках использования комплекса разработанных методов для исследования влияния различных фармацевтических факторов на фармакокинетику тест-препаратов ацетилирования и окисления.

123

 
 

Список использованной литературы по фармакологии, диссертация 2005 года, Шитова, Наталья Сергеевна

1. Холодов J1.E. Клиническая фармакокинетика / JI.E. Холодов, В.П. Яковлев.- М.: Медицина, 1885. 464 с.

2. Куценко С.А. Основы токсикологии. Санкт-Петербург: Фолиант, 2004. -720 с.

3. Nebert D.W. Human drug-metabolizing enzyme polymorphisms: effects on risk of toxicity and cancer / D.W. Nebert, R.A. McKinnon, A. Puga // DNA Cell Biol. -1996.-V. 15.-P. 273 -280.

4. Evans D.A.P. Pharmacogenetics of Drug Metabolism. N.Y.: John Wiley and Sons Inc. - 1992.-34 p.

5. Kadlubar F.F. Biochemical individuality and its implications for drug and carcinogen metabolism: recent insights from acetyltransferase and cytochrome P4501A2 phenotyping and genotyping in humans // Drug Metab Rev. 1994. - V. 26.-P. 37-46.

6. Oesch F. The apparent ubiquity of epoxide hydrolase in rat organs / F. Oesch, H. Glatt, H. Schimassmann // Biochem. Pharmacol. 1977. - V. 26. - P. 603 - 607.

7. Nebert D.W. Ethnic and genetic differences in metabolism genes and risk of toxicity and cancer / D.W. Nebert, A.L. Roe // Sci. Total Environ. 2001. - V. 274. -P. 93 - 102.

8. Kohut A. Genetic polymorphism of enzymes and changes in the effect of drugs / A. Kohut, I. Kalina // Slovakofarma Rev. 1998. - V. 8. - № 4. - P. 141 - 146.

9. Краковский М.Э. Изучение in viva активности ферментов, метаболизирующих лекарственные вещества, при некоторых патологических состояниях / М.Э. Краковский, Аширметов А.Х. // Вопросы медицинской химии. 1985. - Т. 31. - Вып. 1. - С. 76 - 79.

10. Messina E.S. A major role for CYP2A6 in nicotine C-oxidation by human liver microsomes / E.S. Messina, R.F. Tyndale, E.M. Sellers // J. Pharmacol. Exp. Ther.- 1997.-V. 282.-P. 1608- 1614.

11. Omiecinski C.J. Human peripheral lymphocytes as indicators of microsomal epoxide hydrolase activity in liver and lung / C.J. Omiecinski, L. Aicher, R. Holubkov, H. Checkoway // Pharmacogenetics. 1993. - V. 3. - P. 150 - 158.

12. Miles J.S. Identification of the human liver citochrome P-450 responsible for coumarin 7-hydroxylase activity / J.S. Miles, A.W. McLaren, L.M. Forrester, M.J. Glancey, M.A. Lang, C.R. Wolf// Biochem. J. 1990. - V. 267. - P. 365 - 372.

13. Etter H. Rotation and interaction with epoxide hydrolase of P-450 in proteoliposomes / H. Etter, C. Richter, Y. Ohta, K.H. Winterhalter, H. Sasabe, S. Kawato //J. Biol. Chem. 1991. - V. 266. - P. 18600 - 18605.

14. Gonzalez F.J. Role of human cytochromes P450 in the metabolic activation of chemical carcinogens and toxins / F.J. Gonzalez, H.V. Gelboin // Drug Metab Rev. 1994.-V. 26.-P. 165 - 183.

15. Lancaster J.M. Microsomal epoxide hydrolase polymorphism as a risk factor for ovarian cancer / J.M. Lancaster, H.A. Browniee, D.A. Bell, A. Futreal, J.R. Marks, A. Berchuck, R.W. Wiseman, J.A. Taylor // Mol. Carcinogenesis. -1996. -V. 17.-P. 160- 162.

16. Iyer L. Pharmacogenetics and cancer chemotherapy / L. Iyer, M.J. Ratain // European J. Cancer. 1998. - V. 34. - № 10. - P. 1493 - 1499.

17. Сергеев В.И. Очерки биохимической фармакологии / В.И. Сергеев, П.А. Галенко-Ярошевский, H.JI. Шимановский- М: РЦ Фармедонф, 1996. 384 с.

18. Макаров В.А. Фармакология сульфаниламидных препаратов. Фармакокинетика, фармакодинамика, химиотерапия. / В.А. Макаров, А.Н. Кудрин, В.П. Черных, С.М. Дроговоз Киев: Здоров'я, 1982. - 144с.

19. Мирошниченко И.И. Основы фармакокинетики. М.: издательский дом ГЭОТАР-МЕД, 2002. - 200 с.

20. Каркищенко И.И. Фармакокинетика / И.И. Каркищенко, В.В. Хоронько, С.А. Сергеева, В.И. Каркищенко. Ростов-на-Дону: Феникс, 2001. - 284с.

21. Routledge P.A. Pharmacokinetics in children // J. Antimicrob. Chemother. -1994.-V. 34 (A).-P. 19-24.

22. Соловьев В.Н. Фармакокинетика: Руководство / В.Н. Соловьев, А.А. Фирсов, В.А. Филов. М.: Медицина, 1980. - 347 с.

23. Фирсов А.А. Клиническая фармакокинетика и оптимальный режим внутривенного введения ампицилина у детей / А.А. Фирсов, Г.Ф. Панкова // Антибиотики. 1981. - № 2. - С. 114 - 118.

24. Gonzalez F.J. Human cytochromes P450: problems and prospects // Trends Pharmacol Sci. 1992.-V. 13.-P. 346 - 352.

25. Gonzalez F.J. Cytochromes P450 expression systems / F.J. Gonzalez, K.R. Korzekwa // Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 1995. - V. 35. - P. 369 - 390.

26. Joseph P. NAD(P)H: quinone oxidoreductase 1 (DT-diaphorase): expression, regulation and role in cancer / Joseph P., Xie Т., Xu Y., Jaiswal A.K. // Oncol. Res. 1994. - V. 6. - P. 525 - 532.

27. Oesch F. Mammalian epoxide hydrolases: Inducible enzymes catalyzing the inactivation of carcinogenic and cytotoxic metabolites derived from aromatic and olefinic compounds // Xenobiotica. 1973. - V. 3. - P. 305 - 340.

28. Rosvold E.A. Identification of an NAD(P)H:quinone oxidoreductase polymorphism and its association with lung cancer and smoking / E.A. Rosvold, K.A. McGlynn, E.D. Lustbader, K.H. Buetow // Pharmacogenetics. 1995. - V. 5. -P. 199-206.

29. Guengerich F.P. Cytochromes P450 of human liver. Classification and activity profiles of the major enzymes. Advances in drug metabolism in man. Luxembourg,

30. Office for the Official Publications of the European Communities, 1995. P. 179 -231.

31. Yamano S. CYP2A3 gene product catalyes, coumarin 7-hydroxylation in human liver microsomes / S. Yamano, J. Tatsuno, F.J. Gonzales // Biochemistry. -1990.-V. 29.-P. 1322 1329.

32. Kupfer A. Pharmacogenetics of mephenytoin: a new drug hydroxylation polymorphisms / A. Kupfer, R. Presig // Europ. J. Clin. Pharmacol. 1984. - V. 26. -P. 753 -677.

33. Rausy J.L. Risk assessment: toxicity from chemical exposure resulting from enhanced expression of CYP2E1 // Toxicology. 1995. - V. 105. - P. 217 - 223.

34. McCracken N.V. Cotinine formation cDNA-expressed human cytochrome P450 / N.V. McCracken, S. Cholerton, J.R Idle // Med. Sci. Res. 1992. - V. 20. -P. 877 - 878.

35. Skjelbo E. Inhibitors of imipramine metabolism by human liver microsomes / E. Skjelbo, K. Brosen // Brit. J. Clin. Pharmacol. 1992. - V. 34. - P. 556 - 561.

36. Scott J. Pharmacogenetics of tolbutamide metabolism in humans / J. Scott, P.L. Poffenbarger // Diabetes. 1978. - V. 28. - P. 41 - 51.

37. Рудая H.B. Состояние системы ферментов микросомального окисления в зависимости от ацетилтрансферазной активности / Н. В. Рудая, О. Е. Сиваченко // Укр. биохим. журн. 1993. - Т. 65. - № 6. - С. 108 - 110.

38. Гуляева Л.Ф. Ферменты биотрансформации ксенобиотиков в химическом канцерогенезе: Аналитический обзор / Л.Ф. Гуляева, В.А. Вавилин, В.В. Ляхович Новосибирск: ГПНТБ, 2000 - 90 с.

39. IPCS Environmental Health Criteria 119: Principles and methods for the assessment of nephrotoxicity associated with exposure to chemicals. Geneva: World Health Organization, International Programme on Chemical Safety. -1991. -266 p.

40. Goldstein J.A. Biochemistry and molecular biology of the human CYP2C subfamily / J.A. Goldstein, S.M.F. de Morais // Pharmacogenetics. 1994. - V. 4. -P. 285 - 300.

41. Guengerich F.P. Catalytic selectivity of human cytochrome P450 enzymes: relevance to drug metabolism and toxicity // Toxicol. Lett. 1994. - V. 70. - P. 133 - 138.

42. Goldstein J.A. Biochemistry and molecular biology of the human CYP2C subfamily / J.A. Goldstein, S.M.F. de Morais // Pharmacogenetics. 1994. - V. 4. -P. 285 - 299.

43. Blum M. Human arylamine N-acetyltransferase genes: isolation, chromosomal localization, and functional expression / M. Blum, D.M. Grant, W. McBride, M. Heim, U.A. Meyer // DNA Cell. Biol. 1990. - V. 9. - P. 193 - 203.

44. Гуляева Л.Ф. Микросомная монооксигеназная система живых организмов в биомониторинге окружающей среды: Аналитический обзор / Л.Ф. Гуляева, А.Ю. Гришанова, О.А. Громова. Новосибирск: ГПНТБ, 1994 - 98 с.

45. Evans D.A. N-acetyltransferase. Pharmacogenetics of drug metabolism. New York: Pergamon Press, 1992. - P. 95 - 178.

46. Grant D.M. Monomorphic and polymorphic human arylamine N-acetyltransferases: a comparison of liver isozymes and expressed products of twocloned genes / D.M. Grant, M. Blum, M. Beer, U.A. Meyer // Mol. Pharmacol. -1991.-V. 39.-P. 184-191.

47. Grant D.M. Detection of a new polymorphism of human arylamine N-acetyltransferase NAT1 using p-aminosalicylic acid as an in vivo probe / D.M. Grant, P. Vohra, Y. Avis, A. Ima // J. Basic Clin. Physiol. Pharmacol. 1992. - V. 3.-P. 244-238.

48. Grant D.M. Monomorphic and polymorphic human arylamine N-acetyltransferases: a comparison of liver isozymes and expressed products of two cloned genes / D.M. Grant, M. Blum, M. Beer, U.A. Meyer // Mol. Pharmacol. -1991.-V. 39.-P. 184- 191.

49. Алексеев Ю.В. Исследование общей ацетилирующей способности организма у больных розацеа / Ю.В. Алексеев, С.П. Гладких, A.JL Машкиллейсон, Р.Д. Алтынбаева, O.JI. Евстафьева,,В.С. Мыскин // Вестник дерматологии и венерологии. 1985. - № 10. - С. 21 - 22.

50. Sugamori K.S. Generation and Functional Characterization of Arylamine N-Acetyltransferase Natl/Nat2 Double-Knockout Mice / K.S. Sugamori, S. Wong, A. Gaedigk, V. Yu, H. Abramovici, R. Rozmahel, D.M. Grant / Mol. Pharmacol. -2003.-V. 64.-P. 170-179.

51. Hearse D.J. Multiple N-acetyltransferases and drug metabolism. Tissue distribution, characterization and significance of mammalian N-acetyltransferase / D.J. Hearse, W.W. Weber // Biochem J. 1973. - V. 132. - P. 519 - 526.

52. Lopez T.G. Isoniazid acetylation, its relation to genetic and environmental altitude factors / T. G. Lopez, M.L.N, de Claure // Arch. Biol. Med. Exp. (Santiago). 1987. -V. 20. - № 1. - P. 13 - 19.

53. Augustynowicz-Kopec E. Bioavailability of isoniazid in healthy volunteers-fast and slow INH acetylators / E. Augustynowicz-Kopec, Z. Zwolska, H. Niemirowska-Mikulska // Pneumonolto Alergolio Pol. 2002. - V. 70. - №3-4.-P. 167 - 179.

54. Машковский М.Д. Лекарственные средства. T.2. -M.: Новая Волна, 2000. 648с.

55. Проблемы медицинской генетики. М.: Медицина, - 1970. - 256 с.

56. Clark D.W. Genetically determined variability in acetylation and oxidation. Therapeutic implications // Drugs. 1985. - V. 29. - № 4. - P. 342 - 375.

57. Kalov W. Pharmacodenetics: Heredi ty and the Response to Grunds. -Philadelphia. 1962. - 224 p.

58. Evans D.A.P. The association of the slow acetylator phenotype with bladder cancer / D.A.P. Evans, L.C. Eze, E.J. Whitney // J. Med. Genet. 1983. - V. 20. -P. 330 -333.

59. Grant D.M. Detection of a new polymorphism of human arylamine N-acetyltransferase NAT1 using p-aminosalicylic acid as an in vivo probe / D.M. Grant, P. Vohra, Y. Avis, A. Ima // J. Basic. Clin. Physiol. Pharmacol. 1992. - V. 3. - P. 244 - 246.

60. Grant D.M. Human acetyltransferase polymorphisms / D.M. Grant, N.C. Hughes, S.A. Janezic, G.H. Goodfellow, H.J. Chen, A. Gaedigk, V.L. Yu, R. Grewal // Mutat. Res. 1997. - V. 376. - P. 61 - 70.

61. Lin H. Ethnic distribution of slow acetylator mutations in the polymorphic N-acetyltransferase (NAT2) gene / H. Lin, C-Y. Han, B.K. Lin, S. Hardy // Pharmacogenetics. 1994. -V. 4. - P. 125 - 134.

62. London S.J. Lung cancer risk in relation to the CYP2C9 genetic polymorphism among Caucasians in Los Angeles County / S.J. London, T. Sullivan-Klose, A.K. Daly, J.R. Idle // Pharmacogenetics. 1997b. - V. 7. - P. 401 - 404.

63. Nebert D.W. Pharmacogenetics. Principles of drug action. The basis of pharmacology / D.W. Nebert, W.W. Weber. New York: Churchill Livingstone Inc, 1990.-469 p.

64. Grant D.M. Human acetyltransferase polymorphisms / D.M. Grant, N.C. Hughes, S.A. Janezic, H.G. Goodfellow, J.H. Chen, A. Gaedigk, V.L. Yu, R. Grewae // Mutation Research. 1997. - V. 376. - P. 61 - 70.

65. Hein D.W. Rodent models of the human acetilation polymorphism: Comparisons of recombinant acetiltransferases / D.W. Hein, M.A. Doll, A.J.

66. Fretland, К. Gray, A.C. Deitz, Y. Feng, W. Jiang, T.D. Rustan, S.L. Satran, T.R. Wilkie // Mutation Research. 1997. - V. 376. - P. 101 - 106.

67. Лильин Е.Г. Ацетилирование сульфадимезина в старческом возрасте / Е.Г. Лильин, В.А. Мескин, М.М. Ванюков, М.П. Корсунская, Л.В. Тарлычева // Хим. фарм. журн. 1981. - № 6. - С. 16 - 17.

68. Asprodini Е.К. Determination of N-acetylation phenotyping in a Greek population using caffeine as a metabolic probe / E.K. Asprodini, E. Zifa, I. Papageorgiou, A. Benakis // Eur. J. Drug. Metab. Pharmacokinet. 1998. - V. 23.-№4.-P. 501 -506.

69. Погорельцев В.И. Основы клинической фармакогенетики: учебное пособие для студентов, интернов, субординаторов и ординаторов / В.И. Погорельцев, С.Ю. Гармонов, Д.А. Валимухаметова- Казань: КГМУ, 1998. -42 с.

70. Bouchardy С. N-acetyltransferase NAT1 and NAT2 genotypes and lung cancer risk / C. Bouchardy, K. Mitrunen, H. Wikman, K. Husgafvel-Pursiainen, P. Dayer, S. Benhamou, A. Hirvonen // Pharmacogenetics. 1998. - V. 8. - № 4. - P. 291 -298.

71. Cheng K.C. Recombinational hotspot activity of Chi-like sequences / K.C. Cheng, H.V. Gelboin, B.J. Song // J. Biol. Chem. 1984. - V. 259. - P. 122 - 179.

72. Timbrell J.A. Metabolism of isoniazide / Timbrell J.A., Wright J.M., Baillie Th.A. // Clin. Pharmacol. Ther. 1977. - V. 22. - P. 602.

73. Колла В.Э. Фармакология и химия производных гидразина / В.Э. Колла, И.С. Бердинский. Йошкар-Ола: Марийск. кн. изд-во, 1976. - 264 с.

74. Баранов B.C. Геном человека и гены предрасположенности / B.C. Баранов, Е.В. Баранова, Т.Э. Иващенко, М.В. Асеев. — СПб.: Интермедика, 2000. 272 с.

75. Gonzalez F.J. Pharmacogenetic phenotyping and genotyping: present status and future potential / F.J. Gonzalez, J.R. Idle // Clin. Pharmacokinet. 1994. - V. 26. - P. 59 - 70.

76. Nebert D.W., Carvan M. J. Ecogenetics: from ecology to health / D.W. Nebert, M.J. Carvan// Toxicol. Industr. Hlth. 1997. - V. 13. - P. 163 - 192.

77. Nebert D.W. Pharmacogenetics and pharmacogenomics: why is this relevant to the clinical geneticist? // Clin. Genet. 1999. - V. 56. - P. 247 - 258.

78. Nebert D.W. The Ah locus: genetic differences in toxicity, cancer, mutation and birth defects // CRC Crit. Rev. Toxicol. 1989. - V. 20. - P. 153 - 174.

79. Середенин С.Б. Фармакологическая защита генома / С.Б. Середенин, А.Д. Дурнев. М: ВИНИТИ, 1992. - 386 с.

80. Hein D.W. N-acetyltransferase genetics and their role in predisposition to aromatic and heterocyclic amine-induced carcinogenesis // Toxicology Letters. -2000. V. 112 - 113. - P. 349 - 356.

81. Autrup H. Genetic polymorphisms in human xenobiotica metabolizing enzymes as susceptibility factors in toxic response // Mutation Research. Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis. 2000. - V. 464. - P. 65 - 76.

82. Weber W.W. Pharmacogenetics. New York-Oxford: Oxford University Press, 1997.-286 p.

83. Kadlubar F.F. Biochemical individuality and its implications in drug and carcinogen metabolism. Recent insights from N-acetyltransferase and cytochrome P450 1A2 phenotyping and genotyping in humans // Drug Metab. Dispos. 1994. -V. 26.-P. 37-46.

84. Мисийчук Ю.И. Экологические аспекты применения 1,1-диметилгидразина / Ю.И. Мисийчук, Г.Ф. Терещенко, Г.П. Лебедев // Экологическая химия. 1998. - №7(1). - С. 42 - 47.

85. Kim R.B. Interindividual variability of chlorozoxazone 6-hydroxilation in men and women and its relationship to CYP2E1 genetic polymorphisms / R.B. Kim, D. Shea, G.R. Wilkinson// Clin. Pharmacol. Ther. 1995. - V. 57. - P. 645 - 655.

86. Камышников B.C. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике. 2-е изд. перераб. и доп. - М.: МЕДпресс-информ, 2004. - 911 с.

87. Шубин П. Н. Изоферменты холинэстераз крови человека и их генетический контроль / П. Н. Шубин, Э. А. Ефимцева // Генетика. 1989. -Т. 25.-№8.-С. 1480- 1487.

88. Андрианов А. К. Ковалентная иммобилизация холинэстераз в полиакриламидных гидрогелях / А. К. Андрианов, В. В. Чупов, Л. И. Валуев, Н. А. Платэ // Докл. АН СССР. 1991. - Т. 318. - № 5. - С. 1250 - 1253.

89. Муратов И. Д. Способ оценки активности тканевой ацетилхолинэстеразы при диагностике болезни Гиршпрунга у новорожденных / И. Д. Муратов, Т. И. Вавилова, Т. В. Красовская // Вестн. хирургии им. И. И. Грекова. 1992. - Т. 148. - № 4 - 6. - С. 73 - 75.

90. Мартынюк Т.В. Активность ренин-ангиотензин-альдостероновой системы и уровень вазопрессина у пациентов с первичной легочной гипертонией / Т.В. Мартынюк, И.Е. Чазова, В.П. Масенко, В.Н. Волков, Ю.Н. Беленков // Тер. арх. 1998. - № 4. - С. 33 - 36.

91. Dor F. Validity of biomarkers in environmental health studies: The case of PAHs and Benzene / F. Dor, W. Dab, P. Empereur-Bissonnet, D. Zmirou //Critical Rev. Tox. 1999. -V. 29. - P. 129 - 168.

92. Dor F. Validity of biomarkers in environmental health studies: The case of PAHs and Benzene / Dor F., Dab W., Empereur-Bissonnet P., Zmirou D. // Critical Rev. Tox. 1999. - V. 29. - P. 129 - 168.

93. Evans W.E. Pharmacogenomics: translating functional genomics into rational therapeutics / W.E. Evans, M.V. Relling // Science. 1999. - V. 286. - P. 487 -491.

94. Bois F.Y. Modeling human interindividual variability in metabolism and risk: The example of 4-aminobiphenyl / F.Y. Bois, G. Krowech, L. Zeise // Risk Analysis.-1995.-V. 15. P. 205 - 213.

95. Краковский М.Э. Методы оценки активности монооксигеназной ферментативной системы (обзор литературы) / М.Э. Краковский, А.Х. Аширметов // Лаб. дело. 1990. - №10. - С. 21 - 26.

96. Weber J.L. Human DNA polymorphisms and methods of analysis // Curr. Opin. Biotech. 1990. - № 1. - P. 166 -171.

97. Zhang Z. Quantitative liquid chromatography/mass spectrometry/mass spectrometry warfarin assay for in vitro cytochrome P450 studies / Z. Zhang, B.M. King, Y.N. Wong // Analyt. Biochem. 2001. - V. 298. - № 1. - P.40 - 49.

98. Nakamura K. Coumarin substrates for cytochrome P450 2D6 flurescence assays / K. Nakamura, I.H.Hannal, H. Cai, Y. Nishimura, K.M. Williams, F.P. Guengerich // Analyt. Biochem. 2001. - V. 292. - № 2. - P. 280 - 286.

99. Аширметов A.X. Использование антипирина для оценки активности ферментов монооксигеназной системы печени (обзор литературы) / А.Х. Аширметов, М.Э Краковский // Лаб. дело. 1990. - №1. - С. 16-20.

100. Симонов Е.А. Наркотики. Методы анализа на коже, в ее придатках и выделениях / Е.А. Симонов, Б.Н. Изотов, А.В. Фесенко М.: Анахарсис, 2000. - 130 с.

101. Relling M.V. Racial and gender differences in N-acetyltransferase, xanthine oxidase, and CYP1A2 activities / M.V. Relling, J.S. Lin, G.D. Ayers, W.E. Evans // Clin. Pharmacol. Ther. 1992. - V. 52. - № 6. - P. 643 - 658.

102. Peter R. Hydroxylation of chlorzoxazone as a specific probe for human liver cytochrome P-450IIE1 / R. Peter, R. Bocker, P.H. Beaune, M. Iwasaki, F.P. Guengerich, C.S. Yang // Chem. Res. Toxicol. 1990. - V. 3. - P. 566 - 573.

103. Abernethy D.R. High-performance liquid chromatographic determination of antipyrine metabolites / Abernethy D.R., Greenblatt D.I., Zumbo A.M. // J. Chromatogr. 1981. - V. 223. - P. 432.

104. Семенюк A.B. Метод оценки активности ферментов / А.В. Семенюк, ЛИ. Колесникова, В.Ю. Куликов, С.В. Неделькина, Р.И. Салганик // Лаб. дело. 1982.-№ 10.-С. 31 -33.

105. Rivas A. Human exposure to endocrine disrupting chemicals: assessing the total estrogenic xenobiotic burden / A. Rivas, N. Olea, F. Olea-Serrano // Trends in Analyt. Chem. - 1997. - V. 16. - P. 613 - 625.

106. Соради И. Основы и педиатрические аспекты фармакогенетики. -Будапешт: изд- во АН Венгрии, 1984. 187 с.

107. Veenstra-VanderWeele J. Pharmacogenetics and the serotonin system: initial studies and future directions / J. Veenstra-VanderWeele, G.M. Anderson, E.H. Cook // European J. Pharmacology. 2000. - V. 410. - P. 165 - 181.

108. Niewinski P. Importance of genetically determined acetylation of drugs and xenobiotics in pathogenesis of neoplasms / P. Niewinski, K. Orzechowska-Juzwenko // Pol. Merkuriusz. Lek. 1997. - V. 2. № 9. - P. 231 - 235.

109. Furet Y. Clinical relevance of N-acetytransferase type 2 (NAT2) genetic polymorphism / Y. Furet, Y. Bechtel, C. Le Guellec, P.R. Bechtel, E. Autret-Leca, G. Paintaud // Therapie. 2002. - V. 57. - № 5. - P. 427 - 431.

110. Gaitonde Ch. Rapid liquid chromatographic method for the estimation of isoniazid and pyrazinamide in plasma and urine / Ch. Gaitonde, P.V. Pathak // J.Chromatogr. Biomed. Appl. 1990. - V. 532. - № 2. - P. 418 - 423.

111. Холодов JI.E. Клиническая фармакокинетика и фармакодинамика новокаинамида и его метаболита N-ацетилновокаинамида / JI.E. Холодов, М.Г. Глезер, А.В. Соколов // Кардиология. 1981. - № 11. - С. 119 - 126.

112. Евгеньев М.И. Спектрофотометрическое и хроматографическое определение лекарственных веществ в биологических субстратах / М.И. Евгеньев, С.Ю. Гармонов, И.И. Евгеньева, Х.И. Куртбелялова // Журн. аналит. химии. 1998. - Т. 53. - № 1. - С. 101 - 106.

113. Евгеньев М.И. Определение фенотипа ацетилирования для терапевтического мониторинга лекарственных средств / М.И. Евгеньев, С.Ю. Гармонов, В.И. Погорельцев, Х.И. Куртбелялова, Д.А. Валимухаметова // Клин. лаб. диагностика. 1996. - № 5. - С. 24 - 27.

114. Гармонов С.Ю. Перспективные методы оценки генетически детерминированной химической чувствительности организма человека / С.Ю. Гармонов, М.И. Евгеньев, И.Е. Зыкова // Химическая и биологическая безопасность. 2003. - № 11 - 12. - С. 3 - 16.

115. Евгеньев М.И. Метод определения гидразина в природных водах в виде 5,7-динитробензофуразанового производного / М.И. Евгеньев, С.Ю. Гармонов, Л.Ш. Шакирова, В.И. Погорельцев // Хим. фарм журнал. 2000. -Т. 34.-№ 11.-С. 5-8.

116. Буловская Л.Н. Определение фенотипа N-ацетилтрансферазной активности / Л.Н. Буловская, Г.Н. Борисенко, О.А. Дробаченко, Г.П. Курбатова, В.В. Иванова // Лаб. дело. 1990. - № Ю. - С. 28 - 30.

117. Гребенник Л.И. Об определении производных гидразида изоникотиновой кислоты и продуктов их превращения в организме // Проблемы туберкулеза. 1961. - № 4. - С. 69 - 73.

118. Джорджеску П. Биохимические методы диагноза и исследования / П. Джорджеску, Е. Пэунеску.- Бухарест: Медицинское издательство, 1963. 500 с.

119. Методы экспериментальной химиотерапии / Под ред. Г.Н.Першина. -М.: Медгиз, 1959.-508 с.

120. Pande J.N. Acetylator status, drug metabolism and disease / J.N. Pande, A. Pande, S.P. Singh //Natl. Med. J. India. 2003. - V. 16. - № 1. - P. 24 - 26.

121. Kaufmann G.R. N-acetyltransferase 2 polymorphism in patients infected with human immunodeficiency vims / G.R. Kaufmann, M. Wenk, W. Taeschner, B.

122. Peterli, К. Gyr, U.A. Meyer, W.E. Haefeli // Clin. Pharmacol. Ther. 1996. - V. 60.-№ l.-P. 62-67.

123. Nyeki A. NAT2 and CYP1A2 phenotyping with caffeine: head-to-head comparison of AJFMU vs. AAMU in the urine metabolite ratios / A. Nyeki, T. Buclin, J. Biollaz, L.A. Decosterd // Br. J. Clin. Pharmacol. 2003. - V. 55. - № 1. -P. 62-67.

124. Wenk M. Effect of St John's wort on the activities of CYP1A2, CYP3A4, CYP2D6, N-acetyltransferase 2, and xanthine oxidase in healthy males and females / M. Wenk, L. Todesco, S. Krahenbuhl // Br. J. Clin. Pharmacol. 2004. -V. 57. - № 4. - P. 495 - 499.

125. Абакшина С.А. Определение мочевой кислоты в сыворотке крови и моче вольтамперометрическим методом / Абакшина С.А., Анисимова JI.C., Белихмаер Я.А., Манвейлер Н.Ф. // Клин. лаб. диагностика. 1994. - № 5. -С.41 -42.

126. Франке 3. Химия отравляющих веществ. Т. 2 / Франке 3., Франц П., Варнке В. М.: Химия, 1973. - 482 с.

127. Хегай М.Д., Доброхотова Е.Г. Потенциометрическое определение активности холинэстераз в крови и тканях // Лаб. дело. 1990. - №10. - С. 26 -28.

128. Методы клинических лабораторных исследований: Учебник / Под ред. B.C. Камышникова. 2-е изд. перераб. и доп. - Минск.: Беларус. наука, 2003. -512 с.

129. Goodall R. Association of Clinical Biochemists Analytical Investigations Standing Committee. Cholinesterase: phenotyping and genotyping // Ann Clin Biochem. 2004. - V. 41. - № 2. - P. 98 - 110.

130. Гадаскина И. Д. Превращения и определение промышленных органических ядов в организме / И.Д. Гадаскина, В.А. Филов Д.: Медицина, Ленингр. Отделение, 1971. - 303 с.

131. Yen Т. Butyrylcholinesterase (ВСНЕ) genotyping for post-succinylcholine apnea in an Australian population / T. Yen, B.N. Nightingale, J.C. Burns, D.R. Sullivan, P.M. Stewart // Clin. Chem. 2003. - V. 49. - № 8. - P. 1297 - 1308.

132. Picheth G. An improved method for butyrylcholinesterase phenotyping / G. Picheth, C. Fadel-Picheth, S.L. Primo-Parmo, E.A. Chautard-Freire-Maia, M.M. Vieira // Biochem. Genet. 1994. - V. 32. - № 3-4. - P. 83 - 89.

133. Pantuck EJ. Plasma cholinesterase: gene and variations // Anesth Analg. -1993. V. 77, - № 2. - P. 380 - 386.

134. Kovarik Z. An improvement in segregation of human butyrylcholinesterase phenotypes having the fluoride-resistant variants / Z. Kovarik, V. Simeon-Rudolf // Arh. Hig. Rada Toksikol. 2003. - V. 54. - № 4. - P. 239 - 244.

135. Jensen F.S. Identification of human plasma cholinesterase variants in 6,688 individuals using biochemical analysis / F.S. Jensen, L.T. Skovgaard, J. Viby-Mogensen // Acta Anaesthesiol. Scand. 1995. - V. 39. - № 2. - P. 157 - 162.

136. La Du B.N. Phenotypic and molecular biological analysis of human butyrylcholinesterase variants / B.N. La Du, C.F. Bartels, C.P. Nogueira, A. Hajra, H. Lightstone, A. Van der Spek, O. Lockridge // Clin. Biochem. 1990. - V. 23. -№5.-P. 423 -431.

137. Pontes Z.B. Acetylation phenotypes and biological variation in a French Caucasian population / Z.B. Pontes, M. Vincent-Viry, R. Gueguen, M.M. Galteau, G. Siest // Eur. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 1993. - V. 31. - № 2. - P. 59 - 68.

138. Регистр лекарственных средств России. Энциклопедия лекарств. М.: Медицина, 2001. - 1503 с.

139. Palmer J.L. An interaction between the cytochrome P450 probe substrates chlorzoxazone (CYP2E1) and midazolam (CYP3A) / J.L. Palmer, R.J. Scott, A. Gibson, M. Dickins, S. Pleasance // Br. J. Clin. Pharmacol. 2001. - V. 52. - № 5. -P. 555 -561.

140. Frye R.F. Effect of chronic disulfiram administration on the activities of CYP1A2, CYP2C19, CYP2D6, CYP2E1, and N-acetyltransferase in healthyhuman subjects / R.F. Frye, R.A. Branch // Br. J. Clin. Pharmacol. 2002. - V. 53.- № 2. P. 155 - 162.

141. Hartmann M. Pantoprazole lacks induction of CYP1A2 activity in man / M. Hartmann, K. Zech, H. Bliesath, V.W. Steinijans, H. Koch, W. Wurst, H. Mascher // Int. J. Clin. Pharmacol. Ther. 1999. - V. 37. - № 4. - P. 159 - 164.

142. Rothen J.P. Acetaminophen is an inhibitor of hepatic N-acetyltransferase 2 in vitro and in vivo / J.P. Rothen, W.E. Haefeli, U.A. Meyer, L. Todesco, M. Wenk // Pharmacogenetics. 1998. - V. 8. - № 6. - 553 - 559.

143. Макаров В. А. Зависимость терапевтической эффективности сульфаниламидов от их метаболизма / В.А. Макаров, А.Н. Кудрин // Тер. арх.- 1978. Т. 50. - № 1. - С. 99 - 102.

144. Макаров В.А. О рациональном приеме сульфаниламидов внутрь / В.А. Макаров, А.Н. Кудрин // Тер. арх. 1978. - Т. 50. - № 3. - С. 82 - 87.

145. Макаров В. А. Зависимость терапевтической эффективности сульфаниламидов от связи их с белками и скорости выведения из организма / В.А. Макаров, А.Н. Кудрин // Сов. мед. 1978. - № 3. - С. 117 - 122.

146. Макаров В.А. Влияние фенобарбитала и ингибиторов энергетического обмена на всасывание и ацетилирование норосульфазола в желудочно-кишечном тракте крыс / В.А. Макаров, А.Н. Кудрин // Фармация. 1976. - Т. 25.-№6.-С. 38-41.

147. Макаров В.А. Ацетилирование и выведение с мочой норсульфазола у больных желудочно-кишечными заболеваниями разных возрастных групп / В.А. Макаров, А.Г. Саакян // Фармакол. и токсикол. 1979. - Т. 42. - № 5. - С. 531 -533.

148. Макаров В.А. Всасывание и ацетилирование сульфаниламидов при экспериментальной гиперлипидемии у крыс и клеточная регуляция процессаацетилирования / В.А. Макаров, Ю.К. Василенко, И.В. Суетина // Фармакол. итоксикол. 1981.-Т. 44. - № 1.-С. 109-114.

149. Trepanier E.F. Absence of effect of terbinafine on the activity of CYP1A2, NAT-2, and xanthine oxidase / E.F. Trepanier, A.N. Nafziger, G.L. Kearns, A.D. Kashuba, G.W. Amsden // J. Clin. Pharmacol. 1998. - V. 38. - № 5. - P. 424 -428.

150. Evans R.T. Cholinesterase phenotyping: clinical aspects and laboratory applications // Crit. Rev. Clin. Lab. Sci. 1986. - V. 23. - № 1. - P. 35 - 64.

151. Франке 3. Химия отравляющих веществ. Том 1 / Перевод с нем. — М.: Химия, 1973.-440 с.

152. Lockridge O. Pesticides and susceptible populations: people with butyrylcholinesterase genetic variants may be at risk / O. Lockridge, P. Masson // Neurotoxicology. 2000. - V. 21. - № 1 - 2. - P. 113 - 126.

153. Schwartz HJ. In vitro competitive inhibition of plasma cholinesterase by cocaine: normal and variant genotypes / H.J. Schwartz, D. Johnson // J. Toxicol. Clin. Toxicol. 1996. - V. 34. - № 1. - P. 77 - 81.

154. Festing M.F.W. Experimental approaches to the determination of genetic variability // Toxicology Letters. 2001. - V. 120. - P. 293 - 300.

155. Miller C. S. Chemical sensitivity: symptom, syndrome or mechanism for disease? //Toxicology. 1996. - V. 111. - P. 69 - 86.

156. Шарнин Г.П. Способ получения 4-хлор-5,7-динитробензофуразана / Г.П. Шарнин, Ф.С. Левинсон, С.А. Акимова, Р.Х. Хасанов. А.С. 657025 (СССР), опубл. БИ №14. 1979.

157. Лакин Г.Ф. Биометрия // М.: «Высшая школа», 1973. - 343 с.

158. Гордон А. Спутник химика: Физико-химические свойства, методики, библиография / А. Гордон, Р. Форд. М.: Мир, 1976. - 544 с.

159. Погорельцев В.И. Клинико-экспериментальное изучение фармакокинетики и фармакодинамики ксимедона: Автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 1991. - 20 с.

160. Юсупов Р.А. Сложные равновесия в системе Pb(II) Н20 - ОН- // Журн. физической химии // Р.А. Юсупов, Р.Ф. Абзалов, Н.И. Мовчан, С.Г. Смердова. - 2000. - Т. 74. - № 4. - С. 625 - 629.

161. Luque de Castro M.D. Flow-injection analysis of pharmaceuticals / M.D. Luque de Castro, M. Valcarcel // J. Pharm. And Biomed. Anal. 1989. - V.7. - № 12.-P. 1291 - 1300.

162. Gorog S. The changing face of chemical derivatization in pharmaceutical and biomedical analysis //Fresenius J. Anal. Chem. -1998. V. 362. - P. 4 - 11.

163. Luque de Castro M.D. Flow injection analysis of drugs / M.D. Luque de Castro, M. Valcarel // J. Pharm.Biomed. Anal. 1990. - V. 8. - P. 329 - 335.

164. Barnett N. Sequential injection analysis: an alternative approach to process analytical chemistry / N. Barnett, C. Lenehan, S. Lewis // Trends in Anal. Chem. -1999. V. 18. - № 5. - P. 346 - 352.

165. Максютина Н.П. Методы анализа лекарств / Н.П. Максютина, Ф.Е. Каган, JI.A. Кириченко. К.: Здоровье, 1984. -224 с.

166. Государственная фармакопея СССР. М.: Медицина, 1987. - 333 с.

167. Руководство к лабораторным занятиям по фармацевтической химии / Под ред. А.П. Арзамасцева. М.: Медицина, 1995. - 320 с.

168. Коренман И.М. Фотометрический анализ. Методы определения органических соединений М.: Химия, 1970. - 343 с.

169. Полюдек-Фабини Р. Органический анализ / Р. Полюдек-Фабини, Т. Бейрих. Л.:Химия, 1981.-624 с.

170. Хирц Ж. Аналитические методы исследования метаболизма лекарственных веществ. М.: Медицина, 1975.-270 с.

171. Химия пятивалентного ванадия в водных растворах: АН СССР Уральский научный центр труды института химии / отв. редактор Г.П. Швейкин, Свердловск: АН СССР Уральский научный центр, 1971. Вып. 24. -191 с.

172. Савельева Н.И. Руководство к спецпрактикуму по оптическим методам анализа / Н.И. Савельева, А.Д. Белоглазова. Казань.: Издательство Казанского университета, 1980. - 100 с.

173. Евгеньев М.И. Неинвазивные методы определения фенотипа ацетилирования / М.И. Евгеньев, С.Ю. Гармонов, Р.Г. Гисмятов, Н.С. Шитова, И.Е. Зыкова // Вопросы биол., мед. и фармацевт, химии. 2003. - №3. - С. 34-39.

174. Евгеньев М.И. Биофармацевтический анализ ферментативной активности метаболических систем организма / М.И. Евгеньев, С.Ю. Гармонов, Н.С. Шитова, В.И. Погорельцев // Вестник Казанского технологического университета. 2004. - № 1-2. - С. 74 - 81.

175. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия: Учеб. для фармац. институтов и фармац. факультетов мед. институтов. М.: Высшая школа, 1985. — 768 с.

176. Christensen C.B.V. Arrays in biological and chemical analysis // Talanta. -2002.-V. 56.-P. 289-299.

177. Евгеньев М.И. Химическая чувствительность. Полиморфизм генов, генетические и этнические основы риска канцерогенеза и токсичности (обзор) / М.И. Евгеньев, И.И. Евгеньева // Вестник ТО РЭА. 2002. - № 3 - 4. -С. 91-99.

178. Евгеньев М.И. Химическая чувствительность. Полиморфизм генов, генетические основы риска канцерогенеза и интоксикации (обзор) / М.И.

179. Евгеньев, Е.В. Дегтерев // Хим. фарм журнал. 2003. - Т. 37. - № 2. - С. 25 -29.

180. Brosen К. First pass metabolism of imipramine and desipramine: impast of the sparteine oxidation phenotype / K. Brosen, L.F. Gram // Clin. Pharmacol. Ther. - 1988.-V. 43.-P. 400-406.

181. Cholerton S. Poor metabolicers of nicotine and CYP2D6 polymorphism / S. Cholerton, A. Arpanahi, N. McCracken, C. Boustead, H. Taber, E. Johnstone, J. Leathard, A.K. Daly, J.R. Idle // Lancet. 1994. - V. 343. - P. 62 - 65.

182. Pfost D.R. A SNPshot: pharmacogenetics and the future of drug therapy / D.R. Pfost, M. T. Boyce-Jacino, D. M. Grant // Trends Biotechnol. 2000. - V. 18. -P. 334-338.

183. Scheepers P.T.J. Assessing health risk of toxic substances by analysis of body fluids and exhaled air / P.T.J. Scheepers, G.A.H. Heussen // Trends in Analyt. Chem. 2001. - V. 21. -P. 613-616.

184. Гладких С.П. Направленный поиск, получение и исследование новых лекарственных средств на основе концепции метало-лигандного гомеостаза: Автореф. дис. . д-ра мед. наук. Старая Купавна, 1991. - 28 с.

185. Подымов В.К. Красная волчанка. -Ереван, 1981. -С. 100 103.

186. Сергеев П. В. Теоретическая и практическая фармакокинетика: Методические разработки / П.В. Сергеев, И.Л. Шимановский, К. Г. Гуревич. -М.: РГМУ, 2003.-114 с.

187. Veng-Pedersen P. The mean residence time of drug in the systemic circulation / P. Veng-Pedersen, W. Gillespie // J. Pharm. Sci. 1985. - V. 74 - P. 791 - 792.

188. Бард Й. Нелинейное оценивание параметров // Пер. с англ. под ред. В. Г. Горского, М.: Статистика, 1979 368 с.

189. Herman R. A. Pharmacokinetic of low-dose methotrexate in rheumatoid arthritis patients / R. A. Herman, P. Veng-Pedersen, J. Hoffman, R. Koehnke, D. E. Frust// J. Pharm. Sci. 1989 - V. 78 - P. 165 - 171.

190. Лечение туберкулеза: руководящие принципы для национальных программ, ВОЗ, Женева, 1994. 46 с.

191. Измайлов Г.А. Ксимедон в клинической практике / Г.А. Измайлов, М.Ю. Аверьянов, B.C. Резник. Н. Новгород: издательство НМГА, 2001, 186с.

192. Слабнов Ю. Д. Механизмы системного иммуномодулирующего действия пиримидиновых производных / Ю. Д. Слабнов, Т. В. Черепнев, А. П. Цибулькин, Р. С. Гараев // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1997. - Т. 60. - № 3. - С. 65 - 67.

193. Голиков С.Н. Общие механизмы токсического действия / С.Н. Голиков, И.В. Саноцкий, Л.А. Тиунов. М: Медицина, 1986.-280 с.

194. Белоусов Ю.Б. Клиническая фармакология и фармакотерапия: Руководство для врачей / Ю.Б. Белоусов, B.C. Моисеев, В.К. Лепахин. М.: Универсум, 1993. - 397 с.

195. Гармонов С.Ю. Оценка активости холинэстеразы у быстрых и медленных ацетиляторов / С.Ю. Гармонов, В.И. Погорельцев, Н.С. Шитова, И.Е. Зыкова, М.И. Евгеньев // Вопросы биол., мед. и фармацевт, химии. -2005.-№3.-С. 27-30.

196. Заявка 2005124656 РФ, МПК7 С 12 N 9/10 Способ увеличения активности фермента N-ацетилтрансферазы у человека /B.C. Резник, В.И. Погорельцев, С.Ю. Гармонов, Н.С. Шитова, Т.А. Киселева приоритет 02.08.2005.-11 с.

197. Trakur М.К. Biochemistry of aging: modification of cromosomal proteus of the brain of the rat. Banar: Banars Hidu University, 1978. - 162 p.

198. Гостищев В. К. Диагностика и коррекция иммунных нарушений у больных хроническим остеомиелитом таза / В. К. Гостищев, JI. П. Шалчкова, JI.O. Шкроб // Новости хирургии. 1996. - № 1. - С. 7 - 13.

199. Литвинский П.Ф. Патофизиология. М.: Медицина, 1997. 562 с.

200. Патофизиология / Под ред. Шанин В.Ю. С -Пб.: ЭЛБИ-Спб, 2005. -639 с.

201. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в живых системах / Ю.А. Владимиров, О.А. Азизова, А.И. Деев, А.В. Козлов, А.Н. Осипов, Д.И. Рощупкин // Итоги науки и техники. Серия «Биофизика». 1991. - Т. 29. - С. 125-127.

202. Али-Заде Ч.А. Состояние процесса перекисного окисления липидов у больных хроническим остеомиелитом и его коррекция антиоксидантами / Ч.А. Али-Заде, Ч.Н. Караваев, А.В. Паукер // Ортопедия и травматология. -1993.-№3.-С. 100- 102.

203. Scheuh Е. Influence of H2-receptor and proton pump inhibitors on some functions of the oxydative and conjugative drug metabolism / E. Scheuh, R. Walter, E. Hadasovo, I. Amon, W. Siegmund // Pharmazie. 1996. - № 7. - C. 493 - 497.

204. Svensson C.E. Effect of H2-receptor antagonists on rat liver cytosolic acetyl CoA: arylamine N-acetyltransferase activity / C.E. Svensson, M. Tomilo // Drug. Metab. Dispos. 1992. - № 1. - P. 74 - 78.

205. Магалашвили P. Д. N-ацетилтрансфераза и процесс образования спаек брюшной полости в эксперименте // Хирургия. 1985. - № 4. - С. 64 - 67.

206. Ланчинский В.И. Патогенетические механизмы развития спаечного процесса у гинекологических больных и его послеоперационная профилактика на основе анализа фенотипа ацетилирования: Автореф. . канд. мед. наук. М., 1995. - 20 с.

207. Stroev Е.А. Effect of antidiabetic preparations on the processes of xenobiotic metabolism / E.A. Stroev, Z.V. Belkina // Farmakol. Toksikol. 1989. - V. 52. -№ 2. - P. 74 - 77.

208. Zimmet P. Etiology of the metabolic syndrome: potential role of insulin resistance, leptin resistance, and other players / P. Zimmet, EJ. Boyko, G.R. Collier, M. de Courten // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1999. - V. 892. - P. 25 - 44.

209. Цыркунов B.M. Фармакокинетика антипирина при вирусном и алкогольном поражении печени / В.М. Цыркунов, М.И. Бушма, П.В. Гарелик // Клин. мед. 1989. - № 2. - Р. 87 - 89.

210. Ковалев И.Е. Система цитохрома Р-450 и сахарный диабет / И.Е. Ковалев, Е.И. Румянцева // Проблемы Эндокринологии. 2000. - Т. 46. - № 2. -С. 16-22.

211. Заместитель главного врача поликлиники КазНЦ РАН ^-л по лечебной, работе, врач высшей категории,-заслуженный врач РТ1.

212. УТВЕРЖДАЮ" Главный врач РК'Ь МЗ Р'1 Корма1it

213. АКТ ВНЕДРЕНИЯ результатов научно-исследовательских работ

214. Высокая эффективность предложенных подходов позволяет их использовать в практической медицине для оптимизации терапии сахарною диабета 2 типа.

215. Заведующий отделением эндокринологии РКБильмуллгш И.Ф.1. АКТвнедрения результатов научно-исследовательских работ

216. УТВЕРЖДАЮ Заместитё^даачальника КВАКУ1. Щг*по^^ё^отги^на^я^ой работе,1. В. КОРНИЛОВ1. АКТвнедрения научно-исследовательских работ

217. Начальник медицинской службы Казанского высшего артиллерийского командного училища, подполковник1. Р. Гисмятов